71
SVĚTELNÁ A ELEKTRONOVÁ M I K R O S K O P I E Rozvoj a internacionalizace chemických a biologických studijních programů na Univerzitě Palackého v Olomouci CZ.1.07/2.2.00/28.0066 Inovace předmětu KBB/MIK

Světelná a elektronová mikroskopie...(AMF – Atomic Force Miroscope) - skenování povrchu materiálu pomocí hrotu zavěšeném na pružném výkyvném raménku, který je přitahován

  • Upload
    others

  • View
    2

  • Download
    0

Embed Size (px)

Citation preview

Page 1: Světelná a elektronová mikroskopie...(AMF – Atomic Force Miroscope) - skenování povrchu materiálu pomocí hrotu zavěšeném na pružném výkyvném raménku, který je přitahován

SVĚTELNAacute

A ELEKTRONOVAacute

M I K R O S K O P I E

Rozvoj a internacionalizace chemickyacutech

a biologickyacutech studijniacutech programů na Univerzitě

Palackeacuteho v Olomouci

CZ1072200280066

Inovace předmětu KBBMIK

bull studijniacute kombinace MBB I roč

bull přednaacutešejiacuteciacute RNDr Pavla VAacuteLOVAacute

bull typ - semestr - rozsah A - L - 10

142 ndash 283 2018 ndash po 2 hod

bull ukončeniacute kolokvium (zaacutepočtovyacute test)

bull kredity 2

Soukromyacute mail valovapavlacentrumcz

evajiskrovaupolcz

Sylabus

1 Historie mikroskopovaacuteniacute Optickeacute principy světelneacute

mikroskopie Konstrukce obrazu složenyacutem mikroskopem

rozlišovaciacute schopnost mikroskopu

2 Zaacutekladniacute součaacutesti světelneacuteho mikroskopu - objektivy

okulaacutery a osvětleniacute

3 Exkurze Elektronovaacute a atomaacuterniacute mikroskopie ndash

pracoviště RCPTM (Regionaacutelniacute centrum pokročilyacutech

technologiiacute a materiaacutelů areaacutel Přiacuterodovědeckeacute fakulty Univerzity

Palackeacuteho Olomouc ndash Holice) (Mgr Klaacutera Čeacutepe PhD a spol)

Středa 282 2018 helliphelliphelliphellip 1315 - 1430

4 Speciaacutelniacute mikroskopickeacute metody (temneacute pole faacutezovyacute

kontrast polarizace interference) Principy fluorescenčniacute

mikroskopie zaacutekladniacute fluorescenčniacute metody

Sylabus 5 Princip konfokaacutelniacuteho mikroskopu Různeacute typy mikroskopů

(lupa stereolupa inverzniacute mikroskop digitaacutelniacute mikroskop

mikroskopy atomaacuterniacutech sil - STM ASM) Mikroskop jako

mikromanipulačniacute naacutestroj Systeacutemy pro zkvalitněniacute

mikroskopickeacuteho obrazu Zaacuteklady superrozlišovaciacute

mikroskopie

6 Prezentace Noveacute směry ve světelneacute mikroskopii

mikroskopie s vysokyacutem rozlišeniacutem

Ing Pavel Krist PhD Carl Zeiss sro Praha

Středa 213 2018 helliphelliphelliphellip 1315 ndash 1445

7 Kolokvium ndash zaacutepočtovyacute test

Středa 283 2018 helliphelliphelliphellip 1315 ndash MIK

1400 - CVMIK

Doporučenaacute literatura

Hejtmaacutenek M (2001) Uacutevod do světelneacute mikroskopie Skripta UP Olomouc

Knoz J Opravilovaacute V (1992) Zaacuteklady mikroskopickeacute techniky Skripta MU Brno

Přednaacutešky ndash PřF UP Olomouc Katedra experimentaacutelniacute fyziky

Kubiacutenek Roman Moderniacute světelnaacute a elektronovaacute mikroskopie

httpfyzikaupolczcssystemfilesdownloadvujtekprezentacekubinekSMaEMpdf

Kubiacutenek R Vůjtek M Mašlaacuteň M Mikroskopie skenujiacuteciacute sondou httpfyzikaupolczcssystemfilesdownloadvujtekprezentacekubinekSPMpdf

Kuacuteš P a kol (2008) Modernaacute mikroskopia a digitaacutelne zpracovanie obrazu Skripta

Bratislava ISBN 978-80-89186-37-2

httpwwwmikroskopiaskmaterialsskripta_mikroskopiapdf

Matis D a kol (2001) Mikroskopickaacute technika Faunima Bratislava

Paleček J (1996) Biologie buňky I Zaacuteklady mikroskopickeacute cytologie Skripta UK

Praha

Ruzin SE (1999) Plant microtechnique and microscopy Oxford University

bull wwwolympusmicrocom

bull httpwwwparucasczlembookPodkap30html (Elektronovaacute mikroskopie)

bull httpbiologieupolczmikroskopie

Nejnovějšiacute literatura (k dispozici v miacutestniacute knihovně)

Murphy DB Davidson MW (2013)

Fundamentals of Light Microscopy and Electronic Imaging

Willey-Blackwell Published 2013 by John Wiley amp Sons Inc

Hoboken New Jersey

vč rozsaacutehleacuteho slovniacuteku pojmů z mikroskopie na konci knihy

Randy O Wayne (2014) Light and Video Microscopy

Second Edition Hardcover

Doplňujiacuteciacute literatura

Habrovaacute V (1990) Mikroskopickaacute technika SPN Praha

Jurčaacutek J (1998) Zaacutekladniacute praktikum z botanickeacute mikrotechniky a rostlinneacute anatomie Skripta UP Olomouc

Němec B a kol (1962) Botanickaacute mikrotechnika Nakladatelstviacute ČSAV Praha

Lepil O (2013) Fyzika pro gymnaacutezia Optika Prometheus Praha

4 přepracovaneacute vydaacuteniacute

Pazourek J (1975) Pracujeme s mikroskopem SNTL Praha

Pazourkovaacute Z (1986) Botanickaacute mikrotechnika Praha 1986 skripta UK Praha

Pazourkovaacute Z Pazourek J (1960) Rychleacute metody botanickeacute mikrotechniky ČAZV SZN Praha

Špaček J (2008) Svět pod mikroskopem Grada Praha

Kremer Bruno P (2013) Mikroskop zcela jednoduše Aventium nakladatelstviacute sro

Člaacutenky z časopisu Vesmiacuter

Internet Učebniacute texty Katedry Optiky UP Olomouc Světelnaacute mikroskopie (doc Roman Kubiacutenek)

httpapfyzupolczucebniceoptmikrohtml

httpapfyzupolczucebnicedownoptmikropdf

Leacutekařskaacute fakulta UP Olomouc httpbiologieupolczmikroskopie

Nebesaacuteřovaacute J Elektronovaacute mikroskopie pro biology

httpwwwparucasczlembookindexhtml

skripta httpwwwmikroskopiaskpage8html (slovensky)

httpwwwhistory-of-the-microscopeorg

Kurzy mikroskopie na httpmicroscopydukeedu httpmicroscopydukeeduconceptshtml

Internetoveacute adresy o mikroskopech různyacutech firem Olympus httpwwwolympuscz httpwwwolympusmicrocom

Olympus_2011 - httpwwwmujolympusczdata20110209095419bodyhtm

Kniha o světelneacute mikroskopii na www

Davidson and Abramowitz Optical Microscopy Review Article

httpolympusmagnetfsueduprimeropticalmicroscopyhtml

Přiacuteručka firmy Zeiss httpwwwusaskcabiologyscopesMicroscopyBasicspdf

Nikon httpwwwmicroscopyucom

Přiacuteručka firmy Nikon httpwwwareczdatafilezakladni_metody_svetelne_mikroskopiepdf

Odkazy na literaturu

httplommicroscopyweeblycombasics-of-light-microscopy-and-opticshtml

Virtuaacutelniacute obraacutezky

httpwwwolympusmicrocomprimerjava

httpzeiss-campusmagnetfsuedututorialsindexhtml

Historie mikroskopovaacuteniacute

Optickeacute principy

světelneacute mikroskopie

Přednaacuteška 1

Pavla Vaacutelovaacute 2018

naacutezev z řec mikroacutes = malyacute skopoacutes = pozorovatel

vynaacutelez mikroskopu ndash konec 16 stol (technickyacute rozmach lidstva)

1625 - naacutezev mikroskop odvozenyacute od naacutezvu teleskop

(Giovanni Faber z Bambergu ndash papežskyacute leacutekař )

H i s t o r i e o b j e v u m i k r o s k o p u

Dřiacutevějšiacute pozorovaacuteniacute

Řecko - Aristofanes Atheacutenskyacute (424-380 př n l) - ve hře bdquoOblakaldquo

popis zraněniacute paprskem slunce prochaacutezejiacuteciacuteho skleněnou

kouliacute naplněnou vodou

Řiacutemskaacute doba

- filosof Seneca (asi 4 přnl-65 nl) - zvětšeniacute piacutesmen

pomociacute skleněneacute koule naplněneacute vodou

- Klaudius Ptolemaios (asi 100-170 nl) ndash diacutelo bdquoOptikaldquo -

poznatky o odraze paprsků a lomu paprsků skrz sklo

11 stol - Ibn al Haitham (bdquoAlhazenldquo) (965-1039) - arabskyacute fyzik a

matematik diacutelo bdquoPojednaacuteniacute o opticeldquo ndash zkoumaacute vlastnosti

světla (lom a odraz) čočky a zrcadla

viz Anna Černaacute Mikroskop pod drobnohledem Živa 52017 str CXXVIII

14 stol ndash zvlaacutednutiacute techniky broušeniacute čoček do bryacuteliacute (italštiacute mniši)

konec 16 stol ndash vynaacutelez mikroskopu

kolem roku 1590 - Hans a Zacharias Janssenovi (Holandsko otec a syn)

H i s t o r i e o b j e v u m i k r o s k o p u

- konstrukce prvniacuteho použitelneacuteho mikroskopu (ze dvou čoček)

- čočky vypoukleacute i vyduteacute

- zvětšeniacute mikroskopu 60x

viz kniha a film bdquoJmeacuteno růželdquo od Umberta Eca

Systeacutem dvou čoček

16 stol

deacutelka 12 m

(tzv kompaudniacute mikroskop)

httpwwwmicroscopyfsueduprimermuseum

httpmicromagnetfsueduprimermuseumjanssenhtml

httpwwwapsorgpublicationsapsnews200403historycfm

Janssenův mikroskop

17 stol Galileo Galilei (1564-1642)

ndash italskyacute astronom a matematik

1604-1609 ndash konstrukce dalekohledu

- použitiacute složeneacuteho mikroskopu

nazvaneacuteho occhiolino

k vědeckyacutem uacutečelům (pozorovaacuteniacute

oka mouchy)

Nejasnosti kolem vynaacutelezu mikroskopu

ndash z dobovyacutech zpraacutev neniacute jasneacute zda se jednaacute o mikroskop

jehož okulaacuterem je spojka nebo o dalekohled s rozptylkou

(kteryacute použiacuteval Galileo)

Anthony van Leeuwenhoek (1632-1723)

ndash obchodniacutek s laacutetkami v holandskeacutem Delftu

ndash sestrojil jednočočkovyacute mikroskop silnyacute zvětšovaciacute

efekt čočky

(až 270x)

ndash nejprve zkoumaacuteniacute struktury laacutetek

později zkoumal listy květiny drobneacute organismy lidskou krev kůži vlasy hellip

- prvniacute viděl a popsal krevniacute buňky chovaacuteniacute lidskyacutech spermiiacute

- vyacuteroba asi 250 mikroskopů

17 stol

Jednočočkovyacute Leeuwenhoekův

mikroskop

httpbiologimediacentrecomwp-contentuploads201101image2png

Anglickyacute původ Italskyacute původ

17 stol

Prvniacute světelneacute mikroskopy

Jednočočkovyacute

mikroskop Dvoučočkoveacute

mikroskopy

Robert Hook (1635-1703) [huacutek]

ndash anglickyacute fyzik chemik geolog astronom hellip

ndash použiacuteval zakoupenyacute složenyacute mikroskop s viacutece

čočkami (tzv kompaudniacute) vylepšenyacute o kvalitniacute osvětleniacute

17 stol

Hookův mikroskop

- vylepšeniacute osvětleniacute použitiacute irisoveacute clony

irisovaacute clona

- zkoumaacuteniacute slabyacutech plaacutetků korku z korkovniacuteku

živeacute laacutetky jsou tvořeny buňkami

- 1665 - kniha bdquoMicrographialdquo

mikroskopickeacute pozorovaacuteniacute rostlinnyacutech

pletiv živočišnyacutech objektů a struktur

mineraacutelů

Rok vydaacuteniacute 1665 Micrographia or some Physiological Descriptions of Minute Bodies

made by Magnifying Glasses with Observations and Inquiries thereupon

London 1665

17 stol Leeuwenhoek Hook

Angličan Henry Power (1626ndash1668) ndash jako

prvniacute (1663) publikoval pozorovaacuteniacute mikroskopem

Marcello Malphighi (1628ndash1694)

italskyacute leacutekař

zakladatel mikroskopickeacute anatomie

- objev krevniacutech kapilaacuter savců (1661)

- malphigickeacute trubice hmyzu

18 stol

ndash mikroskopy přežily jako hračka pro zaacutebavu anglickyacutech gentlemanů zajiacutemajiacuteciacutech se o tajemstviacute přiacuterody

19 stol

zač 19 stol ndash Dollond Lister Amici - vynaacutelez

achromatickeacuteho objektivu

ndash do teacute doby použiacutevaacuteniacute jednočočkoveacuteho mikroskopu (dvoučočkovyacute

mikroskop podaacuteval značně zkreslenyacute obraz)

Vyacuteznačniacute vědci 19 stol použiacutevajiacuteciacute k svyacutem pozorovaacuteniacutem mikroskop

Robert Brown (1773-1858) - objev jaacutedra (1831)

Luis Pasteur (1822-1895) (francouzskyacute mikrobiolog)

- objev kvasinek

Robert Koch (1843-1910) (německyacute leacutekař a mikrobiolog)

- objev původců tuberkuloacutezy a cholery

Jan Evangelista Purkyně (1787-1869) (českyacute fyziolog)

- 1825 popsal jaacutedro u živočišneacute buňky (lupa)

od r 1832 použiacutevaacute kvalitniacute mikroskop

Microscope

stand VII

19 stol ndash dalšiacute vyacutevoj mikroskopů

Carl Zeiss ndash průmyslovaacute vyacuteroba mikroskopů (firma Zeiss)

Ernst Karl Abbe ndash teoretickaacute studia optickyacutech principů

Otto Schott ndash vyacutezkum optickeacuteho skla

August Koumlhler ndash kvalitniacute osvětleniacute

Otto Schott (1851-1935)

Ernst Abbe (1840-1905)

Carl Zeiss (1816-1888)

August Koumlhler (1866-1948)

Mikroskopy 19 stoletiacute

19 stol

20 stol

Konfokaacutelniacute mikroskop

A1R (Nikon)

BX60 (Olympus)

Laserovyacute fluorescenčniacute mikroskop bdquoLight Sheetldquo Centrum regionu Hanaacute pro biotechnologickyacute a zemědělskyacute vyacutezkum Odděleniacute buněčneacute biologie

21 stol

21 stol

Digitaacutelniacute holografickyacute mikroskop firmy Lynceacutee Tec

Důležitaacute data při rozvoji moderniacute světelneacute mikroskopie

1847 - Zahaacutejeniacute vyacuteroby mikroskopů firmou Carl Zeiss v Jeně

1903 - Ultramikroskop (Richard Zsigmondy NC 1925)

1911 - Fluorescenčniacute mikroskop (Carl Reichert)

1935 - Faacutezovyacute kontrast (Fritz Zernike NC 1953)

1955 - Diferenciaacutelniacute interferenčniacute kontrast (DIC ndash Nomarski)

1968 - Rastrovaciacute tandemovyacute konfokaacutelniacute mikroskop (TSCM)

1978 - Laserovyacute konfokaacutelniacute rastrovaciacute mikroskop

1994 - Princip STED mikroskopie (S W Hell NC 2014)

(Stimulated Emission Depletion ndash redukce fluorescence stimulovanou emisiacute)

po roce 2000 - rozvoj tzv superrozlišovaciacute mikroskopie

2006 - Super-resolučniacute fluorescenčniacute mikroskop (Eric Betzig

Stefan W Hell a William E Moerner NC za chemii 2014)

NC = Nobelova cena

30 leacuteta 20 stoletiacute

ndash hranice vyacutevoje optickeacuteho (paprskoveacuteho) mikroskopu

(hranice rozlišeniacute světelneacuteho mikroskopu je diacuteky velikosti deacutelky světla 02 microm)

- dalšiacute zvětšovaacuteniacute pozorovanyacutech objektů na jineacutem principu

- miacutesto světelneacuteho paprsku elektronovyacute paprsek

(= tok rychlyacutech elektronů)

- miacutesto skleněneacute čočky magnetickaacute čočka

1931 - Ernst Ruska Max Knoll

prvniacute elektronovyacute mikroskop

tzv prozařovaciacute transmisniacute EM

(TEM ndash Transmission Electron Microscope)

- originaacutelniacute zvětšeniacute 1 000 - 250 000x

Ernst Ruska (1906-1988)

1942 - rastrovaciacute EM

(SEM ndash Scanning Electron Microscope) - postupneacute bombardovaacuteniacute vzorku elektrony

- zvětšeniacute až 30 000x

EM UacuteMG AV ČR Praha-Krč

FEI ndash TECHNAIG2TEM + kryozařiacutezeniacute

200 kV (λ el = 00025 nm)

RS 01 nm

prvkovaacute analyacuteza vzorků

zařiacutezeniacute pro

prvkovou analyacutezu

vzorků

Foto Pavla Vaacutelovaacute 2010

Brněnštiacute vědci z Uacutestavu přiacutestrojoveacute techniky AV ČR (UacutePT) a Mendelovy

univerzity představili novou metodu pozorovaacuteniacute rostlinnyacutech vzorků v jejich

přirozeneacutem stavu (za využitiacute kryoprotektiv)

Viacutece na httpe-svete15cztechnikacesti-vedci-posunuli-hranice-elektronove-mikroskopie-1174818

Enviromentaacutelniacute rastrovaciacute elektronovyacute mikroskop Aquasem II

TEM TITAN FEI Company Mgr Klaacutera Čeacutepe PhD

Vysokorozlišovaciacute transmisniacute elektronovyacute mikroskop

schopnyacute nahleacutednout do struktury materiaacutelů až na uacuterovni atomů

a současně přesně zmapovat jejich chemickeacute složeniacute

Regionaacutelniacute centrum pokročilyacutech

materiaacutelů (RCPTM)

Odd uhliacutekoveacute nanostruktury

PřF UP OL

Vysokorozlišovaciacute transmisniacute

elektronovyacute mikroskop TITAN (FEI)

Foto Pavla Vaacutelovaacute 2015

Transmisniacute elektronovyacute

mikroskop Jeol

Regionaacutelniacute centrum pokročilyacutech materiaacutelů (RCPTM)

Odd uhliacutekoveacute nanostruktury PřF UP OL

Neoptickeacute mikroskopy

1981

Řaacutedkovaciacute tunelovyacute mikroskop (STM ndash Scanning Tunnelling Microscope)

- mapovaacuteniacute povrchu pomociacute pohybu vodiveacuteho hrotu nad vodivyacutem povrchem sledovaneacuteho materiaacutelu

1986

Mikroskop atomaacuterniacutech sil (AMF ndash Atomic Force Miroscope)

- skenovaacuteniacute povrchu materiaacutelu pomociacute hrotu zavěšeneacutem na pružneacutem vyacutekyvneacutem rameacutenku kteryacute je přitahovaacuten elektrostatickyacutemi a Van der Walsovyacutemi silami

Rozlišeniacute v řaacutedech pikometrů (10-12 m) ndash rozeznaacuteniacute struktur

jednotlivyacutech atomů

O p t i c k eacute p r i n c i p y

světelneacute mikroskopie

Reichl J Všetička M Encyklopedie fyziky [online] copy2006-2014

[vid 2014] Dostupneacute z httpfyzikajreichlcommainarticleview431-optika Lepil O (2013) Fyzika pro gymnaacutezia Optika Prometheus Praha 4 přepracovaneacute vydaacuteniacute

Murphy DB Davidson MW (2013) Fundamentals of Light

Microscopy and Electronic Imaging Willey-Blackwell Published

2013 by John Wiley amp Sons Inc Hoboken New Jersey

S v ě t l o

= čaacutest rozsaacutehleacute oblasti elektromagnetickeacuteho zaacuteřeniacute

kterou vniacutemaacuteme zrakem

Rozhlasoveacute a raacutedioveacute vlny 250 km - 1 mm

Infračerveneacute zaacuteřeniacute 05 mm - 08 μm

Světlo (viditelneacute zaacuteřeniacute) 08 μm - 04 μm

Ultrafialoveacute zaacuteřeniacute 04 microm - 01 microm

Roumlntgenovo zaacuteřeniacute (X-paprsky) 15 nm - 0005 nm

γ-zaacuteřeniacute pod 00001 nm

Přibližneacute hodnoty ndash individuaacutelniacute vlastnosti zraku různyacutech lidiacute

S v ě t l o

= čaacutest rozsaacutehleacute oblasti elektromagnetickeacuteho zaacuteřeniacute

kterou vniacutemaacuteme zrakem

rarr se zkracujiacuteciacute se vlnovou deacutelkou se zvyšuje frekvence (energie)

Viditelneacute

Vlnoveacute deacutelky světla a relativniacute citlivost oka

Murphy DB Davidson MW (2013) Fundamentals of Light Microscopy and Electronic

Imaging Willey-Blackwell Published 2013 by John Wiley amp Sons Inc Hoboken New Jersey

= zrakovyacute pigment citlivyacute na

světlo nachaacutezejiacuteciacute se v tyčinkaacutech Jodopsin = zrakovyacute pigment citlivyacute na

barvu nachaacutezejiacuteciacute se v čiacutepciacutech

S v ě t l o

Duaacutelniacute charakter světla ndash vlněniacute i proud čaacutestic (fotonů)

Vlnovyacute model světla

vlna elektrickaacute a magnetickaacute (elektromagnetickaacute vlna je tvořena oscilujiacuteciacutem elektrickyacutem a

magnetickyacutem polem na sebe kolmyacutech a nesouciacutech vpřed energii)

Pro uacutečinky světla v mikroskopu je důležitaacute vlna elektrickaacute

= přiacutečneacute vlněniacute

postupneacute kmitaacuteniacute

jednotlivyacutech vedle sebe

ležiacuteciacutech bodů

Scheacutema světla jako elektromagnetickeacute vlny

Obr httpwwwprosoundwebcomarticleprintinvaders_from_

outer_space_electromagnetic_radiation_interference

λ - vlnovaacute deacutelka

(v oblasti svět zaacuteřeniacute

v rozmeziacute od 380 do 780 nm)

určuje barvu světla

a - amplituda

nejvyššiacute hodnota

určuje intenzitu světla

Z hlediska vlnoveacute deacutelky rozlišujeme

polychromatickeacute x monochromatickeacute světlo (selekce pomociacute barevnyacutech filtrů rarr jednotnaacute vlnovaacute deacutelka světlo zeleneacute červeneacute hellip)

Elektrickaacute vlna - sinusoida

Charakterizovaacutena dvěma veličinami

Pazourek 1975

Vlastnosti světla

Rovnoměrneacute šiacuteřeniacute světla ze zaacuteřiacuteciacuteho bodu na všechny strany rarr vlnovaacute plocha tvaru koule

Paprsek ndash směr kteryacutem se vlněniacute šiacuteřiacute a kteryacute je kolmyacute

na vlnoplochu

Pazourek 1975

- paprsek nepolarizovanyacute (A C) ndash kmitaacute v každeacutem

miacutestě a v průběhu času ve všech možnyacutech směrech

kolmyacutech na směr šiacuteřeniacute paprsku

- paprsek polarizovanyacute (B D1 D2) - kmitaacute v jedneacute

rovině přičemž rovina kmitů (vlněniacute) jednoho z nich je

kolmaacute k rovině kmitů druheacuteho

Pazourek 1975

Polarizovaneacute světlo viz

httpswwwyoutubecomwatchv=gP751qpm4n4

Murphy DB Davidson MW (2013) Fundamentals of Light Microscopy and

Electronic Imaging Jonh Wkiley amp Sons Inc Hoboken New Jersey

Osm různyacutech vlnovyacutech forem světla (znaacutezorňujiacuteciacutech různou kvalitu světla)

Odraz a lom světelnyacutech paprsků

v prostřediacutech různeacute hustoty

Důležitaacute charakteristika prostřediacute

index lomu ( n ) (= optickaacute hustota prostřediacute)

c = rychlost světla ve vakuu (stejnaacute pro všechny λ )

v = rychlost světla určiteacute vlnoveacute deacutelky ve zkoumaneacute laacutetce

c

n =

v

zde absolutniacute index lomu

(bezrozměrnaacute fyzikaacutelniacute veličina jeho jednotka je 1)

Rychlost světla (c) určiteacute vlnoveacute

deacutelky v různyacutech prostřediacutech

c ve vakuu

= 300 000 kms

Index lomu (n) některyacutech laacutetek

vzduch (vakuum) helliphellip 100 (vzduch 10002718)

voda helliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 133

plexisklo helliphelliphelliphelliphelliphellip 140 ndash 152

křemenneacute sklo helliphellip hellip 145 (čočka z křemene z Ninive ndash 7 stol přnl)

běžneacute sklo helliphelliphelliphelliphellip 151

cedrovyacute olej helliphelliphelliphelliphellip 151

imerzniacute olej Olympus hellip 1516 pro fluorescenci 1404

kanadskyacute balzaacutem helliphellip 150

krystal NaCl helliphelliphelliphellip 154

korunoveacute sklo helliphelliphelliphellip 145 ndash 156 (sodno-draselneacute bezolovnateacute)

flintoveacute sklo helliphelliphelliphellip 162 ndash 180 (olovnateacute)

diamant helliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 242

Index lomu je vždy většiacute než 100

očniacute čočka hellip 1406

sklivec helliphelliphellip 1336

Odraz světla rovnyacutem zrcadlem (reflexe)

Zaacutekony

1 Paprsek dopadajiacuteciacute kolmice dopadu a paprsek odraženyacute

ležiacute v jedneacute rovině

2 Uacutehel odrazu se rovnaacute uacutehlu dopadu

Odraz a lom paprsku

k

Důležiteacute pro mikroskopii (astronomii)

- neniacute zaacutevislost na vlnoveacute deacutelce světla (λ)

- na rozdiacutel od lomu paprsků se světelneacute

paprsky se odraacutežejiacute stejně

Pazourek 1975

Zaacutekony

1 Paprsek dopadajiacuteciacute kolmice lomu a paprsek lomenyacute ležiacute v teacuteže rovině

Lom světla (refrakce)

2 Při přechodu z prostřediacute opticky řidšiacuteho do prostřediacute opticky hustšiacuteho se paprsek laacuteme ke kolmici (A)

a z prostřediacute opticky hustšiacuteho

do prostřediacute opticky řidšiacuteho

se laacuteme od kolmice (B)

(C a D) ndash uacuteplnyacute odraz při tzv

mezniacutem uacutehlu dopadu paprsku

v přiacutepadě lomu od kolmice (B)

(viz Nikol odrazneacute hranoly světlovodneacute vlaacutekno nebo fluorescenčniacute metoda TIRFM ndash totaacutelniacute odraz exitačniacuteho zaacuteřeniacute)

Pazourek 1975

Svatyacute Kryštof od

švyacutecarskeacuteho maliacuteře

Konrada Witze (kolem 1400ndash1446)

Witz byl jedniacutem z prvniacutech

maliacuteřů kteryacute namaloval

přesnyacute způsob odrazu

světla na vodě

Disperze (rozklad) světla

= důsledek zaacutevislosti rychlosti světla v laacutetkaacutech na frekvenci světla

(λ = c f)

světlo různyacutech barev (λ)

se laacuteme různě

(červeneacute se lomiacute meacuteně než modreacute)

Přiacuteklad disperze (rozkladu) světla

Primaacuterniacute a sekundaacuterniacute duha Severniacute Čechy Foto Pavla Vaacutelovaacute 2010

D u h a

Jeden z mnoha

optickyacutech

jevů (fotometeorů)

v atmosfeacuteře

Rok 312 nl - před bitvou byzantskeacuteho ciacutesaře Konstantina I (272-337) s

konkurenčniacutem ciacutesařem Maxentiem u bran Řiacutema (tzv bitva u Milvijskeacuteho mostu) se

na obloze objevily tři zaacuteřiacuteciacute křiacuteže (halovyacute sloup parheacutelia a parhelickyacute oblouk)

Konstantin bitvu proti přesile vyhraacutel sjednotil řiacuteši a povolil v niacute vyznaacutevat křesťanstviacute

Maleacute halo (22deg) (viz 1) vedlejšiacute slunce (2) a horniacute a dolniacute halovyacute sloup (3)

vznikajiacuteciacute odrazem a lomem světelnyacutech paprsků na krystalciacutech ledu

Lom světla a dějiny

httptmagazineblogsnytimescom20121126halo-effect_r=0

1

3

2 2

3

Ohyb (difrakce) a interference

světla

Foto Pavla Vaacutelovaacute Bukovany 2015 Rozklad světla na CD - světlo žaacuterovky

Rozklad biacuteleacuteho světla na mřiacutežce

Pevnost poznaacuteniacute Olomouc 2015

Foto Pavla Vaacutelovaacute Olomouc 2015

Ohyb (difrakce) a interference

světla

Ohyb (difrakce) a interference

Difrakčniacute obrazec obsahuje světlaacute a tmavaacute miacutesta kteraacute se

střiacutedajiacute - světlaacute miacutesta nazyacutevaacuteme maxima a tmavaacute minima

Interference světla = sklaacutedaacuteniacute světelnyacutech vln

Předpoklad světlo musiacute byacutet koherentniacute

Podmiacutenka koherence

- paprsky musiacute miacutet stejnou frekvenci

- paprsky musiacute byacutet navzaacutejem rovnoběžneacute

- paprsky musiacute miacutet na sobě nezaacutevislyacute draacutehovyacute (faacutezovyacute) rozdiacutel

Vznik koherentniacuteho zaacuteřeniacute

rozděleniacutem světla

- buď odrazem pomociacute zrcadel

- nebo lomem pomociacute hranolů

Foto Pavla Vaacutelovaacute Praha 151 2016

Interference světla

stejnyacute způsob vlněniacute

(faacuteze je vzaacutejemně posunuta o sudeacute

naacutesobky λ2)

vznik interferenčniacuteho maxima

(konstruktivniacute interference)

Interference světla

asynchronniacute vlněniacute

(vzaacutejemně posunutaacute faacuteze

o licheacute naacutesobky λ2)

vznik interferenčniacuteho

minima

(destruktivniacute interference)

rarr zaacuteřeniacute zanikaacute

rarr zeslabeniacute zaacuteřeniacute

Interference dvou vrstev elektromagnetickeacuteho zaacuteřeniacute u Slunce

Čočky ndash zaacutekladniacute součaacutesti

mikroskopu

= průhlednaacute (nejčastěji skleněnaacute) tělesa omezenaacute

vypuklyacutemi nebo vydutyacutemi kulovityacutemi plochami lišiacuteciacute se od sveacuteho okoliacute odlišnyacutem indexem lomu

Zaacutekladniacute typy čoček

spojky (vypukleacute neboli konvexniacute)

rozptylky (vyduteacute konkaacutevniacute)

Pazourek 1975

Optickaacute osa ( o ) prochaacuteziacute středem čočky

Ohnisko ( F ) - bod do ktereacuteho se soustřeďujiacute paprsky probiacutehajiacuteciacute rovnoběžně s optickou osou

- 2 ohniska - předmětoveacute ohnisko ( F )

obrazoveacute ohnisko ( Facute )

- ohniskovaacute vzdaacutelenost ( f )

vzdaacutelenost ohniska od hlavniacute roviny proloženeacute středem čočky

- dvojnaacutesobnaacute ohniskovaacute vzdaacutelenost ( P Pacute )

Obrazovyacute prostor - prostor v němž vznikaacute obraz

Důležiteacute charakteristiky čočky

f

o

hlavniacute rovina

Pazourek 1975

V přiacutepadě velmi tenkeacute čočky

bull Obraz za optickou soustavou

rarr obraz s k u t e č n yacute

Skutečnyacute obraz je možneacute zachytit na stiacuteniacutetko

nebo na fotografickou desku neskutečnyacute nikoliv

bull Obraz před soustavou

rarr obraz n e s k u t e č n yacute (zdaacutenlivyacute virtuaacutelniacute)

Obraz skutečnyacute a neskutečnyacute

A ndash předmět Aacute- obraz předmětu

Upraveno podle Pazourek 1975

Francouz Augustin Jean Fresnel (1788-1827) [frenel]

Fresnelova čočka [frenelova]

- plochyacute tvar (zachovaacuteny pouze čaacutesti ktereacute měniacute směr chodu světelnyacutech paprsků)

- vyacuterazně nižšiacute hmotnost při zachovaacuteniacute podobnyacutech parametrů

Využitiacute infračidla pohybu semafory světlomety (majaacuteky) a reflektory (světla aut

divadelniacutech a filmovyacutech osvětlovaciacutech zařiacutezeniacute) zpětneacute projektory slunečniacute kolektory

na zaacutekladě tohoto principu takeacute vyacuteroba 3D displejů k mobilniacutem telefonům a televiziacutem

httpwwwmffcuniczverejnostzpravicky03_lupahtm

čočka na majaacuteku

Čočky v budoucnosti

Pokus o vyacuterobu tzv dokonaleacute čočky

Prototyp - upraveneacute tzv Maxwellovo rybiacute oko

- paprsky světla se v něm pohybujiacute po kružniciacutech a

na rozdiacutel od běžnyacutech čoček se při zobrazeniacute využijiacute

všechny paprsky

- superčočky využiacutevajiacute geometrie k tomu aby se světlo

soustředilo do oblasti menšiacute než je jeho vlnovaacute deacutelka

(zatiacutem se neviacute jak do čočky vyhovujiacuteciacutem způsobem

doveacutest světlo)

Využitiacute v budoucnu

mimo jineacute v pozorovaacuteniacute živyacutech buněk při velkeacutem zvětšeniacute

pomociacute obyčejneacuteho světla bez jejich narušeniacute

Viacutece viz Plaacutešek J Mikroskopy se superčočkami httpwwwvesmircz | Vesmiacuter 91 531 zaacuteřiacute 2012

Hranoly

- doplňky optickyacutech systeacutemů

- většinou tvar rovnostranneacuteho trojuacutehelniacuteka

- využiacutevajiacute uacuteplneacuteho odrazu

Funkce

- změna chodu paprsků pod různyacutemi uacutehly

- rozdvojeniacute paprsků

Pazourek 1975

Různeacute typy odraznyacutech hranolů

Hranoly

Různeacute typy hranolů

httplaserykvalitneczimagestext_25_zakladyoptiky1odrazne_hranolyjpg

Viz dichroickeacute zrcadlo u fluorescenčniacuteho mikroskopu

Chod paprsků v binokulaacuterniacutem tubusu

Pazourek 1975

Nikol = hranol z islandskeacuteho vaacutepence

rarr polarizace světla

Dvojlomnyacute vaacutepencovyacute

krystal

ř ndash paprsek řaacutednyacute (zanikaacute na začerněneacute ploše)

mř ndash paprsek mimořaacutednyacute (lineaacuterně polarizovanyacute

využit k osvětleniacute)

začerněnaacute plocha

Nikol

Pazourek 1975

vzduchovaacute štěrbina

- rychlost světla je

v různyacutech směrech různaacute

- uacutehel paprsku řaacutedneacuteho a

mimořaacutedneacuteho je odlišnyacute

(u Vikingů - slunečniacute kaacutemen

soacutelarsteinn)

Chod paprsků ve světlovodneacutem vlaacuteknu

Princip uacuteplnyacute odraz paprsku

- uvnitř skleněneacuteho vlaacutekna je opticky hustšiacute prostřediacute

- nutnost dostatečně silneacuteho světelneacuteho zdroje

Světlovodnaacute vlaacutekna

Pazourek 1975

Širokeacute využitiacute v praxi optickeacute kabely ndash přenos signaacutelů ve sdělovaciacute technice

světlovody umožňujiacuteciacute veacutest denniacute světlo vedeniacute světla u stereolup endoskopů hellip

Page 2: Světelná a elektronová mikroskopie...(AMF – Atomic Force Miroscope) - skenování povrchu materiálu pomocí hrotu zavěšeném na pružném výkyvném raménku, který je přitahován

bull studijniacute kombinace MBB I roč

bull přednaacutešejiacuteciacute RNDr Pavla VAacuteLOVAacute

bull typ - semestr - rozsah A - L - 10

142 ndash 283 2018 ndash po 2 hod

bull ukončeniacute kolokvium (zaacutepočtovyacute test)

bull kredity 2

Soukromyacute mail valovapavlacentrumcz

evajiskrovaupolcz

Sylabus

1 Historie mikroskopovaacuteniacute Optickeacute principy světelneacute

mikroskopie Konstrukce obrazu složenyacutem mikroskopem

rozlišovaciacute schopnost mikroskopu

2 Zaacutekladniacute součaacutesti světelneacuteho mikroskopu - objektivy

okulaacutery a osvětleniacute

3 Exkurze Elektronovaacute a atomaacuterniacute mikroskopie ndash

pracoviště RCPTM (Regionaacutelniacute centrum pokročilyacutech

technologiiacute a materiaacutelů areaacutel Přiacuterodovědeckeacute fakulty Univerzity

Palackeacuteho Olomouc ndash Holice) (Mgr Klaacutera Čeacutepe PhD a spol)

Středa 282 2018 helliphelliphelliphellip 1315 - 1430

4 Speciaacutelniacute mikroskopickeacute metody (temneacute pole faacutezovyacute

kontrast polarizace interference) Principy fluorescenčniacute

mikroskopie zaacutekladniacute fluorescenčniacute metody

Sylabus 5 Princip konfokaacutelniacuteho mikroskopu Různeacute typy mikroskopů

(lupa stereolupa inverzniacute mikroskop digitaacutelniacute mikroskop

mikroskopy atomaacuterniacutech sil - STM ASM) Mikroskop jako

mikromanipulačniacute naacutestroj Systeacutemy pro zkvalitněniacute

mikroskopickeacuteho obrazu Zaacuteklady superrozlišovaciacute

mikroskopie

6 Prezentace Noveacute směry ve světelneacute mikroskopii

mikroskopie s vysokyacutem rozlišeniacutem

Ing Pavel Krist PhD Carl Zeiss sro Praha

Středa 213 2018 helliphelliphelliphellip 1315 ndash 1445

7 Kolokvium ndash zaacutepočtovyacute test

Středa 283 2018 helliphelliphelliphellip 1315 ndash MIK

1400 - CVMIK

Doporučenaacute literatura

Hejtmaacutenek M (2001) Uacutevod do světelneacute mikroskopie Skripta UP Olomouc

Knoz J Opravilovaacute V (1992) Zaacuteklady mikroskopickeacute techniky Skripta MU Brno

Přednaacutešky ndash PřF UP Olomouc Katedra experimentaacutelniacute fyziky

Kubiacutenek Roman Moderniacute světelnaacute a elektronovaacute mikroskopie

httpfyzikaupolczcssystemfilesdownloadvujtekprezentacekubinekSMaEMpdf

Kubiacutenek R Vůjtek M Mašlaacuteň M Mikroskopie skenujiacuteciacute sondou httpfyzikaupolczcssystemfilesdownloadvujtekprezentacekubinekSPMpdf

Kuacuteš P a kol (2008) Modernaacute mikroskopia a digitaacutelne zpracovanie obrazu Skripta

Bratislava ISBN 978-80-89186-37-2

httpwwwmikroskopiaskmaterialsskripta_mikroskopiapdf

Matis D a kol (2001) Mikroskopickaacute technika Faunima Bratislava

Paleček J (1996) Biologie buňky I Zaacuteklady mikroskopickeacute cytologie Skripta UK

Praha

Ruzin SE (1999) Plant microtechnique and microscopy Oxford University

bull wwwolympusmicrocom

bull httpwwwparucasczlembookPodkap30html (Elektronovaacute mikroskopie)

bull httpbiologieupolczmikroskopie

Nejnovějšiacute literatura (k dispozici v miacutestniacute knihovně)

Murphy DB Davidson MW (2013)

Fundamentals of Light Microscopy and Electronic Imaging

Willey-Blackwell Published 2013 by John Wiley amp Sons Inc

Hoboken New Jersey

vč rozsaacutehleacuteho slovniacuteku pojmů z mikroskopie na konci knihy

Randy O Wayne (2014) Light and Video Microscopy

Second Edition Hardcover

Doplňujiacuteciacute literatura

Habrovaacute V (1990) Mikroskopickaacute technika SPN Praha

Jurčaacutek J (1998) Zaacutekladniacute praktikum z botanickeacute mikrotechniky a rostlinneacute anatomie Skripta UP Olomouc

Němec B a kol (1962) Botanickaacute mikrotechnika Nakladatelstviacute ČSAV Praha

Lepil O (2013) Fyzika pro gymnaacutezia Optika Prometheus Praha

4 přepracovaneacute vydaacuteniacute

Pazourek J (1975) Pracujeme s mikroskopem SNTL Praha

Pazourkovaacute Z (1986) Botanickaacute mikrotechnika Praha 1986 skripta UK Praha

Pazourkovaacute Z Pazourek J (1960) Rychleacute metody botanickeacute mikrotechniky ČAZV SZN Praha

Špaček J (2008) Svět pod mikroskopem Grada Praha

Kremer Bruno P (2013) Mikroskop zcela jednoduše Aventium nakladatelstviacute sro

Člaacutenky z časopisu Vesmiacuter

Internet Učebniacute texty Katedry Optiky UP Olomouc Světelnaacute mikroskopie (doc Roman Kubiacutenek)

httpapfyzupolczucebniceoptmikrohtml

httpapfyzupolczucebnicedownoptmikropdf

Leacutekařskaacute fakulta UP Olomouc httpbiologieupolczmikroskopie

Nebesaacuteřovaacute J Elektronovaacute mikroskopie pro biology

httpwwwparucasczlembookindexhtml

skripta httpwwwmikroskopiaskpage8html (slovensky)

httpwwwhistory-of-the-microscopeorg

Kurzy mikroskopie na httpmicroscopydukeedu httpmicroscopydukeeduconceptshtml

Internetoveacute adresy o mikroskopech různyacutech firem Olympus httpwwwolympuscz httpwwwolympusmicrocom

Olympus_2011 - httpwwwmujolympusczdata20110209095419bodyhtm

Kniha o světelneacute mikroskopii na www

Davidson and Abramowitz Optical Microscopy Review Article

httpolympusmagnetfsueduprimeropticalmicroscopyhtml

Přiacuteručka firmy Zeiss httpwwwusaskcabiologyscopesMicroscopyBasicspdf

Nikon httpwwwmicroscopyucom

Přiacuteručka firmy Nikon httpwwwareczdatafilezakladni_metody_svetelne_mikroskopiepdf

Odkazy na literaturu

httplommicroscopyweeblycombasics-of-light-microscopy-and-opticshtml

Virtuaacutelniacute obraacutezky

httpwwwolympusmicrocomprimerjava

httpzeiss-campusmagnetfsuedututorialsindexhtml

Historie mikroskopovaacuteniacute

Optickeacute principy

světelneacute mikroskopie

Přednaacuteška 1

Pavla Vaacutelovaacute 2018

naacutezev z řec mikroacutes = malyacute skopoacutes = pozorovatel

vynaacutelez mikroskopu ndash konec 16 stol (technickyacute rozmach lidstva)

1625 - naacutezev mikroskop odvozenyacute od naacutezvu teleskop

(Giovanni Faber z Bambergu ndash papežskyacute leacutekař )

H i s t o r i e o b j e v u m i k r o s k o p u

Dřiacutevějšiacute pozorovaacuteniacute

Řecko - Aristofanes Atheacutenskyacute (424-380 př n l) - ve hře bdquoOblakaldquo

popis zraněniacute paprskem slunce prochaacutezejiacuteciacuteho skleněnou

kouliacute naplněnou vodou

Řiacutemskaacute doba

- filosof Seneca (asi 4 přnl-65 nl) - zvětšeniacute piacutesmen

pomociacute skleněneacute koule naplněneacute vodou

- Klaudius Ptolemaios (asi 100-170 nl) ndash diacutelo bdquoOptikaldquo -

poznatky o odraze paprsků a lomu paprsků skrz sklo

11 stol - Ibn al Haitham (bdquoAlhazenldquo) (965-1039) - arabskyacute fyzik a

matematik diacutelo bdquoPojednaacuteniacute o opticeldquo ndash zkoumaacute vlastnosti

světla (lom a odraz) čočky a zrcadla

viz Anna Černaacute Mikroskop pod drobnohledem Živa 52017 str CXXVIII

14 stol ndash zvlaacutednutiacute techniky broušeniacute čoček do bryacuteliacute (italštiacute mniši)

konec 16 stol ndash vynaacutelez mikroskopu

kolem roku 1590 - Hans a Zacharias Janssenovi (Holandsko otec a syn)

H i s t o r i e o b j e v u m i k r o s k o p u

- konstrukce prvniacuteho použitelneacuteho mikroskopu (ze dvou čoček)

- čočky vypoukleacute i vyduteacute

- zvětšeniacute mikroskopu 60x

viz kniha a film bdquoJmeacuteno růželdquo od Umberta Eca

Systeacutem dvou čoček

16 stol

deacutelka 12 m

(tzv kompaudniacute mikroskop)

httpwwwmicroscopyfsueduprimermuseum

httpmicromagnetfsueduprimermuseumjanssenhtml

httpwwwapsorgpublicationsapsnews200403historycfm

Janssenův mikroskop

17 stol Galileo Galilei (1564-1642)

ndash italskyacute astronom a matematik

1604-1609 ndash konstrukce dalekohledu

- použitiacute složeneacuteho mikroskopu

nazvaneacuteho occhiolino

k vědeckyacutem uacutečelům (pozorovaacuteniacute

oka mouchy)

Nejasnosti kolem vynaacutelezu mikroskopu

ndash z dobovyacutech zpraacutev neniacute jasneacute zda se jednaacute o mikroskop

jehož okulaacuterem je spojka nebo o dalekohled s rozptylkou

(kteryacute použiacuteval Galileo)

Anthony van Leeuwenhoek (1632-1723)

ndash obchodniacutek s laacutetkami v holandskeacutem Delftu

ndash sestrojil jednočočkovyacute mikroskop silnyacute zvětšovaciacute

efekt čočky

(až 270x)

ndash nejprve zkoumaacuteniacute struktury laacutetek

později zkoumal listy květiny drobneacute organismy lidskou krev kůži vlasy hellip

- prvniacute viděl a popsal krevniacute buňky chovaacuteniacute lidskyacutech spermiiacute

- vyacuteroba asi 250 mikroskopů

17 stol

Jednočočkovyacute Leeuwenhoekův

mikroskop

httpbiologimediacentrecomwp-contentuploads201101image2png

Anglickyacute původ Italskyacute původ

17 stol

Prvniacute světelneacute mikroskopy

Jednočočkovyacute

mikroskop Dvoučočkoveacute

mikroskopy

Robert Hook (1635-1703) [huacutek]

ndash anglickyacute fyzik chemik geolog astronom hellip

ndash použiacuteval zakoupenyacute složenyacute mikroskop s viacutece

čočkami (tzv kompaudniacute) vylepšenyacute o kvalitniacute osvětleniacute

17 stol

Hookův mikroskop

- vylepšeniacute osvětleniacute použitiacute irisoveacute clony

irisovaacute clona

- zkoumaacuteniacute slabyacutech plaacutetků korku z korkovniacuteku

živeacute laacutetky jsou tvořeny buňkami

- 1665 - kniha bdquoMicrographialdquo

mikroskopickeacute pozorovaacuteniacute rostlinnyacutech

pletiv živočišnyacutech objektů a struktur

mineraacutelů

Rok vydaacuteniacute 1665 Micrographia or some Physiological Descriptions of Minute Bodies

made by Magnifying Glasses with Observations and Inquiries thereupon

London 1665

17 stol Leeuwenhoek Hook

Angličan Henry Power (1626ndash1668) ndash jako

prvniacute (1663) publikoval pozorovaacuteniacute mikroskopem

Marcello Malphighi (1628ndash1694)

italskyacute leacutekař

zakladatel mikroskopickeacute anatomie

- objev krevniacutech kapilaacuter savců (1661)

- malphigickeacute trubice hmyzu

18 stol

ndash mikroskopy přežily jako hračka pro zaacutebavu anglickyacutech gentlemanů zajiacutemajiacuteciacutech se o tajemstviacute přiacuterody

19 stol

zač 19 stol ndash Dollond Lister Amici - vynaacutelez

achromatickeacuteho objektivu

ndash do teacute doby použiacutevaacuteniacute jednočočkoveacuteho mikroskopu (dvoučočkovyacute

mikroskop podaacuteval značně zkreslenyacute obraz)

Vyacuteznačniacute vědci 19 stol použiacutevajiacuteciacute k svyacutem pozorovaacuteniacutem mikroskop

Robert Brown (1773-1858) - objev jaacutedra (1831)

Luis Pasteur (1822-1895) (francouzskyacute mikrobiolog)

- objev kvasinek

Robert Koch (1843-1910) (německyacute leacutekař a mikrobiolog)

- objev původců tuberkuloacutezy a cholery

Jan Evangelista Purkyně (1787-1869) (českyacute fyziolog)

- 1825 popsal jaacutedro u živočišneacute buňky (lupa)

od r 1832 použiacutevaacute kvalitniacute mikroskop

Microscope

stand VII

19 stol ndash dalšiacute vyacutevoj mikroskopů

Carl Zeiss ndash průmyslovaacute vyacuteroba mikroskopů (firma Zeiss)

Ernst Karl Abbe ndash teoretickaacute studia optickyacutech principů

Otto Schott ndash vyacutezkum optickeacuteho skla

August Koumlhler ndash kvalitniacute osvětleniacute

Otto Schott (1851-1935)

Ernst Abbe (1840-1905)

Carl Zeiss (1816-1888)

August Koumlhler (1866-1948)

Mikroskopy 19 stoletiacute

19 stol

20 stol

Konfokaacutelniacute mikroskop

A1R (Nikon)

BX60 (Olympus)

Laserovyacute fluorescenčniacute mikroskop bdquoLight Sheetldquo Centrum regionu Hanaacute pro biotechnologickyacute a zemědělskyacute vyacutezkum Odděleniacute buněčneacute biologie

21 stol

21 stol

Digitaacutelniacute holografickyacute mikroskop firmy Lynceacutee Tec

Důležitaacute data při rozvoji moderniacute světelneacute mikroskopie

1847 - Zahaacutejeniacute vyacuteroby mikroskopů firmou Carl Zeiss v Jeně

1903 - Ultramikroskop (Richard Zsigmondy NC 1925)

1911 - Fluorescenčniacute mikroskop (Carl Reichert)

1935 - Faacutezovyacute kontrast (Fritz Zernike NC 1953)

1955 - Diferenciaacutelniacute interferenčniacute kontrast (DIC ndash Nomarski)

1968 - Rastrovaciacute tandemovyacute konfokaacutelniacute mikroskop (TSCM)

1978 - Laserovyacute konfokaacutelniacute rastrovaciacute mikroskop

1994 - Princip STED mikroskopie (S W Hell NC 2014)

(Stimulated Emission Depletion ndash redukce fluorescence stimulovanou emisiacute)

po roce 2000 - rozvoj tzv superrozlišovaciacute mikroskopie

2006 - Super-resolučniacute fluorescenčniacute mikroskop (Eric Betzig

Stefan W Hell a William E Moerner NC za chemii 2014)

NC = Nobelova cena

30 leacuteta 20 stoletiacute

ndash hranice vyacutevoje optickeacuteho (paprskoveacuteho) mikroskopu

(hranice rozlišeniacute světelneacuteho mikroskopu je diacuteky velikosti deacutelky světla 02 microm)

- dalšiacute zvětšovaacuteniacute pozorovanyacutech objektů na jineacutem principu

- miacutesto světelneacuteho paprsku elektronovyacute paprsek

(= tok rychlyacutech elektronů)

- miacutesto skleněneacute čočky magnetickaacute čočka

1931 - Ernst Ruska Max Knoll

prvniacute elektronovyacute mikroskop

tzv prozařovaciacute transmisniacute EM

(TEM ndash Transmission Electron Microscope)

- originaacutelniacute zvětšeniacute 1 000 - 250 000x

Ernst Ruska (1906-1988)

1942 - rastrovaciacute EM

(SEM ndash Scanning Electron Microscope) - postupneacute bombardovaacuteniacute vzorku elektrony

- zvětšeniacute až 30 000x

EM UacuteMG AV ČR Praha-Krč

FEI ndash TECHNAIG2TEM + kryozařiacutezeniacute

200 kV (λ el = 00025 nm)

RS 01 nm

prvkovaacute analyacuteza vzorků

zařiacutezeniacute pro

prvkovou analyacutezu

vzorků

Foto Pavla Vaacutelovaacute 2010

Brněnštiacute vědci z Uacutestavu přiacutestrojoveacute techniky AV ČR (UacutePT) a Mendelovy

univerzity představili novou metodu pozorovaacuteniacute rostlinnyacutech vzorků v jejich

přirozeneacutem stavu (za využitiacute kryoprotektiv)

Viacutece na httpe-svete15cztechnikacesti-vedci-posunuli-hranice-elektronove-mikroskopie-1174818

Enviromentaacutelniacute rastrovaciacute elektronovyacute mikroskop Aquasem II

TEM TITAN FEI Company Mgr Klaacutera Čeacutepe PhD

Vysokorozlišovaciacute transmisniacute elektronovyacute mikroskop

schopnyacute nahleacutednout do struktury materiaacutelů až na uacuterovni atomů

a současně přesně zmapovat jejich chemickeacute složeniacute

Regionaacutelniacute centrum pokročilyacutech

materiaacutelů (RCPTM)

Odd uhliacutekoveacute nanostruktury

PřF UP OL

Vysokorozlišovaciacute transmisniacute

elektronovyacute mikroskop TITAN (FEI)

Foto Pavla Vaacutelovaacute 2015

Transmisniacute elektronovyacute

mikroskop Jeol

Regionaacutelniacute centrum pokročilyacutech materiaacutelů (RCPTM)

Odd uhliacutekoveacute nanostruktury PřF UP OL

Neoptickeacute mikroskopy

1981

Řaacutedkovaciacute tunelovyacute mikroskop (STM ndash Scanning Tunnelling Microscope)

- mapovaacuteniacute povrchu pomociacute pohybu vodiveacuteho hrotu nad vodivyacutem povrchem sledovaneacuteho materiaacutelu

1986

Mikroskop atomaacuterniacutech sil (AMF ndash Atomic Force Miroscope)

- skenovaacuteniacute povrchu materiaacutelu pomociacute hrotu zavěšeneacutem na pružneacutem vyacutekyvneacutem rameacutenku kteryacute je přitahovaacuten elektrostatickyacutemi a Van der Walsovyacutemi silami

Rozlišeniacute v řaacutedech pikometrů (10-12 m) ndash rozeznaacuteniacute struktur

jednotlivyacutech atomů

O p t i c k eacute p r i n c i p y

světelneacute mikroskopie

Reichl J Všetička M Encyklopedie fyziky [online] copy2006-2014

[vid 2014] Dostupneacute z httpfyzikajreichlcommainarticleview431-optika Lepil O (2013) Fyzika pro gymnaacutezia Optika Prometheus Praha 4 přepracovaneacute vydaacuteniacute

Murphy DB Davidson MW (2013) Fundamentals of Light

Microscopy and Electronic Imaging Willey-Blackwell Published

2013 by John Wiley amp Sons Inc Hoboken New Jersey

S v ě t l o

= čaacutest rozsaacutehleacute oblasti elektromagnetickeacuteho zaacuteřeniacute

kterou vniacutemaacuteme zrakem

Rozhlasoveacute a raacutedioveacute vlny 250 km - 1 mm

Infračerveneacute zaacuteřeniacute 05 mm - 08 μm

Světlo (viditelneacute zaacuteřeniacute) 08 μm - 04 μm

Ultrafialoveacute zaacuteřeniacute 04 microm - 01 microm

Roumlntgenovo zaacuteřeniacute (X-paprsky) 15 nm - 0005 nm

γ-zaacuteřeniacute pod 00001 nm

Přibližneacute hodnoty ndash individuaacutelniacute vlastnosti zraku různyacutech lidiacute

S v ě t l o

= čaacutest rozsaacutehleacute oblasti elektromagnetickeacuteho zaacuteřeniacute

kterou vniacutemaacuteme zrakem

rarr se zkracujiacuteciacute se vlnovou deacutelkou se zvyšuje frekvence (energie)

Viditelneacute

Vlnoveacute deacutelky světla a relativniacute citlivost oka

Murphy DB Davidson MW (2013) Fundamentals of Light Microscopy and Electronic

Imaging Willey-Blackwell Published 2013 by John Wiley amp Sons Inc Hoboken New Jersey

= zrakovyacute pigment citlivyacute na

světlo nachaacutezejiacuteciacute se v tyčinkaacutech Jodopsin = zrakovyacute pigment citlivyacute na

barvu nachaacutezejiacuteciacute se v čiacutepciacutech

S v ě t l o

Duaacutelniacute charakter světla ndash vlněniacute i proud čaacutestic (fotonů)

Vlnovyacute model světla

vlna elektrickaacute a magnetickaacute (elektromagnetickaacute vlna je tvořena oscilujiacuteciacutem elektrickyacutem a

magnetickyacutem polem na sebe kolmyacutech a nesouciacutech vpřed energii)

Pro uacutečinky světla v mikroskopu je důležitaacute vlna elektrickaacute

= přiacutečneacute vlněniacute

postupneacute kmitaacuteniacute

jednotlivyacutech vedle sebe

ležiacuteciacutech bodů

Scheacutema světla jako elektromagnetickeacute vlny

Obr httpwwwprosoundwebcomarticleprintinvaders_from_

outer_space_electromagnetic_radiation_interference

λ - vlnovaacute deacutelka

(v oblasti svět zaacuteřeniacute

v rozmeziacute od 380 do 780 nm)

určuje barvu světla

a - amplituda

nejvyššiacute hodnota

určuje intenzitu světla

Z hlediska vlnoveacute deacutelky rozlišujeme

polychromatickeacute x monochromatickeacute světlo (selekce pomociacute barevnyacutech filtrů rarr jednotnaacute vlnovaacute deacutelka světlo zeleneacute červeneacute hellip)

Elektrickaacute vlna - sinusoida

Charakterizovaacutena dvěma veličinami

Pazourek 1975

Vlastnosti světla

Rovnoměrneacute šiacuteřeniacute světla ze zaacuteřiacuteciacuteho bodu na všechny strany rarr vlnovaacute plocha tvaru koule

Paprsek ndash směr kteryacutem se vlněniacute šiacuteřiacute a kteryacute je kolmyacute

na vlnoplochu

Pazourek 1975

- paprsek nepolarizovanyacute (A C) ndash kmitaacute v každeacutem

miacutestě a v průběhu času ve všech možnyacutech směrech

kolmyacutech na směr šiacuteřeniacute paprsku

- paprsek polarizovanyacute (B D1 D2) - kmitaacute v jedneacute

rovině přičemž rovina kmitů (vlněniacute) jednoho z nich je

kolmaacute k rovině kmitů druheacuteho

Pazourek 1975

Polarizovaneacute světlo viz

httpswwwyoutubecomwatchv=gP751qpm4n4

Murphy DB Davidson MW (2013) Fundamentals of Light Microscopy and

Electronic Imaging Jonh Wkiley amp Sons Inc Hoboken New Jersey

Osm různyacutech vlnovyacutech forem světla (znaacutezorňujiacuteciacutech různou kvalitu světla)

Odraz a lom světelnyacutech paprsků

v prostřediacutech různeacute hustoty

Důležitaacute charakteristika prostřediacute

index lomu ( n ) (= optickaacute hustota prostřediacute)

c = rychlost světla ve vakuu (stejnaacute pro všechny λ )

v = rychlost světla určiteacute vlnoveacute deacutelky ve zkoumaneacute laacutetce

c

n =

v

zde absolutniacute index lomu

(bezrozměrnaacute fyzikaacutelniacute veličina jeho jednotka je 1)

Rychlost světla (c) určiteacute vlnoveacute

deacutelky v různyacutech prostřediacutech

c ve vakuu

= 300 000 kms

Index lomu (n) některyacutech laacutetek

vzduch (vakuum) helliphellip 100 (vzduch 10002718)

voda helliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 133

plexisklo helliphelliphelliphelliphelliphellip 140 ndash 152

křemenneacute sklo helliphellip hellip 145 (čočka z křemene z Ninive ndash 7 stol přnl)

běžneacute sklo helliphelliphelliphelliphellip 151

cedrovyacute olej helliphelliphelliphelliphellip 151

imerzniacute olej Olympus hellip 1516 pro fluorescenci 1404

kanadskyacute balzaacutem helliphellip 150

krystal NaCl helliphelliphelliphellip 154

korunoveacute sklo helliphelliphelliphellip 145 ndash 156 (sodno-draselneacute bezolovnateacute)

flintoveacute sklo helliphelliphelliphellip 162 ndash 180 (olovnateacute)

diamant helliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 242

Index lomu je vždy většiacute než 100

očniacute čočka hellip 1406

sklivec helliphelliphellip 1336

Odraz světla rovnyacutem zrcadlem (reflexe)

Zaacutekony

1 Paprsek dopadajiacuteciacute kolmice dopadu a paprsek odraženyacute

ležiacute v jedneacute rovině

2 Uacutehel odrazu se rovnaacute uacutehlu dopadu

Odraz a lom paprsku

k

Důležiteacute pro mikroskopii (astronomii)

- neniacute zaacutevislost na vlnoveacute deacutelce světla (λ)

- na rozdiacutel od lomu paprsků se světelneacute

paprsky se odraacutežejiacute stejně

Pazourek 1975

Zaacutekony

1 Paprsek dopadajiacuteciacute kolmice lomu a paprsek lomenyacute ležiacute v teacuteže rovině

Lom světla (refrakce)

2 Při přechodu z prostřediacute opticky řidšiacuteho do prostřediacute opticky hustšiacuteho se paprsek laacuteme ke kolmici (A)

a z prostřediacute opticky hustšiacuteho

do prostřediacute opticky řidšiacuteho

se laacuteme od kolmice (B)

(C a D) ndash uacuteplnyacute odraz při tzv

mezniacutem uacutehlu dopadu paprsku

v přiacutepadě lomu od kolmice (B)

(viz Nikol odrazneacute hranoly světlovodneacute vlaacutekno nebo fluorescenčniacute metoda TIRFM ndash totaacutelniacute odraz exitačniacuteho zaacuteřeniacute)

Pazourek 1975

Svatyacute Kryštof od

švyacutecarskeacuteho maliacuteře

Konrada Witze (kolem 1400ndash1446)

Witz byl jedniacutem z prvniacutech

maliacuteřů kteryacute namaloval

přesnyacute způsob odrazu

světla na vodě

Disperze (rozklad) světla

= důsledek zaacutevislosti rychlosti světla v laacutetkaacutech na frekvenci světla

(λ = c f)

světlo různyacutech barev (λ)

se laacuteme různě

(červeneacute se lomiacute meacuteně než modreacute)

Přiacuteklad disperze (rozkladu) světla

Primaacuterniacute a sekundaacuterniacute duha Severniacute Čechy Foto Pavla Vaacutelovaacute 2010

D u h a

Jeden z mnoha

optickyacutech

jevů (fotometeorů)

v atmosfeacuteře

Rok 312 nl - před bitvou byzantskeacuteho ciacutesaře Konstantina I (272-337) s

konkurenčniacutem ciacutesařem Maxentiem u bran Řiacutema (tzv bitva u Milvijskeacuteho mostu) se

na obloze objevily tři zaacuteřiacuteciacute křiacuteže (halovyacute sloup parheacutelia a parhelickyacute oblouk)

Konstantin bitvu proti přesile vyhraacutel sjednotil řiacuteši a povolil v niacute vyznaacutevat křesťanstviacute

Maleacute halo (22deg) (viz 1) vedlejšiacute slunce (2) a horniacute a dolniacute halovyacute sloup (3)

vznikajiacuteciacute odrazem a lomem světelnyacutech paprsků na krystalciacutech ledu

Lom světla a dějiny

httptmagazineblogsnytimescom20121126halo-effect_r=0

1

3

2 2

3

Ohyb (difrakce) a interference

světla

Foto Pavla Vaacutelovaacute Bukovany 2015 Rozklad světla na CD - světlo žaacuterovky

Rozklad biacuteleacuteho světla na mřiacutežce

Pevnost poznaacuteniacute Olomouc 2015

Foto Pavla Vaacutelovaacute Olomouc 2015

Ohyb (difrakce) a interference

světla

Ohyb (difrakce) a interference

Difrakčniacute obrazec obsahuje světlaacute a tmavaacute miacutesta kteraacute se

střiacutedajiacute - světlaacute miacutesta nazyacutevaacuteme maxima a tmavaacute minima

Interference světla = sklaacutedaacuteniacute světelnyacutech vln

Předpoklad světlo musiacute byacutet koherentniacute

Podmiacutenka koherence

- paprsky musiacute miacutet stejnou frekvenci

- paprsky musiacute byacutet navzaacutejem rovnoběžneacute

- paprsky musiacute miacutet na sobě nezaacutevislyacute draacutehovyacute (faacutezovyacute) rozdiacutel

Vznik koherentniacuteho zaacuteřeniacute

rozděleniacutem světla

- buď odrazem pomociacute zrcadel

- nebo lomem pomociacute hranolů

Foto Pavla Vaacutelovaacute Praha 151 2016

Interference světla

stejnyacute způsob vlněniacute

(faacuteze je vzaacutejemně posunuta o sudeacute

naacutesobky λ2)

vznik interferenčniacuteho maxima

(konstruktivniacute interference)

Interference světla

asynchronniacute vlněniacute

(vzaacutejemně posunutaacute faacuteze

o licheacute naacutesobky λ2)

vznik interferenčniacuteho

minima

(destruktivniacute interference)

rarr zaacuteřeniacute zanikaacute

rarr zeslabeniacute zaacuteřeniacute

Interference dvou vrstev elektromagnetickeacuteho zaacuteřeniacute u Slunce

Čočky ndash zaacutekladniacute součaacutesti

mikroskopu

= průhlednaacute (nejčastěji skleněnaacute) tělesa omezenaacute

vypuklyacutemi nebo vydutyacutemi kulovityacutemi plochami lišiacuteciacute se od sveacuteho okoliacute odlišnyacutem indexem lomu

Zaacutekladniacute typy čoček

spojky (vypukleacute neboli konvexniacute)

rozptylky (vyduteacute konkaacutevniacute)

Pazourek 1975

Optickaacute osa ( o ) prochaacuteziacute středem čočky

Ohnisko ( F ) - bod do ktereacuteho se soustřeďujiacute paprsky probiacutehajiacuteciacute rovnoběžně s optickou osou

- 2 ohniska - předmětoveacute ohnisko ( F )

obrazoveacute ohnisko ( Facute )

- ohniskovaacute vzdaacutelenost ( f )

vzdaacutelenost ohniska od hlavniacute roviny proloženeacute středem čočky

- dvojnaacutesobnaacute ohniskovaacute vzdaacutelenost ( P Pacute )

Obrazovyacute prostor - prostor v němž vznikaacute obraz

Důležiteacute charakteristiky čočky

f

o

hlavniacute rovina

Pazourek 1975

V přiacutepadě velmi tenkeacute čočky

bull Obraz za optickou soustavou

rarr obraz s k u t e č n yacute

Skutečnyacute obraz je možneacute zachytit na stiacuteniacutetko

nebo na fotografickou desku neskutečnyacute nikoliv

bull Obraz před soustavou

rarr obraz n e s k u t e č n yacute (zdaacutenlivyacute virtuaacutelniacute)

Obraz skutečnyacute a neskutečnyacute

A ndash předmět Aacute- obraz předmětu

Upraveno podle Pazourek 1975

Francouz Augustin Jean Fresnel (1788-1827) [frenel]

Fresnelova čočka [frenelova]

- plochyacute tvar (zachovaacuteny pouze čaacutesti ktereacute měniacute směr chodu světelnyacutech paprsků)

- vyacuterazně nižšiacute hmotnost při zachovaacuteniacute podobnyacutech parametrů

Využitiacute infračidla pohybu semafory světlomety (majaacuteky) a reflektory (světla aut

divadelniacutech a filmovyacutech osvětlovaciacutech zařiacutezeniacute) zpětneacute projektory slunečniacute kolektory

na zaacutekladě tohoto principu takeacute vyacuteroba 3D displejů k mobilniacutem telefonům a televiziacutem

httpwwwmffcuniczverejnostzpravicky03_lupahtm

čočka na majaacuteku

Čočky v budoucnosti

Pokus o vyacuterobu tzv dokonaleacute čočky

Prototyp - upraveneacute tzv Maxwellovo rybiacute oko

- paprsky světla se v něm pohybujiacute po kružniciacutech a

na rozdiacutel od běžnyacutech čoček se při zobrazeniacute využijiacute

všechny paprsky

- superčočky využiacutevajiacute geometrie k tomu aby se světlo

soustředilo do oblasti menšiacute než je jeho vlnovaacute deacutelka

(zatiacutem se neviacute jak do čočky vyhovujiacuteciacutem způsobem

doveacutest světlo)

Využitiacute v budoucnu

mimo jineacute v pozorovaacuteniacute živyacutech buněk při velkeacutem zvětšeniacute

pomociacute obyčejneacuteho světla bez jejich narušeniacute

Viacutece viz Plaacutešek J Mikroskopy se superčočkami httpwwwvesmircz | Vesmiacuter 91 531 zaacuteřiacute 2012

Hranoly

- doplňky optickyacutech systeacutemů

- většinou tvar rovnostranneacuteho trojuacutehelniacuteka

- využiacutevajiacute uacuteplneacuteho odrazu

Funkce

- změna chodu paprsků pod různyacutemi uacutehly

- rozdvojeniacute paprsků

Pazourek 1975

Různeacute typy odraznyacutech hranolů

Hranoly

Různeacute typy hranolů

httplaserykvalitneczimagestext_25_zakladyoptiky1odrazne_hranolyjpg

Viz dichroickeacute zrcadlo u fluorescenčniacuteho mikroskopu

Chod paprsků v binokulaacuterniacutem tubusu

Pazourek 1975

Nikol = hranol z islandskeacuteho vaacutepence

rarr polarizace světla

Dvojlomnyacute vaacutepencovyacute

krystal

ř ndash paprsek řaacutednyacute (zanikaacute na začerněneacute ploše)

mř ndash paprsek mimořaacutednyacute (lineaacuterně polarizovanyacute

využit k osvětleniacute)

začerněnaacute plocha

Nikol

Pazourek 1975

vzduchovaacute štěrbina

- rychlost světla je

v různyacutech směrech různaacute

- uacutehel paprsku řaacutedneacuteho a

mimořaacutedneacuteho je odlišnyacute

(u Vikingů - slunečniacute kaacutemen

soacutelarsteinn)

Chod paprsků ve světlovodneacutem vlaacuteknu

Princip uacuteplnyacute odraz paprsku

- uvnitř skleněneacuteho vlaacutekna je opticky hustšiacute prostřediacute

- nutnost dostatečně silneacuteho světelneacuteho zdroje

Světlovodnaacute vlaacutekna

Pazourek 1975

Širokeacute využitiacute v praxi optickeacute kabely ndash přenos signaacutelů ve sdělovaciacute technice

světlovody umožňujiacuteciacute veacutest denniacute světlo vedeniacute světla u stereolup endoskopů hellip

Page 3: Světelná a elektronová mikroskopie...(AMF – Atomic Force Miroscope) - skenování povrchu materiálu pomocí hrotu zavěšeném na pružném výkyvném raménku, který je přitahován

Sylabus

1 Historie mikroskopovaacuteniacute Optickeacute principy světelneacute

mikroskopie Konstrukce obrazu složenyacutem mikroskopem

rozlišovaciacute schopnost mikroskopu

2 Zaacutekladniacute součaacutesti světelneacuteho mikroskopu - objektivy

okulaacutery a osvětleniacute

3 Exkurze Elektronovaacute a atomaacuterniacute mikroskopie ndash

pracoviště RCPTM (Regionaacutelniacute centrum pokročilyacutech

technologiiacute a materiaacutelů areaacutel Přiacuterodovědeckeacute fakulty Univerzity

Palackeacuteho Olomouc ndash Holice) (Mgr Klaacutera Čeacutepe PhD a spol)

Středa 282 2018 helliphelliphelliphellip 1315 - 1430

4 Speciaacutelniacute mikroskopickeacute metody (temneacute pole faacutezovyacute

kontrast polarizace interference) Principy fluorescenčniacute

mikroskopie zaacutekladniacute fluorescenčniacute metody

Sylabus 5 Princip konfokaacutelniacuteho mikroskopu Různeacute typy mikroskopů

(lupa stereolupa inverzniacute mikroskop digitaacutelniacute mikroskop

mikroskopy atomaacuterniacutech sil - STM ASM) Mikroskop jako

mikromanipulačniacute naacutestroj Systeacutemy pro zkvalitněniacute

mikroskopickeacuteho obrazu Zaacuteklady superrozlišovaciacute

mikroskopie

6 Prezentace Noveacute směry ve světelneacute mikroskopii

mikroskopie s vysokyacutem rozlišeniacutem

Ing Pavel Krist PhD Carl Zeiss sro Praha

Středa 213 2018 helliphelliphelliphellip 1315 ndash 1445

7 Kolokvium ndash zaacutepočtovyacute test

Středa 283 2018 helliphelliphelliphellip 1315 ndash MIK

1400 - CVMIK

Doporučenaacute literatura

Hejtmaacutenek M (2001) Uacutevod do světelneacute mikroskopie Skripta UP Olomouc

Knoz J Opravilovaacute V (1992) Zaacuteklady mikroskopickeacute techniky Skripta MU Brno

Přednaacutešky ndash PřF UP Olomouc Katedra experimentaacutelniacute fyziky

Kubiacutenek Roman Moderniacute světelnaacute a elektronovaacute mikroskopie

httpfyzikaupolczcssystemfilesdownloadvujtekprezentacekubinekSMaEMpdf

Kubiacutenek R Vůjtek M Mašlaacuteň M Mikroskopie skenujiacuteciacute sondou httpfyzikaupolczcssystemfilesdownloadvujtekprezentacekubinekSPMpdf

Kuacuteš P a kol (2008) Modernaacute mikroskopia a digitaacutelne zpracovanie obrazu Skripta

Bratislava ISBN 978-80-89186-37-2

httpwwwmikroskopiaskmaterialsskripta_mikroskopiapdf

Matis D a kol (2001) Mikroskopickaacute technika Faunima Bratislava

Paleček J (1996) Biologie buňky I Zaacuteklady mikroskopickeacute cytologie Skripta UK

Praha

Ruzin SE (1999) Plant microtechnique and microscopy Oxford University

bull wwwolympusmicrocom

bull httpwwwparucasczlembookPodkap30html (Elektronovaacute mikroskopie)

bull httpbiologieupolczmikroskopie

Nejnovějšiacute literatura (k dispozici v miacutestniacute knihovně)

Murphy DB Davidson MW (2013)

Fundamentals of Light Microscopy and Electronic Imaging

Willey-Blackwell Published 2013 by John Wiley amp Sons Inc

Hoboken New Jersey

vč rozsaacutehleacuteho slovniacuteku pojmů z mikroskopie na konci knihy

Randy O Wayne (2014) Light and Video Microscopy

Second Edition Hardcover

Doplňujiacuteciacute literatura

Habrovaacute V (1990) Mikroskopickaacute technika SPN Praha

Jurčaacutek J (1998) Zaacutekladniacute praktikum z botanickeacute mikrotechniky a rostlinneacute anatomie Skripta UP Olomouc

Němec B a kol (1962) Botanickaacute mikrotechnika Nakladatelstviacute ČSAV Praha

Lepil O (2013) Fyzika pro gymnaacutezia Optika Prometheus Praha

4 přepracovaneacute vydaacuteniacute

Pazourek J (1975) Pracujeme s mikroskopem SNTL Praha

Pazourkovaacute Z (1986) Botanickaacute mikrotechnika Praha 1986 skripta UK Praha

Pazourkovaacute Z Pazourek J (1960) Rychleacute metody botanickeacute mikrotechniky ČAZV SZN Praha

Špaček J (2008) Svět pod mikroskopem Grada Praha

Kremer Bruno P (2013) Mikroskop zcela jednoduše Aventium nakladatelstviacute sro

Člaacutenky z časopisu Vesmiacuter

Internet Učebniacute texty Katedry Optiky UP Olomouc Světelnaacute mikroskopie (doc Roman Kubiacutenek)

httpapfyzupolczucebniceoptmikrohtml

httpapfyzupolczucebnicedownoptmikropdf

Leacutekařskaacute fakulta UP Olomouc httpbiologieupolczmikroskopie

Nebesaacuteřovaacute J Elektronovaacute mikroskopie pro biology

httpwwwparucasczlembookindexhtml

skripta httpwwwmikroskopiaskpage8html (slovensky)

httpwwwhistory-of-the-microscopeorg

Kurzy mikroskopie na httpmicroscopydukeedu httpmicroscopydukeeduconceptshtml

Internetoveacute adresy o mikroskopech různyacutech firem Olympus httpwwwolympuscz httpwwwolympusmicrocom

Olympus_2011 - httpwwwmujolympusczdata20110209095419bodyhtm

Kniha o světelneacute mikroskopii na www

Davidson and Abramowitz Optical Microscopy Review Article

httpolympusmagnetfsueduprimeropticalmicroscopyhtml

Přiacuteručka firmy Zeiss httpwwwusaskcabiologyscopesMicroscopyBasicspdf

Nikon httpwwwmicroscopyucom

Přiacuteručka firmy Nikon httpwwwareczdatafilezakladni_metody_svetelne_mikroskopiepdf

Odkazy na literaturu

httplommicroscopyweeblycombasics-of-light-microscopy-and-opticshtml

Virtuaacutelniacute obraacutezky

httpwwwolympusmicrocomprimerjava

httpzeiss-campusmagnetfsuedututorialsindexhtml

Historie mikroskopovaacuteniacute

Optickeacute principy

světelneacute mikroskopie

Přednaacuteška 1

Pavla Vaacutelovaacute 2018

naacutezev z řec mikroacutes = malyacute skopoacutes = pozorovatel

vynaacutelez mikroskopu ndash konec 16 stol (technickyacute rozmach lidstva)

1625 - naacutezev mikroskop odvozenyacute od naacutezvu teleskop

(Giovanni Faber z Bambergu ndash papežskyacute leacutekař )

H i s t o r i e o b j e v u m i k r o s k o p u

Dřiacutevějšiacute pozorovaacuteniacute

Řecko - Aristofanes Atheacutenskyacute (424-380 př n l) - ve hře bdquoOblakaldquo

popis zraněniacute paprskem slunce prochaacutezejiacuteciacuteho skleněnou

kouliacute naplněnou vodou

Řiacutemskaacute doba

- filosof Seneca (asi 4 přnl-65 nl) - zvětšeniacute piacutesmen

pomociacute skleněneacute koule naplněneacute vodou

- Klaudius Ptolemaios (asi 100-170 nl) ndash diacutelo bdquoOptikaldquo -

poznatky o odraze paprsků a lomu paprsků skrz sklo

11 stol - Ibn al Haitham (bdquoAlhazenldquo) (965-1039) - arabskyacute fyzik a

matematik diacutelo bdquoPojednaacuteniacute o opticeldquo ndash zkoumaacute vlastnosti

světla (lom a odraz) čočky a zrcadla

viz Anna Černaacute Mikroskop pod drobnohledem Živa 52017 str CXXVIII

14 stol ndash zvlaacutednutiacute techniky broušeniacute čoček do bryacuteliacute (italštiacute mniši)

konec 16 stol ndash vynaacutelez mikroskopu

kolem roku 1590 - Hans a Zacharias Janssenovi (Holandsko otec a syn)

H i s t o r i e o b j e v u m i k r o s k o p u

- konstrukce prvniacuteho použitelneacuteho mikroskopu (ze dvou čoček)

- čočky vypoukleacute i vyduteacute

- zvětšeniacute mikroskopu 60x

viz kniha a film bdquoJmeacuteno růželdquo od Umberta Eca

Systeacutem dvou čoček

16 stol

deacutelka 12 m

(tzv kompaudniacute mikroskop)

httpwwwmicroscopyfsueduprimermuseum

httpmicromagnetfsueduprimermuseumjanssenhtml

httpwwwapsorgpublicationsapsnews200403historycfm

Janssenův mikroskop

17 stol Galileo Galilei (1564-1642)

ndash italskyacute astronom a matematik

1604-1609 ndash konstrukce dalekohledu

- použitiacute složeneacuteho mikroskopu

nazvaneacuteho occhiolino

k vědeckyacutem uacutečelům (pozorovaacuteniacute

oka mouchy)

Nejasnosti kolem vynaacutelezu mikroskopu

ndash z dobovyacutech zpraacutev neniacute jasneacute zda se jednaacute o mikroskop

jehož okulaacuterem je spojka nebo o dalekohled s rozptylkou

(kteryacute použiacuteval Galileo)

Anthony van Leeuwenhoek (1632-1723)

ndash obchodniacutek s laacutetkami v holandskeacutem Delftu

ndash sestrojil jednočočkovyacute mikroskop silnyacute zvětšovaciacute

efekt čočky

(až 270x)

ndash nejprve zkoumaacuteniacute struktury laacutetek

později zkoumal listy květiny drobneacute organismy lidskou krev kůži vlasy hellip

- prvniacute viděl a popsal krevniacute buňky chovaacuteniacute lidskyacutech spermiiacute

- vyacuteroba asi 250 mikroskopů

17 stol

Jednočočkovyacute Leeuwenhoekův

mikroskop

httpbiologimediacentrecomwp-contentuploads201101image2png

Anglickyacute původ Italskyacute původ

17 stol

Prvniacute světelneacute mikroskopy

Jednočočkovyacute

mikroskop Dvoučočkoveacute

mikroskopy

Robert Hook (1635-1703) [huacutek]

ndash anglickyacute fyzik chemik geolog astronom hellip

ndash použiacuteval zakoupenyacute složenyacute mikroskop s viacutece

čočkami (tzv kompaudniacute) vylepšenyacute o kvalitniacute osvětleniacute

17 stol

Hookův mikroskop

- vylepšeniacute osvětleniacute použitiacute irisoveacute clony

irisovaacute clona

- zkoumaacuteniacute slabyacutech plaacutetků korku z korkovniacuteku

živeacute laacutetky jsou tvořeny buňkami

- 1665 - kniha bdquoMicrographialdquo

mikroskopickeacute pozorovaacuteniacute rostlinnyacutech

pletiv živočišnyacutech objektů a struktur

mineraacutelů

Rok vydaacuteniacute 1665 Micrographia or some Physiological Descriptions of Minute Bodies

made by Magnifying Glasses with Observations and Inquiries thereupon

London 1665

17 stol Leeuwenhoek Hook

Angličan Henry Power (1626ndash1668) ndash jako

prvniacute (1663) publikoval pozorovaacuteniacute mikroskopem

Marcello Malphighi (1628ndash1694)

italskyacute leacutekař

zakladatel mikroskopickeacute anatomie

- objev krevniacutech kapilaacuter savců (1661)

- malphigickeacute trubice hmyzu

18 stol

ndash mikroskopy přežily jako hračka pro zaacutebavu anglickyacutech gentlemanů zajiacutemajiacuteciacutech se o tajemstviacute přiacuterody

19 stol

zač 19 stol ndash Dollond Lister Amici - vynaacutelez

achromatickeacuteho objektivu

ndash do teacute doby použiacutevaacuteniacute jednočočkoveacuteho mikroskopu (dvoučočkovyacute

mikroskop podaacuteval značně zkreslenyacute obraz)

Vyacuteznačniacute vědci 19 stol použiacutevajiacuteciacute k svyacutem pozorovaacuteniacutem mikroskop

Robert Brown (1773-1858) - objev jaacutedra (1831)

Luis Pasteur (1822-1895) (francouzskyacute mikrobiolog)

- objev kvasinek

Robert Koch (1843-1910) (německyacute leacutekař a mikrobiolog)

- objev původců tuberkuloacutezy a cholery

Jan Evangelista Purkyně (1787-1869) (českyacute fyziolog)

- 1825 popsal jaacutedro u živočišneacute buňky (lupa)

od r 1832 použiacutevaacute kvalitniacute mikroskop

Microscope

stand VII

19 stol ndash dalšiacute vyacutevoj mikroskopů

Carl Zeiss ndash průmyslovaacute vyacuteroba mikroskopů (firma Zeiss)

Ernst Karl Abbe ndash teoretickaacute studia optickyacutech principů

Otto Schott ndash vyacutezkum optickeacuteho skla

August Koumlhler ndash kvalitniacute osvětleniacute

Otto Schott (1851-1935)

Ernst Abbe (1840-1905)

Carl Zeiss (1816-1888)

August Koumlhler (1866-1948)

Mikroskopy 19 stoletiacute

19 stol

20 stol

Konfokaacutelniacute mikroskop

A1R (Nikon)

BX60 (Olympus)

Laserovyacute fluorescenčniacute mikroskop bdquoLight Sheetldquo Centrum regionu Hanaacute pro biotechnologickyacute a zemědělskyacute vyacutezkum Odděleniacute buněčneacute biologie

21 stol

21 stol

Digitaacutelniacute holografickyacute mikroskop firmy Lynceacutee Tec

Důležitaacute data při rozvoji moderniacute světelneacute mikroskopie

1847 - Zahaacutejeniacute vyacuteroby mikroskopů firmou Carl Zeiss v Jeně

1903 - Ultramikroskop (Richard Zsigmondy NC 1925)

1911 - Fluorescenčniacute mikroskop (Carl Reichert)

1935 - Faacutezovyacute kontrast (Fritz Zernike NC 1953)

1955 - Diferenciaacutelniacute interferenčniacute kontrast (DIC ndash Nomarski)

1968 - Rastrovaciacute tandemovyacute konfokaacutelniacute mikroskop (TSCM)

1978 - Laserovyacute konfokaacutelniacute rastrovaciacute mikroskop

1994 - Princip STED mikroskopie (S W Hell NC 2014)

(Stimulated Emission Depletion ndash redukce fluorescence stimulovanou emisiacute)

po roce 2000 - rozvoj tzv superrozlišovaciacute mikroskopie

2006 - Super-resolučniacute fluorescenčniacute mikroskop (Eric Betzig

Stefan W Hell a William E Moerner NC za chemii 2014)

NC = Nobelova cena

30 leacuteta 20 stoletiacute

ndash hranice vyacutevoje optickeacuteho (paprskoveacuteho) mikroskopu

(hranice rozlišeniacute světelneacuteho mikroskopu je diacuteky velikosti deacutelky světla 02 microm)

- dalšiacute zvětšovaacuteniacute pozorovanyacutech objektů na jineacutem principu

- miacutesto světelneacuteho paprsku elektronovyacute paprsek

(= tok rychlyacutech elektronů)

- miacutesto skleněneacute čočky magnetickaacute čočka

1931 - Ernst Ruska Max Knoll

prvniacute elektronovyacute mikroskop

tzv prozařovaciacute transmisniacute EM

(TEM ndash Transmission Electron Microscope)

- originaacutelniacute zvětšeniacute 1 000 - 250 000x

Ernst Ruska (1906-1988)

1942 - rastrovaciacute EM

(SEM ndash Scanning Electron Microscope) - postupneacute bombardovaacuteniacute vzorku elektrony

- zvětšeniacute až 30 000x

EM UacuteMG AV ČR Praha-Krč

FEI ndash TECHNAIG2TEM + kryozařiacutezeniacute

200 kV (λ el = 00025 nm)

RS 01 nm

prvkovaacute analyacuteza vzorků

zařiacutezeniacute pro

prvkovou analyacutezu

vzorků

Foto Pavla Vaacutelovaacute 2010

Brněnštiacute vědci z Uacutestavu přiacutestrojoveacute techniky AV ČR (UacutePT) a Mendelovy

univerzity představili novou metodu pozorovaacuteniacute rostlinnyacutech vzorků v jejich

přirozeneacutem stavu (za využitiacute kryoprotektiv)

Viacutece na httpe-svete15cztechnikacesti-vedci-posunuli-hranice-elektronove-mikroskopie-1174818

Enviromentaacutelniacute rastrovaciacute elektronovyacute mikroskop Aquasem II

TEM TITAN FEI Company Mgr Klaacutera Čeacutepe PhD

Vysokorozlišovaciacute transmisniacute elektronovyacute mikroskop

schopnyacute nahleacutednout do struktury materiaacutelů až na uacuterovni atomů

a současně přesně zmapovat jejich chemickeacute složeniacute

Regionaacutelniacute centrum pokročilyacutech

materiaacutelů (RCPTM)

Odd uhliacutekoveacute nanostruktury

PřF UP OL

Vysokorozlišovaciacute transmisniacute

elektronovyacute mikroskop TITAN (FEI)

Foto Pavla Vaacutelovaacute 2015

Transmisniacute elektronovyacute

mikroskop Jeol

Regionaacutelniacute centrum pokročilyacutech materiaacutelů (RCPTM)

Odd uhliacutekoveacute nanostruktury PřF UP OL

Neoptickeacute mikroskopy

1981

Řaacutedkovaciacute tunelovyacute mikroskop (STM ndash Scanning Tunnelling Microscope)

- mapovaacuteniacute povrchu pomociacute pohybu vodiveacuteho hrotu nad vodivyacutem povrchem sledovaneacuteho materiaacutelu

1986

Mikroskop atomaacuterniacutech sil (AMF ndash Atomic Force Miroscope)

- skenovaacuteniacute povrchu materiaacutelu pomociacute hrotu zavěšeneacutem na pružneacutem vyacutekyvneacutem rameacutenku kteryacute je přitahovaacuten elektrostatickyacutemi a Van der Walsovyacutemi silami

Rozlišeniacute v řaacutedech pikometrů (10-12 m) ndash rozeznaacuteniacute struktur

jednotlivyacutech atomů

O p t i c k eacute p r i n c i p y

světelneacute mikroskopie

Reichl J Všetička M Encyklopedie fyziky [online] copy2006-2014

[vid 2014] Dostupneacute z httpfyzikajreichlcommainarticleview431-optika Lepil O (2013) Fyzika pro gymnaacutezia Optika Prometheus Praha 4 přepracovaneacute vydaacuteniacute

Murphy DB Davidson MW (2013) Fundamentals of Light

Microscopy and Electronic Imaging Willey-Blackwell Published

2013 by John Wiley amp Sons Inc Hoboken New Jersey

S v ě t l o

= čaacutest rozsaacutehleacute oblasti elektromagnetickeacuteho zaacuteřeniacute

kterou vniacutemaacuteme zrakem

Rozhlasoveacute a raacutedioveacute vlny 250 km - 1 mm

Infračerveneacute zaacuteřeniacute 05 mm - 08 μm

Světlo (viditelneacute zaacuteřeniacute) 08 μm - 04 μm

Ultrafialoveacute zaacuteřeniacute 04 microm - 01 microm

Roumlntgenovo zaacuteřeniacute (X-paprsky) 15 nm - 0005 nm

γ-zaacuteřeniacute pod 00001 nm

Přibližneacute hodnoty ndash individuaacutelniacute vlastnosti zraku různyacutech lidiacute

S v ě t l o

= čaacutest rozsaacutehleacute oblasti elektromagnetickeacuteho zaacuteřeniacute

kterou vniacutemaacuteme zrakem

rarr se zkracujiacuteciacute se vlnovou deacutelkou se zvyšuje frekvence (energie)

Viditelneacute

Vlnoveacute deacutelky světla a relativniacute citlivost oka

Murphy DB Davidson MW (2013) Fundamentals of Light Microscopy and Electronic

Imaging Willey-Blackwell Published 2013 by John Wiley amp Sons Inc Hoboken New Jersey

= zrakovyacute pigment citlivyacute na

světlo nachaacutezejiacuteciacute se v tyčinkaacutech Jodopsin = zrakovyacute pigment citlivyacute na

barvu nachaacutezejiacuteciacute se v čiacutepciacutech

S v ě t l o

Duaacutelniacute charakter světla ndash vlněniacute i proud čaacutestic (fotonů)

Vlnovyacute model světla

vlna elektrickaacute a magnetickaacute (elektromagnetickaacute vlna je tvořena oscilujiacuteciacutem elektrickyacutem a

magnetickyacutem polem na sebe kolmyacutech a nesouciacutech vpřed energii)

Pro uacutečinky světla v mikroskopu je důležitaacute vlna elektrickaacute

= přiacutečneacute vlněniacute

postupneacute kmitaacuteniacute

jednotlivyacutech vedle sebe

ležiacuteciacutech bodů

Scheacutema světla jako elektromagnetickeacute vlny

Obr httpwwwprosoundwebcomarticleprintinvaders_from_

outer_space_electromagnetic_radiation_interference

λ - vlnovaacute deacutelka

(v oblasti svět zaacuteřeniacute

v rozmeziacute od 380 do 780 nm)

určuje barvu světla

a - amplituda

nejvyššiacute hodnota

určuje intenzitu světla

Z hlediska vlnoveacute deacutelky rozlišujeme

polychromatickeacute x monochromatickeacute světlo (selekce pomociacute barevnyacutech filtrů rarr jednotnaacute vlnovaacute deacutelka světlo zeleneacute červeneacute hellip)

Elektrickaacute vlna - sinusoida

Charakterizovaacutena dvěma veličinami

Pazourek 1975

Vlastnosti světla

Rovnoměrneacute šiacuteřeniacute světla ze zaacuteřiacuteciacuteho bodu na všechny strany rarr vlnovaacute plocha tvaru koule

Paprsek ndash směr kteryacutem se vlněniacute šiacuteřiacute a kteryacute je kolmyacute

na vlnoplochu

Pazourek 1975

- paprsek nepolarizovanyacute (A C) ndash kmitaacute v každeacutem

miacutestě a v průběhu času ve všech možnyacutech směrech

kolmyacutech na směr šiacuteřeniacute paprsku

- paprsek polarizovanyacute (B D1 D2) - kmitaacute v jedneacute

rovině přičemž rovina kmitů (vlněniacute) jednoho z nich je

kolmaacute k rovině kmitů druheacuteho

Pazourek 1975

Polarizovaneacute světlo viz

httpswwwyoutubecomwatchv=gP751qpm4n4

Murphy DB Davidson MW (2013) Fundamentals of Light Microscopy and

Electronic Imaging Jonh Wkiley amp Sons Inc Hoboken New Jersey

Osm různyacutech vlnovyacutech forem světla (znaacutezorňujiacuteciacutech různou kvalitu světla)

Odraz a lom světelnyacutech paprsků

v prostřediacutech různeacute hustoty

Důležitaacute charakteristika prostřediacute

index lomu ( n ) (= optickaacute hustota prostřediacute)

c = rychlost světla ve vakuu (stejnaacute pro všechny λ )

v = rychlost světla určiteacute vlnoveacute deacutelky ve zkoumaneacute laacutetce

c

n =

v

zde absolutniacute index lomu

(bezrozměrnaacute fyzikaacutelniacute veličina jeho jednotka je 1)

Rychlost světla (c) určiteacute vlnoveacute

deacutelky v různyacutech prostřediacutech

c ve vakuu

= 300 000 kms

Index lomu (n) některyacutech laacutetek

vzduch (vakuum) helliphellip 100 (vzduch 10002718)

voda helliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 133

plexisklo helliphelliphelliphelliphelliphellip 140 ndash 152

křemenneacute sklo helliphellip hellip 145 (čočka z křemene z Ninive ndash 7 stol přnl)

běžneacute sklo helliphelliphelliphelliphellip 151

cedrovyacute olej helliphelliphelliphelliphellip 151

imerzniacute olej Olympus hellip 1516 pro fluorescenci 1404

kanadskyacute balzaacutem helliphellip 150

krystal NaCl helliphelliphelliphellip 154

korunoveacute sklo helliphelliphelliphellip 145 ndash 156 (sodno-draselneacute bezolovnateacute)

flintoveacute sklo helliphelliphelliphellip 162 ndash 180 (olovnateacute)

diamant helliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 242

Index lomu je vždy většiacute než 100

očniacute čočka hellip 1406

sklivec helliphelliphellip 1336

Odraz světla rovnyacutem zrcadlem (reflexe)

Zaacutekony

1 Paprsek dopadajiacuteciacute kolmice dopadu a paprsek odraženyacute

ležiacute v jedneacute rovině

2 Uacutehel odrazu se rovnaacute uacutehlu dopadu

Odraz a lom paprsku

k

Důležiteacute pro mikroskopii (astronomii)

- neniacute zaacutevislost na vlnoveacute deacutelce světla (λ)

- na rozdiacutel od lomu paprsků se světelneacute

paprsky se odraacutežejiacute stejně

Pazourek 1975

Zaacutekony

1 Paprsek dopadajiacuteciacute kolmice lomu a paprsek lomenyacute ležiacute v teacuteže rovině

Lom světla (refrakce)

2 Při přechodu z prostřediacute opticky řidšiacuteho do prostřediacute opticky hustšiacuteho se paprsek laacuteme ke kolmici (A)

a z prostřediacute opticky hustšiacuteho

do prostřediacute opticky řidšiacuteho

se laacuteme od kolmice (B)

(C a D) ndash uacuteplnyacute odraz při tzv

mezniacutem uacutehlu dopadu paprsku

v přiacutepadě lomu od kolmice (B)

(viz Nikol odrazneacute hranoly světlovodneacute vlaacutekno nebo fluorescenčniacute metoda TIRFM ndash totaacutelniacute odraz exitačniacuteho zaacuteřeniacute)

Pazourek 1975

Svatyacute Kryštof od

švyacutecarskeacuteho maliacuteře

Konrada Witze (kolem 1400ndash1446)

Witz byl jedniacutem z prvniacutech

maliacuteřů kteryacute namaloval

přesnyacute způsob odrazu

světla na vodě

Disperze (rozklad) světla

= důsledek zaacutevislosti rychlosti světla v laacutetkaacutech na frekvenci světla

(λ = c f)

světlo různyacutech barev (λ)

se laacuteme různě

(červeneacute se lomiacute meacuteně než modreacute)

Přiacuteklad disperze (rozkladu) světla

Primaacuterniacute a sekundaacuterniacute duha Severniacute Čechy Foto Pavla Vaacutelovaacute 2010

D u h a

Jeden z mnoha

optickyacutech

jevů (fotometeorů)

v atmosfeacuteře

Rok 312 nl - před bitvou byzantskeacuteho ciacutesaře Konstantina I (272-337) s

konkurenčniacutem ciacutesařem Maxentiem u bran Řiacutema (tzv bitva u Milvijskeacuteho mostu) se

na obloze objevily tři zaacuteřiacuteciacute křiacuteže (halovyacute sloup parheacutelia a parhelickyacute oblouk)

Konstantin bitvu proti přesile vyhraacutel sjednotil řiacuteši a povolil v niacute vyznaacutevat křesťanstviacute

Maleacute halo (22deg) (viz 1) vedlejšiacute slunce (2) a horniacute a dolniacute halovyacute sloup (3)

vznikajiacuteciacute odrazem a lomem světelnyacutech paprsků na krystalciacutech ledu

Lom světla a dějiny

httptmagazineblogsnytimescom20121126halo-effect_r=0

1

3

2 2

3

Ohyb (difrakce) a interference

světla

Foto Pavla Vaacutelovaacute Bukovany 2015 Rozklad světla na CD - světlo žaacuterovky

Rozklad biacuteleacuteho světla na mřiacutežce

Pevnost poznaacuteniacute Olomouc 2015

Foto Pavla Vaacutelovaacute Olomouc 2015

Ohyb (difrakce) a interference

světla

Ohyb (difrakce) a interference

Difrakčniacute obrazec obsahuje světlaacute a tmavaacute miacutesta kteraacute se

střiacutedajiacute - světlaacute miacutesta nazyacutevaacuteme maxima a tmavaacute minima

Interference světla = sklaacutedaacuteniacute světelnyacutech vln

Předpoklad světlo musiacute byacutet koherentniacute

Podmiacutenka koherence

- paprsky musiacute miacutet stejnou frekvenci

- paprsky musiacute byacutet navzaacutejem rovnoběžneacute

- paprsky musiacute miacutet na sobě nezaacutevislyacute draacutehovyacute (faacutezovyacute) rozdiacutel

Vznik koherentniacuteho zaacuteřeniacute

rozděleniacutem světla

- buď odrazem pomociacute zrcadel

- nebo lomem pomociacute hranolů

Foto Pavla Vaacutelovaacute Praha 151 2016

Interference světla

stejnyacute způsob vlněniacute

(faacuteze je vzaacutejemně posunuta o sudeacute

naacutesobky λ2)

vznik interferenčniacuteho maxima

(konstruktivniacute interference)

Interference světla

asynchronniacute vlněniacute

(vzaacutejemně posunutaacute faacuteze

o licheacute naacutesobky λ2)

vznik interferenčniacuteho

minima

(destruktivniacute interference)

rarr zaacuteřeniacute zanikaacute

rarr zeslabeniacute zaacuteřeniacute

Interference dvou vrstev elektromagnetickeacuteho zaacuteřeniacute u Slunce

Čočky ndash zaacutekladniacute součaacutesti

mikroskopu

= průhlednaacute (nejčastěji skleněnaacute) tělesa omezenaacute

vypuklyacutemi nebo vydutyacutemi kulovityacutemi plochami lišiacuteciacute se od sveacuteho okoliacute odlišnyacutem indexem lomu

Zaacutekladniacute typy čoček

spojky (vypukleacute neboli konvexniacute)

rozptylky (vyduteacute konkaacutevniacute)

Pazourek 1975

Optickaacute osa ( o ) prochaacuteziacute středem čočky

Ohnisko ( F ) - bod do ktereacuteho se soustřeďujiacute paprsky probiacutehajiacuteciacute rovnoběžně s optickou osou

- 2 ohniska - předmětoveacute ohnisko ( F )

obrazoveacute ohnisko ( Facute )

- ohniskovaacute vzdaacutelenost ( f )

vzdaacutelenost ohniska od hlavniacute roviny proloženeacute středem čočky

- dvojnaacutesobnaacute ohniskovaacute vzdaacutelenost ( P Pacute )

Obrazovyacute prostor - prostor v němž vznikaacute obraz

Důležiteacute charakteristiky čočky

f

o

hlavniacute rovina

Pazourek 1975

V přiacutepadě velmi tenkeacute čočky

bull Obraz za optickou soustavou

rarr obraz s k u t e č n yacute

Skutečnyacute obraz je možneacute zachytit na stiacuteniacutetko

nebo na fotografickou desku neskutečnyacute nikoliv

bull Obraz před soustavou

rarr obraz n e s k u t e č n yacute (zdaacutenlivyacute virtuaacutelniacute)

Obraz skutečnyacute a neskutečnyacute

A ndash předmět Aacute- obraz předmětu

Upraveno podle Pazourek 1975

Francouz Augustin Jean Fresnel (1788-1827) [frenel]

Fresnelova čočka [frenelova]

- plochyacute tvar (zachovaacuteny pouze čaacutesti ktereacute měniacute směr chodu světelnyacutech paprsků)

- vyacuterazně nižšiacute hmotnost při zachovaacuteniacute podobnyacutech parametrů

Využitiacute infračidla pohybu semafory světlomety (majaacuteky) a reflektory (světla aut

divadelniacutech a filmovyacutech osvětlovaciacutech zařiacutezeniacute) zpětneacute projektory slunečniacute kolektory

na zaacutekladě tohoto principu takeacute vyacuteroba 3D displejů k mobilniacutem telefonům a televiziacutem

httpwwwmffcuniczverejnostzpravicky03_lupahtm

čočka na majaacuteku

Čočky v budoucnosti

Pokus o vyacuterobu tzv dokonaleacute čočky

Prototyp - upraveneacute tzv Maxwellovo rybiacute oko

- paprsky světla se v něm pohybujiacute po kružniciacutech a

na rozdiacutel od běžnyacutech čoček se při zobrazeniacute využijiacute

všechny paprsky

- superčočky využiacutevajiacute geometrie k tomu aby se světlo

soustředilo do oblasti menšiacute než je jeho vlnovaacute deacutelka

(zatiacutem se neviacute jak do čočky vyhovujiacuteciacutem způsobem

doveacutest světlo)

Využitiacute v budoucnu

mimo jineacute v pozorovaacuteniacute živyacutech buněk při velkeacutem zvětšeniacute

pomociacute obyčejneacuteho světla bez jejich narušeniacute

Viacutece viz Plaacutešek J Mikroskopy se superčočkami httpwwwvesmircz | Vesmiacuter 91 531 zaacuteřiacute 2012

Hranoly

- doplňky optickyacutech systeacutemů

- většinou tvar rovnostranneacuteho trojuacutehelniacuteka

- využiacutevajiacute uacuteplneacuteho odrazu

Funkce

- změna chodu paprsků pod různyacutemi uacutehly

- rozdvojeniacute paprsků

Pazourek 1975

Různeacute typy odraznyacutech hranolů

Hranoly

Různeacute typy hranolů

httplaserykvalitneczimagestext_25_zakladyoptiky1odrazne_hranolyjpg

Viz dichroickeacute zrcadlo u fluorescenčniacuteho mikroskopu

Chod paprsků v binokulaacuterniacutem tubusu

Pazourek 1975

Nikol = hranol z islandskeacuteho vaacutepence

rarr polarizace světla

Dvojlomnyacute vaacutepencovyacute

krystal

ř ndash paprsek řaacutednyacute (zanikaacute na začerněneacute ploše)

mř ndash paprsek mimořaacutednyacute (lineaacuterně polarizovanyacute

využit k osvětleniacute)

začerněnaacute plocha

Nikol

Pazourek 1975

vzduchovaacute štěrbina

- rychlost světla je

v různyacutech směrech různaacute

- uacutehel paprsku řaacutedneacuteho a

mimořaacutedneacuteho je odlišnyacute

(u Vikingů - slunečniacute kaacutemen

soacutelarsteinn)

Chod paprsků ve světlovodneacutem vlaacuteknu

Princip uacuteplnyacute odraz paprsku

- uvnitř skleněneacuteho vlaacutekna je opticky hustšiacute prostřediacute

- nutnost dostatečně silneacuteho světelneacuteho zdroje

Světlovodnaacute vlaacutekna

Pazourek 1975

Širokeacute využitiacute v praxi optickeacute kabely ndash přenos signaacutelů ve sdělovaciacute technice

světlovody umožňujiacuteciacute veacutest denniacute světlo vedeniacute světla u stereolup endoskopů hellip

Page 4: Světelná a elektronová mikroskopie...(AMF – Atomic Force Miroscope) - skenování povrchu materiálu pomocí hrotu zavěšeném na pružném výkyvném raménku, který je přitahován

Sylabus 5 Princip konfokaacutelniacuteho mikroskopu Různeacute typy mikroskopů

(lupa stereolupa inverzniacute mikroskop digitaacutelniacute mikroskop

mikroskopy atomaacuterniacutech sil - STM ASM) Mikroskop jako

mikromanipulačniacute naacutestroj Systeacutemy pro zkvalitněniacute

mikroskopickeacuteho obrazu Zaacuteklady superrozlišovaciacute

mikroskopie

6 Prezentace Noveacute směry ve světelneacute mikroskopii

mikroskopie s vysokyacutem rozlišeniacutem

Ing Pavel Krist PhD Carl Zeiss sro Praha

Středa 213 2018 helliphelliphelliphellip 1315 ndash 1445

7 Kolokvium ndash zaacutepočtovyacute test

Středa 283 2018 helliphelliphelliphellip 1315 ndash MIK

1400 - CVMIK

Doporučenaacute literatura

Hejtmaacutenek M (2001) Uacutevod do světelneacute mikroskopie Skripta UP Olomouc

Knoz J Opravilovaacute V (1992) Zaacuteklady mikroskopickeacute techniky Skripta MU Brno

Přednaacutešky ndash PřF UP Olomouc Katedra experimentaacutelniacute fyziky

Kubiacutenek Roman Moderniacute světelnaacute a elektronovaacute mikroskopie

httpfyzikaupolczcssystemfilesdownloadvujtekprezentacekubinekSMaEMpdf

Kubiacutenek R Vůjtek M Mašlaacuteň M Mikroskopie skenujiacuteciacute sondou httpfyzikaupolczcssystemfilesdownloadvujtekprezentacekubinekSPMpdf

Kuacuteš P a kol (2008) Modernaacute mikroskopia a digitaacutelne zpracovanie obrazu Skripta

Bratislava ISBN 978-80-89186-37-2

httpwwwmikroskopiaskmaterialsskripta_mikroskopiapdf

Matis D a kol (2001) Mikroskopickaacute technika Faunima Bratislava

Paleček J (1996) Biologie buňky I Zaacuteklady mikroskopickeacute cytologie Skripta UK

Praha

Ruzin SE (1999) Plant microtechnique and microscopy Oxford University

bull wwwolympusmicrocom

bull httpwwwparucasczlembookPodkap30html (Elektronovaacute mikroskopie)

bull httpbiologieupolczmikroskopie

Nejnovějšiacute literatura (k dispozici v miacutestniacute knihovně)

Murphy DB Davidson MW (2013)

Fundamentals of Light Microscopy and Electronic Imaging

Willey-Blackwell Published 2013 by John Wiley amp Sons Inc

Hoboken New Jersey

vč rozsaacutehleacuteho slovniacuteku pojmů z mikroskopie na konci knihy

Randy O Wayne (2014) Light and Video Microscopy

Second Edition Hardcover

Doplňujiacuteciacute literatura

Habrovaacute V (1990) Mikroskopickaacute technika SPN Praha

Jurčaacutek J (1998) Zaacutekladniacute praktikum z botanickeacute mikrotechniky a rostlinneacute anatomie Skripta UP Olomouc

Němec B a kol (1962) Botanickaacute mikrotechnika Nakladatelstviacute ČSAV Praha

Lepil O (2013) Fyzika pro gymnaacutezia Optika Prometheus Praha

4 přepracovaneacute vydaacuteniacute

Pazourek J (1975) Pracujeme s mikroskopem SNTL Praha

Pazourkovaacute Z (1986) Botanickaacute mikrotechnika Praha 1986 skripta UK Praha

Pazourkovaacute Z Pazourek J (1960) Rychleacute metody botanickeacute mikrotechniky ČAZV SZN Praha

Špaček J (2008) Svět pod mikroskopem Grada Praha

Kremer Bruno P (2013) Mikroskop zcela jednoduše Aventium nakladatelstviacute sro

Člaacutenky z časopisu Vesmiacuter

Internet Učebniacute texty Katedry Optiky UP Olomouc Světelnaacute mikroskopie (doc Roman Kubiacutenek)

httpapfyzupolczucebniceoptmikrohtml

httpapfyzupolczucebnicedownoptmikropdf

Leacutekařskaacute fakulta UP Olomouc httpbiologieupolczmikroskopie

Nebesaacuteřovaacute J Elektronovaacute mikroskopie pro biology

httpwwwparucasczlembookindexhtml

skripta httpwwwmikroskopiaskpage8html (slovensky)

httpwwwhistory-of-the-microscopeorg

Kurzy mikroskopie na httpmicroscopydukeedu httpmicroscopydukeeduconceptshtml

Internetoveacute adresy o mikroskopech různyacutech firem Olympus httpwwwolympuscz httpwwwolympusmicrocom

Olympus_2011 - httpwwwmujolympusczdata20110209095419bodyhtm

Kniha o světelneacute mikroskopii na www

Davidson and Abramowitz Optical Microscopy Review Article

httpolympusmagnetfsueduprimeropticalmicroscopyhtml

Přiacuteručka firmy Zeiss httpwwwusaskcabiologyscopesMicroscopyBasicspdf

Nikon httpwwwmicroscopyucom

Přiacuteručka firmy Nikon httpwwwareczdatafilezakladni_metody_svetelne_mikroskopiepdf

Odkazy na literaturu

httplommicroscopyweeblycombasics-of-light-microscopy-and-opticshtml

Virtuaacutelniacute obraacutezky

httpwwwolympusmicrocomprimerjava

httpzeiss-campusmagnetfsuedututorialsindexhtml

Historie mikroskopovaacuteniacute

Optickeacute principy

světelneacute mikroskopie

Přednaacuteška 1

Pavla Vaacutelovaacute 2018

naacutezev z řec mikroacutes = malyacute skopoacutes = pozorovatel

vynaacutelez mikroskopu ndash konec 16 stol (technickyacute rozmach lidstva)

1625 - naacutezev mikroskop odvozenyacute od naacutezvu teleskop

(Giovanni Faber z Bambergu ndash papežskyacute leacutekař )

H i s t o r i e o b j e v u m i k r o s k o p u

Dřiacutevějšiacute pozorovaacuteniacute

Řecko - Aristofanes Atheacutenskyacute (424-380 př n l) - ve hře bdquoOblakaldquo

popis zraněniacute paprskem slunce prochaacutezejiacuteciacuteho skleněnou

kouliacute naplněnou vodou

Řiacutemskaacute doba

- filosof Seneca (asi 4 přnl-65 nl) - zvětšeniacute piacutesmen

pomociacute skleněneacute koule naplněneacute vodou

- Klaudius Ptolemaios (asi 100-170 nl) ndash diacutelo bdquoOptikaldquo -

poznatky o odraze paprsků a lomu paprsků skrz sklo

11 stol - Ibn al Haitham (bdquoAlhazenldquo) (965-1039) - arabskyacute fyzik a

matematik diacutelo bdquoPojednaacuteniacute o opticeldquo ndash zkoumaacute vlastnosti

světla (lom a odraz) čočky a zrcadla

viz Anna Černaacute Mikroskop pod drobnohledem Živa 52017 str CXXVIII

14 stol ndash zvlaacutednutiacute techniky broušeniacute čoček do bryacuteliacute (italštiacute mniši)

konec 16 stol ndash vynaacutelez mikroskopu

kolem roku 1590 - Hans a Zacharias Janssenovi (Holandsko otec a syn)

H i s t o r i e o b j e v u m i k r o s k o p u

- konstrukce prvniacuteho použitelneacuteho mikroskopu (ze dvou čoček)

- čočky vypoukleacute i vyduteacute

- zvětšeniacute mikroskopu 60x

viz kniha a film bdquoJmeacuteno růželdquo od Umberta Eca

Systeacutem dvou čoček

16 stol

deacutelka 12 m

(tzv kompaudniacute mikroskop)

httpwwwmicroscopyfsueduprimermuseum

httpmicromagnetfsueduprimermuseumjanssenhtml

httpwwwapsorgpublicationsapsnews200403historycfm

Janssenův mikroskop

17 stol Galileo Galilei (1564-1642)

ndash italskyacute astronom a matematik

1604-1609 ndash konstrukce dalekohledu

- použitiacute složeneacuteho mikroskopu

nazvaneacuteho occhiolino

k vědeckyacutem uacutečelům (pozorovaacuteniacute

oka mouchy)

Nejasnosti kolem vynaacutelezu mikroskopu

ndash z dobovyacutech zpraacutev neniacute jasneacute zda se jednaacute o mikroskop

jehož okulaacuterem je spojka nebo o dalekohled s rozptylkou

(kteryacute použiacuteval Galileo)

Anthony van Leeuwenhoek (1632-1723)

ndash obchodniacutek s laacutetkami v holandskeacutem Delftu

ndash sestrojil jednočočkovyacute mikroskop silnyacute zvětšovaciacute

efekt čočky

(až 270x)

ndash nejprve zkoumaacuteniacute struktury laacutetek

později zkoumal listy květiny drobneacute organismy lidskou krev kůži vlasy hellip

- prvniacute viděl a popsal krevniacute buňky chovaacuteniacute lidskyacutech spermiiacute

- vyacuteroba asi 250 mikroskopů

17 stol

Jednočočkovyacute Leeuwenhoekův

mikroskop

httpbiologimediacentrecomwp-contentuploads201101image2png

Anglickyacute původ Italskyacute původ

17 stol

Prvniacute světelneacute mikroskopy

Jednočočkovyacute

mikroskop Dvoučočkoveacute

mikroskopy

Robert Hook (1635-1703) [huacutek]

ndash anglickyacute fyzik chemik geolog astronom hellip

ndash použiacuteval zakoupenyacute složenyacute mikroskop s viacutece

čočkami (tzv kompaudniacute) vylepšenyacute o kvalitniacute osvětleniacute

17 stol

Hookův mikroskop

- vylepšeniacute osvětleniacute použitiacute irisoveacute clony

irisovaacute clona

- zkoumaacuteniacute slabyacutech plaacutetků korku z korkovniacuteku

živeacute laacutetky jsou tvořeny buňkami

- 1665 - kniha bdquoMicrographialdquo

mikroskopickeacute pozorovaacuteniacute rostlinnyacutech

pletiv živočišnyacutech objektů a struktur

mineraacutelů

Rok vydaacuteniacute 1665 Micrographia or some Physiological Descriptions of Minute Bodies

made by Magnifying Glasses with Observations and Inquiries thereupon

London 1665

17 stol Leeuwenhoek Hook

Angličan Henry Power (1626ndash1668) ndash jako

prvniacute (1663) publikoval pozorovaacuteniacute mikroskopem

Marcello Malphighi (1628ndash1694)

italskyacute leacutekař

zakladatel mikroskopickeacute anatomie

- objev krevniacutech kapilaacuter savců (1661)

- malphigickeacute trubice hmyzu

18 stol

ndash mikroskopy přežily jako hračka pro zaacutebavu anglickyacutech gentlemanů zajiacutemajiacuteciacutech se o tajemstviacute přiacuterody

19 stol

zač 19 stol ndash Dollond Lister Amici - vynaacutelez

achromatickeacuteho objektivu

ndash do teacute doby použiacutevaacuteniacute jednočočkoveacuteho mikroskopu (dvoučočkovyacute

mikroskop podaacuteval značně zkreslenyacute obraz)

Vyacuteznačniacute vědci 19 stol použiacutevajiacuteciacute k svyacutem pozorovaacuteniacutem mikroskop

Robert Brown (1773-1858) - objev jaacutedra (1831)

Luis Pasteur (1822-1895) (francouzskyacute mikrobiolog)

- objev kvasinek

Robert Koch (1843-1910) (německyacute leacutekař a mikrobiolog)

- objev původců tuberkuloacutezy a cholery

Jan Evangelista Purkyně (1787-1869) (českyacute fyziolog)

- 1825 popsal jaacutedro u živočišneacute buňky (lupa)

od r 1832 použiacutevaacute kvalitniacute mikroskop

Microscope

stand VII

19 stol ndash dalšiacute vyacutevoj mikroskopů

Carl Zeiss ndash průmyslovaacute vyacuteroba mikroskopů (firma Zeiss)

Ernst Karl Abbe ndash teoretickaacute studia optickyacutech principů

Otto Schott ndash vyacutezkum optickeacuteho skla

August Koumlhler ndash kvalitniacute osvětleniacute

Otto Schott (1851-1935)

Ernst Abbe (1840-1905)

Carl Zeiss (1816-1888)

August Koumlhler (1866-1948)

Mikroskopy 19 stoletiacute

19 stol

20 stol

Konfokaacutelniacute mikroskop

A1R (Nikon)

BX60 (Olympus)

Laserovyacute fluorescenčniacute mikroskop bdquoLight Sheetldquo Centrum regionu Hanaacute pro biotechnologickyacute a zemědělskyacute vyacutezkum Odděleniacute buněčneacute biologie

21 stol

21 stol

Digitaacutelniacute holografickyacute mikroskop firmy Lynceacutee Tec

Důležitaacute data při rozvoji moderniacute světelneacute mikroskopie

1847 - Zahaacutejeniacute vyacuteroby mikroskopů firmou Carl Zeiss v Jeně

1903 - Ultramikroskop (Richard Zsigmondy NC 1925)

1911 - Fluorescenčniacute mikroskop (Carl Reichert)

1935 - Faacutezovyacute kontrast (Fritz Zernike NC 1953)

1955 - Diferenciaacutelniacute interferenčniacute kontrast (DIC ndash Nomarski)

1968 - Rastrovaciacute tandemovyacute konfokaacutelniacute mikroskop (TSCM)

1978 - Laserovyacute konfokaacutelniacute rastrovaciacute mikroskop

1994 - Princip STED mikroskopie (S W Hell NC 2014)

(Stimulated Emission Depletion ndash redukce fluorescence stimulovanou emisiacute)

po roce 2000 - rozvoj tzv superrozlišovaciacute mikroskopie

2006 - Super-resolučniacute fluorescenčniacute mikroskop (Eric Betzig

Stefan W Hell a William E Moerner NC za chemii 2014)

NC = Nobelova cena

30 leacuteta 20 stoletiacute

ndash hranice vyacutevoje optickeacuteho (paprskoveacuteho) mikroskopu

(hranice rozlišeniacute světelneacuteho mikroskopu je diacuteky velikosti deacutelky světla 02 microm)

- dalšiacute zvětšovaacuteniacute pozorovanyacutech objektů na jineacutem principu

- miacutesto světelneacuteho paprsku elektronovyacute paprsek

(= tok rychlyacutech elektronů)

- miacutesto skleněneacute čočky magnetickaacute čočka

1931 - Ernst Ruska Max Knoll

prvniacute elektronovyacute mikroskop

tzv prozařovaciacute transmisniacute EM

(TEM ndash Transmission Electron Microscope)

- originaacutelniacute zvětšeniacute 1 000 - 250 000x

Ernst Ruska (1906-1988)

1942 - rastrovaciacute EM

(SEM ndash Scanning Electron Microscope) - postupneacute bombardovaacuteniacute vzorku elektrony

- zvětšeniacute až 30 000x

EM UacuteMG AV ČR Praha-Krč

FEI ndash TECHNAIG2TEM + kryozařiacutezeniacute

200 kV (λ el = 00025 nm)

RS 01 nm

prvkovaacute analyacuteza vzorků

zařiacutezeniacute pro

prvkovou analyacutezu

vzorků

Foto Pavla Vaacutelovaacute 2010

Brněnštiacute vědci z Uacutestavu přiacutestrojoveacute techniky AV ČR (UacutePT) a Mendelovy

univerzity představili novou metodu pozorovaacuteniacute rostlinnyacutech vzorků v jejich

přirozeneacutem stavu (za využitiacute kryoprotektiv)

Viacutece na httpe-svete15cztechnikacesti-vedci-posunuli-hranice-elektronove-mikroskopie-1174818

Enviromentaacutelniacute rastrovaciacute elektronovyacute mikroskop Aquasem II

TEM TITAN FEI Company Mgr Klaacutera Čeacutepe PhD

Vysokorozlišovaciacute transmisniacute elektronovyacute mikroskop

schopnyacute nahleacutednout do struktury materiaacutelů až na uacuterovni atomů

a současně přesně zmapovat jejich chemickeacute složeniacute

Regionaacutelniacute centrum pokročilyacutech

materiaacutelů (RCPTM)

Odd uhliacutekoveacute nanostruktury

PřF UP OL

Vysokorozlišovaciacute transmisniacute

elektronovyacute mikroskop TITAN (FEI)

Foto Pavla Vaacutelovaacute 2015

Transmisniacute elektronovyacute

mikroskop Jeol

Regionaacutelniacute centrum pokročilyacutech materiaacutelů (RCPTM)

Odd uhliacutekoveacute nanostruktury PřF UP OL

Neoptickeacute mikroskopy

1981

Řaacutedkovaciacute tunelovyacute mikroskop (STM ndash Scanning Tunnelling Microscope)

- mapovaacuteniacute povrchu pomociacute pohybu vodiveacuteho hrotu nad vodivyacutem povrchem sledovaneacuteho materiaacutelu

1986

Mikroskop atomaacuterniacutech sil (AMF ndash Atomic Force Miroscope)

- skenovaacuteniacute povrchu materiaacutelu pomociacute hrotu zavěšeneacutem na pružneacutem vyacutekyvneacutem rameacutenku kteryacute je přitahovaacuten elektrostatickyacutemi a Van der Walsovyacutemi silami

Rozlišeniacute v řaacutedech pikometrů (10-12 m) ndash rozeznaacuteniacute struktur

jednotlivyacutech atomů

O p t i c k eacute p r i n c i p y

světelneacute mikroskopie

Reichl J Všetička M Encyklopedie fyziky [online] copy2006-2014

[vid 2014] Dostupneacute z httpfyzikajreichlcommainarticleview431-optika Lepil O (2013) Fyzika pro gymnaacutezia Optika Prometheus Praha 4 přepracovaneacute vydaacuteniacute

Murphy DB Davidson MW (2013) Fundamentals of Light

Microscopy and Electronic Imaging Willey-Blackwell Published

2013 by John Wiley amp Sons Inc Hoboken New Jersey

S v ě t l o

= čaacutest rozsaacutehleacute oblasti elektromagnetickeacuteho zaacuteřeniacute

kterou vniacutemaacuteme zrakem

Rozhlasoveacute a raacutedioveacute vlny 250 km - 1 mm

Infračerveneacute zaacuteřeniacute 05 mm - 08 μm

Světlo (viditelneacute zaacuteřeniacute) 08 μm - 04 μm

Ultrafialoveacute zaacuteřeniacute 04 microm - 01 microm

Roumlntgenovo zaacuteřeniacute (X-paprsky) 15 nm - 0005 nm

γ-zaacuteřeniacute pod 00001 nm

Přibližneacute hodnoty ndash individuaacutelniacute vlastnosti zraku různyacutech lidiacute

S v ě t l o

= čaacutest rozsaacutehleacute oblasti elektromagnetickeacuteho zaacuteřeniacute

kterou vniacutemaacuteme zrakem

rarr se zkracujiacuteciacute se vlnovou deacutelkou se zvyšuje frekvence (energie)

Viditelneacute

Vlnoveacute deacutelky světla a relativniacute citlivost oka

Murphy DB Davidson MW (2013) Fundamentals of Light Microscopy and Electronic

Imaging Willey-Blackwell Published 2013 by John Wiley amp Sons Inc Hoboken New Jersey

= zrakovyacute pigment citlivyacute na

světlo nachaacutezejiacuteciacute se v tyčinkaacutech Jodopsin = zrakovyacute pigment citlivyacute na

barvu nachaacutezejiacuteciacute se v čiacutepciacutech

S v ě t l o

Duaacutelniacute charakter světla ndash vlněniacute i proud čaacutestic (fotonů)

Vlnovyacute model světla

vlna elektrickaacute a magnetickaacute (elektromagnetickaacute vlna je tvořena oscilujiacuteciacutem elektrickyacutem a

magnetickyacutem polem na sebe kolmyacutech a nesouciacutech vpřed energii)

Pro uacutečinky světla v mikroskopu je důležitaacute vlna elektrickaacute

= přiacutečneacute vlněniacute

postupneacute kmitaacuteniacute

jednotlivyacutech vedle sebe

ležiacuteciacutech bodů

Scheacutema světla jako elektromagnetickeacute vlny

Obr httpwwwprosoundwebcomarticleprintinvaders_from_

outer_space_electromagnetic_radiation_interference

λ - vlnovaacute deacutelka

(v oblasti svět zaacuteřeniacute

v rozmeziacute od 380 do 780 nm)

určuje barvu světla

a - amplituda

nejvyššiacute hodnota

určuje intenzitu světla

Z hlediska vlnoveacute deacutelky rozlišujeme

polychromatickeacute x monochromatickeacute světlo (selekce pomociacute barevnyacutech filtrů rarr jednotnaacute vlnovaacute deacutelka světlo zeleneacute červeneacute hellip)

Elektrickaacute vlna - sinusoida

Charakterizovaacutena dvěma veličinami

Pazourek 1975

Vlastnosti světla

Rovnoměrneacute šiacuteřeniacute světla ze zaacuteřiacuteciacuteho bodu na všechny strany rarr vlnovaacute plocha tvaru koule

Paprsek ndash směr kteryacutem se vlněniacute šiacuteřiacute a kteryacute je kolmyacute

na vlnoplochu

Pazourek 1975

- paprsek nepolarizovanyacute (A C) ndash kmitaacute v každeacutem

miacutestě a v průběhu času ve všech možnyacutech směrech

kolmyacutech na směr šiacuteřeniacute paprsku

- paprsek polarizovanyacute (B D1 D2) - kmitaacute v jedneacute

rovině přičemž rovina kmitů (vlněniacute) jednoho z nich je

kolmaacute k rovině kmitů druheacuteho

Pazourek 1975

Polarizovaneacute světlo viz

httpswwwyoutubecomwatchv=gP751qpm4n4

Murphy DB Davidson MW (2013) Fundamentals of Light Microscopy and

Electronic Imaging Jonh Wkiley amp Sons Inc Hoboken New Jersey

Osm různyacutech vlnovyacutech forem světla (znaacutezorňujiacuteciacutech různou kvalitu světla)

Odraz a lom světelnyacutech paprsků

v prostřediacutech různeacute hustoty

Důležitaacute charakteristika prostřediacute

index lomu ( n ) (= optickaacute hustota prostřediacute)

c = rychlost světla ve vakuu (stejnaacute pro všechny λ )

v = rychlost světla určiteacute vlnoveacute deacutelky ve zkoumaneacute laacutetce

c

n =

v

zde absolutniacute index lomu

(bezrozměrnaacute fyzikaacutelniacute veličina jeho jednotka je 1)

Rychlost světla (c) určiteacute vlnoveacute

deacutelky v různyacutech prostřediacutech

c ve vakuu

= 300 000 kms

Index lomu (n) některyacutech laacutetek

vzduch (vakuum) helliphellip 100 (vzduch 10002718)

voda helliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 133

plexisklo helliphelliphelliphelliphelliphellip 140 ndash 152

křemenneacute sklo helliphellip hellip 145 (čočka z křemene z Ninive ndash 7 stol přnl)

běžneacute sklo helliphelliphelliphelliphellip 151

cedrovyacute olej helliphelliphelliphelliphellip 151

imerzniacute olej Olympus hellip 1516 pro fluorescenci 1404

kanadskyacute balzaacutem helliphellip 150

krystal NaCl helliphelliphelliphellip 154

korunoveacute sklo helliphelliphelliphellip 145 ndash 156 (sodno-draselneacute bezolovnateacute)

flintoveacute sklo helliphelliphelliphellip 162 ndash 180 (olovnateacute)

diamant helliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 242

Index lomu je vždy většiacute než 100

očniacute čočka hellip 1406

sklivec helliphelliphellip 1336

Odraz světla rovnyacutem zrcadlem (reflexe)

Zaacutekony

1 Paprsek dopadajiacuteciacute kolmice dopadu a paprsek odraženyacute

ležiacute v jedneacute rovině

2 Uacutehel odrazu se rovnaacute uacutehlu dopadu

Odraz a lom paprsku

k

Důležiteacute pro mikroskopii (astronomii)

- neniacute zaacutevislost na vlnoveacute deacutelce světla (λ)

- na rozdiacutel od lomu paprsků se světelneacute

paprsky se odraacutežejiacute stejně

Pazourek 1975

Zaacutekony

1 Paprsek dopadajiacuteciacute kolmice lomu a paprsek lomenyacute ležiacute v teacuteže rovině

Lom světla (refrakce)

2 Při přechodu z prostřediacute opticky řidšiacuteho do prostřediacute opticky hustšiacuteho se paprsek laacuteme ke kolmici (A)

a z prostřediacute opticky hustšiacuteho

do prostřediacute opticky řidšiacuteho

se laacuteme od kolmice (B)

(C a D) ndash uacuteplnyacute odraz při tzv

mezniacutem uacutehlu dopadu paprsku

v přiacutepadě lomu od kolmice (B)

(viz Nikol odrazneacute hranoly světlovodneacute vlaacutekno nebo fluorescenčniacute metoda TIRFM ndash totaacutelniacute odraz exitačniacuteho zaacuteřeniacute)

Pazourek 1975

Svatyacute Kryštof od

švyacutecarskeacuteho maliacuteře

Konrada Witze (kolem 1400ndash1446)

Witz byl jedniacutem z prvniacutech

maliacuteřů kteryacute namaloval

přesnyacute způsob odrazu

světla na vodě

Disperze (rozklad) světla

= důsledek zaacutevislosti rychlosti světla v laacutetkaacutech na frekvenci světla

(λ = c f)

světlo různyacutech barev (λ)

se laacuteme různě

(červeneacute se lomiacute meacuteně než modreacute)

Přiacuteklad disperze (rozkladu) světla

Primaacuterniacute a sekundaacuterniacute duha Severniacute Čechy Foto Pavla Vaacutelovaacute 2010

D u h a

Jeden z mnoha

optickyacutech

jevů (fotometeorů)

v atmosfeacuteře

Rok 312 nl - před bitvou byzantskeacuteho ciacutesaře Konstantina I (272-337) s

konkurenčniacutem ciacutesařem Maxentiem u bran Řiacutema (tzv bitva u Milvijskeacuteho mostu) se

na obloze objevily tři zaacuteřiacuteciacute křiacuteže (halovyacute sloup parheacutelia a parhelickyacute oblouk)

Konstantin bitvu proti přesile vyhraacutel sjednotil řiacuteši a povolil v niacute vyznaacutevat křesťanstviacute

Maleacute halo (22deg) (viz 1) vedlejšiacute slunce (2) a horniacute a dolniacute halovyacute sloup (3)

vznikajiacuteciacute odrazem a lomem světelnyacutech paprsků na krystalciacutech ledu

Lom světla a dějiny

httptmagazineblogsnytimescom20121126halo-effect_r=0

1

3

2 2

3

Ohyb (difrakce) a interference

světla

Foto Pavla Vaacutelovaacute Bukovany 2015 Rozklad světla na CD - světlo žaacuterovky

Rozklad biacuteleacuteho světla na mřiacutežce

Pevnost poznaacuteniacute Olomouc 2015

Foto Pavla Vaacutelovaacute Olomouc 2015

Ohyb (difrakce) a interference

světla

Ohyb (difrakce) a interference

Difrakčniacute obrazec obsahuje světlaacute a tmavaacute miacutesta kteraacute se

střiacutedajiacute - světlaacute miacutesta nazyacutevaacuteme maxima a tmavaacute minima

Interference světla = sklaacutedaacuteniacute světelnyacutech vln

Předpoklad světlo musiacute byacutet koherentniacute

Podmiacutenka koherence

- paprsky musiacute miacutet stejnou frekvenci

- paprsky musiacute byacutet navzaacutejem rovnoběžneacute

- paprsky musiacute miacutet na sobě nezaacutevislyacute draacutehovyacute (faacutezovyacute) rozdiacutel

Vznik koherentniacuteho zaacuteřeniacute

rozděleniacutem světla

- buď odrazem pomociacute zrcadel

- nebo lomem pomociacute hranolů

Foto Pavla Vaacutelovaacute Praha 151 2016

Interference světla

stejnyacute způsob vlněniacute

(faacuteze je vzaacutejemně posunuta o sudeacute

naacutesobky λ2)

vznik interferenčniacuteho maxima

(konstruktivniacute interference)

Interference světla

asynchronniacute vlněniacute

(vzaacutejemně posunutaacute faacuteze

o licheacute naacutesobky λ2)

vznik interferenčniacuteho

minima

(destruktivniacute interference)

rarr zaacuteřeniacute zanikaacute

rarr zeslabeniacute zaacuteřeniacute

Interference dvou vrstev elektromagnetickeacuteho zaacuteřeniacute u Slunce

Čočky ndash zaacutekladniacute součaacutesti

mikroskopu

= průhlednaacute (nejčastěji skleněnaacute) tělesa omezenaacute

vypuklyacutemi nebo vydutyacutemi kulovityacutemi plochami lišiacuteciacute se od sveacuteho okoliacute odlišnyacutem indexem lomu

Zaacutekladniacute typy čoček

spojky (vypukleacute neboli konvexniacute)

rozptylky (vyduteacute konkaacutevniacute)

Pazourek 1975

Optickaacute osa ( o ) prochaacuteziacute středem čočky

Ohnisko ( F ) - bod do ktereacuteho se soustřeďujiacute paprsky probiacutehajiacuteciacute rovnoběžně s optickou osou

- 2 ohniska - předmětoveacute ohnisko ( F )

obrazoveacute ohnisko ( Facute )

- ohniskovaacute vzdaacutelenost ( f )

vzdaacutelenost ohniska od hlavniacute roviny proloženeacute středem čočky

- dvojnaacutesobnaacute ohniskovaacute vzdaacutelenost ( P Pacute )

Obrazovyacute prostor - prostor v němž vznikaacute obraz

Důležiteacute charakteristiky čočky

f

o

hlavniacute rovina

Pazourek 1975

V přiacutepadě velmi tenkeacute čočky

bull Obraz za optickou soustavou

rarr obraz s k u t e č n yacute

Skutečnyacute obraz je možneacute zachytit na stiacuteniacutetko

nebo na fotografickou desku neskutečnyacute nikoliv

bull Obraz před soustavou

rarr obraz n e s k u t e č n yacute (zdaacutenlivyacute virtuaacutelniacute)

Obraz skutečnyacute a neskutečnyacute

A ndash předmět Aacute- obraz předmětu

Upraveno podle Pazourek 1975

Francouz Augustin Jean Fresnel (1788-1827) [frenel]

Fresnelova čočka [frenelova]

- plochyacute tvar (zachovaacuteny pouze čaacutesti ktereacute měniacute směr chodu světelnyacutech paprsků)

- vyacuterazně nižšiacute hmotnost při zachovaacuteniacute podobnyacutech parametrů

Využitiacute infračidla pohybu semafory světlomety (majaacuteky) a reflektory (světla aut

divadelniacutech a filmovyacutech osvětlovaciacutech zařiacutezeniacute) zpětneacute projektory slunečniacute kolektory

na zaacutekladě tohoto principu takeacute vyacuteroba 3D displejů k mobilniacutem telefonům a televiziacutem

httpwwwmffcuniczverejnostzpravicky03_lupahtm

čočka na majaacuteku

Čočky v budoucnosti

Pokus o vyacuterobu tzv dokonaleacute čočky

Prototyp - upraveneacute tzv Maxwellovo rybiacute oko

- paprsky světla se v něm pohybujiacute po kružniciacutech a

na rozdiacutel od běžnyacutech čoček se při zobrazeniacute využijiacute

všechny paprsky

- superčočky využiacutevajiacute geometrie k tomu aby se světlo

soustředilo do oblasti menšiacute než je jeho vlnovaacute deacutelka

(zatiacutem se neviacute jak do čočky vyhovujiacuteciacutem způsobem

doveacutest světlo)

Využitiacute v budoucnu

mimo jineacute v pozorovaacuteniacute živyacutech buněk při velkeacutem zvětšeniacute

pomociacute obyčejneacuteho světla bez jejich narušeniacute

Viacutece viz Plaacutešek J Mikroskopy se superčočkami httpwwwvesmircz | Vesmiacuter 91 531 zaacuteřiacute 2012

Hranoly

- doplňky optickyacutech systeacutemů

- většinou tvar rovnostranneacuteho trojuacutehelniacuteka

- využiacutevajiacute uacuteplneacuteho odrazu

Funkce

- změna chodu paprsků pod různyacutemi uacutehly

- rozdvojeniacute paprsků

Pazourek 1975

Různeacute typy odraznyacutech hranolů

Hranoly

Různeacute typy hranolů

httplaserykvalitneczimagestext_25_zakladyoptiky1odrazne_hranolyjpg

Viz dichroickeacute zrcadlo u fluorescenčniacuteho mikroskopu

Chod paprsků v binokulaacuterniacutem tubusu

Pazourek 1975

Nikol = hranol z islandskeacuteho vaacutepence

rarr polarizace světla

Dvojlomnyacute vaacutepencovyacute

krystal

ř ndash paprsek řaacutednyacute (zanikaacute na začerněneacute ploše)

mř ndash paprsek mimořaacutednyacute (lineaacuterně polarizovanyacute

využit k osvětleniacute)

začerněnaacute plocha

Nikol

Pazourek 1975

vzduchovaacute štěrbina

- rychlost světla je

v různyacutech směrech různaacute

- uacutehel paprsku řaacutedneacuteho a

mimořaacutedneacuteho je odlišnyacute

(u Vikingů - slunečniacute kaacutemen

soacutelarsteinn)

Chod paprsků ve světlovodneacutem vlaacuteknu

Princip uacuteplnyacute odraz paprsku

- uvnitř skleněneacuteho vlaacutekna je opticky hustšiacute prostřediacute

- nutnost dostatečně silneacuteho světelneacuteho zdroje

Světlovodnaacute vlaacutekna

Pazourek 1975

Širokeacute využitiacute v praxi optickeacute kabely ndash přenos signaacutelů ve sdělovaciacute technice

světlovody umožňujiacuteciacute veacutest denniacute světlo vedeniacute světla u stereolup endoskopů hellip

Page 5: Světelná a elektronová mikroskopie...(AMF – Atomic Force Miroscope) - skenování povrchu materiálu pomocí hrotu zavěšeném na pružném výkyvném raménku, který je přitahován

Doporučenaacute literatura

Hejtmaacutenek M (2001) Uacutevod do světelneacute mikroskopie Skripta UP Olomouc

Knoz J Opravilovaacute V (1992) Zaacuteklady mikroskopickeacute techniky Skripta MU Brno

Přednaacutešky ndash PřF UP Olomouc Katedra experimentaacutelniacute fyziky

Kubiacutenek Roman Moderniacute světelnaacute a elektronovaacute mikroskopie

httpfyzikaupolczcssystemfilesdownloadvujtekprezentacekubinekSMaEMpdf

Kubiacutenek R Vůjtek M Mašlaacuteň M Mikroskopie skenujiacuteciacute sondou httpfyzikaupolczcssystemfilesdownloadvujtekprezentacekubinekSPMpdf

Kuacuteš P a kol (2008) Modernaacute mikroskopia a digitaacutelne zpracovanie obrazu Skripta

Bratislava ISBN 978-80-89186-37-2

httpwwwmikroskopiaskmaterialsskripta_mikroskopiapdf

Matis D a kol (2001) Mikroskopickaacute technika Faunima Bratislava

Paleček J (1996) Biologie buňky I Zaacuteklady mikroskopickeacute cytologie Skripta UK

Praha

Ruzin SE (1999) Plant microtechnique and microscopy Oxford University

bull wwwolympusmicrocom

bull httpwwwparucasczlembookPodkap30html (Elektronovaacute mikroskopie)

bull httpbiologieupolczmikroskopie

Nejnovějšiacute literatura (k dispozici v miacutestniacute knihovně)

Murphy DB Davidson MW (2013)

Fundamentals of Light Microscopy and Electronic Imaging

Willey-Blackwell Published 2013 by John Wiley amp Sons Inc

Hoboken New Jersey

vč rozsaacutehleacuteho slovniacuteku pojmů z mikroskopie na konci knihy

Randy O Wayne (2014) Light and Video Microscopy

Second Edition Hardcover

Doplňujiacuteciacute literatura

Habrovaacute V (1990) Mikroskopickaacute technika SPN Praha

Jurčaacutek J (1998) Zaacutekladniacute praktikum z botanickeacute mikrotechniky a rostlinneacute anatomie Skripta UP Olomouc

Němec B a kol (1962) Botanickaacute mikrotechnika Nakladatelstviacute ČSAV Praha

Lepil O (2013) Fyzika pro gymnaacutezia Optika Prometheus Praha

4 přepracovaneacute vydaacuteniacute

Pazourek J (1975) Pracujeme s mikroskopem SNTL Praha

Pazourkovaacute Z (1986) Botanickaacute mikrotechnika Praha 1986 skripta UK Praha

Pazourkovaacute Z Pazourek J (1960) Rychleacute metody botanickeacute mikrotechniky ČAZV SZN Praha

Špaček J (2008) Svět pod mikroskopem Grada Praha

Kremer Bruno P (2013) Mikroskop zcela jednoduše Aventium nakladatelstviacute sro

Člaacutenky z časopisu Vesmiacuter

Internet Učebniacute texty Katedry Optiky UP Olomouc Světelnaacute mikroskopie (doc Roman Kubiacutenek)

httpapfyzupolczucebniceoptmikrohtml

httpapfyzupolczucebnicedownoptmikropdf

Leacutekařskaacute fakulta UP Olomouc httpbiologieupolczmikroskopie

Nebesaacuteřovaacute J Elektronovaacute mikroskopie pro biology

httpwwwparucasczlembookindexhtml

skripta httpwwwmikroskopiaskpage8html (slovensky)

httpwwwhistory-of-the-microscopeorg

Kurzy mikroskopie na httpmicroscopydukeedu httpmicroscopydukeeduconceptshtml

Internetoveacute adresy o mikroskopech různyacutech firem Olympus httpwwwolympuscz httpwwwolympusmicrocom

Olympus_2011 - httpwwwmujolympusczdata20110209095419bodyhtm

Kniha o světelneacute mikroskopii na www

Davidson and Abramowitz Optical Microscopy Review Article

httpolympusmagnetfsueduprimeropticalmicroscopyhtml

Přiacuteručka firmy Zeiss httpwwwusaskcabiologyscopesMicroscopyBasicspdf

Nikon httpwwwmicroscopyucom

Přiacuteručka firmy Nikon httpwwwareczdatafilezakladni_metody_svetelne_mikroskopiepdf

Odkazy na literaturu

httplommicroscopyweeblycombasics-of-light-microscopy-and-opticshtml

Virtuaacutelniacute obraacutezky

httpwwwolympusmicrocomprimerjava

httpzeiss-campusmagnetfsuedututorialsindexhtml

Historie mikroskopovaacuteniacute

Optickeacute principy

světelneacute mikroskopie

Přednaacuteška 1

Pavla Vaacutelovaacute 2018

naacutezev z řec mikroacutes = malyacute skopoacutes = pozorovatel

vynaacutelez mikroskopu ndash konec 16 stol (technickyacute rozmach lidstva)

1625 - naacutezev mikroskop odvozenyacute od naacutezvu teleskop

(Giovanni Faber z Bambergu ndash papežskyacute leacutekař )

H i s t o r i e o b j e v u m i k r o s k o p u

Dřiacutevějšiacute pozorovaacuteniacute

Řecko - Aristofanes Atheacutenskyacute (424-380 př n l) - ve hře bdquoOblakaldquo

popis zraněniacute paprskem slunce prochaacutezejiacuteciacuteho skleněnou

kouliacute naplněnou vodou

Řiacutemskaacute doba

- filosof Seneca (asi 4 přnl-65 nl) - zvětšeniacute piacutesmen

pomociacute skleněneacute koule naplněneacute vodou

- Klaudius Ptolemaios (asi 100-170 nl) ndash diacutelo bdquoOptikaldquo -

poznatky o odraze paprsků a lomu paprsků skrz sklo

11 stol - Ibn al Haitham (bdquoAlhazenldquo) (965-1039) - arabskyacute fyzik a

matematik diacutelo bdquoPojednaacuteniacute o opticeldquo ndash zkoumaacute vlastnosti

světla (lom a odraz) čočky a zrcadla

viz Anna Černaacute Mikroskop pod drobnohledem Živa 52017 str CXXVIII

14 stol ndash zvlaacutednutiacute techniky broušeniacute čoček do bryacuteliacute (italštiacute mniši)

konec 16 stol ndash vynaacutelez mikroskopu

kolem roku 1590 - Hans a Zacharias Janssenovi (Holandsko otec a syn)

H i s t o r i e o b j e v u m i k r o s k o p u

- konstrukce prvniacuteho použitelneacuteho mikroskopu (ze dvou čoček)

- čočky vypoukleacute i vyduteacute

- zvětšeniacute mikroskopu 60x

viz kniha a film bdquoJmeacuteno růželdquo od Umberta Eca

Systeacutem dvou čoček

16 stol

deacutelka 12 m

(tzv kompaudniacute mikroskop)

httpwwwmicroscopyfsueduprimermuseum

httpmicromagnetfsueduprimermuseumjanssenhtml

httpwwwapsorgpublicationsapsnews200403historycfm

Janssenův mikroskop

17 stol Galileo Galilei (1564-1642)

ndash italskyacute astronom a matematik

1604-1609 ndash konstrukce dalekohledu

- použitiacute složeneacuteho mikroskopu

nazvaneacuteho occhiolino

k vědeckyacutem uacutečelům (pozorovaacuteniacute

oka mouchy)

Nejasnosti kolem vynaacutelezu mikroskopu

ndash z dobovyacutech zpraacutev neniacute jasneacute zda se jednaacute o mikroskop

jehož okulaacuterem je spojka nebo o dalekohled s rozptylkou

(kteryacute použiacuteval Galileo)

Anthony van Leeuwenhoek (1632-1723)

ndash obchodniacutek s laacutetkami v holandskeacutem Delftu

ndash sestrojil jednočočkovyacute mikroskop silnyacute zvětšovaciacute

efekt čočky

(až 270x)

ndash nejprve zkoumaacuteniacute struktury laacutetek

později zkoumal listy květiny drobneacute organismy lidskou krev kůži vlasy hellip

- prvniacute viděl a popsal krevniacute buňky chovaacuteniacute lidskyacutech spermiiacute

- vyacuteroba asi 250 mikroskopů

17 stol

Jednočočkovyacute Leeuwenhoekův

mikroskop

httpbiologimediacentrecomwp-contentuploads201101image2png

Anglickyacute původ Italskyacute původ

17 stol

Prvniacute světelneacute mikroskopy

Jednočočkovyacute

mikroskop Dvoučočkoveacute

mikroskopy

Robert Hook (1635-1703) [huacutek]

ndash anglickyacute fyzik chemik geolog astronom hellip

ndash použiacuteval zakoupenyacute složenyacute mikroskop s viacutece

čočkami (tzv kompaudniacute) vylepšenyacute o kvalitniacute osvětleniacute

17 stol

Hookův mikroskop

- vylepšeniacute osvětleniacute použitiacute irisoveacute clony

irisovaacute clona

- zkoumaacuteniacute slabyacutech plaacutetků korku z korkovniacuteku

živeacute laacutetky jsou tvořeny buňkami

- 1665 - kniha bdquoMicrographialdquo

mikroskopickeacute pozorovaacuteniacute rostlinnyacutech

pletiv živočišnyacutech objektů a struktur

mineraacutelů

Rok vydaacuteniacute 1665 Micrographia or some Physiological Descriptions of Minute Bodies

made by Magnifying Glasses with Observations and Inquiries thereupon

London 1665

17 stol Leeuwenhoek Hook

Angličan Henry Power (1626ndash1668) ndash jako

prvniacute (1663) publikoval pozorovaacuteniacute mikroskopem

Marcello Malphighi (1628ndash1694)

italskyacute leacutekař

zakladatel mikroskopickeacute anatomie

- objev krevniacutech kapilaacuter savců (1661)

- malphigickeacute trubice hmyzu

18 stol

ndash mikroskopy přežily jako hračka pro zaacutebavu anglickyacutech gentlemanů zajiacutemajiacuteciacutech se o tajemstviacute přiacuterody

19 stol

zač 19 stol ndash Dollond Lister Amici - vynaacutelez

achromatickeacuteho objektivu

ndash do teacute doby použiacutevaacuteniacute jednočočkoveacuteho mikroskopu (dvoučočkovyacute

mikroskop podaacuteval značně zkreslenyacute obraz)

Vyacuteznačniacute vědci 19 stol použiacutevajiacuteciacute k svyacutem pozorovaacuteniacutem mikroskop

Robert Brown (1773-1858) - objev jaacutedra (1831)

Luis Pasteur (1822-1895) (francouzskyacute mikrobiolog)

- objev kvasinek

Robert Koch (1843-1910) (německyacute leacutekař a mikrobiolog)

- objev původců tuberkuloacutezy a cholery

Jan Evangelista Purkyně (1787-1869) (českyacute fyziolog)

- 1825 popsal jaacutedro u živočišneacute buňky (lupa)

od r 1832 použiacutevaacute kvalitniacute mikroskop

Microscope

stand VII

19 stol ndash dalšiacute vyacutevoj mikroskopů

Carl Zeiss ndash průmyslovaacute vyacuteroba mikroskopů (firma Zeiss)

Ernst Karl Abbe ndash teoretickaacute studia optickyacutech principů

Otto Schott ndash vyacutezkum optickeacuteho skla

August Koumlhler ndash kvalitniacute osvětleniacute

Otto Schott (1851-1935)

Ernst Abbe (1840-1905)

Carl Zeiss (1816-1888)

August Koumlhler (1866-1948)

Mikroskopy 19 stoletiacute

19 stol

20 stol

Konfokaacutelniacute mikroskop

A1R (Nikon)

BX60 (Olympus)

Laserovyacute fluorescenčniacute mikroskop bdquoLight Sheetldquo Centrum regionu Hanaacute pro biotechnologickyacute a zemědělskyacute vyacutezkum Odděleniacute buněčneacute biologie

21 stol

21 stol

Digitaacutelniacute holografickyacute mikroskop firmy Lynceacutee Tec

Důležitaacute data při rozvoji moderniacute světelneacute mikroskopie

1847 - Zahaacutejeniacute vyacuteroby mikroskopů firmou Carl Zeiss v Jeně

1903 - Ultramikroskop (Richard Zsigmondy NC 1925)

1911 - Fluorescenčniacute mikroskop (Carl Reichert)

1935 - Faacutezovyacute kontrast (Fritz Zernike NC 1953)

1955 - Diferenciaacutelniacute interferenčniacute kontrast (DIC ndash Nomarski)

1968 - Rastrovaciacute tandemovyacute konfokaacutelniacute mikroskop (TSCM)

1978 - Laserovyacute konfokaacutelniacute rastrovaciacute mikroskop

1994 - Princip STED mikroskopie (S W Hell NC 2014)

(Stimulated Emission Depletion ndash redukce fluorescence stimulovanou emisiacute)

po roce 2000 - rozvoj tzv superrozlišovaciacute mikroskopie

2006 - Super-resolučniacute fluorescenčniacute mikroskop (Eric Betzig

Stefan W Hell a William E Moerner NC za chemii 2014)

NC = Nobelova cena

30 leacuteta 20 stoletiacute

ndash hranice vyacutevoje optickeacuteho (paprskoveacuteho) mikroskopu

(hranice rozlišeniacute světelneacuteho mikroskopu je diacuteky velikosti deacutelky světla 02 microm)

- dalšiacute zvětšovaacuteniacute pozorovanyacutech objektů na jineacutem principu

- miacutesto světelneacuteho paprsku elektronovyacute paprsek

(= tok rychlyacutech elektronů)

- miacutesto skleněneacute čočky magnetickaacute čočka

1931 - Ernst Ruska Max Knoll

prvniacute elektronovyacute mikroskop

tzv prozařovaciacute transmisniacute EM

(TEM ndash Transmission Electron Microscope)

- originaacutelniacute zvětšeniacute 1 000 - 250 000x

Ernst Ruska (1906-1988)

1942 - rastrovaciacute EM

(SEM ndash Scanning Electron Microscope) - postupneacute bombardovaacuteniacute vzorku elektrony

- zvětšeniacute až 30 000x

EM UacuteMG AV ČR Praha-Krč

FEI ndash TECHNAIG2TEM + kryozařiacutezeniacute

200 kV (λ el = 00025 nm)

RS 01 nm

prvkovaacute analyacuteza vzorků

zařiacutezeniacute pro

prvkovou analyacutezu

vzorků

Foto Pavla Vaacutelovaacute 2010

Brněnštiacute vědci z Uacutestavu přiacutestrojoveacute techniky AV ČR (UacutePT) a Mendelovy

univerzity představili novou metodu pozorovaacuteniacute rostlinnyacutech vzorků v jejich

přirozeneacutem stavu (za využitiacute kryoprotektiv)

Viacutece na httpe-svete15cztechnikacesti-vedci-posunuli-hranice-elektronove-mikroskopie-1174818

Enviromentaacutelniacute rastrovaciacute elektronovyacute mikroskop Aquasem II

TEM TITAN FEI Company Mgr Klaacutera Čeacutepe PhD

Vysokorozlišovaciacute transmisniacute elektronovyacute mikroskop

schopnyacute nahleacutednout do struktury materiaacutelů až na uacuterovni atomů

a současně přesně zmapovat jejich chemickeacute složeniacute

Regionaacutelniacute centrum pokročilyacutech

materiaacutelů (RCPTM)

Odd uhliacutekoveacute nanostruktury

PřF UP OL

Vysokorozlišovaciacute transmisniacute

elektronovyacute mikroskop TITAN (FEI)

Foto Pavla Vaacutelovaacute 2015

Transmisniacute elektronovyacute

mikroskop Jeol

Regionaacutelniacute centrum pokročilyacutech materiaacutelů (RCPTM)

Odd uhliacutekoveacute nanostruktury PřF UP OL

Neoptickeacute mikroskopy

1981

Řaacutedkovaciacute tunelovyacute mikroskop (STM ndash Scanning Tunnelling Microscope)

- mapovaacuteniacute povrchu pomociacute pohybu vodiveacuteho hrotu nad vodivyacutem povrchem sledovaneacuteho materiaacutelu

1986

Mikroskop atomaacuterniacutech sil (AMF ndash Atomic Force Miroscope)

- skenovaacuteniacute povrchu materiaacutelu pomociacute hrotu zavěšeneacutem na pružneacutem vyacutekyvneacutem rameacutenku kteryacute je přitahovaacuten elektrostatickyacutemi a Van der Walsovyacutemi silami

Rozlišeniacute v řaacutedech pikometrů (10-12 m) ndash rozeznaacuteniacute struktur

jednotlivyacutech atomů

O p t i c k eacute p r i n c i p y

světelneacute mikroskopie

Reichl J Všetička M Encyklopedie fyziky [online] copy2006-2014

[vid 2014] Dostupneacute z httpfyzikajreichlcommainarticleview431-optika Lepil O (2013) Fyzika pro gymnaacutezia Optika Prometheus Praha 4 přepracovaneacute vydaacuteniacute

Murphy DB Davidson MW (2013) Fundamentals of Light

Microscopy and Electronic Imaging Willey-Blackwell Published

2013 by John Wiley amp Sons Inc Hoboken New Jersey

S v ě t l o

= čaacutest rozsaacutehleacute oblasti elektromagnetickeacuteho zaacuteřeniacute

kterou vniacutemaacuteme zrakem

Rozhlasoveacute a raacutedioveacute vlny 250 km - 1 mm

Infračerveneacute zaacuteřeniacute 05 mm - 08 μm

Světlo (viditelneacute zaacuteřeniacute) 08 μm - 04 μm

Ultrafialoveacute zaacuteřeniacute 04 microm - 01 microm

Roumlntgenovo zaacuteřeniacute (X-paprsky) 15 nm - 0005 nm

γ-zaacuteřeniacute pod 00001 nm

Přibližneacute hodnoty ndash individuaacutelniacute vlastnosti zraku různyacutech lidiacute

S v ě t l o

= čaacutest rozsaacutehleacute oblasti elektromagnetickeacuteho zaacuteřeniacute

kterou vniacutemaacuteme zrakem

rarr se zkracujiacuteciacute se vlnovou deacutelkou se zvyšuje frekvence (energie)

Viditelneacute

Vlnoveacute deacutelky světla a relativniacute citlivost oka

Murphy DB Davidson MW (2013) Fundamentals of Light Microscopy and Electronic

Imaging Willey-Blackwell Published 2013 by John Wiley amp Sons Inc Hoboken New Jersey

= zrakovyacute pigment citlivyacute na

světlo nachaacutezejiacuteciacute se v tyčinkaacutech Jodopsin = zrakovyacute pigment citlivyacute na

barvu nachaacutezejiacuteciacute se v čiacutepciacutech

S v ě t l o

Duaacutelniacute charakter světla ndash vlněniacute i proud čaacutestic (fotonů)

Vlnovyacute model světla

vlna elektrickaacute a magnetickaacute (elektromagnetickaacute vlna je tvořena oscilujiacuteciacutem elektrickyacutem a

magnetickyacutem polem na sebe kolmyacutech a nesouciacutech vpřed energii)

Pro uacutečinky světla v mikroskopu je důležitaacute vlna elektrickaacute

= přiacutečneacute vlněniacute

postupneacute kmitaacuteniacute

jednotlivyacutech vedle sebe

ležiacuteciacutech bodů

Scheacutema světla jako elektromagnetickeacute vlny

Obr httpwwwprosoundwebcomarticleprintinvaders_from_

outer_space_electromagnetic_radiation_interference

λ - vlnovaacute deacutelka

(v oblasti svět zaacuteřeniacute

v rozmeziacute od 380 do 780 nm)

určuje barvu světla

a - amplituda

nejvyššiacute hodnota

určuje intenzitu světla

Z hlediska vlnoveacute deacutelky rozlišujeme

polychromatickeacute x monochromatickeacute světlo (selekce pomociacute barevnyacutech filtrů rarr jednotnaacute vlnovaacute deacutelka světlo zeleneacute červeneacute hellip)

Elektrickaacute vlna - sinusoida

Charakterizovaacutena dvěma veličinami

Pazourek 1975

Vlastnosti světla

Rovnoměrneacute šiacuteřeniacute světla ze zaacuteřiacuteciacuteho bodu na všechny strany rarr vlnovaacute plocha tvaru koule

Paprsek ndash směr kteryacutem se vlněniacute šiacuteřiacute a kteryacute je kolmyacute

na vlnoplochu

Pazourek 1975

- paprsek nepolarizovanyacute (A C) ndash kmitaacute v každeacutem

miacutestě a v průběhu času ve všech možnyacutech směrech

kolmyacutech na směr šiacuteřeniacute paprsku

- paprsek polarizovanyacute (B D1 D2) - kmitaacute v jedneacute

rovině přičemž rovina kmitů (vlněniacute) jednoho z nich je

kolmaacute k rovině kmitů druheacuteho

Pazourek 1975

Polarizovaneacute světlo viz

httpswwwyoutubecomwatchv=gP751qpm4n4

Murphy DB Davidson MW (2013) Fundamentals of Light Microscopy and

Electronic Imaging Jonh Wkiley amp Sons Inc Hoboken New Jersey

Osm různyacutech vlnovyacutech forem světla (znaacutezorňujiacuteciacutech různou kvalitu světla)

Odraz a lom světelnyacutech paprsků

v prostřediacutech různeacute hustoty

Důležitaacute charakteristika prostřediacute

index lomu ( n ) (= optickaacute hustota prostřediacute)

c = rychlost světla ve vakuu (stejnaacute pro všechny λ )

v = rychlost světla určiteacute vlnoveacute deacutelky ve zkoumaneacute laacutetce

c

n =

v

zde absolutniacute index lomu

(bezrozměrnaacute fyzikaacutelniacute veličina jeho jednotka je 1)

Rychlost světla (c) určiteacute vlnoveacute

deacutelky v různyacutech prostřediacutech

c ve vakuu

= 300 000 kms

Index lomu (n) některyacutech laacutetek

vzduch (vakuum) helliphellip 100 (vzduch 10002718)

voda helliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 133

plexisklo helliphelliphelliphelliphelliphellip 140 ndash 152

křemenneacute sklo helliphellip hellip 145 (čočka z křemene z Ninive ndash 7 stol přnl)

běžneacute sklo helliphelliphelliphelliphellip 151

cedrovyacute olej helliphelliphelliphelliphellip 151

imerzniacute olej Olympus hellip 1516 pro fluorescenci 1404

kanadskyacute balzaacutem helliphellip 150

krystal NaCl helliphelliphelliphellip 154

korunoveacute sklo helliphelliphelliphellip 145 ndash 156 (sodno-draselneacute bezolovnateacute)

flintoveacute sklo helliphelliphelliphellip 162 ndash 180 (olovnateacute)

diamant helliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 242

Index lomu je vždy většiacute než 100

očniacute čočka hellip 1406

sklivec helliphelliphellip 1336

Odraz světla rovnyacutem zrcadlem (reflexe)

Zaacutekony

1 Paprsek dopadajiacuteciacute kolmice dopadu a paprsek odraženyacute

ležiacute v jedneacute rovině

2 Uacutehel odrazu se rovnaacute uacutehlu dopadu

Odraz a lom paprsku

k

Důležiteacute pro mikroskopii (astronomii)

- neniacute zaacutevislost na vlnoveacute deacutelce světla (λ)

- na rozdiacutel od lomu paprsků se světelneacute

paprsky se odraacutežejiacute stejně

Pazourek 1975

Zaacutekony

1 Paprsek dopadajiacuteciacute kolmice lomu a paprsek lomenyacute ležiacute v teacuteže rovině

Lom světla (refrakce)

2 Při přechodu z prostřediacute opticky řidšiacuteho do prostřediacute opticky hustšiacuteho se paprsek laacuteme ke kolmici (A)

a z prostřediacute opticky hustšiacuteho

do prostřediacute opticky řidšiacuteho

se laacuteme od kolmice (B)

(C a D) ndash uacuteplnyacute odraz při tzv

mezniacutem uacutehlu dopadu paprsku

v přiacutepadě lomu od kolmice (B)

(viz Nikol odrazneacute hranoly světlovodneacute vlaacutekno nebo fluorescenčniacute metoda TIRFM ndash totaacutelniacute odraz exitačniacuteho zaacuteřeniacute)

Pazourek 1975

Svatyacute Kryštof od

švyacutecarskeacuteho maliacuteře

Konrada Witze (kolem 1400ndash1446)

Witz byl jedniacutem z prvniacutech

maliacuteřů kteryacute namaloval

přesnyacute způsob odrazu

světla na vodě

Disperze (rozklad) světla

= důsledek zaacutevislosti rychlosti světla v laacutetkaacutech na frekvenci světla

(λ = c f)

světlo různyacutech barev (λ)

se laacuteme různě

(červeneacute se lomiacute meacuteně než modreacute)

Přiacuteklad disperze (rozkladu) světla

Primaacuterniacute a sekundaacuterniacute duha Severniacute Čechy Foto Pavla Vaacutelovaacute 2010

D u h a

Jeden z mnoha

optickyacutech

jevů (fotometeorů)

v atmosfeacuteře

Rok 312 nl - před bitvou byzantskeacuteho ciacutesaře Konstantina I (272-337) s

konkurenčniacutem ciacutesařem Maxentiem u bran Řiacutema (tzv bitva u Milvijskeacuteho mostu) se

na obloze objevily tři zaacuteřiacuteciacute křiacuteže (halovyacute sloup parheacutelia a parhelickyacute oblouk)

Konstantin bitvu proti přesile vyhraacutel sjednotil řiacuteši a povolil v niacute vyznaacutevat křesťanstviacute

Maleacute halo (22deg) (viz 1) vedlejšiacute slunce (2) a horniacute a dolniacute halovyacute sloup (3)

vznikajiacuteciacute odrazem a lomem světelnyacutech paprsků na krystalciacutech ledu

Lom světla a dějiny

httptmagazineblogsnytimescom20121126halo-effect_r=0

1

3

2 2

3

Ohyb (difrakce) a interference

světla

Foto Pavla Vaacutelovaacute Bukovany 2015 Rozklad světla na CD - světlo žaacuterovky

Rozklad biacuteleacuteho světla na mřiacutežce

Pevnost poznaacuteniacute Olomouc 2015

Foto Pavla Vaacutelovaacute Olomouc 2015

Ohyb (difrakce) a interference

světla

Ohyb (difrakce) a interference

Difrakčniacute obrazec obsahuje světlaacute a tmavaacute miacutesta kteraacute se

střiacutedajiacute - světlaacute miacutesta nazyacutevaacuteme maxima a tmavaacute minima

Interference světla = sklaacutedaacuteniacute světelnyacutech vln

Předpoklad světlo musiacute byacutet koherentniacute

Podmiacutenka koherence

- paprsky musiacute miacutet stejnou frekvenci

- paprsky musiacute byacutet navzaacutejem rovnoběžneacute

- paprsky musiacute miacutet na sobě nezaacutevislyacute draacutehovyacute (faacutezovyacute) rozdiacutel

Vznik koherentniacuteho zaacuteřeniacute

rozděleniacutem světla

- buď odrazem pomociacute zrcadel

- nebo lomem pomociacute hranolů

Foto Pavla Vaacutelovaacute Praha 151 2016

Interference světla

stejnyacute způsob vlněniacute

(faacuteze je vzaacutejemně posunuta o sudeacute

naacutesobky λ2)

vznik interferenčniacuteho maxima

(konstruktivniacute interference)

Interference světla

asynchronniacute vlněniacute

(vzaacutejemně posunutaacute faacuteze

o licheacute naacutesobky λ2)

vznik interferenčniacuteho

minima

(destruktivniacute interference)

rarr zaacuteřeniacute zanikaacute

rarr zeslabeniacute zaacuteřeniacute

Interference dvou vrstev elektromagnetickeacuteho zaacuteřeniacute u Slunce

Čočky ndash zaacutekladniacute součaacutesti

mikroskopu

= průhlednaacute (nejčastěji skleněnaacute) tělesa omezenaacute

vypuklyacutemi nebo vydutyacutemi kulovityacutemi plochami lišiacuteciacute se od sveacuteho okoliacute odlišnyacutem indexem lomu

Zaacutekladniacute typy čoček

spojky (vypukleacute neboli konvexniacute)

rozptylky (vyduteacute konkaacutevniacute)

Pazourek 1975

Optickaacute osa ( o ) prochaacuteziacute středem čočky

Ohnisko ( F ) - bod do ktereacuteho se soustřeďujiacute paprsky probiacutehajiacuteciacute rovnoběžně s optickou osou

- 2 ohniska - předmětoveacute ohnisko ( F )

obrazoveacute ohnisko ( Facute )

- ohniskovaacute vzdaacutelenost ( f )

vzdaacutelenost ohniska od hlavniacute roviny proloženeacute středem čočky

- dvojnaacutesobnaacute ohniskovaacute vzdaacutelenost ( P Pacute )

Obrazovyacute prostor - prostor v němž vznikaacute obraz

Důležiteacute charakteristiky čočky

f

o

hlavniacute rovina

Pazourek 1975

V přiacutepadě velmi tenkeacute čočky

bull Obraz za optickou soustavou

rarr obraz s k u t e č n yacute

Skutečnyacute obraz je možneacute zachytit na stiacuteniacutetko

nebo na fotografickou desku neskutečnyacute nikoliv

bull Obraz před soustavou

rarr obraz n e s k u t e č n yacute (zdaacutenlivyacute virtuaacutelniacute)

Obraz skutečnyacute a neskutečnyacute

A ndash předmět Aacute- obraz předmětu

Upraveno podle Pazourek 1975

Francouz Augustin Jean Fresnel (1788-1827) [frenel]

Fresnelova čočka [frenelova]

- plochyacute tvar (zachovaacuteny pouze čaacutesti ktereacute měniacute směr chodu světelnyacutech paprsků)

- vyacuterazně nižšiacute hmotnost při zachovaacuteniacute podobnyacutech parametrů

Využitiacute infračidla pohybu semafory světlomety (majaacuteky) a reflektory (světla aut

divadelniacutech a filmovyacutech osvětlovaciacutech zařiacutezeniacute) zpětneacute projektory slunečniacute kolektory

na zaacutekladě tohoto principu takeacute vyacuteroba 3D displejů k mobilniacutem telefonům a televiziacutem

httpwwwmffcuniczverejnostzpravicky03_lupahtm

čočka na majaacuteku

Čočky v budoucnosti

Pokus o vyacuterobu tzv dokonaleacute čočky

Prototyp - upraveneacute tzv Maxwellovo rybiacute oko

- paprsky světla se v něm pohybujiacute po kružniciacutech a

na rozdiacutel od běžnyacutech čoček se při zobrazeniacute využijiacute

všechny paprsky

- superčočky využiacutevajiacute geometrie k tomu aby se světlo

soustředilo do oblasti menšiacute než je jeho vlnovaacute deacutelka

(zatiacutem se neviacute jak do čočky vyhovujiacuteciacutem způsobem

doveacutest světlo)

Využitiacute v budoucnu

mimo jineacute v pozorovaacuteniacute živyacutech buněk při velkeacutem zvětšeniacute

pomociacute obyčejneacuteho světla bez jejich narušeniacute

Viacutece viz Plaacutešek J Mikroskopy se superčočkami httpwwwvesmircz | Vesmiacuter 91 531 zaacuteřiacute 2012

Hranoly

- doplňky optickyacutech systeacutemů

- většinou tvar rovnostranneacuteho trojuacutehelniacuteka

- využiacutevajiacute uacuteplneacuteho odrazu

Funkce

- změna chodu paprsků pod různyacutemi uacutehly

- rozdvojeniacute paprsků

Pazourek 1975

Různeacute typy odraznyacutech hranolů

Hranoly

Různeacute typy hranolů

httplaserykvalitneczimagestext_25_zakladyoptiky1odrazne_hranolyjpg

Viz dichroickeacute zrcadlo u fluorescenčniacuteho mikroskopu

Chod paprsků v binokulaacuterniacutem tubusu

Pazourek 1975

Nikol = hranol z islandskeacuteho vaacutepence

rarr polarizace světla

Dvojlomnyacute vaacutepencovyacute

krystal

ř ndash paprsek řaacutednyacute (zanikaacute na začerněneacute ploše)

mř ndash paprsek mimořaacutednyacute (lineaacuterně polarizovanyacute

využit k osvětleniacute)

začerněnaacute plocha

Nikol

Pazourek 1975

vzduchovaacute štěrbina

- rychlost světla je

v různyacutech směrech různaacute

- uacutehel paprsku řaacutedneacuteho a

mimořaacutedneacuteho je odlišnyacute

(u Vikingů - slunečniacute kaacutemen

soacutelarsteinn)

Chod paprsků ve světlovodneacutem vlaacuteknu

Princip uacuteplnyacute odraz paprsku

- uvnitř skleněneacuteho vlaacutekna je opticky hustšiacute prostřediacute

- nutnost dostatečně silneacuteho světelneacuteho zdroje

Světlovodnaacute vlaacutekna

Pazourek 1975

Širokeacute využitiacute v praxi optickeacute kabely ndash přenos signaacutelů ve sdělovaciacute technice

světlovody umožňujiacuteciacute veacutest denniacute světlo vedeniacute světla u stereolup endoskopů hellip

Page 6: Světelná a elektronová mikroskopie...(AMF – Atomic Force Miroscope) - skenování povrchu materiálu pomocí hrotu zavěšeném na pružném výkyvném raménku, který je přitahován

Nejnovějšiacute literatura (k dispozici v miacutestniacute knihovně)

Murphy DB Davidson MW (2013)

Fundamentals of Light Microscopy and Electronic Imaging

Willey-Blackwell Published 2013 by John Wiley amp Sons Inc

Hoboken New Jersey

vč rozsaacutehleacuteho slovniacuteku pojmů z mikroskopie na konci knihy

Randy O Wayne (2014) Light and Video Microscopy

Second Edition Hardcover

Doplňujiacuteciacute literatura

Habrovaacute V (1990) Mikroskopickaacute technika SPN Praha

Jurčaacutek J (1998) Zaacutekladniacute praktikum z botanickeacute mikrotechniky a rostlinneacute anatomie Skripta UP Olomouc

Němec B a kol (1962) Botanickaacute mikrotechnika Nakladatelstviacute ČSAV Praha

Lepil O (2013) Fyzika pro gymnaacutezia Optika Prometheus Praha

4 přepracovaneacute vydaacuteniacute

Pazourek J (1975) Pracujeme s mikroskopem SNTL Praha

Pazourkovaacute Z (1986) Botanickaacute mikrotechnika Praha 1986 skripta UK Praha

Pazourkovaacute Z Pazourek J (1960) Rychleacute metody botanickeacute mikrotechniky ČAZV SZN Praha

Špaček J (2008) Svět pod mikroskopem Grada Praha

Kremer Bruno P (2013) Mikroskop zcela jednoduše Aventium nakladatelstviacute sro

Člaacutenky z časopisu Vesmiacuter

Internet Učebniacute texty Katedry Optiky UP Olomouc Světelnaacute mikroskopie (doc Roman Kubiacutenek)

httpapfyzupolczucebniceoptmikrohtml

httpapfyzupolczucebnicedownoptmikropdf

Leacutekařskaacute fakulta UP Olomouc httpbiologieupolczmikroskopie

Nebesaacuteřovaacute J Elektronovaacute mikroskopie pro biology

httpwwwparucasczlembookindexhtml

skripta httpwwwmikroskopiaskpage8html (slovensky)

httpwwwhistory-of-the-microscopeorg

Kurzy mikroskopie na httpmicroscopydukeedu httpmicroscopydukeeduconceptshtml

Internetoveacute adresy o mikroskopech různyacutech firem Olympus httpwwwolympuscz httpwwwolympusmicrocom

Olympus_2011 - httpwwwmujolympusczdata20110209095419bodyhtm

Kniha o světelneacute mikroskopii na www

Davidson and Abramowitz Optical Microscopy Review Article

httpolympusmagnetfsueduprimeropticalmicroscopyhtml

Přiacuteručka firmy Zeiss httpwwwusaskcabiologyscopesMicroscopyBasicspdf

Nikon httpwwwmicroscopyucom

Přiacuteručka firmy Nikon httpwwwareczdatafilezakladni_metody_svetelne_mikroskopiepdf

Odkazy na literaturu

httplommicroscopyweeblycombasics-of-light-microscopy-and-opticshtml

Virtuaacutelniacute obraacutezky

httpwwwolympusmicrocomprimerjava

httpzeiss-campusmagnetfsuedututorialsindexhtml

Historie mikroskopovaacuteniacute

Optickeacute principy

světelneacute mikroskopie

Přednaacuteška 1

Pavla Vaacutelovaacute 2018

naacutezev z řec mikroacutes = malyacute skopoacutes = pozorovatel

vynaacutelez mikroskopu ndash konec 16 stol (technickyacute rozmach lidstva)

1625 - naacutezev mikroskop odvozenyacute od naacutezvu teleskop

(Giovanni Faber z Bambergu ndash papežskyacute leacutekař )

H i s t o r i e o b j e v u m i k r o s k o p u

Dřiacutevějšiacute pozorovaacuteniacute

Řecko - Aristofanes Atheacutenskyacute (424-380 př n l) - ve hře bdquoOblakaldquo

popis zraněniacute paprskem slunce prochaacutezejiacuteciacuteho skleněnou

kouliacute naplněnou vodou

Řiacutemskaacute doba

- filosof Seneca (asi 4 přnl-65 nl) - zvětšeniacute piacutesmen

pomociacute skleněneacute koule naplněneacute vodou

- Klaudius Ptolemaios (asi 100-170 nl) ndash diacutelo bdquoOptikaldquo -

poznatky o odraze paprsků a lomu paprsků skrz sklo

11 stol - Ibn al Haitham (bdquoAlhazenldquo) (965-1039) - arabskyacute fyzik a

matematik diacutelo bdquoPojednaacuteniacute o opticeldquo ndash zkoumaacute vlastnosti

světla (lom a odraz) čočky a zrcadla

viz Anna Černaacute Mikroskop pod drobnohledem Živa 52017 str CXXVIII

14 stol ndash zvlaacutednutiacute techniky broušeniacute čoček do bryacuteliacute (italštiacute mniši)

konec 16 stol ndash vynaacutelez mikroskopu

kolem roku 1590 - Hans a Zacharias Janssenovi (Holandsko otec a syn)

H i s t o r i e o b j e v u m i k r o s k o p u

- konstrukce prvniacuteho použitelneacuteho mikroskopu (ze dvou čoček)

- čočky vypoukleacute i vyduteacute

- zvětšeniacute mikroskopu 60x

viz kniha a film bdquoJmeacuteno růželdquo od Umberta Eca

Systeacutem dvou čoček

16 stol

deacutelka 12 m

(tzv kompaudniacute mikroskop)

httpwwwmicroscopyfsueduprimermuseum

httpmicromagnetfsueduprimermuseumjanssenhtml

httpwwwapsorgpublicationsapsnews200403historycfm

Janssenův mikroskop

17 stol Galileo Galilei (1564-1642)

ndash italskyacute astronom a matematik

1604-1609 ndash konstrukce dalekohledu

- použitiacute složeneacuteho mikroskopu

nazvaneacuteho occhiolino

k vědeckyacutem uacutečelům (pozorovaacuteniacute

oka mouchy)

Nejasnosti kolem vynaacutelezu mikroskopu

ndash z dobovyacutech zpraacutev neniacute jasneacute zda se jednaacute o mikroskop

jehož okulaacuterem je spojka nebo o dalekohled s rozptylkou

(kteryacute použiacuteval Galileo)

Anthony van Leeuwenhoek (1632-1723)

ndash obchodniacutek s laacutetkami v holandskeacutem Delftu

ndash sestrojil jednočočkovyacute mikroskop silnyacute zvětšovaciacute

efekt čočky

(až 270x)

ndash nejprve zkoumaacuteniacute struktury laacutetek

později zkoumal listy květiny drobneacute organismy lidskou krev kůži vlasy hellip

- prvniacute viděl a popsal krevniacute buňky chovaacuteniacute lidskyacutech spermiiacute

- vyacuteroba asi 250 mikroskopů

17 stol

Jednočočkovyacute Leeuwenhoekův

mikroskop

httpbiologimediacentrecomwp-contentuploads201101image2png

Anglickyacute původ Italskyacute původ

17 stol

Prvniacute světelneacute mikroskopy

Jednočočkovyacute

mikroskop Dvoučočkoveacute

mikroskopy

Robert Hook (1635-1703) [huacutek]

ndash anglickyacute fyzik chemik geolog astronom hellip

ndash použiacuteval zakoupenyacute složenyacute mikroskop s viacutece

čočkami (tzv kompaudniacute) vylepšenyacute o kvalitniacute osvětleniacute

17 stol

Hookův mikroskop

- vylepšeniacute osvětleniacute použitiacute irisoveacute clony

irisovaacute clona

- zkoumaacuteniacute slabyacutech plaacutetků korku z korkovniacuteku

živeacute laacutetky jsou tvořeny buňkami

- 1665 - kniha bdquoMicrographialdquo

mikroskopickeacute pozorovaacuteniacute rostlinnyacutech

pletiv živočišnyacutech objektů a struktur

mineraacutelů

Rok vydaacuteniacute 1665 Micrographia or some Physiological Descriptions of Minute Bodies

made by Magnifying Glasses with Observations and Inquiries thereupon

London 1665

17 stol Leeuwenhoek Hook

Angličan Henry Power (1626ndash1668) ndash jako

prvniacute (1663) publikoval pozorovaacuteniacute mikroskopem

Marcello Malphighi (1628ndash1694)

italskyacute leacutekař

zakladatel mikroskopickeacute anatomie

- objev krevniacutech kapilaacuter savců (1661)

- malphigickeacute trubice hmyzu

18 stol

ndash mikroskopy přežily jako hračka pro zaacutebavu anglickyacutech gentlemanů zajiacutemajiacuteciacutech se o tajemstviacute přiacuterody

19 stol

zač 19 stol ndash Dollond Lister Amici - vynaacutelez

achromatickeacuteho objektivu

ndash do teacute doby použiacutevaacuteniacute jednočočkoveacuteho mikroskopu (dvoučočkovyacute

mikroskop podaacuteval značně zkreslenyacute obraz)

Vyacuteznačniacute vědci 19 stol použiacutevajiacuteciacute k svyacutem pozorovaacuteniacutem mikroskop

Robert Brown (1773-1858) - objev jaacutedra (1831)

Luis Pasteur (1822-1895) (francouzskyacute mikrobiolog)

- objev kvasinek

Robert Koch (1843-1910) (německyacute leacutekař a mikrobiolog)

- objev původců tuberkuloacutezy a cholery

Jan Evangelista Purkyně (1787-1869) (českyacute fyziolog)

- 1825 popsal jaacutedro u živočišneacute buňky (lupa)

od r 1832 použiacutevaacute kvalitniacute mikroskop

Microscope

stand VII

19 stol ndash dalšiacute vyacutevoj mikroskopů

Carl Zeiss ndash průmyslovaacute vyacuteroba mikroskopů (firma Zeiss)

Ernst Karl Abbe ndash teoretickaacute studia optickyacutech principů

Otto Schott ndash vyacutezkum optickeacuteho skla

August Koumlhler ndash kvalitniacute osvětleniacute

Otto Schott (1851-1935)

Ernst Abbe (1840-1905)

Carl Zeiss (1816-1888)

August Koumlhler (1866-1948)

Mikroskopy 19 stoletiacute

19 stol

20 stol

Konfokaacutelniacute mikroskop

A1R (Nikon)

BX60 (Olympus)

Laserovyacute fluorescenčniacute mikroskop bdquoLight Sheetldquo Centrum regionu Hanaacute pro biotechnologickyacute a zemědělskyacute vyacutezkum Odděleniacute buněčneacute biologie

21 stol

21 stol

Digitaacutelniacute holografickyacute mikroskop firmy Lynceacutee Tec

Důležitaacute data při rozvoji moderniacute světelneacute mikroskopie

1847 - Zahaacutejeniacute vyacuteroby mikroskopů firmou Carl Zeiss v Jeně

1903 - Ultramikroskop (Richard Zsigmondy NC 1925)

1911 - Fluorescenčniacute mikroskop (Carl Reichert)

1935 - Faacutezovyacute kontrast (Fritz Zernike NC 1953)

1955 - Diferenciaacutelniacute interferenčniacute kontrast (DIC ndash Nomarski)

1968 - Rastrovaciacute tandemovyacute konfokaacutelniacute mikroskop (TSCM)

1978 - Laserovyacute konfokaacutelniacute rastrovaciacute mikroskop

1994 - Princip STED mikroskopie (S W Hell NC 2014)

(Stimulated Emission Depletion ndash redukce fluorescence stimulovanou emisiacute)

po roce 2000 - rozvoj tzv superrozlišovaciacute mikroskopie

2006 - Super-resolučniacute fluorescenčniacute mikroskop (Eric Betzig

Stefan W Hell a William E Moerner NC za chemii 2014)

NC = Nobelova cena

30 leacuteta 20 stoletiacute

ndash hranice vyacutevoje optickeacuteho (paprskoveacuteho) mikroskopu

(hranice rozlišeniacute světelneacuteho mikroskopu je diacuteky velikosti deacutelky světla 02 microm)

- dalšiacute zvětšovaacuteniacute pozorovanyacutech objektů na jineacutem principu

- miacutesto světelneacuteho paprsku elektronovyacute paprsek

(= tok rychlyacutech elektronů)

- miacutesto skleněneacute čočky magnetickaacute čočka

1931 - Ernst Ruska Max Knoll

prvniacute elektronovyacute mikroskop

tzv prozařovaciacute transmisniacute EM

(TEM ndash Transmission Electron Microscope)

- originaacutelniacute zvětšeniacute 1 000 - 250 000x

Ernst Ruska (1906-1988)

1942 - rastrovaciacute EM

(SEM ndash Scanning Electron Microscope) - postupneacute bombardovaacuteniacute vzorku elektrony

- zvětšeniacute až 30 000x

EM UacuteMG AV ČR Praha-Krč

FEI ndash TECHNAIG2TEM + kryozařiacutezeniacute

200 kV (λ el = 00025 nm)

RS 01 nm

prvkovaacute analyacuteza vzorků

zařiacutezeniacute pro

prvkovou analyacutezu

vzorků

Foto Pavla Vaacutelovaacute 2010

Brněnštiacute vědci z Uacutestavu přiacutestrojoveacute techniky AV ČR (UacutePT) a Mendelovy

univerzity představili novou metodu pozorovaacuteniacute rostlinnyacutech vzorků v jejich

přirozeneacutem stavu (za využitiacute kryoprotektiv)

Viacutece na httpe-svete15cztechnikacesti-vedci-posunuli-hranice-elektronove-mikroskopie-1174818

Enviromentaacutelniacute rastrovaciacute elektronovyacute mikroskop Aquasem II

TEM TITAN FEI Company Mgr Klaacutera Čeacutepe PhD

Vysokorozlišovaciacute transmisniacute elektronovyacute mikroskop

schopnyacute nahleacutednout do struktury materiaacutelů až na uacuterovni atomů

a současně přesně zmapovat jejich chemickeacute složeniacute

Regionaacutelniacute centrum pokročilyacutech

materiaacutelů (RCPTM)

Odd uhliacutekoveacute nanostruktury

PřF UP OL

Vysokorozlišovaciacute transmisniacute

elektronovyacute mikroskop TITAN (FEI)

Foto Pavla Vaacutelovaacute 2015

Transmisniacute elektronovyacute

mikroskop Jeol

Regionaacutelniacute centrum pokročilyacutech materiaacutelů (RCPTM)

Odd uhliacutekoveacute nanostruktury PřF UP OL

Neoptickeacute mikroskopy

1981

Řaacutedkovaciacute tunelovyacute mikroskop (STM ndash Scanning Tunnelling Microscope)

- mapovaacuteniacute povrchu pomociacute pohybu vodiveacuteho hrotu nad vodivyacutem povrchem sledovaneacuteho materiaacutelu

1986

Mikroskop atomaacuterniacutech sil (AMF ndash Atomic Force Miroscope)

- skenovaacuteniacute povrchu materiaacutelu pomociacute hrotu zavěšeneacutem na pružneacutem vyacutekyvneacutem rameacutenku kteryacute je přitahovaacuten elektrostatickyacutemi a Van der Walsovyacutemi silami

Rozlišeniacute v řaacutedech pikometrů (10-12 m) ndash rozeznaacuteniacute struktur

jednotlivyacutech atomů

O p t i c k eacute p r i n c i p y

světelneacute mikroskopie

Reichl J Všetička M Encyklopedie fyziky [online] copy2006-2014

[vid 2014] Dostupneacute z httpfyzikajreichlcommainarticleview431-optika Lepil O (2013) Fyzika pro gymnaacutezia Optika Prometheus Praha 4 přepracovaneacute vydaacuteniacute

Murphy DB Davidson MW (2013) Fundamentals of Light

Microscopy and Electronic Imaging Willey-Blackwell Published

2013 by John Wiley amp Sons Inc Hoboken New Jersey

S v ě t l o

= čaacutest rozsaacutehleacute oblasti elektromagnetickeacuteho zaacuteřeniacute

kterou vniacutemaacuteme zrakem

Rozhlasoveacute a raacutedioveacute vlny 250 km - 1 mm

Infračerveneacute zaacuteřeniacute 05 mm - 08 μm

Světlo (viditelneacute zaacuteřeniacute) 08 μm - 04 μm

Ultrafialoveacute zaacuteřeniacute 04 microm - 01 microm

Roumlntgenovo zaacuteřeniacute (X-paprsky) 15 nm - 0005 nm

γ-zaacuteřeniacute pod 00001 nm

Přibližneacute hodnoty ndash individuaacutelniacute vlastnosti zraku různyacutech lidiacute

S v ě t l o

= čaacutest rozsaacutehleacute oblasti elektromagnetickeacuteho zaacuteřeniacute

kterou vniacutemaacuteme zrakem

rarr se zkracujiacuteciacute se vlnovou deacutelkou se zvyšuje frekvence (energie)

Viditelneacute

Vlnoveacute deacutelky světla a relativniacute citlivost oka

Murphy DB Davidson MW (2013) Fundamentals of Light Microscopy and Electronic

Imaging Willey-Blackwell Published 2013 by John Wiley amp Sons Inc Hoboken New Jersey

= zrakovyacute pigment citlivyacute na

světlo nachaacutezejiacuteciacute se v tyčinkaacutech Jodopsin = zrakovyacute pigment citlivyacute na

barvu nachaacutezejiacuteciacute se v čiacutepciacutech

S v ě t l o

Duaacutelniacute charakter světla ndash vlněniacute i proud čaacutestic (fotonů)

Vlnovyacute model světla

vlna elektrickaacute a magnetickaacute (elektromagnetickaacute vlna je tvořena oscilujiacuteciacutem elektrickyacutem a

magnetickyacutem polem na sebe kolmyacutech a nesouciacutech vpřed energii)

Pro uacutečinky světla v mikroskopu je důležitaacute vlna elektrickaacute

= přiacutečneacute vlněniacute

postupneacute kmitaacuteniacute

jednotlivyacutech vedle sebe

ležiacuteciacutech bodů

Scheacutema světla jako elektromagnetickeacute vlny

Obr httpwwwprosoundwebcomarticleprintinvaders_from_

outer_space_electromagnetic_radiation_interference

λ - vlnovaacute deacutelka

(v oblasti svět zaacuteřeniacute

v rozmeziacute od 380 do 780 nm)

určuje barvu světla

a - amplituda

nejvyššiacute hodnota

určuje intenzitu světla

Z hlediska vlnoveacute deacutelky rozlišujeme

polychromatickeacute x monochromatickeacute světlo (selekce pomociacute barevnyacutech filtrů rarr jednotnaacute vlnovaacute deacutelka světlo zeleneacute červeneacute hellip)

Elektrickaacute vlna - sinusoida

Charakterizovaacutena dvěma veličinami

Pazourek 1975

Vlastnosti světla

Rovnoměrneacute šiacuteřeniacute světla ze zaacuteřiacuteciacuteho bodu na všechny strany rarr vlnovaacute plocha tvaru koule

Paprsek ndash směr kteryacutem se vlněniacute šiacuteřiacute a kteryacute je kolmyacute

na vlnoplochu

Pazourek 1975

- paprsek nepolarizovanyacute (A C) ndash kmitaacute v každeacutem

miacutestě a v průběhu času ve všech možnyacutech směrech

kolmyacutech na směr šiacuteřeniacute paprsku

- paprsek polarizovanyacute (B D1 D2) - kmitaacute v jedneacute

rovině přičemž rovina kmitů (vlněniacute) jednoho z nich je

kolmaacute k rovině kmitů druheacuteho

Pazourek 1975

Polarizovaneacute světlo viz

httpswwwyoutubecomwatchv=gP751qpm4n4

Murphy DB Davidson MW (2013) Fundamentals of Light Microscopy and

Electronic Imaging Jonh Wkiley amp Sons Inc Hoboken New Jersey

Osm různyacutech vlnovyacutech forem světla (znaacutezorňujiacuteciacutech různou kvalitu světla)

Odraz a lom světelnyacutech paprsků

v prostřediacutech různeacute hustoty

Důležitaacute charakteristika prostřediacute

index lomu ( n ) (= optickaacute hustota prostřediacute)

c = rychlost světla ve vakuu (stejnaacute pro všechny λ )

v = rychlost světla určiteacute vlnoveacute deacutelky ve zkoumaneacute laacutetce

c

n =

v

zde absolutniacute index lomu

(bezrozměrnaacute fyzikaacutelniacute veličina jeho jednotka je 1)

Rychlost světla (c) určiteacute vlnoveacute

deacutelky v různyacutech prostřediacutech

c ve vakuu

= 300 000 kms

Index lomu (n) některyacutech laacutetek

vzduch (vakuum) helliphellip 100 (vzduch 10002718)

voda helliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 133

plexisklo helliphelliphelliphelliphelliphellip 140 ndash 152

křemenneacute sklo helliphellip hellip 145 (čočka z křemene z Ninive ndash 7 stol přnl)

běžneacute sklo helliphelliphelliphelliphellip 151

cedrovyacute olej helliphelliphelliphelliphellip 151

imerzniacute olej Olympus hellip 1516 pro fluorescenci 1404

kanadskyacute balzaacutem helliphellip 150

krystal NaCl helliphelliphelliphellip 154

korunoveacute sklo helliphelliphelliphellip 145 ndash 156 (sodno-draselneacute bezolovnateacute)

flintoveacute sklo helliphelliphelliphellip 162 ndash 180 (olovnateacute)

diamant helliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 242

Index lomu je vždy většiacute než 100

očniacute čočka hellip 1406

sklivec helliphelliphellip 1336

Odraz světla rovnyacutem zrcadlem (reflexe)

Zaacutekony

1 Paprsek dopadajiacuteciacute kolmice dopadu a paprsek odraženyacute

ležiacute v jedneacute rovině

2 Uacutehel odrazu se rovnaacute uacutehlu dopadu

Odraz a lom paprsku

k

Důležiteacute pro mikroskopii (astronomii)

- neniacute zaacutevislost na vlnoveacute deacutelce světla (λ)

- na rozdiacutel od lomu paprsků se světelneacute

paprsky se odraacutežejiacute stejně

Pazourek 1975

Zaacutekony

1 Paprsek dopadajiacuteciacute kolmice lomu a paprsek lomenyacute ležiacute v teacuteže rovině

Lom světla (refrakce)

2 Při přechodu z prostřediacute opticky řidšiacuteho do prostřediacute opticky hustšiacuteho se paprsek laacuteme ke kolmici (A)

a z prostřediacute opticky hustšiacuteho

do prostřediacute opticky řidšiacuteho

se laacuteme od kolmice (B)

(C a D) ndash uacuteplnyacute odraz při tzv

mezniacutem uacutehlu dopadu paprsku

v přiacutepadě lomu od kolmice (B)

(viz Nikol odrazneacute hranoly světlovodneacute vlaacutekno nebo fluorescenčniacute metoda TIRFM ndash totaacutelniacute odraz exitačniacuteho zaacuteřeniacute)

Pazourek 1975

Svatyacute Kryštof od

švyacutecarskeacuteho maliacuteře

Konrada Witze (kolem 1400ndash1446)

Witz byl jedniacutem z prvniacutech

maliacuteřů kteryacute namaloval

přesnyacute způsob odrazu

světla na vodě

Disperze (rozklad) světla

= důsledek zaacutevislosti rychlosti světla v laacutetkaacutech na frekvenci světla

(λ = c f)

světlo různyacutech barev (λ)

se laacuteme různě

(červeneacute se lomiacute meacuteně než modreacute)

Přiacuteklad disperze (rozkladu) světla

Primaacuterniacute a sekundaacuterniacute duha Severniacute Čechy Foto Pavla Vaacutelovaacute 2010

D u h a

Jeden z mnoha

optickyacutech

jevů (fotometeorů)

v atmosfeacuteře

Rok 312 nl - před bitvou byzantskeacuteho ciacutesaře Konstantina I (272-337) s

konkurenčniacutem ciacutesařem Maxentiem u bran Řiacutema (tzv bitva u Milvijskeacuteho mostu) se

na obloze objevily tři zaacuteřiacuteciacute křiacuteže (halovyacute sloup parheacutelia a parhelickyacute oblouk)

Konstantin bitvu proti přesile vyhraacutel sjednotil řiacuteši a povolil v niacute vyznaacutevat křesťanstviacute

Maleacute halo (22deg) (viz 1) vedlejšiacute slunce (2) a horniacute a dolniacute halovyacute sloup (3)

vznikajiacuteciacute odrazem a lomem světelnyacutech paprsků na krystalciacutech ledu

Lom světla a dějiny

httptmagazineblogsnytimescom20121126halo-effect_r=0

1

3

2 2

3

Ohyb (difrakce) a interference

světla

Foto Pavla Vaacutelovaacute Bukovany 2015 Rozklad světla na CD - světlo žaacuterovky

Rozklad biacuteleacuteho světla na mřiacutežce

Pevnost poznaacuteniacute Olomouc 2015

Foto Pavla Vaacutelovaacute Olomouc 2015

Ohyb (difrakce) a interference

světla

Ohyb (difrakce) a interference

Difrakčniacute obrazec obsahuje světlaacute a tmavaacute miacutesta kteraacute se

střiacutedajiacute - světlaacute miacutesta nazyacutevaacuteme maxima a tmavaacute minima

Interference světla = sklaacutedaacuteniacute světelnyacutech vln

Předpoklad světlo musiacute byacutet koherentniacute

Podmiacutenka koherence

- paprsky musiacute miacutet stejnou frekvenci

- paprsky musiacute byacutet navzaacutejem rovnoběžneacute

- paprsky musiacute miacutet na sobě nezaacutevislyacute draacutehovyacute (faacutezovyacute) rozdiacutel

Vznik koherentniacuteho zaacuteřeniacute

rozděleniacutem světla

- buď odrazem pomociacute zrcadel

- nebo lomem pomociacute hranolů

Foto Pavla Vaacutelovaacute Praha 151 2016

Interference světla

stejnyacute způsob vlněniacute

(faacuteze je vzaacutejemně posunuta o sudeacute

naacutesobky λ2)

vznik interferenčniacuteho maxima

(konstruktivniacute interference)

Interference světla

asynchronniacute vlněniacute

(vzaacutejemně posunutaacute faacuteze

o licheacute naacutesobky λ2)

vznik interferenčniacuteho

minima

(destruktivniacute interference)

rarr zaacuteřeniacute zanikaacute

rarr zeslabeniacute zaacuteřeniacute

Interference dvou vrstev elektromagnetickeacuteho zaacuteřeniacute u Slunce

Čočky ndash zaacutekladniacute součaacutesti

mikroskopu

= průhlednaacute (nejčastěji skleněnaacute) tělesa omezenaacute

vypuklyacutemi nebo vydutyacutemi kulovityacutemi plochami lišiacuteciacute se od sveacuteho okoliacute odlišnyacutem indexem lomu

Zaacutekladniacute typy čoček

spojky (vypukleacute neboli konvexniacute)

rozptylky (vyduteacute konkaacutevniacute)

Pazourek 1975

Optickaacute osa ( o ) prochaacuteziacute středem čočky

Ohnisko ( F ) - bod do ktereacuteho se soustřeďujiacute paprsky probiacutehajiacuteciacute rovnoběžně s optickou osou

- 2 ohniska - předmětoveacute ohnisko ( F )

obrazoveacute ohnisko ( Facute )

- ohniskovaacute vzdaacutelenost ( f )

vzdaacutelenost ohniska od hlavniacute roviny proloženeacute středem čočky

- dvojnaacutesobnaacute ohniskovaacute vzdaacutelenost ( P Pacute )

Obrazovyacute prostor - prostor v němž vznikaacute obraz

Důležiteacute charakteristiky čočky

f

o

hlavniacute rovina

Pazourek 1975

V přiacutepadě velmi tenkeacute čočky

bull Obraz za optickou soustavou

rarr obraz s k u t e č n yacute

Skutečnyacute obraz je možneacute zachytit na stiacuteniacutetko

nebo na fotografickou desku neskutečnyacute nikoliv

bull Obraz před soustavou

rarr obraz n e s k u t e č n yacute (zdaacutenlivyacute virtuaacutelniacute)

Obraz skutečnyacute a neskutečnyacute

A ndash předmět Aacute- obraz předmětu

Upraveno podle Pazourek 1975

Francouz Augustin Jean Fresnel (1788-1827) [frenel]

Fresnelova čočka [frenelova]

- plochyacute tvar (zachovaacuteny pouze čaacutesti ktereacute měniacute směr chodu světelnyacutech paprsků)

- vyacuterazně nižšiacute hmotnost při zachovaacuteniacute podobnyacutech parametrů

Využitiacute infračidla pohybu semafory světlomety (majaacuteky) a reflektory (světla aut

divadelniacutech a filmovyacutech osvětlovaciacutech zařiacutezeniacute) zpětneacute projektory slunečniacute kolektory

na zaacutekladě tohoto principu takeacute vyacuteroba 3D displejů k mobilniacutem telefonům a televiziacutem

httpwwwmffcuniczverejnostzpravicky03_lupahtm

čočka na majaacuteku

Čočky v budoucnosti

Pokus o vyacuterobu tzv dokonaleacute čočky

Prototyp - upraveneacute tzv Maxwellovo rybiacute oko

- paprsky světla se v něm pohybujiacute po kružniciacutech a

na rozdiacutel od běžnyacutech čoček se při zobrazeniacute využijiacute

všechny paprsky

- superčočky využiacutevajiacute geometrie k tomu aby se světlo

soustředilo do oblasti menšiacute než je jeho vlnovaacute deacutelka

(zatiacutem se neviacute jak do čočky vyhovujiacuteciacutem způsobem

doveacutest světlo)

Využitiacute v budoucnu

mimo jineacute v pozorovaacuteniacute živyacutech buněk při velkeacutem zvětšeniacute

pomociacute obyčejneacuteho světla bez jejich narušeniacute

Viacutece viz Plaacutešek J Mikroskopy se superčočkami httpwwwvesmircz | Vesmiacuter 91 531 zaacuteřiacute 2012

Hranoly

- doplňky optickyacutech systeacutemů

- většinou tvar rovnostranneacuteho trojuacutehelniacuteka

- využiacutevajiacute uacuteplneacuteho odrazu

Funkce

- změna chodu paprsků pod různyacutemi uacutehly

- rozdvojeniacute paprsků

Pazourek 1975

Různeacute typy odraznyacutech hranolů

Hranoly

Různeacute typy hranolů

httplaserykvalitneczimagestext_25_zakladyoptiky1odrazne_hranolyjpg

Viz dichroickeacute zrcadlo u fluorescenčniacuteho mikroskopu

Chod paprsků v binokulaacuterniacutem tubusu

Pazourek 1975

Nikol = hranol z islandskeacuteho vaacutepence

rarr polarizace světla

Dvojlomnyacute vaacutepencovyacute

krystal

ř ndash paprsek řaacutednyacute (zanikaacute na začerněneacute ploše)

mř ndash paprsek mimořaacutednyacute (lineaacuterně polarizovanyacute

využit k osvětleniacute)

začerněnaacute plocha

Nikol

Pazourek 1975

vzduchovaacute štěrbina

- rychlost světla je

v různyacutech směrech různaacute

- uacutehel paprsku řaacutedneacuteho a

mimořaacutedneacuteho je odlišnyacute

(u Vikingů - slunečniacute kaacutemen

soacutelarsteinn)

Chod paprsků ve světlovodneacutem vlaacuteknu

Princip uacuteplnyacute odraz paprsku

- uvnitř skleněneacuteho vlaacutekna je opticky hustšiacute prostřediacute

- nutnost dostatečně silneacuteho světelneacuteho zdroje

Světlovodnaacute vlaacutekna

Pazourek 1975

Širokeacute využitiacute v praxi optickeacute kabely ndash přenos signaacutelů ve sdělovaciacute technice

světlovody umožňujiacuteciacute veacutest denniacute světlo vedeniacute světla u stereolup endoskopů hellip

Page 7: Světelná a elektronová mikroskopie...(AMF – Atomic Force Miroscope) - skenování povrchu materiálu pomocí hrotu zavěšeném na pružném výkyvném raménku, který je přitahován

Doplňujiacuteciacute literatura

Habrovaacute V (1990) Mikroskopickaacute technika SPN Praha

Jurčaacutek J (1998) Zaacutekladniacute praktikum z botanickeacute mikrotechniky a rostlinneacute anatomie Skripta UP Olomouc

Němec B a kol (1962) Botanickaacute mikrotechnika Nakladatelstviacute ČSAV Praha

Lepil O (2013) Fyzika pro gymnaacutezia Optika Prometheus Praha

4 přepracovaneacute vydaacuteniacute

Pazourek J (1975) Pracujeme s mikroskopem SNTL Praha

Pazourkovaacute Z (1986) Botanickaacute mikrotechnika Praha 1986 skripta UK Praha

Pazourkovaacute Z Pazourek J (1960) Rychleacute metody botanickeacute mikrotechniky ČAZV SZN Praha

Špaček J (2008) Svět pod mikroskopem Grada Praha

Kremer Bruno P (2013) Mikroskop zcela jednoduše Aventium nakladatelstviacute sro

Člaacutenky z časopisu Vesmiacuter

Internet Učebniacute texty Katedry Optiky UP Olomouc Světelnaacute mikroskopie (doc Roman Kubiacutenek)

httpapfyzupolczucebniceoptmikrohtml

httpapfyzupolczucebnicedownoptmikropdf

Leacutekařskaacute fakulta UP Olomouc httpbiologieupolczmikroskopie

Nebesaacuteřovaacute J Elektronovaacute mikroskopie pro biology

httpwwwparucasczlembookindexhtml

skripta httpwwwmikroskopiaskpage8html (slovensky)

httpwwwhistory-of-the-microscopeorg

Kurzy mikroskopie na httpmicroscopydukeedu httpmicroscopydukeeduconceptshtml

Internetoveacute adresy o mikroskopech různyacutech firem Olympus httpwwwolympuscz httpwwwolympusmicrocom

Olympus_2011 - httpwwwmujolympusczdata20110209095419bodyhtm

Kniha o světelneacute mikroskopii na www

Davidson and Abramowitz Optical Microscopy Review Article

httpolympusmagnetfsueduprimeropticalmicroscopyhtml

Přiacuteručka firmy Zeiss httpwwwusaskcabiologyscopesMicroscopyBasicspdf

Nikon httpwwwmicroscopyucom

Přiacuteručka firmy Nikon httpwwwareczdatafilezakladni_metody_svetelne_mikroskopiepdf

Odkazy na literaturu

httplommicroscopyweeblycombasics-of-light-microscopy-and-opticshtml

Virtuaacutelniacute obraacutezky

httpwwwolympusmicrocomprimerjava

httpzeiss-campusmagnetfsuedututorialsindexhtml

Historie mikroskopovaacuteniacute

Optickeacute principy

světelneacute mikroskopie

Přednaacuteška 1

Pavla Vaacutelovaacute 2018

naacutezev z řec mikroacutes = malyacute skopoacutes = pozorovatel

vynaacutelez mikroskopu ndash konec 16 stol (technickyacute rozmach lidstva)

1625 - naacutezev mikroskop odvozenyacute od naacutezvu teleskop

(Giovanni Faber z Bambergu ndash papežskyacute leacutekař )

H i s t o r i e o b j e v u m i k r o s k o p u

Dřiacutevějšiacute pozorovaacuteniacute

Řecko - Aristofanes Atheacutenskyacute (424-380 př n l) - ve hře bdquoOblakaldquo

popis zraněniacute paprskem slunce prochaacutezejiacuteciacuteho skleněnou

kouliacute naplněnou vodou

Řiacutemskaacute doba

- filosof Seneca (asi 4 přnl-65 nl) - zvětšeniacute piacutesmen

pomociacute skleněneacute koule naplněneacute vodou

- Klaudius Ptolemaios (asi 100-170 nl) ndash diacutelo bdquoOptikaldquo -

poznatky o odraze paprsků a lomu paprsků skrz sklo

11 stol - Ibn al Haitham (bdquoAlhazenldquo) (965-1039) - arabskyacute fyzik a

matematik diacutelo bdquoPojednaacuteniacute o opticeldquo ndash zkoumaacute vlastnosti

světla (lom a odraz) čočky a zrcadla

viz Anna Černaacute Mikroskop pod drobnohledem Živa 52017 str CXXVIII

14 stol ndash zvlaacutednutiacute techniky broušeniacute čoček do bryacuteliacute (italštiacute mniši)

konec 16 stol ndash vynaacutelez mikroskopu

kolem roku 1590 - Hans a Zacharias Janssenovi (Holandsko otec a syn)

H i s t o r i e o b j e v u m i k r o s k o p u

- konstrukce prvniacuteho použitelneacuteho mikroskopu (ze dvou čoček)

- čočky vypoukleacute i vyduteacute

- zvětšeniacute mikroskopu 60x

viz kniha a film bdquoJmeacuteno růželdquo od Umberta Eca

Systeacutem dvou čoček

16 stol

deacutelka 12 m

(tzv kompaudniacute mikroskop)

httpwwwmicroscopyfsueduprimermuseum

httpmicromagnetfsueduprimermuseumjanssenhtml

httpwwwapsorgpublicationsapsnews200403historycfm

Janssenův mikroskop

17 stol Galileo Galilei (1564-1642)

ndash italskyacute astronom a matematik

1604-1609 ndash konstrukce dalekohledu

- použitiacute složeneacuteho mikroskopu

nazvaneacuteho occhiolino

k vědeckyacutem uacutečelům (pozorovaacuteniacute

oka mouchy)

Nejasnosti kolem vynaacutelezu mikroskopu

ndash z dobovyacutech zpraacutev neniacute jasneacute zda se jednaacute o mikroskop

jehož okulaacuterem je spojka nebo o dalekohled s rozptylkou

(kteryacute použiacuteval Galileo)

Anthony van Leeuwenhoek (1632-1723)

ndash obchodniacutek s laacutetkami v holandskeacutem Delftu

ndash sestrojil jednočočkovyacute mikroskop silnyacute zvětšovaciacute

efekt čočky

(až 270x)

ndash nejprve zkoumaacuteniacute struktury laacutetek

později zkoumal listy květiny drobneacute organismy lidskou krev kůži vlasy hellip

- prvniacute viděl a popsal krevniacute buňky chovaacuteniacute lidskyacutech spermiiacute

- vyacuteroba asi 250 mikroskopů

17 stol

Jednočočkovyacute Leeuwenhoekův

mikroskop

httpbiologimediacentrecomwp-contentuploads201101image2png

Anglickyacute původ Italskyacute původ

17 stol

Prvniacute světelneacute mikroskopy

Jednočočkovyacute

mikroskop Dvoučočkoveacute

mikroskopy

Robert Hook (1635-1703) [huacutek]

ndash anglickyacute fyzik chemik geolog astronom hellip

ndash použiacuteval zakoupenyacute složenyacute mikroskop s viacutece

čočkami (tzv kompaudniacute) vylepšenyacute o kvalitniacute osvětleniacute

17 stol

Hookův mikroskop

- vylepšeniacute osvětleniacute použitiacute irisoveacute clony

irisovaacute clona

- zkoumaacuteniacute slabyacutech plaacutetků korku z korkovniacuteku

živeacute laacutetky jsou tvořeny buňkami

- 1665 - kniha bdquoMicrographialdquo

mikroskopickeacute pozorovaacuteniacute rostlinnyacutech

pletiv živočišnyacutech objektů a struktur

mineraacutelů

Rok vydaacuteniacute 1665 Micrographia or some Physiological Descriptions of Minute Bodies

made by Magnifying Glasses with Observations and Inquiries thereupon

London 1665

17 stol Leeuwenhoek Hook

Angličan Henry Power (1626ndash1668) ndash jako

prvniacute (1663) publikoval pozorovaacuteniacute mikroskopem

Marcello Malphighi (1628ndash1694)

italskyacute leacutekař

zakladatel mikroskopickeacute anatomie

- objev krevniacutech kapilaacuter savců (1661)

- malphigickeacute trubice hmyzu

18 stol

ndash mikroskopy přežily jako hračka pro zaacutebavu anglickyacutech gentlemanů zajiacutemajiacuteciacutech se o tajemstviacute přiacuterody

19 stol

zač 19 stol ndash Dollond Lister Amici - vynaacutelez

achromatickeacuteho objektivu

ndash do teacute doby použiacutevaacuteniacute jednočočkoveacuteho mikroskopu (dvoučočkovyacute

mikroskop podaacuteval značně zkreslenyacute obraz)

Vyacuteznačniacute vědci 19 stol použiacutevajiacuteciacute k svyacutem pozorovaacuteniacutem mikroskop

Robert Brown (1773-1858) - objev jaacutedra (1831)

Luis Pasteur (1822-1895) (francouzskyacute mikrobiolog)

- objev kvasinek

Robert Koch (1843-1910) (německyacute leacutekař a mikrobiolog)

- objev původců tuberkuloacutezy a cholery

Jan Evangelista Purkyně (1787-1869) (českyacute fyziolog)

- 1825 popsal jaacutedro u živočišneacute buňky (lupa)

od r 1832 použiacutevaacute kvalitniacute mikroskop

Microscope

stand VII

19 stol ndash dalšiacute vyacutevoj mikroskopů

Carl Zeiss ndash průmyslovaacute vyacuteroba mikroskopů (firma Zeiss)

Ernst Karl Abbe ndash teoretickaacute studia optickyacutech principů

Otto Schott ndash vyacutezkum optickeacuteho skla

August Koumlhler ndash kvalitniacute osvětleniacute

Otto Schott (1851-1935)

Ernst Abbe (1840-1905)

Carl Zeiss (1816-1888)

August Koumlhler (1866-1948)

Mikroskopy 19 stoletiacute

19 stol

20 stol

Konfokaacutelniacute mikroskop

A1R (Nikon)

BX60 (Olympus)

Laserovyacute fluorescenčniacute mikroskop bdquoLight Sheetldquo Centrum regionu Hanaacute pro biotechnologickyacute a zemědělskyacute vyacutezkum Odděleniacute buněčneacute biologie

21 stol

21 stol

Digitaacutelniacute holografickyacute mikroskop firmy Lynceacutee Tec

Důležitaacute data při rozvoji moderniacute světelneacute mikroskopie

1847 - Zahaacutejeniacute vyacuteroby mikroskopů firmou Carl Zeiss v Jeně

1903 - Ultramikroskop (Richard Zsigmondy NC 1925)

1911 - Fluorescenčniacute mikroskop (Carl Reichert)

1935 - Faacutezovyacute kontrast (Fritz Zernike NC 1953)

1955 - Diferenciaacutelniacute interferenčniacute kontrast (DIC ndash Nomarski)

1968 - Rastrovaciacute tandemovyacute konfokaacutelniacute mikroskop (TSCM)

1978 - Laserovyacute konfokaacutelniacute rastrovaciacute mikroskop

1994 - Princip STED mikroskopie (S W Hell NC 2014)

(Stimulated Emission Depletion ndash redukce fluorescence stimulovanou emisiacute)

po roce 2000 - rozvoj tzv superrozlišovaciacute mikroskopie

2006 - Super-resolučniacute fluorescenčniacute mikroskop (Eric Betzig

Stefan W Hell a William E Moerner NC za chemii 2014)

NC = Nobelova cena

30 leacuteta 20 stoletiacute

ndash hranice vyacutevoje optickeacuteho (paprskoveacuteho) mikroskopu

(hranice rozlišeniacute světelneacuteho mikroskopu je diacuteky velikosti deacutelky světla 02 microm)

- dalšiacute zvětšovaacuteniacute pozorovanyacutech objektů na jineacutem principu

- miacutesto světelneacuteho paprsku elektronovyacute paprsek

(= tok rychlyacutech elektronů)

- miacutesto skleněneacute čočky magnetickaacute čočka

1931 - Ernst Ruska Max Knoll

prvniacute elektronovyacute mikroskop

tzv prozařovaciacute transmisniacute EM

(TEM ndash Transmission Electron Microscope)

- originaacutelniacute zvětšeniacute 1 000 - 250 000x

Ernst Ruska (1906-1988)

1942 - rastrovaciacute EM

(SEM ndash Scanning Electron Microscope) - postupneacute bombardovaacuteniacute vzorku elektrony

- zvětšeniacute až 30 000x

EM UacuteMG AV ČR Praha-Krč

FEI ndash TECHNAIG2TEM + kryozařiacutezeniacute

200 kV (λ el = 00025 nm)

RS 01 nm

prvkovaacute analyacuteza vzorků

zařiacutezeniacute pro

prvkovou analyacutezu

vzorků

Foto Pavla Vaacutelovaacute 2010

Brněnštiacute vědci z Uacutestavu přiacutestrojoveacute techniky AV ČR (UacutePT) a Mendelovy

univerzity představili novou metodu pozorovaacuteniacute rostlinnyacutech vzorků v jejich

přirozeneacutem stavu (za využitiacute kryoprotektiv)

Viacutece na httpe-svete15cztechnikacesti-vedci-posunuli-hranice-elektronove-mikroskopie-1174818

Enviromentaacutelniacute rastrovaciacute elektronovyacute mikroskop Aquasem II

TEM TITAN FEI Company Mgr Klaacutera Čeacutepe PhD

Vysokorozlišovaciacute transmisniacute elektronovyacute mikroskop

schopnyacute nahleacutednout do struktury materiaacutelů až na uacuterovni atomů

a současně přesně zmapovat jejich chemickeacute složeniacute

Regionaacutelniacute centrum pokročilyacutech

materiaacutelů (RCPTM)

Odd uhliacutekoveacute nanostruktury

PřF UP OL

Vysokorozlišovaciacute transmisniacute

elektronovyacute mikroskop TITAN (FEI)

Foto Pavla Vaacutelovaacute 2015

Transmisniacute elektronovyacute

mikroskop Jeol

Regionaacutelniacute centrum pokročilyacutech materiaacutelů (RCPTM)

Odd uhliacutekoveacute nanostruktury PřF UP OL

Neoptickeacute mikroskopy

1981

Řaacutedkovaciacute tunelovyacute mikroskop (STM ndash Scanning Tunnelling Microscope)

- mapovaacuteniacute povrchu pomociacute pohybu vodiveacuteho hrotu nad vodivyacutem povrchem sledovaneacuteho materiaacutelu

1986

Mikroskop atomaacuterniacutech sil (AMF ndash Atomic Force Miroscope)

- skenovaacuteniacute povrchu materiaacutelu pomociacute hrotu zavěšeneacutem na pružneacutem vyacutekyvneacutem rameacutenku kteryacute je přitahovaacuten elektrostatickyacutemi a Van der Walsovyacutemi silami

Rozlišeniacute v řaacutedech pikometrů (10-12 m) ndash rozeznaacuteniacute struktur

jednotlivyacutech atomů

O p t i c k eacute p r i n c i p y

světelneacute mikroskopie

Reichl J Všetička M Encyklopedie fyziky [online] copy2006-2014

[vid 2014] Dostupneacute z httpfyzikajreichlcommainarticleview431-optika Lepil O (2013) Fyzika pro gymnaacutezia Optika Prometheus Praha 4 přepracovaneacute vydaacuteniacute

Murphy DB Davidson MW (2013) Fundamentals of Light

Microscopy and Electronic Imaging Willey-Blackwell Published

2013 by John Wiley amp Sons Inc Hoboken New Jersey

S v ě t l o

= čaacutest rozsaacutehleacute oblasti elektromagnetickeacuteho zaacuteřeniacute

kterou vniacutemaacuteme zrakem

Rozhlasoveacute a raacutedioveacute vlny 250 km - 1 mm

Infračerveneacute zaacuteřeniacute 05 mm - 08 μm

Světlo (viditelneacute zaacuteřeniacute) 08 μm - 04 μm

Ultrafialoveacute zaacuteřeniacute 04 microm - 01 microm

Roumlntgenovo zaacuteřeniacute (X-paprsky) 15 nm - 0005 nm

γ-zaacuteřeniacute pod 00001 nm

Přibližneacute hodnoty ndash individuaacutelniacute vlastnosti zraku různyacutech lidiacute

S v ě t l o

= čaacutest rozsaacutehleacute oblasti elektromagnetickeacuteho zaacuteřeniacute

kterou vniacutemaacuteme zrakem

rarr se zkracujiacuteciacute se vlnovou deacutelkou se zvyšuje frekvence (energie)

Viditelneacute

Vlnoveacute deacutelky světla a relativniacute citlivost oka

Murphy DB Davidson MW (2013) Fundamentals of Light Microscopy and Electronic

Imaging Willey-Blackwell Published 2013 by John Wiley amp Sons Inc Hoboken New Jersey

= zrakovyacute pigment citlivyacute na

světlo nachaacutezejiacuteciacute se v tyčinkaacutech Jodopsin = zrakovyacute pigment citlivyacute na

barvu nachaacutezejiacuteciacute se v čiacutepciacutech

S v ě t l o

Duaacutelniacute charakter světla ndash vlněniacute i proud čaacutestic (fotonů)

Vlnovyacute model světla

vlna elektrickaacute a magnetickaacute (elektromagnetickaacute vlna je tvořena oscilujiacuteciacutem elektrickyacutem a

magnetickyacutem polem na sebe kolmyacutech a nesouciacutech vpřed energii)

Pro uacutečinky světla v mikroskopu je důležitaacute vlna elektrickaacute

= přiacutečneacute vlněniacute

postupneacute kmitaacuteniacute

jednotlivyacutech vedle sebe

ležiacuteciacutech bodů

Scheacutema světla jako elektromagnetickeacute vlny

Obr httpwwwprosoundwebcomarticleprintinvaders_from_

outer_space_electromagnetic_radiation_interference

λ - vlnovaacute deacutelka

(v oblasti svět zaacuteřeniacute

v rozmeziacute od 380 do 780 nm)

určuje barvu světla

a - amplituda

nejvyššiacute hodnota

určuje intenzitu světla

Z hlediska vlnoveacute deacutelky rozlišujeme

polychromatickeacute x monochromatickeacute světlo (selekce pomociacute barevnyacutech filtrů rarr jednotnaacute vlnovaacute deacutelka světlo zeleneacute červeneacute hellip)

Elektrickaacute vlna - sinusoida

Charakterizovaacutena dvěma veličinami

Pazourek 1975

Vlastnosti světla

Rovnoměrneacute šiacuteřeniacute světla ze zaacuteřiacuteciacuteho bodu na všechny strany rarr vlnovaacute plocha tvaru koule

Paprsek ndash směr kteryacutem se vlněniacute šiacuteřiacute a kteryacute je kolmyacute

na vlnoplochu

Pazourek 1975

- paprsek nepolarizovanyacute (A C) ndash kmitaacute v každeacutem

miacutestě a v průběhu času ve všech možnyacutech směrech

kolmyacutech na směr šiacuteřeniacute paprsku

- paprsek polarizovanyacute (B D1 D2) - kmitaacute v jedneacute

rovině přičemž rovina kmitů (vlněniacute) jednoho z nich je

kolmaacute k rovině kmitů druheacuteho

Pazourek 1975

Polarizovaneacute světlo viz

httpswwwyoutubecomwatchv=gP751qpm4n4

Murphy DB Davidson MW (2013) Fundamentals of Light Microscopy and

Electronic Imaging Jonh Wkiley amp Sons Inc Hoboken New Jersey

Osm různyacutech vlnovyacutech forem světla (znaacutezorňujiacuteciacutech různou kvalitu světla)

Odraz a lom světelnyacutech paprsků

v prostřediacutech různeacute hustoty

Důležitaacute charakteristika prostřediacute

index lomu ( n ) (= optickaacute hustota prostřediacute)

c = rychlost světla ve vakuu (stejnaacute pro všechny λ )

v = rychlost světla určiteacute vlnoveacute deacutelky ve zkoumaneacute laacutetce

c

n =

v

zde absolutniacute index lomu

(bezrozměrnaacute fyzikaacutelniacute veličina jeho jednotka je 1)

Rychlost světla (c) určiteacute vlnoveacute

deacutelky v různyacutech prostřediacutech

c ve vakuu

= 300 000 kms

Index lomu (n) některyacutech laacutetek

vzduch (vakuum) helliphellip 100 (vzduch 10002718)

voda helliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 133

plexisklo helliphelliphelliphelliphelliphellip 140 ndash 152

křemenneacute sklo helliphellip hellip 145 (čočka z křemene z Ninive ndash 7 stol přnl)

běžneacute sklo helliphelliphelliphelliphellip 151

cedrovyacute olej helliphelliphelliphelliphellip 151

imerzniacute olej Olympus hellip 1516 pro fluorescenci 1404

kanadskyacute balzaacutem helliphellip 150

krystal NaCl helliphelliphelliphellip 154

korunoveacute sklo helliphelliphelliphellip 145 ndash 156 (sodno-draselneacute bezolovnateacute)

flintoveacute sklo helliphelliphelliphellip 162 ndash 180 (olovnateacute)

diamant helliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 242

Index lomu je vždy většiacute než 100

očniacute čočka hellip 1406

sklivec helliphelliphellip 1336

Odraz světla rovnyacutem zrcadlem (reflexe)

Zaacutekony

1 Paprsek dopadajiacuteciacute kolmice dopadu a paprsek odraženyacute

ležiacute v jedneacute rovině

2 Uacutehel odrazu se rovnaacute uacutehlu dopadu

Odraz a lom paprsku

k

Důležiteacute pro mikroskopii (astronomii)

- neniacute zaacutevislost na vlnoveacute deacutelce světla (λ)

- na rozdiacutel od lomu paprsků se světelneacute

paprsky se odraacutežejiacute stejně

Pazourek 1975

Zaacutekony

1 Paprsek dopadajiacuteciacute kolmice lomu a paprsek lomenyacute ležiacute v teacuteže rovině

Lom světla (refrakce)

2 Při přechodu z prostřediacute opticky řidšiacuteho do prostřediacute opticky hustšiacuteho se paprsek laacuteme ke kolmici (A)

a z prostřediacute opticky hustšiacuteho

do prostřediacute opticky řidšiacuteho

se laacuteme od kolmice (B)

(C a D) ndash uacuteplnyacute odraz při tzv

mezniacutem uacutehlu dopadu paprsku

v přiacutepadě lomu od kolmice (B)

(viz Nikol odrazneacute hranoly světlovodneacute vlaacutekno nebo fluorescenčniacute metoda TIRFM ndash totaacutelniacute odraz exitačniacuteho zaacuteřeniacute)

Pazourek 1975

Svatyacute Kryštof od

švyacutecarskeacuteho maliacuteře

Konrada Witze (kolem 1400ndash1446)

Witz byl jedniacutem z prvniacutech

maliacuteřů kteryacute namaloval

přesnyacute způsob odrazu

světla na vodě

Disperze (rozklad) světla

= důsledek zaacutevislosti rychlosti světla v laacutetkaacutech na frekvenci světla

(λ = c f)

světlo různyacutech barev (λ)

se laacuteme různě

(červeneacute se lomiacute meacuteně než modreacute)

Přiacuteklad disperze (rozkladu) světla

Primaacuterniacute a sekundaacuterniacute duha Severniacute Čechy Foto Pavla Vaacutelovaacute 2010

D u h a

Jeden z mnoha

optickyacutech

jevů (fotometeorů)

v atmosfeacuteře

Rok 312 nl - před bitvou byzantskeacuteho ciacutesaře Konstantina I (272-337) s

konkurenčniacutem ciacutesařem Maxentiem u bran Řiacutema (tzv bitva u Milvijskeacuteho mostu) se

na obloze objevily tři zaacuteřiacuteciacute křiacuteže (halovyacute sloup parheacutelia a parhelickyacute oblouk)

Konstantin bitvu proti přesile vyhraacutel sjednotil řiacuteši a povolil v niacute vyznaacutevat křesťanstviacute

Maleacute halo (22deg) (viz 1) vedlejšiacute slunce (2) a horniacute a dolniacute halovyacute sloup (3)

vznikajiacuteciacute odrazem a lomem světelnyacutech paprsků na krystalciacutech ledu

Lom světla a dějiny

httptmagazineblogsnytimescom20121126halo-effect_r=0

1

3

2 2

3

Ohyb (difrakce) a interference

světla

Foto Pavla Vaacutelovaacute Bukovany 2015 Rozklad světla na CD - světlo žaacuterovky

Rozklad biacuteleacuteho světla na mřiacutežce

Pevnost poznaacuteniacute Olomouc 2015

Foto Pavla Vaacutelovaacute Olomouc 2015

Ohyb (difrakce) a interference

světla

Ohyb (difrakce) a interference

Difrakčniacute obrazec obsahuje světlaacute a tmavaacute miacutesta kteraacute se

střiacutedajiacute - světlaacute miacutesta nazyacutevaacuteme maxima a tmavaacute minima

Interference světla = sklaacutedaacuteniacute světelnyacutech vln

Předpoklad světlo musiacute byacutet koherentniacute

Podmiacutenka koherence

- paprsky musiacute miacutet stejnou frekvenci

- paprsky musiacute byacutet navzaacutejem rovnoběžneacute

- paprsky musiacute miacutet na sobě nezaacutevislyacute draacutehovyacute (faacutezovyacute) rozdiacutel

Vznik koherentniacuteho zaacuteřeniacute

rozděleniacutem světla

- buď odrazem pomociacute zrcadel

- nebo lomem pomociacute hranolů

Foto Pavla Vaacutelovaacute Praha 151 2016

Interference světla

stejnyacute způsob vlněniacute

(faacuteze je vzaacutejemně posunuta o sudeacute

naacutesobky λ2)

vznik interferenčniacuteho maxima

(konstruktivniacute interference)

Interference světla

asynchronniacute vlněniacute

(vzaacutejemně posunutaacute faacuteze

o licheacute naacutesobky λ2)

vznik interferenčniacuteho

minima

(destruktivniacute interference)

rarr zaacuteřeniacute zanikaacute

rarr zeslabeniacute zaacuteřeniacute

Interference dvou vrstev elektromagnetickeacuteho zaacuteřeniacute u Slunce

Čočky ndash zaacutekladniacute součaacutesti

mikroskopu

= průhlednaacute (nejčastěji skleněnaacute) tělesa omezenaacute

vypuklyacutemi nebo vydutyacutemi kulovityacutemi plochami lišiacuteciacute se od sveacuteho okoliacute odlišnyacutem indexem lomu

Zaacutekladniacute typy čoček

spojky (vypukleacute neboli konvexniacute)

rozptylky (vyduteacute konkaacutevniacute)

Pazourek 1975

Optickaacute osa ( o ) prochaacuteziacute středem čočky

Ohnisko ( F ) - bod do ktereacuteho se soustřeďujiacute paprsky probiacutehajiacuteciacute rovnoběžně s optickou osou

- 2 ohniska - předmětoveacute ohnisko ( F )

obrazoveacute ohnisko ( Facute )

- ohniskovaacute vzdaacutelenost ( f )

vzdaacutelenost ohniska od hlavniacute roviny proloženeacute středem čočky

- dvojnaacutesobnaacute ohniskovaacute vzdaacutelenost ( P Pacute )

Obrazovyacute prostor - prostor v němž vznikaacute obraz

Důležiteacute charakteristiky čočky

f

o

hlavniacute rovina

Pazourek 1975

V přiacutepadě velmi tenkeacute čočky

bull Obraz za optickou soustavou

rarr obraz s k u t e č n yacute

Skutečnyacute obraz je možneacute zachytit na stiacuteniacutetko

nebo na fotografickou desku neskutečnyacute nikoliv

bull Obraz před soustavou

rarr obraz n e s k u t e č n yacute (zdaacutenlivyacute virtuaacutelniacute)

Obraz skutečnyacute a neskutečnyacute

A ndash předmět Aacute- obraz předmětu

Upraveno podle Pazourek 1975

Francouz Augustin Jean Fresnel (1788-1827) [frenel]

Fresnelova čočka [frenelova]

- plochyacute tvar (zachovaacuteny pouze čaacutesti ktereacute měniacute směr chodu světelnyacutech paprsků)

- vyacuterazně nižšiacute hmotnost při zachovaacuteniacute podobnyacutech parametrů

Využitiacute infračidla pohybu semafory světlomety (majaacuteky) a reflektory (světla aut

divadelniacutech a filmovyacutech osvětlovaciacutech zařiacutezeniacute) zpětneacute projektory slunečniacute kolektory

na zaacutekladě tohoto principu takeacute vyacuteroba 3D displejů k mobilniacutem telefonům a televiziacutem

httpwwwmffcuniczverejnostzpravicky03_lupahtm

čočka na majaacuteku

Čočky v budoucnosti

Pokus o vyacuterobu tzv dokonaleacute čočky

Prototyp - upraveneacute tzv Maxwellovo rybiacute oko

- paprsky světla se v něm pohybujiacute po kružniciacutech a

na rozdiacutel od běžnyacutech čoček se při zobrazeniacute využijiacute

všechny paprsky

- superčočky využiacutevajiacute geometrie k tomu aby se světlo

soustředilo do oblasti menšiacute než je jeho vlnovaacute deacutelka

(zatiacutem se neviacute jak do čočky vyhovujiacuteciacutem způsobem

doveacutest světlo)

Využitiacute v budoucnu

mimo jineacute v pozorovaacuteniacute živyacutech buněk při velkeacutem zvětšeniacute

pomociacute obyčejneacuteho světla bez jejich narušeniacute

Viacutece viz Plaacutešek J Mikroskopy se superčočkami httpwwwvesmircz | Vesmiacuter 91 531 zaacuteřiacute 2012

Hranoly

- doplňky optickyacutech systeacutemů

- většinou tvar rovnostranneacuteho trojuacutehelniacuteka

- využiacutevajiacute uacuteplneacuteho odrazu

Funkce

- změna chodu paprsků pod různyacutemi uacutehly

- rozdvojeniacute paprsků

Pazourek 1975

Různeacute typy odraznyacutech hranolů

Hranoly

Různeacute typy hranolů

httplaserykvalitneczimagestext_25_zakladyoptiky1odrazne_hranolyjpg

Viz dichroickeacute zrcadlo u fluorescenčniacuteho mikroskopu

Chod paprsků v binokulaacuterniacutem tubusu

Pazourek 1975

Nikol = hranol z islandskeacuteho vaacutepence

rarr polarizace světla

Dvojlomnyacute vaacutepencovyacute

krystal

ř ndash paprsek řaacutednyacute (zanikaacute na začerněneacute ploše)

mř ndash paprsek mimořaacutednyacute (lineaacuterně polarizovanyacute

využit k osvětleniacute)

začerněnaacute plocha

Nikol

Pazourek 1975

vzduchovaacute štěrbina

- rychlost světla je

v různyacutech směrech různaacute

- uacutehel paprsku řaacutedneacuteho a

mimořaacutedneacuteho je odlišnyacute

(u Vikingů - slunečniacute kaacutemen

soacutelarsteinn)

Chod paprsků ve světlovodneacutem vlaacuteknu

Princip uacuteplnyacute odraz paprsku

- uvnitř skleněneacuteho vlaacutekna je opticky hustšiacute prostřediacute

- nutnost dostatečně silneacuteho světelneacuteho zdroje

Světlovodnaacute vlaacutekna

Pazourek 1975

Širokeacute využitiacute v praxi optickeacute kabely ndash přenos signaacutelů ve sdělovaciacute technice

světlovody umožňujiacuteciacute veacutest denniacute světlo vedeniacute světla u stereolup endoskopů hellip

Page 8: Světelná a elektronová mikroskopie...(AMF – Atomic Force Miroscope) - skenování povrchu materiálu pomocí hrotu zavěšeném na pružném výkyvném raménku, který je přitahován

Internet Učebniacute texty Katedry Optiky UP Olomouc Světelnaacute mikroskopie (doc Roman Kubiacutenek)

httpapfyzupolczucebniceoptmikrohtml

httpapfyzupolczucebnicedownoptmikropdf

Leacutekařskaacute fakulta UP Olomouc httpbiologieupolczmikroskopie

Nebesaacuteřovaacute J Elektronovaacute mikroskopie pro biology

httpwwwparucasczlembookindexhtml

skripta httpwwwmikroskopiaskpage8html (slovensky)

httpwwwhistory-of-the-microscopeorg

Kurzy mikroskopie na httpmicroscopydukeedu httpmicroscopydukeeduconceptshtml

Internetoveacute adresy o mikroskopech různyacutech firem Olympus httpwwwolympuscz httpwwwolympusmicrocom

Olympus_2011 - httpwwwmujolympusczdata20110209095419bodyhtm

Kniha o světelneacute mikroskopii na www

Davidson and Abramowitz Optical Microscopy Review Article

httpolympusmagnetfsueduprimeropticalmicroscopyhtml

Přiacuteručka firmy Zeiss httpwwwusaskcabiologyscopesMicroscopyBasicspdf

Nikon httpwwwmicroscopyucom

Přiacuteručka firmy Nikon httpwwwareczdatafilezakladni_metody_svetelne_mikroskopiepdf

Odkazy na literaturu

httplommicroscopyweeblycombasics-of-light-microscopy-and-opticshtml

Virtuaacutelniacute obraacutezky

httpwwwolympusmicrocomprimerjava

httpzeiss-campusmagnetfsuedututorialsindexhtml

Historie mikroskopovaacuteniacute

Optickeacute principy

světelneacute mikroskopie

Přednaacuteška 1

Pavla Vaacutelovaacute 2018

naacutezev z řec mikroacutes = malyacute skopoacutes = pozorovatel

vynaacutelez mikroskopu ndash konec 16 stol (technickyacute rozmach lidstva)

1625 - naacutezev mikroskop odvozenyacute od naacutezvu teleskop

(Giovanni Faber z Bambergu ndash papežskyacute leacutekař )

H i s t o r i e o b j e v u m i k r o s k o p u

Dřiacutevějšiacute pozorovaacuteniacute

Řecko - Aristofanes Atheacutenskyacute (424-380 př n l) - ve hře bdquoOblakaldquo

popis zraněniacute paprskem slunce prochaacutezejiacuteciacuteho skleněnou

kouliacute naplněnou vodou

Řiacutemskaacute doba

- filosof Seneca (asi 4 přnl-65 nl) - zvětšeniacute piacutesmen

pomociacute skleněneacute koule naplněneacute vodou

- Klaudius Ptolemaios (asi 100-170 nl) ndash diacutelo bdquoOptikaldquo -

poznatky o odraze paprsků a lomu paprsků skrz sklo

11 stol - Ibn al Haitham (bdquoAlhazenldquo) (965-1039) - arabskyacute fyzik a

matematik diacutelo bdquoPojednaacuteniacute o opticeldquo ndash zkoumaacute vlastnosti

světla (lom a odraz) čočky a zrcadla

viz Anna Černaacute Mikroskop pod drobnohledem Živa 52017 str CXXVIII

14 stol ndash zvlaacutednutiacute techniky broušeniacute čoček do bryacuteliacute (italštiacute mniši)

konec 16 stol ndash vynaacutelez mikroskopu

kolem roku 1590 - Hans a Zacharias Janssenovi (Holandsko otec a syn)

H i s t o r i e o b j e v u m i k r o s k o p u

- konstrukce prvniacuteho použitelneacuteho mikroskopu (ze dvou čoček)

- čočky vypoukleacute i vyduteacute

- zvětšeniacute mikroskopu 60x

viz kniha a film bdquoJmeacuteno růželdquo od Umberta Eca

Systeacutem dvou čoček

16 stol

deacutelka 12 m

(tzv kompaudniacute mikroskop)

httpwwwmicroscopyfsueduprimermuseum

httpmicromagnetfsueduprimermuseumjanssenhtml

httpwwwapsorgpublicationsapsnews200403historycfm

Janssenův mikroskop

17 stol Galileo Galilei (1564-1642)

ndash italskyacute astronom a matematik

1604-1609 ndash konstrukce dalekohledu

- použitiacute složeneacuteho mikroskopu

nazvaneacuteho occhiolino

k vědeckyacutem uacutečelům (pozorovaacuteniacute

oka mouchy)

Nejasnosti kolem vynaacutelezu mikroskopu

ndash z dobovyacutech zpraacutev neniacute jasneacute zda se jednaacute o mikroskop

jehož okulaacuterem je spojka nebo o dalekohled s rozptylkou

(kteryacute použiacuteval Galileo)

Anthony van Leeuwenhoek (1632-1723)

ndash obchodniacutek s laacutetkami v holandskeacutem Delftu

ndash sestrojil jednočočkovyacute mikroskop silnyacute zvětšovaciacute

efekt čočky

(až 270x)

ndash nejprve zkoumaacuteniacute struktury laacutetek

později zkoumal listy květiny drobneacute organismy lidskou krev kůži vlasy hellip

- prvniacute viděl a popsal krevniacute buňky chovaacuteniacute lidskyacutech spermiiacute

- vyacuteroba asi 250 mikroskopů

17 stol

Jednočočkovyacute Leeuwenhoekův

mikroskop

httpbiologimediacentrecomwp-contentuploads201101image2png

Anglickyacute původ Italskyacute původ

17 stol

Prvniacute světelneacute mikroskopy

Jednočočkovyacute

mikroskop Dvoučočkoveacute

mikroskopy

Robert Hook (1635-1703) [huacutek]

ndash anglickyacute fyzik chemik geolog astronom hellip

ndash použiacuteval zakoupenyacute složenyacute mikroskop s viacutece

čočkami (tzv kompaudniacute) vylepšenyacute o kvalitniacute osvětleniacute

17 stol

Hookův mikroskop

- vylepšeniacute osvětleniacute použitiacute irisoveacute clony

irisovaacute clona

- zkoumaacuteniacute slabyacutech plaacutetků korku z korkovniacuteku

živeacute laacutetky jsou tvořeny buňkami

- 1665 - kniha bdquoMicrographialdquo

mikroskopickeacute pozorovaacuteniacute rostlinnyacutech

pletiv živočišnyacutech objektů a struktur

mineraacutelů

Rok vydaacuteniacute 1665 Micrographia or some Physiological Descriptions of Minute Bodies

made by Magnifying Glasses with Observations and Inquiries thereupon

London 1665

17 stol Leeuwenhoek Hook

Angličan Henry Power (1626ndash1668) ndash jako

prvniacute (1663) publikoval pozorovaacuteniacute mikroskopem

Marcello Malphighi (1628ndash1694)

italskyacute leacutekař

zakladatel mikroskopickeacute anatomie

- objev krevniacutech kapilaacuter savců (1661)

- malphigickeacute trubice hmyzu

18 stol

ndash mikroskopy přežily jako hračka pro zaacutebavu anglickyacutech gentlemanů zajiacutemajiacuteciacutech se o tajemstviacute přiacuterody

19 stol

zač 19 stol ndash Dollond Lister Amici - vynaacutelez

achromatickeacuteho objektivu

ndash do teacute doby použiacutevaacuteniacute jednočočkoveacuteho mikroskopu (dvoučočkovyacute

mikroskop podaacuteval značně zkreslenyacute obraz)

Vyacuteznačniacute vědci 19 stol použiacutevajiacuteciacute k svyacutem pozorovaacuteniacutem mikroskop

Robert Brown (1773-1858) - objev jaacutedra (1831)

Luis Pasteur (1822-1895) (francouzskyacute mikrobiolog)

- objev kvasinek

Robert Koch (1843-1910) (německyacute leacutekař a mikrobiolog)

- objev původců tuberkuloacutezy a cholery

Jan Evangelista Purkyně (1787-1869) (českyacute fyziolog)

- 1825 popsal jaacutedro u živočišneacute buňky (lupa)

od r 1832 použiacutevaacute kvalitniacute mikroskop

Microscope

stand VII

19 stol ndash dalšiacute vyacutevoj mikroskopů

Carl Zeiss ndash průmyslovaacute vyacuteroba mikroskopů (firma Zeiss)

Ernst Karl Abbe ndash teoretickaacute studia optickyacutech principů

Otto Schott ndash vyacutezkum optickeacuteho skla

August Koumlhler ndash kvalitniacute osvětleniacute

Otto Schott (1851-1935)

Ernst Abbe (1840-1905)

Carl Zeiss (1816-1888)

August Koumlhler (1866-1948)

Mikroskopy 19 stoletiacute

19 stol

20 stol

Konfokaacutelniacute mikroskop

A1R (Nikon)

BX60 (Olympus)

Laserovyacute fluorescenčniacute mikroskop bdquoLight Sheetldquo Centrum regionu Hanaacute pro biotechnologickyacute a zemědělskyacute vyacutezkum Odděleniacute buněčneacute biologie

21 stol

21 stol

Digitaacutelniacute holografickyacute mikroskop firmy Lynceacutee Tec

Důležitaacute data při rozvoji moderniacute světelneacute mikroskopie

1847 - Zahaacutejeniacute vyacuteroby mikroskopů firmou Carl Zeiss v Jeně

1903 - Ultramikroskop (Richard Zsigmondy NC 1925)

1911 - Fluorescenčniacute mikroskop (Carl Reichert)

1935 - Faacutezovyacute kontrast (Fritz Zernike NC 1953)

1955 - Diferenciaacutelniacute interferenčniacute kontrast (DIC ndash Nomarski)

1968 - Rastrovaciacute tandemovyacute konfokaacutelniacute mikroskop (TSCM)

1978 - Laserovyacute konfokaacutelniacute rastrovaciacute mikroskop

1994 - Princip STED mikroskopie (S W Hell NC 2014)

(Stimulated Emission Depletion ndash redukce fluorescence stimulovanou emisiacute)

po roce 2000 - rozvoj tzv superrozlišovaciacute mikroskopie

2006 - Super-resolučniacute fluorescenčniacute mikroskop (Eric Betzig

Stefan W Hell a William E Moerner NC za chemii 2014)

NC = Nobelova cena

30 leacuteta 20 stoletiacute

ndash hranice vyacutevoje optickeacuteho (paprskoveacuteho) mikroskopu

(hranice rozlišeniacute světelneacuteho mikroskopu je diacuteky velikosti deacutelky světla 02 microm)

- dalšiacute zvětšovaacuteniacute pozorovanyacutech objektů na jineacutem principu

- miacutesto světelneacuteho paprsku elektronovyacute paprsek

(= tok rychlyacutech elektronů)

- miacutesto skleněneacute čočky magnetickaacute čočka

1931 - Ernst Ruska Max Knoll

prvniacute elektronovyacute mikroskop

tzv prozařovaciacute transmisniacute EM

(TEM ndash Transmission Electron Microscope)

- originaacutelniacute zvětšeniacute 1 000 - 250 000x

Ernst Ruska (1906-1988)

1942 - rastrovaciacute EM

(SEM ndash Scanning Electron Microscope) - postupneacute bombardovaacuteniacute vzorku elektrony

- zvětšeniacute až 30 000x

EM UacuteMG AV ČR Praha-Krč

FEI ndash TECHNAIG2TEM + kryozařiacutezeniacute

200 kV (λ el = 00025 nm)

RS 01 nm

prvkovaacute analyacuteza vzorků

zařiacutezeniacute pro

prvkovou analyacutezu

vzorků

Foto Pavla Vaacutelovaacute 2010

Brněnštiacute vědci z Uacutestavu přiacutestrojoveacute techniky AV ČR (UacutePT) a Mendelovy

univerzity představili novou metodu pozorovaacuteniacute rostlinnyacutech vzorků v jejich

přirozeneacutem stavu (za využitiacute kryoprotektiv)

Viacutece na httpe-svete15cztechnikacesti-vedci-posunuli-hranice-elektronove-mikroskopie-1174818

Enviromentaacutelniacute rastrovaciacute elektronovyacute mikroskop Aquasem II

TEM TITAN FEI Company Mgr Klaacutera Čeacutepe PhD

Vysokorozlišovaciacute transmisniacute elektronovyacute mikroskop

schopnyacute nahleacutednout do struktury materiaacutelů až na uacuterovni atomů

a současně přesně zmapovat jejich chemickeacute složeniacute

Regionaacutelniacute centrum pokročilyacutech

materiaacutelů (RCPTM)

Odd uhliacutekoveacute nanostruktury

PřF UP OL

Vysokorozlišovaciacute transmisniacute

elektronovyacute mikroskop TITAN (FEI)

Foto Pavla Vaacutelovaacute 2015

Transmisniacute elektronovyacute

mikroskop Jeol

Regionaacutelniacute centrum pokročilyacutech materiaacutelů (RCPTM)

Odd uhliacutekoveacute nanostruktury PřF UP OL

Neoptickeacute mikroskopy

1981

Řaacutedkovaciacute tunelovyacute mikroskop (STM ndash Scanning Tunnelling Microscope)

- mapovaacuteniacute povrchu pomociacute pohybu vodiveacuteho hrotu nad vodivyacutem povrchem sledovaneacuteho materiaacutelu

1986

Mikroskop atomaacuterniacutech sil (AMF ndash Atomic Force Miroscope)

- skenovaacuteniacute povrchu materiaacutelu pomociacute hrotu zavěšeneacutem na pružneacutem vyacutekyvneacutem rameacutenku kteryacute je přitahovaacuten elektrostatickyacutemi a Van der Walsovyacutemi silami

Rozlišeniacute v řaacutedech pikometrů (10-12 m) ndash rozeznaacuteniacute struktur

jednotlivyacutech atomů

O p t i c k eacute p r i n c i p y

světelneacute mikroskopie

Reichl J Všetička M Encyklopedie fyziky [online] copy2006-2014

[vid 2014] Dostupneacute z httpfyzikajreichlcommainarticleview431-optika Lepil O (2013) Fyzika pro gymnaacutezia Optika Prometheus Praha 4 přepracovaneacute vydaacuteniacute

Murphy DB Davidson MW (2013) Fundamentals of Light

Microscopy and Electronic Imaging Willey-Blackwell Published

2013 by John Wiley amp Sons Inc Hoboken New Jersey

S v ě t l o

= čaacutest rozsaacutehleacute oblasti elektromagnetickeacuteho zaacuteřeniacute

kterou vniacutemaacuteme zrakem

Rozhlasoveacute a raacutedioveacute vlny 250 km - 1 mm

Infračerveneacute zaacuteřeniacute 05 mm - 08 μm

Světlo (viditelneacute zaacuteřeniacute) 08 μm - 04 μm

Ultrafialoveacute zaacuteřeniacute 04 microm - 01 microm

Roumlntgenovo zaacuteřeniacute (X-paprsky) 15 nm - 0005 nm

γ-zaacuteřeniacute pod 00001 nm

Přibližneacute hodnoty ndash individuaacutelniacute vlastnosti zraku různyacutech lidiacute

S v ě t l o

= čaacutest rozsaacutehleacute oblasti elektromagnetickeacuteho zaacuteřeniacute

kterou vniacutemaacuteme zrakem

rarr se zkracujiacuteciacute se vlnovou deacutelkou se zvyšuje frekvence (energie)

Viditelneacute

Vlnoveacute deacutelky světla a relativniacute citlivost oka

Murphy DB Davidson MW (2013) Fundamentals of Light Microscopy and Electronic

Imaging Willey-Blackwell Published 2013 by John Wiley amp Sons Inc Hoboken New Jersey

= zrakovyacute pigment citlivyacute na

světlo nachaacutezejiacuteciacute se v tyčinkaacutech Jodopsin = zrakovyacute pigment citlivyacute na

barvu nachaacutezejiacuteciacute se v čiacutepciacutech

S v ě t l o

Duaacutelniacute charakter světla ndash vlněniacute i proud čaacutestic (fotonů)

Vlnovyacute model světla

vlna elektrickaacute a magnetickaacute (elektromagnetickaacute vlna je tvořena oscilujiacuteciacutem elektrickyacutem a

magnetickyacutem polem na sebe kolmyacutech a nesouciacutech vpřed energii)

Pro uacutečinky světla v mikroskopu je důležitaacute vlna elektrickaacute

= přiacutečneacute vlněniacute

postupneacute kmitaacuteniacute

jednotlivyacutech vedle sebe

ležiacuteciacutech bodů

Scheacutema světla jako elektromagnetickeacute vlny

Obr httpwwwprosoundwebcomarticleprintinvaders_from_

outer_space_electromagnetic_radiation_interference

λ - vlnovaacute deacutelka

(v oblasti svět zaacuteřeniacute

v rozmeziacute od 380 do 780 nm)

určuje barvu světla

a - amplituda

nejvyššiacute hodnota

určuje intenzitu světla

Z hlediska vlnoveacute deacutelky rozlišujeme

polychromatickeacute x monochromatickeacute světlo (selekce pomociacute barevnyacutech filtrů rarr jednotnaacute vlnovaacute deacutelka světlo zeleneacute červeneacute hellip)

Elektrickaacute vlna - sinusoida

Charakterizovaacutena dvěma veličinami

Pazourek 1975

Vlastnosti světla

Rovnoměrneacute šiacuteřeniacute světla ze zaacuteřiacuteciacuteho bodu na všechny strany rarr vlnovaacute plocha tvaru koule

Paprsek ndash směr kteryacutem se vlněniacute šiacuteřiacute a kteryacute je kolmyacute

na vlnoplochu

Pazourek 1975

- paprsek nepolarizovanyacute (A C) ndash kmitaacute v každeacutem

miacutestě a v průběhu času ve všech možnyacutech směrech

kolmyacutech na směr šiacuteřeniacute paprsku

- paprsek polarizovanyacute (B D1 D2) - kmitaacute v jedneacute

rovině přičemž rovina kmitů (vlněniacute) jednoho z nich je

kolmaacute k rovině kmitů druheacuteho

Pazourek 1975

Polarizovaneacute světlo viz

httpswwwyoutubecomwatchv=gP751qpm4n4

Murphy DB Davidson MW (2013) Fundamentals of Light Microscopy and

Electronic Imaging Jonh Wkiley amp Sons Inc Hoboken New Jersey

Osm různyacutech vlnovyacutech forem světla (znaacutezorňujiacuteciacutech různou kvalitu světla)

Odraz a lom světelnyacutech paprsků

v prostřediacutech různeacute hustoty

Důležitaacute charakteristika prostřediacute

index lomu ( n ) (= optickaacute hustota prostřediacute)

c = rychlost světla ve vakuu (stejnaacute pro všechny λ )

v = rychlost světla určiteacute vlnoveacute deacutelky ve zkoumaneacute laacutetce

c

n =

v

zde absolutniacute index lomu

(bezrozměrnaacute fyzikaacutelniacute veličina jeho jednotka je 1)

Rychlost světla (c) určiteacute vlnoveacute

deacutelky v různyacutech prostřediacutech

c ve vakuu

= 300 000 kms

Index lomu (n) některyacutech laacutetek

vzduch (vakuum) helliphellip 100 (vzduch 10002718)

voda helliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 133

plexisklo helliphelliphelliphelliphelliphellip 140 ndash 152

křemenneacute sklo helliphellip hellip 145 (čočka z křemene z Ninive ndash 7 stol přnl)

běžneacute sklo helliphelliphelliphelliphellip 151

cedrovyacute olej helliphelliphelliphelliphellip 151

imerzniacute olej Olympus hellip 1516 pro fluorescenci 1404

kanadskyacute balzaacutem helliphellip 150

krystal NaCl helliphelliphelliphellip 154

korunoveacute sklo helliphelliphelliphellip 145 ndash 156 (sodno-draselneacute bezolovnateacute)

flintoveacute sklo helliphelliphelliphellip 162 ndash 180 (olovnateacute)

diamant helliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 242

Index lomu je vždy většiacute než 100

očniacute čočka hellip 1406

sklivec helliphelliphellip 1336

Odraz světla rovnyacutem zrcadlem (reflexe)

Zaacutekony

1 Paprsek dopadajiacuteciacute kolmice dopadu a paprsek odraženyacute

ležiacute v jedneacute rovině

2 Uacutehel odrazu se rovnaacute uacutehlu dopadu

Odraz a lom paprsku

k

Důležiteacute pro mikroskopii (astronomii)

- neniacute zaacutevislost na vlnoveacute deacutelce světla (λ)

- na rozdiacutel od lomu paprsků se světelneacute

paprsky se odraacutežejiacute stejně

Pazourek 1975

Zaacutekony

1 Paprsek dopadajiacuteciacute kolmice lomu a paprsek lomenyacute ležiacute v teacuteže rovině

Lom světla (refrakce)

2 Při přechodu z prostřediacute opticky řidšiacuteho do prostřediacute opticky hustšiacuteho se paprsek laacuteme ke kolmici (A)

a z prostřediacute opticky hustšiacuteho

do prostřediacute opticky řidšiacuteho

se laacuteme od kolmice (B)

(C a D) ndash uacuteplnyacute odraz při tzv

mezniacutem uacutehlu dopadu paprsku

v přiacutepadě lomu od kolmice (B)

(viz Nikol odrazneacute hranoly světlovodneacute vlaacutekno nebo fluorescenčniacute metoda TIRFM ndash totaacutelniacute odraz exitačniacuteho zaacuteřeniacute)

Pazourek 1975

Svatyacute Kryštof od

švyacutecarskeacuteho maliacuteře

Konrada Witze (kolem 1400ndash1446)

Witz byl jedniacutem z prvniacutech

maliacuteřů kteryacute namaloval

přesnyacute způsob odrazu

světla na vodě

Disperze (rozklad) světla

= důsledek zaacutevislosti rychlosti světla v laacutetkaacutech na frekvenci světla

(λ = c f)

světlo různyacutech barev (λ)

se laacuteme různě

(červeneacute se lomiacute meacuteně než modreacute)

Přiacuteklad disperze (rozkladu) světla

Primaacuterniacute a sekundaacuterniacute duha Severniacute Čechy Foto Pavla Vaacutelovaacute 2010

D u h a

Jeden z mnoha

optickyacutech

jevů (fotometeorů)

v atmosfeacuteře

Rok 312 nl - před bitvou byzantskeacuteho ciacutesaře Konstantina I (272-337) s

konkurenčniacutem ciacutesařem Maxentiem u bran Řiacutema (tzv bitva u Milvijskeacuteho mostu) se

na obloze objevily tři zaacuteřiacuteciacute křiacuteže (halovyacute sloup parheacutelia a parhelickyacute oblouk)

Konstantin bitvu proti přesile vyhraacutel sjednotil řiacuteši a povolil v niacute vyznaacutevat křesťanstviacute

Maleacute halo (22deg) (viz 1) vedlejšiacute slunce (2) a horniacute a dolniacute halovyacute sloup (3)

vznikajiacuteciacute odrazem a lomem světelnyacutech paprsků na krystalciacutech ledu

Lom světla a dějiny

httptmagazineblogsnytimescom20121126halo-effect_r=0

1

3

2 2

3

Ohyb (difrakce) a interference

světla

Foto Pavla Vaacutelovaacute Bukovany 2015 Rozklad světla na CD - světlo žaacuterovky

Rozklad biacuteleacuteho světla na mřiacutežce

Pevnost poznaacuteniacute Olomouc 2015

Foto Pavla Vaacutelovaacute Olomouc 2015

Ohyb (difrakce) a interference

světla

Ohyb (difrakce) a interference

Difrakčniacute obrazec obsahuje světlaacute a tmavaacute miacutesta kteraacute se

střiacutedajiacute - světlaacute miacutesta nazyacutevaacuteme maxima a tmavaacute minima

Interference světla = sklaacutedaacuteniacute světelnyacutech vln

Předpoklad světlo musiacute byacutet koherentniacute

Podmiacutenka koherence

- paprsky musiacute miacutet stejnou frekvenci

- paprsky musiacute byacutet navzaacutejem rovnoběžneacute

- paprsky musiacute miacutet na sobě nezaacutevislyacute draacutehovyacute (faacutezovyacute) rozdiacutel

Vznik koherentniacuteho zaacuteřeniacute

rozděleniacutem světla

- buď odrazem pomociacute zrcadel

- nebo lomem pomociacute hranolů

Foto Pavla Vaacutelovaacute Praha 151 2016

Interference světla

stejnyacute způsob vlněniacute

(faacuteze je vzaacutejemně posunuta o sudeacute

naacutesobky λ2)

vznik interferenčniacuteho maxima

(konstruktivniacute interference)

Interference světla

asynchronniacute vlněniacute

(vzaacutejemně posunutaacute faacuteze

o licheacute naacutesobky λ2)

vznik interferenčniacuteho

minima

(destruktivniacute interference)

rarr zaacuteřeniacute zanikaacute

rarr zeslabeniacute zaacuteřeniacute

Interference dvou vrstev elektromagnetickeacuteho zaacuteřeniacute u Slunce

Čočky ndash zaacutekladniacute součaacutesti

mikroskopu

= průhlednaacute (nejčastěji skleněnaacute) tělesa omezenaacute

vypuklyacutemi nebo vydutyacutemi kulovityacutemi plochami lišiacuteciacute se od sveacuteho okoliacute odlišnyacutem indexem lomu

Zaacutekladniacute typy čoček

spojky (vypukleacute neboli konvexniacute)

rozptylky (vyduteacute konkaacutevniacute)

Pazourek 1975

Optickaacute osa ( o ) prochaacuteziacute středem čočky

Ohnisko ( F ) - bod do ktereacuteho se soustřeďujiacute paprsky probiacutehajiacuteciacute rovnoběžně s optickou osou

- 2 ohniska - předmětoveacute ohnisko ( F )

obrazoveacute ohnisko ( Facute )

- ohniskovaacute vzdaacutelenost ( f )

vzdaacutelenost ohniska od hlavniacute roviny proloženeacute středem čočky

- dvojnaacutesobnaacute ohniskovaacute vzdaacutelenost ( P Pacute )

Obrazovyacute prostor - prostor v němž vznikaacute obraz

Důležiteacute charakteristiky čočky

f

o

hlavniacute rovina

Pazourek 1975

V přiacutepadě velmi tenkeacute čočky

bull Obraz za optickou soustavou

rarr obraz s k u t e č n yacute

Skutečnyacute obraz je možneacute zachytit na stiacuteniacutetko

nebo na fotografickou desku neskutečnyacute nikoliv

bull Obraz před soustavou

rarr obraz n e s k u t e č n yacute (zdaacutenlivyacute virtuaacutelniacute)

Obraz skutečnyacute a neskutečnyacute

A ndash předmět Aacute- obraz předmětu

Upraveno podle Pazourek 1975

Francouz Augustin Jean Fresnel (1788-1827) [frenel]

Fresnelova čočka [frenelova]

- plochyacute tvar (zachovaacuteny pouze čaacutesti ktereacute měniacute směr chodu světelnyacutech paprsků)

- vyacuterazně nižšiacute hmotnost při zachovaacuteniacute podobnyacutech parametrů

Využitiacute infračidla pohybu semafory světlomety (majaacuteky) a reflektory (světla aut

divadelniacutech a filmovyacutech osvětlovaciacutech zařiacutezeniacute) zpětneacute projektory slunečniacute kolektory

na zaacutekladě tohoto principu takeacute vyacuteroba 3D displejů k mobilniacutem telefonům a televiziacutem

httpwwwmffcuniczverejnostzpravicky03_lupahtm

čočka na majaacuteku

Čočky v budoucnosti

Pokus o vyacuterobu tzv dokonaleacute čočky

Prototyp - upraveneacute tzv Maxwellovo rybiacute oko

- paprsky světla se v něm pohybujiacute po kružniciacutech a

na rozdiacutel od běžnyacutech čoček se při zobrazeniacute využijiacute

všechny paprsky

- superčočky využiacutevajiacute geometrie k tomu aby se světlo

soustředilo do oblasti menšiacute než je jeho vlnovaacute deacutelka

(zatiacutem se neviacute jak do čočky vyhovujiacuteciacutem způsobem

doveacutest světlo)

Využitiacute v budoucnu

mimo jineacute v pozorovaacuteniacute živyacutech buněk při velkeacutem zvětšeniacute

pomociacute obyčejneacuteho světla bez jejich narušeniacute

Viacutece viz Plaacutešek J Mikroskopy se superčočkami httpwwwvesmircz | Vesmiacuter 91 531 zaacuteřiacute 2012

Hranoly

- doplňky optickyacutech systeacutemů

- většinou tvar rovnostranneacuteho trojuacutehelniacuteka

- využiacutevajiacute uacuteplneacuteho odrazu

Funkce

- změna chodu paprsků pod různyacutemi uacutehly

- rozdvojeniacute paprsků

Pazourek 1975

Různeacute typy odraznyacutech hranolů

Hranoly

Různeacute typy hranolů

httplaserykvalitneczimagestext_25_zakladyoptiky1odrazne_hranolyjpg

Viz dichroickeacute zrcadlo u fluorescenčniacuteho mikroskopu

Chod paprsků v binokulaacuterniacutem tubusu

Pazourek 1975

Nikol = hranol z islandskeacuteho vaacutepence

rarr polarizace světla

Dvojlomnyacute vaacutepencovyacute

krystal

ř ndash paprsek řaacutednyacute (zanikaacute na začerněneacute ploše)

mř ndash paprsek mimořaacutednyacute (lineaacuterně polarizovanyacute

využit k osvětleniacute)

začerněnaacute plocha

Nikol

Pazourek 1975

vzduchovaacute štěrbina

- rychlost světla je

v různyacutech směrech různaacute

- uacutehel paprsku řaacutedneacuteho a

mimořaacutedneacuteho je odlišnyacute

(u Vikingů - slunečniacute kaacutemen

soacutelarsteinn)

Chod paprsků ve světlovodneacutem vlaacuteknu

Princip uacuteplnyacute odraz paprsku

- uvnitř skleněneacuteho vlaacutekna je opticky hustšiacute prostřediacute

- nutnost dostatečně silneacuteho světelneacuteho zdroje

Světlovodnaacute vlaacutekna

Pazourek 1975

Širokeacute využitiacute v praxi optickeacute kabely ndash přenos signaacutelů ve sdělovaciacute technice

světlovody umožňujiacuteciacute veacutest denniacute světlo vedeniacute světla u stereolup endoskopů hellip

Page 9: Světelná a elektronová mikroskopie...(AMF – Atomic Force Miroscope) - skenování povrchu materiálu pomocí hrotu zavěšeném na pružném výkyvném raménku, který je přitahován

Historie mikroskopovaacuteniacute

Optickeacute principy

světelneacute mikroskopie

Přednaacuteška 1

Pavla Vaacutelovaacute 2018

naacutezev z řec mikroacutes = malyacute skopoacutes = pozorovatel

vynaacutelez mikroskopu ndash konec 16 stol (technickyacute rozmach lidstva)

1625 - naacutezev mikroskop odvozenyacute od naacutezvu teleskop

(Giovanni Faber z Bambergu ndash papežskyacute leacutekař )

H i s t o r i e o b j e v u m i k r o s k o p u

Dřiacutevějšiacute pozorovaacuteniacute

Řecko - Aristofanes Atheacutenskyacute (424-380 př n l) - ve hře bdquoOblakaldquo

popis zraněniacute paprskem slunce prochaacutezejiacuteciacuteho skleněnou

kouliacute naplněnou vodou

Řiacutemskaacute doba

- filosof Seneca (asi 4 přnl-65 nl) - zvětšeniacute piacutesmen

pomociacute skleněneacute koule naplněneacute vodou

- Klaudius Ptolemaios (asi 100-170 nl) ndash diacutelo bdquoOptikaldquo -

poznatky o odraze paprsků a lomu paprsků skrz sklo

11 stol - Ibn al Haitham (bdquoAlhazenldquo) (965-1039) - arabskyacute fyzik a

matematik diacutelo bdquoPojednaacuteniacute o opticeldquo ndash zkoumaacute vlastnosti

světla (lom a odraz) čočky a zrcadla

viz Anna Černaacute Mikroskop pod drobnohledem Živa 52017 str CXXVIII

14 stol ndash zvlaacutednutiacute techniky broušeniacute čoček do bryacuteliacute (italštiacute mniši)

konec 16 stol ndash vynaacutelez mikroskopu

kolem roku 1590 - Hans a Zacharias Janssenovi (Holandsko otec a syn)

H i s t o r i e o b j e v u m i k r o s k o p u

- konstrukce prvniacuteho použitelneacuteho mikroskopu (ze dvou čoček)

- čočky vypoukleacute i vyduteacute

- zvětšeniacute mikroskopu 60x

viz kniha a film bdquoJmeacuteno růželdquo od Umberta Eca

Systeacutem dvou čoček

16 stol

deacutelka 12 m

(tzv kompaudniacute mikroskop)

httpwwwmicroscopyfsueduprimermuseum

httpmicromagnetfsueduprimermuseumjanssenhtml

httpwwwapsorgpublicationsapsnews200403historycfm

Janssenův mikroskop

17 stol Galileo Galilei (1564-1642)

ndash italskyacute astronom a matematik

1604-1609 ndash konstrukce dalekohledu

- použitiacute složeneacuteho mikroskopu

nazvaneacuteho occhiolino

k vědeckyacutem uacutečelům (pozorovaacuteniacute

oka mouchy)

Nejasnosti kolem vynaacutelezu mikroskopu

ndash z dobovyacutech zpraacutev neniacute jasneacute zda se jednaacute o mikroskop

jehož okulaacuterem je spojka nebo o dalekohled s rozptylkou

(kteryacute použiacuteval Galileo)

Anthony van Leeuwenhoek (1632-1723)

ndash obchodniacutek s laacutetkami v holandskeacutem Delftu

ndash sestrojil jednočočkovyacute mikroskop silnyacute zvětšovaciacute

efekt čočky

(až 270x)

ndash nejprve zkoumaacuteniacute struktury laacutetek

později zkoumal listy květiny drobneacute organismy lidskou krev kůži vlasy hellip

- prvniacute viděl a popsal krevniacute buňky chovaacuteniacute lidskyacutech spermiiacute

- vyacuteroba asi 250 mikroskopů

17 stol

Jednočočkovyacute Leeuwenhoekův

mikroskop

httpbiologimediacentrecomwp-contentuploads201101image2png

Anglickyacute původ Italskyacute původ

17 stol

Prvniacute světelneacute mikroskopy

Jednočočkovyacute

mikroskop Dvoučočkoveacute

mikroskopy

Robert Hook (1635-1703) [huacutek]

ndash anglickyacute fyzik chemik geolog astronom hellip

ndash použiacuteval zakoupenyacute složenyacute mikroskop s viacutece

čočkami (tzv kompaudniacute) vylepšenyacute o kvalitniacute osvětleniacute

17 stol

Hookův mikroskop

- vylepšeniacute osvětleniacute použitiacute irisoveacute clony

irisovaacute clona

- zkoumaacuteniacute slabyacutech plaacutetků korku z korkovniacuteku

živeacute laacutetky jsou tvořeny buňkami

- 1665 - kniha bdquoMicrographialdquo

mikroskopickeacute pozorovaacuteniacute rostlinnyacutech

pletiv živočišnyacutech objektů a struktur

mineraacutelů

Rok vydaacuteniacute 1665 Micrographia or some Physiological Descriptions of Minute Bodies

made by Magnifying Glasses with Observations and Inquiries thereupon

London 1665

17 stol Leeuwenhoek Hook

Angličan Henry Power (1626ndash1668) ndash jako

prvniacute (1663) publikoval pozorovaacuteniacute mikroskopem

Marcello Malphighi (1628ndash1694)

italskyacute leacutekař

zakladatel mikroskopickeacute anatomie

- objev krevniacutech kapilaacuter savců (1661)

- malphigickeacute trubice hmyzu

18 stol

ndash mikroskopy přežily jako hračka pro zaacutebavu anglickyacutech gentlemanů zajiacutemajiacuteciacutech se o tajemstviacute přiacuterody

19 stol

zač 19 stol ndash Dollond Lister Amici - vynaacutelez

achromatickeacuteho objektivu

ndash do teacute doby použiacutevaacuteniacute jednočočkoveacuteho mikroskopu (dvoučočkovyacute

mikroskop podaacuteval značně zkreslenyacute obraz)

Vyacuteznačniacute vědci 19 stol použiacutevajiacuteciacute k svyacutem pozorovaacuteniacutem mikroskop

Robert Brown (1773-1858) - objev jaacutedra (1831)

Luis Pasteur (1822-1895) (francouzskyacute mikrobiolog)

- objev kvasinek

Robert Koch (1843-1910) (německyacute leacutekař a mikrobiolog)

- objev původců tuberkuloacutezy a cholery

Jan Evangelista Purkyně (1787-1869) (českyacute fyziolog)

- 1825 popsal jaacutedro u živočišneacute buňky (lupa)

od r 1832 použiacutevaacute kvalitniacute mikroskop

Microscope

stand VII

19 stol ndash dalšiacute vyacutevoj mikroskopů

Carl Zeiss ndash průmyslovaacute vyacuteroba mikroskopů (firma Zeiss)

Ernst Karl Abbe ndash teoretickaacute studia optickyacutech principů

Otto Schott ndash vyacutezkum optickeacuteho skla

August Koumlhler ndash kvalitniacute osvětleniacute

Otto Schott (1851-1935)

Ernst Abbe (1840-1905)

Carl Zeiss (1816-1888)

August Koumlhler (1866-1948)

Mikroskopy 19 stoletiacute

19 stol

20 stol

Konfokaacutelniacute mikroskop

A1R (Nikon)

BX60 (Olympus)

Laserovyacute fluorescenčniacute mikroskop bdquoLight Sheetldquo Centrum regionu Hanaacute pro biotechnologickyacute a zemědělskyacute vyacutezkum Odděleniacute buněčneacute biologie

21 stol

21 stol

Digitaacutelniacute holografickyacute mikroskop firmy Lynceacutee Tec

Důležitaacute data při rozvoji moderniacute světelneacute mikroskopie

1847 - Zahaacutejeniacute vyacuteroby mikroskopů firmou Carl Zeiss v Jeně

1903 - Ultramikroskop (Richard Zsigmondy NC 1925)

1911 - Fluorescenčniacute mikroskop (Carl Reichert)

1935 - Faacutezovyacute kontrast (Fritz Zernike NC 1953)

1955 - Diferenciaacutelniacute interferenčniacute kontrast (DIC ndash Nomarski)

1968 - Rastrovaciacute tandemovyacute konfokaacutelniacute mikroskop (TSCM)

1978 - Laserovyacute konfokaacutelniacute rastrovaciacute mikroskop

1994 - Princip STED mikroskopie (S W Hell NC 2014)

(Stimulated Emission Depletion ndash redukce fluorescence stimulovanou emisiacute)

po roce 2000 - rozvoj tzv superrozlišovaciacute mikroskopie

2006 - Super-resolučniacute fluorescenčniacute mikroskop (Eric Betzig

Stefan W Hell a William E Moerner NC za chemii 2014)

NC = Nobelova cena

30 leacuteta 20 stoletiacute

ndash hranice vyacutevoje optickeacuteho (paprskoveacuteho) mikroskopu

(hranice rozlišeniacute světelneacuteho mikroskopu je diacuteky velikosti deacutelky světla 02 microm)

- dalšiacute zvětšovaacuteniacute pozorovanyacutech objektů na jineacutem principu

- miacutesto světelneacuteho paprsku elektronovyacute paprsek

(= tok rychlyacutech elektronů)

- miacutesto skleněneacute čočky magnetickaacute čočka

1931 - Ernst Ruska Max Knoll

prvniacute elektronovyacute mikroskop

tzv prozařovaciacute transmisniacute EM

(TEM ndash Transmission Electron Microscope)

- originaacutelniacute zvětšeniacute 1 000 - 250 000x

Ernst Ruska (1906-1988)

1942 - rastrovaciacute EM

(SEM ndash Scanning Electron Microscope) - postupneacute bombardovaacuteniacute vzorku elektrony

- zvětšeniacute až 30 000x

EM UacuteMG AV ČR Praha-Krč

FEI ndash TECHNAIG2TEM + kryozařiacutezeniacute

200 kV (λ el = 00025 nm)

RS 01 nm

prvkovaacute analyacuteza vzorků

zařiacutezeniacute pro

prvkovou analyacutezu

vzorků

Foto Pavla Vaacutelovaacute 2010

Brněnštiacute vědci z Uacutestavu přiacutestrojoveacute techniky AV ČR (UacutePT) a Mendelovy

univerzity představili novou metodu pozorovaacuteniacute rostlinnyacutech vzorků v jejich

přirozeneacutem stavu (za využitiacute kryoprotektiv)

Viacutece na httpe-svete15cztechnikacesti-vedci-posunuli-hranice-elektronove-mikroskopie-1174818

Enviromentaacutelniacute rastrovaciacute elektronovyacute mikroskop Aquasem II

TEM TITAN FEI Company Mgr Klaacutera Čeacutepe PhD

Vysokorozlišovaciacute transmisniacute elektronovyacute mikroskop

schopnyacute nahleacutednout do struktury materiaacutelů až na uacuterovni atomů

a současně přesně zmapovat jejich chemickeacute složeniacute

Regionaacutelniacute centrum pokročilyacutech

materiaacutelů (RCPTM)

Odd uhliacutekoveacute nanostruktury

PřF UP OL

Vysokorozlišovaciacute transmisniacute

elektronovyacute mikroskop TITAN (FEI)

Foto Pavla Vaacutelovaacute 2015

Transmisniacute elektronovyacute

mikroskop Jeol

Regionaacutelniacute centrum pokročilyacutech materiaacutelů (RCPTM)

Odd uhliacutekoveacute nanostruktury PřF UP OL

Neoptickeacute mikroskopy

1981

Řaacutedkovaciacute tunelovyacute mikroskop (STM ndash Scanning Tunnelling Microscope)

- mapovaacuteniacute povrchu pomociacute pohybu vodiveacuteho hrotu nad vodivyacutem povrchem sledovaneacuteho materiaacutelu

1986

Mikroskop atomaacuterniacutech sil (AMF ndash Atomic Force Miroscope)

- skenovaacuteniacute povrchu materiaacutelu pomociacute hrotu zavěšeneacutem na pružneacutem vyacutekyvneacutem rameacutenku kteryacute je přitahovaacuten elektrostatickyacutemi a Van der Walsovyacutemi silami

Rozlišeniacute v řaacutedech pikometrů (10-12 m) ndash rozeznaacuteniacute struktur

jednotlivyacutech atomů

O p t i c k eacute p r i n c i p y

světelneacute mikroskopie

Reichl J Všetička M Encyklopedie fyziky [online] copy2006-2014

[vid 2014] Dostupneacute z httpfyzikajreichlcommainarticleview431-optika Lepil O (2013) Fyzika pro gymnaacutezia Optika Prometheus Praha 4 přepracovaneacute vydaacuteniacute

Murphy DB Davidson MW (2013) Fundamentals of Light

Microscopy and Electronic Imaging Willey-Blackwell Published

2013 by John Wiley amp Sons Inc Hoboken New Jersey

S v ě t l o

= čaacutest rozsaacutehleacute oblasti elektromagnetickeacuteho zaacuteřeniacute

kterou vniacutemaacuteme zrakem

Rozhlasoveacute a raacutedioveacute vlny 250 km - 1 mm

Infračerveneacute zaacuteřeniacute 05 mm - 08 μm

Světlo (viditelneacute zaacuteřeniacute) 08 μm - 04 μm

Ultrafialoveacute zaacuteřeniacute 04 microm - 01 microm

Roumlntgenovo zaacuteřeniacute (X-paprsky) 15 nm - 0005 nm

γ-zaacuteřeniacute pod 00001 nm

Přibližneacute hodnoty ndash individuaacutelniacute vlastnosti zraku různyacutech lidiacute

S v ě t l o

= čaacutest rozsaacutehleacute oblasti elektromagnetickeacuteho zaacuteřeniacute

kterou vniacutemaacuteme zrakem

rarr se zkracujiacuteciacute se vlnovou deacutelkou se zvyšuje frekvence (energie)

Viditelneacute

Vlnoveacute deacutelky světla a relativniacute citlivost oka

Murphy DB Davidson MW (2013) Fundamentals of Light Microscopy and Electronic

Imaging Willey-Blackwell Published 2013 by John Wiley amp Sons Inc Hoboken New Jersey

= zrakovyacute pigment citlivyacute na

světlo nachaacutezejiacuteciacute se v tyčinkaacutech Jodopsin = zrakovyacute pigment citlivyacute na

barvu nachaacutezejiacuteciacute se v čiacutepciacutech

S v ě t l o

Duaacutelniacute charakter světla ndash vlněniacute i proud čaacutestic (fotonů)

Vlnovyacute model světla

vlna elektrickaacute a magnetickaacute (elektromagnetickaacute vlna je tvořena oscilujiacuteciacutem elektrickyacutem a

magnetickyacutem polem na sebe kolmyacutech a nesouciacutech vpřed energii)

Pro uacutečinky světla v mikroskopu je důležitaacute vlna elektrickaacute

= přiacutečneacute vlněniacute

postupneacute kmitaacuteniacute

jednotlivyacutech vedle sebe

ležiacuteciacutech bodů

Scheacutema světla jako elektromagnetickeacute vlny

Obr httpwwwprosoundwebcomarticleprintinvaders_from_

outer_space_electromagnetic_radiation_interference

λ - vlnovaacute deacutelka

(v oblasti svět zaacuteřeniacute

v rozmeziacute od 380 do 780 nm)

určuje barvu světla

a - amplituda

nejvyššiacute hodnota

určuje intenzitu světla

Z hlediska vlnoveacute deacutelky rozlišujeme

polychromatickeacute x monochromatickeacute světlo (selekce pomociacute barevnyacutech filtrů rarr jednotnaacute vlnovaacute deacutelka světlo zeleneacute červeneacute hellip)

Elektrickaacute vlna - sinusoida

Charakterizovaacutena dvěma veličinami

Pazourek 1975

Vlastnosti světla

Rovnoměrneacute šiacuteřeniacute světla ze zaacuteřiacuteciacuteho bodu na všechny strany rarr vlnovaacute plocha tvaru koule

Paprsek ndash směr kteryacutem se vlněniacute šiacuteřiacute a kteryacute je kolmyacute

na vlnoplochu

Pazourek 1975

- paprsek nepolarizovanyacute (A C) ndash kmitaacute v každeacutem

miacutestě a v průběhu času ve všech možnyacutech směrech

kolmyacutech na směr šiacuteřeniacute paprsku

- paprsek polarizovanyacute (B D1 D2) - kmitaacute v jedneacute

rovině přičemž rovina kmitů (vlněniacute) jednoho z nich je

kolmaacute k rovině kmitů druheacuteho

Pazourek 1975

Polarizovaneacute světlo viz

httpswwwyoutubecomwatchv=gP751qpm4n4

Murphy DB Davidson MW (2013) Fundamentals of Light Microscopy and

Electronic Imaging Jonh Wkiley amp Sons Inc Hoboken New Jersey

Osm různyacutech vlnovyacutech forem světla (znaacutezorňujiacuteciacutech různou kvalitu světla)

Odraz a lom světelnyacutech paprsků

v prostřediacutech různeacute hustoty

Důležitaacute charakteristika prostřediacute

index lomu ( n ) (= optickaacute hustota prostřediacute)

c = rychlost světla ve vakuu (stejnaacute pro všechny λ )

v = rychlost světla určiteacute vlnoveacute deacutelky ve zkoumaneacute laacutetce

c

n =

v

zde absolutniacute index lomu

(bezrozměrnaacute fyzikaacutelniacute veličina jeho jednotka je 1)

Rychlost světla (c) určiteacute vlnoveacute

deacutelky v různyacutech prostřediacutech

c ve vakuu

= 300 000 kms

Index lomu (n) některyacutech laacutetek

vzduch (vakuum) helliphellip 100 (vzduch 10002718)

voda helliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 133

plexisklo helliphelliphelliphelliphelliphellip 140 ndash 152

křemenneacute sklo helliphellip hellip 145 (čočka z křemene z Ninive ndash 7 stol přnl)

běžneacute sklo helliphelliphelliphelliphellip 151

cedrovyacute olej helliphelliphelliphelliphellip 151

imerzniacute olej Olympus hellip 1516 pro fluorescenci 1404

kanadskyacute balzaacutem helliphellip 150

krystal NaCl helliphelliphelliphellip 154

korunoveacute sklo helliphelliphelliphellip 145 ndash 156 (sodno-draselneacute bezolovnateacute)

flintoveacute sklo helliphelliphelliphellip 162 ndash 180 (olovnateacute)

diamant helliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 242

Index lomu je vždy většiacute než 100

očniacute čočka hellip 1406

sklivec helliphelliphellip 1336

Odraz světla rovnyacutem zrcadlem (reflexe)

Zaacutekony

1 Paprsek dopadajiacuteciacute kolmice dopadu a paprsek odraženyacute

ležiacute v jedneacute rovině

2 Uacutehel odrazu se rovnaacute uacutehlu dopadu

Odraz a lom paprsku

k

Důležiteacute pro mikroskopii (astronomii)

- neniacute zaacutevislost na vlnoveacute deacutelce světla (λ)

- na rozdiacutel od lomu paprsků se světelneacute

paprsky se odraacutežejiacute stejně

Pazourek 1975

Zaacutekony

1 Paprsek dopadajiacuteciacute kolmice lomu a paprsek lomenyacute ležiacute v teacuteže rovině

Lom světla (refrakce)

2 Při přechodu z prostřediacute opticky řidšiacuteho do prostřediacute opticky hustšiacuteho se paprsek laacuteme ke kolmici (A)

a z prostřediacute opticky hustšiacuteho

do prostřediacute opticky řidšiacuteho

se laacuteme od kolmice (B)

(C a D) ndash uacuteplnyacute odraz při tzv

mezniacutem uacutehlu dopadu paprsku

v přiacutepadě lomu od kolmice (B)

(viz Nikol odrazneacute hranoly světlovodneacute vlaacutekno nebo fluorescenčniacute metoda TIRFM ndash totaacutelniacute odraz exitačniacuteho zaacuteřeniacute)

Pazourek 1975

Svatyacute Kryštof od

švyacutecarskeacuteho maliacuteře

Konrada Witze (kolem 1400ndash1446)

Witz byl jedniacutem z prvniacutech

maliacuteřů kteryacute namaloval

přesnyacute způsob odrazu

světla na vodě

Disperze (rozklad) světla

= důsledek zaacutevislosti rychlosti světla v laacutetkaacutech na frekvenci světla

(λ = c f)

světlo různyacutech barev (λ)

se laacuteme různě

(červeneacute se lomiacute meacuteně než modreacute)

Přiacuteklad disperze (rozkladu) světla

Primaacuterniacute a sekundaacuterniacute duha Severniacute Čechy Foto Pavla Vaacutelovaacute 2010

D u h a

Jeden z mnoha

optickyacutech

jevů (fotometeorů)

v atmosfeacuteře

Rok 312 nl - před bitvou byzantskeacuteho ciacutesaře Konstantina I (272-337) s

konkurenčniacutem ciacutesařem Maxentiem u bran Řiacutema (tzv bitva u Milvijskeacuteho mostu) se

na obloze objevily tři zaacuteřiacuteciacute křiacuteže (halovyacute sloup parheacutelia a parhelickyacute oblouk)

Konstantin bitvu proti přesile vyhraacutel sjednotil řiacuteši a povolil v niacute vyznaacutevat křesťanstviacute

Maleacute halo (22deg) (viz 1) vedlejšiacute slunce (2) a horniacute a dolniacute halovyacute sloup (3)

vznikajiacuteciacute odrazem a lomem světelnyacutech paprsků na krystalciacutech ledu

Lom světla a dějiny

httptmagazineblogsnytimescom20121126halo-effect_r=0

1

3

2 2

3

Ohyb (difrakce) a interference

světla

Foto Pavla Vaacutelovaacute Bukovany 2015 Rozklad světla na CD - světlo žaacuterovky

Rozklad biacuteleacuteho světla na mřiacutežce

Pevnost poznaacuteniacute Olomouc 2015

Foto Pavla Vaacutelovaacute Olomouc 2015

Ohyb (difrakce) a interference

světla

Ohyb (difrakce) a interference

Difrakčniacute obrazec obsahuje světlaacute a tmavaacute miacutesta kteraacute se

střiacutedajiacute - světlaacute miacutesta nazyacutevaacuteme maxima a tmavaacute minima

Interference světla = sklaacutedaacuteniacute světelnyacutech vln

Předpoklad světlo musiacute byacutet koherentniacute

Podmiacutenka koherence

- paprsky musiacute miacutet stejnou frekvenci

- paprsky musiacute byacutet navzaacutejem rovnoběžneacute

- paprsky musiacute miacutet na sobě nezaacutevislyacute draacutehovyacute (faacutezovyacute) rozdiacutel

Vznik koherentniacuteho zaacuteřeniacute

rozděleniacutem světla

- buď odrazem pomociacute zrcadel

- nebo lomem pomociacute hranolů

Foto Pavla Vaacutelovaacute Praha 151 2016

Interference světla

stejnyacute způsob vlněniacute

(faacuteze je vzaacutejemně posunuta o sudeacute

naacutesobky λ2)

vznik interferenčniacuteho maxima

(konstruktivniacute interference)

Interference světla

asynchronniacute vlněniacute

(vzaacutejemně posunutaacute faacuteze

o licheacute naacutesobky λ2)

vznik interferenčniacuteho

minima

(destruktivniacute interference)

rarr zaacuteřeniacute zanikaacute

rarr zeslabeniacute zaacuteřeniacute

Interference dvou vrstev elektromagnetickeacuteho zaacuteřeniacute u Slunce

Čočky ndash zaacutekladniacute součaacutesti

mikroskopu

= průhlednaacute (nejčastěji skleněnaacute) tělesa omezenaacute

vypuklyacutemi nebo vydutyacutemi kulovityacutemi plochami lišiacuteciacute se od sveacuteho okoliacute odlišnyacutem indexem lomu

Zaacutekladniacute typy čoček

spojky (vypukleacute neboli konvexniacute)

rozptylky (vyduteacute konkaacutevniacute)

Pazourek 1975

Optickaacute osa ( o ) prochaacuteziacute středem čočky

Ohnisko ( F ) - bod do ktereacuteho se soustřeďujiacute paprsky probiacutehajiacuteciacute rovnoběžně s optickou osou

- 2 ohniska - předmětoveacute ohnisko ( F )

obrazoveacute ohnisko ( Facute )

- ohniskovaacute vzdaacutelenost ( f )

vzdaacutelenost ohniska od hlavniacute roviny proloženeacute středem čočky

- dvojnaacutesobnaacute ohniskovaacute vzdaacutelenost ( P Pacute )

Obrazovyacute prostor - prostor v němž vznikaacute obraz

Důležiteacute charakteristiky čočky

f

o

hlavniacute rovina

Pazourek 1975

V přiacutepadě velmi tenkeacute čočky

bull Obraz za optickou soustavou

rarr obraz s k u t e č n yacute

Skutečnyacute obraz je možneacute zachytit na stiacuteniacutetko

nebo na fotografickou desku neskutečnyacute nikoliv

bull Obraz před soustavou

rarr obraz n e s k u t e č n yacute (zdaacutenlivyacute virtuaacutelniacute)

Obraz skutečnyacute a neskutečnyacute

A ndash předmět Aacute- obraz předmětu

Upraveno podle Pazourek 1975

Francouz Augustin Jean Fresnel (1788-1827) [frenel]

Fresnelova čočka [frenelova]

- plochyacute tvar (zachovaacuteny pouze čaacutesti ktereacute měniacute směr chodu světelnyacutech paprsků)

- vyacuterazně nižšiacute hmotnost při zachovaacuteniacute podobnyacutech parametrů

Využitiacute infračidla pohybu semafory světlomety (majaacuteky) a reflektory (světla aut

divadelniacutech a filmovyacutech osvětlovaciacutech zařiacutezeniacute) zpětneacute projektory slunečniacute kolektory

na zaacutekladě tohoto principu takeacute vyacuteroba 3D displejů k mobilniacutem telefonům a televiziacutem

httpwwwmffcuniczverejnostzpravicky03_lupahtm

čočka na majaacuteku

Čočky v budoucnosti

Pokus o vyacuterobu tzv dokonaleacute čočky

Prototyp - upraveneacute tzv Maxwellovo rybiacute oko

- paprsky světla se v něm pohybujiacute po kružniciacutech a

na rozdiacutel od běžnyacutech čoček se při zobrazeniacute využijiacute

všechny paprsky

- superčočky využiacutevajiacute geometrie k tomu aby se světlo

soustředilo do oblasti menšiacute než je jeho vlnovaacute deacutelka

(zatiacutem se neviacute jak do čočky vyhovujiacuteciacutem způsobem

doveacutest světlo)

Využitiacute v budoucnu

mimo jineacute v pozorovaacuteniacute živyacutech buněk při velkeacutem zvětšeniacute

pomociacute obyčejneacuteho světla bez jejich narušeniacute

Viacutece viz Plaacutešek J Mikroskopy se superčočkami httpwwwvesmircz | Vesmiacuter 91 531 zaacuteřiacute 2012

Hranoly

- doplňky optickyacutech systeacutemů

- většinou tvar rovnostranneacuteho trojuacutehelniacuteka

- využiacutevajiacute uacuteplneacuteho odrazu

Funkce

- změna chodu paprsků pod různyacutemi uacutehly

- rozdvojeniacute paprsků

Pazourek 1975

Různeacute typy odraznyacutech hranolů

Hranoly

Různeacute typy hranolů

httplaserykvalitneczimagestext_25_zakladyoptiky1odrazne_hranolyjpg

Viz dichroickeacute zrcadlo u fluorescenčniacuteho mikroskopu

Chod paprsků v binokulaacuterniacutem tubusu

Pazourek 1975

Nikol = hranol z islandskeacuteho vaacutepence

rarr polarizace světla

Dvojlomnyacute vaacutepencovyacute

krystal

ř ndash paprsek řaacutednyacute (zanikaacute na začerněneacute ploše)

mř ndash paprsek mimořaacutednyacute (lineaacuterně polarizovanyacute

využit k osvětleniacute)

začerněnaacute plocha

Nikol

Pazourek 1975

vzduchovaacute štěrbina

- rychlost světla je

v různyacutech směrech různaacute

- uacutehel paprsku řaacutedneacuteho a

mimořaacutedneacuteho je odlišnyacute

(u Vikingů - slunečniacute kaacutemen

soacutelarsteinn)

Chod paprsků ve světlovodneacutem vlaacuteknu

Princip uacuteplnyacute odraz paprsku

- uvnitř skleněneacuteho vlaacutekna je opticky hustšiacute prostřediacute

- nutnost dostatečně silneacuteho světelneacuteho zdroje

Světlovodnaacute vlaacutekna

Pazourek 1975

Širokeacute využitiacute v praxi optickeacute kabely ndash přenos signaacutelů ve sdělovaciacute technice

světlovody umožňujiacuteciacute veacutest denniacute světlo vedeniacute světla u stereolup endoskopů hellip

Page 10: Světelná a elektronová mikroskopie...(AMF – Atomic Force Miroscope) - skenování povrchu materiálu pomocí hrotu zavěšeném na pružném výkyvném raménku, který je přitahován

naacutezev z řec mikroacutes = malyacute skopoacutes = pozorovatel

vynaacutelez mikroskopu ndash konec 16 stol (technickyacute rozmach lidstva)

1625 - naacutezev mikroskop odvozenyacute od naacutezvu teleskop

(Giovanni Faber z Bambergu ndash papežskyacute leacutekař )

H i s t o r i e o b j e v u m i k r o s k o p u

Dřiacutevějšiacute pozorovaacuteniacute

Řecko - Aristofanes Atheacutenskyacute (424-380 př n l) - ve hře bdquoOblakaldquo

popis zraněniacute paprskem slunce prochaacutezejiacuteciacuteho skleněnou

kouliacute naplněnou vodou

Řiacutemskaacute doba

- filosof Seneca (asi 4 přnl-65 nl) - zvětšeniacute piacutesmen

pomociacute skleněneacute koule naplněneacute vodou

- Klaudius Ptolemaios (asi 100-170 nl) ndash diacutelo bdquoOptikaldquo -

poznatky o odraze paprsků a lomu paprsků skrz sklo

11 stol - Ibn al Haitham (bdquoAlhazenldquo) (965-1039) - arabskyacute fyzik a

matematik diacutelo bdquoPojednaacuteniacute o opticeldquo ndash zkoumaacute vlastnosti

světla (lom a odraz) čočky a zrcadla

viz Anna Černaacute Mikroskop pod drobnohledem Živa 52017 str CXXVIII

14 stol ndash zvlaacutednutiacute techniky broušeniacute čoček do bryacuteliacute (italštiacute mniši)

konec 16 stol ndash vynaacutelez mikroskopu

kolem roku 1590 - Hans a Zacharias Janssenovi (Holandsko otec a syn)

H i s t o r i e o b j e v u m i k r o s k o p u

- konstrukce prvniacuteho použitelneacuteho mikroskopu (ze dvou čoček)

- čočky vypoukleacute i vyduteacute

- zvětšeniacute mikroskopu 60x

viz kniha a film bdquoJmeacuteno růželdquo od Umberta Eca

Systeacutem dvou čoček

16 stol

deacutelka 12 m

(tzv kompaudniacute mikroskop)

httpwwwmicroscopyfsueduprimermuseum

httpmicromagnetfsueduprimermuseumjanssenhtml

httpwwwapsorgpublicationsapsnews200403historycfm

Janssenův mikroskop

17 stol Galileo Galilei (1564-1642)

ndash italskyacute astronom a matematik

1604-1609 ndash konstrukce dalekohledu

- použitiacute složeneacuteho mikroskopu

nazvaneacuteho occhiolino

k vědeckyacutem uacutečelům (pozorovaacuteniacute

oka mouchy)

Nejasnosti kolem vynaacutelezu mikroskopu

ndash z dobovyacutech zpraacutev neniacute jasneacute zda se jednaacute o mikroskop

jehož okulaacuterem je spojka nebo o dalekohled s rozptylkou

(kteryacute použiacuteval Galileo)

Anthony van Leeuwenhoek (1632-1723)

ndash obchodniacutek s laacutetkami v holandskeacutem Delftu

ndash sestrojil jednočočkovyacute mikroskop silnyacute zvětšovaciacute

efekt čočky

(až 270x)

ndash nejprve zkoumaacuteniacute struktury laacutetek

později zkoumal listy květiny drobneacute organismy lidskou krev kůži vlasy hellip

- prvniacute viděl a popsal krevniacute buňky chovaacuteniacute lidskyacutech spermiiacute

- vyacuteroba asi 250 mikroskopů

17 stol

Jednočočkovyacute Leeuwenhoekův

mikroskop

httpbiologimediacentrecomwp-contentuploads201101image2png

Anglickyacute původ Italskyacute původ

17 stol

Prvniacute světelneacute mikroskopy

Jednočočkovyacute

mikroskop Dvoučočkoveacute

mikroskopy

Robert Hook (1635-1703) [huacutek]

ndash anglickyacute fyzik chemik geolog astronom hellip

ndash použiacuteval zakoupenyacute složenyacute mikroskop s viacutece

čočkami (tzv kompaudniacute) vylepšenyacute o kvalitniacute osvětleniacute

17 stol

Hookův mikroskop

- vylepšeniacute osvětleniacute použitiacute irisoveacute clony

irisovaacute clona

- zkoumaacuteniacute slabyacutech plaacutetků korku z korkovniacuteku

živeacute laacutetky jsou tvořeny buňkami

- 1665 - kniha bdquoMicrographialdquo

mikroskopickeacute pozorovaacuteniacute rostlinnyacutech

pletiv živočišnyacutech objektů a struktur

mineraacutelů

Rok vydaacuteniacute 1665 Micrographia or some Physiological Descriptions of Minute Bodies

made by Magnifying Glasses with Observations and Inquiries thereupon

London 1665

17 stol Leeuwenhoek Hook

Angličan Henry Power (1626ndash1668) ndash jako

prvniacute (1663) publikoval pozorovaacuteniacute mikroskopem

Marcello Malphighi (1628ndash1694)

italskyacute leacutekař

zakladatel mikroskopickeacute anatomie

- objev krevniacutech kapilaacuter savců (1661)

- malphigickeacute trubice hmyzu

18 stol

ndash mikroskopy přežily jako hračka pro zaacutebavu anglickyacutech gentlemanů zajiacutemajiacuteciacutech se o tajemstviacute přiacuterody

19 stol

zač 19 stol ndash Dollond Lister Amici - vynaacutelez

achromatickeacuteho objektivu

ndash do teacute doby použiacutevaacuteniacute jednočočkoveacuteho mikroskopu (dvoučočkovyacute

mikroskop podaacuteval značně zkreslenyacute obraz)

Vyacuteznačniacute vědci 19 stol použiacutevajiacuteciacute k svyacutem pozorovaacuteniacutem mikroskop

Robert Brown (1773-1858) - objev jaacutedra (1831)

Luis Pasteur (1822-1895) (francouzskyacute mikrobiolog)

- objev kvasinek

Robert Koch (1843-1910) (německyacute leacutekař a mikrobiolog)

- objev původců tuberkuloacutezy a cholery

Jan Evangelista Purkyně (1787-1869) (českyacute fyziolog)

- 1825 popsal jaacutedro u živočišneacute buňky (lupa)

od r 1832 použiacutevaacute kvalitniacute mikroskop

Microscope

stand VII

19 stol ndash dalšiacute vyacutevoj mikroskopů

Carl Zeiss ndash průmyslovaacute vyacuteroba mikroskopů (firma Zeiss)

Ernst Karl Abbe ndash teoretickaacute studia optickyacutech principů

Otto Schott ndash vyacutezkum optickeacuteho skla

August Koumlhler ndash kvalitniacute osvětleniacute

Otto Schott (1851-1935)

Ernst Abbe (1840-1905)

Carl Zeiss (1816-1888)

August Koumlhler (1866-1948)

Mikroskopy 19 stoletiacute

19 stol

20 stol

Konfokaacutelniacute mikroskop

A1R (Nikon)

BX60 (Olympus)

Laserovyacute fluorescenčniacute mikroskop bdquoLight Sheetldquo Centrum regionu Hanaacute pro biotechnologickyacute a zemědělskyacute vyacutezkum Odděleniacute buněčneacute biologie

21 stol

21 stol

Digitaacutelniacute holografickyacute mikroskop firmy Lynceacutee Tec

Důležitaacute data při rozvoji moderniacute světelneacute mikroskopie

1847 - Zahaacutejeniacute vyacuteroby mikroskopů firmou Carl Zeiss v Jeně

1903 - Ultramikroskop (Richard Zsigmondy NC 1925)

1911 - Fluorescenčniacute mikroskop (Carl Reichert)

1935 - Faacutezovyacute kontrast (Fritz Zernike NC 1953)

1955 - Diferenciaacutelniacute interferenčniacute kontrast (DIC ndash Nomarski)

1968 - Rastrovaciacute tandemovyacute konfokaacutelniacute mikroskop (TSCM)

1978 - Laserovyacute konfokaacutelniacute rastrovaciacute mikroskop

1994 - Princip STED mikroskopie (S W Hell NC 2014)

(Stimulated Emission Depletion ndash redukce fluorescence stimulovanou emisiacute)

po roce 2000 - rozvoj tzv superrozlišovaciacute mikroskopie

2006 - Super-resolučniacute fluorescenčniacute mikroskop (Eric Betzig

Stefan W Hell a William E Moerner NC za chemii 2014)

NC = Nobelova cena

30 leacuteta 20 stoletiacute

ndash hranice vyacutevoje optickeacuteho (paprskoveacuteho) mikroskopu

(hranice rozlišeniacute světelneacuteho mikroskopu je diacuteky velikosti deacutelky světla 02 microm)

- dalšiacute zvětšovaacuteniacute pozorovanyacutech objektů na jineacutem principu

- miacutesto světelneacuteho paprsku elektronovyacute paprsek

(= tok rychlyacutech elektronů)

- miacutesto skleněneacute čočky magnetickaacute čočka

1931 - Ernst Ruska Max Knoll

prvniacute elektronovyacute mikroskop

tzv prozařovaciacute transmisniacute EM

(TEM ndash Transmission Electron Microscope)

- originaacutelniacute zvětšeniacute 1 000 - 250 000x

Ernst Ruska (1906-1988)

1942 - rastrovaciacute EM

(SEM ndash Scanning Electron Microscope) - postupneacute bombardovaacuteniacute vzorku elektrony

- zvětšeniacute až 30 000x

EM UacuteMG AV ČR Praha-Krč

FEI ndash TECHNAIG2TEM + kryozařiacutezeniacute

200 kV (λ el = 00025 nm)

RS 01 nm

prvkovaacute analyacuteza vzorků

zařiacutezeniacute pro

prvkovou analyacutezu

vzorků

Foto Pavla Vaacutelovaacute 2010

Brněnštiacute vědci z Uacutestavu přiacutestrojoveacute techniky AV ČR (UacutePT) a Mendelovy

univerzity představili novou metodu pozorovaacuteniacute rostlinnyacutech vzorků v jejich

přirozeneacutem stavu (za využitiacute kryoprotektiv)

Viacutece na httpe-svete15cztechnikacesti-vedci-posunuli-hranice-elektronove-mikroskopie-1174818

Enviromentaacutelniacute rastrovaciacute elektronovyacute mikroskop Aquasem II

TEM TITAN FEI Company Mgr Klaacutera Čeacutepe PhD

Vysokorozlišovaciacute transmisniacute elektronovyacute mikroskop

schopnyacute nahleacutednout do struktury materiaacutelů až na uacuterovni atomů

a současně přesně zmapovat jejich chemickeacute složeniacute

Regionaacutelniacute centrum pokročilyacutech

materiaacutelů (RCPTM)

Odd uhliacutekoveacute nanostruktury

PřF UP OL

Vysokorozlišovaciacute transmisniacute

elektronovyacute mikroskop TITAN (FEI)

Foto Pavla Vaacutelovaacute 2015

Transmisniacute elektronovyacute

mikroskop Jeol

Regionaacutelniacute centrum pokročilyacutech materiaacutelů (RCPTM)

Odd uhliacutekoveacute nanostruktury PřF UP OL

Neoptickeacute mikroskopy

1981

Řaacutedkovaciacute tunelovyacute mikroskop (STM ndash Scanning Tunnelling Microscope)

- mapovaacuteniacute povrchu pomociacute pohybu vodiveacuteho hrotu nad vodivyacutem povrchem sledovaneacuteho materiaacutelu

1986

Mikroskop atomaacuterniacutech sil (AMF ndash Atomic Force Miroscope)

- skenovaacuteniacute povrchu materiaacutelu pomociacute hrotu zavěšeneacutem na pružneacutem vyacutekyvneacutem rameacutenku kteryacute je přitahovaacuten elektrostatickyacutemi a Van der Walsovyacutemi silami

Rozlišeniacute v řaacutedech pikometrů (10-12 m) ndash rozeznaacuteniacute struktur

jednotlivyacutech atomů

O p t i c k eacute p r i n c i p y

světelneacute mikroskopie

Reichl J Všetička M Encyklopedie fyziky [online] copy2006-2014

[vid 2014] Dostupneacute z httpfyzikajreichlcommainarticleview431-optika Lepil O (2013) Fyzika pro gymnaacutezia Optika Prometheus Praha 4 přepracovaneacute vydaacuteniacute

Murphy DB Davidson MW (2013) Fundamentals of Light

Microscopy and Electronic Imaging Willey-Blackwell Published

2013 by John Wiley amp Sons Inc Hoboken New Jersey

S v ě t l o

= čaacutest rozsaacutehleacute oblasti elektromagnetickeacuteho zaacuteřeniacute

kterou vniacutemaacuteme zrakem

Rozhlasoveacute a raacutedioveacute vlny 250 km - 1 mm

Infračerveneacute zaacuteřeniacute 05 mm - 08 μm

Světlo (viditelneacute zaacuteřeniacute) 08 μm - 04 μm

Ultrafialoveacute zaacuteřeniacute 04 microm - 01 microm

Roumlntgenovo zaacuteřeniacute (X-paprsky) 15 nm - 0005 nm

γ-zaacuteřeniacute pod 00001 nm

Přibližneacute hodnoty ndash individuaacutelniacute vlastnosti zraku různyacutech lidiacute

S v ě t l o

= čaacutest rozsaacutehleacute oblasti elektromagnetickeacuteho zaacuteřeniacute

kterou vniacutemaacuteme zrakem

rarr se zkracujiacuteciacute se vlnovou deacutelkou se zvyšuje frekvence (energie)

Viditelneacute

Vlnoveacute deacutelky světla a relativniacute citlivost oka

Murphy DB Davidson MW (2013) Fundamentals of Light Microscopy and Electronic

Imaging Willey-Blackwell Published 2013 by John Wiley amp Sons Inc Hoboken New Jersey

= zrakovyacute pigment citlivyacute na

světlo nachaacutezejiacuteciacute se v tyčinkaacutech Jodopsin = zrakovyacute pigment citlivyacute na

barvu nachaacutezejiacuteciacute se v čiacutepciacutech

S v ě t l o

Duaacutelniacute charakter světla ndash vlněniacute i proud čaacutestic (fotonů)

Vlnovyacute model světla

vlna elektrickaacute a magnetickaacute (elektromagnetickaacute vlna je tvořena oscilujiacuteciacutem elektrickyacutem a

magnetickyacutem polem na sebe kolmyacutech a nesouciacutech vpřed energii)

Pro uacutečinky světla v mikroskopu je důležitaacute vlna elektrickaacute

= přiacutečneacute vlněniacute

postupneacute kmitaacuteniacute

jednotlivyacutech vedle sebe

ležiacuteciacutech bodů

Scheacutema světla jako elektromagnetickeacute vlny

Obr httpwwwprosoundwebcomarticleprintinvaders_from_

outer_space_electromagnetic_radiation_interference

λ - vlnovaacute deacutelka

(v oblasti svět zaacuteřeniacute

v rozmeziacute od 380 do 780 nm)

určuje barvu světla

a - amplituda

nejvyššiacute hodnota

určuje intenzitu světla

Z hlediska vlnoveacute deacutelky rozlišujeme

polychromatickeacute x monochromatickeacute světlo (selekce pomociacute barevnyacutech filtrů rarr jednotnaacute vlnovaacute deacutelka světlo zeleneacute červeneacute hellip)

Elektrickaacute vlna - sinusoida

Charakterizovaacutena dvěma veličinami

Pazourek 1975

Vlastnosti světla

Rovnoměrneacute šiacuteřeniacute světla ze zaacuteřiacuteciacuteho bodu na všechny strany rarr vlnovaacute plocha tvaru koule

Paprsek ndash směr kteryacutem se vlněniacute šiacuteřiacute a kteryacute je kolmyacute

na vlnoplochu

Pazourek 1975

- paprsek nepolarizovanyacute (A C) ndash kmitaacute v každeacutem

miacutestě a v průběhu času ve všech možnyacutech směrech

kolmyacutech na směr šiacuteřeniacute paprsku

- paprsek polarizovanyacute (B D1 D2) - kmitaacute v jedneacute

rovině přičemž rovina kmitů (vlněniacute) jednoho z nich je

kolmaacute k rovině kmitů druheacuteho

Pazourek 1975

Polarizovaneacute světlo viz

httpswwwyoutubecomwatchv=gP751qpm4n4

Murphy DB Davidson MW (2013) Fundamentals of Light Microscopy and

Electronic Imaging Jonh Wkiley amp Sons Inc Hoboken New Jersey

Osm různyacutech vlnovyacutech forem světla (znaacutezorňujiacuteciacutech různou kvalitu světla)

Odraz a lom světelnyacutech paprsků

v prostřediacutech různeacute hustoty

Důležitaacute charakteristika prostřediacute

index lomu ( n ) (= optickaacute hustota prostřediacute)

c = rychlost světla ve vakuu (stejnaacute pro všechny λ )

v = rychlost světla určiteacute vlnoveacute deacutelky ve zkoumaneacute laacutetce

c

n =

v

zde absolutniacute index lomu

(bezrozměrnaacute fyzikaacutelniacute veličina jeho jednotka je 1)

Rychlost světla (c) určiteacute vlnoveacute

deacutelky v různyacutech prostřediacutech

c ve vakuu

= 300 000 kms

Index lomu (n) některyacutech laacutetek

vzduch (vakuum) helliphellip 100 (vzduch 10002718)

voda helliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 133

plexisklo helliphelliphelliphelliphelliphellip 140 ndash 152

křemenneacute sklo helliphellip hellip 145 (čočka z křemene z Ninive ndash 7 stol přnl)

běžneacute sklo helliphelliphelliphelliphellip 151

cedrovyacute olej helliphelliphelliphelliphellip 151

imerzniacute olej Olympus hellip 1516 pro fluorescenci 1404

kanadskyacute balzaacutem helliphellip 150

krystal NaCl helliphelliphelliphellip 154

korunoveacute sklo helliphelliphelliphellip 145 ndash 156 (sodno-draselneacute bezolovnateacute)

flintoveacute sklo helliphelliphelliphellip 162 ndash 180 (olovnateacute)

diamant helliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 242

Index lomu je vždy většiacute než 100

očniacute čočka hellip 1406

sklivec helliphelliphellip 1336

Odraz světla rovnyacutem zrcadlem (reflexe)

Zaacutekony

1 Paprsek dopadajiacuteciacute kolmice dopadu a paprsek odraženyacute

ležiacute v jedneacute rovině

2 Uacutehel odrazu se rovnaacute uacutehlu dopadu

Odraz a lom paprsku

k

Důležiteacute pro mikroskopii (astronomii)

- neniacute zaacutevislost na vlnoveacute deacutelce světla (λ)

- na rozdiacutel od lomu paprsků se světelneacute

paprsky se odraacutežejiacute stejně

Pazourek 1975

Zaacutekony

1 Paprsek dopadajiacuteciacute kolmice lomu a paprsek lomenyacute ležiacute v teacuteže rovině

Lom světla (refrakce)

2 Při přechodu z prostřediacute opticky řidšiacuteho do prostřediacute opticky hustšiacuteho se paprsek laacuteme ke kolmici (A)

a z prostřediacute opticky hustšiacuteho

do prostřediacute opticky řidšiacuteho

se laacuteme od kolmice (B)

(C a D) ndash uacuteplnyacute odraz při tzv

mezniacutem uacutehlu dopadu paprsku

v přiacutepadě lomu od kolmice (B)

(viz Nikol odrazneacute hranoly světlovodneacute vlaacutekno nebo fluorescenčniacute metoda TIRFM ndash totaacutelniacute odraz exitačniacuteho zaacuteřeniacute)

Pazourek 1975

Svatyacute Kryštof od

švyacutecarskeacuteho maliacuteře

Konrada Witze (kolem 1400ndash1446)

Witz byl jedniacutem z prvniacutech

maliacuteřů kteryacute namaloval

přesnyacute způsob odrazu

světla na vodě

Disperze (rozklad) světla

= důsledek zaacutevislosti rychlosti světla v laacutetkaacutech na frekvenci světla

(λ = c f)

světlo různyacutech barev (λ)

se laacuteme různě

(červeneacute se lomiacute meacuteně než modreacute)

Přiacuteklad disperze (rozkladu) světla

Primaacuterniacute a sekundaacuterniacute duha Severniacute Čechy Foto Pavla Vaacutelovaacute 2010

D u h a

Jeden z mnoha

optickyacutech

jevů (fotometeorů)

v atmosfeacuteře

Rok 312 nl - před bitvou byzantskeacuteho ciacutesaře Konstantina I (272-337) s

konkurenčniacutem ciacutesařem Maxentiem u bran Řiacutema (tzv bitva u Milvijskeacuteho mostu) se

na obloze objevily tři zaacuteřiacuteciacute křiacuteže (halovyacute sloup parheacutelia a parhelickyacute oblouk)

Konstantin bitvu proti přesile vyhraacutel sjednotil řiacuteši a povolil v niacute vyznaacutevat křesťanstviacute

Maleacute halo (22deg) (viz 1) vedlejšiacute slunce (2) a horniacute a dolniacute halovyacute sloup (3)

vznikajiacuteciacute odrazem a lomem světelnyacutech paprsků na krystalciacutech ledu

Lom světla a dějiny

httptmagazineblogsnytimescom20121126halo-effect_r=0

1

3

2 2

3

Ohyb (difrakce) a interference

světla

Foto Pavla Vaacutelovaacute Bukovany 2015 Rozklad světla na CD - světlo žaacuterovky

Rozklad biacuteleacuteho světla na mřiacutežce

Pevnost poznaacuteniacute Olomouc 2015

Foto Pavla Vaacutelovaacute Olomouc 2015

Ohyb (difrakce) a interference

světla

Ohyb (difrakce) a interference

Difrakčniacute obrazec obsahuje světlaacute a tmavaacute miacutesta kteraacute se

střiacutedajiacute - světlaacute miacutesta nazyacutevaacuteme maxima a tmavaacute minima

Interference světla = sklaacutedaacuteniacute světelnyacutech vln

Předpoklad světlo musiacute byacutet koherentniacute

Podmiacutenka koherence

- paprsky musiacute miacutet stejnou frekvenci

- paprsky musiacute byacutet navzaacutejem rovnoběžneacute

- paprsky musiacute miacutet na sobě nezaacutevislyacute draacutehovyacute (faacutezovyacute) rozdiacutel

Vznik koherentniacuteho zaacuteřeniacute

rozděleniacutem světla

- buď odrazem pomociacute zrcadel

- nebo lomem pomociacute hranolů

Foto Pavla Vaacutelovaacute Praha 151 2016

Interference světla

stejnyacute způsob vlněniacute

(faacuteze je vzaacutejemně posunuta o sudeacute

naacutesobky λ2)

vznik interferenčniacuteho maxima

(konstruktivniacute interference)

Interference světla

asynchronniacute vlněniacute

(vzaacutejemně posunutaacute faacuteze

o licheacute naacutesobky λ2)

vznik interferenčniacuteho

minima

(destruktivniacute interference)

rarr zaacuteřeniacute zanikaacute

rarr zeslabeniacute zaacuteřeniacute

Interference dvou vrstev elektromagnetickeacuteho zaacuteřeniacute u Slunce

Čočky ndash zaacutekladniacute součaacutesti

mikroskopu

= průhlednaacute (nejčastěji skleněnaacute) tělesa omezenaacute

vypuklyacutemi nebo vydutyacutemi kulovityacutemi plochami lišiacuteciacute se od sveacuteho okoliacute odlišnyacutem indexem lomu

Zaacutekladniacute typy čoček

spojky (vypukleacute neboli konvexniacute)

rozptylky (vyduteacute konkaacutevniacute)

Pazourek 1975

Optickaacute osa ( o ) prochaacuteziacute středem čočky

Ohnisko ( F ) - bod do ktereacuteho se soustřeďujiacute paprsky probiacutehajiacuteciacute rovnoběžně s optickou osou

- 2 ohniska - předmětoveacute ohnisko ( F )

obrazoveacute ohnisko ( Facute )

- ohniskovaacute vzdaacutelenost ( f )

vzdaacutelenost ohniska od hlavniacute roviny proloženeacute středem čočky

- dvojnaacutesobnaacute ohniskovaacute vzdaacutelenost ( P Pacute )

Obrazovyacute prostor - prostor v němž vznikaacute obraz

Důležiteacute charakteristiky čočky

f

o

hlavniacute rovina

Pazourek 1975

V přiacutepadě velmi tenkeacute čočky

bull Obraz za optickou soustavou

rarr obraz s k u t e č n yacute

Skutečnyacute obraz je možneacute zachytit na stiacuteniacutetko

nebo na fotografickou desku neskutečnyacute nikoliv

bull Obraz před soustavou

rarr obraz n e s k u t e č n yacute (zdaacutenlivyacute virtuaacutelniacute)

Obraz skutečnyacute a neskutečnyacute

A ndash předmět Aacute- obraz předmětu

Upraveno podle Pazourek 1975

Francouz Augustin Jean Fresnel (1788-1827) [frenel]

Fresnelova čočka [frenelova]

- plochyacute tvar (zachovaacuteny pouze čaacutesti ktereacute měniacute směr chodu světelnyacutech paprsků)

- vyacuterazně nižšiacute hmotnost při zachovaacuteniacute podobnyacutech parametrů

Využitiacute infračidla pohybu semafory světlomety (majaacuteky) a reflektory (světla aut

divadelniacutech a filmovyacutech osvětlovaciacutech zařiacutezeniacute) zpětneacute projektory slunečniacute kolektory

na zaacutekladě tohoto principu takeacute vyacuteroba 3D displejů k mobilniacutem telefonům a televiziacutem

httpwwwmffcuniczverejnostzpravicky03_lupahtm

čočka na majaacuteku

Čočky v budoucnosti

Pokus o vyacuterobu tzv dokonaleacute čočky

Prototyp - upraveneacute tzv Maxwellovo rybiacute oko

- paprsky světla se v něm pohybujiacute po kružniciacutech a

na rozdiacutel od běžnyacutech čoček se při zobrazeniacute využijiacute

všechny paprsky

- superčočky využiacutevajiacute geometrie k tomu aby se světlo

soustředilo do oblasti menšiacute než je jeho vlnovaacute deacutelka

(zatiacutem se neviacute jak do čočky vyhovujiacuteciacutem způsobem

doveacutest světlo)

Využitiacute v budoucnu

mimo jineacute v pozorovaacuteniacute živyacutech buněk při velkeacutem zvětšeniacute

pomociacute obyčejneacuteho světla bez jejich narušeniacute

Viacutece viz Plaacutešek J Mikroskopy se superčočkami httpwwwvesmircz | Vesmiacuter 91 531 zaacuteřiacute 2012

Hranoly

- doplňky optickyacutech systeacutemů

- většinou tvar rovnostranneacuteho trojuacutehelniacuteka

- využiacutevajiacute uacuteplneacuteho odrazu

Funkce

- změna chodu paprsků pod různyacutemi uacutehly

- rozdvojeniacute paprsků

Pazourek 1975

Různeacute typy odraznyacutech hranolů

Hranoly

Různeacute typy hranolů

httplaserykvalitneczimagestext_25_zakladyoptiky1odrazne_hranolyjpg

Viz dichroickeacute zrcadlo u fluorescenčniacuteho mikroskopu

Chod paprsků v binokulaacuterniacutem tubusu

Pazourek 1975

Nikol = hranol z islandskeacuteho vaacutepence

rarr polarizace světla

Dvojlomnyacute vaacutepencovyacute

krystal

ř ndash paprsek řaacutednyacute (zanikaacute na začerněneacute ploše)

mř ndash paprsek mimořaacutednyacute (lineaacuterně polarizovanyacute

využit k osvětleniacute)

začerněnaacute plocha

Nikol

Pazourek 1975

vzduchovaacute štěrbina

- rychlost světla je

v různyacutech směrech různaacute

- uacutehel paprsku řaacutedneacuteho a

mimořaacutedneacuteho je odlišnyacute

(u Vikingů - slunečniacute kaacutemen

soacutelarsteinn)

Chod paprsků ve světlovodneacutem vlaacuteknu

Princip uacuteplnyacute odraz paprsku

- uvnitř skleněneacuteho vlaacutekna je opticky hustšiacute prostřediacute

- nutnost dostatečně silneacuteho světelneacuteho zdroje

Světlovodnaacute vlaacutekna

Pazourek 1975

Širokeacute využitiacute v praxi optickeacute kabely ndash přenos signaacutelů ve sdělovaciacute technice

světlovody umožňujiacuteciacute veacutest denniacute světlo vedeniacute světla u stereolup endoskopů hellip

Page 11: Světelná a elektronová mikroskopie...(AMF – Atomic Force Miroscope) - skenování povrchu materiálu pomocí hrotu zavěšeném na pružném výkyvném raménku, který je přitahován

14 stol ndash zvlaacutednutiacute techniky broušeniacute čoček do bryacuteliacute (italštiacute mniši)

konec 16 stol ndash vynaacutelez mikroskopu

kolem roku 1590 - Hans a Zacharias Janssenovi (Holandsko otec a syn)

H i s t o r i e o b j e v u m i k r o s k o p u

- konstrukce prvniacuteho použitelneacuteho mikroskopu (ze dvou čoček)

- čočky vypoukleacute i vyduteacute

- zvětšeniacute mikroskopu 60x

viz kniha a film bdquoJmeacuteno růželdquo od Umberta Eca

Systeacutem dvou čoček

16 stol

deacutelka 12 m

(tzv kompaudniacute mikroskop)

httpwwwmicroscopyfsueduprimermuseum

httpmicromagnetfsueduprimermuseumjanssenhtml

httpwwwapsorgpublicationsapsnews200403historycfm

Janssenův mikroskop

17 stol Galileo Galilei (1564-1642)

ndash italskyacute astronom a matematik

1604-1609 ndash konstrukce dalekohledu

- použitiacute složeneacuteho mikroskopu

nazvaneacuteho occhiolino

k vědeckyacutem uacutečelům (pozorovaacuteniacute

oka mouchy)

Nejasnosti kolem vynaacutelezu mikroskopu

ndash z dobovyacutech zpraacutev neniacute jasneacute zda se jednaacute o mikroskop

jehož okulaacuterem je spojka nebo o dalekohled s rozptylkou

(kteryacute použiacuteval Galileo)

Anthony van Leeuwenhoek (1632-1723)

ndash obchodniacutek s laacutetkami v holandskeacutem Delftu

ndash sestrojil jednočočkovyacute mikroskop silnyacute zvětšovaciacute

efekt čočky

(až 270x)

ndash nejprve zkoumaacuteniacute struktury laacutetek

později zkoumal listy květiny drobneacute organismy lidskou krev kůži vlasy hellip

- prvniacute viděl a popsal krevniacute buňky chovaacuteniacute lidskyacutech spermiiacute

- vyacuteroba asi 250 mikroskopů

17 stol

Jednočočkovyacute Leeuwenhoekův

mikroskop

httpbiologimediacentrecomwp-contentuploads201101image2png

Anglickyacute původ Italskyacute původ

17 stol

Prvniacute světelneacute mikroskopy

Jednočočkovyacute

mikroskop Dvoučočkoveacute

mikroskopy

Robert Hook (1635-1703) [huacutek]

ndash anglickyacute fyzik chemik geolog astronom hellip

ndash použiacuteval zakoupenyacute složenyacute mikroskop s viacutece

čočkami (tzv kompaudniacute) vylepšenyacute o kvalitniacute osvětleniacute

17 stol

Hookův mikroskop

- vylepšeniacute osvětleniacute použitiacute irisoveacute clony

irisovaacute clona

- zkoumaacuteniacute slabyacutech plaacutetků korku z korkovniacuteku

živeacute laacutetky jsou tvořeny buňkami

- 1665 - kniha bdquoMicrographialdquo

mikroskopickeacute pozorovaacuteniacute rostlinnyacutech

pletiv živočišnyacutech objektů a struktur

mineraacutelů

Rok vydaacuteniacute 1665 Micrographia or some Physiological Descriptions of Minute Bodies

made by Magnifying Glasses with Observations and Inquiries thereupon

London 1665

17 stol Leeuwenhoek Hook

Angličan Henry Power (1626ndash1668) ndash jako

prvniacute (1663) publikoval pozorovaacuteniacute mikroskopem

Marcello Malphighi (1628ndash1694)

italskyacute leacutekař

zakladatel mikroskopickeacute anatomie

- objev krevniacutech kapilaacuter savců (1661)

- malphigickeacute trubice hmyzu

18 stol

ndash mikroskopy přežily jako hračka pro zaacutebavu anglickyacutech gentlemanů zajiacutemajiacuteciacutech se o tajemstviacute přiacuterody

19 stol

zač 19 stol ndash Dollond Lister Amici - vynaacutelez

achromatickeacuteho objektivu

ndash do teacute doby použiacutevaacuteniacute jednočočkoveacuteho mikroskopu (dvoučočkovyacute

mikroskop podaacuteval značně zkreslenyacute obraz)

Vyacuteznačniacute vědci 19 stol použiacutevajiacuteciacute k svyacutem pozorovaacuteniacutem mikroskop

Robert Brown (1773-1858) - objev jaacutedra (1831)

Luis Pasteur (1822-1895) (francouzskyacute mikrobiolog)

- objev kvasinek

Robert Koch (1843-1910) (německyacute leacutekař a mikrobiolog)

- objev původců tuberkuloacutezy a cholery

Jan Evangelista Purkyně (1787-1869) (českyacute fyziolog)

- 1825 popsal jaacutedro u živočišneacute buňky (lupa)

od r 1832 použiacutevaacute kvalitniacute mikroskop

Microscope

stand VII

19 stol ndash dalšiacute vyacutevoj mikroskopů

Carl Zeiss ndash průmyslovaacute vyacuteroba mikroskopů (firma Zeiss)

Ernst Karl Abbe ndash teoretickaacute studia optickyacutech principů

Otto Schott ndash vyacutezkum optickeacuteho skla

August Koumlhler ndash kvalitniacute osvětleniacute

Otto Schott (1851-1935)

Ernst Abbe (1840-1905)

Carl Zeiss (1816-1888)

August Koumlhler (1866-1948)

Mikroskopy 19 stoletiacute

19 stol

20 stol

Konfokaacutelniacute mikroskop

A1R (Nikon)

BX60 (Olympus)

Laserovyacute fluorescenčniacute mikroskop bdquoLight Sheetldquo Centrum regionu Hanaacute pro biotechnologickyacute a zemědělskyacute vyacutezkum Odděleniacute buněčneacute biologie

21 stol

21 stol

Digitaacutelniacute holografickyacute mikroskop firmy Lynceacutee Tec

Důležitaacute data při rozvoji moderniacute světelneacute mikroskopie

1847 - Zahaacutejeniacute vyacuteroby mikroskopů firmou Carl Zeiss v Jeně

1903 - Ultramikroskop (Richard Zsigmondy NC 1925)

1911 - Fluorescenčniacute mikroskop (Carl Reichert)

1935 - Faacutezovyacute kontrast (Fritz Zernike NC 1953)

1955 - Diferenciaacutelniacute interferenčniacute kontrast (DIC ndash Nomarski)

1968 - Rastrovaciacute tandemovyacute konfokaacutelniacute mikroskop (TSCM)

1978 - Laserovyacute konfokaacutelniacute rastrovaciacute mikroskop

1994 - Princip STED mikroskopie (S W Hell NC 2014)

(Stimulated Emission Depletion ndash redukce fluorescence stimulovanou emisiacute)

po roce 2000 - rozvoj tzv superrozlišovaciacute mikroskopie

2006 - Super-resolučniacute fluorescenčniacute mikroskop (Eric Betzig

Stefan W Hell a William E Moerner NC za chemii 2014)

NC = Nobelova cena

30 leacuteta 20 stoletiacute

ndash hranice vyacutevoje optickeacuteho (paprskoveacuteho) mikroskopu

(hranice rozlišeniacute světelneacuteho mikroskopu je diacuteky velikosti deacutelky světla 02 microm)

- dalšiacute zvětšovaacuteniacute pozorovanyacutech objektů na jineacutem principu

- miacutesto světelneacuteho paprsku elektronovyacute paprsek

(= tok rychlyacutech elektronů)

- miacutesto skleněneacute čočky magnetickaacute čočka

1931 - Ernst Ruska Max Knoll

prvniacute elektronovyacute mikroskop

tzv prozařovaciacute transmisniacute EM

(TEM ndash Transmission Electron Microscope)

- originaacutelniacute zvětšeniacute 1 000 - 250 000x

Ernst Ruska (1906-1988)

1942 - rastrovaciacute EM

(SEM ndash Scanning Electron Microscope) - postupneacute bombardovaacuteniacute vzorku elektrony

- zvětšeniacute až 30 000x

EM UacuteMG AV ČR Praha-Krč

FEI ndash TECHNAIG2TEM + kryozařiacutezeniacute

200 kV (λ el = 00025 nm)

RS 01 nm

prvkovaacute analyacuteza vzorků

zařiacutezeniacute pro

prvkovou analyacutezu

vzorků

Foto Pavla Vaacutelovaacute 2010

Brněnštiacute vědci z Uacutestavu přiacutestrojoveacute techniky AV ČR (UacutePT) a Mendelovy

univerzity představili novou metodu pozorovaacuteniacute rostlinnyacutech vzorků v jejich

přirozeneacutem stavu (za využitiacute kryoprotektiv)

Viacutece na httpe-svete15cztechnikacesti-vedci-posunuli-hranice-elektronove-mikroskopie-1174818

Enviromentaacutelniacute rastrovaciacute elektronovyacute mikroskop Aquasem II

TEM TITAN FEI Company Mgr Klaacutera Čeacutepe PhD

Vysokorozlišovaciacute transmisniacute elektronovyacute mikroskop

schopnyacute nahleacutednout do struktury materiaacutelů až na uacuterovni atomů

a současně přesně zmapovat jejich chemickeacute složeniacute

Regionaacutelniacute centrum pokročilyacutech

materiaacutelů (RCPTM)

Odd uhliacutekoveacute nanostruktury

PřF UP OL

Vysokorozlišovaciacute transmisniacute

elektronovyacute mikroskop TITAN (FEI)

Foto Pavla Vaacutelovaacute 2015

Transmisniacute elektronovyacute

mikroskop Jeol

Regionaacutelniacute centrum pokročilyacutech materiaacutelů (RCPTM)

Odd uhliacutekoveacute nanostruktury PřF UP OL

Neoptickeacute mikroskopy

1981

Řaacutedkovaciacute tunelovyacute mikroskop (STM ndash Scanning Tunnelling Microscope)

- mapovaacuteniacute povrchu pomociacute pohybu vodiveacuteho hrotu nad vodivyacutem povrchem sledovaneacuteho materiaacutelu

1986

Mikroskop atomaacuterniacutech sil (AMF ndash Atomic Force Miroscope)

- skenovaacuteniacute povrchu materiaacutelu pomociacute hrotu zavěšeneacutem na pružneacutem vyacutekyvneacutem rameacutenku kteryacute je přitahovaacuten elektrostatickyacutemi a Van der Walsovyacutemi silami

Rozlišeniacute v řaacutedech pikometrů (10-12 m) ndash rozeznaacuteniacute struktur

jednotlivyacutech atomů

O p t i c k eacute p r i n c i p y

světelneacute mikroskopie

Reichl J Všetička M Encyklopedie fyziky [online] copy2006-2014

[vid 2014] Dostupneacute z httpfyzikajreichlcommainarticleview431-optika Lepil O (2013) Fyzika pro gymnaacutezia Optika Prometheus Praha 4 přepracovaneacute vydaacuteniacute

Murphy DB Davidson MW (2013) Fundamentals of Light

Microscopy and Electronic Imaging Willey-Blackwell Published

2013 by John Wiley amp Sons Inc Hoboken New Jersey

S v ě t l o

= čaacutest rozsaacutehleacute oblasti elektromagnetickeacuteho zaacuteřeniacute

kterou vniacutemaacuteme zrakem

Rozhlasoveacute a raacutedioveacute vlny 250 km - 1 mm

Infračerveneacute zaacuteřeniacute 05 mm - 08 μm

Světlo (viditelneacute zaacuteřeniacute) 08 μm - 04 μm

Ultrafialoveacute zaacuteřeniacute 04 microm - 01 microm

Roumlntgenovo zaacuteřeniacute (X-paprsky) 15 nm - 0005 nm

γ-zaacuteřeniacute pod 00001 nm

Přibližneacute hodnoty ndash individuaacutelniacute vlastnosti zraku různyacutech lidiacute

S v ě t l o

= čaacutest rozsaacutehleacute oblasti elektromagnetickeacuteho zaacuteřeniacute

kterou vniacutemaacuteme zrakem

rarr se zkracujiacuteciacute se vlnovou deacutelkou se zvyšuje frekvence (energie)

Viditelneacute

Vlnoveacute deacutelky světla a relativniacute citlivost oka

Murphy DB Davidson MW (2013) Fundamentals of Light Microscopy and Electronic

Imaging Willey-Blackwell Published 2013 by John Wiley amp Sons Inc Hoboken New Jersey

= zrakovyacute pigment citlivyacute na

světlo nachaacutezejiacuteciacute se v tyčinkaacutech Jodopsin = zrakovyacute pigment citlivyacute na

barvu nachaacutezejiacuteciacute se v čiacutepciacutech

S v ě t l o

Duaacutelniacute charakter světla ndash vlněniacute i proud čaacutestic (fotonů)

Vlnovyacute model světla

vlna elektrickaacute a magnetickaacute (elektromagnetickaacute vlna je tvořena oscilujiacuteciacutem elektrickyacutem a

magnetickyacutem polem na sebe kolmyacutech a nesouciacutech vpřed energii)

Pro uacutečinky světla v mikroskopu je důležitaacute vlna elektrickaacute

= přiacutečneacute vlněniacute

postupneacute kmitaacuteniacute

jednotlivyacutech vedle sebe

ležiacuteciacutech bodů

Scheacutema světla jako elektromagnetickeacute vlny

Obr httpwwwprosoundwebcomarticleprintinvaders_from_

outer_space_electromagnetic_radiation_interference

λ - vlnovaacute deacutelka

(v oblasti svět zaacuteřeniacute

v rozmeziacute od 380 do 780 nm)

určuje barvu světla

a - amplituda

nejvyššiacute hodnota

určuje intenzitu světla

Z hlediska vlnoveacute deacutelky rozlišujeme

polychromatickeacute x monochromatickeacute světlo (selekce pomociacute barevnyacutech filtrů rarr jednotnaacute vlnovaacute deacutelka světlo zeleneacute červeneacute hellip)

Elektrickaacute vlna - sinusoida

Charakterizovaacutena dvěma veličinami

Pazourek 1975

Vlastnosti světla

Rovnoměrneacute šiacuteřeniacute světla ze zaacuteřiacuteciacuteho bodu na všechny strany rarr vlnovaacute plocha tvaru koule

Paprsek ndash směr kteryacutem se vlněniacute šiacuteřiacute a kteryacute je kolmyacute

na vlnoplochu

Pazourek 1975

- paprsek nepolarizovanyacute (A C) ndash kmitaacute v každeacutem

miacutestě a v průběhu času ve všech možnyacutech směrech

kolmyacutech na směr šiacuteřeniacute paprsku

- paprsek polarizovanyacute (B D1 D2) - kmitaacute v jedneacute

rovině přičemž rovina kmitů (vlněniacute) jednoho z nich je

kolmaacute k rovině kmitů druheacuteho

Pazourek 1975

Polarizovaneacute světlo viz

httpswwwyoutubecomwatchv=gP751qpm4n4

Murphy DB Davidson MW (2013) Fundamentals of Light Microscopy and

Electronic Imaging Jonh Wkiley amp Sons Inc Hoboken New Jersey

Osm různyacutech vlnovyacutech forem světla (znaacutezorňujiacuteciacutech různou kvalitu světla)

Odraz a lom světelnyacutech paprsků

v prostřediacutech různeacute hustoty

Důležitaacute charakteristika prostřediacute

index lomu ( n ) (= optickaacute hustota prostřediacute)

c = rychlost světla ve vakuu (stejnaacute pro všechny λ )

v = rychlost světla určiteacute vlnoveacute deacutelky ve zkoumaneacute laacutetce

c

n =

v

zde absolutniacute index lomu

(bezrozměrnaacute fyzikaacutelniacute veličina jeho jednotka je 1)

Rychlost světla (c) určiteacute vlnoveacute

deacutelky v různyacutech prostřediacutech

c ve vakuu

= 300 000 kms

Index lomu (n) některyacutech laacutetek

vzduch (vakuum) helliphellip 100 (vzduch 10002718)

voda helliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 133

plexisklo helliphelliphelliphelliphelliphellip 140 ndash 152

křemenneacute sklo helliphellip hellip 145 (čočka z křemene z Ninive ndash 7 stol přnl)

běžneacute sklo helliphelliphelliphelliphellip 151

cedrovyacute olej helliphelliphelliphelliphellip 151

imerzniacute olej Olympus hellip 1516 pro fluorescenci 1404

kanadskyacute balzaacutem helliphellip 150

krystal NaCl helliphelliphelliphellip 154

korunoveacute sklo helliphelliphelliphellip 145 ndash 156 (sodno-draselneacute bezolovnateacute)

flintoveacute sklo helliphelliphelliphellip 162 ndash 180 (olovnateacute)

diamant helliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 242

Index lomu je vždy většiacute než 100

očniacute čočka hellip 1406

sklivec helliphelliphellip 1336

Odraz světla rovnyacutem zrcadlem (reflexe)

Zaacutekony

1 Paprsek dopadajiacuteciacute kolmice dopadu a paprsek odraženyacute

ležiacute v jedneacute rovině

2 Uacutehel odrazu se rovnaacute uacutehlu dopadu

Odraz a lom paprsku

k

Důležiteacute pro mikroskopii (astronomii)

- neniacute zaacutevislost na vlnoveacute deacutelce světla (λ)

- na rozdiacutel od lomu paprsků se světelneacute

paprsky se odraacutežejiacute stejně

Pazourek 1975

Zaacutekony

1 Paprsek dopadajiacuteciacute kolmice lomu a paprsek lomenyacute ležiacute v teacuteže rovině

Lom světla (refrakce)

2 Při přechodu z prostřediacute opticky řidšiacuteho do prostřediacute opticky hustšiacuteho se paprsek laacuteme ke kolmici (A)

a z prostřediacute opticky hustšiacuteho

do prostřediacute opticky řidšiacuteho

se laacuteme od kolmice (B)

(C a D) ndash uacuteplnyacute odraz při tzv

mezniacutem uacutehlu dopadu paprsku

v přiacutepadě lomu od kolmice (B)

(viz Nikol odrazneacute hranoly světlovodneacute vlaacutekno nebo fluorescenčniacute metoda TIRFM ndash totaacutelniacute odraz exitačniacuteho zaacuteřeniacute)

Pazourek 1975

Svatyacute Kryštof od

švyacutecarskeacuteho maliacuteře

Konrada Witze (kolem 1400ndash1446)

Witz byl jedniacutem z prvniacutech

maliacuteřů kteryacute namaloval

přesnyacute způsob odrazu

světla na vodě

Disperze (rozklad) světla

= důsledek zaacutevislosti rychlosti světla v laacutetkaacutech na frekvenci světla

(λ = c f)

světlo různyacutech barev (λ)

se laacuteme různě

(červeneacute se lomiacute meacuteně než modreacute)

Přiacuteklad disperze (rozkladu) světla

Primaacuterniacute a sekundaacuterniacute duha Severniacute Čechy Foto Pavla Vaacutelovaacute 2010

D u h a

Jeden z mnoha

optickyacutech

jevů (fotometeorů)

v atmosfeacuteře

Rok 312 nl - před bitvou byzantskeacuteho ciacutesaře Konstantina I (272-337) s

konkurenčniacutem ciacutesařem Maxentiem u bran Řiacutema (tzv bitva u Milvijskeacuteho mostu) se

na obloze objevily tři zaacuteřiacuteciacute křiacuteže (halovyacute sloup parheacutelia a parhelickyacute oblouk)

Konstantin bitvu proti přesile vyhraacutel sjednotil řiacuteši a povolil v niacute vyznaacutevat křesťanstviacute

Maleacute halo (22deg) (viz 1) vedlejšiacute slunce (2) a horniacute a dolniacute halovyacute sloup (3)

vznikajiacuteciacute odrazem a lomem světelnyacutech paprsků na krystalciacutech ledu

Lom světla a dějiny

httptmagazineblogsnytimescom20121126halo-effect_r=0

1

3

2 2

3

Ohyb (difrakce) a interference

světla

Foto Pavla Vaacutelovaacute Bukovany 2015 Rozklad světla na CD - světlo žaacuterovky

Rozklad biacuteleacuteho světla na mřiacutežce

Pevnost poznaacuteniacute Olomouc 2015

Foto Pavla Vaacutelovaacute Olomouc 2015

Ohyb (difrakce) a interference

světla

Ohyb (difrakce) a interference

Difrakčniacute obrazec obsahuje světlaacute a tmavaacute miacutesta kteraacute se

střiacutedajiacute - světlaacute miacutesta nazyacutevaacuteme maxima a tmavaacute minima

Interference světla = sklaacutedaacuteniacute světelnyacutech vln

Předpoklad světlo musiacute byacutet koherentniacute

Podmiacutenka koherence

- paprsky musiacute miacutet stejnou frekvenci

- paprsky musiacute byacutet navzaacutejem rovnoběžneacute

- paprsky musiacute miacutet na sobě nezaacutevislyacute draacutehovyacute (faacutezovyacute) rozdiacutel

Vznik koherentniacuteho zaacuteřeniacute

rozděleniacutem světla

- buď odrazem pomociacute zrcadel

- nebo lomem pomociacute hranolů

Foto Pavla Vaacutelovaacute Praha 151 2016

Interference světla

stejnyacute způsob vlněniacute

(faacuteze je vzaacutejemně posunuta o sudeacute

naacutesobky λ2)

vznik interferenčniacuteho maxima

(konstruktivniacute interference)

Interference světla

asynchronniacute vlněniacute

(vzaacutejemně posunutaacute faacuteze

o licheacute naacutesobky λ2)

vznik interferenčniacuteho

minima

(destruktivniacute interference)

rarr zaacuteřeniacute zanikaacute

rarr zeslabeniacute zaacuteřeniacute

Interference dvou vrstev elektromagnetickeacuteho zaacuteřeniacute u Slunce

Čočky ndash zaacutekladniacute součaacutesti

mikroskopu

= průhlednaacute (nejčastěji skleněnaacute) tělesa omezenaacute

vypuklyacutemi nebo vydutyacutemi kulovityacutemi plochami lišiacuteciacute se od sveacuteho okoliacute odlišnyacutem indexem lomu

Zaacutekladniacute typy čoček

spojky (vypukleacute neboli konvexniacute)

rozptylky (vyduteacute konkaacutevniacute)

Pazourek 1975

Optickaacute osa ( o ) prochaacuteziacute středem čočky

Ohnisko ( F ) - bod do ktereacuteho se soustřeďujiacute paprsky probiacutehajiacuteciacute rovnoběžně s optickou osou

- 2 ohniska - předmětoveacute ohnisko ( F )

obrazoveacute ohnisko ( Facute )

- ohniskovaacute vzdaacutelenost ( f )

vzdaacutelenost ohniska od hlavniacute roviny proloženeacute středem čočky

- dvojnaacutesobnaacute ohniskovaacute vzdaacutelenost ( P Pacute )

Obrazovyacute prostor - prostor v němž vznikaacute obraz

Důležiteacute charakteristiky čočky

f

o

hlavniacute rovina

Pazourek 1975

V přiacutepadě velmi tenkeacute čočky

bull Obraz za optickou soustavou

rarr obraz s k u t e č n yacute

Skutečnyacute obraz je možneacute zachytit na stiacuteniacutetko

nebo na fotografickou desku neskutečnyacute nikoliv

bull Obraz před soustavou

rarr obraz n e s k u t e č n yacute (zdaacutenlivyacute virtuaacutelniacute)

Obraz skutečnyacute a neskutečnyacute

A ndash předmět Aacute- obraz předmětu

Upraveno podle Pazourek 1975

Francouz Augustin Jean Fresnel (1788-1827) [frenel]

Fresnelova čočka [frenelova]

- plochyacute tvar (zachovaacuteny pouze čaacutesti ktereacute měniacute směr chodu světelnyacutech paprsků)

- vyacuterazně nižšiacute hmotnost při zachovaacuteniacute podobnyacutech parametrů

Využitiacute infračidla pohybu semafory světlomety (majaacuteky) a reflektory (světla aut

divadelniacutech a filmovyacutech osvětlovaciacutech zařiacutezeniacute) zpětneacute projektory slunečniacute kolektory

na zaacutekladě tohoto principu takeacute vyacuteroba 3D displejů k mobilniacutem telefonům a televiziacutem

httpwwwmffcuniczverejnostzpravicky03_lupahtm

čočka na majaacuteku

Čočky v budoucnosti

Pokus o vyacuterobu tzv dokonaleacute čočky

Prototyp - upraveneacute tzv Maxwellovo rybiacute oko

- paprsky světla se v něm pohybujiacute po kružniciacutech a

na rozdiacutel od běžnyacutech čoček se při zobrazeniacute využijiacute

všechny paprsky

- superčočky využiacutevajiacute geometrie k tomu aby se světlo

soustředilo do oblasti menšiacute než je jeho vlnovaacute deacutelka

(zatiacutem se neviacute jak do čočky vyhovujiacuteciacutem způsobem

doveacutest světlo)

Využitiacute v budoucnu

mimo jineacute v pozorovaacuteniacute živyacutech buněk při velkeacutem zvětšeniacute

pomociacute obyčejneacuteho světla bez jejich narušeniacute

Viacutece viz Plaacutešek J Mikroskopy se superčočkami httpwwwvesmircz | Vesmiacuter 91 531 zaacuteřiacute 2012

Hranoly

- doplňky optickyacutech systeacutemů

- většinou tvar rovnostranneacuteho trojuacutehelniacuteka

- využiacutevajiacute uacuteplneacuteho odrazu

Funkce

- změna chodu paprsků pod různyacutemi uacutehly

- rozdvojeniacute paprsků

Pazourek 1975

Různeacute typy odraznyacutech hranolů

Hranoly

Různeacute typy hranolů

httplaserykvalitneczimagestext_25_zakladyoptiky1odrazne_hranolyjpg

Viz dichroickeacute zrcadlo u fluorescenčniacuteho mikroskopu

Chod paprsků v binokulaacuterniacutem tubusu

Pazourek 1975

Nikol = hranol z islandskeacuteho vaacutepence

rarr polarizace světla

Dvojlomnyacute vaacutepencovyacute

krystal

ř ndash paprsek řaacutednyacute (zanikaacute na začerněneacute ploše)

mř ndash paprsek mimořaacutednyacute (lineaacuterně polarizovanyacute

využit k osvětleniacute)

začerněnaacute plocha

Nikol

Pazourek 1975

vzduchovaacute štěrbina

- rychlost světla je

v různyacutech směrech různaacute

- uacutehel paprsku řaacutedneacuteho a

mimořaacutedneacuteho je odlišnyacute

(u Vikingů - slunečniacute kaacutemen

soacutelarsteinn)

Chod paprsků ve světlovodneacutem vlaacuteknu

Princip uacuteplnyacute odraz paprsku

- uvnitř skleněneacuteho vlaacutekna je opticky hustšiacute prostřediacute

- nutnost dostatečně silneacuteho světelneacuteho zdroje

Světlovodnaacute vlaacutekna

Pazourek 1975

Širokeacute využitiacute v praxi optickeacute kabely ndash přenos signaacutelů ve sdělovaciacute technice

světlovody umožňujiacuteciacute veacutest denniacute světlo vedeniacute světla u stereolup endoskopů hellip

Page 12: Světelná a elektronová mikroskopie...(AMF – Atomic Force Miroscope) - skenování povrchu materiálu pomocí hrotu zavěšeném na pružném výkyvném raménku, který je přitahován

Systeacutem dvou čoček

16 stol

deacutelka 12 m

(tzv kompaudniacute mikroskop)

httpwwwmicroscopyfsueduprimermuseum

httpmicromagnetfsueduprimermuseumjanssenhtml

httpwwwapsorgpublicationsapsnews200403historycfm

Janssenův mikroskop

17 stol Galileo Galilei (1564-1642)

ndash italskyacute astronom a matematik

1604-1609 ndash konstrukce dalekohledu

- použitiacute složeneacuteho mikroskopu

nazvaneacuteho occhiolino

k vědeckyacutem uacutečelům (pozorovaacuteniacute

oka mouchy)

Nejasnosti kolem vynaacutelezu mikroskopu

ndash z dobovyacutech zpraacutev neniacute jasneacute zda se jednaacute o mikroskop

jehož okulaacuterem je spojka nebo o dalekohled s rozptylkou

(kteryacute použiacuteval Galileo)

Anthony van Leeuwenhoek (1632-1723)

ndash obchodniacutek s laacutetkami v holandskeacutem Delftu

ndash sestrojil jednočočkovyacute mikroskop silnyacute zvětšovaciacute

efekt čočky

(až 270x)

ndash nejprve zkoumaacuteniacute struktury laacutetek

později zkoumal listy květiny drobneacute organismy lidskou krev kůži vlasy hellip

- prvniacute viděl a popsal krevniacute buňky chovaacuteniacute lidskyacutech spermiiacute

- vyacuteroba asi 250 mikroskopů

17 stol

Jednočočkovyacute Leeuwenhoekův

mikroskop

httpbiologimediacentrecomwp-contentuploads201101image2png

Anglickyacute původ Italskyacute původ

17 stol

Prvniacute světelneacute mikroskopy

Jednočočkovyacute

mikroskop Dvoučočkoveacute

mikroskopy

Robert Hook (1635-1703) [huacutek]

ndash anglickyacute fyzik chemik geolog astronom hellip

ndash použiacuteval zakoupenyacute složenyacute mikroskop s viacutece

čočkami (tzv kompaudniacute) vylepšenyacute o kvalitniacute osvětleniacute

17 stol

Hookův mikroskop

- vylepšeniacute osvětleniacute použitiacute irisoveacute clony

irisovaacute clona

- zkoumaacuteniacute slabyacutech plaacutetků korku z korkovniacuteku

živeacute laacutetky jsou tvořeny buňkami

- 1665 - kniha bdquoMicrographialdquo

mikroskopickeacute pozorovaacuteniacute rostlinnyacutech

pletiv živočišnyacutech objektů a struktur

mineraacutelů

Rok vydaacuteniacute 1665 Micrographia or some Physiological Descriptions of Minute Bodies

made by Magnifying Glasses with Observations and Inquiries thereupon

London 1665

17 stol Leeuwenhoek Hook

Angličan Henry Power (1626ndash1668) ndash jako

prvniacute (1663) publikoval pozorovaacuteniacute mikroskopem

Marcello Malphighi (1628ndash1694)

italskyacute leacutekař

zakladatel mikroskopickeacute anatomie

- objev krevniacutech kapilaacuter savců (1661)

- malphigickeacute trubice hmyzu

18 stol

ndash mikroskopy přežily jako hračka pro zaacutebavu anglickyacutech gentlemanů zajiacutemajiacuteciacutech se o tajemstviacute přiacuterody

19 stol

zač 19 stol ndash Dollond Lister Amici - vynaacutelez

achromatickeacuteho objektivu

ndash do teacute doby použiacutevaacuteniacute jednočočkoveacuteho mikroskopu (dvoučočkovyacute

mikroskop podaacuteval značně zkreslenyacute obraz)

Vyacuteznačniacute vědci 19 stol použiacutevajiacuteciacute k svyacutem pozorovaacuteniacutem mikroskop

Robert Brown (1773-1858) - objev jaacutedra (1831)

Luis Pasteur (1822-1895) (francouzskyacute mikrobiolog)

- objev kvasinek

Robert Koch (1843-1910) (německyacute leacutekař a mikrobiolog)

- objev původců tuberkuloacutezy a cholery

Jan Evangelista Purkyně (1787-1869) (českyacute fyziolog)

- 1825 popsal jaacutedro u živočišneacute buňky (lupa)

od r 1832 použiacutevaacute kvalitniacute mikroskop

Microscope

stand VII

19 stol ndash dalšiacute vyacutevoj mikroskopů

Carl Zeiss ndash průmyslovaacute vyacuteroba mikroskopů (firma Zeiss)

Ernst Karl Abbe ndash teoretickaacute studia optickyacutech principů

Otto Schott ndash vyacutezkum optickeacuteho skla

August Koumlhler ndash kvalitniacute osvětleniacute

Otto Schott (1851-1935)

Ernst Abbe (1840-1905)

Carl Zeiss (1816-1888)

August Koumlhler (1866-1948)

Mikroskopy 19 stoletiacute

19 stol

20 stol

Konfokaacutelniacute mikroskop

A1R (Nikon)

BX60 (Olympus)

Laserovyacute fluorescenčniacute mikroskop bdquoLight Sheetldquo Centrum regionu Hanaacute pro biotechnologickyacute a zemědělskyacute vyacutezkum Odděleniacute buněčneacute biologie

21 stol

21 stol

Digitaacutelniacute holografickyacute mikroskop firmy Lynceacutee Tec

Důležitaacute data při rozvoji moderniacute světelneacute mikroskopie

1847 - Zahaacutejeniacute vyacuteroby mikroskopů firmou Carl Zeiss v Jeně

1903 - Ultramikroskop (Richard Zsigmondy NC 1925)

1911 - Fluorescenčniacute mikroskop (Carl Reichert)

1935 - Faacutezovyacute kontrast (Fritz Zernike NC 1953)

1955 - Diferenciaacutelniacute interferenčniacute kontrast (DIC ndash Nomarski)

1968 - Rastrovaciacute tandemovyacute konfokaacutelniacute mikroskop (TSCM)

1978 - Laserovyacute konfokaacutelniacute rastrovaciacute mikroskop

1994 - Princip STED mikroskopie (S W Hell NC 2014)

(Stimulated Emission Depletion ndash redukce fluorescence stimulovanou emisiacute)

po roce 2000 - rozvoj tzv superrozlišovaciacute mikroskopie

2006 - Super-resolučniacute fluorescenčniacute mikroskop (Eric Betzig

Stefan W Hell a William E Moerner NC za chemii 2014)

NC = Nobelova cena

30 leacuteta 20 stoletiacute

ndash hranice vyacutevoje optickeacuteho (paprskoveacuteho) mikroskopu

(hranice rozlišeniacute světelneacuteho mikroskopu je diacuteky velikosti deacutelky světla 02 microm)

- dalšiacute zvětšovaacuteniacute pozorovanyacutech objektů na jineacutem principu

- miacutesto světelneacuteho paprsku elektronovyacute paprsek

(= tok rychlyacutech elektronů)

- miacutesto skleněneacute čočky magnetickaacute čočka

1931 - Ernst Ruska Max Knoll

prvniacute elektronovyacute mikroskop

tzv prozařovaciacute transmisniacute EM

(TEM ndash Transmission Electron Microscope)

- originaacutelniacute zvětšeniacute 1 000 - 250 000x

Ernst Ruska (1906-1988)

1942 - rastrovaciacute EM

(SEM ndash Scanning Electron Microscope) - postupneacute bombardovaacuteniacute vzorku elektrony

- zvětšeniacute až 30 000x

EM UacuteMG AV ČR Praha-Krč

FEI ndash TECHNAIG2TEM + kryozařiacutezeniacute

200 kV (λ el = 00025 nm)

RS 01 nm

prvkovaacute analyacuteza vzorků

zařiacutezeniacute pro

prvkovou analyacutezu

vzorků

Foto Pavla Vaacutelovaacute 2010

Brněnštiacute vědci z Uacutestavu přiacutestrojoveacute techniky AV ČR (UacutePT) a Mendelovy

univerzity představili novou metodu pozorovaacuteniacute rostlinnyacutech vzorků v jejich

přirozeneacutem stavu (za využitiacute kryoprotektiv)

Viacutece na httpe-svete15cztechnikacesti-vedci-posunuli-hranice-elektronove-mikroskopie-1174818

Enviromentaacutelniacute rastrovaciacute elektronovyacute mikroskop Aquasem II

TEM TITAN FEI Company Mgr Klaacutera Čeacutepe PhD

Vysokorozlišovaciacute transmisniacute elektronovyacute mikroskop

schopnyacute nahleacutednout do struktury materiaacutelů až na uacuterovni atomů

a současně přesně zmapovat jejich chemickeacute složeniacute

Regionaacutelniacute centrum pokročilyacutech

materiaacutelů (RCPTM)

Odd uhliacutekoveacute nanostruktury

PřF UP OL

Vysokorozlišovaciacute transmisniacute

elektronovyacute mikroskop TITAN (FEI)

Foto Pavla Vaacutelovaacute 2015

Transmisniacute elektronovyacute

mikroskop Jeol

Regionaacutelniacute centrum pokročilyacutech materiaacutelů (RCPTM)

Odd uhliacutekoveacute nanostruktury PřF UP OL

Neoptickeacute mikroskopy

1981

Řaacutedkovaciacute tunelovyacute mikroskop (STM ndash Scanning Tunnelling Microscope)

- mapovaacuteniacute povrchu pomociacute pohybu vodiveacuteho hrotu nad vodivyacutem povrchem sledovaneacuteho materiaacutelu

1986

Mikroskop atomaacuterniacutech sil (AMF ndash Atomic Force Miroscope)

- skenovaacuteniacute povrchu materiaacutelu pomociacute hrotu zavěšeneacutem na pružneacutem vyacutekyvneacutem rameacutenku kteryacute je přitahovaacuten elektrostatickyacutemi a Van der Walsovyacutemi silami

Rozlišeniacute v řaacutedech pikometrů (10-12 m) ndash rozeznaacuteniacute struktur

jednotlivyacutech atomů

O p t i c k eacute p r i n c i p y

světelneacute mikroskopie

Reichl J Všetička M Encyklopedie fyziky [online] copy2006-2014

[vid 2014] Dostupneacute z httpfyzikajreichlcommainarticleview431-optika Lepil O (2013) Fyzika pro gymnaacutezia Optika Prometheus Praha 4 přepracovaneacute vydaacuteniacute

Murphy DB Davidson MW (2013) Fundamentals of Light

Microscopy and Electronic Imaging Willey-Blackwell Published

2013 by John Wiley amp Sons Inc Hoboken New Jersey

S v ě t l o

= čaacutest rozsaacutehleacute oblasti elektromagnetickeacuteho zaacuteřeniacute

kterou vniacutemaacuteme zrakem

Rozhlasoveacute a raacutedioveacute vlny 250 km - 1 mm

Infračerveneacute zaacuteřeniacute 05 mm - 08 μm

Světlo (viditelneacute zaacuteřeniacute) 08 μm - 04 μm

Ultrafialoveacute zaacuteřeniacute 04 microm - 01 microm

Roumlntgenovo zaacuteřeniacute (X-paprsky) 15 nm - 0005 nm

γ-zaacuteřeniacute pod 00001 nm

Přibližneacute hodnoty ndash individuaacutelniacute vlastnosti zraku různyacutech lidiacute

S v ě t l o

= čaacutest rozsaacutehleacute oblasti elektromagnetickeacuteho zaacuteřeniacute

kterou vniacutemaacuteme zrakem

rarr se zkracujiacuteciacute se vlnovou deacutelkou se zvyšuje frekvence (energie)

Viditelneacute

Vlnoveacute deacutelky světla a relativniacute citlivost oka

Murphy DB Davidson MW (2013) Fundamentals of Light Microscopy and Electronic

Imaging Willey-Blackwell Published 2013 by John Wiley amp Sons Inc Hoboken New Jersey

= zrakovyacute pigment citlivyacute na

světlo nachaacutezejiacuteciacute se v tyčinkaacutech Jodopsin = zrakovyacute pigment citlivyacute na

barvu nachaacutezejiacuteciacute se v čiacutepciacutech

S v ě t l o

Duaacutelniacute charakter světla ndash vlněniacute i proud čaacutestic (fotonů)

Vlnovyacute model světla

vlna elektrickaacute a magnetickaacute (elektromagnetickaacute vlna je tvořena oscilujiacuteciacutem elektrickyacutem a

magnetickyacutem polem na sebe kolmyacutech a nesouciacutech vpřed energii)

Pro uacutečinky světla v mikroskopu je důležitaacute vlna elektrickaacute

= přiacutečneacute vlněniacute

postupneacute kmitaacuteniacute

jednotlivyacutech vedle sebe

ležiacuteciacutech bodů

Scheacutema světla jako elektromagnetickeacute vlny

Obr httpwwwprosoundwebcomarticleprintinvaders_from_

outer_space_electromagnetic_radiation_interference

λ - vlnovaacute deacutelka

(v oblasti svět zaacuteřeniacute

v rozmeziacute od 380 do 780 nm)

určuje barvu světla

a - amplituda

nejvyššiacute hodnota

určuje intenzitu světla

Z hlediska vlnoveacute deacutelky rozlišujeme

polychromatickeacute x monochromatickeacute světlo (selekce pomociacute barevnyacutech filtrů rarr jednotnaacute vlnovaacute deacutelka světlo zeleneacute červeneacute hellip)

Elektrickaacute vlna - sinusoida

Charakterizovaacutena dvěma veličinami

Pazourek 1975

Vlastnosti světla

Rovnoměrneacute šiacuteřeniacute světla ze zaacuteřiacuteciacuteho bodu na všechny strany rarr vlnovaacute plocha tvaru koule

Paprsek ndash směr kteryacutem se vlněniacute šiacuteřiacute a kteryacute je kolmyacute

na vlnoplochu

Pazourek 1975

- paprsek nepolarizovanyacute (A C) ndash kmitaacute v každeacutem

miacutestě a v průběhu času ve všech možnyacutech směrech

kolmyacutech na směr šiacuteřeniacute paprsku

- paprsek polarizovanyacute (B D1 D2) - kmitaacute v jedneacute

rovině přičemž rovina kmitů (vlněniacute) jednoho z nich je

kolmaacute k rovině kmitů druheacuteho

Pazourek 1975

Polarizovaneacute světlo viz

httpswwwyoutubecomwatchv=gP751qpm4n4

Murphy DB Davidson MW (2013) Fundamentals of Light Microscopy and

Electronic Imaging Jonh Wkiley amp Sons Inc Hoboken New Jersey

Osm různyacutech vlnovyacutech forem světla (znaacutezorňujiacuteciacutech různou kvalitu světla)

Odraz a lom světelnyacutech paprsků

v prostřediacutech různeacute hustoty

Důležitaacute charakteristika prostřediacute

index lomu ( n ) (= optickaacute hustota prostřediacute)

c = rychlost světla ve vakuu (stejnaacute pro všechny λ )

v = rychlost světla určiteacute vlnoveacute deacutelky ve zkoumaneacute laacutetce

c

n =

v

zde absolutniacute index lomu

(bezrozměrnaacute fyzikaacutelniacute veličina jeho jednotka je 1)

Rychlost světla (c) určiteacute vlnoveacute

deacutelky v různyacutech prostřediacutech

c ve vakuu

= 300 000 kms

Index lomu (n) některyacutech laacutetek

vzduch (vakuum) helliphellip 100 (vzduch 10002718)

voda helliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 133

plexisklo helliphelliphelliphelliphelliphellip 140 ndash 152

křemenneacute sklo helliphellip hellip 145 (čočka z křemene z Ninive ndash 7 stol přnl)

běžneacute sklo helliphelliphelliphelliphellip 151

cedrovyacute olej helliphelliphelliphelliphellip 151

imerzniacute olej Olympus hellip 1516 pro fluorescenci 1404

kanadskyacute balzaacutem helliphellip 150

krystal NaCl helliphelliphelliphellip 154

korunoveacute sklo helliphelliphelliphellip 145 ndash 156 (sodno-draselneacute bezolovnateacute)

flintoveacute sklo helliphelliphelliphellip 162 ndash 180 (olovnateacute)

diamant helliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 242

Index lomu je vždy většiacute než 100

očniacute čočka hellip 1406

sklivec helliphelliphellip 1336

Odraz světla rovnyacutem zrcadlem (reflexe)

Zaacutekony

1 Paprsek dopadajiacuteciacute kolmice dopadu a paprsek odraženyacute

ležiacute v jedneacute rovině

2 Uacutehel odrazu se rovnaacute uacutehlu dopadu

Odraz a lom paprsku

k

Důležiteacute pro mikroskopii (astronomii)

- neniacute zaacutevislost na vlnoveacute deacutelce světla (λ)

- na rozdiacutel od lomu paprsků se světelneacute

paprsky se odraacutežejiacute stejně

Pazourek 1975

Zaacutekony

1 Paprsek dopadajiacuteciacute kolmice lomu a paprsek lomenyacute ležiacute v teacuteže rovině

Lom světla (refrakce)

2 Při přechodu z prostřediacute opticky řidšiacuteho do prostřediacute opticky hustšiacuteho se paprsek laacuteme ke kolmici (A)

a z prostřediacute opticky hustšiacuteho

do prostřediacute opticky řidšiacuteho

se laacuteme od kolmice (B)

(C a D) ndash uacuteplnyacute odraz při tzv

mezniacutem uacutehlu dopadu paprsku

v přiacutepadě lomu od kolmice (B)

(viz Nikol odrazneacute hranoly světlovodneacute vlaacutekno nebo fluorescenčniacute metoda TIRFM ndash totaacutelniacute odraz exitačniacuteho zaacuteřeniacute)

Pazourek 1975

Svatyacute Kryštof od

švyacutecarskeacuteho maliacuteře

Konrada Witze (kolem 1400ndash1446)

Witz byl jedniacutem z prvniacutech

maliacuteřů kteryacute namaloval

přesnyacute způsob odrazu

světla na vodě

Disperze (rozklad) světla

= důsledek zaacutevislosti rychlosti světla v laacutetkaacutech na frekvenci světla

(λ = c f)

světlo různyacutech barev (λ)

se laacuteme různě

(červeneacute se lomiacute meacuteně než modreacute)

Přiacuteklad disperze (rozkladu) světla

Primaacuterniacute a sekundaacuterniacute duha Severniacute Čechy Foto Pavla Vaacutelovaacute 2010

D u h a

Jeden z mnoha

optickyacutech

jevů (fotometeorů)

v atmosfeacuteře

Rok 312 nl - před bitvou byzantskeacuteho ciacutesaře Konstantina I (272-337) s

konkurenčniacutem ciacutesařem Maxentiem u bran Řiacutema (tzv bitva u Milvijskeacuteho mostu) se

na obloze objevily tři zaacuteřiacuteciacute křiacuteže (halovyacute sloup parheacutelia a parhelickyacute oblouk)

Konstantin bitvu proti přesile vyhraacutel sjednotil řiacuteši a povolil v niacute vyznaacutevat křesťanstviacute

Maleacute halo (22deg) (viz 1) vedlejšiacute slunce (2) a horniacute a dolniacute halovyacute sloup (3)

vznikajiacuteciacute odrazem a lomem světelnyacutech paprsků na krystalciacutech ledu

Lom světla a dějiny

httptmagazineblogsnytimescom20121126halo-effect_r=0

1

3

2 2

3

Ohyb (difrakce) a interference

světla

Foto Pavla Vaacutelovaacute Bukovany 2015 Rozklad světla na CD - světlo žaacuterovky

Rozklad biacuteleacuteho světla na mřiacutežce

Pevnost poznaacuteniacute Olomouc 2015

Foto Pavla Vaacutelovaacute Olomouc 2015

Ohyb (difrakce) a interference

světla

Ohyb (difrakce) a interference

Difrakčniacute obrazec obsahuje světlaacute a tmavaacute miacutesta kteraacute se

střiacutedajiacute - světlaacute miacutesta nazyacutevaacuteme maxima a tmavaacute minima

Interference světla = sklaacutedaacuteniacute světelnyacutech vln

Předpoklad světlo musiacute byacutet koherentniacute

Podmiacutenka koherence

- paprsky musiacute miacutet stejnou frekvenci

- paprsky musiacute byacutet navzaacutejem rovnoběžneacute

- paprsky musiacute miacutet na sobě nezaacutevislyacute draacutehovyacute (faacutezovyacute) rozdiacutel

Vznik koherentniacuteho zaacuteřeniacute

rozděleniacutem světla

- buď odrazem pomociacute zrcadel

- nebo lomem pomociacute hranolů

Foto Pavla Vaacutelovaacute Praha 151 2016

Interference světla

stejnyacute způsob vlněniacute

(faacuteze je vzaacutejemně posunuta o sudeacute

naacutesobky λ2)

vznik interferenčniacuteho maxima

(konstruktivniacute interference)

Interference světla

asynchronniacute vlněniacute

(vzaacutejemně posunutaacute faacuteze

o licheacute naacutesobky λ2)

vznik interferenčniacuteho

minima

(destruktivniacute interference)

rarr zaacuteřeniacute zanikaacute

rarr zeslabeniacute zaacuteřeniacute

Interference dvou vrstev elektromagnetickeacuteho zaacuteřeniacute u Slunce

Čočky ndash zaacutekladniacute součaacutesti

mikroskopu

= průhlednaacute (nejčastěji skleněnaacute) tělesa omezenaacute

vypuklyacutemi nebo vydutyacutemi kulovityacutemi plochami lišiacuteciacute se od sveacuteho okoliacute odlišnyacutem indexem lomu

Zaacutekladniacute typy čoček

spojky (vypukleacute neboli konvexniacute)

rozptylky (vyduteacute konkaacutevniacute)

Pazourek 1975

Optickaacute osa ( o ) prochaacuteziacute středem čočky

Ohnisko ( F ) - bod do ktereacuteho se soustřeďujiacute paprsky probiacutehajiacuteciacute rovnoběžně s optickou osou

- 2 ohniska - předmětoveacute ohnisko ( F )

obrazoveacute ohnisko ( Facute )

- ohniskovaacute vzdaacutelenost ( f )

vzdaacutelenost ohniska od hlavniacute roviny proloženeacute středem čočky

- dvojnaacutesobnaacute ohniskovaacute vzdaacutelenost ( P Pacute )

Obrazovyacute prostor - prostor v němž vznikaacute obraz

Důležiteacute charakteristiky čočky

f

o

hlavniacute rovina

Pazourek 1975

V přiacutepadě velmi tenkeacute čočky

bull Obraz za optickou soustavou

rarr obraz s k u t e č n yacute

Skutečnyacute obraz je možneacute zachytit na stiacuteniacutetko

nebo na fotografickou desku neskutečnyacute nikoliv

bull Obraz před soustavou

rarr obraz n e s k u t e č n yacute (zdaacutenlivyacute virtuaacutelniacute)

Obraz skutečnyacute a neskutečnyacute

A ndash předmět Aacute- obraz předmětu

Upraveno podle Pazourek 1975

Francouz Augustin Jean Fresnel (1788-1827) [frenel]

Fresnelova čočka [frenelova]

- plochyacute tvar (zachovaacuteny pouze čaacutesti ktereacute měniacute směr chodu světelnyacutech paprsků)

- vyacuterazně nižšiacute hmotnost při zachovaacuteniacute podobnyacutech parametrů

Využitiacute infračidla pohybu semafory světlomety (majaacuteky) a reflektory (světla aut

divadelniacutech a filmovyacutech osvětlovaciacutech zařiacutezeniacute) zpětneacute projektory slunečniacute kolektory

na zaacutekladě tohoto principu takeacute vyacuteroba 3D displejů k mobilniacutem telefonům a televiziacutem

httpwwwmffcuniczverejnostzpravicky03_lupahtm

čočka na majaacuteku

Čočky v budoucnosti

Pokus o vyacuterobu tzv dokonaleacute čočky

Prototyp - upraveneacute tzv Maxwellovo rybiacute oko

- paprsky světla se v něm pohybujiacute po kružniciacutech a

na rozdiacutel od běžnyacutech čoček se při zobrazeniacute využijiacute

všechny paprsky

- superčočky využiacutevajiacute geometrie k tomu aby se světlo

soustředilo do oblasti menšiacute než je jeho vlnovaacute deacutelka

(zatiacutem se neviacute jak do čočky vyhovujiacuteciacutem způsobem

doveacutest světlo)

Využitiacute v budoucnu

mimo jineacute v pozorovaacuteniacute živyacutech buněk při velkeacutem zvětšeniacute

pomociacute obyčejneacuteho světla bez jejich narušeniacute

Viacutece viz Plaacutešek J Mikroskopy se superčočkami httpwwwvesmircz | Vesmiacuter 91 531 zaacuteřiacute 2012

Hranoly

- doplňky optickyacutech systeacutemů

- většinou tvar rovnostranneacuteho trojuacutehelniacuteka

- využiacutevajiacute uacuteplneacuteho odrazu

Funkce

- změna chodu paprsků pod různyacutemi uacutehly

- rozdvojeniacute paprsků

Pazourek 1975

Různeacute typy odraznyacutech hranolů

Hranoly

Různeacute typy hranolů

httplaserykvalitneczimagestext_25_zakladyoptiky1odrazne_hranolyjpg

Viz dichroickeacute zrcadlo u fluorescenčniacuteho mikroskopu

Chod paprsků v binokulaacuterniacutem tubusu

Pazourek 1975

Nikol = hranol z islandskeacuteho vaacutepence

rarr polarizace světla

Dvojlomnyacute vaacutepencovyacute

krystal

ř ndash paprsek řaacutednyacute (zanikaacute na začerněneacute ploše)

mř ndash paprsek mimořaacutednyacute (lineaacuterně polarizovanyacute

využit k osvětleniacute)

začerněnaacute plocha

Nikol

Pazourek 1975

vzduchovaacute štěrbina

- rychlost světla je

v různyacutech směrech různaacute

- uacutehel paprsku řaacutedneacuteho a

mimořaacutedneacuteho je odlišnyacute

(u Vikingů - slunečniacute kaacutemen

soacutelarsteinn)

Chod paprsků ve světlovodneacutem vlaacuteknu

Princip uacuteplnyacute odraz paprsku

- uvnitř skleněneacuteho vlaacutekna je opticky hustšiacute prostřediacute

- nutnost dostatečně silneacuteho světelneacuteho zdroje

Světlovodnaacute vlaacutekna

Pazourek 1975

Širokeacute využitiacute v praxi optickeacute kabely ndash přenos signaacutelů ve sdělovaciacute technice

světlovody umožňujiacuteciacute veacutest denniacute světlo vedeniacute světla u stereolup endoskopů hellip

Page 13: Světelná a elektronová mikroskopie...(AMF – Atomic Force Miroscope) - skenování povrchu materiálu pomocí hrotu zavěšeném na pružném výkyvném raménku, který je přitahován

17 stol Galileo Galilei (1564-1642)

ndash italskyacute astronom a matematik

1604-1609 ndash konstrukce dalekohledu

- použitiacute složeneacuteho mikroskopu

nazvaneacuteho occhiolino

k vědeckyacutem uacutečelům (pozorovaacuteniacute

oka mouchy)

Nejasnosti kolem vynaacutelezu mikroskopu

ndash z dobovyacutech zpraacutev neniacute jasneacute zda se jednaacute o mikroskop

jehož okulaacuterem je spojka nebo o dalekohled s rozptylkou

(kteryacute použiacuteval Galileo)

Anthony van Leeuwenhoek (1632-1723)

ndash obchodniacutek s laacutetkami v holandskeacutem Delftu

ndash sestrojil jednočočkovyacute mikroskop silnyacute zvětšovaciacute

efekt čočky

(až 270x)

ndash nejprve zkoumaacuteniacute struktury laacutetek

později zkoumal listy květiny drobneacute organismy lidskou krev kůži vlasy hellip

- prvniacute viděl a popsal krevniacute buňky chovaacuteniacute lidskyacutech spermiiacute

- vyacuteroba asi 250 mikroskopů

17 stol

Jednočočkovyacute Leeuwenhoekův

mikroskop

httpbiologimediacentrecomwp-contentuploads201101image2png

Anglickyacute původ Italskyacute původ

17 stol

Prvniacute světelneacute mikroskopy

Jednočočkovyacute

mikroskop Dvoučočkoveacute

mikroskopy

Robert Hook (1635-1703) [huacutek]

ndash anglickyacute fyzik chemik geolog astronom hellip

ndash použiacuteval zakoupenyacute složenyacute mikroskop s viacutece

čočkami (tzv kompaudniacute) vylepšenyacute o kvalitniacute osvětleniacute

17 stol

Hookův mikroskop

- vylepšeniacute osvětleniacute použitiacute irisoveacute clony

irisovaacute clona

- zkoumaacuteniacute slabyacutech plaacutetků korku z korkovniacuteku

živeacute laacutetky jsou tvořeny buňkami

- 1665 - kniha bdquoMicrographialdquo

mikroskopickeacute pozorovaacuteniacute rostlinnyacutech

pletiv živočišnyacutech objektů a struktur

mineraacutelů

Rok vydaacuteniacute 1665 Micrographia or some Physiological Descriptions of Minute Bodies

made by Magnifying Glasses with Observations and Inquiries thereupon

London 1665

17 stol Leeuwenhoek Hook

Angličan Henry Power (1626ndash1668) ndash jako

prvniacute (1663) publikoval pozorovaacuteniacute mikroskopem

Marcello Malphighi (1628ndash1694)

italskyacute leacutekař

zakladatel mikroskopickeacute anatomie

- objev krevniacutech kapilaacuter savců (1661)

- malphigickeacute trubice hmyzu

18 stol

ndash mikroskopy přežily jako hračka pro zaacutebavu anglickyacutech gentlemanů zajiacutemajiacuteciacutech se o tajemstviacute přiacuterody

19 stol

zač 19 stol ndash Dollond Lister Amici - vynaacutelez

achromatickeacuteho objektivu

ndash do teacute doby použiacutevaacuteniacute jednočočkoveacuteho mikroskopu (dvoučočkovyacute

mikroskop podaacuteval značně zkreslenyacute obraz)

Vyacuteznačniacute vědci 19 stol použiacutevajiacuteciacute k svyacutem pozorovaacuteniacutem mikroskop

Robert Brown (1773-1858) - objev jaacutedra (1831)

Luis Pasteur (1822-1895) (francouzskyacute mikrobiolog)

- objev kvasinek

Robert Koch (1843-1910) (německyacute leacutekař a mikrobiolog)

- objev původců tuberkuloacutezy a cholery

Jan Evangelista Purkyně (1787-1869) (českyacute fyziolog)

- 1825 popsal jaacutedro u živočišneacute buňky (lupa)

od r 1832 použiacutevaacute kvalitniacute mikroskop

Microscope

stand VII

19 stol ndash dalšiacute vyacutevoj mikroskopů

Carl Zeiss ndash průmyslovaacute vyacuteroba mikroskopů (firma Zeiss)

Ernst Karl Abbe ndash teoretickaacute studia optickyacutech principů

Otto Schott ndash vyacutezkum optickeacuteho skla

August Koumlhler ndash kvalitniacute osvětleniacute

Otto Schott (1851-1935)

Ernst Abbe (1840-1905)

Carl Zeiss (1816-1888)

August Koumlhler (1866-1948)

Mikroskopy 19 stoletiacute

19 stol

20 stol

Konfokaacutelniacute mikroskop

A1R (Nikon)

BX60 (Olympus)

Laserovyacute fluorescenčniacute mikroskop bdquoLight Sheetldquo Centrum regionu Hanaacute pro biotechnologickyacute a zemědělskyacute vyacutezkum Odděleniacute buněčneacute biologie

21 stol

21 stol

Digitaacutelniacute holografickyacute mikroskop firmy Lynceacutee Tec

Důležitaacute data při rozvoji moderniacute světelneacute mikroskopie

1847 - Zahaacutejeniacute vyacuteroby mikroskopů firmou Carl Zeiss v Jeně

1903 - Ultramikroskop (Richard Zsigmondy NC 1925)

1911 - Fluorescenčniacute mikroskop (Carl Reichert)

1935 - Faacutezovyacute kontrast (Fritz Zernike NC 1953)

1955 - Diferenciaacutelniacute interferenčniacute kontrast (DIC ndash Nomarski)

1968 - Rastrovaciacute tandemovyacute konfokaacutelniacute mikroskop (TSCM)

1978 - Laserovyacute konfokaacutelniacute rastrovaciacute mikroskop

1994 - Princip STED mikroskopie (S W Hell NC 2014)

(Stimulated Emission Depletion ndash redukce fluorescence stimulovanou emisiacute)

po roce 2000 - rozvoj tzv superrozlišovaciacute mikroskopie

2006 - Super-resolučniacute fluorescenčniacute mikroskop (Eric Betzig

Stefan W Hell a William E Moerner NC za chemii 2014)

NC = Nobelova cena

30 leacuteta 20 stoletiacute

ndash hranice vyacutevoje optickeacuteho (paprskoveacuteho) mikroskopu

(hranice rozlišeniacute světelneacuteho mikroskopu je diacuteky velikosti deacutelky světla 02 microm)

- dalšiacute zvětšovaacuteniacute pozorovanyacutech objektů na jineacutem principu

- miacutesto světelneacuteho paprsku elektronovyacute paprsek

(= tok rychlyacutech elektronů)

- miacutesto skleněneacute čočky magnetickaacute čočka

1931 - Ernst Ruska Max Knoll

prvniacute elektronovyacute mikroskop

tzv prozařovaciacute transmisniacute EM

(TEM ndash Transmission Electron Microscope)

- originaacutelniacute zvětšeniacute 1 000 - 250 000x

Ernst Ruska (1906-1988)

1942 - rastrovaciacute EM

(SEM ndash Scanning Electron Microscope) - postupneacute bombardovaacuteniacute vzorku elektrony

- zvětšeniacute až 30 000x

EM UacuteMG AV ČR Praha-Krč

FEI ndash TECHNAIG2TEM + kryozařiacutezeniacute

200 kV (λ el = 00025 nm)

RS 01 nm

prvkovaacute analyacuteza vzorků

zařiacutezeniacute pro

prvkovou analyacutezu

vzorků

Foto Pavla Vaacutelovaacute 2010

Brněnštiacute vědci z Uacutestavu přiacutestrojoveacute techniky AV ČR (UacutePT) a Mendelovy

univerzity představili novou metodu pozorovaacuteniacute rostlinnyacutech vzorků v jejich

přirozeneacutem stavu (za využitiacute kryoprotektiv)

Viacutece na httpe-svete15cztechnikacesti-vedci-posunuli-hranice-elektronove-mikroskopie-1174818

Enviromentaacutelniacute rastrovaciacute elektronovyacute mikroskop Aquasem II

TEM TITAN FEI Company Mgr Klaacutera Čeacutepe PhD

Vysokorozlišovaciacute transmisniacute elektronovyacute mikroskop

schopnyacute nahleacutednout do struktury materiaacutelů až na uacuterovni atomů

a současně přesně zmapovat jejich chemickeacute složeniacute

Regionaacutelniacute centrum pokročilyacutech

materiaacutelů (RCPTM)

Odd uhliacutekoveacute nanostruktury

PřF UP OL

Vysokorozlišovaciacute transmisniacute

elektronovyacute mikroskop TITAN (FEI)

Foto Pavla Vaacutelovaacute 2015

Transmisniacute elektronovyacute

mikroskop Jeol

Regionaacutelniacute centrum pokročilyacutech materiaacutelů (RCPTM)

Odd uhliacutekoveacute nanostruktury PřF UP OL

Neoptickeacute mikroskopy

1981

Řaacutedkovaciacute tunelovyacute mikroskop (STM ndash Scanning Tunnelling Microscope)

- mapovaacuteniacute povrchu pomociacute pohybu vodiveacuteho hrotu nad vodivyacutem povrchem sledovaneacuteho materiaacutelu

1986

Mikroskop atomaacuterniacutech sil (AMF ndash Atomic Force Miroscope)

- skenovaacuteniacute povrchu materiaacutelu pomociacute hrotu zavěšeneacutem na pružneacutem vyacutekyvneacutem rameacutenku kteryacute je přitahovaacuten elektrostatickyacutemi a Van der Walsovyacutemi silami

Rozlišeniacute v řaacutedech pikometrů (10-12 m) ndash rozeznaacuteniacute struktur

jednotlivyacutech atomů

O p t i c k eacute p r i n c i p y

světelneacute mikroskopie

Reichl J Všetička M Encyklopedie fyziky [online] copy2006-2014

[vid 2014] Dostupneacute z httpfyzikajreichlcommainarticleview431-optika Lepil O (2013) Fyzika pro gymnaacutezia Optika Prometheus Praha 4 přepracovaneacute vydaacuteniacute

Murphy DB Davidson MW (2013) Fundamentals of Light

Microscopy and Electronic Imaging Willey-Blackwell Published

2013 by John Wiley amp Sons Inc Hoboken New Jersey

S v ě t l o

= čaacutest rozsaacutehleacute oblasti elektromagnetickeacuteho zaacuteřeniacute

kterou vniacutemaacuteme zrakem

Rozhlasoveacute a raacutedioveacute vlny 250 km - 1 mm

Infračerveneacute zaacuteřeniacute 05 mm - 08 μm

Světlo (viditelneacute zaacuteřeniacute) 08 μm - 04 μm

Ultrafialoveacute zaacuteřeniacute 04 microm - 01 microm

Roumlntgenovo zaacuteřeniacute (X-paprsky) 15 nm - 0005 nm

γ-zaacuteřeniacute pod 00001 nm

Přibližneacute hodnoty ndash individuaacutelniacute vlastnosti zraku různyacutech lidiacute

S v ě t l o

= čaacutest rozsaacutehleacute oblasti elektromagnetickeacuteho zaacuteřeniacute

kterou vniacutemaacuteme zrakem

rarr se zkracujiacuteciacute se vlnovou deacutelkou se zvyšuje frekvence (energie)

Viditelneacute

Vlnoveacute deacutelky světla a relativniacute citlivost oka

Murphy DB Davidson MW (2013) Fundamentals of Light Microscopy and Electronic

Imaging Willey-Blackwell Published 2013 by John Wiley amp Sons Inc Hoboken New Jersey

= zrakovyacute pigment citlivyacute na

světlo nachaacutezejiacuteciacute se v tyčinkaacutech Jodopsin = zrakovyacute pigment citlivyacute na

barvu nachaacutezejiacuteciacute se v čiacutepciacutech

S v ě t l o

Duaacutelniacute charakter světla ndash vlněniacute i proud čaacutestic (fotonů)

Vlnovyacute model světla

vlna elektrickaacute a magnetickaacute (elektromagnetickaacute vlna je tvořena oscilujiacuteciacutem elektrickyacutem a

magnetickyacutem polem na sebe kolmyacutech a nesouciacutech vpřed energii)

Pro uacutečinky světla v mikroskopu je důležitaacute vlna elektrickaacute

= přiacutečneacute vlněniacute

postupneacute kmitaacuteniacute

jednotlivyacutech vedle sebe

ležiacuteciacutech bodů

Scheacutema světla jako elektromagnetickeacute vlny

Obr httpwwwprosoundwebcomarticleprintinvaders_from_

outer_space_electromagnetic_radiation_interference

λ - vlnovaacute deacutelka

(v oblasti svět zaacuteřeniacute

v rozmeziacute od 380 do 780 nm)

určuje barvu světla

a - amplituda

nejvyššiacute hodnota

určuje intenzitu světla

Z hlediska vlnoveacute deacutelky rozlišujeme

polychromatickeacute x monochromatickeacute světlo (selekce pomociacute barevnyacutech filtrů rarr jednotnaacute vlnovaacute deacutelka světlo zeleneacute červeneacute hellip)

Elektrickaacute vlna - sinusoida

Charakterizovaacutena dvěma veličinami

Pazourek 1975

Vlastnosti světla

Rovnoměrneacute šiacuteřeniacute světla ze zaacuteřiacuteciacuteho bodu na všechny strany rarr vlnovaacute plocha tvaru koule

Paprsek ndash směr kteryacutem se vlněniacute šiacuteřiacute a kteryacute je kolmyacute

na vlnoplochu

Pazourek 1975

- paprsek nepolarizovanyacute (A C) ndash kmitaacute v každeacutem

miacutestě a v průběhu času ve všech možnyacutech směrech

kolmyacutech na směr šiacuteřeniacute paprsku

- paprsek polarizovanyacute (B D1 D2) - kmitaacute v jedneacute

rovině přičemž rovina kmitů (vlněniacute) jednoho z nich je

kolmaacute k rovině kmitů druheacuteho

Pazourek 1975

Polarizovaneacute světlo viz

httpswwwyoutubecomwatchv=gP751qpm4n4

Murphy DB Davidson MW (2013) Fundamentals of Light Microscopy and

Electronic Imaging Jonh Wkiley amp Sons Inc Hoboken New Jersey

Osm různyacutech vlnovyacutech forem světla (znaacutezorňujiacuteciacutech různou kvalitu světla)

Odraz a lom světelnyacutech paprsků

v prostřediacutech různeacute hustoty

Důležitaacute charakteristika prostřediacute

index lomu ( n ) (= optickaacute hustota prostřediacute)

c = rychlost světla ve vakuu (stejnaacute pro všechny λ )

v = rychlost světla určiteacute vlnoveacute deacutelky ve zkoumaneacute laacutetce

c

n =

v

zde absolutniacute index lomu

(bezrozměrnaacute fyzikaacutelniacute veličina jeho jednotka je 1)

Rychlost světla (c) určiteacute vlnoveacute

deacutelky v různyacutech prostřediacutech

c ve vakuu

= 300 000 kms

Index lomu (n) některyacutech laacutetek

vzduch (vakuum) helliphellip 100 (vzduch 10002718)

voda helliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 133

plexisklo helliphelliphelliphelliphelliphellip 140 ndash 152

křemenneacute sklo helliphellip hellip 145 (čočka z křemene z Ninive ndash 7 stol přnl)

běžneacute sklo helliphelliphelliphelliphellip 151

cedrovyacute olej helliphelliphelliphelliphellip 151

imerzniacute olej Olympus hellip 1516 pro fluorescenci 1404

kanadskyacute balzaacutem helliphellip 150

krystal NaCl helliphelliphelliphellip 154

korunoveacute sklo helliphelliphelliphellip 145 ndash 156 (sodno-draselneacute bezolovnateacute)

flintoveacute sklo helliphelliphelliphellip 162 ndash 180 (olovnateacute)

diamant helliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 242

Index lomu je vždy většiacute než 100

očniacute čočka hellip 1406

sklivec helliphelliphellip 1336

Odraz světla rovnyacutem zrcadlem (reflexe)

Zaacutekony

1 Paprsek dopadajiacuteciacute kolmice dopadu a paprsek odraženyacute

ležiacute v jedneacute rovině

2 Uacutehel odrazu se rovnaacute uacutehlu dopadu

Odraz a lom paprsku

k

Důležiteacute pro mikroskopii (astronomii)

- neniacute zaacutevislost na vlnoveacute deacutelce světla (λ)

- na rozdiacutel od lomu paprsků se světelneacute

paprsky se odraacutežejiacute stejně

Pazourek 1975

Zaacutekony

1 Paprsek dopadajiacuteciacute kolmice lomu a paprsek lomenyacute ležiacute v teacuteže rovině

Lom světla (refrakce)

2 Při přechodu z prostřediacute opticky řidšiacuteho do prostřediacute opticky hustšiacuteho se paprsek laacuteme ke kolmici (A)

a z prostřediacute opticky hustšiacuteho

do prostřediacute opticky řidšiacuteho

se laacuteme od kolmice (B)

(C a D) ndash uacuteplnyacute odraz při tzv

mezniacutem uacutehlu dopadu paprsku

v přiacutepadě lomu od kolmice (B)

(viz Nikol odrazneacute hranoly světlovodneacute vlaacutekno nebo fluorescenčniacute metoda TIRFM ndash totaacutelniacute odraz exitačniacuteho zaacuteřeniacute)

Pazourek 1975

Svatyacute Kryštof od

švyacutecarskeacuteho maliacuteře

Konrada Witze (kolem 1400ndash1446)

Witz byl jedniacutem z prvniacutech

maliacuteřů kteryacute namaloval

přesnyacute způsob odrazu

světla na vodě

Disperze (rozklad) světla

= důsledek zaacutevislosti rychlosti světla v laacutetkaacutech na frekvenci světla

(λ = c f)

světlo různyacutech barev (λ)

se laacuteme různě

(červeneacute se lomiacute meacuteně než modreacute)

Přiacuteklad disperze (rozkladu) světla

Primaacuterniacute a sekundaacuterniacute duha Severniacute Čechy Foto Pavla Vaacutelovaacute 2010

D u h a

Jeden z mnoha

optickyacutech

jevů (fotometeorů)

v atmosfeacuteře

Rok 312 nl - před bitvou byzantskeacuteho ciacutesaře Konstantina I (272-337) s

konkurenčniacutem ciacutesařem Maxentiem u bran Řiacutema (tzv bitva u Milvijskeacuteho mostu) se

na obloze objevily tři zaacuteřiacuteciacute křiacuteže (halovyacute sloup parheacutelia a parhelickyacute oblouk)

Konstantin bitvu proti přesile vyhraacutel sjednotil řiacuteši a povolil v niacute vyznaacutevat křesťanstviacute

Maleacute halo (22deg) (viz 1) vedlejšiacute slunce (2) a horniacute a dolniacute halovyacute sloup (3)

vznikajiacuteciacute odrazem a lomem světelnyacutech paprsků na krystalciacutech ledu

Lom světla a dějiny

httptmagazineblogsnytimescom20121126halo-effect_r=0

1

3

2 2

3

Ohyb (difrakce) a interference

světla

Foto Pavla Vaacutelovaacute Bukovany 2015 Rozklad světla na CD - světlo žaacuterovky

Rozklad biacuteleacuteho světla na mřiacutežce

Pevnost poznaacuteniacute Olomouc 2015

Foto Pavla Vaacutelovaacute Olomouc 2015

Ohyb (difrakce) a interference

světla

Ohyb (difrakce) a interference

Difrakčniacute obrazec obsahuje světlaacute a tmavaacute miacutesta kteraacute se

střiacutedajiacute - světlaacute miacutesta nazyacutevaacuteme maxima a tmavaacute minima

Interference světla = sklaacutedaacuteniacute světelnyacutech vln

Předpoklad světlo musiacute byacutet koherentniacute

Podmiacutenka koherence

- paprsky musiacute miacutet stejnou frekvenci

- paprsky musiacute byacutet navzaacutejem rovnoběžneacute

- paprsky musiacute miacutet na sobě nezaacutevislyacute draacutehovyacute (faacutezovyacute) rozdiacutel

Vznik koherentniacuteho zaacuteřeniacute

rozděleniacutem světla

- buď odrazem pomociacute zrcadel

- nebo lomem pomociacute hranolů

Foto Pavla Vaacutelovaacute Praha 151 2016

Interference světla

stejnyacute způsob vlněniacute

(faacuteze je vzaacutejemně posunuta o sudeacute

naacutesobky λ2)

vznik interferenčniacuteho maxima

(konstruktivniacute interference)

Interference světla

asynchronniacute vlněniacute

(vzaacutejemně posunutaacute faacuteze

o licheacute naacutesobky λ2)

vznik interferenčniacuteho

minima

(destruktivniacute interference)

rarr zaacuteřeniacute zanikaacute

rarr zeslabeniacute zaacuteřeniacute

Interference dvou vrstev elektromagnetickeacuteho zaacuteřeniacute u Slunce

Čočky ndash zaacutekladniacute součaacutesti

mikroskopu

= průhlednaacute (nejčastěji skleněnaacute) tělesa omezenaacute

vypuklyacutemi nebo vydutyacutemi kulovityacutemi plochami lišiacuteciacute se od sveacuteho okoliacute odlišnyacutem indexem lomu

Zaacutekladniacute typy čoček

spojky (vypukleacute neboli konvexniacute)

rozptylky (vyduteacute konkaacutevniacute)

Pazourek 1975

Optickaacute osa ( o ) prochaacuteziacute středem čočky

Ohnisko ( F ) - bod do ktereacuteho se soustřeďujiacute paprsky probiacutehajiacuteciacute rovnoběžně s optickou osou

- 2 ohniska - předmětoveacute ohnisko ( F )

obrazoveacute ohnisko ( Facute )

- ohniskovaacute vzdaacutelenost ( f )

vzdaacutelenost ohniska od hlavniacute roviny proloženeacute středem čočky

- dvojnaacutesobnaacute ohniskovaacute vzdaacutelenost ( P Pacute )

Obrazovyacute prostor - prostor v němž vznikaacute obraz

Důležiteacute charakteristiky čočky

f

o

hlavniacute rovina

Pazourek 1975

V přiacutepadě velmi tenkeacute čočky

bull Obraz za optickou soustavou

rarr obraz s k u t e č n yacute

Skutečnyacute obraz je možneacute zachytit na stiacuteniacutetko

nebo na fotografickou desku neskutečnyacute nikoliv

bull Obraz před soustavou

rarr obraz n e s k u t e č n yacute (zdaacutenlivyacute virtuaacutelniacute)

Obraz skutečnyacute a neskutečnyacute

A ndash předmět Aacute- obraz předmětu

Upraveno podle Pazourek 1975

Francouz Augustin Jean Fresnel (1788-1827) [frenel]

Fresnelova čočka [frenelova]

- plochyacute tvar (zachovaacuteny pouze čaacutesti ktereacute měniacute směr chodu světelnyacutech paprsků)

- vyacuterazně nižšiacute hmotnost při zachovaacuteniacute podobnyacutech parametrů

Využitiacute infračidla pohybu semafory světlomety (majaacuteky) a reflektory (světla aut

divadelniacutech a filmovyacutech osvětlovaciacutech zařiacutezeniacute) zpětneacute projektory slunečniacute kolektory

na zaacutekladě tohoto principu takeacute vyacuteroba 3D displejů k mobilniacutem telefonům a televiziacutem

httpwwwmffcuniczverejnostzpravicky03_lupahtm

čočka na majaacuteku

Čočky v budoucnosti

Pokus o vyacuterobu tzv dokonaleacute čočky

Prototyp - upraveneacute tzv Maxwellovo rybiacute oko

- paprsky světla se v něm pohybujiacute po kružniciacutech a

na rozdiacutel od běžnyacutech čoček se při zobrazeniacute využijiacute

všechny paprsky

- superčočky využiacutevajiacute geometrie k tomu aby se světlo

soustředilo do oblasti menšiacute než je jeho vlnovaacute deacutelka

(zatiacutem se neviacute jak do čočky vyhovujiacuteciacutem způsobem

doveacutest světlo)

Využitiacute v budoucnu

mimo jineacute v pozorovaacuteniacute živyacutech buněk při velkeacutem zvětšeniacute

pomociacute obyčejneacuteho světla bez jejich narušeniacute

Viacutece viz Plaacutešek J Mikroskopy se superčočkami httpwwwvesmircz | Vesmiacuter 91 531 zaacuteřiacute 2012

Hranoly

- doplňky optickyacutech systeacutemů

- většinou tvar rovnostranneacuteho trojuacutehelniacuteka

- využiacutevajiacute uacuteplneacuteho odrazu

Funkce

- změna chodu paprsků pod různyacutemi uacutehly

- rozdvojeniacute paprsků

Pazourek 1975

Různeacute typy odraznyacutech hranolů

Hranoly

Různeacute typy hranolů

httplaserykvalitneczimagestext_25_zakladyoptiky1odrazne_hranolyjpg

Viz dichroickeacute zrcadlo u fluorescenčniacuteho mikroskopu

Chod paprsků v binokulaacuterniacutem tubusu

Pazourek 1975

Nikol = hranol z islandskeacuteho vaacutepence

rarr polarizace světla

Dvojlomnyacute vaacutepencovyacute

krystal

ř ndash paprsek řaacutednyacute (zanikaacute na začerněneacute ploše)

mř ndash paprsek mimořaacutednyacute (lineaacuterně polarizovanyacute

využit k osvětleniacute)

začerněnaacute plocha

Nikol

Pazourek 1975

vzduchovaacute štěrbina

- rychlost světla je

v různyacutech směrech různaacute

- uacutehel paprsku řaacutedneacuteho a

mimořaacutedneacuteho je odlišnyacute

(u Vikingů - slunečniacute kaacutemen

soacutelarsteinn)

Chod paprsků ve světlovodneacutem vlaacuteknu

Princip uacuteplnyacute odraz paprsku

- uvnitř skleněneacuteho vlaacutekna je opticky hustšiacute prostřediacute

- nutnost dostatečně silneacuteho světelneacuteho zdroje

Světlovodnaacute vlaacutekna

Pazourek 1975

Širokeacute využitiacute v praxi optickeacute kabely ndash přenos signaacutelů ve sdělovaciacute technice

světlovody umožňujiacuteciacute veacutest denniacute světlo vedeniacute světla u stereolup endoskopů hellip

Page 14: Světelná a elektronová mikroskopie...(AMF – Atomic Force Miroscope) - skenování povrchu materiálu pomocí hrotu zavěšeném na pružném výkyvném raménku, který je přitahován

Anthony van Leeuwenhoek (1632-1723)

ndash obchodniacutek s laacutetkami v holandskeacutem Delftu

ndash sestrojil jednočočkovyacute mikroskop silnyacute zvětšovaciacute

efekt čočky

(až 270x)

ndash nejprve zkoumaacuteniacute struktury laacutetek

později zkoumal listy květiny drobneacute organismy lidskou krev kůži vlasy hellip

- prvniacute viděl a popsal krevniacute buňky chovaacuteniacute lidskyacutech spermiiacute

- vyacuteroba asi 250 mikroskopů

17 stol

Jednočočkovyacute Leeuwenhoekův

mikroskop

httpbiologimediacentrecomwp-contentuploads201101image2png

Anglickyacute původ Italskyacute původ

17 stol

Prvniacute světelneacute mikroskopy

Jednočočkovyacute

mikroskop Dvoučočkoveacute

mikroskopy

Robert Hook (1635-1703) [huacutek]

ndash anglickyacute fyzik chemik geolog astronom hellip

ndash použiacuteval zakoupenyacute složenyacute mikroskop s viacutece

čočkami (tzv kompaudniacute) vylepšenyacute o kvalitniacute osvětleniacute

17 stol

Hookův mikroskop

- vylepšeniacute osvětleniacute použitiacute irisoveacute clony

irisovaacute clona

- zkoumaacuteniacute slabyacutech plaacutetků korku z korkovniacuteku

živeacute laacutetky jsou tvořeny buňkami

- 1665 - kniha bdquoMicrographialdquo

mikroskopickeacute pozorovaacuteniacute rostlinnyacutech

pletiv živočišnyacutech objektů a struktur

mineraacutelů

Rok vydaacuteniacute 1665 Micrographia or some Physiological Descriptions of Minute Bodies

made by Magnifying Glasses with Observations and Inquiries thereupon

London 1665

17 stol Leeuwenhoek Hook

Angličan Henry Power (1626ndash1668) ndash jako

prvniacute (1663) publikoval pozorovaacuteniacute mikroskopem

Marcello Malphighi (1628ndash1694)

italskyacute leacutekař

zakladatel mikroskopickeacute anatomie

- objev krevniacutech kapilaacuter savců (1661)

- malphigickeacute trubice hmyzu

18 stol

ndash mikroskopy přežily jako hračka pro zaacutebavu anglickyacutech gentlemanů zajiacutemajiacuteciacutech se o tajemstviacute přiacuterody

19 stol

zač 19 stol ndash Dollond Lister Amici - vynaacutelez

achromatickeacuteho objektivu

ndash do teacute doby použiacutevaacuteniacute jednočočkoveacuteho mikroskopu (dvoučočkovyacute

mikroskop podaacuteval značně zkreslenyacute obraz)

Vyacuteznačniacute vědci 19 stol použiacutevajiacuteciacute k svyacutem pozorovaacuteniacutem mikroskop

Robert Brown (1773-1858) - objev jaacutedra (1831)

Luis Pasteur (1822-1895) (francouzskyacute mikrobiolog)

- objev kvasinek

Robert Koch (1843-1910) (německyacute leacutekař a mikrobiolog)

- objev původců tuberkuloacutezy a cholery

Jan Evangelista Purkyně (1787-1869) (českyacute fyziolog)

- 1825 popsal jaacutedro u živočišneacute buňky (lupa)

od r 1832 použiacutevaacute kvalitniacute mikroskop

Microscope

stand VII

19 stol ndash dalšiacute vyacutevoj mikroskopů

Carl Zeiss ndash průmyslovaacute vyacuteroba mikroskopů (firma Zeiss)

Ernst Karl Abbe ndash teoretickaacute studia optickyacutech principů

Otto Schott ndash vyacutezkum optickeacuteho skla

August Koumlhler ndash kvalitniacute osvětleniacute

Otto Schott (1851-1935)

Ernst Abbe (1840-1905)

Carl Zeiss (1816-1888)

August Koumlhler (1866-1948)

Mikroskopy 19 stoletiacute

19 stol

20 stol

Konfokaacutelniacute mikroskop

A1R (Nikon)

BX60 (Olympus)

Laserovyacute fluorescenčniacute mikroskop bdquoLight Sheetldquo Centrum regionu Hanaacute pro biotechnologickyacute a zemědělskyacute vyacutezkum Odděleniacute buněčneacute biologie

21 stol

21 stol

Digitaacutelniacute holografickyacute mikroskop firmy Lynceacutee Tec

Důležitaacute data při rozvoji moderniacute světelneacute mikroskopie

1847 - Zahaacutejeniacute vyacuteroby mikroskopů firmou Carl Zeiss v Jeně

1903 - Ultramikroskop (Richard Zsigmondy NC 1925)

1911 - Fluorescenčniacute mikroskop (Carl Reichert)

1935 - Faacutezovyacute kontrast (Fritz Zernike NC 1953)

1955 - Diferenciaacutelniacute interferenčniacute kontrast (DIC ndash Nomarski)

1968 - Rastrovaciacute tandemovyacute konfokaacutelniacute mikroskop (TSCM)

1978 - Laserovyacute konfokaacutelniacute rastrovaciacute mikroskop

1994 - Princip STED mikroskopie (S W Hell NC 2014)

(Stimulated Emission Depletion ndash redukce fluorescence stimulovanou emisiacute)

po roce 2000 - rozvoj tzv superrozlišovaciacute mikroskopie

2006 - Super-resolučniacute fluorescenčniacute mikroskop (Eric Betzig

Stefan W Hell a William E Moerner NC za chemii 2014)

NC = Nobelova cena

30 leacuteta 20 stoletiacute

ndash hranice vyacutevoje optickeacuteho (paprskoveacuteho) mikroskopu

(hranice rozlišeniacute světelneacuteho mikroskopu je diacuteky velikosti deacutelky světla 02 microm)

- dalšiacute zvětšovaacuteniacute pozorovanyacutech objektů na jineacutem principu

- miacutesto světelneacuteho paprsku elektronovyacute paprsek

(= tok rychlyacutech elektronů)

- miacutesto skleněneacute čočky magnetickaacute čočka

1931 - Ernst Ruska Max Knoll

prvniacute elektronovyacute mikroskop

tzv prozařovaciacute transmisniacute EM

(TEM ndash Transmission Electron Microscope)

- originaacutelniacute zvětšeniacute 1 000 - 250 000x

Ernst Ruska (1906-1988)

1942 - rastrovaciacute EM

(SEM ndash Scanning Electron Microscope) - postupneacute bombardovaacuteniacute vzorku elektrony

- zvětšeniacute až 30 000x

EM UacuteMG AV ČR Praha-Krč

FEI ndash TECHNAIG2TEM + kryozařiacutezeniacute

200 kV (λ el = 00025 nm)

RS 01 nm

prvkovaacute analyacuteza vzorků

zařiacutezeniacute pro

prvkovou analyacutezu

vzorků

Foto Pavla Vaacutelovaacute 2010

Brněnštiacute vědci z Uacutestavu přiacutestrojoveacute techniky AV ČR (UacutePT) a Mendelovy

univerzity představili novou metodu pozorovaacuteniacute rostlinnyacutech vzorků v jejich

přirozeneacutem stavu (za využitiacute kryoprotektiv)

Viacutece na httpe-svete15cztechnikacesti-vedci-posunuli-hranice-elektronove-mikroskopie-1174818

Enviromentaacutelniacute rastrovaciacute elektronovyacute mikroskop Aquasem II

TEM TITAN FEI Company Mgr Klaacutera Čeacutepe PhD

Vysokorozlišovaciacute transmisniacute elektronovyacute mikroskop

schopnyacute nahleacutednout do struktury materiaacutelů až na uacuterovni atomů

a současně přesně zmapovat jejich chemickeacute složeniacute

Regionaacutelniacute centrum pokročilyacutech

materiaacutelů (RCPTM)

Odd uhliacutekoveacute nanostruktury

PřF UP OL

Vysokorozlišovaciacute transmisniacute

elektronovyacute mikroskop TITAN (FEI)

Foto Pavla Vaacutelovaacute 2015

Transmisniacute elektronovyacute

mikroskop Jeol

Regionaacutelniacute centrum pokročilyacutech materiaacutelů (RCPTM)

Odd uhliacutekoveacute nanostruktury PřF UP OL

Neoptickeacute mikroskopy

1981

Řaacutedkovaciacute tunelovyacute mikroskop (STM ndash Scanning Tunnelling Microscope)

- mapovaacuteniacute povrchu pomociacute pohybu vodiveacuteho hrotu nad vodivyacutem povrchem sledovaneacuteho materiaacutelu

1986

Mikroskop atomaacuterniacutech sil (AMF ndash Atomic Force Miroscope)

- skenovaacuteniacute povrchu materiaacutelu pomociacute hrotu zavěšeneacutem na pružneacutem vyacutekyvneacutem rameacutenku kteryacute je přitahovaacuten elektrostatickyacutemi a Van der Walsovyacutemi silami

Rozlišeniacute v řaacutedech pikometrů (10-12 m) ndash rozeznaacuteniacute struktur

jednotlivyacutech atomů

O p t i c k eacute p r i n c i p y

světelneacute mikroskopie

Reichl J Všetička M Encyklopedie fyziky [online] copy2006-2014

[vid 2014] Dostupneacute z httpfyzikajreichlcommainarticleview431-optika Lepil O (2013) Fyzika pro gymnaacutezia Optika Prometheus Praha 4 přepracovaneacute vydaacuteniacute

Murphy DB Davidson MW (2013) Fundamentals of Light

Microscopy and Electronic Imaging Willey-Blackwell Published

2013 by John Wiley amp Sons Inc Hoboken New Jersey

S v ě t l o

= čaacutest rozsaacutehleacute oblasti elektromagnetickeacuteho zaacuteřeniacute

kterou vniacutemaacuteme zrakem

Rozhlasoveacute a raacutedioveacute vlny 250 km - 1 mm

Infračerveneacute zaacuteřeniacute 05 mm - 08 μm

Světlo (viditelneacute zaacuteřeniacute) 08 μm - 04 μm

Ultrafialoveacute zaacuteřeniacute 04 microm - 01 microm

Roumlntgenovo zaacuteřeniacute (X-paprsky) 15 nm - 0005 nm

γ-zaacuteřeniacute pod 00001 nm

Přibližneacute hodnoty ndash individuaacutelniacute vlastnosti zraku různyacutech lidiacute

S v ě t l o

= čaacutest rozsaacutehleacute oblasti elektromagnetickeacuteho zaacuteřeniacute

kterou vniacutemaacuteme zrakem

rarr se zkracujiacuteciacute se vlnovou deacutelkou se zvyšuje frekvence (energie)

Viditelneacute

Vlnoveacute deacutelky světla a relativniacute citlivost oka

Murphy DB Davidson MW (2013) Fundamentals of Light Microscopy and Electronic

Imaging Willey-Blackwell Published 2013 by John Wiley amp Sons Inc Hoboken New Jersey

= zrakovyacute pigment citlivyacute na

světlo nachaacutezejiacuteciacute se v tyčinkaacutech Jodopsin = zrakovyacute pigment citlivyacute na

barvu nachaacutezejiacuteciacute se v čiacutepciacutech

S v ě t l o

Duaacutelniacute charakter světla ndash vlněniacute i proud čaacutestic (fotonů)

Vlnovyacute model světla

vlna elektrickaacute a magnetickaacute (elektromagnetickaacute vlna je tvořena oscilujiacuteciacutem elektrickyacutem a

magnetickyacutem polem na sebe kolmyacutech a nesouciacutech vpřed energii)

Pro uacutečinky světla v mikroskopu je důležitaacute vlna elektrickaacute

= přiacutečneacute vlněniacute

postupneacute kmitaacuteniacute

jednotlivyacutech vedle sebe

ležiacuteciacutech bodů

Scheacutema světla jako elektromagnetickeacute vlny

Obr httpwwwprosoundwebcomarticleprintinvaders_from_

outer_space_electromagnetic_radiation_interference

λ - vlnovaacute deacutelka

(v oblasti svět zaacuteřeniacute

v rozmeziacute od 380 do 780 nm)

určuje barvu světla

a - amplituda

nejvyššiacute hodnota

určuje intenzitu světla

Z hlediska vlnoveacute deacutelky rozlišujeme

polychromatickeacute x monochromatickeacute světlo (selekce pomociacute barevnyacutech filtrů rarr jednotnaacute vlnovaacute deacutelka světlo zeleneacute červeneacute hellip)

Elektrickaacute vlna - sinusoida

Charakterizovaacutena dvěma veličinami

Pazourek 1975

Vlastnosti světla

Rovnoměrneacute šiacuteřeniacute světla ze zaacuteřiacuteciacuteho bodu na všechny strany rarr vlnovaacute plocha tvaru koule

Paprsek ndash směr kteryacutem se vlněniacute šiacuteřiacute a kteryacute je kolmyacute

na vlnoplochu

Pazourek 1975

- paprsek nepolarizovanyacute (A C) ndash kmitaacute v každeacutem

miacutestě a v průběhu času ve všech možnyacutech směrech

kolmyacutech na směr šiacuteřeniacute paprsku

- paprsek polarizovanyacute (B D1 D2) - kmitaacute v jedneacute

rovině přičemž rovina kmitů (vlněniacute) jednoho z nich je

kolmaacute k rovině kmitů druheacuteho

Pazourek 1975

Polarizovaneacute světlo viz

httpswwwyoutubecomwatchv=gP751qpm4n4

Murphy DB Davidson MW (2013) Fundamentals of Light Microscopy and

Electronic Imaging Jonh Wkiley amp Sons Inc Hoboken New Jersey

Osm různyacutech vlnovyacutech forem světla (znaacutezorňujiacuteciacutech různou kvalitu světla)

Odraz a lom světelnyacutech paprsků

v prostřediacutech různeacute hustoty

Důležitaacute charakteristika prostřediacute

index lomu ( n ) (= optickaacute hustota prostřediacute)

c = rychlost světla ve vakuu (stejnaacute pro všechny λ )

v = rychlost světla určiteacute vlnoveacute deacutelky ve zkoumaneacute laacutetce

c

n =

v

zde absolutniacute index lomu

(bezrozměrnaacute fyzikaacutelniacute veličina jeho jednotka je 1)

Rychlost světla (c) určiteacute vlnoveacute

deacutelky v různyacutech prostřediacutech

c ve vakuu

= 300 000 kms

Index lomu (n) některyacutech laacutetek

vzduch (vakuum) helliphellip 100 (vzduch 10002718)

voda helliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 133

plexisklo helliphelliphelliphelliphelliphellip 140 ndash 152

křemenneacute sklo helliphellip hellip 145 (čočka z křemene z Ninive ndash 7 stol přnl)

běžneacute sklo helliphelliphelliphelliphellip 151

cedrovyacute olej helliphelliphelliphelliphellip 151

imerzniacute olej Olympus hellip 1516 pro fluorescenci 1404

kanadskyacute balzaacutem helliphellip 150

krystal NaCl helliphelliphelliphellip 154

korunoveacute sklo helliphelliphelliphellip 145 ndash 156 (sodno-draselneacute bezolovnateacute)

flintoveacute sklo helliphelliphelliphellip 162 ndash 180 (olovnateacute)

diamant helliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 242

Index lomu je vždy většiacute než 100

očniacute čočka hellip 1406

sklivec helliphelliphellip 1336

Odraz světla rovnyacutem zrcadlem (reflexe)

Zaacutekony

1 Paprsek dopadajiacuteciacute kolmice dopadu a paprsek odraženyacute

ležiacute v jedneacute rovině

2 Uacutehel odrazu se rovnaacute uacutehlu dopadu

Odraz a lom paprsku

k

Důležiteacute pro mikroskopii (astronomii)

- neniacute zaacutevislost na vlnoveacute deacutelce světla (λ)

- na rozdiacutel od lomu paprsků se světelneacute

paprsky se odraacutežejiacute stejně

Pazourek 1975

Zaacutekony

1 Paprsek dopadajiacuteciacute kolmice lomu a paprsek lomenyacute ležiacute v teacuteže rovině

Lom světla (refrakce)

2 Při přechodu z prostřediacute opticky řidšiacuteho do prostřediacute opticky hustšiacuteho se paprsek laacuteme ke kolmici (A)

a z prostřediacute opticky hustšiacuteho

do prostřediacute opticky řidšiacuteho

se laacuteme od kolmice (B)

(C a D) ndash uacuteplnyacute odraz při tzv

mezniacutem uacutehlu dopadu paprsku

v přiacutepadě lomu od kolmice (B)

(viz Nikol odrazneacute hranoly světlovodneacute vlaacutekno nebo fluorescenčniacute metoda TIRFM ndash totaacutelniacute odraz exitačniacuteho zaacuteřeniacute)

Pazourek 1975

Svatyacute Kryštof od

švyacutecarskeacuteho maliacuteře

Konrada Witze (kolem 1400ndash1446)

Witz byl jedniacutem z prvniacutech

maliacuteřů kteryacute namaloval

přesnyacute způsob odrazu

světla na vodě

Disperze (rozklad) světla

= důsledek zaacutevislosti rychlosti světla v laacutetkaacutech na frekvenci světla

(λ = c f)

světlo různyacutech barev (λ)

se laacuteme různě

(červeneacute se lomiacute meacuteně než modreacute)

Přiacuteklad disperze (rozkladu) světla

Primaacuterniacute a sekundaacuterniacute duha Severniacute Čechy Foto Pavla Vaacutelovaacute 2010

D u h a

Jeden z mnoha

optickyacutech

jevů (fotometeorů)

v atmosfeacuteře

Rok 312 nl - před bitvou byzantskeacuteho ciacutesaře Konstantina I (272-337) s

konkurenčniacutem ciacutesařem Maxentiem u bran Řiacutema (tzv bitva u Milvijskeacuteho mostu) se

na obloze objevily tři zaacuteřiacuteciacute křiacuteže (halovyacute sloup parheacutelia a parhelickyacute oblouk)

Konstantin bitvu proti přesile vyhraacutel sjednotil řiacuteši a povolil v niacute vyznaacutevat křesťanstviacute

Maleacute halo (22deg) (viz 1) vedlejšiacute slunce (2) a horniacute a dolniacute halovyacute sloup (3)

vznikajiacuteciacute odrazem a lomem světelnyacutech paprsků na krystalciacutech ledu

Lom světla a dějiny

httptmagazineblogsnytimescom20121126halo-effect_r=0

1

3

2 2

3

Ohyb (difrakce) a interference

světla

Foto Pavla Vaacutelovaacute Bukovany 2015 Rozklad světla na CD - světlo žaacuterovky

Rozklad biacuteleacuteho světla na mřiacutežce

Pevnost poznaacuteniacute Olomouc 2015

Foto Pavla Vaacutelovaacute Olomouc 2015

Ohyb (difrakce) a interference

světla

Ohyb (difrakce) a interference

Difrakčniacute obrazec obsahuje světlaacute a tmavaacute miacutesta kteraacute se

střiacutedajiacute - světlaacute miacutesta nazyacutevaacuteme maxima a tmavaacute minima

Interference světla = sklaacutedaacuteniacute světelnyacutech vln

Předpoklad světlo musiacute byacutet koherentniacute

Podmiacutenka koherence

- paprsky musiacute miacutet stejnou frekvenci

- paprsky musiacute byacutet navzaacutejem rovnoběžneacute

- paprsky musiacute miacutet na sobě nezaacutevislyacute draacutehovyacute (faacutezovyacute) rozdiacutel

Vznik koherentniacuteho zaacuteřeniacute

rozděleniacutem světla

- buď odrazem pomociacute zrcadel

- nebo lomem pomociacute hranolů

Foto Pavla Vaacutelovaacute Praha 151 2016

Interference světla

stejnyacute způsob vlněniacute

(faacuteze je vzaacutejemně posunuta o sudeacute

naacutesobky λ2)

vznik interferenčniacuteho maxima

(konstruktivniacute interference)

Interference světla

asynchronniacute vlněniacute

(vzaacutejemně posunutaacute faacuteze

o licheacute naacutesobky λ2)

vznik interferenčniacuteho

minima

(destruktivniacute interference)

rarr zaacuteřeniacute zanikaacute

rarr zeslabeniacute zaacuteřeniacute

Interference dvou vrstev elektromagnetickeacuteho zaacuteřeniacute u Slunce

Čočky ndash zaacutekladniacute součaacutesti

mikroskopu

= průhlednaacute (nejčastěji skleněnaacute) tělesa omezenaacute

vypuklyacutemi nebo vydutyacutemi kulovityacutemi plochami lišiacuteciacute se od sveacuteho okoliacute odlišnyacutem indexem lomu

Zaacutekladniacute typy čoček

spojky (vypukleacute neboli konvexniacute)

rozptylky (vyduteacute konkaacutevniacute)

Pazourek 1975

Optickaacute osa ( o ) prochaacuteziacute středem čočky

Ohnisko ( F ) - bod do ktereacuteho se soustřeďujiacute paprsky probiacutehajiacuteciacute rovnoběžně s optickou osou

- 2 ohniska - předmětoveacute ohnisko ( F )

obrazoveacute ohnisko ( Facute )

- ohniskovaacute vzdaacutelenost ( f )

vzdaacutelenost ohniska od hlavniacute roviny proloženeacute středem čočky

- dvojnaacutesobnaacute ohniskovaacute vzdaacutelenost ( P Pacute )

Obrazovyacute prostor - prostor v němž vznikaacute obraz

Důležiteacute charakteristiky čočky

f

o

hlavniacute rovina

Pazourek 1975

V přiacutepadě velmi tenkeacute čočky

bull Obraz za optickou soustavou

rarr obraz s k u t e č n yacute

Skutečnyacute obraz je možneacute zachytit na stiacuteniacutetko

nebo na fotografickou desku neskutečnyacute nikoliv

bull Obraz před soustavou

rarr obraz n e s k u t e č n yacute (zdaacutenlivyacute virtuaacutelniacute)

Obraz skutečnyacute a neskutečnyacute

A ndash předmět Aacute- obraz předmětu

Upraveno podle Pazourek 1975

Francouz Augustin Jean Fresnel (1788-1827) [frenel]

Fresnelova čočka [frenelova]

- plochyacute tvar (zachovaacuteny pouze čaacutesti ktereacute měniacute směr chodu světelnyacutech paprsků)

- vyacuterazně nižšiacute hmotnost při zachovaacuteniacute podobnyacutech parametrů

Využitiacute infračidla pohybu semafory světlomety (majaacuteky) a reflektory (světla aut

divadelniacutech a filmovyacutech osvětlovaciacutech zařiacutezeniacute) zpětneacute projektory slunečniacute kolektory

na zaacutekladě tohoto principu takeacute vyacuteroba 3D displejů k mobilniacutem telefonům a televiziacutem

httpwwwmffcuniczverejnostzpravicky03_lupahtm

čočka na majaacuteku

Čočky v budoucnosti

Pokus o vyacuterobu tzv dokonaleacute čočky

Prototyp - upraveneacute tzv Maxwellovo rybiacute oko

- paprsky světla se v něm pohybujiacute po kružniciacutech a

na rozdiacutel od běžnyacutech čoček se při zobrazeniacute využijiacute

všechny paprsky

- superčočky využiacutevajiacute geometrie k tomu aby se světlo

soustředilo do oblasti menšiacute než je jeho vlnovaacute deacutelka

(zatiacutem se neviacute jak do čočky vyhovujiacuteciacutem způsobem

doveacutest světlo)

Využitiacute v budoucnu

mimo jineacute v pozorovaacuteniacute živyacutech buněk při velkeacutem zvětšeniacute

pomociacute obyčejneacuteho světla bez jejich narušeniacute

Viacutece viz Plaacutešek J Mikroskopy se superčočkami httpwwwvesmircz | Vesmiacuter 91 531 zaacuteřiacute 2012

Hranoly

- doplňky optickyacutech systeacutemů

- většinou tvar rovnostranneacuteho trojuacutehelniacuteka

- využiacutevajiacute uacuteplneacuteho odrazu

Funkce

- změna chodu paprsků pod různyacutemi uacutehly

- rozdvojeniacute paprsků

Pazourek 1975

Různeacute typy odraznyacutech hranolů

Hranoly

Různeacute typy hranolů

httplaserykvalitneczimagestext_25_zakladyoptiky1odrazne_hranolyjpg

Viz dichroickeacute zrcadlo u fluorescenčniacuteho mikroskopu

Chod paprsků v binokulaacuterniacutem tubusu

Pazourek 1975

Nikol = hranol z islandskeacuteho vaacutepence

rarr polarizace světla

Dvojlomnyacute vaacutepencovyacute

krystal

ř ndash paprsek řaacutednyacute (zanikaacute na začerněneacute ploše)

mř ndash paprsek mimořaacutednyacute (lineaacuterně polarizovanyacute

využit k osvětleniacute)

začerněnaacute plocha

Nikol

Pazourek 1975

vzduchovaacute štěrbina

- rychlost světla je

v různyacutech směrech různaacute

- uacutehel paprsku řaacutedneacuteho a

mimořaacutedneacuteho je odlišnyacute

(u Vikingů - slunečniacute kaacutemen

soacutelarsteinn)

Chod paprsků ve světlovodneacutem vlaacuteknu

Princip uacuteplnyacute odraz paprsku

- uvnitř skleněneacuteho vlaacutekna je opticky hustšiacute prostřediacute

- nutnost dostatečně silneacuteho světelneacuteho zdroje

Světlovodnaacute vlaacutekna

Pazourek 1975

Širokeacute využitiacute v praxi optickeacute kabely ndash přenos signaacutelů ve sdělovaciacute technice

světlovody umožňujiacuteciacute veacutest denniacute světlo vedeniacute světla u stereolup endoskopů hellip

Page 15: Světelná a elektronová mikroskopie...(AMF – Atomic Force Miroscope) - skenování povrchu materiálu pomocí hrotu zavěšeném na pružném výkyvném raménku, který je přitahován

Jednočočkovyacute Leeuwenhoekův

mikroskop

httpbiologimediacentrecomwp-contentuploads201101image2png

Anglickyacute původ Italskyacute původ

17 stol

Prvniacute světelneacute mikroskopy

Jednočočkovyacute

mikroskop Dvoučočkoveacute

mikroskopy

Robert Hook (1635-1703) [huacutek]

ndash anglickyacute fyzik chemik geolog astronom hellip

ndash použiacuteval zakoupenyacute složenyacute mikroskop s viacutece

čočkami (tzv kompaudniacute) vylepšenyacute o kvalitniacute osvětleniacute

17 stol

Hookův mikroskop

- vylepšeniacute osvětleniacute použitiacute irisoveacute clony

irisovaacute clona

- zkoumaacuteniacute slabyacutech plaacutetků korku z korkovniacuteku

živeacute laacutetky jsou tvořeny buňkami

- 1665 - kniha bdquoMicrographialdquo

mikroskopickeacute pozorovaacuteniacute rostlinnyacutech

pletiv živočišnyacutech objektů a struktur

mineraacutelů

Rok vydaacuteniacute 1665 Micrographia or some Physiological Descriptions of Minute Bodies

made by Magnifying Glasses with Observations and Inquiries thereupon

London 1665

17 stol Leeuwenhoek Hook

Angličan Henry Power (1626ndash1668) ndash jako

prvniacute (1663) publikoval pozorovaacuteniacute mikroskopem

Marcello Malphighi (1628ndash1694)

italskyacute leacutekař

zakladatel mikroskopickeacute anatomie

- objev krevniacutech kapilaacuter savců (1661)

- malphigickeacute trubice hmyzu

18 stol

ndash mikroskopy přežily jako hračka pro zaacutebavu anglickyacutech gentlemanů zajiacutemajiacuteciacutech se o tajemstviacute přiacuterody

19 stol

zač 19 stol ndash Dollond Lister Amici - vynaacutelez

achromatickeacuteho objektivu

ndash do teacute doby použiacutevaacuteniacute jednočočkoveacuteho mikroskopu (dvoučočkovyacute

mikroskop podaacuteval značně zkreslenyacute obraz)

Vyacuteznačniacute vědci 19 stol použiacutevajiacuteciacute k svyacutem pozorovaacuteniacutem mikroskop

Robert Brown (1773-1858) - objev jaacutedra (1831)

Luis Pasteur (1822-1895) (francouzskyacute mikrobiolog)

- objev kvasinek

Robert Koch (1843-1910) (německyacute leacutekař a mikrobiolog)

- objev původců tuberkuloacutezy a cholery

Jan Evangelista Purkyně (1787-1869) (českyacute fyziolog)

- 1825 popsal jaacutedro u živočišneacute buňky (lupa)

od r 1832 použiacutevaacute kvalitniacute mikroskop

Microscope

stand VII

19 stol ndash dalšiacute vyacutevoj mikroskopů

Carl Zeiss ndash průmyslovaacute vyacuteroba mikroskopů (firma Zeiss)

Ernst Karl Abbe ndash teoretickaacute studia optickyacutech principů

Otto Schott ndash vyacutezkum optickeacuteho skla

August Koumlhler ndash kvalitniacute osvětleniacute

Otto Schott (1851-1935)

Ernst Abbe (1840-1905)

Carl Zeiss (1816-1888)

August Koumlhler (1866-1948)

Mikroskopy 19 stoletiacute

19 stol

20 stol

Konfokaacutelniacute mikroskop

A1R (Nikon)

BX60 (Olympus)

Laserovyacute fluorescenčniacute mikroskop bdquoLight Sheetldquo Centrum regionu Hanaacute pro biotechnologickyacute a zemědělskyacute vyacutezkum Odděleniacute buněčneacute biologie

21 stol

21 stol

Digitaacutelniacute holografickyacute mikroskop firmy Lynceacutee Tec

Důležitaacute data při rozvoji moderniacute světelneacute mikroskopie

1847 - Zahaacutejeniacute vyacuteroby mikroskopů firmou Carl Zeiss v Jeně

1903 - Ultramikroskop (Richard Zsigmondy NC 1925)

1911 - Fluorescenčniacute mikroskop (Carl Reichert)

1935 - Faacutezovyacute kontrast (Fritz Zernike NC 1953)

1955 - Diferenciaacutelniacute interferenčniacute kontrast (DIC ndash Nomarski)

1968 - Rastrovaciacute tandemovyacute konfokaacutelniacute mikroskop (TSCM)

1978 - Laserovyacute konfokaacutelniacute rastrovaciacute mikroskop

1994 - Princip STED mikroskopie (S W Hell NC 2014)

(Stimulated Emission Depletion ndash redukce fluorescence stimulovanou emisiacute)

po roce 2000 - rozvoj tzv superrozlišovaciacute mikroskopie

2006 - Super-resolučniacute fluorescenčniacute mikroskop (Eric Betzig

Stefan W Hell a William E Moerner NC za chemii 2014)

NC = Nobelova cena

30 leacuteta 20 stoletiacute

ndash hranice vyacutevoje optickeacuteho (paprskoveacuteho) mikroskopu

(hranice rozlišeniacute světelneacuteho mikroskopu je diacuteky velikosti deacutelky světla 02 microm)

- dalšiacute zvětšovaacuteniacute pozorovanyacutech objektů na jineacutem principu

- miacutesto světelneacuteho paprsku elektronovyacute paprsek

(= tok rychlyacutech elektronů)

- miacutesto skleněneacute čočky magnetickaacute čočka

1931 - Ernst Ruska Max Knoll

prvniacute elektronovyacute mikroskop

tzv prozařovaciacute transmisniacute EM

(TEM ndash Transmission Electron Microscope)

- originaacutelniacute zvětšeniacute 1 000 - 250 000x

Ernst Ruska (1906-1988)

1942 - rastrovaciacute EM

(SEM ndash Scanning Electron Microscope) - postupneacute bombardovaacuteniacute vzorku elektrony

- zvětšeniacute až 30 000x

EM UacuteMG AV ČR Praha-Krč

FEI ndash TECHNAIG2TEM + kryozařiacutezeniacute

200 kV (λ el = 00025 nm)

RS 01 nm

prvkovaacute analyacuteza vzorků

zařiacutezeniacute pro

prvkovou analyacutezu

vzorků

Foto Pavla Vaacutelovaacute 2010

Brněnštiacute vědci z Uacutestavu přiacutestrojoveacute techniky AV ČR (UacutePT) a Mendelovy

univerzity představili novou metodu pozorovaacuteniacute rostlinnyacutech vzorků v jejich

přirozeneacutem stavu (za využitiacute kryoprotektiv)

Viacutece na httpe-svete15cztechnikacesti-vedci-posunuli-hranice-elektronove-mikroskopie-1174818

Enviromentaacutelniacute rastrovaciacute elektronovyacute mikroskop Aquasem II

TEM TITAN FEI Company Mgr Klaacutera Čeacutepe PhD

Vysokorozlišovaciacute transmisniacute elektronovyacute mikroskop

schopnyacute nahleacutednout do struktury materiaacutelů až na uacuterovni atomů

a současně přesně zmapovat jejich chemickeacute složeniacute

Regionaacutelniacute centrum pokročilyacutech

materiaacutelů (RCPTM)

Odd uhliacutekoveacute nanostruktury

PřF UP OL

Vysokorozlišovaciacute transmisniacute

elektronovyacute mikroskop TITAN (FEI)

Foto Pavla Vaacutelovaacute 2015

Transmisniacute elektronovyacute

mikroskop Jeol

Regionaacutelniacute centrum pokročilyacutech materiaacutelů (RCPTM)

Odd uhliacutekoveacute nanostruktury PřF UP OL

Neoptickeacute mikroskopy

1981

Řaacutedkovaciacute tunelovyacute mikroskop (STM ndash Scanning Tunnelling Microscope)

- mapovaacuteniacute povrchu pomociacute pohybu vodiveacuteho hrotu nad vodivyacutem povrchem sledovaneacuteho materiaacutelu

1986

Mikroskop atomaacuterniacutech sil (AMF ndash Atomic Force Miroscope)

- skenovaacuteniacute povrchu materiaacutelu pomociacute hrotu zavěšeneacutem na pružneacutem vyacutekyvneacutem rameacutenku kteryacute je přitahovaacuten elektrostatickyacutemi a Van der Walsovyacutemi silami

Rozlišeniacute v řaacutedech pikometrů (10-12 m) ndash rozeznaacuteniacute struktur

jednotlivyacutech atomů

O p t i c k eacute p r i n c i p y

světelneacute mikroskopie

Reichl J Všetička M Encyklopedie fyziky [online] copy2006-2014

[vid 2014] Dostupneacute z httpfyzikajreichlcommainarticleview431-optika Lepil O (2013) Fyzika pro gymnaacutezia Optika Prometheus Praha 4 přepracovaneacute vydaacuteniacute

Murphy DB Davidson MW (2013) Fundamentals of Light

Microscopy and Electronic Imaging Willey-Blackwell Published

2013 by John Wiley amp Sons Inc Hoboken New Jersey

S v ě t l o

= čaacutest rozsaacutehleacute oblasti elektromagnetickeacuteho zaacuteřeniacute

kterou vniacutemaacuteme zrakem

Rozhlasoveacute a raacutedioveacute vlny 250 km - 1 mm

Infračerveneacute zaacuteřeniacute 05 mm - 08 μm

Světlo (viditelneacute zaacuteřeniacute) 08 μm - 04 μm

Ultrafialoveacute zaacuteřeniacute 04 microm - 01 microm

Roumlntgenovo zaacuteřeniacute (X-paprsky) 15 nm - 0005 nm

γ-zaacuteřeniacute pod 00001 nm

Přibližneacute hodnoty ndash individuaacutelniacute vlastnosti zraku různyacutech lidiacute

S v ě t l o

= čaacutest rozsaacutehleacute oblasti elektromagnetickeacuteho zaacuteřeniacute

kterou vniacutemaacuteme zrakem

rarr se zkracujiacuteciacute se vlnovou deacutelkou se zvyšuje frekvence (energie)

Viditelneacute

Vlnoveacute deacutelky světla a relativniacute citlivost oka

Murphy DB Davidson MW (2013) Fundamentals of Light Microscopy and Electronic

Imaging Willey-Blackwell Published 2013 by John Wiley amp Sons Inc Hoboken New Jersey

= zrakovyacute pigment citlivyacute na

světlo nachaacutezejiacuteciacute se v tyčinkaacutech Jodopsin = zrakovyacute pigment citlivyacute na

barvu nachaacutezejiacuteciacute se v čiacutepciacutech

S v ě t l o

Duaacutelniacute charakter světla ndash vlněniacute i proud čaacutestic (fotonů)

Vlnovyacute model světla

vlna elektrickaacute a magnetickaacute (elektromagnetickaacute vlna je tvořena oscilujiacuteciacutem elektrickyacutem a

magnetickyacutem polem na sebe kolmyacutech a nesouciacutech vpřed energii)

Pro uacutečinky světla v mikroskopu je důležitaacute vlna elektrickaacute

= přiacutečneacute vlněniacute

postupneacute kmitaacuteniacute

jednotlivyacutech vedle sebe

ležiacuteciacutech bodů

Scheacutema světla jako elektromagnetickeacute vlny

Obr httpwwwprosoundwebcomarticleprintinvaders_from_

outer_space_electromagnetic_radiation_interference

λ - vlnovaacute deacutelka

(v oblasti svět zaacuteřeniacute

v rozmeziacute od 380 do 780 nm)

určuje barvu světla

a - amplituda

nejvyššiacute hodnota

určuje intenzitu světla

Z hlediska vlnoveacute deacutelky rozlišujeme

polychromatickeacute x monochromatickeacute světlo (selekce pomociacute barevnyacutech filtrů rarr jednotnaacute vlnovaacute deacutelka světlo zeleneacute červeneacute hellip)

Elektrickaacute vlna - sinusoida

Charakterizovaacutena dvěma veličinami

Pazourek 1975

Vlastnosti světla

Rovnoměrneacute šiacuteřeniacute světla ze zaacuteřiacuteciacuteho bodu na všechny strany rarr vlnovaacute plocha tvaru koule

Paprsek ndash směr kteryacutem se vlněniacute šiacuteřiacute a kteryacute je kolmyacute

na vlnoplochu

Pazourek 1975

- paprsek nepolarizovanyacute (A C) ndash kmitaacute v každeacutem

miacutestě a v průběhu času ve všech možnyacutech směrech

kolmyacutech na směr šiacuteřeniacute paprsku

- paprsek polarizovanyacute (B D1 D2) - kmitaacute v jedneacute

rovině přičemž rovina kmitů (vlněniacute) jednoho z nich je

kolmaacute k rovině kmitů druheacuteho

Pazourek 1975

Polarizovaneacute světlo viz

httpswwwyoutubecomwatchv=gP751qpm4n4

Murphy DB Davidson MW (2013) Fundamentals of Light Microscopy and

Electronic Imaging Jonh Wkiley amp Sons Inc Hoboken New Jersey

Osm různyacutech vlnovyacutech forem světla (znaacutezorňujiacuteciacutech různou kvalitu světla)

Odraz a lom světelnyacutech paprsků

v prostřediacutech různeacute hustoty

Důležitaacute charakteristika prostřediacute

index lomu ( n ) (= optickaacute hustota prostřediacute)

c = rychlost světla ve vakuu (stejnaacute pro všechny λ )

v = rychlost světla určiteacute vlnoveacute deacutelky ve zkoumaneacute laacutetce

c

n =

v

zde absolutniacute index lomu

(bezrozměrnaacute fyzikaacutelniacute veličina jeho jednotka je 1)

Rychlost světla (c) určiteacute vlnoveacute

deacutelky v různyacutech prostřediacutech

c ve vakuu

= 300 000 kms

Index lomu (n) některyacutech laacutetek

vzduch (vakuum) helliphellip 100 (vzduch 10002718)

voda helliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 133

plexisklo helliphelliphelliphelliphelliphellip 140 ndash 152

křemenneacute sklo helliphellip hellip 145 (čočka z křemene z Ninive ndash 7 stol přnl)

běžneacute sklo helliphelliphelliphelliphellip 151

cedrovyacute olej helliphelliphelliphelliphellip 151

imerzniacute olej Olympus hellip 1516 pro fluorescenci 1404

kanadskyacute balzaacutem helliphellip 150

krystal NaCl helliphelliphelliphellip 154

korunoveacute sklo helliphelliphelliphellip 145 ndash 156 (sodno-draselneacute bezolovnateacute)

flintoveacute sklo helliphelliphelliphellip 162 ndash 180 (olovnateacute)

diamant helliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 242

Index lomu je vždy většiacute než 100

očniacute čočka hellip 1406

sklivec helliphelliphellip 1336

Odraz světla rovnyacutem zrcadlem (reflexe)

Zaacutekony

1 Paprsek dopadajiacuteciacute kolmice dopadu a paprsek odraženyacute

ležiacute v jedneacute rovině

2 Uacutehel odrazu se rovnaacute uacutehlu dopadu

Odraz a lom paprsku

k

Důležiteacute pro mikroskopii (astronomii)

- neniacute zaacutevislost na vlnoveacute deacutelce světla (λ)

- na rozdiacutel od lomu paprsků se světelneacute

paprsky se odraacutežejiacute stejně

Pazourek 1975

Zaacutekony

1 Paprsek dopadajiacuteciacute kolmice lomu a paprsek lomenyacute ležiacute v teacuteže rovině

Lom světla (refrakce)

2 Při přechodu z prostřediacute opticky řidšiacuteho do prostřediacute opticky hustšiacuteho se paprsek laacuteme ke kolmici (A)

a z prostřediacute opticky hustšiacuteho

do prostřediacute opticky řidšiacuteho

se laacuteme od kolmice (B)

(C a D) ndash uacuteplnyacute odraz při tzv

mezniacutem uacutehlu dopadu paprsku

v přiacutepadě lomu od kolmice (B)

(viz Nikol odrazneacute hranoly světlovodneacute vlaacutekno nebo fluorescenčniacute metoda TIRFM ndash totaacutelniacute odraz exitačniacuteho zaacuteřeniacute)

Pazourek 1975

Svatyacute Kryštof od

švyacutecarskeacuteho maliacuteře

Konrada Witze (kolem 1400ndash1446)

Witz byl jedniacutem z prvniacutech

maliacuteřů kteryacute namaloval

přesnyacute způsob odrazu

světla na vodě

Disperze (rozklad) světla

= důsledek zaacutevislosti rychlosti světla v laacutetkaacutech na frekvenci světla

(λ = c f)

světlo různyacutech barev (λ)

se laacuteme různě

(červeneacute se lomiacute meacuteně než modreacute)

Přiacuteklad disperze (rozkladu) světla

Primaacuterniacute a sekundaacuterniacute duha Severniacute Čechy Foto Pavla Vaacutelovaacute 2010

D u h a

Jeden z mnoha

optickyacutech

jevů (fotometeorů)

v atmosfeacuteře

Rok 312 nl - před bitvou byzantskeacuteho ciacutesaře Konstantina I (272-337) s

konkurenčniacutem ciacutesařem Maxentiem u bran Řiacutema (tzv bitva u Milvijskeacuteho mostu) se

na obloze objevily tři zaacuteřiacuteciacute křiacuteže (halovyacute sloup parheacutelia a parhelickyacute oblouk)

Konstantin bitvu proti přesile vyhraacutel sjednotil řiacuteši a povolil v niacute vyznaacutevat křesťanstviacute

Maleacute halo (22deg) (viz 1) vedlejšiacute slunce (2) a horniacute a dolniacute halovyacute sloup (3)

vznikajiacuteciacute odrazem a lomem světelnyacutech paprsků na krystalciacutech ledu

Lom světla a dějiny

httptmagazineblogsnytimescom20121126halo-effect_r=0

1

3

2 2

3

Ohyb (difrakce) a interference

světla

Foto Pavla Vaacutelovaacute Bukovany 2015 Rozklad světla na CD - světlo žaacuterovky

Rozklad biacuteleacuteho světla na mřiacutežce

Pevnost poznaacuteniacute Olomouc 2015

Foto Pavla Vaacutelovaacute Olomouc 2015

Ohyb (difrakce) a interference

světla

Ohyb (difrakce) a interference

Difrakčniacute obrazec obsahuje světlaacute a tmavaacute miacutesta kteraacute se

střiacutedajiacute - světlaacute miacutesta nazyacutevaacuteme maxima a tmavaacute minima

Interference světla = sklaacutedaacuteniacute světelnyacutech vln

Předpoklad světlo musiacute byacutet koherentniacute

Podmiacutenka koherence

- paprsky musiacute miacutet stejnou frekvenci

- paprsky musiacute byacutet navzaacutejem rovnoběžneacute

- paprsky musiacute miacutet na sobě nezaacutevislyacute draacutehovyacute (faacutezovyacute) rozdiacutel

Vznik koherentniacuteho zaacuteřeniacute

rozděleniacutem světla

- buď odrazem pomociacute zrcadel

- nebo lomem pomociacute hranolů

Foto Pavla Vaacutelovaacute Praha 151 2016

Interference světla

stejnyacute způsob vlněniacute

(faacuteze je vzaacutejemně posunuta o sudeacute

naacutesobky λ2)

vznik interferenčniacuteho maxima

(konstruktivniacute interference)

Interference světla

asynchronniacute vlněniacute

(vzaacutejemně posunutaacute faacuteze

o licheacute naacutesobky λ2)

vznik interferenčniacuteho

minima

(destruktivniacute interference)

rarr zaacuteřeniacute zanikaacute

rarr zeslabeniacute zaacuteřeniacute

Interference dvou vrstev elektromagnetickeacuteho zaacuteřeniacute u Slunce

Čočky ndash zaacutekladniacute součaacutesti

mikroskopu

= průhlednaacute (nejčastěji skleněnaacute) tělesa omezenaacute

vypuklyacutemi nebo vydutyacutemi kulovityacutemi plochami lišiacuteciacute se od sveacuteho okoliacute odlišnyacutem indexem lomu

Zaacutekladniacute typy čoček

spojky (vypukleacute neboli konvexniacute)

rozptylky (vyduteacute konkaacutevniacute)

Pazourek 1975

Optickaacute osa ( o ) prochaacuteziacute středem čočky

Ohnisko ( F ) - bod do ktereacuteho se soustřeďujiacute paprsky probiacutehajiacuteciacute rovnoběžně s optickou osou

- 2 ohniska - předmětoveacute ohnisko ( F )

obrazoveacute ohnisko ( Facute )

- ohniskovaacute vzdaacutelenost ( f )

vzdaacutelenost ohniska od hlavniacute roviny proloženeacute středem čočky

- dvojnaacutesobnaacute ohniskovaacute vzdaacutelenost ( P Pacute )

Obrazovyacute prostor - prostor v němž vznikaacute obraz

Důležiteacute charakteristiky čočky

f

o

hlavniacute rovina

Pazourek 1975

V přiacutepadě velmi tenkeacute čočky

bull Obraz za optickou soustavou

rarr obraz s k u t e č n yacute

Skutečnyacute obraz je možneacute zachytit na stiacuteniacutetko

nebo na fotografickou desku neskutečnyacute nikoliv

bull Obraz před soustavou

rarr obraz n e s k u t e č n yacute (zdaacutenlivyacute virtuaacutelniacute)

Obraz skutečnyacute a neskutečnyacute

A ndash předmět Aacute- obraz předmětu

Upraveno podle Pazourek 1975

Francouz Augustin Jean Fresnel (1788-1827) [frenel]

Fresnelova čočka [frenelova]

- plochyacute tvar (zachovaacuteny pouze čaacutesti ktereacute měniacute směr chodu světelnyacutech paprsků)

- vyacuterazně nižšiacute hmotnost při zachovaacuteniacute podobnyacutech parametrů

Využitiacute infračidla pohybu semafory světlomety (majaacuteky) a reflektory (světla aut

divadelniacutech a filmovyacutech osvětlovaciacutech zařiacutezeniacute) zpětneacute projektory slunečniacute kolektory

na zaacutekladě tohoto principu takeacute vyacuteroba 3D displejů k mobilniacutem telefonům a televiziacutem

httpwwwmffcuniczverejnostzpravicky03_lupahtm

čočka na majaacuteku

Čočky v budoucnosti

Pokus o vyacuterobu tzv dokonaleacute čočky

Prototyp - upraveneacute tzv Maxwellovo rybiacute oko

- paprsky světla se v něm pohybujiacute po kružniciacutech a

na rozdiacutel od běžnyacutech čoček se při zobrazeniacute využijiacute

všechny paprsky

- superčočky využiacutevajiacute geometrie k tomu aby se světlo

soustředilo do oblasti menšiacute než je jeho vlnovaacute deacutelka

(zatiacutem se neviacute jak do čočky vyhovujiacuteciacutem způsobem

doveacutest světlo)

Využitiacute v budoucnu

mimo jineacute v pozorovaacuteniacute živyacutech buněk při velkeacutem zvětšeniacute

pomociacute obyčejneacuteho světla bez jejich narušeniacute

Viacutece viz Plaacutešek J Mikroskopy se superčočkami httpwwwvesmircz | Vesmiacuter 91 531 zaacuteřiacute 2012

Hranoly

- doplňky optickyacutech systeacutemů

- většinou tvar rovnostranneacuteho trojuacutehelniacuteka

- využiacutevajiacute uacuteplneacuteho odrazu

Funkce

- změna chodu paprsků pod různyacutemi uacutehly

- rozdvojeniacute paprsků

Pazourek 1975

Různeacute typy odraznyacutech hranolů

Hranoly

Různeacute typy hranolů

httplaserykvalitneczimagestext_25_zakladyoptiky1odrazne_hranolyjpg

Viz dichroickeacute zrcadlo u fluorescenčniacuteho mikroskopu

Chod paprsků v binokulaacuterniacutem tubusu

Pazourek 1975

Nikol = hranol z islandskeacuteho vaacutepence

rarr polarizace světla

Dvojlomnyacute vaacutepencovyacute

krystal

ř ndash paprsek řaacutednyacute (zanikaacute na začerněneacute ploše)

mř ndash paprsek mimořaacutednyacute (lineaacuterně polarizovanyacute

využit k osvětleniacute)

začerněnaacute plocha

Nikol

Pazourek 1975

vzduchovaacute štěrbina

- rychlost světla je

v různyacutech směrech různaacute

- uacutehel paprsku řaacutedneacuteho a

mimořaacutedneacuteho je odlišnyacute

(u Vikingů - slunečniacute kaacutemen

soacutelarsteinn)

Chod paprsků ve světlovodneacutem vlaacuteknu

Princip uacuteplnyacute odraz paprsku

- uvnitř skleněneacuteho vlaacutekna je opticky hustšiacute prostřediacute

- nutnost dostatečně silneacuteho světelneacuteho zdroje

Světlovodnaacute vlaacutekna

Pazourek 1975

Širokeacute využitiacute v praxi optickeacute kabely ndash přenos signaacutelů ve sdělovaciacute technice

světlovody umožňujiacuteciacute veacutest denniacute světlo vedeniacute světla u stereolup endoskopů hellip

Page 16: Světelná a elektronová mikroskopie...(AMF – Atomic Force Miroscope) - skenování povrchu materiálu pomocí hrotu zavěšeném na pružném výkyvném raménku, který je přitahován

Anglickyacute původ Italskyacute původ

17 stol

Prvniacute světelneacute mikroskopy

Jednočočkovyacute

mikroskop Dvoučočkoveacute

mikroskopy

Robert Hook (1635-1703) [huacutek]

ndash anglickyacute fyzik chemik geolog astronom hellip

ndash použiacuteval zakoupenyacute složenyacute mikroskop s viacutece

čočkami (tzv kompaudniacute) vylepšenyacute o kvalitniacute osvětleniacute

17 stol

Hookův mikroskop

- vylepšeniacute osvětleniacute použitiacute irisoveacute clony

irisovaacute clona

- zkoumaacuteniacute slabyacutech plaacutetků korku z korkovniacuteku

živeacute laacutetky jsou tvořeny buňkami

- 1665 - kniha bdquoMicrographialdquo

mikroskopickeacute pozorovaacuteniacute rostlinnyacutech

pletiv živočišnyacutech objektů a struktur

mineraacutelů

Rok vydaacuteniacute 1665 Micrographia or some Physiological Descriptions of Minute Bodies

made by Magnifying Glasses with Observations and Inquiries thereupon

London 1665

17 stol Leeuwenhoek Hook

Angličan Henry Power (1626ndash1668) ndash jako

prvniacute (1663) publikoval pozorovaacuteniacute mikroskopem

Marcello Malphighi (1628ndash1694)

italskyacute leacutekař

zakladatel mikroskopickeacute anatomie

- objev krevniacutech kapilaacuter savců (1661)

- malphigickeacute trubice hmyzu

18 stol

ndash mikroskopy přežily jako hračka pro zaacutebavu anglickyacutech gentlemanů zajiacutemajiacuteciacutech se o tajemstviacute přiacuterody

19 stol

zač 19 stol ndash Dollond Lister Amici - vynaacutelez

achromatickeacuteho objektivu

ndash do teacute doby použiacutevaacuteniacute jednočočkoveacuteho mikroskopu (dvoučočkovyacute

mikroskop podaacuteval značně zkreslenyacute obraz)

Vyacuteznačniacute vědci 19 stol použiacutevajiacuteciacute k svyacutem pozorovaacuteniacutem mikroskop

Robert Brown (1773-1858) - objev jaacutedra (1831)

Luis Pasteur (1822-1895) (francouzskyacute mikrobiolog)

- objev kvasinek

Robert Koch (1843-1910) (německyacute leacutekař a mikrobiolog)

- objev původců tuberkuloacutezy a cholery

Jan Evangelista Purkyně (1787-1869) (českyacute fyziolog)

- 1825 popsal jaacutedro u živočišneacute buňky (lupa)

od r 1832 použiacutevaacute kvalitniacute mikroskop

Microscope

stand VII

19 stol ndash dalšiacute vyacutevoj mikroskopů

Carl Zeiss ndash průmyslovaacute vyacuteroba mikroskopů (firma Zeiss)

Ernst Karl Abbe ndash teoretickaacute studia optickyacutech principů

Otto Schott ndash vyacutezkum optickeacuteho skla

August Koumlhler ndash kvalitniacute osvětleniacute

Otto Schott (1851-1935)

Ernst Abbe (1840-1905)

Carl Zeiss (1816-1888)

August Koumlhler (1866-1948)

Mikroskopy 19 stoletiacute

19 stol

20 stol

Konfokaacutelniacute mikroskop

A1R (Nikon)

BX60 (Olympus)

Laserovyacute fluorescenčniacute mikroskop bdquoLight Sheetldquo Centrum regionu Hanaacute pro biotechnologickyacute a zemědělskyacute vyacutezkum Odděleniacute buněčneacute biologie

21 stol

21 stol

Digitaacutelniacute holografickyacute mikroskop firmy Lynceacutee Tec

Důležitaacute data při rozvoji moderniacute světelneacute mikroskopie

1847 - Zahaacutejeniacute vyacuteroby mikroskopů firmou Carl Zeiss v Jeně

1903 - Ultramikroskop (Richard Zsigmondy NC 1925)

1911 - Fluorescenčniacute mikroskop (Carl Reichert)

1935 - Faacutezovyacute kontrast (Fritz Zernike NC 1953)

1955 - Diferenciaacutelniacute interferenčniacute kontrast (DIC ndash Nomarski)

1968 - Rastrovaciacute tandemovyacute konfokaacutelniacute mikroskop (TSCM)

1978 - Laserovyacute konfokaacutelniacute rastrovaciacute mikroskop

1994 - Princip STED mikroskopie (S W Hell NC 2014)

(Stimulated Emission Depletion ndash redukce fluorescence stimulovanou emisiacute)

po roce 2000 - rozvoj tzv superrozlišovaciacute mikroskopie

2006 - Super-resolučniacute fluorescenčniacute mikroskop (Eric Betzig

Stefan W Hell a William E Moerner NC za chemii 2014)

NC = Nobelova cena

30 leacuteta 20 stoletiacute

ndash hranice vyacutevoje optickeacuteho (paprskoveacuteho) mikroskopu

(hranice rozlišeniacute světelneacuteho mikroskopu je diacuteky velikosti deacutelky světla 02 microm)

- dalšiacute zvětšovaacuteniacute pozorovanyacutech objektů na jineacutem principu

- miacutesto světelneacuteho paprsku elektronovyacute paprsek

(= tok rychlyacutech elektronů)

- miacutesto skleněneacute čočky magnetickaacute čočka

1931 - Ernst Ruska Max Knoll

prvniacute elektronovyacute mikroskop

tzv prozařovaciacute transmisniacute EM

(TEM ndash Transmission Electron Microscope)

- originaacutelniacute zvětšeniacute 1 000 - 250 000x

Ernst Ruska (1906-1988)

1942 - rastrovaciacute EM

(SEM ndash Scanning Electron Microscope) - postupneacute bombardovaacuteniacute vzorku elektrony

- zvětšeniacute až 30 000x

EM UacuteMG AV ČR Praha-Krč

FEI ndash TECHNAIG2TEM + kryozařiacutezeniacute

200 kV (λ el = 00025 nm)

RS 01 nm

prvkovaacute analyacuteza vzorků

zařiacutezeniacute pro

prvkovou analyacutezu

vzorků

Foto Pavla Vaacutelovaacute 2010

Brněnštiacute vědci z Uacutestavu přiacutestrojoveacute techniky AV ČR (UacutePT) a Mendelovy

univerzity představili novou metodu pozorovaacuteniacute rostlinnyacutech vzorků v jejich

přirozeneacutem stavu (za využitiacute kryoprotektiv)

Viacutece na httpe-svete15cztechnikacesti-vedci-posunuli-hranice-elektronove-mikroskopie-1174818

Enviromentaacutelniacute rastrovaciacute elektronovyacute mikroskop Aquasem II

TEM TITAN FEI Company Mgr Klaacutera Čeacutepe PhD

Vysokorozlišovaciacute transmisniacute elektronovyacute mikroskop

schopnyacute nahleacutednout do struktury materiaacutelů až na uacuterovni atomů

a současně přesně zmapovat jejich chemickeacute složeniacute

Regionaacutelniacute centrum pokročilyacutech

materiaacutelů (RCPTM)

Odd uhliacutekoveacute nanostruktury

PřF UP OL

Vysokorozlišovaciacute transmisniacute

elektronovyacute mikroskop TITAN (FEI)

Foto Pavla Vaacutelovaacute 2015

Transmisniacute elektronovyacute

mikroskop Jeol

Regionaacutelniacute centrum pokročilyacutech materiaacutelů (RCPTM)

Odd uhliacutekoveacute nanostruktury PřF UP OL

Neoptickeacute mikroskopy

1981

Řaacutedkovaciacute tunelovyacute mikroskop (STM ndash Scanning Tunnelling Microscope)

- mapovaacuteniacute povrchu pomociacute pohybu vodiveacuteho hrotu nad vodivyacutem povrchem sledovaneacuteho materiaacutelu

1986

Mikroskop atomaacuterniacutech sil (AMF ndash Atomic Force Miroscope)

- skenovaacuteniacute povrchu materiaacutelu pomociacute hrotu zavěšeneacutem na pružneacutem vyacutekyvneacutem rameacutenku kteryacute je přitahovaacuten elektrostatickyacutemi a Van der Walsovyacutemi silami

Rozlišeniacute v řaacutedech pikometrů (10-12 m) ndash rozeznaacuteniacute struktur

jednotlivyacutech atomů

O p t i c k eacute p r i n c i p y

světelneacute mikroskopie

Reichl J Všetička M Encyklopedie fyziky [online] copy2006-2014

[vid 2014] Dostupneacute z httpfyzikajreichlcommainarticleview431-optika Lepil O (2013) Fyzika pro gymnaacutezia Optika Prometheus Praha 4 přepracovaneacute vydaacuteniacute

Murphy DB Davidson MW (2013) Fundamentals of Light

Microscopy and Electronic Imaging Willey-Blackwell Published

2013 by John Wiley amp Sons Inc Hoboken New Jersey

S v ě t l o

= čaacutest rozsaacutehleacute oblasti elektromagnetickeacuteho zaacuteřeniacute

kterou vniacutemaacuteme zrakem

Rozhlasoveacute a raacutedioveacute vlny 250 km - 1 mm

Infračerveneacute zaacuteřeniacute 05 mm - 08 μm

Světlo (viditelneacute zaacuteřeniacute) 08 μm - 04 μm

Ultrafialoveacute zaacuteřeniacute 04 microm - 01 microm

Roumlntgenovo zaacuteřeniacute (X-paprsky) 15 nm - 0005 nm

γ-zaacuteřeniacute pod 00001 nm

Přibližneacute hodnoty ndash individuaacutelniacute vlastnosti zraku různyacutech lidiacute

S v ě t l o

= čaacutest rozsaacutehleacute oblasti elektromagnetickeacuteho zaacuteřeniacute

kterou vniacutemaacuteme zrakem

rarr se zkracujiacuteciacute se vlnovou deacutelkou se zvyšuje frekvence (energie)

Viditelneacute

Vlnoveacute deacutelky světla a relativniacute citlivost oka

Murphy DB Davidson MW (2013) Fundamentals of Light Microscopy and Electronic

Imaging Willey-Blackwell Published 2013 by John Wiley amp Sons Inc Hoboken New Jersey

= zrakovyacute pigment citlivyacute na

světlo nachaacutezejiacuteciacute se v tyčinkaacutech Jodopsin = zrakovyacute pigment citlivyacute na

barvu nachaacutezejiacuteciacute se v čiacutepciacutech

S v ě t l o

Duaacutelniacute charakter světla ndash vlněniacute i proud čaacutestic (fotonů)

Vlnovyacute model světla

vlna elektrickaacute a magnetickaacute (elektromagnetickaacute vlna je tvořena oscilujiacuteciacutem elektrickyacutem a

magnetickyacutem polem na sebe kolmyacutech a nesouciacutech vpřed energii)

Pro uacutečinky světla v mikroskopu je důležitaacute vlna elektrickaacute

= přiacutečneacute vlněniacute

postupneacute kmitaacuteniacute

jednotlivyacutech vedle sebe

ležiacuteciacutech bodů

Scheacutema světla jako elektromagnetickeacute vlny

Obr httpwwwprosoundwebcomarticleprintinvaders_from_

outer_space_electromagnetic_radiation_interference

λ - vlnovaacute deacutelka

(v oblasti svět zaacuteřeniacute

v rozmeziacute od 380 do 780 nm)

určuje barvu světla

a - amplituda

nejvyššiacute hodnota

určuje intenzitu světla

Z hlediska vlnoveacute deacutelky rozlišujeme

polychromatickeacute x monochromatickeacute světlo (selekce pomociacute barevnyacutech filtrů rarr jednotnaacute vlnovaacute deacutelka světlo zeleneacute červeneacute hellip)

Elektrickaacute vlna - sinusoida

Charakterizovaacutena dvěma veličinami

Pazourek 1975

Vlastnosti světla

Rovnoměrneacute šiacuteřeniacute světla ze zaacuteřiacuteciacuteho bodu na všechny strany rarr vlnovaacute plocha tvaru koule

Paprsek ndash směr kteryacutem se vlněniacute šiacuteřiacute a kteryacute je kolmyacute

na vlnoplochu

Pazourek 1975

- paprsek nepolarizovanyacute (A C) ndash kmitaacute v každeacutem

miacutestě a v průběhu času ve všech možnyacutech směrech

kolmyacutech na směr šiacuteřeniacute paprsku

- paprsek polarizovanyacute (B D1 D2) - kmitaacute v jedneacute

rovině přičemž rovina kmitů (vlněniacute) jednoho z nich je

kolmaacute k rovině kmitů druheacuteho

Pazourek 1975

Polarizovaneacute světlo viz

httpswwwyoutubecomwatchv=gP751qpm4n4

Murphy DB Davidson MW (2013) Fundamentals of Light Microscopy and

Electronic Imaging Jonh Wkiley amp Sons Inc Hoboken New Jersey

Osm různyacutech vlnovyacutech forem světla (znaacutezorňujiacuteciacutech různou kvalitu světla)

Odraz a lom světelnyacutech paprsků

v prostřediacutech různeacute hustoty

Důležitaacute charakteristika prostřediacute

index lomu ( n ) (= optickaacute hustota prostřediacute)

c = rychlost světla ve vakuu (stejnaacute pro všechny λ )

v = rychlost světla určiteacute vlnoveacute deacutelky ve zkoumaneacute laacutetce

c

n =

v

zde absolutniacute index lomu

(bezrozměrnaacute fyzikaacutelniacute veličina jeho jednotka je 1)

Rychlost světla (c) určiteacute vlnoveacute

deacutelky v různyacutech prostřediacutech

c ve vakuu

= 300 000 kms

Index lomu (n) některyacutech laacutetek

vzduch (vakuum) helliphellip 100 (vzduch 10002718)

voda helliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 133

plexisklo helliphelliphelliphelliphelliphellip 140 ndash 152

křemenneacute sklo helliphellip hellip 145 (čočka z křemene z Ninive ndash 7 stol přnl)

běžneacute sklo helliphelliphelliphelliphellip 151

cedrovyacute olej helliphelliphelliphelliphellip 151

imerzniacute olej Olympus hellip 1516 pro fluorescenci 1404

kanadskyacute balzaacutem helliphellip 150

krystal NaCl helliphelliphelliphellip 154

korunoveacute sklo helliphelliphelliphellip 145 ndash 156 (sodno-draselneacute bezolovnateacute)

flintoveacute sklo helliphelliphelliphellip 162 ndash 180 (olovnateacute)

diamant helliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 242

Index lomu je vždy většiacute než 100

očniacute čočka hellip 1406

sklivec helliphelliphellip 1336

Odraz světla rovnyacutem zrcadlem (reflexe)

Zaacutekony

1 Paprsek dopadajiacuteciacute kolmice dopadu a paprsek odraženyacute

ležiacute v jedneacute rovině

2 Uacutehel odrazu se rovnaacute uacutehlu dopadu

Odraz a lom paprsku

k

Důležiteacute pro mikroskopii (astronomii)

- neniacute zaacutevislost na vlnoveacute deacutelce světla (λ)

- na rozdiacutel od lomu paprsků se světelneacute

paprsky se odraacutežejiacute stejně

Pazourek 1975

Zaacutekony

1 Paprsek dopadajiacuteciacute kolmice lomu a paprsek lomenyacute ležiacute v teacuteže rovině

Lom světla (refrakce)

2 Při přechodu z prostřediacute opticky řidšiacuteho do prostřediacute opticky hustšiacuteho se paprsek laacuteme ke kolmici (A)

a z prostřediacute opticky hustšiacuteho

do prostřediacute opticky řidšiacuteho

se laacuteme od kolmice (B)

(C a D) ndash uacuteplnyacute odraz při tzv

mezniacutem uacutehlu dopadu paprsku

v přiacutepadě lomu od kolmice (B)

(viz Nikol odrazneacute hranoly světlovodneacute vlaacutekno nebo fluorescenčniacute metoda TIRFM ndash totaacutelniacute odraz exitačniacuteho zaacuteřeniacute)

Pazourek 1975

Svatyacute Kryštof od

švyacutecarskeacuteho maliacuteře

Konrada Witze (kolem 1400ndash1446)

Witz byl jedniacutem z prvniacutech

maliacuteřů kteryacute namaloval

přesnyacute způsob odrazu

světla na vodě

Disperze (rozklad) světla

= důsledek zaacutevislosti rychlosti světla v laacutetkaacutech na frekvenci světla

(λ = c f)

světlo různyacutech barev (λ)

se laacuteme různě

(červeneacute se lomiacute meacuteně než modreacute)

Přiacuteklad disperze (rozkladu) světla

Primaacuterniacute a sekundaacuterniacute duha Severniacute Čechy Foto Pavla Vaacutelovaacute 2010

D u h a

Jeden z mnoha

optickyacutech

jevů (fotometeorů)

v atmosfeacuteře

Rok 312 nl - před bitvou byzantskeacuteho ciacutesaře Konstantina I (272-337) s

konkurenčniacutem ciacutesařem Maxentiem u bran Řiacutema (tzv bitva u Milvijskeacuteho mostu) se

na obloze objevily tři zaacuteřiacuteciacute křiacuteže (halovyacute sloup parheacutelia a parhelickyacute oblouk)

Konstantin bitvu proti přesile vyhraacutel sjednotil řiacuteši a povolil v niacute vyznaacutevat křesťanstviacute

Maleacute halo (22deg) (viz 1) vedlejšiacute slunce (2) a horniacute a dolniacute halovyacute sloup (3)

vznikajiacuteciacute odrazem a lomem světelnyacutech paprsků na krystalciacutech ledu

Lom světla a dějiny

httptmagazineblogsnytimescom20121126halo-effect_r=0

1

3

2 2

3

Ohyb (difrakce) a interference

světla

Foto Pavla Vaacutelovaacute Bukovany 2015 Rozklad světla na CD - světlo žaacuterovky

Rozklad biacuteleacuteho světla na mřiacutežce

Pevnost poznaacuteniacute Olomouc 2015

Foto Pavla Vaacutelovaacute Olomouc 2015

Ohyb (difrakce) a interference

světla

Ohyb (difrakce) a interference

Difrakčniacute obrazec obsahuje světlaacute a tmavaacute miacutesta kteraacute se

střiacutedajiacute - světlaacute miacutesta nazyacutevaacuteme maxima a tmavaacute minima

Interference světla = sklaacutedaacuteniacute světelnyacutech vln

Předpoklad světlo musiacute byacutet koherentniacute

Podmiacutenka koherence

- paprsky musiacute miacutet stejnou frekvenci

- paprsky musiacute byacutet navzaacutejem rovnoběžneacute

- paprsky musiacute miacutet na sobě nezaacutevislyacute draacutehovyacute (faacutezovyacute) rozdiacutel

Vznik koherentniacuteho zaacuteřeniacute

rozděleniacutem světla

- buď odrazem pomociacute zrcadel

- nebo lomem pomociacute hranolů

Foto Pavla Vaacutelovaacute Praha 151 2016

Interference světla

stejnyacute způsob vlněniacute

(faacuteze je vzaacutejemně posunuta o sudeacute

naacutesobky λ2)

vznik interferenčniacuteho maxima

(konstruktivniacute interference)

Interference světla

asynchronniacute vlněniacute

(vzaacutejemně posunutaacute faacuteze

o licheacute naacutesobky λ2)

vznik interferenčniacuteho

minima

(destruktivniacute interference)

rarr zaacuteřeniacute zanikaacute

rarr zeslabeniacute zaacuteřeniacute

Interference dvou vrstev elektromagnetickeacuteho zaacuteřeniacute u Slunce

Čočky ndash zaacutekladniacute součaacutesti

mikroskopu

= průhlednaacute (nejčastěji skleněnaacute) tělesa omezenaacute

vypuklyacutemi nebo vydutyacutemi kulovityacutemi plochami lišiacuteciacute se od sveacuteho okoliacute odlišnyacutem indexem lomu

Zaacutekladniacute typy čoček

spojky (vypukleacute neboli konvexniacute)

rozptylky (vyduteacute konkaacutevniacute)

Pazourek 1975

Optickaacute osa ( o ) prochaacuteziacute středem čočky

Ohnisko ( F ) - bod do ktereacuteho se soustřeďujiacute paprsky probiacutehajiacuteciacute rovnoběžně s optickou osou

- 2 ohniska - předmětoveacute ohnisko ( F )

obrazoveacute ohnisko ( Facute )

- ohniskovaacute vzdaacutelenost ( f )

vzdaacutelenost ohniska od hlavniacute roviny proloženeacute středem čočky

- dvojnaacutesobnaacute ohniskovaacute vzdaacutelenost ( P Pacute )

Obrazovyacute prostor - prostor v němž vznikaacute obraz

Důležiteacute charakteristiky čočky

f

o

hlavniacute rovina

Pazourek 1975

V přiacutepadě velmi tenkeacute čočky

bull Obraz za optickou soustavou

rarr obraz s k u t e č n yacute

Skutečnyacute obraz je možneacute zachytit na stiacuteniacutetko

nebo na fotografickou desku neskutečnyacute nikoliv

bull Obraz před soustavou

rarr obraz n e s k u t e č n yacute (zdaacutenlivyacute virtuaacutelniacute)

Obraz skutečnyacute a neskutečnyacute

A ndash předmět Aacute- obraz předmětu

Upraveno podle Pazourek 1975

Francouz Augustin Jean Fresnel (1788-1827) [frenel]

Fresnelova čočka [frenelova]

- plochyacute tvar (zachovaacuteny pouze čaacutesti ktereacute měniacute směr chodu světelnyacutech paprsků)

- vyacuterazně nižšiacute hmotnost při zachovaacuteniacute podobnyacutech parametrů

Využitiacute infračidla pohybu semafory světlomety (majaacuteky) a reflektory (světla aut

divadelniacutech a filmovyacutech osvětlovaciacutech zařiacutezeniacute) zpětneacute projektory slunečniacute kolektory

na zaacutekladě tohoto principu takeacute vyacuteroba 3D displejů k mobilniacutem telefonům a televiziacutem

httpwwwmffcuniczverejnostzpravicky03_lupahtm

čočka na majaacuteku

Čočky v budoucnosti

Pokus o vyacuterobu tzv dokonaleacute čočky

Prototyp - upraveneacute tzv Maxwellovo rybiacute oko

- paprsky světla se v něm pohybujiacute po kružniciacutech a

na rozdiacutel od běžnyacutech čoček se při zobrazeniacute využijiacute

všechny paprsky

- superčočky využiacutevajiacute geometrie k tomu aby se světlo

soustředilo do oblasti menšiacute než je jeho vlnovaacute deacutelka

(zatiacutem se neviacute jak do čočky vyhovujiacuteciacutem způsobem

doveacutest světlo)

Využitiacute v budoucnu

mimo jineacute v pozorovaacuteniacute živyacutech buněk při velkeacutem zvětšeniacute

pomociacute obyčejneacuteho světla bez jejich narušeniacute

Viacutece viz Plaacutešek J Mikroskopy se superčočkami httpwwwvesmircz | Vesmiacuter 91 531 zaacuteřiacute 2012

Hranoly

- doplňky optickyacutech systeacutemů

- většinou tvar rovnostranneacuteho trojuacutehelniacuteka

- využiacutevajiacute uacuteplneacuteho odrazu

Funkce

- změna chodu paprsků pod různyacutemi uacutehly

- rozdvojeniacute paprsků

Pazourek 1975

Různeacute typy odraznyacutech hranolů

Hranoly

Různeacute typy hranolů

httplaserykvalitneczimagestext_25_zakladyoptiky1odrazne_hranolyjpg

Viz dichroickeacute zrcadlo u fluorescenčniacuteho mikroskopu

Chod paprsků v binokulaacuterniacutem tubusu

Pazourek 1975

Nikol = hranol z islandskeacuteho vaacutepence

rarr polarizace světla

Dvojlomnyacute vaacutepencovyacute

krystal

ř ndash paprsek řaacutednyacute (zanikaacute na začerněneacute ploše)

mř ndash paprsek mimořaacutednyacute (lineaacuterně polarizovanyacute

využit k osvětleniacute)

začerněnaacute plocha

Nikol

Pazourek 1975

vzduchovaacute štěrbina

- rychlost světla je

v různyacutech směrech různaacute

- uacutehel paprsku řaacutedneacuteho a

mimořaacutedneacuteho je odlišnyacute

(u Vikingů - slunečniacute kaacutemen

soacutelarsteinn)

Chod paprsků ve světlovodneacutem vlaacuteknu

Princip uacuteplnyacute odraz paprsku

- uvnitř skleněneacuteho vlaacutekna je opticky hustšiacute prostřediacute

- nutnost dostatečně silneacuteho světelneacuteho zdroje

Světlovodnaacute vlaacutekna

Pazourek 1975

Širokeacute využitiacute v praxi optickeacute kabely ndash přenos signaacutelů ve sdělovaciacute technice

světlovody umožňujiacuteciacute veacutest denniacute světlo vedeniacute světla u stereolup endoskopů hellip

Page 17: Světelná a elektronová mikroskopie...(AMF – Atomic Force Miroscope) - skenování povrchu materiálu pomocí hrotu zavěšeném na pružném výkyvném raménku, který je přitahován

Robert Hook (1635-1703) [huacutek]

ndash anglickyacute fyzik chemik geolog astronom hellip

ndash použiacuteval zakoupenyacute složenyacute mikroskop s viacutece

čočkami (tzv kompaudniacute) vylepšenyacute o kvalitniacute osvětleniacute

17 stol

Hookův mikroskop

- vylepšeniacute osvětleniacute použitiacute irisoveacute clony

irisovaacute clona

- zkoumaacuteniacute slabyacutech plaacutetků korku z korkovniacuteku

živeacute laacutetky jsou tvořeny buňkami

- 1665 - kniha bdquoMicrographialdquo

mikroskopickeacute pozorovaacuteniacute rostlinnyacutech

pletiv živočišnyacutech objektů a struktur

mineraacutelů

Rok vydaacuteniacute 1665 Micrographia or some Physiological Descriptions of Minute Bodies

made by Magnifying Glasses with Observations and Inquiries thereupon

London 1665

17 stol Leeuwenhoek Hook

Angličan Henry Power (1626ndash1668) ndash jako

prvniacute (1663) publikoval pozorovaacuteniacute mikroskopem

Marcello Malphighi (1628ndash1694)

italskyacute leacutekař

zakladatel mikroskopickeacute anatomie

- objev krevniacutech kapilaacuter savců (1661)

- malphigickeacute trubice hmyzu

18 stol

ndash mikroskopy přežily jako hračka pro zaacutebavu anglickyacutech gentlemanů zajiacutemajiacuteciacutech se o tajemstviacute přiacuterody

19 stol

zač 19 stol ndash Dollond Lister Amici - vynaacutelez

achromatickeacuteho objektivu

ndash do teacute doby použiacutevaacuteniacute jednočočkoveacuteho mikroskopu (dvoučočkovyacute

mikroskop podaacuteval značně zkreslenyacute obraz)

Vyacuteznačniacute vědci 19 stol použiacutevajiacuteciacute k svyacutem pozorovaacuteniacutem mikroskop

Robert Brown (1773-1858) - objev jaacutedra (1831)

Luis Pasteur (1822-1895) (francouzskyacute mikrobiolog)

- objev kvasinek

Robert Koch (1843-1910) (německyacute leacutekař a mikrobiolog)

- objev původců tuberkuloacutezy a cholery

Jan Evangelista Purkyně (1787-1869) (českyacute fyziolog)

- 1825 popsal jaacutedro u živočišneacute buňky (lupa)

od r 1832 použiacutevaacute kvalitniacute mikroskop

Microscope

stand VII

19 stol ndash dalšiacute vyacutevoj mikroskopů

Carl Zeiss ndash průmyslovaacute vyacuteroba mikroskopů (firma Zeiss)

Ernst Karl Abbe ndash teoretickaacute studia optickyacutech principů

Otto Schott ndash vyacutezkum optickeacuteho skla

August Koumlhler ndash kvalitniacute osvětleniacute

Otto Schott (1851-1935)

Ernst Abbe (1840-1905)

Carl Zeiss (1816-1888)

August Koumlhler (1866-1948)

Mikroskopy 19 stoletiacute

19 stol

20 stol

Konfokaacutelniacute mikroskop

A1R (Nikon)

BX60 (Olympus)

Laserovyacute fluorescenčniacute mikroskop bdquoLight Sheetldquo Centrum regionu Hanaacute pro biotechnologickyacute a zemědělskyacute vyacutezkum Odděleniacute buněčneacute biologie

21 stol

21 stol

Digitaacutelniacute holografickyacute mikroskop firmy Lynceacutee Tec

Důležitaacute data při rozvoji moderniacute světelneacute mikroskopie

1847 - Zahaacutejeniacute vyacuteroby mikroskopů firmou Carl Zeiss v Jeně

1903 - Ultramikroskop (Richard Zsigmondy NC 1925)

1911 - Fluorescenčniacute mikroskop (Carl Reichert)

1935 - Faacutezovyacute kontrast (Fritz Zernike NC 1953)

1955 - Diferenciaacutelniacute interferenčniacute kontrast (DIC ndash Nomarski)

1968 - Rastrovaciacute tandemovyacute konfokaacutelniacute mikroskop (TSCM)

1978 - Laserovyacute konfokaacutelniacute rastrovaciacute mikroskop

1994 - Princip STED mikroskopie (S W Hell NC 2014)

(Stimulated Emission Depletion ndash redukce fluorescence stimulovanou emisiacute)

po roce 2000 - rozvoj tzv superrozlišovaciacute mikroskopie

2006 - Super-resolučniacute fluorescenčniacute mikroskop (Eric Betzig

Stefan W Hell a William E Moerner NC za chemii 2014)

NC = Nobelova cena

30 leacuteta 20 stoletiacute

ndash hranice vyacutevoje optickeacuteho (paprskoveacuteho) mikroskopu

(hranice rozlišeniacute světelneacuteho mikroskopu je diacuteky velikosti deacutelky světla 02 microm)

- dalšiacute zvětšovaacuteniacute pozorovanyacutech objektů na jineacutem principu

- miacutesto světelneacuteho paprsku elektronovyacute paprsek

(= tok rychlyacutech elektronů)

- miacutesto skleněneacute čočky magnetickaacute čočka

1931 - Ernst Ruska Max Knoll

prvniacute elektronovyacute mikroskop

tzv prozařovaciacute transmisniacute EM

(TEM ndash Transmission Electron Microscope)

- originaacutelniacute zvětšeniacute 1 000 - 250 000x

Ernst Ruska (1906-1988)

1942 - rastrovaciacute EM

(SEM ndash Scanning Electron Microscope) - postupneacute bombardovaacuteniacute vzorku elektrony

- zvětšeniacute až 30 000x

EM UacuteMG AV ČR Praha-Krč

FEI ndash TECHNAIG2TEM + kryozařiacutezeniacute

200 kV (λ el = 00025 nm)

RS 01 nm

prvkovaacute analyacuteza vzorků

zařiacutezeniacute pro

prvkovou analyacutezu

vzorků

Foto Pavla Vaacutelovaacute 2010

Brněnštiacute vědci z Uacutestavu přiacutestrojoveacute techniky AV ČR (UacutePT) a Mendelovy

univerzity představili novou metodu pozorovaacuteniacute rostlinnyacutech vzorků v jejich

přirozeneacutem stavu (za využitiacute kryoprotektiv)

Viacutece na httpe-svete15cztechnikacesti-vedci-posunuli-hranice-elektronove-mikroskopie-1174818

Enviromentaacutelniacute rastrovaciacute elektronovyacute mikroskop Aquasem II

TEM TITAN FEI Company Mgr Klaacutera Čeacutepe PhD

Vysokorozlišovaciacute transmisniacute elektronovyacute mikroskop

schopnyacute nahleacutednout do struktury materiaacutelů až na uacuterovni atomů

a současně přesně zmapovat jejich chemickeacute složeniacute

Regionaacutelniacute centrum pokročilyacutech

materiaacutelů (RCPTM)

Odd uhliacutekoveacute nanostruktury

PřF UP OL

Vysokorozlišovaciacute transmisniacute

elektronovyacute mikroskop TITAN (FEI)

Foto Pavla Vaacutelovaacute 2015

Transmisniacute elektronovyacute

mikroskop Jeol

Regionaacutelniacute centrum pokročilyacutech materiaacutelů (RCPTM)

Odd uhliacutekoveacute nanostruktury PřF UP OL

Neoptickeacute mikroskopy

1981

Řaacutedkovaciacute tunelovyacute mikroskop (STM ndash Scanning Tunnelling Microscope)

- mapovaacuteniacute povrchu pomociacute pohybu vodiveacuteho hrotu nad vodivyacutem povrchem sledovaneacuteho materiaacutelu

1986

Mikroskop atomaacuterniacutech sil (AMF ndash Atomic Force Miroscope)

- skenovaacuteniacute povrchu materiaacutelu pomociacute hrotu zavěšeneacutem na pružneacutem vyacutekyvneacutem rameacutenku kteryacute je přitahovaacuten elektrostatickyacutemi a Van der Walsovyacutemi silami

Rozlišeniacute v řaacutedech pikometrů (10-12 m) ndash rozeznaacuteniacute struktur

jednotlivyacutech atomů

O p t i c k eacute p r i n c i p y

světelneacute mikroskopie

Reichl J Všetička M Encyklopedie fyziky [online] copy2006-2014

[vid 2014] Dostupneacute z httpfyzikajreichlcommainarticleview431-optika Lepil O (2013) Fyzika pro gymnaacutezia Optika Prometheus Praha 4 přepracovaneacute vydaacuteniacute

Murphy DB Davidson MW (2013) Fundamentals of Light

Microscopy and Electronic Imaging Willey-Blackwell Published

2013 by John Wiley amp Sons Inc Hoboken New Jersey

S v ě t l o

= čaacutest rozsaacutehleacute oblasti elektromagnetickeacuteho zaacuteřeniacute

kterou vniacutemaacuteme zrakem

Rozhlasoveacute a raacutedioveacute vlny 250 km - 1 mm

Infračerveneacute zaacuteřeniacute 05 mm - 08 μm

Světlo (viditelneacute zaacuteřeniacute) 08 μm - 04 μm

Ultrafialoveacute zaacuteřeniacute 04 microm - 01 microm

Roumlntgenovo zaacuteřeniacute (X-paprsky) 15 nm - 0005 nm

γ-zaacuteřeniacute pod 00001 nm

Přibližneacute hodnoty ndash individuaacutelniacute vlastnosti zraku různyacutech lidiacute

S v ě t l o

= čaacutest rozsaacutehleacute oblasti elektromagnetickeacuteho zaacuteřeniacute

kterou vniacutemaacuteme zrakem

rarr se zkracujiacuteciacute se vlnovou deacutelkou se zvyšuje frekvence (energie)

Viditelneacute

Vlnoveacute deacutelky světla a relativniacute citlivost oka

Murphy DB Davidson MW (2013) Fundamentals of Light Microscopy and Electronic

Imaging Willey-Blackwell Published 2013 by John Wiley amp Sons Inc Hoboken New Jersey

= zrakovyacute pigment citlivyacute na

světlo nachaacutezejiacuteciacute se v tyčinkaacutech Jodopsin = zrakovyacute pigment citlivyacute na

barvu nachaacutezejiacuteciacute se v čiacutepciacutech

S v ě t l o

Duaacutelniacute charakter světla ndash vlněniacute i proud čaacutestic (fotonů)

Vlnovyacute model světla

vlna elektrickaacute a magnetickaacute (elektromagnetickaacute vlna je tvořena oscilujiacuteciacutem elektrickyacutem a

magnetickyacutem polem na sebe kolmyacutech a nesouciacutech vpřed energii)

Pro uacutečinky světla v mikroskopu je důležitaacute vlna elektrickaacute

= přiacutečneacute vlněniacute

postupneacute kmitaacuteniacute

jednotlivyacutech vedle sebe

ležiacuteciacutech bodů

Scheacutema světla jako elektromagnetickeacute vlny

Obr httpwwwprosoundwebcomarticleprintinvaders_from_

outer_space_electromagnetic_radiation_interference

λ - vlnovaacute deacutelka

(v oblasti svět zaacuteřeniacute

v rozmeziacute od 380 do 780 nm)

určuje barvu světla

a - amplituda

nejvyššiacute hodnota

určuje intenzitu světla

Z hlediska vlnoveacute deacutelky rozlišujeme

polychromatickeacute x monochromatickeacute světlo (selekce pomociacute barevnyacutech filtrů rarr jednotnaacute vlnovaacute deacutelka světlo zeleneacute červeneacute hellip)

Elektrickaacute vlna - sinusoida

Charakterizovaacutena dvěma veličinami

Pazourek 1975

Vlastnosti světla

Rovnoměrneacute šiacuteřeniacute světla ze zaacuteřiacuteciacuteho bodu na všechny strany rarr vlnovaacute plocha tvaru koule

Paprsek ndash směr kteryacutem se vlněniacute šiacuteřiacute a kteryacute je kolmyacute

na vlnoplochu

Pazourek 1975

- paprsek nepolarizovanyacute (A C) ndash kmitaacute v každeacutem

miacutestě a v průběhu času ve všech možnyacutech směrech

kolmyacutech na směr šiacuteřeniacute paprsku

- paprsek polarizovanyacute (B D1 D2) - kmitaacute v jedneacute

rovině přičemž rovina kmitů (vlněniacute) jednoho z nich je

kolmaacute k rovině kmitů druheacuteho

Pazourek 1975

Polarizovaneacute světlo viz

httpswwwyoutubecomwatchv=gP751qpm4n4

Murphy DB Davidson MW (2013) Fundamentals of Light Microscopy and

Electronic Imaging Jonh Wkiley amp Sons Inc Hoboken New Jersey

Osm různyacutech vlnovyacutech forem světla (znaacutezorňujiacuteciacutech různou kvalitu světla)

Odraz a lom světelnyacutech paprsků

v prostřediacutech různeacute hustoty

Důležitaacute charakteristika prostřediacute

index lomu ( n ) (= optickaacute hustota prostřediacute)

c = rychlost světla ve vakuu (stejnaacute pro všechny λ )

v = rychlost světla určiteacute vlnoveacute deacutelky ve zkoumaneacute laacutetce

c

n =

v

zde absolutniacute index lomu

(bezrozměrnaacute fyzikaacutelniacute veličina jeho jednotka je 1)

Rychlost světla (c) určiteacute vlnoveacute

deacutelky v různyacutech prostřediacutech

c ve vakuu

= 300 000 kms

Index lomu (n) některyacutech laacutetek

vzduch (vakuum) helliphellip 100 (vzduch 10002718)

voda helliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 133

plexisklo helliphelliphelliphelliphelliphellip 140 ndash 152

křemenneacute sklo helliphellip hellip 145 (čočka z křemene z Ninive ndash 7 stol přnl)

běžneacute sklo helliphelliphelliphelliphellip 151

cedrovyacute olej helliphelliphelliphelliphellip 151

imerzniacute olej Olympus hellip 1516 pro fluorescenci 1404

kanadskyacute balzaacutem helliphellip 150

krystal NaCl helliphelliphelliphellip 154

korunoveacute sklo helliphelliphelliphellip 145 ndash 156 (sodno-draselneacute bezolovnateacute)

flintoveacute sklo helliphelliphelliphellip 162 ndash 180 (olovnateacute)

diamant helliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 242

Index lomu je vždy většiacute než 100

očniacute čočka hellip 1406

sklivec helliphelliphellip 1336

Odraz světla rovnyacutem zrcadlem (reflexe)

Zaacutekony

1 Paprsek dopadajiacuteciacute kolmice dopadu a paprsek odraženyacute

ležiacute v jedneacute rovině

2 Uacutehel odrazu se rovnaacute uacutehlu dopadu

Odraz a lom paprsku

k

Důležiteacute pro mikroskopii (astronomii)

- neniacute zaacutevislost na vlnoveacute deacutelce světla (λ)

- na rozdiacutel od lomu paprsků se světelneacute

paprsky se odraacutežejiacute stejně

Pazourek 1975

Zaacutekony

1 Paprsek dopadajiacuteciacute kolmice lomu a paprsek lomenyacute ležiacute v teacuteže rovině

Lom světla (refrakce)

2 Při přechodu z prostřediacute opticky řidšiacuteho do prostřediacute opticky hustšiacuteho se paprsek laacuteme ke kolmici (A)

a z prostřediacute opticky hustšiacuteho

do prostřediacute opticky řidšiacuteho

se laacuteme od kolmice (B)

(C a D) ndash uacuteplnyacute odraz při tzv

mezniacutem uacutehlu dopadu paprsku

v přiacutepadě lomu od kolmice (B)

(viz Nikol odrazneacute hranoly světlovodneacute vlaacutekno nebo fluorescenčniacute metoda TIRFM ndash totaacutelniacute odraz exitačniacuteho zaacuteřeniacute)

Pazourek 1975

Svatyacute Kryštof od

švyacutecarskeacuteho maliacuteře

Konrada Witze (kolem 1400ndash1446)

Witz byl jedniacutem z prvniacutech

maliacuteřů kteryacute namaloval

přesnyacute způsob odrazu

světla na vodě

Disperze (rozklad) světla

= důsledek zaacutevislosti rychlosti světla v laacutetkaacutech na frekvenci světla

(λ = c f)

světlo různyacutech barev (λ)

se laacuteme různě

(červeneacute se lomiacute meacuteně než modreacute)

Přiacuteklad disperze (rozkladu) světla

Primaacuterniacute a sekundaacuterniacute duha Severniacute Čechy Foto Pavla Vaacutelovaacute 2010

D u h a

Jeden z mnoha

optickyacutech

jevů (fotometeorů)

v atmosfeacuteře

Rok 312 nl - před bitvou byzantskeacuteho ciacutesaře Konstantina I (272-337) s

konkurenčniacutem ciacutesařem Maxentiem u bran Řiacutema (tzv bitva u Milvijskeacuteho mostu) se

na obloze objevily tři zaacuteřiacuteciacute křiacuteže (halovyacute sloup parheacutelia a parhelickyacute oblouk)

Konstantin bitvu proti přesile vyhraacutel sjednotil řiacuteši a povolil v niacute vyznaacutevat křesťanstviacute

Maleacute halo (22deg) (viz 1) vedlejšiacute slunce (2) a horniacute a dolniacute halovyacute sloup (3)

vznikajiacuteciacute odrazem a lomem světelnyacutech paprsků na krystalciacutech ledu

Lom světla a dějiny

httptmagazineblogsnytimescom20121126halo-effect_r=0

1

3

2 2

3

Ohyb (difrakce) a interference

světla

Foto Pavla Vaacutelovaacute Bukovany 2015 Rozklad světla na CD - světlo žaacuterovky

Rozklad biacuteleacuteho světla na mřiacutežce

Pevnost poznaacuteniacute Olomouc 2015

Foto Pavla Vaacutelovaacute Olomouc 2015

Ohyb (difrakce) a interference

světla

Ohyb (difrakce) a interference

Difrakčniacute obrazec obsahuje světlaacute a tmavaacute miacutesta kteraacute se

střiacutedajiacute - světlaacute miacutesta nazyacutevaacuteme maxima a tmavaacute minima

Interference světla = sklaacutedaacuteniacute světelnyacutech vln

Předpoklad světlo musiacute byacutet koherentniacute

Podmiacutenka koherence

- paprsky musiacute miacutet stejnou frekvenci

- paprsky musiacute byacutet navzaacutejem rovnoběžneacute

- paprsky musiacute miacutet na sobě nezaacutevislyacute draacutehovyacute (faacutezovyacute) rozdiacutel

Vznik koherentniacuteho zaacuteřeniacute

rozděleniacutem světla

- buď odrazem pomociacute zrcadel

- nebo lomem pomociacute hranolů

Foto Pavla Vaacutelovaacute Praha 151 2016

Interference světla

stejnyacute způsob vlněniacute

(faacuteze je vzaacutejemně posunuta o sudeacute

naacutesobky λ2)

vznik interferenčniacuteho maxima

(konstruktivniacute interference)

Interference světla

asynchronniacute vlněniacute

(vzaacutejemně posunutaacute faacuteze

o licheacute naacutesobky λ2)

vznik interferenčniacuteho

minima

(destruktivniacute interference)

rarr zaacuteřeniacute zanikaacute

rarr zeslabeniacute zaacuteřeniacute

Interference dvou vrstev elektromagnetickeacuteho zaacuteřeniacute u Slunce

Čočky ndash zaacutekladniacute součaacutesti

mikroskopu

= průhlednaacute (nejčastěji skleněnaacute) tělesa omezenaacute

vypuklyacutemi nebo vydutyacutemi kulovityacutemi plochami lišiacuteciacute se od sveacuteho okoliacute odlišnyacutem indexem lomu

Zaacutekladniacute typy čoček

spojky (vypukleacute neboli konvexniacute)

rozptylky (vyduteacute konkaacutevniacute)

Pazourek 1975

Optickaacute osa ( o ) prochaacuteziacute středem čočky

Ohnisko ( F ) - bod do ktereacuteho se soustřeďujiacute paprsky probiacutehajiacuteciacute rovnoběžně s optickou osou

- 2 ohniska - předmětoveacute ohnisko ( F )

obrazoveacute ohnisko ( Facute )

- ohniskovaacute vzdaacutelenost ( f )

vzdaacutelenost ohniska od hlavniacute roviny proloženeacute středem čočky

- dvojnaacutesobnaacute ohniskovaacute vzdaacutelenost ( P Pacute )

Obrazovyacute prostor - prostor v němž vznikaacute obraz

Důležiteacute charakteristiky čočky

f

o

hlavniacute rovina

Pazourek 1975

V přiacutepadě velmi tenkeacute čočky

bull Obraz za optickou soustavou

rarr obraz s k u t e č n yacute

Skutečnyacute obraz je možneacute zachytit na stiacuteniacutetko

nebo na fotografickou desku neskutečnyacute nikoliv

bull Obraz před soustavou

rarr obraz n e s k u t e č n yacute (zdaacutenlivyacute virtuaacutelniacute)

Obraz skutečnyacute a neskutečnyacute

A ndash předmět Aacute- obraz předmětu

Upraveno podle Pazourek 1975

Francouz Augustin Jean Fresnel (1788-1827) [frenel]

Fresnelova čočka [frenelova]

- plochyacute tvar (zachovaacuteny pouze čaacutesti ktereacute měniacute směr chodu světelnyacutech paprsků)

- vyacuterazně nižšiacute hmotnost při zachovaacuteniacute podobnyacutech parametrů

Využitiacute infračidla pohybu semafory světlomety (majaacuteky) a reflektory (světla aut

divadelniacutech a filmovyacutech osvětlovaciacutech zařiacutezeniacute) zpětneacute projektory slunečniacute kolektory

na zaacutekladě tohoto principu takeacute vyacuteroba 3D displejů k mobilniacutem telefonům a televiziacutem

httpwwwmffcuniczverejnostzpravicky03_lupahtm

čočka na majaacuteku

Čočky v budoucnosti

Pokus o vyacuterobu tzv dokonaleacute čočky

Prototyp - upraveneacute tzv Maxwellovo rybiacute oko

- paprsky světla se v něm pohybujiacute po kružniciacutech a

na rozdiacutel od běžnyacutech čoček se při zobrazeniacute využijiacute

všechny paprsky

- superčočky využiacutevajiacute geometrie k tomu aby se světlo

soustředilo do oblasti menšiacute než je jeho vlnovaacute deacutelka

(zatiacutem se neviacute jak do čočky vyhovujiacuteciacutem způsobem

doveacutest světlo)

Využitiacute v budoucnu

mimo jineacute v pozorovaacuteniacute živyacutech buněk při velkeacutem zvětšeniacute

pomociacute obyčejneacuteho světla bez jejich narušeniacute

Viacutece viz Plaacutešek J Mikroskopy se superčočkami httpwwwvesmircz | Vesmiacuter 91 531 zaacuteřiacute 2012

Hranoly

- doplňky optickyacutech systeacutemů

- většinou tvar rovnostranneacuteho trojuacutehelniacuteka

- využiacutevajiacute uacuteplneacuteho odrazu

Funkce

- změna chodu paprsků pod různyacutemi uacutehly

- rozdvojeniacute paprsků

Pazourek 1975

Různeacute typy odraznyacutech hranolů

Hranoly

Různeacute typy hranolů

httplaserykvalitneczimagestext_25_zakladyoptiky1odrazne_hranolyjpg

Viz dichroickeacute zrcadlo u fluorescenčniacuteho mikroskopu

Chod paprsků v binokulaacuterniacutem tubusu

Pazourek 1975

Nikol = hranol z islandskeacuteho vaacutepence

rarr polarizace světla

Dvojlomnyacute vaacutepencovyacute

krystal

ř ndash paprsek řaacutednyacute (zanikaacute na začerněneacute ploše)

mř ndash paprsek mimořaacutednyacute (lineaacuterně polarizovanyacute

využit k osvětleniacute)

začerněnaacute plocha

Nikol

Pazourek 1975

vzduchovaacute štěrbina

- rychlost světla je

v různyacutech směrech různaacute

- uacutehel paprsku řaacutedneacuteho a

mimořaacutedneacuteho je odlišnyacute

(u Vikingů - slunečniacute kaacutemen

soacutelarsteinn)

Chod paprsků ve světlovodneacutem vlaacuteknu

Princip uacuteplnyacute odraz paprsku

- uvnitř skleněneacuteho vlaacutekna je opticky hustšiacute prostřediacute

- nutnost dostatečně silneacuteho světelneacuteho zdroje

Světlovodnaacute vlaacutekna

Pazourek 1975

Širokeacute využitiacute v praxi optickeacute kabely ndash přenos signaacutelů ve sdělovaciacute technice

světlovody umožňujiacuteciacute veacutest denniacute světlo vedeniacute světla u stereolup endoskopů hellip

Page 18: Světelná a elektronová mikroskopie...(AMF – Atomic Force Miroscope) - skenování povrchu materiálu pomocí hrotu zavěšeném na pružném výkyvném raménku, který je přitahován

Hookův mikroskop

- vylepšeniacute osvětleniacute použitiacute irisoveacute clony

irisovaacute clona

- zkoumaacuteniacute slabyacutech plaacutetků korku z korkovniacuteku

živeacute laacutetky jsou tvořeny buňkami

- 1665 - kniha bdquoMicrographialdquo

mikroskopickeacute pozorovaacuteniacute rostlinnyacutech

pletiv živočišnyacutech objektů a struktur

mineraacutelů

Rok vydaacuteniacute 1665 Micrographia or some Physiological Descriptions of Minute Bodies

made by Magnifying Glasses with Observations and Inquiries thereupon

London 1665

17 stol Leeuwenhoek Hook

Angličan Henry Power (1626ndash1668) ndash jako

prvniacute (1663) publikoval pozorovaacuteniacute mikroskopem

Marcello Malphighi (1628ndash1694)

italskyacute leacutekař

zakladatel mikroskopickeacute anatomie

- objev krevniacutech kapilaacuter savců (1661)

- malphigickeacute trubice hmyzu

18 stol

ndash mikroskopy přežily jako hračka pro zaacutebavu anglickyacutech gentlemanů zajiacutemajiacuteciacutech se o tajemstviacute přiacuterody

19 stol

zač 19 stol ndash Dollond Lister Amici - vynaacutelez

achromatickeacuteho objektivu

ndash do teacute doby použiacutevaacuteniacute jednočočkoveacuteho mikroskopu (dvoučočkovyacute

mikroskop podaacuteval značně zkreslenyacute obraz)

Vyacuteznačniacute vědci 19 stol použiacutevajiacuteciacute k svyacutem pozorovaacuteniacutem mikroskop

Robert Brown (1773-1858) - objev jaacutedra (1831)

Luis Pasteur (1822-1895) (francouzskyacute mikrobiolog)

- objev kvasinek

Robert Koch (1843-1910) (německyacute leacutekař a mikrobiolog)

- objev původců tuberkuloacutezy a cholery

Jan Evangelista Purkyně (1787-1869) (českyacute fyziolog)

- 1825 popsal jaacutedro u živočišneacute buňky (lupa)

od r 1832 použiacutevaacute kvalitniacute mikroskop

Microscope

stand VII

19 stol ndash dalšiacute vyacutevoj mikroskopů

Carl Zeiss ndash průmyslovaacute vyacuteroba mikroskopů (firma Zeiss)

Ernst Karl Abbe ndash teoretickaacute studia optickyacutech principů

Otto Schott ndash vyacutezkum optickeacuteho skla

August Koumlhler ndash kvalitniacute osvětleniacute

Otto Schott (1851-1935)

Ernst Abbe (1840-1905)

Carl Zeiss (1816-1888)

August Koumlhler (1866-1948)

Mikroskopy 19 stoletiacute

19 stol

20 stol

Konfokaacutelniacute mikroskop

A1R (Nikon)

BX60 (Olympus)

Laserovyacute fluorescenčniacute mikroskop bdquoLight Sheetldquo Centrum regionu Hanaacute pro biotechnologickyacute a zemědělskyacute vyacutezkum Odděleniacute buněčneacute biologie

21 stol

21 stol

Digitaacutelniacute holografickyacute mikroskop firmy Lynceacutee Tec

Důležitaacute data při rozvoji moderniacute světelneacute mikroskopie

1847 - Zahaacutejeniacute vyacuteroby mikroskopů firmou Carl Zeiss v Jeně

1903 - Ultramikroskop (Richard Zsigmondy NC 1925)

1911 - Fluorescenčniacute mikroskop (Carl Reichert)

1935 - Faacutezovyacute kontrast (Fritz Zernike NC 1953)

1955 - Diferenciaacutelniacute interferenčniacute kontrast (DIC ndash Nomarski)

1968 - Rastrovaciacute tandemovyacute konfokaacutelniacute mikroskop (TSCM)

1978 - Laserovyacute konfokaacutelniacute rastrovaciacute mikroskop

1994 - Princip STED mikroskopie (S W Hell NC 2014)

(Stimulated Emission Depletion ndash redukce fluorescence stimulovanou emisiacute)

po roce 2000 - rozvoj tzv superrozlišovaciacute mikroskopie

2006 - Super-resolučniacute fluorescenčniacute mikroskop (Eric Betzig

Stefan W Hell a William E Moerner NC za chemii 2014)

NC = Nobelova cena

30 leacuteta 20 stoletiacute

ndash hranice vyacutevoje optickeacuteho (paprskoveacuteho) mikroskopu

(hranice rozlišeniacute světelneacuteho mikroskopu je diacuteky velikosti deacutelky světla 02 microm)

- dalšiacute zvětšovaacuteniacute pozorovanyacutech objektů na jineacutem principu

- miacutesto světelneacuteho paprsku elektronovyacute paprsek

(= tok rychlyacutech elektronů)

- miacutesto skleněneacute čočky magnetickaacute čočka

1931 - Ernst Ruska Max Knoll

prvniacute elektronovyacute mikroskop

tzv prozařovaciacute transmisniacute EM

(TEM ndash Transmission Electron Microscope)

- originaacutelniacute zvětšeniacute 1 000 - 250 000x

Ernst Ruska (1906-1988)

1942 - rastrovaciacute EM

(SEM ndash Scanning Electron Microscope) - postupneacute bombardovaacuteniacute vzorku elektrony

- zvětšeniacute až 30 000x

EM UacuteMG AV ČR Praha-Krč

FEI ndash TECHNAIG2TEM + kryozařiacutezeniacute

200 kV (λ el = 00025 nm)

RS 01 nm

prvkovaacute analyacuteza vzorků

zařiacutezeniacute pro

prvkovou analyacutezu

vzorků

Foto Pavla Vaacutelovaacute 2010

Brněnštiacute vědci z Uacutestavu přiacutestrojoveacute techniky AV ČR (UacutePT) a Mendelovy

univerzity představili novou metodu pozorovaacuteniacute rostlinnyacutech vzorků v jejich

přirozeneacutem stavu (za využitiacute kryoprotektiv)

Viacutece na httpe-svete15cztechnikacesti-vedci-posunuli-hranice-elektronove-mikroskopie-1174818

Enviromentaacutelniacute rastrovaciacute elektronovyacute mikroskop Aquasem II

TEM TITAN FEI Company Mgr Klaacutera Čeacutepe PhD

Vysokorozlišovaciacute transmisniacute elektronovyacute mikroskop

schopnyacute nahleacutednout do struktury materiaacutelů až na uacuterovni atomů

a současně přesně zmapovat jejich chemickeacute složeniacute

Regionaacutelniacute centrum pokročilyacutech

materiaacutelů (RCPTM)

Odd uhliacutekoveacute nanostruktury

PřF UP OL

Vysokorozlišovaciacute transmisniacute

elektronovyacute mikroskop TITAN (FEI)

Foto Pavla Vaacutelovaacute 2015

Transmisniacute elektronovyacute

mikroskop Jeol

Regionaacutelniacute centrum pokročilyacutech materiaacutelů (RCPTM)

Odd uhliacutekoveacute nanostruktury PřF UP OL

Neoptickeacute mikroskopy

1981

Řaacutedkovaciacute tunelovyacute mikroskop (STM ndash Scanning Tunnelling Microscope)

- mapovaacuteniacute povrchu pomociacute pohybu vodiveacuteho hrotu nad vodivyacutem povrchem sledovaneacuteho materiaacutelu

1986

Mikroskop atomaacuterniacutech sil (AMF ndash Atomic Force Miroscope)

- skenovaacuteniacute povrchu materiaacutelu pomociacute hrotu zavěšeneacutem na pružneacutem vyacutekyvneacutem rameacutenku kteryacute je přitahovaacuten elektrostatickyacutemi a Van der Walsovyacutemi silami

Rozlišeniacute v řaacutedech pikometrů (10-12 m) ndash rozeznaacuteniacute struktur

jednotlivyacutech atomů

O p t i c k eacute p r i n c i p y

světelneacute mikroskopie

Reichl J Všetička M Encyklopedie fyziky [online] copy2006-2014

[vid 2014] Dostupneacute z httpfyzikajreichlcommainarticleview431-optika Lepil O (2013) Fyzika pro gymnaacutezia Optika Prometheus Praha 4 přepracovaneacute vydaacuteniacute

Murphy DB Davidson MW (2013) Fundamentals of Light

Microscopy and Electronic Imaging Willey-Blackwell Published

2013 by John Wiley amp Sons Inc Hoboken New Jersey

S v ě t l o

= čaacutest rozsaacutehleacute oblasti elektromagnetickeacuteho zaacuteřeniacute

kterou vniacutemaacuteme zrakem

Rozhlasoveacute a raacutedioveacute vlny 250 km - 1 mm

Infračerveneacute zaacuteřeniacute 05 mm - 08 μm

Světlo (viditelneacute zaacuteřeniacute) 08 μm - 04 μm

Ultrafialoveacute zaacuteřeniacute 04 microm - 01 microm

Roumlntgenovo zaacuteřeniacute (X-paprsky) 15 nm - 0005 nm

γ-zaacuteřeniacute pod 00001 nm

Přibližneacute hodnoty ndash individuaacutelniacute vlastnosti zraku různyacutech lidiacute

S v ě t l o

= čaacutest rozsaacutehleacute oblasti elektromagnetickeacuteho zaacuteřeniacute

kterou vniacutemaacuteme zrakem

rarr se zkracujiacuteciacute se vlnovou deacutelkou se zvyšuje frekvence (energie)

Viditelneacute

Vlnoveacute deacutelky světla a relativniacute citlivost oka

Murphy DB Davidson MW (2013) Fundamentals of Light Microscopy and Electronic

Imaging Willey-Blackwell Published 2013 by John Wiley amp Sons Inc Hoboken New Jersey

= zrakovyacute pigment citlivyacute na

světlo nachaacutezejiacuteciacute se v tyčinkaacutech Jodopsin = zrakovyacute pigment citlivyacute na

barvu nachaacutezejiacuteciacute se v čiacutepciacutech

S v ě t l o

Duaacutelniacute charakter světla ndash vlněniacute i proud čaacutestic (fotonů)

Vlnovyacute model světla

vlna elektrickaacute a magnetickaacute (elektromagnetickaacute vlna je tvořena oscilujiacuteciacutem elektrickyacutem a

magnetickyacutem polem na sebe kolmyacutech a nesouciacutech vpřed energii)

Pro uacutečinky světla v mikroskopu je důležitaacute vlna elektrickaacute

= přiacutečneacute vlněniacute

postupneacute kmitaacuteniacute

jednotlivyacutech vedle sebe

ležiacuteciacutech bodů

Scheacutema světla jako elektromagnetickeacute vlny

Obr httpwwwprosoundwebcomarticleprintinvaders_from_

outer_space_electromagnetic_radiation_interference

λ - vlnovaacute deacutelka

(v oblasti svět zaacuteřeniacute

v rozmeziacute od 380 do 780 nm)

určuje barvu světla

a - amplituda

nejvyššiacute hodnota

určuje intenzitu světla

Z hlediska vlnoveacute deacutelky rozlišujeme

polychromatickeacute x monochromatickeacute světlo (selekce pomociacute barevnyacutech filtrů rarr jednotnaacute vlnovaacute deacutelka světlo zeleneacute červeneacute hellip)

Elektrickaacute vlna - sinusoida

Charakterizovaacutena dvěma veličinami

Pazourek 1975

Vlastnosti světla

Rovnoměrneacute šiacuteřeniacute světla ze zaacuteřiacuteciacuteho bodu na všechny strany rarr vlnovaacute plocha tvaru koule

Paprsek ndash směr kteryacutem se vlněniacute šiacuteřiacute a kteryacute je kolmyacute

na vlnoplochu

Pazourek 1975

- paprsek nepolarizovanyacute (A C) ndash kmitaacute v každeacutem

miacutestě a v průběhu času ve všech možnyacutech směrech

kolmyacutech na směr šiacuteřeniacute paprsku

- paprsek polarizovanyacute (B D1 D2) - kmitaacute v jedneacute

rovině přičemž rovina kmitů (vlněniacute) jednoho z nich je

kolmaacute k rovině kmitů druheacuteho

Pazourek 1975

Polarizovaneacute světlo viz

httpswwwyoutubecomwatchv=gP751qpm4n4

Murphy DB Davidson MW (2013) Fundamentals of Light Microscopy and

Electronic Imaging Jonh Wkiley amp Sons Inc Hoboken New Jersey

Osm různyacutech vlnovyacutech forem světla (znaacutezorňujiacuteciacutech různou kvalitu světla)

Odraz a lom světelnyacutech paprsků

v prostřediacutech různeacute hustoty

Důležitaacute charakteristika prostřediacute

index lomu ( n ) (= optickaacute hustota prostřediacute)

c = rychlost světla ve vakuu (stejnaacute pro všechny λ )

v = rychlost světla určiteacute vlnoveacute deacutelky ve zkoumaneacute laacutetce

c

n =

v

zde absolutniacute index lomu

(bezrozměrnaacute fyzikaacutelniacute veličina jeho jednotka je 1)

Rychlost světla (c) určiteacute vlnoveacute

deacutelky v různyacutech prostřediacutech

c ve vakuu

= 300 000 kms

Index lomu (n) některyacutech laacutetek

vzduch (vakuum) helliphellip 100 (vzduch 10002718)

voda helliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 133

plexisklo helliphelliphelliphelliphelliphellip 140 ndash 152

křemenneacute sklo helliphellip hellip 145 (čočka z křemene z Ninive ndash 7 stol přnl)

běžneacute sklo helliphelliphelliphelliphellip 151

cedrovyacute olej helliphelliphelliphelliphellip 151

imerzniacute olej Olympus hellip 1516 pro fluorescenci 1404

kanadskyacute balzaacutem helliphellip 150

krystal NaCl helliphelliphelliphellip 154

korunoveacute sklo helliphelliphelliphellip 145 ndash 156 (sodno-draselneacute bezolovnateacute)

flintoveacute sklo helliphelliphelliphellip 162 ndash 180 (olovnateacute)

diamant helliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 242

Index lomu je vždy většiacute než 100

očniacute čočka hellip 1406

sklivec helliphelliphellip 1336

Odraz světla rovnyacutem zrcadlem (reflexe)

Zaacutekony

1 Paprsek dopadajiacuteciacute kolmice dopadu a paprsek odraženyacute

ležiacute v jedneacute rovině

2 Uacutehel odrazu se rovnaacute uacutehlu dopadu

Odraz a lom paprsku

k

Důležiteacute pro mikroskopii (astronomii)

- neniacute zaacutevislost na vlnoveacute deacutelce světla (λ)

- na rozdiacutel od lomu paprsků se světelneacute

paprsky se odraacutežejiacute stejně

Pazourek 1975

Zaacutekony

1 Paprsek dopadajiacuteciacute kolmice lomu a paprsek lomenyacute ležiacute v teacuteže rovině

Lom světla (refrakce)

2 Při přechodu z prostřediacute opticky řidšiacuteho do prostřediacute opticky hustšiacuteho se paprsek laacuteme ke kolmici (A)

a z prostřediacute opticky hustšiacuteho

do prostřediacute opticky řidšiacuteho

se laacuteme od kolmice (B)

(C a D) ndash uacuteplnyacute odraz při tzv

mezniacutem uacutehlu dopadu paprsku

v přiacutepadě lomu od kolmice (B)

(viz Nikol odrazneacute hranoly světlovodneacute vlaacutekno nebo fluorescenčniacute metoda TIRFM ndash totaacutelniacute odraz exitačniacuteho zaacuteřeniacute)

Pazourek 1975

Svatyacute Kryštof od

švyacutecarskeacuteho maliacuteře

Konrada Witze (kolem 1400ndash1446)

Witz byl jedniacutem z prvniacutech

maliacuteřů kteryacute namaloval

přesnyacute způsob odrazu

světla na vodě

Disperze (rozklad) světla

= důsledek zaacutevislosti rychlosti světla v laacutetkaacutech na frekvenci světla

(λ = c f)

světlo různyacutech barev (λ)

se laacuteme různě

(červeneacute se lomiacute meacuteně než modreacute)

Přiacuteklad disperze (rozkladu) světla

Primaacuterniacute a sekundaacuterniacute duha Severniacute Čechy Foto Pavla Vaacutelovaacute 2010

D u h a

Jeden z mnoha

optickyacutech

jevů (fotometeorů)

v atmosfeacuteře

Rok 312 nl - před bitvou byzantskeacuteho ciacutesaře Konstantina I (272-337) s

konkurenčniacutem ciacutesařem Maxentiem u bran Řiacutema (tzv bitva u Milvijskeacuteho mostu) se

na obloze objevily tři zaacuteřiacuteciacute křiacuteže (halovyacute sloup parheacutelia a parhelickyacute oblouk)

Konstantin bitvu proti přesile vyhraacutel sjednotil řiacuteši a povolil v niacute vyznaacutevat křesťanstviacute

Maleacute halo (22deg) (viz 1) vedlejšiacute slunce (2) a horniacute a dolniacute halovyacute sloup (3)

vznikajiacuteciacute odrazem a lomem světelnyacutech paprsků na krystalciacutech ledu

Lom světla a dějiny

httptmagazineblogsnytimescom20121126halo-effect_r=0

1

3

2 2

3

Ohyb (difrakce) a interference

světla

Foto Pavla Vaacutelovaacute Bukovany 2015 Rozklad světla na CD - světlo žaacuterovky

Rozklad biacuteleacuteho světla na mřiacutežce

Pevnost poznaacuteniacute Olomouc 2015

Foto Pavla Vaacutelovaacute Olomouc 2015

Ohyb (difrakce) a interference

světla

Ohyb (difrakce) a interference

Difrakčniacute obrazec obsahuje světlaacute a tmavaacute miacutesta kteraacute se

střiacutedajiacute - světlaacute miacutesta nazyacutevaacuteme maxima a tmavaacute minima

Interference světla = sklaacutedaacuteniacute světelnyacutech vln

Předpoklad světlo musiacute byacutet koherentniacute

Podmiacutenka koherence

- paprsky musiacute miacutet stejnou frekvenci

- paprsky musiacute byacutet navzaacutejem rovnoběžneacute

- paprsky musiacute miacutet na sobě nezaacutevislyacute draacutehovyacute (faacutezovyacute) rozdiacutel

Vznik koherentniacuteho zaacuteřeniacute

rozděleniacutem světla

- buď odrazem pomociacute zrcadel

- nebo lomem pomociacute hranolů

Foto Pavla Vaacutelovaacute Praha 151 2016

Interference světla

stejnyacute způsob vlněniacute

(faacuteze je vzaacutejemně posunuta o sudeacute

naacutesobky λ2)

vznik interferenčniacuteho maxima

(konstruktivniacute interference)

Interference světla

asynchronniacute vlněniacute

(vzaacutejemně posunutaacute faacuteze

o licheacute naacutesobky λ2)

vznik interferenčniacuteho

minima

(destruktivniacute interference)

rarr zaacuteřeniacute zanikaacute

rarr zeslabeniacute zaacuteřeniacute

Interference dvou vrstev elektromagnetickeacuteho zaacuteřeniacute u Slunce

Čočky ndash zaacutekladniacute součaacutesti

mikroskopu

= průhlednaacute (nejčastěji skleněnaacute) tělesa omezenaacute

vypuklyacutemi nebo vydutyacutemi kulovityacutemi plochami lišiacuteciacute se od sveacuteho okoliacute odlišnyacutem indexem lomu

Zaacutekladniacute typy čoček

spojky (vypukleacute neboli konvexniacute)

rozptylky (vyduteacute konkaacutevniacute)

Pazourek 1975

Optickaacute osa ( o ) prochaacuteziacute středem čočky

Ohnisko ( F ) - bod do ktereacuteho se soustřeďujiacute paprsky probiacutehajiacuteciacute rovnoběžně s optickou osou

- 2 ohniska - předmětoveacute ohnisko ( F )

obrazoveacute ohnisko ( Facute )

- ohniskovaacute vzdaacutelenost ( f )

vzdaacutelenost ohniska od hlavniacute roviny proloženeacute středem čočky

- dvojnaacutesobnaacute ohniskovaacute vzdaacutelenost ( P Pacute )

Obrazovyacute prostor - prostor v němž vznikaacute obraz

Důležiteacute charakteristiky čočky

f

o

hlavniacute rovina

Pazourek 1975

V přiacutepadě velmi tenkeacute čočky

bull Obraz za optickou soustavou

rarr obraz s k u t e č n yacute

Skutečnyacute obraz je možneacute zachytit na stiacuteniacutetko

nebo na fotografickou desku neskutečnyacute nikoliv

bull Obraz před soustavou

rarr obraz n e s k u t e č n yacute (zdaacutenlivyacute virtuaacutelniacute)

Obraz skutečnyacute a neskutečnyacute

A ndash předmět Aacute- obraz předmětu

Upraveno podle Pazourek 1975

Francouz Augustin Jean Fresnel (1788-1827) [frenel]

Fresnelova čočka [frenelova]

- plochyacute tvar (zachovaacuteny pouze čaacutesti ktereacute měniacute směr chodu světelnyacutech paprsků)

- vyacuterazně nižšiacute hmotnost při zachovaacuteniacute podobnyacutech parametrů

Využitiacute infračidla pohybu semafory světlomety (majaacuteky) a reflektory (světla aut

divadelniacutech a filmovyacutech osvětlovaciacutech zařiacutezeniacute) zpětneacute projektory slunečniacute kolektory

na zaacutekladě tohoto principu takeacute vyacuteroba 3D displejů k mobilniacutem telefonům a televiziacutem

httpwwwmffcuniczverejnostzpravicky03_lupahtm

čočka na majaacuteku

Čočky v budoucnosti

Pokus o vyacuterobu tzv dokonaleacute čočky

Prototyp - upraveneacute tzv Maxwellovo rybiacute oko

- paprsky světla se v něm pohybujiacute po kružniciacutech a

na rozdiacutel od běžnyacutech čoček se při zobrazeniacute využijiacute

všechny paprsky

- superčočky využiacutevajiacute geometrie k tomu aby se světlo

soustředilo do oblasti menšiacute než je jeho vlnovaacute deacutelka

(zatiacutem se neviacute jak do čočky vyhovujiacuteciacutem způsobem

doveacutest světlo)

Využitiacute v budoucnu

mimo jineacute v pozorovaacuteniacute živyacutech buněk při velkeacutem zvětšeniacute

pomociacute obyčejneacuteho světla bez jejich narušeniacute

Viacutece viz Plaacutešek J Mikroskopy se superčočkami httpwwwvesmircz | Vesmiacuter 91 531 zaacuteřiacute 2012

Hranoly

- doplňky optickyacutech systeacutemů

- většinou tvar rovnostranneacuteho trojuacutehelniacuteka

- využiacutevajiacute uacuteplneacuteho odrazu

Funkce

- změna chodu paprsků pod různyacutemi uacutehly

- rozdvojeniacute paprsků

Pazourek 1975

Různeacute typy odraznyacutech hranolů

Hranoly

Různeacute typy hranolů

httplaserykvalitneczimagestext_25_zakladyoptiky1odrazne_hranolyjpg

Viz dichroickeacute zrcadlo u fluorescenčniacuteho mikroskopu

Chod paprsků v binokulaacuterniacutem tubusu

Pazourek 1975

Nikol = hranol z islandskeacuteho vaacutepence

rarr polarizace světla

Dvojlomnyacute vaacutepencovyacute

krystal

ř ndash paprsek řaacutednyacute (zanikaacute na začerněneacute ploše)

mř ndash paprsek mimořaacutednyacute (lineaacuterně polarizovanyacute

využit k osvětleniacute)

začerněnaacute plocha

Nikol

Pazourek 1975

vzduchovaacute štěrbina

- rychlost světla je

v různyacutech směrech různaacute

- uacutehel paprsku řaacutedneacuteho a

mimořaacutedneacuteho je odlišnyacute

(u Vikingů - slunečniacute kaacutemen

soacutelarsteinn)

Chod paprsků ve světlovodneacutem vlaacuteknu

Princip uacuteplnyacute odraz paprsku

- uvnitř skleněneacuteho vlaacutekna je opticky hustšiacute prostřediacute

- nutnost dostatečně silneacuteho světelneacuteho zdroje

Světlovodnaacute vlaacutekna

Pazourek 1975

Širokeacute využitiacute v praxi optickeacute kabely ndash přenos signaacutelů ve sdělovaciacute technice

světlovody umožňujiacuteciacute veacutest denniacute světlo vedeniacute světla u stereolup endoskopů hellip

Page 19: Světelná a elektronová mikroskopie...(AMF – Atomic Force Miroscope) - skenování povrchu materiálu pomocí hrotu zavěšeném na pružném výkyvném raménku, který je přitahován

- zkoumaacuteniacute slabyacutech plaacutetků korku z korkovniacuteku

živeacute laacutetky jsou tvořeny buňkami

- 1665 - kniha bdquoMicrographialdquo

mikroskopickeacute pozorovaacuteniacute rostlinnyacutech

pletiv živočišnyacutech objektů a struktur

mineraacutelů

Rok vydaacuteniacute 1665 Micrographia or some Physiological Descriptions of Minute Bodies

made by Magnifying Glasses with Observations and Inquiries thereupon

London 1665

17 stol Leeuwenhoek Hook

Angličan Henry Power (1626ndash1668) ndash jako

prvniacute (1663) publikoval pozorovaacuteniacute mikroskopem

Marcello Malphighi (1628ndash1694)

italskyacute leacutekař

zakladatel mikroskopickeacute anatomie

- objev krevniacutech kapilaacuter savců (1661)

- malphigickeacute trubice hmyzu

18 stol

ndash mikroskopy přežily jako hračka pro zaacutebavu anglickyacutech gentlemanů zajiacutemajiacuteciacutech se o tajemstviacute přiacuterody

19 stol

zač 19 stol ndash Dollond Lister Amici - vynaacutelez

achromatickeacuteho objektivu

ndash do teacute doby použiacutevaacuteniacute jednočočkoveacuteho mikroskopu (dvoučočkovyacute

mikroskop podaacuteval značně zkreslenyacute obraz)

Vyacuteznačniacute vědci 19 stol použiacutevajiacuteciacute k svyacutem pozorovaacuteniacutem mikroskop

Robert Brown (1773-1858) - objev jaacutedra (1831)

Luis Pasteur (1822-1895) (francouzskyacute mikrobiolog)

- objev kvasinek

Robert Koch (1843-1910) (německyacute leacutekař a mikrobiolog)

- objev původců tuberkuloacutezy a cholery

Jan Evangelista Purkyně (1787-1869) (českyacute fyziolog)

- 1825 popsal jaacutedro u živočišneacute buňky (lupa)

od r 1832 použiacutevaacute kvalitniacute mikroskop

Microscope

stand VII

19 stol ndash dalšiacute vyacutevoj mikroskopů

Carl Zeiss ndash průmyslovaacute vyacuteroba mikroskopů (firma Zeiss)

Ernst Karl Abbe ndash teoretickaacute studia optickyacutech principů

Otto Schott ndash vyacutezkum optickeacuteho skla

August Koumlhler ndash kvalitniacute osvětleniacute

Otto Schott (1851-1935)

Ernst Abbe (1840-1905)

Carl Zeiss (1816-1888)

August Koumlhler (1866-1948)

Mikroskopy 19 stoletiacute

19 stol

20 stol

Konfokaacutelniacute mikroskop

A1R (Nikon)

BX60 (Olympus)

Laserovyacute fluorescenčniacute mikroskop bdquoLight Sheetldquo Centrum regionu Hanaacute pro biotechnologickyacute a zemědělskyacute vyacutezkum Odděleniacute buněčneacute biologie

21 stol

21 stol

Digitaacutelniacute holografickyacute mikroskop firmy Lynceacutee Tec

Důležitaacute data při rozvoji moderniacute světelneacute mikroskopie

1847 - Zahaacutejeniacute vyacuteroby mikroskopů firmou Carl Zeiss v Jeně

1903 - Ultramikroskop (Richard Zsigmondy NC 1925)

1911 - Fluorescenčniacute mikroskop (Carl Reichert)

1935 - Faacutezovyacute kontrast (Fritz Zernike NC 1953)

1955 - Diferenciaacutelniacute interferenčniacute kontrast (DIC ndash Nomarski)

1968 - Rastrovaciacute tandemovyacute konfokaacutelniacute mikroskop (TSCM)

1978 - Laserovyacute konfokaacutelniacute rastrovaciacute mikroskop

1994 - Princip STED mikroskopie (S W Hell NC 2014)

(Stimulated Emission Depletion ndash redukce fluorescence stimulovanou emisiacute)

po roce 2000 - rozvoj tzv superrozlišovaciacute mikroskopie

2006 - Super-resolučniacute fluorescenčniacute mikroskop (Eric Betzig

Stefan W Hell a William E Moerner NC za chemii 2014)

NC = Nobelova cena

30 leacuteta 20 stoletiacute

ndash hranice vyacutevoje optickeacuteho (paprskoveacuteho) mikroskopu

(hranice rozlišeniacute světelneacuteho mikroskopu je diacuteky velikosti deacutelky světla 02 microm)

- dalšiacute zvětšovaacuteniacute pozorovanyacutech objektů na jineacutem principu

- miacutesto světelneacuteho paprsku elektronovyacute paprsek

(= tok rychlyacutech elektronů)

- miacutesto skleněneacute čočky magnetickaacute čočka

1931 - Ernst Ruska Max Knoll

prvniacute elektronovyacute mikroskop

tzv prozařovaciacute transmisniacute EM

(TEM ndash Transmission Electron Microscope)

- originaacutelniacute zvětšeniacute 1 000 - 250 000x

Ernst Ruska (1906-1988)

1942 - rastrovaciacute EM

(SEM ndash Scanning Electron Microscope) - postupneacute bombardovaacuteniacute vzorku elektrony

- zvětšeniacute až 30 000x

EM UacuteMG AV ČR Praha-Krč

FEI ndash TECHNAIG2TEM + kryozařiacutezeniacute

200 kV (λ el = 00025 nm)

RS 01 nm

prvkovaacute analyacuteza vzorků

zařiacutezeniacute pro

prvkovou analyacutezu

vzorků

Foto Pavla Vaacutelovaacute 2010

Brněnštiacute vědci z Uacutestavu přiacutestrojoveacute techniky AV ČR (UacutePT) a Mendelovy

univerzity představili novou metodu pozorovaacuteniacute rostlinnyacutech vzorků v jejich

přirozeneacutem stavu (za využitiacute kryoprotektiv)

Viacutece na httpe-svete15cztechnikacesti-vedci-posunuli-hranice-elektronove-mikroskopie-1174818

Enviromentaacutelniacute rastrovaciacute elektronovyacute mikroskop Aquasem II

TEM TITAN FEI Company Mgr Klaacutera Čeacutepe PhD

Vysokorozlišovaciacute transmisniacute elektronovyacute mikroskop

schopnyacute nahleacutednout do struktury materiaacutelů až na uacuterovni atomů

a současně přesně zmapovat jejich chemickeacute složeniacute

Regionaacutelniacute centrum pokročilyacutech

materiaacutelů (RCPTM)

Odd uhliacutekoveacute nanostruktury

PřF UP OL

Vysokorozlišovaciacute transmisniacute

elektronovyacute mikroskop TITAN (FEI)

Foto Pavla Vaacutelovaacute 2015

Transmisniacute elektronovyacute

mikroskop Jeol

Regionaacutelniacute centrum pokročilyacutech materiaacutelů (RCPTM)

Odd uhliacutekoveacute nanostruktury PřF UP OL

Neoptickeacute mikroskopy

1981

Řaacutedkovaciacute tunelovyacute mikroskop (STM ndash Scanning Tunnelling Microscope)

- mapovaacuteniacute povrchu pomociacute pohybu vodiveacuteho hrotu nad vodivyacutem povrchem sledovaneacuteho materiaacutelu

1986

Mikroskop atomaacuterniacutech sil (AMF ndash Atomic Force Miroscope)

- skenovaacuteniacute povrchu materiaacutelu pomociacute hrotu zavěšeneacutem na pružneacutem vyacutekyvneacutem rameacutenku kteryacute je přitahovaacuten elektrostatickyacutemi a Van der Walsovyacutemi silami

Rozlišeniacute v řaacutedech pikometrů (10-12 m) ndash rozeznaacuteniacute struktur

jednotlivyacutech atomů

O p t i c k eacute p r i n c i p y

světelneacute mikroskopie

Reichl J Všetička M Encyklopedie fyziky [online] copy2006-2014

[vid 2014] Dostupneacute z httpfyzikajreichlcommainarticleview431-optika Lepil O (2013) Fyzika pro gymnaacutezia Optika Prometheus Praha 4 přepracovaneacute vydaacuteniacute

Murphy DB Davidson MW (2013) Fundamentals of Light

Microscopy and Electronic Imaging Willey-Blackwell Published

2013 by John Wiley amp Sons Inc Hoboken New Jersey

S v ě t l o

= čaacutest rozsaacutehleacute oblasti elektromagnetickeacuteho zaacuteřeniacute

kterou vniacutemaacuteme zrakem

Rozhlasoveacute a raacutedioveacute vlny 250 km - 1 mm

Infračerveneacute zaacuteřeniacute 05 mm - 08 μm

Světlo (viditelneacute zaacuteřeniacute) 08 μm - 04 μm

Ultrafialoveacute zaacuteřeniacute 04 microm - 01 microm

Roumlntgenovo zaacuteřeniacute (X-paprsky) 15 nm - 0005 nm

γ-zaacuteřeniacute pod 00001 nm

Přibližneacute hodnoty ndash individuaacutelniacute vlastnosti zraku různyacutech lidiacute

S v ě t l o

= čaacutest rozsaacutehleacute oblasti elektromagnetickeacuteho zaacuteřeniacute

kterou vniacutemaacuteme zrakem

rarr se zkracujiacuteciacute se vlnovou deacutelkou se zvyšuje frekvence (energie)

Viditelneacute

Vlnoveacute deacutelky světla a relativniacute citlivost oka

Murphy DB Davidson MW (2013) Fundamentals of Light Microscopy and Electronic

Imaging Willey-Blackwell Published 2013 by John Wiley amp Sons Inc Hoboken New Jersey

= zrakovyacute pigment citlivyacute na

světlo nachaacutezejiacuteciacute se v tyčinkaacutech Jodopsin = zrakovyacute pigment citlivyacute na

barvu nachaacutezejiacuteciacute se v čiacutepciacutech

S v ě t l o

Duaacutelniacute charakter světla ndash vlněniacute i proud čaacutestic (fotonů)

Vlnovyacute model světla

vlna elektrickaacute a magnetickaacute (elektromagnetickaacute vlna je tvořena oscilujiacuteciacutem elektrickyacutem a

magnetickyacutem polem na sebe kolmyacutech a nesouciacutech vpřed energii)

Pro uacutečinky světla v mikroskopu je důležitaacute vlna elektrickaacute

= přiacutečneacute vlněniacute

postupneacute kmitaacuteniacute

jednotlivyacutech vedle sebe

ležiacuteciacutech bodů

Scheacutema světla jako elektromagnetickeacute vlny

Obr httpwwwprosoundwebcomarticleprintinvaders_from_

outer_space_electromagnetic_radiation_interference

λ - vlnovaacute deacutelka

(v oblasti svět zaacuteřeniacute

v rozmeziacute od 380 do 780 nm)

určuje barvu světla

a - amplituda

nejvyššiacute hodnota

určuje intenzitu světla

Z hlediska vlnoveacute deacutelky rozlišujeme

polychromatickeacute x monochromatickeacute světlo (selekce pomociacute barevnyacutech filtrů rarr jednotnaacute vlnovaacute deacutelka světlo zeleneacute červeneacute hellip)

Elektrickaacute vlna - sinusoida

Charakterizovaacutena dvěma veličinami

Pazourek 1975

Vlastnosti světla

Rovnoměrneacute šiacuteřeniacute světla ze zaacuteřiacuteciacuteho bodu na všechny strany rarr vlnovaacute plocha tvaru koule

Paprsek ndash směr kteryacutem se vlněniacute šiacuteřiacute a kteryacute je kolmyacute

na vlnoplochu

Pazourek 1975

- paprsek nepolarizovanyacute (A C) ndash kmitaacute v každeacutem

miacutestě a v průběhu času ve všech možnyacutech směrech

kolmyacutech na směr šiacuteřeniacute paprsku

- paprsek polarizovanyacute (B D1 D2) - kmitaacute v jedneacute

rovině přičemž rovina kmitů (vlněniacute) jednoho z nich je

kolmaacute k rovině kmitů druheacuteho

Pazourek 1975

Polarizovaneacute světlo viz

httpswwwyoutubecomwatchv=gP751qpm4n4

Murphy DB Davidson MW (2013) Fundamentals of Light Microscopy and

Electronic Imaging Jonh Wkiley amp Sons Inc Hoboken New Jersey

Osm různyacutech vlnovyacutech forem světla (znaacutezorňujiacuteciacutech různou kvalitu světla)

Odraz a lom světelnyacutech paprsků

v prostřediacutech různeacute hustoty

Důležitaacute charakteristika prostřediacute

index lomu ( n ) (= optickaacute hustota prostřediacute)

c = rychlost světla ve vakuu (stejnaacute pro všechny λ )

v = rychlost světla určiteacute vlnoveacute deacutelky ve zkoumaneacute laacutetce

c

n =

v

zde absolutniacute index lomu

(bezrozměrnaacute fyzikaacutelniacute veličina jeho jednotka je 1)

Rychlost světla (c) určiteacute vlnoveacute

deacutelky v různyacutech prostřediacutech

c ve vakuu

= 300 000 kms

Index lomu (n) některyacutech laacutetek

vzduch (vakuum) helliphellip 100 (vzduch 10002718)

voda helliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 133

plexisklo helliphelliphelliphelliphelliphellip 140 ndash 152

křemenneacute sklo helliphellip hellip 145 (čočka z křemene z Ninive ndash 7 stol přnl)

běžneacute sklo helliphelliphelliphelliphellip 151

cedrovyacute olej helliphelliphelliphelliphellip 151

imerzniacute olej Olympus hellip 1516 pro fluorescenci 1404

kanadskyacute balzaacutem helliphellip 150

krystal NaCl helliphelliphelliphellip 154

korunoveacute sklo helliphelliphelliphellip 145 ndash 156 (sodno-draselneacute bezolovnateacute)

flintoveacute sklo helliphelliphelliphellip 162 ndash 180 (olovnateacute)

diamant helliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 242

Index lomu je vždy většiacute než 100

očniacute čočka hellip 1406

sklivec helliphelliphellip 1336

Odraz světla rovnyacutem zrcadlem (reflexe)

Zaacutekony

1 Paprsek dopadajiacuteciacute kolmice dopadu a paprsek odraženyacute

ležiacute v jedneacute rovině

2 Uacutehel odrazu se rovnaacute uacutehlu dopadu

Odraz a lom paprsku

k

Důležiteacute pro mikroskopii (astronomii)

- neniacute zaacutevislost na vlnoveacute deacutelce světla (λ)

- na rozdiacutel od lomu paprsků se světelneacute

paprsky se odraacutežejiacute stejně

Pazourek 1975

Zaacutekony

1 Paprsek dopadajiacuteciacute kolmice lomu a paprsek lomenyacute ležiacute v teacuteže rovině

Lom světla (refrakce)

2 Při přechodu z prostřediacute opticky řidšiacuteho do prostřediacute opticky hustšiacuteho se paprsek laacuteme ke kolmici (A)

a z prostřediacute opticky hustšiacuteho

do prostřediacute opticky řidšiacuteho

se laacuteme od kolmice (B)

(C a D) ndash uacuteplnyacute odraz při tzv

mezniacutem uacutehlu dopadu paprsku

v přiacutepadě lomu od kolmice (B)

(viz Nikol odrazneacute hranoly světlovodneacute vlaacutekno nebo fluorescenčniacute metoda TIRFM ndash totaacutelniacute odraz exitačniacuteho zaacuteřeniacute)

Pazourek 1975

Svatyacute Kryštof od

švyacutecarskeacuteho maliacuteře

Konrada Witze (kolem 1400ndash1446)

Witz byl jedniacutem z prvniacutech

maliacuteřů kteryacute namaloval

přesnyacute způsob odrazu

světla na vodě

Disperze (rozklad) světla

= důsledek zaacutevislosti rychlosti světla v laacutetkaacutech na frekvenci světla

(λ = c f)

světlo různyacutech barev (λ)

se laacuteme různě

(červeneacute se lomiacute meacuteně než modreacute)

Přiacuteklad disperze (rozkladu) světla

Primaacuterniacute a sekundaacuterniacute duha Severniacute Čechy Foto Pavla Vaacutelovaacute 2010

D u h a

Jeden z mnoha

optickyacutech

jevů (fotometeorů)

v atmosfeacuteře

Rok 312 nl - před bitvou byzantskeacuteho ciacutesaře Konstantina I (272-337) s

konkurenčniacutem ciacutesařem Maxentiem u bran Řiacutema (tzv bitva u Milvijskeacuteho mostu) se

na obloze objevily tři zaacuteřiacuteciacute křiacuteže (halovyacute sloup parheacutelia a parhelickyacute oblouk)

Konstantin bitvu proti přesile vyhraacutel sjednotil řiacuteši a povolil v niacute vyznaacutevat křesťanstviacute

Maleacute halo (22deg) (viz 1) vedlejšiacute slunce (2) a horniacute a dolniacute halovyacute sloup (3)

vznikajiacuteciacute odrazem a lomem světelnyacutech paprsků na krystalciacutech ledu

Lom světla a dějiny

httptmagazineblogsnytimescom20121126halo-effect_r=0

1

3

2 2

3

Ohyb (difrakce) a interference

světla

Foto Pavla Vaacutelovaacute Bukovany 2015 Rozklad světla na CD - světlo žaacuterovky

Rozklad biacuteleacuteho světla na mřiacutežce

Pevnost poznaacuteniacute Olomouc 2015

Foto Pavla Vaacutelovaacute Olomouc 2015

Ohyb (difrakce) a interference

světla

Ohyb (difrakce) a interference

Difrakčniacute obrazec obsahuje světlaacute a tmavaacute miacutesta kteraacute se

střiacutedajiacute - světlaacute miacutesta nazyacutevaacuteme maxima a tmavaacute minima

Interference světla = sklaacutedaacuteniacute světelnyacutech vln

Předpoklad světlo musiacute byacutet koherentniacute

Podmiacutenka koherence

- paprsky musiacute miacutet stejnou frekvenci

- paprsky musiacute byacutet navzaacutejem rovnoběžneacute

- paprsky musiacute miacutet na sobě nezaacutevislyacute draacutehovyacute (faacutezovyacute) rozdiacutel

Vznik koherentniacuteho zaacuteřeniacute

rozděleniacutem světla

- buď odrazem pomociacute zrcadel

- nebo lomem pomociacute hranolů

Foto Pavla Vaacutelovaacute Praha 151 2016

Interference světla

stejnyacute způsob vlněniacute

(faacuteze je vzaacutejemně posunuta o sudeacute

naacutesobky λ2)

vznik interferenčniacuteho maxima

(konstruktivniacute interference)

Interference světla

asynchronniacute vlněniacute

(vzaacutejemně posunutaacute faacuteze

o licheacute naacutesobky λ2)

vznik interferenčniacuteho

minima

(destruktivniacute interference)

rarr zaacuteřeniacute zanikaacute

rarr zeslabeniacute zaacuteřeniacute

Interference dvou vrstev elektromagnetickeacuteho zaacuteřeniacute u Slunce

Čočky ndash zaacutekladniacute součaacutesti

mikroskopu

= průhlednaacute (nejčastěji skleněnaacute) tělesa omezenaacute

vypuklyacutemi nebo vydutyacutemi kulovityacutemi plochami lišiacuteciacute se od sveacuteho okoliacute odlišnyacutem indexem lomu

Zaacutekladniacute typy čoček

spojky (vypukleacute neboli konvexniacute)

rozptylky (vyduteacute konkaacutevniacute)

Pazourek 1975

Optickaacute osa ( o ) prochaacuteziacute středem čočky

Ohnisko ( F ) - bod do ktereacuteho se soustřeďujiacute paprsky probiacutehajiacuteciacute rovnoběžně s optickou osou

- 2 ohniska - předmětoveacute ohnisko ( F )

obrazoveacute ohnisko ( Facute )

- ohniskovaacute vzdaacutelenost ( f )

vzdaacutelenost ohniska od hlavniacute roviny proloženeacute středem čočky

- dvojnaacutesobnaacute ohniskovaacute vzdaacutelenost ( P Pacute )

Obrazovyacute prostor - prostor v němž vznikaacute obraz

Důležiteacute charakteristiky čočky

f

o

hlavniacute rovina

Pazourek 1975

V přiacutepadě velmi tenkeacute čočky

bull Obraz za optickou soustavou

rarr obraz s k u t e č n yacute

Skutečnyacute obraz je možneacute zachytit na stiacuteniacutetko

nebo na fotografickou desku neskutečnyacute nikoliv

bull Obraz před soustavou

rarr obraz n e s k u t e č n yacute (zdaacutenlivyacute virtuaacutelniacute)

Obraz skutečnyacute a neskutečnyacute

A ndash předmět Aacute- obraz předmětu

Upraveno podle Pazourek 1975

Francouz Augustin Jean Fresnel (1788-1827) [frenel]

Fresnelova čočka [frenelova]

- plochyacute tvar (zachovaacuteny pouze čaacutesti ktereacute měniacute směr chodu světelnyacutech paprsků)

- vyacuterazně nižšiacute hmotnost při zachovaacuteniacute podobnyacutech parametrů

Využitiacute infračidla pohybu semafory světlomety (majaacuteky) a reflektory (světla aut

divadelniacutech a filmovyacutech osvětlovaciacutech zařiacutezeniacute) zpětneacute projektory slunečniacute kolektory

na zaacutekladě tohoto principu takeacute vyacuteroba 3D displejů k mobilniacutem telefonům a televiziacutem

httpwwwmffcuniczverejnostzpravicky03_lupahtm

čočka na majaacuteku

Čočky v budoucnosti

Pokus o vyacuterobu tzv dokonaleacute čočky

Prototyp - upraveneacute tzv Maxwellovo rybiacute oko

- paprsky světla se v něm pohybujiacute po kružniciacutech a

na rozdiacutel od běžnyacutech čoček se při zobrazeniacute využijiacute

všechny paprsky

- superčočky využiacutevajiacute geometrie k tomu aby se světlo

soustředilo do oblasti menšiacute než je jeho vlnovaacute deacutelka

(zatiacutem se neviacute jak do čočky vyhovujiacuteciacutem způsobem

doveacutest světlo)

Využitiacute v budoucnu

mimo jineacute v pozorovaacuteniacute živyacutech buněk při velkeacutem zvětšeniacute

pomociacute obyčejneacuteho světla bez jejich narušeniacute

Viacutece viz Plaacutešek J Mikroskopy se superčočkami httpwwwvesmircz | Vesmiacuter 91 531 zaacuteřiacute 2012

Hranoly

- doplňky optickyacutech systeacutemů

- většinou tvar rovnostranneacuteho trojuacutehelniacuteka

- využiacutevajiacute uacuteplneacuteho odrazu

Funkce

- změna chodu paprsků pod různyacutemi uacutehly

- rozdvojeniacute paprsků

Pazourek 1975

Různeacute typy odraznyacutech hranolů

Hranoly

Různeacute typy hranolů

httplaserykvalitneczimagestext_25_zakladyoptiky1odrazne_hranolyjpg

Viz dichroickeacute zrcadlo u fluorescenčniacuteho mikroskopu

Chod paprsků v binokulaacuterniacutem tubusu

Pazourek 1975

Nikol = hranol z islandskeacuteho vaacutepence

rarr polarizace světla

Dvojlomnyacute vaacutepencovyacute

krystal

ř ndash paprsek řaacutednyacute (zanikaacute na začerněneacute ploše)

mř ndash paprsek mimořaacutednyacute (lineaacuterně polarizovanyacute

využit k osvětleniacute)

začerněnaacute plocha

Nikol

Pazourek 1975

vzduchovaacute štěrbina

- rychlost světla je

v různyacutech směrech různaacute

- uacutehel paprsku řaacutedneacuteho a

mimořaacutedneacuteho je odlišnyacute

(u Vikingů - slunečniacute kaacutemen

soacutelarsteinn)

Chod paprsků ve světlovodneacutem vlaacuteknu

Princip uacuteplnyacute odraz paprsku

- uvnitř skleněneacuteho vlaacutekna je opticky hustšiacute prostřediacute

- nutnost dostatečně silneacuteho světelneacuteho zdroje

Světlovodnaacute vlaacutekna

Pazourek 1975

Širokeacute využitiacute v praxi optickeacute kabely ndash přenos signaacutelů ve sdělovaciacute technice

světlovody umožňujiacuteciacute veacutest denniacute světlo vedeniacute světla u stereolup endoskopů hellip

Page 20: Světelná a elektronová mikroskopie...(AMF – Atomic Force Miroscope) - skenování povrchu materiálu pomocí hrotu zavěšeném na pružném výkyvném raménku, který je přitahován

Rok vydaacuteniacute 1665 Micrographia or some Physiological Descriptions of Minute Bodies

made by Magnifying Glasses with Observations and Inquiries thereupon

London 1665

17 stol Leeuwenhoek Hook

Angličan Henry Power (1626ndash1668) ndash jako

prvniacute (1663) publikoval pozorovaacuteniacute mikroskopem

Marcello Malphighi (1628ndash1694)

italskyacute leacutekař

zakladatel mikroskopickeacute anatomie

- objev krevniacutech kapilaacuter savců (1661)

- malphigickeacute trubice hmyzu

18 stol

ndash mikroskopy přežily jako hračka pro zaacutebavu anglickyacutech gentlemanů zajiacutemajiacuteciacutech se o tajemstviacute přiacuterody

19 stol

zač 19 stol ndash Dollond Lister Amici - vynaacutelez

achromatickeacuteho objektivu

ndash do teacute doby použiacutevaacuteniacute jednočočkoveacuteho mikroskopu (dvoučočkovyacute

mikroskop podaacuteval značně zkreslenyacute obraz)

Vyacuteznačniacute vědci 19 stol použiacutevajiacuteciacute k svyacutem pozorovaacuteniacutem mikroskop

Robert Brown (1773-1858) - objev jaacutedra (1831)

Luis Pasteur (1822-1895) (francouzskyacute mikrobiolog)

- objev kvasinek

Robert Koch (1843-1910) (německyacute leacutekař a mikrobiolog)

- objev původců tuberkuloacutezy a cholery

Jan Evangelista Purkyně (1787-1869) (českyacute fyziolog)

- 1825 popsal jaacutedro u živočišneacute buňky (lupa)

od r 1832 použiacutevaacute kvalitniacute mikroskop

Microscope

stand VII

19 stol ndash dalšiacute vyacutevoj mikroskopů

Carl Zeiss ndash průmyslovaacute vyacuteroba mikroskopů (firma Zeiss)

Ernst Karl Abbe ndash teoretickaacute studia optickyacutech principů

Otto Schott ndash vyacutezkum optickeacuteho skla

August Koumlhler ndash kvalitniacute osvětleniacute

Otto Schott (1851-1935)

Ernst Abbe (1840-1905)

Carl Zeiss (1816-1888)

August Koumlhler (1866-1948)

Mikroskopy 19 stoletiacute

19 stol

20 stol

Konfokaacutelniacute mikroskop

A1R (Nikon)

BX60 (Olympus)

Laserovyacute fluorescenčniacute mikroskop bdquoLight Sheetldquo Centrum regionu Hanaacute pro biotechnologickyacute a zemědělskyacute vyacutezkum Odděleniacute buněčneacute biologie

21 stol

21 stol

Digitaacutelniacute holografickyacute mikroskop firmy Lynceacutee Tec

Důležitaacute data při rozvoji moderniacute světelneacute mikroskopie

1847 - Zahaacutejeniacute vyacuteroby mikroskopů firmou Carl Zeiss v Jeně

1903 - Ultramikroskop (Richard Zsigmondy NC 1925)

1911 - Fluorescenčniacute mikroskop (Carl Reichert)

1935 - Faacutezovyacute kontrast (Fritz Zernike NC 1953)

1955 - Diferenciaacutelniacute interferenčniacute kontrast (DIC ndash Nomarski)

1968 - Rastrovaciacute tandemovyacute konfokaacutelniacute mikroskop (TSCM)

1978 - Laserovyacute konfokaacutelniacute rastrovaciacute mikroskop

1994 - Princip STED mikroskopie (S W Hell NC 2014)

(Stimulated Emission Depletion ndash redukce fluorescence stimulovanou emisiacute)

po roce 2000 - rozvoj tzv superrozlišovaciacute mikroskopie

2006 - Super-resolučniacute fluorescenčniacute mikroskop (Eric Betzig

Stefan W Hell a William E Moerner NC za chemii 2014)

NC = Nobelova cena

30 leacuteta 20 stoletiacute

ndash hranice vyacutevoje optickeacuteho (paprskoveacuteho) mikroskopu

(hranice rozlišeniacute světelneacuteho mikroskopu je diacuteky velikosti deacutelky světla 02 microm)

- dalšiacute zvětšovaacuteniacute pozorovanyacutech objektů na jineacutem principu

- miacutesto světelneacuteho paprsku elektronovyacute paprsek

(= tok rychlyacutech elektronů)

- miacutesto skleněneacute čočky magnetickaacute čočka

1931 - Ernst Ruska Max Knoll

prvniacute elektronovyacute mikroskop

tzv prozařovaciacute transmisniacute EM

(TEM ndash Transmission Electron Microscope)

- originaacutelniacute zvětšeniacute 1 000 - 250 000x

Ernst Ruska (1906-1988)

1942 - rastrovaciacute EM

(SEM ndash Scanning Electron Microscope) - postupneacute bombardovaacuteniacute vzorku elektrony

- zvětšeniacute až 30 000x

EM UacuteMG AV ČR Praha-Krč

FEI ndash TECHNAIG2TEM + kryozařiacutezeniacute

200 kV (λ el = 00025 nm)

RS 01 nm

prvkovaacute analyacuteza vzorků

zařiacutezeniacute pro

prvkovou analyacutezu

vzorků

Foto Pavla Vaacutelovaacute 2010

Brněnštiacute vědci z Uacutestavu přiacutestrojoveacute techniky AV ČR (UacutePT) a Mendelovy

univerzity představili novou metodu pozorovaacuteniacute rostlinnyacutech vzorků v jejich

přirozeneacutem stavu (za využitiacute kryoprotektiv)

Viacutece na httpe-svete15cztechnikacesti-vedci-posunuli-hranice-elektronove-mikroskopie-1174818

Enviromentaacutelniacute rastrovaciacute elektronovyacute mikroskop Aquasem II

TEM TITAN FEI Company Mgr Klaacutera Čeacutepe PhD

Vysokorozlišovaciacute transmisniacute elektronovyacute mikroskop

schopnyacute nahleacutednout do struktury materiaacutelů až na uacuterovni atomů

a současně přesně zmapovat jejich chemickeacute složeniacute

Regionaacutelniacute centrum pokročilyacutech

materiaacutelů (RCPTM)

Odd uhliacutekoveacute nanostruktury

PřF UP OL

Vysokorozlišovaciacute transmisniacute

elektronovyacute mikroskop TITAN (FEI)

Foto Pavla Vaacutelovaacute 2015

Transmisniacute elektronovyacute

mikroskop Jeol

Regionaacutelniacute centrum pokročilyacutech materiaacutelů (RCPTM)

Odd uhliacutekoveacute nanostruktury PřF UP OL

Neoptickeacute mikroskopy

1981

Řaacutedkovaciacute tunelovyacute mikroskop (STM ndash Scanning Tunnelling Microscope)

- mapovaacuteniacute povrchu pomociacute pohybu vodiveacuteho hrotu nad vodivyacutem povrchem sledovaneacuteho materiaacutelu

1986

Mikroskop atomaacuterniacutech sil (AMF ndash Atomic Force Miroscope)

- skenovaacuteniacute povrchu materiaacutelu pomociacute hrotu zavěšeneacutem na pružneacutem vyacutekyvneacutem rameacutenku kteryacute je přitahovaacuten elektrostatickyacutemi a Van der Walsovyacutemi silami

Rozlišeniacute v řaacutedech pikometrů (10-12 m) ndash rozeznaacuteniacute struktur

jednotlivyacutech atomů

O p t i c k eacute p r i n c i p y

světelneacute mikroskopie

Reichl J Všetička M Encyklopedie fyziky [online] copy2006-2014

[vid 2014] Dostupneacute z httpfyzikajreichlcommainarticleview431-optika Lepil O (2013) Fyzika pro gymnaacutezia Optika Prometheus Praha 4 přepracovaneacute vydaacuteniacute

Murphy DB Davidson MW (2013) Fundamentals of Light

Microscopy and Electronic Imaging Willey-Blackwell Published

2013 by John Wiley amp Sons Inc Hoboken New Jersey

S v ě t l o

= čaacutest rozsaacutehleacute oblasti elektromagnetickeacuteho zaacuteřeniacute

kterou vniacutemaacuteme zrakem

Rozhlasoveacute a raacutedioveacute vlny 250 km - 1 mm

Infračerveneacute zaacuteřeniacute 05 mm - 08 μm

Světlo (viditelneacute zaacuteřeniacute) 08 μm - 04 μm

Ultrafialoveacute zaacuteřeniacute 04 microm - 01 microm

Roumlntgenovo zaacuteřeniacute (X-paprsky) 15 nm - 0005 nm

γ-zaacuteřeniacute pod 00001 nm

Přibližneacute hodnoty ndash individuaacutelniacute vlastnosti zraku různyacutech lidiacute

S v ě t l o

= čaacutest rozsaacutehleacute oblasti elektromagnetickeacuteho zaacuteřeniacute

kterou vniacutemaacuteme zrakem

rarr se zkracujiacuteciacute se vlnovou deacutelkou se zvyšuje frekvence (energie)

Viditelneacute

Vlnoveacute deacutelky světla a relativniacute citlivost oka

Murphy DB Davidson MW (2013) Fundamentals of Light Microscopy and Electronic

Imaging Willey-Blackwell Published 2013 by John Wiley amp Sons Inc Hoboken New Jersey

= zrakovyacute pigment citlivyacute na

světlo nachaacutezejiacuteciacute se v tyčinkaacutech Jodopsin = zrakovyacute pigment citlivyacute na

barvu nachaacutezejiacuteciacute se v čiacutepciacutech

S v ě t l o

Duaacutelniacute charakter světla ndash vlněniacute i proud čaacutestic (fotonů)

Vlnovyacute model světla

vlna elektrickaacute a magnetickaacute (elektromagnetickaacute vlna je tvořena oscilujiacuteciacutem elektrickyacutem a

magnetickyacutem polem na sebe kolmyacutech a nesouciacutech vpřed energii)

Pro uacutečinky světla v mikroskopu je důležitaacute vlna elektrickaacute

= přiacutečneacute vlněniacute

postupneacute kmitaacuteniacute

jednotlivyacutech vedle sebe

ležiacuteciacutech bodů

Scheacutema světla jako elektromagnetickeacute vlny

Obr httpwwwprosoundwebcomarticleprintinvaders_from_

outer_space_electromagnetic_radiation_interference

λ - vlnovaacute deacutelka

(v oblasti svět zaacuteřeniacute

v rozmeziacute od 380 do 780 nm)

určuje barvu světla

a - amplituda

nejvyššiacute hodnota

určuje intenzitu světla

Z hlediska vlnoveacute deacutelky rozlišujeme

polychromatickeacute x monochromatickeacute světlo (selekce pomociacute barevnyacutech filtrů rarr jednotnaacute vlnovaacute deacutelka světlo zeleneacute červeneacute hellip)

Elektrickaacute vlna - sinusoida

Charakterizovaacutena dvěma veličinami

Pazourek 1975

Vlastnosti světla

Rovnoměrneacute šiacuteřeniacute světla ze zaacuteřiacuteciacuteho bodu na všechny strany rarr vlnovaacute plocha tvaru koule

Paprsek ndash směr kteryacutem se vlněniacute šiacuteřiacute a kteryacute je kolmyacute

na vlnoplochu

Pazourek 1975

- paprsek nepolarizovanyacute (A C) ndash kmitaacute v každeacutem

miacutestě a v průběhu času ve všech možnyacutech směrech

kolmyacutech na směr šiacuteřeniacute paprsku

- paprsek polarizovanyacute (B D1 D2) - kmitaacute v jedneacute

rovině přičemž rovina kmitů (vlněniacute) jednoho z nich je

kolmaacute k rovině kmitů druheacuteho

Pazourek 1975

Polarizovaneacute světlo viz

httpswwwyoutubecomwatchv=gP751qpm4n4

Murphy DB Davidson MW (2013) Fundamentals of Light Microscopy and

Electronic Imaging Jonh Wkiley amp Sons Inc Hoboken New Jersey

Osm různyacutech vlnovyacutech forem světla (znaacutezorňujiacuteciacutech různou kvalitu světla)

Odraz a lom světelnyacutech paprsků

v prostřediacutech různeacute hustoty

Důležitaacute charakteristika prostřediacute

index lomu ( n ) (= optickaacute hustota prostřediacute)

c = rychlost světla ve vakuu (stejnaacute pro všechny λ )

v = rychlost světla určiteacute vlnoveacute deacutelky ve zkoumaneacute laacutetce

c

n =

v

zde absolutniacute index lomu

(bezrozměrnaacute fyzikaacutelniacute veličina jeho jednotka je 1)

Rychlost světla (c) určiteacute vlnoveacute

deacutelky v různyacutech prostřediacutech

c ve vakuu

= 300 000 kms

Index lomu (n) některyacutech laacutetek

vzduch (vakuum) helliphellip 100 (vzduch 10002718)

voda helliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 133

plexisklo helliphelliphelliphelliphelliphellip 140 ndash 152

křemenneacute sklo helliphellip hellip 145 (čočka z křemene z Ninive ndash 7 stol přnl)

běžneacute sklo helliphelliphelliphelliphellip 151

cedrovyacute olej helliphelliphelliphelliphellip 151

imerzniacute olej Olympus hellip 1516 pro fluorescenci 1404

kanadskyacute balzaacutem helliphellip 150

krystal NaCl helliphelliphelliphellip 154

korunoveacute sklo helliphelliphelliphellip 145 ndash 156 (sodno-draselneacute bezolovnateacute)

flintoveacute sklo helliphelliphelliphellip 162 ndash 180 (olovnateacute)

diamant helliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 242

Index lomu je vždy většiacute než 100

očniacute čočka hellip 1406

sklivec helliphelliphellip 1336

Odraz světla rovnyacutem zrcadlem (reflexe)

Zaacutekony

1 Paprsek dopadajiacuteciacute kolmice dopadu a paprsek odraženyacute

ležiacute v jedneacute rovině

2 Uacutehel odrazu se rovnaacute uacutehlu dopadu

Odraz a lom paprsku

k

Důležiteacute pro mikroskopii (astronomii)

- neniacute zaacutevislost na vlnoveacute deacutelce světla (λ)

- na rozdiacutel od lomu paprsků se světelneacute

paprsky se odraacutežejiacute stejně

Pazourek 1975

Zaacutekony

1 Paprsek dopadajiacuteciacute kolmice lomu a paprsek lomenyacute ležiacute v teacuteže rovině

Lom světla (refrakce)

2 Při přechodu z prostřediacute opticky řidšiacuteho do prostřediacute opticky hustšiacuteho se paprsek laacuteme ke kolmici (A)

a z prostřediacute opticky hustšiacuteho

do prostřediacute opticky řidšiacuteho

se laacuteme od kolmice (B)

(C a D) ndash uacuteplnyacute odraz při tzv

mezniacutem uacutehlu dopadu paprsku

v přiacutepadě lomu od kolmice (B)

(viz Nikol odrazneacute hranoly světlovodneacute vlaacutekno nebo fluorescenčniacute metoda TIRFM ndash totaacutelniacute odraz exitačniacuteho zaacuteřeniacute)

Pazourek 1975

Svatyacute Kryštof od

švyacutecarskeacuteho maliacuteře

Konrada Witze (kolem 1400ndash1446)

Witz byl jedniacutem z prvniacutech

maliacuteřů kteryacute namaloval

přesnyacute způsob odrazu

světla na vodě

Disperze (rozklad) světla

= důsledek zaacutevislosti rychlosti světla v laacutetkaacutech na frekvenci světla

(λ = c f)

světlo různyacutech barev (λ)

se laacuteme různě

(červeneacute se lomiacute meacuteně než modreacute)

Přiacuteklad disperze (rozkladu) světla

Primaacuterniacute a sekundaacuterniacute duha Severniacute Čechy Foto Pavla Vaacutelovaacute 2010

D u h a

Jeden z mnoha

optickyacutech

jevů (fotometeorů)

v atmosfeacuteře

Rok 312 nl - před bitvou byzantskeacuteho ciacutesaře Konstantina I (272-337) s

konkurenčniacutem ciacutesařem Maxentiem u bran Řiacutema (tzv bitva u Milvijskeacuteho mostu) se

na obloze objevily tři zaacuteřiacuteciacute křiacuteže (halovyacute sloup parheacutelia a parhelickyacute oblouk)

Konstantin bitvu proti přesile vyhraacutel sjednotil řiacuteši a povolil v niacute vyznaacutevat křesťanstviacute

Maleacute halo (22deg) (viz 1) vedlejšiacute slunce (2) a horniacute a dolniacute halovyacute sloup (3)

vznikajiacuteciacute odrazem a lomem světelnyacutech paprsků na krystalciacutech ledu

Lom světla a dějiny

httptmagazineblogsnytimescom20121126halo-effect_r=0

1

3

2 2

3

Ohyb (difrakce) a interference

světla

Foto Pavla Vaacutelovaacute Bukovany 2015 Rozklad světla na CD - světlo žaacuterovky

Rozklad biacuteleacuteho světla na mřiacutežce

Pevnost poznaacuteniacute Olomouc 2015

Foto Pavla Vaacutelovaacute Olomouc 2015

Ohyb (difrakce) a interference

světla

Ohyb (difrakce) a interference

Difrakčniacute obrazec obsahuje světlaacute a tmavaacute miacutesta kteraacute se

střiacutedajiacute - světlaacute miacutesta nazyacutevaacuteme maxima a tmavaacute minima

Interference světla = sklaacutedaacuteniacute světelnyacutech vln

Předpoklad světlo musiacute byacutet koherentniacute

Podmiacutenka koherence

- paprsky musiacute miacutet stejnou frekvenci

- paprsky musiacute byacutet navzaacutejem rovnoběžneacute

- paprsky musiacute miacutet na sobě nezaacutevislyacute draacutehovyacute (faacutezovyacute) rozdiacutel

Vznik koherentniacuteho zaacuteřeniacute

rozděleniacutem světla

- buď odrazem pomociacute zrcadel

- nebo lomem pomociacute hranolů

Foto Pavla Vaacutelovaacute Praha 151 2016

Interference světla

stejnyacute způsob vlněniacute

(faacuteze je vzaacutejemně posunuta o sudeacute

naacutesobky λ2)

vznik interferenčniacuteho maxima

(konstruktivniacute interference)

Interference světla

asynchronniacute vlněniacute

(vzaacutejemně posunutaacute faacuteze

o licheacute naacutesobky λ2)

vznik interferenčniacuteho

minima

(destruktivniacute interference)

rarr zaacuteřeniacute zanikaacute

rarr zeslabeniacute zaacuteřeniacute

Interference dvou vrstev elektromagnetickeacuteho zaacuteřeniacute u Slunce

Čočky ndash zaacutekladniacute součaacutesti

mikroskopu

= průhlednaacute (nejčastěji skleněnaacute) tělesa omezenaacute

vypuklyacutemi nebo vydutyacutemi kulovityacutemi plochami lišiacuteciacute se od sveacuteho okoliacute odlišnyacutem indexem lomu

Zaacutekladniacute typy čoček

spojky (vypukleacute neboli konvexniacute)

rozptylky (vyduteacute konkaacutevniacute)

Pazourek 1975

Optickaacute osa ( o ) prochaacuteziacute středem čočky

Ohnisko ( F ) - bod do ktereacuteho se soustřeďujiacute paprsky probiacutehajiacuteciacute rovnoběžně s optickou osou

- 2 ohniska - předmětoveacute ohnisko ( F )

obrazoveacute ohnisko ( Facute )

- ohniskovaacute vzdaacutelenost ( f )

vzdaacutelenost ohniska od hlavniacute roviny proloženeacute středem čočky

- dvojnaacutesobnaacute ohniskovaacute vzdaacutelenost ( P Pacute )

Obrazovyacute prostor - prostor v němž vznikaacute obraz

Důležiteacute charakteristiky čočky

f

o

hlavniacute rovina

Pazourek 1975

V přiacutepadě velmi tenkeacute čočky

bull Obraz za optickou soustavou

rarr obraz s k u t e č n yacute

Skutečnyacute obraz je možneacute zachytit na stiacuteniacutetko

nebo na fotografickou desku neskutečnyacute nikoliv

bull Obraz před soustavou

rarr obraz n e s k u t e č n yacute (zdaacutenlivyacute virtuaacutelniacute)

Obraz skutečnyacute a neskutečnyacute

A ndash předmět Aacute- obraz předmětu

Upraveno podle Pazourek 1975

Francouz Augustin Jean Fresnel (1788-1827) [frenel]

Fresnelova čočka [frenelova]

- plochyacute tvar (zachovaacuteny pouze čaacutesti ktereacute měniacute směr chodu světelnyacutech paprsků)

- vyacuterazně nižšiacute hmotnost při zachovaacuteniacute podobnyacutech parametrů

Využitiacute infračidla pohybu semafory světlomety (majaacuteky) a reflektory (světla aut

divadelniacutech a filmovyacutech osvětlovaciacutech zařiacutezeniacute) zpětneacute projektory slunečniacute kolektory

na zaacutekladě tohoto principu takeacute vyacuteroba 3D displejů k mobilniacutem telefonům a televiziacutem

httpwwwmffcuniczverejnostzpravicky03_lupahtm

čočka na majaacuteku

Čočky v budoucnosti

Pokus o vyacuterobu tzv dokonaleacute čočky

Prototyp - upraveneacute tzv Maxwellovo rybiacute oko

- paprsky světla se v něm pohybujiacute po kružniciacutech a

na rozdiacutel od běžnyacutech čoček se při zobrazeniacute využijiacute

všechny paprsky

- superčočky využiacutevajiacute geometrie k tomu aby se světlo

soustředilo do oblasti menšiacute než je jeho vlnovaacute deacutelka

(zatiacutem se neviacute jak do čočky vyhovujiacuteciacutem způsobem

doveacutest světlo)

Využitiacute v budoucnu

mimo jineacute v pozorovaacuteniacute živyacutech buněk při velkeacutem zvětšeniacute

pomociacute obyčejneacuteho světla bez jejich narušeniacute

Viacutece viz Plaacutešek J Mikroskopy se superčočkami httpwwwvesmircz | Vesmiacuter 91 531 zaacuteřiacute 2012

Hranoly

- doplňky optickyacutech systeacutemů

- většinou tvar rovnostranneacuteho trojuacutehelniacuteka

- využiacutevajiacute uacuteplneacuteho odrazu

Funkce

- změna chodu paprsků pod různyacutemi uacutehly

- rozdvojeniacute paprsků

Pazourek 1975

Různeacute typy odraznyacutech hranolů

Hranoly

Různeacute typy hranolů

httplaserykvalitneczimagestext_25_zakladyoptiky1odrazne_hranolyjpg

Viz dichroickeacute zrcadlo u fluorescenčniacuteho mikroskopu

Chod paprsků v binokulaacuterniacutem tubusu

Pazourek 1975

Nikol = hranol z islandskeacuteho vaacutepence

rarr polarizace světla

Dvojlomnyacute vaacutepencovyacute

krystal

ř ndash paprsek řaacutednyacute (zanikaacute na začerněneacute ploše)

mř ndash paprsek mimořaacutednyacute (lineaacuterně polarizovanyacute

využit k osvětleniacute)

začerněnaacute plocha

Nikol

Pazourek 1975

vzduchovaacute štěrbina

- rychlost světla je

v různyacutech směrech různaacute

- uacutehel paprsku řaacutedneacuteho a

mimořaacutedneacuteho je odlišnyacute

(u Vikingů - slunečniacute kaacutemen

soacutelarsteinn)

Chod paprsků ve světlovodneacutem vlaacuteknu

Princip uacuteplnyacute odraz paprsku

- uvnitř skleněneacuteho vlaacutekna je opticky hustšiacute prostřediacute

- nutnost dostatečně silneacuteho světelneacuteho zdroje

Světlovodnaacute vlaacutekna

Pazourek 1975

Širokeacute využitiacute v praxi optickeacute kabely ndash přenos signaacutelů ve sdělovaciacute technice

světlovody umožňujiacuteciacute veacutest denniacute světlo vedeniacute světla u stereolup endoskopů hellip

Page 21: Světelná a elektronová mikroskopie...(AMF – Atomic Force Miroscope) - skenování povrchu materiálu pomocí hrotu zavěšeném na pružném výkyvném raménku, který je přitahován

17 stol Leeuwenhoek Hook

Angličan Henry Power (1626ndash1668) ndash jako

prvniacute (1663) publikoval pozorovaacuteniacute mikroskopem

Marcello Malphighi (1628ndash1694)

italskyacute leacutekař

zakladatel mikroskopickeacute anatomie

- objev krevniacutech kapilaacuter savců (1661)

- malphigickeacute trubice hmyzu

18 stol

ndash mikroskopy přežily jako hračka pro zaacutebavu anglickyacutech gentlemanů zajiacutemajiacuteciacutech se o tajemstviacute přiacuterody

19 stol

zač 19 stol ndash Dollond Lister Amici - vynaacutelez

achromatickeacuteho objektivu

ndash do teacute doby použiacutevaacuteniacute jednočočkoveacuteho mikroskopu (dvoučočkovyacute

mikroskop podaacuteval značně zkreslenyacute obraz)

Vyacuteznačniacute vědci 19 stol použiacutevajiacuteciacute k svyacutem pozorovaacuteniacutem mikroskop

Robert Brown (1773-1858) - objev jaacutedra (1831)

Luis Pasteur (1822-1895) (francouzskyacute mikrobiolog)

- objev kvasinek

Robert Koch (1843-1910) (německyacute leacutekař a mikrobiolog)

- objev původců tuberkuloacutezy a cholery

Jan Evangelista Purkyně (1787-1869) (českyacute fyziolog)

- 1825 popsal jaacutedro u živočišneacute buňky (lupa)

od r 1832 použiacutevaacute kvalitniacute mikroskop

Microscope

stand VII

19 stol ndash dalšiacute vyacutevoj mikroskopů

Carl Zeiss ndash průmyslovaacute vyacuteroba mikroskopů (firma Zeiss)

Ernst Karl Abbe ndash teoretickaacute studia optickyacutech principů

Otto Schott ndash vyacutezkum optickeacuteho skla

August Koumlhler ndash kvalitniacute osvětleniacute

Otto Schott (1851-1935)

Ernst Abbe (1840-1905)

Carl Zeiss (1816-1888)

August Koumlhler (1866-1948)

Mikroskopy 19 stoletiacute

19 stol

20 stol

Konfokaacutelniacute mikroskop

A1R (Nikon)

BX60 (Olympus)

Laserovyacute fluorescenčniacute mikroskop bdquoLight Sheetldquo Centrum regionu Hanaacute pro biotechnologickyacute a zemědělskyacute vyacutezkum Odděleniacute buněčneacute biologie

21 stol

21 stol

Digitaacutelniacute holografickyacute mikroskop firmy Lynceacutee Tec

Důležitaacute data při rozvoji moderniacute světelneacute mikroskopie

1847 - Zahaacutejeniacute vyacuteroby mikroskopů firmou Carl Zeiss v Jeně

1903 - Ultramikroskop (Richard Zsigmondy NC 1925)

1911 - Fluorescenčniacute mikroskop (Carl Reichert)

1935 - Faacutezovyacute kontrast (Fritz Zernike NC 1953)

1955 - Diferenciaacutelniacute interferenčniacute kontrast (DIC ndash Nomarski)

1968 - Rastrovaciacute tandemovyacute konfokaacutelniacute mikroskop (TSCM)

1978 - Laserovyacute konfokaacutelniacute rastrovaciacute mikroskop

1994 - Princip STED mikroskopie (S W Hell NC 2014)

(Stimulated Emission Depletion ndash redukce fluorescence stimulovanou emisiacute)

po roce 2000 - rozvoj tzv superrozlišovaciacute mikroskopie

2006 - Super-resolučniacute fluorescenčniacute mikroskop (Eric Betzig

Stefan W Hell a William E Moerner NC za chemii 2014)

NC = Nobelova cena

30 leacuteta 20 stoletiacute

ndash hranice vyacutevoje optickeacuteho (paprskoveacuteho) mikroskopu

(hranice rozlišeniacute světelneacuteho mikroskopu je diacuteky velikosti deacutelky světla 02 microm)

- dalšiacute zvětšovaacuteniacute pozorovanyacutech objektů na jineacutem principu

- miacutesto světelneacuteho paprsku elektronovyacute paprsek

(= tok rychlyacutech elektronů)

- miacutesto skleněneacute čočky magnetickaacute čočka

1931 - Ernst Ruska Max Knoll

prvniacute elektronovyacute mikroskop

tzv prozařovaciacute transmisniacute EM

(TEM ndash Transmission Electron Microscope)

- originaacutelniacute zvětšeniacute 1 000 - 250 000x

Ernst Ruska (1906-1988)

1942 - rastrovaciacute EM

(SEM ndash Scanning Electron Microscope) - postupneacute bombardovaacuteniacute vzorku elektrony

- zvětšeniacute až 30 000x

EM UacuteMG AV ČR Praha-Krč

FEI ndash TECHNAIG2TEM + kryozařiacutezeniacute

200 kV (λ el = 00025 nm)

RS 01 nm

prvkovaacute analyacuteza vzorků

zařiacutezeniacute pro

prvkovou analyacutezu

vzorků

Foto Pavla Vaacutelovaacute 2010

Brněnštiacute vědci z Uacutestavu přiacutestrojoveacute techniky AV ČR (UacutePT) a Mendelovy

univerzity představili novou metodu pozorovaacuteniacute rostlinnyacutech vzorků v jejich

přirozeneacutem stavu (za využitiacute kryoprotektiv)

Viacutece na httpe-svete15cztechnikacesti-vedci-posunuli-hranice-elektronove-mikroskopie-1174818

Enviromentaacutelniacute rastrovaciacute elektronovyacute mikroskop Aquasem II

TEM TITAN FEI Company Mgr Klaacutera Čeacutepe PhD

Vysokorozlišovaciacute transmisniacute elektronovyacute mikroskop

schopnyacute nahleacutednout do struktury materiaacutelů až na uacuterovni atomů

a současně přesně zmapovat jejich chemickeacute složeniacute

Regionaacutelniacute centrum pokročilyacutech

materiaacutelů (RCPTM)

Odd uhliacutekoveacute nanostruktury

PřF UP OL

Vysokorozlišovaciacute transmisniacute

elektronovyacute mikroskop TITAN (FEI)

Foto Pavla Vaacutelovaacute 2015

Transmisniacute elektronovyacute

mikroskop Jeol

Regionaacutelniacute centrum pokročilyacutech materiaacutelů (RCPTM)

Odd uhliacutekoveacute nanostruktury PřF UP OL

Neoptickeacute mikroskopy

1981

Řaacutedkovaciacute tunelovyacute mikroskop (STM ndash Scanning Tunnelling Microscope)

- mapovaacuteniacute povrchu pomociacute pohybu vodiveacuteho hrotu nad vodivyacutem povrchem sledovaneacuteho materiaacutelu

1986

Mikroskop atomaacuterniacutech sil (AMF ndash Atomic Force Miroscope)

- skenovaacuteniacute povrchu materiaacutelu pomociacute hrotu zavěšeneacutem na pružneacutem vyacutekyvneacutem rameacutenku kteryacute je přitahovaacuten elektrostatickyacutemi a Van der Walsovyacutemi silami

Rozlišeniacute v řaacutedech pikometrů (10-12 m) ndash rozeznaacuteniacute struktur

jednotlivyacutech atomů

O p t i c k eacute p r i n c i p y

světelneacute mikroskopie

Reichl J Všetička M Encyklopedie fyziky [online] copy2006-2014

[vid 2014] Dostupneacute z httpfyzikajreichlcommainarticleview431-optika Lepil O (2013) Fyzika pro gymnaacutezia Optika Prometheus Praha 4 přepracovaneacute vydaacuteniacute

Murphy DB Davidson MW (2013) Fundamentals of Light

Microscopy and Electronic Imaging Willey-Blackwell Published

2013 by John Wiley amp Sons Inc Hoboken New Jersey

S v ě t l o

= čaacutest rozsaacutehleacute oblasti elektromagnetickeacuteho zaacuteřeniacute

kterou vniacutemaacuteme zrakem

Rozhlasoveacute a raacutedioveacute vlny 250 km - 1 mm

Infračerveneacute zaacuteřeniacute 05 mm - 08 μm

Světlo (viditelneacute zaacuteřeniacute) 08 μm - 04 μm

Ultrafialoveacute zaacuteřeniacute 04 microm - 01 microm

Roumlntgenovo zaacuteřeniacute (X-paprsky) 15 nm - 0005 nm

γ-zaacuteřeniacute pod 00001 nm

Přibližneacute hodnoty ndash individuaacutelniacute vlastnosti zraku různyacutech lidiacute

S v ě t l o

= čaacutest rozsaacutehleacute oblasti elektromagnetickeacuteho zaacuteřeniacute

kterou vniacutemaacuteme zrakem

rarr se zkracujiacuteciacute se vlnovou deacutelkou se zvyšuje frekvence (energie)

Viditelneacute

Vlnoveacute deacutelky světla a relativniacute citlivost oka

Murphy DB Davidson MW (2013) Fundamentals of Light Microscopy and Electronic

Imaging Willey-Blackwell Published 2013 by John Wiley amp Sons Inc Hoboken New Jersey

= zrakovyacute pigment citlivyacute na

světlo nachaacutezejiacuteciacute se v tyčinkaacutech Jodopsin = zrakovyacute pigment citlivyacute na

barvu nachaacutezejiacuteciacute se v čiacutepciacutech

S v ě t l o

Duaacutelniacute charakter světla ndash vlněniacute i proud čaacutestic (fotonů)

Vlnovyacute model světla

vlna elektrickaacute a magnetickaacute (elektromagnetickaacute vlna je tvořena oscilujiacuteciacutem elektrickyacutem a

magnetickyacutem polem na sebe kolmyacutech a nesouciacutech vpřed energii)

Pro uacutečinky světla v mikroskopu je důležitaacute vlna elektrickaacute

= přiacutečneacute vlněniacute

postupneacute kmitaacuteniacute

jednotlivyacutech vedle sebe

ležiacuteciacutech bodů

Scheacutema světla jako elektromagnetickeacute vlny

Obr httpwwwprosoundwebcomarticleprintinvaders_from_

outer_space_electromagnetic_radiation_interference

λ - vlnovaacute deacutelka

(v oblasti svět zaacuteřeniacute

v rozmeziacute od 380 do 780 nm)

určuje barvu světla

a - amplituda

nejvyššiacute hodnota

určuje intenzitu světla

Z hlediska vlnoveacute deacutelky rozlišujeme

polychromatickeacute x monochromatickeacute světlo (selekce pomociacute barevnyacutech filtrů rarr jednotnaacute vlnovaacute deacutelka světlo zeleneacute červeneacute hellip)

Elektrickaacute vlna - sinusoida

Charakterizovaacutena dvěma veličinami

Pazourek 1975

Vlastnosti světla

Rovnoměrneacute šiacuteřeniacute světla ze zaacuteřiacuteciacuteho bodu na všechny strany rarr vlnovaacute plocha tvaru koule

Paprsek ndash směr kteryacutem se vlněniacute šiacuteřiacute a kteryacute je kolmyacute

na vlnoplochu

Pazourek 1975

- paprsek nepolarizovanyacute (A C) ndash kmitaacute v každeacutem

miacutestě a v průběhu času ve všech možnyacutech směrech

kolmyacutech na směr šiacuteřeniacute paprsku

- paprsek polarizovanyacute (B D1 D2) - kmitaacute v jedneacute

rovině přičemž rovina kmitů (vlněniacute) jednoho z nich je

kolmaacute k rovině kmitů druheacuteho

Pazourek 1975

Polarizovaneacute světlo viz

httpswwwyoutubecomwatchv=gP751qpm4n4

Murphy DB Davidson MW (2013) Fundamentals of Light Microscopy and

Electronic Imaging Jonh Wkiley amp Sons Inc Hoboken New Jersey

Osm různyacutech vlnovyacutech forem světla (znaacutezorňujiacuteciacutech různou kvalitu světla)

Odraz a lom světelnyacutech paprsků

v prostřediacutech různeacute hustoty

Důležitaacute charakteristika prostřediacute

index lomu ( n ) (= optickaacute hustota prostřediacute)

c = rychlost světla ve vakuu (stejnaacute pro všechny λ )

v = rychlost světla určiteacute vlnoveacute deacutelky ve zkoumaneacute laacutetce

c

n =

v

zde absolutniacute index lomu

(bezrozměrnaacute fyzikaacutelniacute veličina jeho jednotka je 1)

Rychlost světla (c) určiteacute vlnoveacute

deacutelky v různyacutech prostřediacutech

c ve vakuu

= 300 000 kms

Index lomu (n) některyacutech laacutetek

vzduch (vakuum) helliphellip 100 (vzduch 10002718)

voda helliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 133

plexisklo helliphelliphelliphelliphelliphellip 140 ndash 152

křemenneacute sklo helliphellip hellip 145 (čočka z křemene z Ninive ndash 7 stol přnl)

běžneacute sklo helliphelliphelliphelliphellip 151

cedrovyacute olej helliphelliphelliphelliphellip 151

imerzniacute olej Olympus hellip 1516 pro fluorescenci 1404

kanadskyacute balzaacutem helliphellip 150

krystal NaCl helliphelliphelliphellip 154

korunoveacute sklo helliphelliphelliphellip 145 ndash 156 (sodno-draselneacute bezolovnateacute)

flintoveacute sklo helliphelliphelliphellip 162 ndash 180 (olovnateacute)

diamant helliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 242

Index lomu je vždy většiacute než 100

očniacute čočka hellip 1406

sklivec helliphelliphellip 1336

Odraz světla rovnyacutem zrcadlem (reflexe)

Zaacutekony

1 Paprsek dopadajiacuteciacute kolmice dopadu a paprsek odraženyacute

ležiacute v jedneacute rovině

2 Uacutehel odrazu se rovnaacute uacutehlu dopadu

Odraz a lom paprsku

k

Důležiteacute pro mikroskopii (astronomii)

- neniacute zaacutevislost na vlnoveacute deacutelce světla (λ)

- na rozdiacutel od lomu paprsků se světelneacute

paprsky se odraacutežejiacute stejně

Pazourek 1975

Zaacutekony

1 Paprsek dopadajiacuteciacute kolmice lomu a paprsek lomenyacute ležiacute v teacuteže rovině

Lom světla (refrakce)

2 Při přechodu z prostřediacute opticky řidšiacuteho do prostřediacute opticky hustšiacuteho se paprsek laacuteme ke kolmici (A)

a z prostřediacute opticky hustšiacuteho

do prostřediacute opticky řidšiacuteho

se laacuteme od kolmice (B)

(C a D) ndash uacuteplnyacute odraz při tzv

mezniacutem uacutehlu dopadu paprsku

v přiacutepadě lomu od kolmice (B)

(viz Nikol odrazneacute hranoly světlovodneacute vlaacutekno nebo fluorescenčniacute metoda TIRFM ndash totaacutelniacute odraz exitačniacuteho zaacuteřeniacute)

Pazourek 1975

Svatyacute Kryštof od

švyacutecarskeacuteho maliacuteře

Konrada Witze (kolem 1400ndash1446)

Witz byl jedniacutem z prvniacutech

maliacuteřů kteryacute namaloval

přesnyacute způsob odrazu

světla na vodě

Disperze (rozklad) světla

= důsledek zaacutevislosti rychlosti světla v laacutetkaacutech na frekvenci světla

(λ = c f)

světlo různyacutech barev (λ)

se laacuteme různě

(červeneacute se lomiacute meacuteně než modreacute)

Přiacuteklad disperze (rozkladu) světla

Primaacuterniacute a sekundaacuterniacute duha Severniacute Čechy Foto Pavla Vaacutelovaacute 2010

D u h a

Jeden z mnoha

optickyacutech

jevů (fotometeorů)

v atmosfeacuteře

Rok 312 nl - před bitvou byzantskeacuteho ciacutesaře Konstantina I (272-337) s

konkurenčniacutem ciacutesařem Maxentiem u bran Řiacutema (tzv bitva u Milvijskeacuteho mostu) se

na obloze objevily tři zaacuteřiacuteciacute křiacuteže (halovyacute sloup parheacutelia a parhelickyacute oblouk)

Konstantin bitvu proti přesile vyhraacutel sjednotil řiacuteši a povolil v niacute vyznaacutevat křesťanstviacute

Maleacute halo (22deg) (viz 1) vedlejšiacute slunce (2) a horniacute a dolniacute halovyacute sloup (3)

vznikajiacuteciacute odrazem a lomem světelnyacutech paprsků na krystalciacutech ledu

Lom světla a dějiny

httptmagazineblogsnytimescom20121126halo-effect_r=0

1

3

2 2

3

Ohyb (difrakce) a interference

světla

Foto Pavla Vaacutelovaacute Bukovany 2015 Rozklad světla na CD - světlo žaacuterovky

Rozklad biacuteleacuteho světla na mřiacutežce

Pevnost poznaacuteniacute Olomouc 2015

Foto Pavla Vaacutelovaacute Olomouc 2015

Ohyb (difrakce) a interference

světla

Ohyb (difrakce) a interference

Difrakčniacute obrazec obsahuje světlaacute a tmavaacute miacutesta kteraacute se

střiacutedajiacute - světlaacute miacutesta nazyacutevaacuteme maxima a tmavaacute minima

Interference světla = sklaacutedaacuteniacute světelnyacutech vln

Předpoklad světlo musiacute byacutet koherentniacute

Podmiacutenka koherence

- paprsky musiacute miacutet stejnou frekvenci

- paprsky musiacute byacutet navzaacutejem rovnoběžneacute

- paprsky musiacute miacutet na sobě nezaacutevislyacute draacutehovyacute (faacutezovyacute) rozdiacutel

Vznik koherentniacuteho zaacuteřeniacute

rozděleniacutem světla

- buď odrazem pomociacute zrcadel

- nebo lomem pomociacute hranolů

Foto Pavla Vaacutelovaacute Praha 151 2016

Interference světla

stejnyacute způsob vlněniacute

(faacuteze je vzaacutejemně posunuta o sudeacute

naacutesobky λ2)

vznik interferenčniacuteho maxima

(konstruktivniacute interference)

Interference světla

asynchronniacute vlněniacute

(vzaacutejemně posunutaacute faacuteze

o licheacute naacutesobky λ2)

vznik interferenčniacuteho

minima

(destruktivniacute interference)

rarr zaacuteřeniacute zanikaacute

rarr zeslabeniacute zaacuteřeniacute

Interference dvou vrstev elektromagnetickeacuteho zaacuteřeniacute u Slunce

Čočky ndash zaacutekladniacute součaacutesti

mikroskopu

= průhlednaacute (nejčastěji skleněnaacute) tělesa omezenaacute

vypuklyacutemi nebo vydutyacutemi kulovityacutemi plochami lišiacuteciacute se od sveacuteho okoliacute odlišnyacutem indexem lomu

Zaacutekladniacute typy čoček

spojky (vypukleacute neboli konvexniacute)

rozptylky (vyduteacute konkaacutevniacute)

Pazourek 1975

Optickaacute osa ( o ) prochaacuteziacute středem čočky

Ohnisko ( F ) - bod do ktereacuteho se soustřeďujiacute paprsky probiacutehajiacuteciacute rovnoběžně s optickou osou

- 2 ohniska - předmětoveacute ohnisko ( F )

obrazoveacute ohnisko ( Facute )

- ohniskovaacute vzdaacutelenost ( f )

vzdaacutelenost ohniska od hlavniacute roviny proloženeacute středem čočky

- dvojnaacutesobnaacute ohniskovaacute vzdaacutelenost ( P Pacute )

Obrazovyacute prostor - prostor v němž vznikaacute obraz

Důležiteacute charakteristiky čočky

f

o

hlavniacute rovina

Pazourek 1975

V přiacutepadě velmi tenkeacute čočky

bull Obraz za optickou soustavou

rarr obraz s k u t e č n yacute

Skutečnyacute obraz je možneacute zachytit na stiacuteniacutetko

nebo na fotografickou desku neskutečnyacute nikoliv

bull Obraz před soustavou

rarr obraz n e s k u t e č n yacute (zdaacutenlivyacute virtuaacutelniacute)

Obraz skutečnyacute a neskutečnyacute

A ndash předmět Aacute- obraz předmětu

Upraveno podle Pazourek 1975

Francouz Augustin Jean Fresnel (1788-1827) [frenel]

Fresnelova čočka [frenelova]

- plochyacute tvar (zachovaacuteny pouze čaacutesti ktereacute měniacute směr chodu světelnyacutech paprsků)

- vyacuterazně nižšiacute hmotnost při zachovaacuteniacute podobnyacutech parametrů

Využitiacute infračidla pohybu semafory světlomety (majaacuteky) a reflektory (světla aut

divadelniacutech a filmovyacutech osvětlovaciacutech zařiacutezeniacute) zpětneacute projektory slunečniacute kolektory

na zaacutekladě tohoto principu takeacute vyacuteroba 3D displejů k mobilniacutem telefonům a televiziacutem

httpwwwmffcuniczverejnostzpravicky03_lupahtm

čočka na majaacuteku

Čočky v budoucnosti

Pokus o vyacuterobu tzv dokonaleacute čočky

Prototyp - upraveneacute tzv Maxwellovo rybiacute oko

- paprsky světla se v něm pohybujiacute po kružniciacutech a

na rozdiacutel od běžnyacutech čoček se při zobrazeniacute využijiacute

všechny paprsky

- superčočky využiacutevajiacute geometrie k tomu aby se světlo

soustředilo do oblasti menšiacute než je jeho vlnovaacute deacutelka

(zatiacutem se neviacute jak do čočky vyhovujiacuteciacutem způsobem

doveacutest světlo)

Využitiacute v budoucnu

mimo jineacute v pozorovaacuteniacute živyacutech buněk při velkeacutem zvětšeniacute

pomociacute obyčejneacuteho světla bez jejich narušeniacute

Viacutece viz Plaacutešek J Mikroskopy se superčočkami httpwwwvesmircz | Vesmiacuter 91 531 zaacuteřiacute 2012

Hranoly

- doplňky optickyacutech systeacutemů

- většinou tvar rovnostranneacuteho trojuacutehelniacuteka

- využiacutevajiacute uacuteplneacuteho odrazu

Funkce

- změna chodu paprsků pod různyacutemi uacutehly

- rozdvojeniacute paprsků

Pazourek 1975

Různeacute typy odraznyacutech hranolů

Hranoly

Různeacute typy hranolů

httplaserykvalitneczimagestext_25_zakladyoptiky1odrazne_hranolyjpg

Viz dichroickeacute zrcadlo u fluorescenčniacuteho mikroskopu

Chod paprsků v binokulaacuterniacutem tubusu

Pazourek 1975

Nikol = hranol z islandskeacuteho vaacutepence

rarr polarizace světla

Dvojlomnyacute vaacutepencovyacute

krystal

ř ndash paprsek řaacutednyacute (zanikaacute na začerněneacute ploše)

mř ndash paprsek mimořaacutednyacute (lineaacuterně polarizovanyacute

využit k osvětleniacute)

začerněnaacute plocha

Nikol

Pazourek 1975

vzduchovaacute štěrbina

- rychlost světla je

v různyacutech směrech různaacute

- uacutehel paprsku řaacutedneacuteho a

mimořaacutedneacuteho je odlišnyacute

(u Vikingů - slunečniacute kaacutemen

soacutelarsteinn)

Chod paprsků ve světlovodneacutem vlaacuteknu

Princip uacuteplnyacute odraz paprsku

- uvnitř skleněneacuteho vlaacutekna je opticky hustšiacute prostřediacute

- nutnost dostatečně silneacuteho světelneacuteho zdroje

Světlovodnaacute vlaacutekna

Pazourek 1975

Širokeacute využitiacute v praxi optickeacute kabely ndash přenos signaacutelů ve sdělovaciacute technice

světlovody umožňujiacuteciacute veacutest denniacute světlo vedeniacute světla u stereolup endoskopů hellip

Page 22: Světelná a elektronová mikroskopie...(AMF – Atomic Force Miroscope) - skenování povrchu materiálu pomocí hrotu zavěšeném na pružném výkyvném raménku, který je přitahován

19 stol

zač 19 stol ndash Dollond Lister Amici - vynaacutelez

achromatickeacuteho objektivu

ndash do teacute doby použiacutevaacuteniacute jednočočkoveacuteho mikroskopu (dvoučočkovyacute

mikroskop podaacuteval značně zkreslenyacute obraz)

Vyacuteznačniacute vědci 19 stol použiacutevajiacuteciacute k svyacutem pozorovaacuteniacutem mikroskop

Robert Brown (1773-1858) - objev jaacutedra (1831)

Luis Pasteur (1822-1895) (francouzskyacute mikrobiolog)

- objev kvasinek

Robert Koch (1843-1910) (německyacute leacutekař a mikrobiolog)

- objev původců tuberkuloacutezy a cholery

Jan Evangelista Purkyně (1787-1869) (českyacute fyziolog)

- 1825 popsal jaacutedro u živočišneacute buňky (lupa)

od r 1832 použiacutevaacute kvalitniacute mikroskop

Microscope

stand VII

19 stol ndash dalšiacute vyacutevoj mikroskopů

Carl Zeiss ndash průmyslovaacute vyacuteroba mikroskopů (firma Zeiss)

Ernst Karl Abbe ndash teoretickaacute studia optickyacutech principů

Otto Schott ndash vyacutezkum optickeacuteho skla

August Koumlhler ndash kvalitniacute osvětleniacute

Otto Schott (1851-1935)

Ernst Abbe (1840-1905)

Carl Zeiss (1816-1888)

August Koumlhler (1866-1948)

Mikroskopy 19 stoletiacute

19 stol

20 stol

Konfokaacutelniacute mikroskop

A1R (Nikon)

BX60 (Olympus)

Laserovyacute fluorescenčniacute mikroskop bdquoLight Sheetldquo Centrum regionu Hanaacute pro biotechnologickyacute a zemědělskyacute vyacutezkum Odděleniacute buněčneacute biologie

21 stol

21 stol

Digitaacutelniacute holografickyacute mikroskop firmy Lynceacutee Tec

Důležitaacute data při rozvoji moderniacute světelneacute mikroskopie

1847 - Zahaacutejeniacute vyacuteroby mikroskopů firmou Carl Zeiss v Jeně

1903 - Ultramikroskop (Richard Zsigmondy NC 1925)

1911 - Fluorescenčniacute mikroskop (Carl Reichert)

1935 - Faacutezovyacute kontrast (Fritz Zernike NC 1953)

1955 - Diferenciaacutelniacute interferenčniacute kontrast (DIC ndash Nomarski)

1968 - Rastrovaciacute tandemovyacute konfokaacutelniacute mikroskop (TSCM)

1978 - Laserovyacute konfokaacutelniacute rastrovaciacute mikroskop

1994 - Princip STED mikroskopie (S W Hell NC 2014)

(Stimulated Emission Depletion ndash redukce fluorescence stimulovanou emisiacute)

po roce 2000 - rozvoj tzv superrozlišovaciacute mikroskopie

2006 - Super-resolučniacute fluorescenčniacute mikroskop (Eric Betzig

Stefan W Hell a William E Moerner NC za chemii 2014)

NC = Nobelova cena

30 leacuteta 20 stoletiacute

ndash hranice vyacutevoje optickeacuteho (paprskoveacuteho) mikroskopu

(hranice rozlišeniacute světelneacuteho mikroskopu je diacuteky velikosti deacutelky světla 02 microm)

- dalšiacute zvětšovaacuteniacute pozorovanyacutech objektů na jineacutem principu

- miacutesto světelneacuteho paprsku elektronovyacute paprsek

(= tok rychlyacutech elektronů)

- miacutesto skleněneacute čočky magnetickaacute čočka

1931 - Ernst Ruska Max Knoll

prvniacute elektronovyacute mikroskop

tzv prozařovaciacute transmisniacute EM

(TEM ndash Transmission Electron Microscope)

- originaacutelniacute zvětšeniacute 1 000 - 250 000x

Ernst Ruska (1906-1988)

1942 - rastrovaciacute EM

(SEM ndash Scanning Electron Microscope) - postupneacute bombardovaacuteniacute vzorku elektrony

- zvětšeniacute až 30 000x

EM UacuteMG AV ČR Praha-Krč

FEI ndash TECHNAIG2TEM + kryozařiacutezeniacute

200 kV (λ el = 00025 nm)

RS 01 nm

prvkovaacute analyacuteza vzorků

zařiacutezeniacute pro

prvkovou analyacutezu

vzorků

Foto Pavla Vaacutelovaacute 2010

Brněnštiacute vědci z Uacutestavu přiacutestrojoveacute techniky AV ČR (UacutePT) a Mendelovy

univerzity představili novou metodu pozorovaacuteniacute rostlinnyacutech vzorků v jejich

přirozeneacutem stavu (za využitiacute kryoprotektiv)

Viacutece na httpe-svete15cztechnikacesti-vedci-posunuli-hranice-elektronove-mikroskopie-1174818

Enviromentaacutelniacute rastrovaciacute elektronovyacute mikroskop Aquasem II

TEM TITAN FEI Company Mgr Klaacutera Čeacutepe PhD

Vysokorozlišovaciacute transmisniacute elektronovyacute mikroskop

schopnyacute nahleacutednout do struktury materiaacutelů až na uacuterovni atomů

a současně přesně zmapovat jejich chemickeacute složeniacute

Regionaacutelniacute centrum pokročilyacutech

materiaacutelů (RCPTM)

Odd uhliacutekoveacute nanostruktury

PřF UP OL

Vysokorozlišovaciacute transmisniacute

elektronovyacute mikroskop TITAN (FEI)

Foto Pavla Vaacutelovaacute 2015

Transmisniacute elektronovyacute

mikroskop Jeol

Regionaacutelniacute centrum pokročilyacutech materiaacutelů (RCPTM)

Odd uhliacutekoveacute nanostruktury PřF UP OL

Neoptickeacute mikroskopy

1981

Řaacutedkovaciacute tunelovyacute mikroskop (STM ndash Scanning Tunnelling Microscope)

- mapovaacuteniacute povrchu pomociacute pohybu vodiveacuteho hrotu nad vodivyacutem povrchem sledovaneacuteho materiaacutelu

1986

Mikroskop atomaacuterniacutech sil (AMF ndash Atomic Force Miroscope)

- skenovaacuteniacute povrchu materiaacutelu pomociacute hrotu zavěšeneacutem na pružneacutem vyacutekyvneacutem rameacutenku kteryacute je přitahovaacuten elektrostatickyacutemi a Van der Walsovyacutemi silami

Rozlišeniacute v řaacutedech pikometrů (10-12 m) ndash rozeznaacuteniacute struktur

jednotlivyacutech atomů

O p t i c k eacute p r i n c i p y

světelneacute mikroskopie

Reichl J Všetička M Encyklopedie fyziky [online] copy2006-2014

[vid 2014] Dostupneacute z httpfyzikajreichlcommainarticleview431-optika Lepil O (2013) Fyzika pro gymnaacutezia Optika Prometheus Praha 4 přepracovaneacute vydaacuteniacute

Murphy DB Davidson MW (2013) Fundamentals of Light

Microscopy and Electronic Imaging Willey-Blackwell Published

2013 by John Wiley amp Sons Inc Hoboken New Jersey

S v ě t l o

= čaacutest rozsaacutehleacute oblasti elektromagnetickeacuteho zaacuteřeniacute

kterou vniacutemaacuteme zrakem

Rozhlasoveacute a raacutedioveacute vlny 250 km - 1 mm

Infračerveneacute zaacuteřeniacute 05 mm - 08 μm

Světlo (viditelneacute zaacuteřeniacute) 08 μm - 04 μm

Ultrafialoveacute zaacuteřeniacute 04 microm - 01 microm

Roumlntgenovo zaacuteřeniacute (X-paprsky) 15 nm - 0005 nm

γ-zaacuteřeniacute pod 00001 nm

Přibližneacute hodnoty ndash individuaacutelniacute vlastnosti zraku různyacutech lidiacute

S v ě t l o

= čaacutest rozsaacutehleacute oblasti elektromagnetickeacuteho zaacuteřeniacute

kterou vniacutemaacuteme zrakem

rarr se zkracujiacuteciacute se vlnovou deacutelkou se zvyšuje frekvence (energie)

Viditelneacute

Vlnoveacute deacutelky světla a relativniacute citlivost oka

Murphy DB Davidson MW (2013) Fundamentals of Light Microscopy and Electronic

Imaging Willey-Blackwell Published 2013 by John Wiley amp Sons Inc Hoboken New Jersey

= zrakovyacute pigment citlivyacute na

světlo nachaacutezejiacuteciacute se v tyčinkaacutech Jodopsin = zrakovyacute pigment citlivyacute na

barvu nachaacutezejiacuteciacute se v čiacutepciacutech

S v ě t l o

Duaacutelniacute charakter světla ndash vlněniacute i proud čaacutestic (fotonů)

Vlnovyacute model světla

vlna elektrickaacute a magnetickaacute (elektromagnetickaacute vlna je tvořena oscilujiacuteciacutem elektrickyacutem a

magnetickyacutem polem na sebe kolmyacutech a nesouciacutech vpřed energii)

Pro uacutečinky světla v mikroskopu je důležitaacute vlna elektrickaacute

= přiacutečneacute vlněniacute

postupneacute kmitaacuteniacute

jednotlivyacutech vedle sebe

ležiacuteciacutech bodů

Scheacutema světla jako elektromagnetickeacute vlny

Obr httpwwwprosoundwebcomarticleprintinvaders_from_

outer_space_electromagnetic_radiation_interference

λ - vlnovaacute deacutelka

(v oblasti svět zaacuteřeniacute

v rozmeziacute od 380 do 780 nm)

určuje barvu světla

a - amplituda

nejvyššiacute hodnota

určuje intenzitu světla

Z hlediska vlnoveacute deacutelky rozlišujeme

polychromatickeacute x monochromatickeacute světlo (selekce pomociacute barevnyacutech filtrů rarr jednotnaacute vlnovaacute deacutelka světlo zeleneacute červeneacute hellip)

Elektrickaacute vlna - sinusoida

Charakterizovaacutena dvěma veličinami

Pazourek 1975

Vlastnosti světla

Rovnoměrneacute šiacuteřeniacute světla ze zaacuteřiacuteciacuteho bodu na všechny strany rarr vlnovaacute plocha tvaru koule

Paprsek ndash směr kteryacutem se vlněniacute šiacuteřiacute a kteryacute je kolmyacute

na vlnoplochu

Pazourek 1975

- paprsek nepolarizovanyacute (A C) ndash kmitaacute v každeacutem

miacutestě a v průběhu času ve všech možnyacutech směrech

kolmyacutech na směr šiacuteřeniacute paprsku

- paprsek polarizovanyacute (B D1 D2) - kmitaacute v jedneacute

rovině přičemž rovina kmitů (vlněniacute) jednoho z nich je

kolmaacute k rovině kmitů druheacuteho

Pazourek 1975

Polarizovaneacute světlo viz

httpswwwyoutubecomwatchv=gP751qpm4n4

Murphy DB Davidson MW (2013) Fundamentals of Light Microscopy and

Electronic Imaging Jonh Wkiley amp Sons Inc Hoboken New Jersey

Osm různyacutech vlnovyacutech forem světla (znaacutezorňujiacuteciacutech různou kvalitu světla)

Odraz a lom světelnyacutech paprsků

v prostřediacutech různeacute hustoty

Důležitaacute charakteristika prostřediacute

index lomu ( n ) (= optickaacute hustota prostřediacute)

c = rychlost světla ve vakuu (stejnaacute pro všechny λ )

v = rychlost světla určiteacute vlnoveacute deacutelky ve zkoumaneacute laacutetce

c

n =

v

zde absolutniacute index lomu

(bezrozměrnaacute fyzikaacutelniacute veličina jeho jednotka je 1)

Rychlost světla (c) určiteacute vlnoveacute

deacutelky v různyacutech prostřediacutech

c ve vakuu

= 300 000 kms

Index lomu (n) některyacutech laacutetek

vzduch (vakuum) helliphellip 100 (vzduch 10002718)

voda helliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 133

plexisklo helliphelliphelliphelliphelliphellip 140 ndash 152

křemenneacute sklo helliphellip hellip 145 (čočka z křemene z Ninive ndash 7 stol přnl)

běžneacute sklo helliphelliphelliphelliphellip 151

cedrovyacute olej helliphelliphelliphelliphellip 151

imerzniacute olej Olympus hellip 1516 pro fluorescenci 1404

kanadskyacute balzaacutem helliphellip 150

krystal NaCl helliphelliphelliphellip 154

korunoveacute sklo helliphelliphelliphellip 145 ndash 156 (sodno-draselneacute bezolovnateacute)

flintoveacute sklo helliphelliphelliphellip 162 ndash 180 (olovnateacute)

diamant helliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 242

Index lomu je vždy většiacute než 100

očniacute čočka hellip 1406

sklivec helliphelliphellip 1336

Odraz světla rovnyacutem zrcadlem (reflexe)

Zaacutekony

1 Paprsek dopadajiacuteciacute kolmice dopadu a paprsek odraženyacute

ležiacute v jedneacute rovině

2 Uacutehel odrazu se rovnaacute uacutehlu dopadu

Odraz a lom paprsku

k

Důležiteacute pro mikroskopii (astronomii)

- neniacute zaacutevislost na vlnoveacute deacutelce světla (λ)

- na rozdiacutel od lomu paprsků se světelneacute

paprsky se odraacutežejiacute stejně

Pazourek 1975

Zaacutekony

1 Paprsek dopadajiacuteciacute kolmice lomu a paprsek lomenyacute ležiacute v teacuteže rovině

Lom světla (refrakce)

2 Při přechodu z prostřediacute opticky řidšiacuteho do prostřediacute opticky hustšiacuteho se paprsek laacuteme ke kolmici (A)

a z prostřediacute opticky hustšiacuteho

do prostřediacute opticky řidšiacuteho

se laacuteme od kolmice (B)

(C a D) ndash uacuteplnyacute odraz při tzv

mezniacutem uacutehlu dopadu paprsku

v přiacutepadě lomu od kolmice (B)

(viz Nikol odrazneacute hranoly světlovodneacute vlaacutekno nebo fluorescenčniacute metoda TIRFM ndash totaacutelniacute odraz exitačniacuteho zaacuteřeniacute)

Pazourek 1975

Svatyacute Kryštof od

švyacutecarskeacuteho maliacuteře

Konrada Witze (kolem 1400ndash1446)

Witz byl jedniacutem z prvniacutech

maliacuteřů kteryacute namaloval

přesnyacute způsob odrazu

světla na vodě

Disperze (rozklad) světla

= důsledek zaacutevislosti rychlosti světla v laacutetkaacutech na frekvenci světla

(λ = c f)

světlo různyacutech barev (λ)

se laacuteme různě

(červeneacute se lomiacute meacuteně než modreacute)

Přiacuteklad disperze (rozkladu) světla

Primaacuterniacute a sekundaacuterniacute duha Severniacute Čechy Foto Pavla Vaacutelovaacute 2010

D u h a

Jeden z mnoha

optickyacutech

jevů (fotometeorů)

v atmosfeacuteře

Rok 312 nl - před bitvou byzantskeacuteho ciacutesaře Konstantina I (272-337) s

konkurenčniacutem ciacutesařem Maxentiem u bran Řiacutema (tzv bitva u Milvijskeacuteho mostu) se

na obloze objevily tři zaacuteřiacuteciacute křiacuteže (halovyacute sloup parheacutelia a parhelickyacute oblouk)

Konstantin bitvu proti přesile vyhraacutel sjednotil řiacuteši a povolil v niacute vyznaacutevat křesťanstviacute

Maleacute halo (22deg) (viz 1) vedlejšiacute slunce (2) a horniacute a dolniacute halovyacute sloup (3)

vznikajiacuteciacute odrazem a lomem světelnyacutech paprsků na krystalciacutech ledu

Lom světla a dějiny

httptmagazineblogsnytimescom20121126halo-effect_r=0

1

3

2 2

3

Ohyb (difrakce) a interference

světla

Foto Pavla Vaacutelovaacute Bukovany 2015 Rozklad světla na CD - světlo žaacuterovky

Rozklad biacuteleacuteho světla na mřiacutežce

Pevnost poznaacuteniacute Olomouc 2015

Foto Pavla Vaacutelovaacute Olomouc 2015

Ohyb (difrakce) a interference

světla

Ohyb (difrakce) a interference

Difrakčniacute obrazec obsahuje světlaacute a tmavaacute miacutesta kteraacute se

střiacutedajiacute - světlaacute miacutesta nazyacutevaacuteme maxima a tmavaacute minima

Interference světla = sklaacutedaacuteniacute světelnyacutech vln

Předpoklad světlo musiacute byacutet koherentniacute

Podmiacutenka koherence

- paprsky musiacute miacutet stejnou frekvenci

- paprsky musiacute byacutet navzaacutejem rovnoběžneacute

- paprsky musiacute miacutet na sobě nezaacutevislyacute draacutehovyacute (faacutezovyacute) rozdiacutel

Vznik koherentniacuteho zaacuteřeniacute

rozděleniacutem světla

- buď odrazem pomociacute zrcadel

- nebo lomem pomociacute hranolů

Foto Pavla Vaacutelovaacute Praha 151 2016

Interference světla

stejnyacute způsob vlněniacute

(faacuteze je vzaacutejemně posunuta o sudeacute

naacutesobky λ2)

vznik interferenčniacuteho maxima

(konstruktivniacute interference)

Interference světla

asynchronniacute vlněniacute

(vzaacutejemně posunutaacute faacuteze

o licheacute naacutesobky λ2)

vznik interferenčniacuteho

minima

(destruktivniacute interference)

rarr zaacuteřeniacute zanikaacute

rarr zeslabeniacute zaacuteřeniacute

Interference dvou vrstev elektromagnetickeacuteho zaacuteřeniacute u Slunce

Čočky ndash zaacutekladniacute součaacutesti

mikroskopu

= průhlednaacute (nejčastěji skleněnaacute) tělesa omezenaacute

vypuklyacutemi nebo vydutyacutemi kulovityacutemi plochami lišiacuteciacute se od sveacuteho okoliacute odlišnyacutem indexem lomu

Zaacutekladniacute typy čoček

spojky (vypukleacute neboli konvexniacute)

rozptylky (vyduteacute konkaacutevniacute)

Pazourek 1975

Optickaacute osa ( o ) prochaacuteziacute středem čočky

Ohnisko ( F ) - bod do ktereacuteho se soustřeďujiacute paprsky probiacutehajiacuteciacute rovnoběžně s optickou osou

- 2 ohniska - předmětoveacute ohnisko ( F )

obrazoveacute ohnisko ( Facute )

- ohniskovaacute vzdaacutelenost ( f )

vzdaacutelenost ohniska od hlavniacute roviny proloženeacute středem čočky

- dvojnaacutesobnaacute ohniskovaacute vzdaacutelenost ( P Pacute )

Obrazovyacute prostor - prostor v němž vznikaacute obraz

Důležiteacute charakteristiky čočky

f

o

hlavniacute rovina

Pazourek 1975

V přiacutepadě velmi tenkeacute čočky

bull Obraz za optickou soustavou

rarr obraz s k u t e č n yacute

Skutečnyacute obraz je možneacute zachytit na stiacuteniacutetko

nebo na fotografickou desku neskutečnyacute nikoliv

bull Obraz před soustavou

rarr obraz n e s k u t e č n yacute (zdaacutenlivyacute virtuaacutelniacute)

Obraz skutečnyacute a neskutečnyacute

A ndash předmět Aacute- obraz předmětu

Upraveno podle Pazourek 1975

Francouz Augustin Jean Fresnel (1788-1827) [frenel]

Fresnelova čočka [frenelova]

- plochyacute tvar (zachovaacuteny pouze čaacutesti ktereacute měniacute směr chodu světelnyacutech paprsků)

- vyacuterazně nižšiacute hmotnost při zachovaacuteniacute podobnyacutech parametrů

Využitiacute infračidla pohybu semafory světlomety (majaacuteky) a reflektory (světla aut

divadelniacutech a filmovyacutech osvětlovaciacutech zařiacutezeniacute) zpětneacute projektory slunečniacute kolektory

na zaacutekladě tohoto principu takeacute vyacuteroba 3D displejů k mobilniacutem telefonům a televiziacutem

httpwwwmffcuniczverejnostzpravicky03_lupahtm

čočka na majaacuteku

Čočky v budoucnosti

Pokus o vyacuterobu tzv dokonaleacute čočky

Prototyp - upraveneacute tzv Maxwellovo rybiacute oko

- paprsky světla se v něm pohybujiacute po kružniciacutech a

na rozdiacutel od běžnyacutech čoček se při zobrazeniacute využijiacute

všechny paprsky

- superčočky využiacutevajiacute geometrie k tomu aby se světlo

soustředilo do oblasti menšiacute než je jeho vlnovaacute deacutelka

(zatiacutem se neviacute jak do čočky vyhovujiacuteciacutem způsobem

doveacutest světlo)

Využitiacute v budoucnu

mimo jineacute v pozorovaacuteniacute živyacutech buněk při velkeacutem zvětšeniacute

pomociacute obyčejneacuteho světla bez jejich narušeniacute

Viacutece viz Plaacutešek J Mikroskopy se superčočkami httpwwwvesmircz | Vesmiacuter 91 531 zaacuteřiacute 2012

Hranoly

- doplňky optickyacutech systeacutemů

- většinou tvar rovnostranneacuteho trojuacutehelniacuteka

- využiacutevajiacute uacuteplneacuteho odrazu

Funkce

- změna chodu paprsků pod různyacutemi uacutehly

- rozdvojeniacute paprsků

Pazourek 1975

Různeacute typy odraznyacutech hranolů

Hranoly

Různeacute typy hranolů

httplaserykvalitneczimagestext_25_zakladyoptiky1odrazne_hranolyjpg

Viz dichroickeacute zrcadlo u fluorescenčniacuteho mikroskopu

Chod paprsků v binokulaacuterniacutem tubusu

Pazourek 1975

Nikol = hranol z islandskeacuteho vaacutepence

rarr polarizace světla

Dvojlomnyacute vaacutepencovyacute

krystal

ř ndash paprsek řaacutednyacute (zanikaacute na začerněneacute ploše)

mř ndash paprsek mimořaacutednyacute (lineaacuterně polarizovanyacute

využit k osvětleniacute)

začerněnaacute plocha

Nikol

Pazourek 1975

vzduchovaacute štěrbina

- rychlost světla je

v různyacutech směrech různaacute

- uacutehel paprsku řaacutedneacuteho a

mimořaacutedneacuteho je odlišnyacute

(u Vikingů - slunečniacute kaacutemen

soacutelarsteinn)

Chod paprsků ve světlovodneacutem vlaacuteknu

Princip uacuteplnyacute odraz paprsku

- uvnitř skleněneacuteho vlaacutekna je opticky hustšiacute prostřediacute

- nutnost dostatečně silneacuteho světelneacuteho zdroje

Světlovodnaacute vlaacutekna

Pazourek 1975

Širokeacute využitiacute v praxi optickeacute kabely ndash přenos signaacutelů ve sdělovaciacute technice

světlovody umožňujiacuteciacute veacutest denniacute světlo vedeniacute světla u stereolup endoskopů hellip

Page 23: Světelná a elektronová mikroskopie...(AMF – Atomic Force Miroscope) - skenování povrchu materiálu pomocí hrotu zavěšeném na pružném výkyvném raménku, který je přitahován

19 stol ndash dalšiacute vyacutevoj mikroskopů

Carl Zeiss ndash průmyslovaacute vyacuteroba mikroskopů (firma Zeiss)

Ernst Karl Abbe ndash teoretickaacute studia optickyacutech principů

Otto Schott ndash vyacutezkum optickeacuteho skla

August Koumlhler ndash kvalitniacute osvětleniacute

Otto Schott (1851-1935)

Ernst Abbe (1840-1905)

Carl Zeiss (1816-1888)

August Koumlhler (1866-1948)

Mikroskopy 19 stoletiacute

19 stol

20 stol

Konfokaacutelniacute mikroskop

A1R (Nikon)

BX60 (Olympus)

Laserovyacute fluorescenčniacute mikroskop bdquoLight Sheetldquo Centrum regionu Hanaacute pro biotechnologickyacute a zemědělskyacute vyacutezkum Odděleniacute buněčneacute biologie

21 stol

21 stol

Digitaacutelniacute holografickyacute mikroskop firmy Lynceacutee Tec

Důležitaacute data při rozvoji moderniacute světelneacute mikroskopie

1847 - Zahaacutejeniacute vyacuteroby mikroskopů firmou Carl Zeiss v Jeně

1903 - Ultramikroskop (Richard Zsigmondy NC 1925)

1911 - Fluorescenčniacute mikroskop (Carl Reichert)

1935 - Faacutezovyacute kontrast (Fritz Zernike NC 1953)

1955 - Diferenciaacutelniacute interferenčniacute kontrast (DIC ndash Nomarski)

1968 - Rastrovaciacute tandemovyacute konfokaacutelniacute mikroskop (TSCM)

1978 - Laserovyacute konfokaacutelniacute rastrovaciacute mikroskop

1994 - Princip STED mikroskopie (S W Hell NC 2014)

(Stimulated Emission Depletion ndash redukce fluorescence stimulovanou emisiacute)

po roce 2000 - rozvoj tzv superrozlišovaciacute mikroskopie

2006 - Super-resolučniacute fluorescenčniacute mikroskop (Eric Betzig

Stefan W Hell a William E Moerner NC za chemii 2014)

NC = Nobelova cena

30 leacuteta 20 stoletiacute

ndash hranice vyacutevoje optickeacuteho (paprskoveacuteho) mikroskopu

(hranice rozlišeniacute světelneacuteho mikroskopu je diacuteky velikosti deacutelky světla 02 microm)

- dalšiacute zvětšovaacuteniacute pozorovanyacutech objektů na jineacutem principu

- miacutesto světelneacuteho paprsku elektronovyacute paprsek

(= tok rychlyacutech elektronů)

- miacutesto skleněneacute čočky magnetickaacute čočka

1931 - Ernst Ruska Max Knoll

prvniacute elektronovyacute mikroskop

tzv prozařovaciacute transmisniacute EM

(TEM ndash Transmission Electron Microscope)

- originaacutelniacute zvětšeniacute 1 000 - 250 000x

Ernst Ruska (1906-1988)

1942 - rastrovaciacute EM

(SEM ndash Scanning Electron Microscope) - postupneacute bombardovaacuteniacute vzorku elektrony

- zvětšeniacute až 30 000x

EM UacuteMG AV ČR Praha-Krč

FEI ndash TECHNAIG2TEM + kryozařiacutezeniacute

200 kV (λ el = 00025 nm)

RS 01 nm

prvkovaacute analyacuteza vzorků

zařiacutezeniacute pro

prvkovou analyacutezu

vzorků

Foto Pavla Vaacutelovaacute 2010

Brněnštiacute vědci z Uacutestavu přiacutestrojoveacute techniky AV ČR (UacutePT) a Mendelovy

univerzity představili novou metodu pozorovaacuteniacute rostlinnyacutech vzorků v jejich

přirozeneacutem stavu (za využitiacute kryoprotektiv)

Viacutece na httpe-svete15cztechnikacesti-vedci-posunuli-hranice-elektronove-mikroskopie-1174818

Enviromentaacutelniacute rastrovaciacute elektronovyacute mikroskop Aquasem II

TEM TITAN FEI Company Mgr Klaacutera Čeacutepe PhD

Vysokorozlišovaciacute transmisniacute elektronovyacute mikroskop

schopnyacute nahleacutednout do struktury materiaacutelů až na uacuterovni atomů

a současně přesně zmapovat jejich chemickeacute složeniacute

Regionaacutelniacute centrum pokročilyacutech

materiaacutelů (RCPTM)

Odd uhliacutekoveacute nanostruktury

PřF UP OL

Vysokorozlišovaciacute transmisniacute

elektronovyacute mikroskop TITAN (FEI)

Foto Pavla Vaacutelovaacute 2015

Transmisniacute elektronovyacute

mikroskop Jeol

Regionaacutelniacute centrum pokročilyacutech materiaacutelů (RCPTM)

Odd uhliacutekoveacute nanostruktury PřF UP OL

Neoptickeacute mikroskopy

1981

Řaacutedkovaciacute tunelovyacute mikroskop (STM ndash Scanning Tunnelling Microscope)

- mapovaacuteniacute povrchu pomociacute pohybu vodiveacuteho hrotu nad vodivyacutem povrchem sledovaneacuteho materiaacutelu

1986

Mikroskop atomaacuterniacutech sil (AMF ndash Atomic Force Miroscope)

- skenovaacuteniacute povrchu materiaacutelu pomociacute hrotu zavěšeneacutem na pružneacutem vyacutekyvneacutem rameacutenku kteryacute je přitahovaacuten elektrostatickyacutemi a Van der Walsovyacutemi silami

Rozlišeniacute v řaacutedech pikometrů (10-12 m) ndash rozeznaacuteniacute struktur

jednotlivyacutech atomů

O p t i c k eacute p r i n c i p y

světelneacute mikroskopie

Reichl J Všetička M Encyklopedie fyziky [online] copy2006-2014

[vid 2014] Dostupneacute z httpfyzikajreichlcommainarticleview431-optika Lepil O (2013) Fyzika pro gymnaacutezia Optika Prometheus Praha 4 přepracovaneacute vydaacuteniacute

Murphy DB Davidson MW (2013) Fundamentals of Light

Microscopy and Electronic Imaging Willey-Blackwell Published

2013 by John Wiley amp Sons Inc Hoboken New Jersey

S v ě t l o

= čaacutest rozsaacutehleacute oblasti elektromagnetickeacuteho zaacuteřeniacute

kterou vniacutemaacuteme zrakem

Rozhlasoveacute a raacutedioveacute vlny 250 km - 1 mm

Infračerveneacute zaacuteřeniacute 05 mm - 08 μm

Světlo (viditelneacute zaacuteřeniacute) 08 μm - 04 μm

Ultrafialoveacute zaacuteřeniacute 04 microm - 01 microm

Roumlntgenovo zaacuteřeniacute (X-paprsky) 15 nm - 0005 nm

γ-zaacuteřeniacute pod 00001 nm

Přibližneacute hodnoty ndash individuaacutelniacute vlastnosti zraku různyacutech lidiacute

S v ě t l o

= čaacutest rozsaacutehleacute oblasti elektromagnetickeacuteho zaacuteřeniacute

kterou vniacutemaacuteme zrakem

rarr se zkracujiacuteciacute se vlnovou deacutelkou se zvyšuje frekvence (energie)

Viditelneacute

Vlnoveacute deacutelky světla a relativniacute citlivost oka

Murphy DB Davidson MW (2013) Fundamentals of Light Microscopy and Electronic

Imaging Willey-Blackwell Published 2013 by John Wiley amp Sons Inc Hoboken New Jersey

= zrakovyacute pigment citlivyacute na

světlo nachaacutezejiacuteciacute se v tyčinkaacutech Jodopsin = zrakovyacute pigment citlivyacute na

barvu nachaacutezejiacuteciacute se v čiacutepciacutech

S v ě t l o

Duaacutelniacute charakter světla ndash vlněniacute i proud čaacutestic (fotonů)

Vlnovyacute model světla

vlna elektrickaacute a magnetickaacute (elektromagnetickaacute vlna je tvořena oscilujiacuteciacutem elektrickyacutem a

magnetickyacutem polem na sebe kolmyacutech a nesouciacutech vpřed energii)

Pro uacutečinky světla v mikroskopu je důležitaacute vlna elektrickaacute

= přiacutečneacute vlněniacute

postupneacute kmitaacuteniacute

jednotlivyacutech vedle sebe

ležiacuteciacutech bodů

Scheacutema světla jako elektromagnetickeacute vlny

Obr httpwwwprosoundwebcomarticleprintinvaders_from_

outer_space_electromagnetic_radiation_interference

λ - vlnovaacute deacutelka

(v oblasti svět zaacuteřeniacute

v rozmeziacute od 380 do 780 nm)

určuje barvu světla

a - amplituda

nejvyššiacute hodnota

určuje intenzitu světla

Z hlediska vlnoveacute deacutelky rozlišujeme

polychromatickeacute x monochromatickeacute světlo (selekce pomociacute barevnyacutech filtrů rarr jednotnaacute vlnovaacute deacutelka světlo zeleneacute červeneacute hellip)

Elektrickaacute vlna - sinusoida

Charakterizovaacutena dvěma veličinami

Pazourek 1975

Vlastnosti světla

Rovnoměrneacute šiacuteřeniacute světla ze zaacuteřiacuteciacuteho bodu na všechny strany rarr vlnovaacute plocha tvaru koule

Paprsek ndash směr kteryacutem se vlněniacute šiacuteřiacute a kteryacute je kolmyacute

na vlnoplochu

Pazourek 1975

- paprsek nepolarizovanyacute (A C) ndash kmitaacute v každeacutem

miacutestě a v průběhu času ve všech možnyacutech směrech

kolmyacutech na směr šiacuteřeniacute paprsku

- paprsek polarizovanyacute (B D1 D2) - kmitaacute v jedneacute

rovině přičemž rovina kmitů (vlněniacute) jednoho z nich je

kolmaacute k rovině kmitů druheacuteho

Pazourek 1975

Polarizovaneacute světlo viz

httpswwwyoutubecomwatchv=gP751qpm4n4

Murphy DB Davidson MW (2013) Fundamentals of Light Microscopy and

Electronic Imaging Jonh Wkiley amp Sons Inc Hoboken New Jersey

Osm různyacutech vlnovyacutech forem světla (znaacutezorňujiacuteciacutech různou kvalitu světla)

Odraz a lom světelnyacutech paprsků

v prostřediacutech různeacute hustoty

Důležitaacute charakteristika prostřediacute

index lomu ( n ) (= optickaacute hustota prostřediacute)

c = rychlost světla ve vakuu (stejnaacute pro všechny λ )

v = rychlost světla určiteacute vlnoveacute deacutelky ve zkoumaneacute laacutetce

c

n =

v

zde absolutniacute index lomu

(bezrozměrnaacute fyzikaacutelniacute veličina jeho jednotka je 1)

Rychlost světla (c) určiteacute vlnoveacute

deacutelky v různyacutech prostřediacutech

c ve vakuu

= 300 000 kms

Index lomu (n) některyacutech laacutetek

vzduch (vakuum) helliphellip 100 (vzduch 10002718)

voda helliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 133

plexisklo helliphelliphelliphelliphelliphellip 140 ndash 152

křemenneacute sklo helliphellip hellip 145 (čočka z křemene z Ninive ndash 7 stol přnl)

běžneacute sklo helliphelliphelliphelliphellip 151

cedrovyacute olej helliphelliphelliphelliphellip 151

imerzniacute olej Olympus hellip 1516 pro fluorescenci 1404

kanadskyacute balzaacutem helliphellip 150

krystal NaCl helliphelliphelliphellip 154

korunoveacute sklo helliphelliphelliphellip 145 ndash 156 (sodno-draselneacute bezolovnateacute)

flintoveacute sklo helliphelliphelliphellip 162 ndash 180 (olovnateacute)

diamant helliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 242

Index lomu je vždy většiacute než 100

očniacute čočka hellip 1406

sklivec helliphelliphellip 1336

Odraz světla rovnyacutem zrcadlem (reflexe)

Zaacutekony

1 Paprsek dopadajiacuteciacute kolmice dopadu a paprsek odraženyacute

ležiacute v jedneacute rovině

2 Uacutehel odrazu se rovnaacute uacutehlu dopadu

Odraz a lom paprsku

k

Důležiteacute pro mikroskopii (astronomii)

- neniacute zaacutevislost na vlnoveacute deacutelce světla (λ)

- na rozdiacutel od lomu paprsků se světelneacute

paprsky se odraacutežejiacute stejně

Pazourek 1975

Zaacutekony

1 Paprsek dopadajiacuteciacute kolmice lomu a paprsek lomenyacute ležiacute v teacuteže rovině

Lom světla (refrakce)

2 Při přechodu z prostřediacute opticky řidšiacuteho do prostřediacute opticky hustšiacuteho se paprsek laacuteme ke kolmici (A)

a z prostřediacute opticky hustšiacuteho

do prostřediacute opticky řidšiacuteho

se laacuteme od kolmice (B)

(C a D) ndash uacuteplnyacute odraz při tzv

mezniacutem uacutehlu dopadu paprsku

v přiacutepadě lomu od kolmice (B)

(viz Nikol odrazneacute hranoly světlovodneacute vlaacutekno nebo fluorescenčniacute metoda TIRFM ndash totaacutelniacute odraz exitačniacuteho zaacuteřeniacute)

Pazourek 1975

Svatyacute Kryštof od

švyacutecarskeacuteho maliacuteře

Konrada Witze (kolem 1400ndash1446)

Witz byl jedniacutem z prvniacutech

maliacuteřů kteryacute namaloval

přesnyacute způsob odrazu

světla na vodě

Disperze (rozklad) světla

= důsledek zaacutevislosti rychlosti světla v laacutetkaacutech na frekvenci světla

(λ = c f)

světlo různyacutech barev (λ)

se laacuteme různě

(červeneacute se lomiacute meacuteně než modreacute)

Přiacuteklad disperze (rozkladu) světla

Primaacuterniacute a sekundaacuterniacute duha Severniacute Čechy Foto Pavla Vaacutelovaacute 2010

D u h a

Jeden z mnoha

optickyacutech

jevů (fotometeorů)

v atmosfeacuteře

Rok 312 nl - před bitvou byzantskeacuteho ciacutesaře Konstantina I (272-337) s

konkurenčniacutem ciacutesařem Maxentiem u bran Řiacutema (tzv bitva u Milvijskeacuteho mostu) se

na obloze objevily tři zaacuteřiacuteciacute křiacuteže (halovyacute sloup parheacutelia a parhelickyacute oblouk)

Konstantin bitvu proti přesile vyhraacutel sjednotil řiacuteši a povolil v niacute vyznaacutevat křesťanstviacute

Maleacute halo (22deg) (viz 1) vedlejšiacute slunce (2) a horniacute a dolniacute halovyacute sloup (3)

vznikajiacuteciacute odrazem a lomem světelnyacutech paprsků na krystalciacutech ledu

Lom světla a dějiny

httptmagazineblogsnytimescom20121126halo-effect_r=0

1

3

2 2

3

Ohyb (difrakce) a interference

světla

Foto Pavla Vaacutelovaacute Bukovany 2015 Rozklad světla na CD - světlo žaacuterovky

Rozklad biacuteleacuteho světla na mřiacutežce

Pevnost poznaacuteniacute Olomouc 2015

Foto Pavla Vaacutelovaacute Olomouc 2015

Ohyb (difrakce) a interference

světla

Ohyb (difrakce) a interference

Difrakčniacute obrazec obsahuje světlaacute a tmavaacute miacutesta kteraacute se

střiacutedajiacute - světlaacute miacutesta nazyacutevaacuteme maxima a tmavaacute minima

Interference světla = sklaacutedaacuteniacute světelnyacutech vln

Předpoklad světlo musiacute byacutet koherentniacute

Podmiacutenka koherence

- paprsky musiacute miacutet stejnou frekvenci

- paprsky musiacute byacutet navzaacutejem rovnoběžneacute

- paprsky musiacute miacutet na sobě nezaacutevislyacute draacutehovyacute (faacutezovyacute) rozdiacutel

Vznik koherentniacuteho zaacuteřeniacute

rozděleniacutem světla

- buď odrazem pomociacute zrcadel

- nebo lomem pomociacute hranolů

Foto Pavla Vaacutelovaacute Praha 151 2016

Interference světla

stejnyacute způsob vlněniacute

(faacuteze je vzaacutejemně posunuta o sudeacute

naacutesobky λ2)

vznik interferenčniacuteho maxima

(konstruktivniacute interference)

Interference světla

asynchronniacute vlněniacute

(vzaacutejemně posunutaacute faacuteze

o licheacute naacutesobky λ2)

vznik interferenčniacuteho

minima

(destruktivniacute interference)

rarr zaacuteřeniacute zanikaacute

rarr zeslabeniacute zaacuteřeniacute

Interference dvou vrstev elektromagnetickeacuteho zaacuteřeniacute u Slunce

Čočky ndash zaacutekladniacute součaacutesti

mikroskopu

= průhlednaacute (nejčastěji skleněnaacute) tělesa omezenaacute

vypuklyacutemi nebo vydutyacutemi kulovityacutemi plochami lišiacuteciacute se od sveacuteho okoliacute odlišnyacutem indexem lomu

Zaacutekladniacute typy čoček

spojky (vypukleacute neboli konvexniacute)

rozptylky (vyduteacute konkaacutevniacute)

Pazourek 1975

Optickaacute osa ( o ) prochaacuteziacute středem čočky

Ohnisko ( F ) - bod do ktereacuteho se soustřeďujiacute paprsky probiacutehajiacuteciacute rovnoběžně s optickou osou

- 2 ohniska - předmětoveacute ohnisko ( F )

obrazoveacute ohnisko ( Facute )

- ohniskovaacute vzdaacutelenost ( f )

vzdaacutelenost ohniska od hlavniacute roviny proloženeacute středem čočky

- dvojnaacutesobnaacute ohniskovaacute vzdaacutelenost ( P Pacute )

Obrazovyacute prostor - prostor v němž vznikaacute obraz

Důležiteacute charakteristiky čočky

f

o

hlavniacute rovina

Pazourek 1975

V přiacutepadě velmi tenkeacute čočky

bull Obraz za optickou soustavou

rarr obraz s k u t e č n yacute

Skutečnyacute obraz je možneacute zachytit na stiacuteniacutetko

nebo na fotografickou desku neskutečnyacute nikoliv

bull Obraz před soustavou

rarr obraz n e s k u t e č n yacute (zdaacutenlivyacute virtuaacutelniacute)

Obraz skutečnyacute a neskutečnyacute

A ndash předmět Aacute- obraz předmětu

Upraveno podle Pazourek 1975

Francouz Augustin Jean Fresnel (1788-1827) [frenel]

Fresnelova čočka [frenelova]

- plochyacute tvar (zachovaacuteny pouze čaacutesti ktereacute měniacute směr chodu světelnyacutech paprsků)

- vyacuterazně nižšiacute hmotnost při zachovaacuteniacute podobnyacutech parametrů

Využitiacute infračidla pohybu semafory světlomety (majaacuteky) a reflektory (světla aut

divadelniacutech a filmovyacutech osvětlovaciacutech zařiacutezeniacute) zpětneacute projektory slunečniacute kolektory

na zaacutekladě tohoto principu takeacute vyacuteroba 3D displejů k mobilniacutem telefonům a televiziacutem

httpwwwmffcuniczverejnostzpravicky03_lupahtm

čočka na majaacuteku

Čočky v budoucnosti

Pokus o vyacuterobu tzv dokonaleacute čočky

Prototyp - upraveneacute tzv Maxwellovo rybiacute oko

- paprsky světla se v něm pohybujiacute po kružniciacutech a

na rozdiacutel od běžnyacutech čoček se při zobrazeniacute využijiacute

všechny paprsky

- superčočky využiacutevajiacute geometrie k tomu aby se světlo

soustředilo do oblasti menšiacute než je jeho vlnovaacute deacutelka

(zatiacutem se neviacute jak do čočky vyhovujiacuteciacutem způsobem

doveacutest světlo)

Využitiacute v budoucnu

mimo jineacute v pozorovaacuteniacute živyacutech buněk při velkeacutem zvětšeniacute

pomociacute obyčejneacuteho světla bez jejich narušeniacute

Viacutece viz Plaacutešek J Mikroskopy se superčočkami httpwwwvesmircz | Vesmiacuter 91 531 zaacuteřiacute 2012

Hranoly

- doplňky optickyacutech systeacutemů

- většinou tvar rovnostranneacuteho trojuacutehelniacuteka

- využiacutevajiacute uacuteplneacuteho odrazu

Funkce

- změna chodu paprsků pod různyacutemi uacutehly

- rozdvojeniacute paprsků

Pazourek 1975

Různeacute typy odraznyacutech hranolů

Hranoly

Různeacute typy hranolů

httplaserykvalitneczimagestext_25_zakladyoptiky1odrazne_hranolyjpg

Viz dichroickeacute zrcadlo u fluorescenčniacuteho mikroskopu

Chod paprsků v binokulaacuterniacutem tubusu

Pazourek 1975

Nikol = hranol z islandskeacuteho vaacutepence

rarr polarizace světla

Dvojlomnyacute vaacutepencovyacute

krystal

ř ndash paprsek řaacutednyacute (zanikaacute na začerněneacute ploše)

mř ndash paprsek mimořaacutednyacute (lineaacuterně polarizovanyacute

využit k osvětleniacute)

začerněnaacute plocha

Nikol

Pazourek 1975

vzduchovaacute štěrbina

- rychlost světla je

v různyacutech směrech různaacute

- uacutehel paprsku řaacutedneacuteho a

mimořaacutedneacuteho je odlišnyacute

(u Vikingů - slunečniacute kaacutemen

soacutelarsteinn)

Chod paprsků ve světlovodneacutem vlaacuteknu

Princip uacuteplnyacute odraz paprsku

- uvnitř skleněneacuteho vlaacutekna je opticky hustšiacute prostřediacute

- nutnost dostatečně silneacuteho světelneacuteho zdroje

Světlovodnaacute vlaacutekna

Pazourek 1975

Širokeacute využitiacute v praxi optickeacute kabely ndash přenos signaacutelů ve sdělovaciacute technice

světlovody umožňujiacuteciacute veacutest denniacute světlo vedeniacute světla u stereolup endoskopů hellip

Page 24: Světelná a elektronová mikroskopie...(AMF – Atomic Force Miroscope) - skenování povrchu materiálu pomocí hrotu zavěšeném na pružném výkyvném raménku, který je přitahován

Mikroskopy 19 stoletiacute

19 stol

20 stol

Konfokaacutelniacute mikroskop

A1R (Nikon)

BX60 (Olympus)

Laserovyacute fluorescenčniacute mikroskop bdquoLight Sheetldquo Centrum regionu Hanaacute pro biotechnologickyacute a zemědělskyacute vyacutezkum Odděleniacute buněčneacute biologie

21 stol

21 stol

Digitaacutelniacute holografickyacute mikroskop firmy Lynceacutee Tec

Důležitaacute data při rozvoji moderniacute světelneacute mikroskopie

1847 - Zahaacutejeniacute vyacuteroby mikroskopů firmou Carl Zeiss v Jeně

1903 - Ultramikroskop (Richard Zsigmondy NC 1925)

1911 - Fluorescenčniacute mikroskop (Carl Reichert)

1935 - Faacutezovyacute kontrast (Fritz Zernike NC 1953)

1955 - Diferenciaacutelniacute interferenčniacute kontrast (DIC ndash Nomarski)

1968 - Rastrovaciacute tandemovyacute konfokaacutelniacute mikroskop (TSCM)

1978 - Laserovyacute konfokaacutelniacute rastrovaciacute mikroskop

1994 - Princip STED mikroskopie (S W Hell NC 2014)

(Stimulated Emission Depletion ndash redukce fluorescence stimulovanou emisiacute)

po roce 2000 - rozvoj tzv superrozlišovaciacute mikroskopie

2006 - Super-resolučniacute fluorescenčniacute mikroskop (Eric Betzig

Stefan W Hell a William E Moerner NC za chemii 2014)

NC = Nobelova cena

30 leacuteta 20 stoletiacute

ndash hranice vyacutevoje optickeacuteho (paprskoveacuteho) mikroskopu

(hranice rozlišeniacute světelneacuteho mikroskopu je diacuteky velikosti deacutelky světla 02 microm)

- dalšiacute zvětšovaacuteniacute pozorovanyacutech objektů na jineacutem principu

- miacutesto světelneacuteho paprsku elektronovyacute paprsek

(= tok rychlyacutech elektronů)

- miacutesto skleněneacute čočky magnetickaacute čočka

1931 - Ernst Ruska Max Knoll

prvniacute elektronovyacute mikroskop

tzv prozařovaciacute transmisniacute EM

(TEM ndash Transmission Electron Microscope)

- originaacutelniacute zvětšeniacute 1 000 - 250 000x

Ernst Ruska (1906-1988)

1942 - rastrovaciacute EM

(SEM ndash Scanning Electron Microscope) - postupneacute bombardovaacuteniacute vzorku elektrony

- zvětšeniacute až 30 000x

EM UacuteMG AV ČR Praha-Krč

FEI ndash TECHNAIG2TEM + kryozařiacutezeniacute

200 kV (λ el = 00025 nm)

RS 01 nm

prvkovaacute analyacuteza vzorků

zařiacutezeniacute pro

prvkovou analyacutezu

vzorků

Foto Pavla Vaacutelovaacute 2010

Brněnštiacute vědci z Uacutestavu přiacutestrojoveacute techniky AV ČR (UacutePT) a Mendelovy

univerzity představili novou metodu pozorovaacuteniacute rostlinnyacutech vzorků v jejich

přirozeneacutem stavu (za využitiacute kryoprotektiv)

Viacutece na httpe-svete15cztechnikacesti-vedci-posunuli-hranice-elektronove-mikroskopie-1174818

Enviromentaacutelniacute rastrovaciacute elektronovyacute mikroskop Aquasem II

TEM TITAN FEI Company Mgr Klaacutera Čeacutepe PhD

Vysokorozlišovaciacute transmisniacute elektronovyacute mikroskop

schopnyacute nahleacutednout do struktury materiaacutelů až na uacuterovni atomů

a současně přesně zmapovat jejich chemickeacute složeniacute

Regionaacutelniacute centrum pokročilyacutech

materiaacutelů (RCPTM)

Odd uhliacutekoveacute nanostruktury

PřF UP OL

Vysokorozlišovaciacute transmisniacute

elektronovyacute mikroskop TITAN (FEI)

Foto Pavla Vaacutelovaacute 2015

Transmisniacute elektronovyacute

mikroskop Jeol

Regionaacutelniacute centrum pokročilyacutech materiaacutelů (RCPTM)

Odd uhliacutekoveacute nanostruktury PřF UP OL

Neoptickeacute mikroskopy

1981

Řaacutedkovaciacute tunelovyacute mikroskop (STM ndash Scanning Tunnelling Microscope)

- mapovaacuteniacute povrchu pomociacute pohybu vodiveacuteho hrotu nad vodivyacutem povrchem sledovaneacuteho materiaacutelu

1986

Mikroskop atomaacuterniacutech sil (AMF ndash Atomic Force Miroscope)

- skenovaacuteniacute povrchu materiaacutelu pomociacute hrotu zavěšeneacutem na pružneacutem vyacutekyvneacutem rameacutenku kteryacute je přitahovaacuten elektrostatickyacutemi a Van der Walsovyacutemi silami

Rozlišeniacute v řaacutedech pikometrů (10-12 m) ndash rozeznaacuteniacute struktur

jednotlivyacutech atomů

O p t i c k eacute p r i n c i p y

světelneacute mikroskopie

Reichl J Všetička M Encyklopedie fyziky [online] copy2006-2014

[vid 2014] Dostupneacute z httpfyzikajreichlcommainarticleview431-optika Lepil O (2013) Fyzika pro gymnaacutezia Optika Prometheus Praha 4 přepracovaneacute vydaacuteniacute

Murphy DB Davidson MW (2013) Fundamentals of Light

Microscopy and Electronic Imaging Willey-Blackwell Published

2013 by John Wiley amp Sons Inc Hoboken New Jersey

S v ě t l o

= čaacutest rozsaacutehleacute oblasti elektromagnetickeacuteho zaacuteřeniacute

kterou vniacutemaacuteme zrakem

Rozhlasoveacute a raacutedioveacute vlny 250 km - 1 mm

Infračerveneacute zaacuteřeniacute 05 mm - 08 μm

Světlo (viditelneacute zaacuteřeniacute) 08 μm - 04 μm

Ultrafialoveacute zaacuteřeniacute 04 microm - 01 microm

Roumlntgenovo zaacuteřeniacute (X-paprsky) 15 nm - 0005 nm

γ-zaacuteřeniacute pod 00001 nm

Přibližneacute hodnoty ndash individuaacutelniacute vlastnosti zraku různyacutech lidiacute

S v ě t l o

= čaacutest rozsaacutehleacute oblasti elektromagnetickeacuteho zaacuteřeniacute

kterou vniacutemaacuteme zrakem

rarr se zkracujiacuteciacute se vlnovou deacutelkou se zvyšuje frekvence (energie)

Viditelneacute

Vlnoveacute deacutelky světla a relativniacute citlivost oka

Murphy DB Davidson MW (2013) Fundamentals of Light Microscopy and Electronic

Imaging Willey-Blackwell Published 2013 by John Wiley amp Sons Inc Hoboken New Jersey

= zrakovyacute pigment citlivyacute na

světlo nachaacutezejiacuteciacute se v tyčinkaacutech Jodopsin = zrakovyacute pigment citlivyacute na

barvu nachaacutezejiacuteciacute se v čiacutepciacutech

S v ě t l o

Duaacutelniacute charakter světla ndash vlněniacute i proud čaacutestic (fotonů)

Vlnovyacute model světla

vlna elektrickaacute a magnetickaacute (elektromagnetickaacute vlna je tvořena oscilujiacuteciacutem elektrickyacutem a

magnetickyacutem polem na sebe kolmyacutech a nesouciacutech vpřed energii)

Pro uacutečinky světla v mikroskopu je důležitaacute vlna elektrickaacute

= přiacutečneacute vlněniacute

postupneacute kmitaacuteniacute

jednotlivyacutech vedle sebe

ležiacuteciacutech bodů

Scheacutema světla jako elektromagnetickeacute vlny

Obr httpwwwprosoundwebcomarticleprintinvaders_from_

outer_space_electromagnetic_radiation_interference

λ - vlnovaacute deacutelka

(v oblasti svět zaacuteřeniacute

v rozmeziacute od 380 do 780 nm)

určuje barvu světla

a - amplituda

nejvyššiacute hodnota

určuje intenzitu světla

Z hlediska vlnoveacute deacutelky rozlišujeme

polychromatickeacute x monochromatickeacute světlo (selekce pomociacute barevnyacutech filtrů rarr jednotnaacute vlnovaacute deacutelka světlo zeleneacute červeneacute hellip)

Elektrickaacute vlna - sinusoida

Charakterizovaacutena dvěma veličinami

Pazourek 1975

Vlastnosti světla

Rovnoměrneacute šiacuteřeniacute světla ze zaacuteřiacuteciacuteho bodu na všechny strany rarr vlnovaacute plocha tvaru koule

Paprsek ndash směr kteryacutem se vlněniacute šiacuteřiacute a kteryacute je kolmyacute

na vlnoplochu

Pazourek 1975

- paprsek nepolarizovanyacute (A C) ndash kmitaacute v každeacutem

miacutestě a v průběhu času ve všech možnyacutech směrech

kolmyacutech na směr šiacuteřeniacute paprsku

- paprsek polarizovanyacute (B D1 D2) - kmitaacute v jedneacute

rovině přičemž rovina kmitů (vlněniacute) jednoho z nich je

kolmaacute k rovině kmitů druheacuteho

Pazourek 1975

Polarizovaneacute světlo viz

httpswwwyoutubecomwatchv=gP751qpm4n4

Murphy DB Davidson MW (2013) Fundamentals of Light Microscopy and

Electronic Imaging Jonh Wkiley amp Sons Inc Hoboken New Jersey

Osm různyacutech vlnovyacutech forem světla (znaacutezorňujiacuteciacutech různou kvalitu světla)

Odraz a lom světelnyacutech paprsků

v prostřediacutech různeacute hustoty

Důležitaacute charakteristika prostřediacute

index lomu ( n ) (= optickaacute hustota prostřediacute)

c = rychlost světla ve vakuu (stejnaacute pro všechny λ )

v = rychlost světla určiteacute vlnoveacute deacutelky ve zkoumaneacute laacutetce

c

n =

v

zde absolutniacute index lomu

(bezrozměrnaacute fyzikaacutelniacute veličina jeho jednotka je 1)

Rychlost světla (c) určiteacute vlnoveacute

deacutelky v různyacutech prostřediacutech

c ve vakuu

= 300 000 kms

Index lomu (n) některyacutech laacutetek

vzduch (vakuum) helliphellip 100 (vzduch 10002718)

voda helliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 133

plexisklo helliphelliphelliphelliphelliphellip 140 ndash 152

křemenneacute sklo helliphellip hellip 145 (čočka z křemene z Ninive ndash 7 stol přnl)

běžneacute sklo helliphelliphelliphelliphellip 151

cedrovyacute olej helliphelliphelliphelliphellip 151

imerzniacute olej Olympus hellip 1516 pro fluorescenci 1404

kanadskyacute balzaacutem helliphellip 150

krystal NaCl helliphelliphelliphellip 154

korunoveacute sklo helliphelliphelliphellip 145 ndash 156 (sodno-draselneacute bezolovnateacute)

flintoveacute sklo helliphelliphelliphellip 162 ndash 180 (olovnateacute)

diamant helliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 242

Index lomu je vždy většiacute než 100

očniacute čočka hellip 1406

sklivec helliphelliphellip 1336

Odraz světla rovnyacutem zrcadlem (reflexe)

Zaacutekony

1 Paprsek dopadajiacuteciacute kolmice dopadu a paprsek odraženyacute

ležiacute v jedneacute rovině

2 Uacutehel odrazu se rovnaacute uacutehlu dopadu

Odraz a lom paprsku

k

Důležiteacute pro mikroskopii (astronomii)

- neniacute zaacutevislost na vlnoveacute deacutelce světla (λ)

- na rozdiacutel od lomu paprsků se světelneacute

paprsky se odraacutežejiacute stejně

Pazourek 1975

Zaacutekony

1 Paprsek dopadajiacuteciacute kolmice lomu a paprsek lomenyacute ležiacute v teacuteže rovině

Lom světla (refrakce)

2 Při přechodu z prostřediacute opticky řidšiacuteho do prostřediacute opticky hustšiacuteho se paprsek laacuteme ke kolmici (A)

a z prostřediacute opticky hustšiacuteho

do prostřediacute opticky řidšiacuteho

se laacuteme od kolmice (B)

(C a D) ndash uacuteplnyacute odraz při tzv

mezniacutem uacutehlu dopadu paprsku

v přiacutepadě lomu od kolmice (B)

(viz Nikol odrazneacute hranoly světlovodneacute vlaacutekno nebo fluorescenčniacute metoda TIRFM ndash totaacutelniacute odraz exitačniacuteho zaacuteřeniacute)

Pazourek 1975

Svatyacute Kryštof od

švyacutecarskeacuteho maliacuteře

Konrada Witze (kolem 1400ndash1446)

Witz byl jedniacutem z prvniacutech

maliacuteřů kteryacute namaloval

přesnyacute způsob odrazu

světla na vodě

Disperze (rozklad) světla

= důsledek zaacutevislosti rychlosti světla v laacutetkaacutech na frekvenci světla

(λ = c f)

světlo různyacutech barev (λ)

se laacuteme různě

(červeneacute se lomiacute meacuteně než modreacute)

Přiacuteklad disperze (rozkladu) světla

Primaacuterniacute a sekundaacuterniacute duha Severniacute Čechy Foto Pavla Vaacutelovaacute 2010

D u h a

Jeden z mnoha

optickyacutech

jevů (fotometeorů)

v atmosfeacuteře

Rok 312 nl - před bitvou byzantskeacuteho ciacutesaře Konstantina I (272-337) s

konkurenčniacutem ciacutesařem Maxentiem u bran Řiacutema (tzv bitva u Milvijskeacuteho mostu) se

na obloze objevily tři zaacuteřiacuteciacute křiacuteže (halovyacute sloup parheacutelia a parhelickyacute oblouk)

Konstantin bitvu proti přesile vyhraacutel sjednotil řiacuteši a povolil v niacute vyznaacutevat křesťanstviacute

Maleacute halo (22deg) (viz 1) vedlejšiacute slunce (2) a horniacute a dolniacute halovyacute sloup (3)

vznikajiacuteciacute odrazem a lomem světelnyacutech paprsků na krystalciacutech ledu

Lom světla a dějiny

httptmagazineblogsnytimescom20121126halo-effect_r=0

1

3

2 2

3

Ohyb (difrakce) a interference

světla

Foto Pavla Vaacutelovaacute Bukovany 2015 Rozklad světla na CD - světlo žaacuterovky

Rozklad biacuteleacuteho světla na mřiacutežce

Pevnost poznaacuteniacute Olomouc 2015

Foto Pavla Vaacutelovaacute Olomouc 2015

Ohyb (difrakce) a interference

světla

Ohyb (difrakce) a interference

Difrakčniacute obrazec obsahuje světlaacute a tmavaacute miacutesta kteraacute se

střiacutedajiacute - světlaacute miacutesta nazyacutevaacuteme maxima a tmavaacute minima

Interference světla = sklaacutedaacuteniacute světelnyacutech vln

Předpoklad světlo musiacute byacutet koherentniacute

Podmiacutenka koherence

- paprsky musiacute miacutet stejnou frekvenci

- paprsky musiacute byacutet navzaacutejem rovnoběžneacute

- paprsky musiacute miacutet na sobě nezaacutevislyacute draacutehovyacute (faacutezovyacute) rozdiacutel

Vznik koherentniacuteho zaacuteřeniacute

rozděleniacutem světla

- buď odrazem pomociacute zrcadel

- nebo lomem pomociacute hranolů

Foto Pavla Vaacutelovaacute Praha 151 2016

Interference světla

stejnyacute způsob vlněniacute

(faacuteze je vzaacutejemně posunuta o sudeacute

naacutesobky λ2)

vznik interferenčniacuteho maxima

(konstruktivniacute interference)

Interference světla

asynchronniacute vlněniacute

(vzaacutejemně posunutaacute faacuteze

o licheacute naacutesobky λ2)

vznik interferenčniacuteho

minima

(destruktivniacute interference)

rarr zaacuteřeniacute zanikaacute

rarr zeslabeniacute zaacuteřeniacute

Interference dvou vrstev elektromagnetickeacuteho zaacuteřeniacute u Slunce

Čočky ndash zaacutekladniacute součaacutesti

mikroskopu

= průhlednaacute (nejčastěji skleněnaacute) tělesa omezenaacute

vypuklyacutemi nebo vydutyacutemi kulovityacutemi plochami lišiacuteciacute se od sveacuteho okoliacute odlišnyacutem indexem lomu

Zaacutekladniacute typy čoček

spojky (vypukleacute neboli konvexniacute)

rozptylky (vyduteacute konkaacutevniacute)

Pazourek 1975

Optickaacute osa ( o ) prochaacuteziacute středem čočky

Ohnisko ( F ) - bod do ktereacuteho se soustřeďujiacute paprsky probiacutehajiacuteciacute rovnoběžně s optickou osou

- 2 ohniska - předmětoveacute ohnisko ( F )

obrazoveacute ohnisko ( Facute )

- ohniskovaacute vzdaacutelenost ( f )

vzdaacutelenost ohniska od hlavniacute roviny proloženeacute středem čočky

- dvojnaacutesobnaacute ohniskovaacute vzdaacutelenost ( P Pacute )

Obrazovyacute prostor - prostor v němž vznikaacute obraz

Důležiteacute charakteristiky čočky

f

o

hlavniacute rovina

Pazourek 1975

V přiacutepadě velmi tenkeacute čočky

bull Obraz za optickou soustavou

rarr obraz s k u t e č n yacute

Skutečnyacute obraz je možneacute zachytit na stiacuteniacutetko

nebo na fotografickou desku neskutečnyacute nikoliv

bull Obraz před soustavou

rarr obraz n e s k u t e č n yacute (zdaacutenlivyacute virtuaacutelniacute)

Obraz skutečnyacute a neskutečnyacute

A ndash předmět Aacute- obraz předmětu

Upraveno podle Pazourek 1975

Francouz Augustin Jean Fresnel (1788-1827) [frenel]

Fresnelova čočka [frenelova]

- plochyacute tvar (zachovaacuteny pouze čaacutesti ktereacute měniacute směr chodu světelnyacutech paprsků)

- vyacuterazně nižšiacute hmotnost při zachovaacuteniacute podobnyacutech parametrů

Využitiacute infračidla pohybu semafory světlomety (majaacuteky) a reflektory (světla aut

divadelniacutech a filmovyacutech osvětlovaciacutech zařiacutezeniacute) zpětneacute projektory slunečniacute kolektory

na zaacutekladě tohoto principu takeacute vyacuteroba 3D displejů k mobilniacutem telefonům a televiziacutem

httpwwwmffcuniczverejnostzpravicky03_lupahtm

čočka na majaacuteku

Čočky v budoucnosti

Pokus o vyacuterobu tzv dokonaleacute čočky

Prototyp - upraveneacute tzv Maxwellovo rybiacute oko

- paprsky světla se v něm pohybujiacute po kružniciacutech a

na rozdiacutel od běžnyacutech čoček se při zobrazeniacute využijiacute

všechny paprsky

- superčočky využiacutevajiacute geometrie k tomu aby se světlo

soustředilo do oblasti menšiacute než je jeho vlnovaacute deacutelka

(zatiacutem se neviacute jak do čočky vyhovujiacuteciacutem způsobem

doveacutest světlo)

Využitiacute v budoucnu

mimo jineacute v pozorovaacuteniacute živyacutech buněk při velkeacutem zvětšeniacute

pomociacute obyčejneacuteho světla bez jejich narušeniacute

Viacutece viz Plaacutešek J Mikroskopy se superčočkami httpwwwvesmircz | Vesmiacuter 91 531 zaacuteřiacute 2012

Hranoly

- doplňky optickyacutech systeacutemů

- většinou tvar rovnostranneacuteho trojuacutehelniacuteka

- využiacutevajiacute uacuteplneacuteho odrazu

Funkce

- změna chodu paprsků pod různyacutemi uacutehly

- rozdvojeniacute paprsků

Pazourek 1975

Různeacute typy odraznyacutech hranolů

Hranoly

Různeacute typy hranolů

httplaserykvalitneczimagestext_25_zakladyoptiky1odrazne_hranolyjpg

Viz dichroickeacute zrcadlo u fluorescenčniacuteho mikroskopu

Chod paprsků v binokulaacuterniacutem tubusu

Pazourek 1975

Nikol = hranol z islandskeacuteho vaacutepence

rarr polarizace světla

Dvojlomnyacute vaacutepencovyacute

krystal

ř ndash paprsek řaacutednyacute (zanikaacute na začerněneacute ploše)

mř ndash paprsek mimořaacutednyacute (lineaacuterně polarizovanyacute

využit k osvětleniacute)

začerněnaacute plocha

Nikol

Pazourek 1975

vzduchovaacute štěrbina

- rychlost světla je

v různyacutech směrech různaacute

- uacutehel paprsku řaacutedneacuteho a

mimořaacutedneacuteho je odlišnyacute

(u Vikingů - slunečniacute kaacutemen

soacutelarsteinn)

Chod paprsků ve světlovodneacutem vlaacuteknu

Princip uacuteplnyacute odraz paprsku

- uvnitř skleněneacuteho vlaacutekna je opticky hustšiacute prostřediacute

- nutnost dostatečně silneacuteho světelneacuteho zdroje

Světlovodnaacute vlaacutekna

Pazourek 1975

Širokeacute využitiacute v praxi optickeacute kabely ndash přenos signaacutelů ve sdělovaciacute technice

světlovody umožňujiacuteciacute veacutest denniacute světlo vedeniacute světla u stereolup endoskopů hellip

Page 25: Světelná a elektronová mikroskopie...(AMF – Atomic Force Miroscope) - skenování povrchu materiálu pomocí hrotu zavěšeném na pružném výkyvném raménku, který je přitahován

20 stol

Konfokaacutelniacute mikroskop

A1R (Nikon)

BX60 (Olympus)

Laserovyacute fluorescenčniacute mikroskop bdquoLight Sheetldquo Centrum regionu Hanaacute pro biotechnologickyacute a zemědělskyacute vyacutezkum Odděleniacute buněčneacute biologie

21 stol

21 stol

Digitaacutelniacute holografickyacute mikroskop firmy Lynceacutee Tec

Důležitaacute data při rozvoji moderniacute světelneacute mikroskopie

1847 - Zahaacutejeniacute vyacuteroby mikroskopů firmou Carl Zeiss v Jeně

1903 - Ultramikroskop (Richard Zsigmondy NC 1925)

1911 - Fluorescenčniacute mikroskop (Carl Reichert)

1935 - Faacutezovyacute kontrast (Fritz Zernike NC 1953)

1955 - Diferenciaacutelniacute interferenčniacute kontrast (DIC ndash Nomarski)

1968 - Rastrovaciacute tandemovyacute konfokaacutelniacute mikroskop (TSCM)

1978 - Laserovyacute konfokaacutelniacute rastrovaciacute mikroskop

1994 - Princip STED mikroskopie (S W Hell NC 2014)

(Stimulated Emission Depletion ndash redukce fluorescence stimulovanou emisiacute)

po roce 2000 - rozvoj tzv superrozlišovaciacute mikroskopie

2006 - Super-resolučniacute fluorescenčniacute mikroskop (Eric Betzig

Stefan W Hell a William E Moerner NC za chemii 2014)

NC = Nobelova cena

30 leacuteta 20 stoletiacute

ndash hranice vyacutevoje optickeacuteho (paprskoveacuteho) mikroskopu

(hranice rozlišeniacute světelneacuteho mikroskopu je diacuteky velikosti deacutelky světla 02 microm)

- dalšiacute zvětšovaacuteniacute pozorovanyacutech objektů na jineacutem principu

- miacutesto světelneacuteho paprsku elektronovyacute paprsek

(= tok rychlyacutech elektronů)

- miacutesto skleněneacute čočky magnetickaacute čočka

1931 - Ernst Ruska Max Knoll

prvniacute elektronovyacute mikroskop

tzv prozařovaciacute transmisniacute EM

(TEM ndash Transmission Electron Microscope)

- originaacutelniacute zvětšeniacute 1 000 - 250 000x

Ernst Ruska (1906-1988)

1942 - rastrovaciacute EM

(SEM ndash Scanning Electron Microscope) - postupneacute bombardovaacuteniacute vzorku elektrony

- zvětšeniacute až 30 000x

EM UacuteMG AV ČR Praha-Krč

FEI ndash TECHNAIG2TEM + kryozařiacutezeniacute

200 kV (λ el = 00025 nm)

RS 01 nm

prvkovaacute analyacuteza vzorků

zařiacutezeniacute pro

prvkovou analyacutezu

vzorků

Foto Pavla Vaacutelovaacute 2010

Brněnštiacute vědci z Uacutestavu přiacutestrojoveacute techniky AV ČR (UacutePT) a Mendelovy

univerzity představili novou metodu pozorovaacuteniacute rostlinnyacutech vzorků v jejich

přirozeneacutem stavu (za využitiacute kryoprotektiv)

Viacutece na httpe-svete15cztechnikacesti-vedci-posunuli-hranice-elektronove-mikroskopie-1174818

Enviromentaacutelniacute rastrovaciacute elektronovyacute mikroskop Aquasem II

TEM TITAN FEI Company Mgr Klaacutera Čeacutepe PhD

Vysokorozlišovaciacute transmisniacute elektronovyacute mikroskop

schopnyacute nahleacutednout do struktury materiaacutelů až na uacuterovni atomů

a současně přesně zmapovat jejich chemickeacute složeniacute

Regionaacutelniacute centrum pokročilyacutech

materiaacutelů (RCPTM)

Odd uhliacutekoveacute nanostruktury

PřF UP OL

Vysokorozlišovaciacute transmisniacute

elektronovyacute mikroskop TITAN (FEI)

Foto Pavla Vaacutelovaacute 2015

Transmisniacute elektronovyacute

mikroskop Jeol

Regionaacutelniacute centrum pokročilyacutech materiaacutelů (RCPTM)

Odd uhliacutekoveacute nanostruktury PřF UP OL

Neoptickeacute mikroskopy

1981

Řaacutedkovaciacute tunelovyacute mikroskop (STM ndash Scanning Tunnelling Microscope)

- mapovaacuteniacute povrchu pomociacute pohybu vodiveacuteho hrotu nad vodivyacutem povrchem sledovaneacuteho materiaacutelu

1986

Mikroskop atomaacuterniacutech sil (AMF ndash Atomic Force Miroscope)

- skenovaacuteniacute povrchu materiaacutelu pomociacute hrotu zavěšeneacutem na pružneacutem vyacutekyvneacutem rameacutenku kteryacute je přitahovaacuten elektrostatickyacutemi a Van der Walsovyacutemi silami

Rozlišeniacute v řaacutedech pikometrů (10-12 m) ndash rozeznaacuteniacute struktur

jednotlivyacutech atomů

O p t i c k eacute p r i n c i p y

světelneacute mikroskopie

Reichl J Všetička M Encyklopedie fyziky [online] copy2006-2014

[vid 2014] Dostupneacute z httpfyzikajreichlcommainarticleview431-optika Lepil O (2013) Fyzika pro gymnaacutezia Optika Prometheus Praha 4 přepracovaneacute vydaacuteniacute

Murphy DB Davidson MW (2013) Fundamentals of Light

Microscopy and Electronic Imaging Willey-Blackwell Published

2013 by John Wiley amp Sons Inc Hoboken New Jersey

S v ě t l o

= čaacutest rozsaacutehleacute oblasti elektromagnetickeacuteho zaacuteřeniacute

kterou vniacutemaacuteme zrakem

Rozhlasoveacute a raacutedioveacute vlny 250 km - 1 mm

Infračerveneacute zaacuteřeniacute 05 mm - 08 μm

Světlo (viditelneacute zaacuteřeniacute) 08 μm - 04 μm

Ultrafialoveacute zaacuteřeniacute 04 microm - 01 microm

Roumlntgenovo zaacuteřeniacute (X-paprsky) 15 nm - 0005 nm

γ-zaacuteřeniacute pod 00001 nm

Přibližneacute hodnoty ndash individuaacutelniacute vlastnosti zraku různyacutech lidiacute

S v ě t l o

= čaacutest rozsaacutehleacute oblasti elektromagnetickeacuteho zaacuteřeniacute

kterou vniacutemaacuteme zrakem

rarr se zkracujiacuteciacute se vlnovou deacutelkou se zvyšuje frekvence (energie)

Viditelneacute

Vlnoveacute deacutelky světla a relativniacute citlivost oka

Murphy DB Davidson MW (2013) Fundamentals of Light Microscopy and Electronic

Imaging Willey-Blackwell Published 2013 by John Wiley amp Sons Inc Hoboken New Jersey

= zrakovyacute pigment citlivyacute na

světlo nachaacutezejiacuteciacute se v tyčinkaacutech Jodopsin = zrakovyacute pigment citlivyacute na

barvu nachaacutezejiacuteciacute se v čiacutepciacutech

S v ě t l o

Duaacutelniacute charakter světla ndash vlněniacute i proud čaacutestic (fotonů)

Vlnovyacute model světla

vlna elektrickaacute a magnetickaacute (elektromagnetickaacute vlna je tvořena oscilujiacuteciacutem elektrickyacutem a

magnetickyacutem polem na sebe kolmyacutech a nesouciacutech vpřed energii)

Pro uacutečinky světla v mikroskopu je důležitaacute vlna elektrickaacute

= přiacutečneacute vlněniacute

postupneacute kmitaacuteniacute

jednotlivyacutech vedle sebe

ležiacuteciacutech bodů

Scheacutema světla jako elektromagnetickeacute vlny

Obr httpwwwprosoundwebcomarticleprintinvaders_from_

outer_space_electromagnetic_radiation_interference

λ - vlnovaacute deacutelka

(v oblasti svět zaacuteřeniacute

v rozmeziacute od 380 do 780 nm)

určuje barvu světla

a - amplituda

nejvyššiacute hodnota

určuje intenzitu světla

Z hlediska vlnoveacute deacutelky rozlišujeme

polychromatickeacute x monochromatickeacute světlo (selekce pomociacute barevnyacutech filtrů rarr jednotnaacute vlnovaacute deacutelka světlo zeleneacute červeneacute hellip)

Elektrickaacute vlna - sinusoida

Charakterizovaacutena dvěma veličinami

Pazourek 1975

Vlastnosti světla

Rovnoměrneacute šiacuteřeniacute světla ze zaacuteřiacuteciacuteho bodu na všechny strany rarr vlnovaacute plocha tvaru koule

Paprsek ndash směr kteryacutem se vlněniacute šiacuteřiacute a kteryacute je kolmyacute

na vlnoplochu

Pazourek 1975

- paprsek nepolarizovanyacute (A C) ndash kmitaacute v každeacutem

miacutestě a v průběhu času ve všech možnyacutech směrech

kolmyacutech na směr šiacuteřeniacute paprsku

- paprsek polarizovanyacute (B D1 D2) - kmitaacute v jedneacute

rovině přičemž rovina kmitů (vlněniacute) jednoho z nich je

kolmaacute k rovině kmitů druheacuteho

Pazourek 1975

Polarizovaneacute světlo viz

httpswwwyoutubecomwatchv=gP751qpm4n4

Murphy DB Davidson MW (2013) Fundamentals of Light Microscopy and

Electronic Imaging Jonh Wkiley amp Sons Inc Hoboken New Jersey

Osm různyacutech vlnovyacutech forem světla (znaacutezorňujiacuteciacutech různou kvalitu světla)

Odraz a lom světelnyacutech paprsků

v prostřediacutech různeacute hustoty

Důležitaacute charakteristika prostřediacute

index lomu ( n ) (= optickaacute hustota prostřediacute)

c = rychlost světla ve vakuu (stejnaacute pro všechny λ )

v = rychlost světla určiteacute vlnoveacute deacutelky ve zkoumaneacute laacutetce

c

n =

v

zde absolutniacute index lomu

(bezrozměrnaacute fyzikaacutelniacute veličina jeho jednotka je 1)

Rychlost světla (c) určiteacute vlnoveacute

deacutelky v různyacutech prostřediacutech

c ve vakuu

= 300 000 kms

Index lomu (n) některyacutech laacutetek

vzduch (vakuum) helliphellip 100 (vzduch 10002718)

voda helliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 133

plexisklo helliphelliphelliphelliphelliphellip 140 ndash 152

křemenneacute sklo helliphellip hellip 145 (čočka z křemene z Ninive ndash 7 stol přnl)

běžneacute sklo helliphelliphelliphelliphellip 151

cedrovyacute olej helliphelliphelliphelliphellip 151

imerzniacute olej Olympus hellip 1516 pro fluorescenci 1404

kanadskyacute balzaacutem helliphellip 150

krystal NaCl helliphelliphelliphellip 154

korunoveacute sklo helliphelliphelliphellip 145 ndash 156 (sodno-draselneacute bezolovnateacute)

flintoveacute sklo helliphelliphelliphellip 162 ndash 180 (olovnateacute)

diamant helliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 242

Index lomu je vždy většiacute než 100

očniacute čočka hellip 1406

sklivec helliphelliphellip 1336

Odraz světla rovnyacutem zrcadlem (reflexe)

Zaacutekony

1 Paprsek dopadajiacuteciacute kolmice dopadu a paprsek odraženyacute

ležiacute v jedneacute rovině

2 Uacutehel odrazu se rovnaacute uacutehlu dopadu

Odraz a lom paprsku

k

Důležiteacute pro mikroskopii (astronomii)

- neniacute zaacutevislost na vlnoveacute deacutelce světla (λ)

- na rozdiacutel od lomu paprsků se světelneacute

paprsky se odraacutežejiacute stejně

Pazourek 1975

Zaacutekony

1 Paprsek dopadajiacuteciacute kolmice lomu a paprsek lomenyacute ležiacute v teacuteže rovině

Lom světla (refrakce)

2 Při přechodu z prostřediacute opticky řidšiacuteho do prostřediacute opticky hustšiacuteho se paprsek laacuteme ke kolmici (A)

a z prostřediacute opticky hustšiacuteho

do prostřediacute opticky řidšiacuteho

se laacuteme od kolmice (B)

(C a D) ndash uacuteplnyacute odraz při tzv

mezniacutem uacutehlu dopadu paprsku

v přiacutepadě lomu od kolmice (B)

(viz Nikol odrazneacute hranoly světlovodneacute vlaacutekno nebo fluorescenčniacute metoda TIRFM ndash totaacutelniacute odraz exitačniacuteho zaacuteřeniacute)

Pazourek 1975

Svatyacute Kryštof od

švyacutecarskeacuteho maliacuteře

Konrada Witze (kolem 1400ndash1446)

Witz byl jedniacutem z prvniacutech

maliacuteřů kteryacute namaloval

přesnyacute způsob odrazu

světla na vodě

Disperze (rozklad) světla

= důsledek zaacutevislosti rychlosti světla v laacutetkaacutech na frekvenci světla

(λ = c f)

světlo různyacutech barev (λ)

se laacuteme různě

(červeneacute se lomiacute meacuteně než modreacute)

Přiacuteklad disperze (rozkladu) světla

Primaacuterniacute a sekundaacuterniacute duha Severniacute Čechy Foto Pavla Vaacutelovaacute 2010

D u h a

Jeden z mnoha

optickyacutech

jevů (fotometeorů)

v atmosfeacuteře

Rok 312 nl - před bitvou byzantskeacuteho ciacutesaře Konstantina I (272-337) s

konkurenčniacutem ciacutesařem Maxentiem u bran Řiacutema (tzv bitva u Milvijskeacuteho mostu) se

na obloze objevily tři zaacuteřiacuteciacute křiacuteže (halovyacute sloup parheacutelia a parhelickyacute oblouk)

Konstantin bitvu proti přesile vyhraacutel sjednotil řiacuteši a povolil v niacute vyznaacutevat křesťanstviacute

Maleacute halo (22deg) (viz 1) vedlejšiacute slunce (2) a horniacute a dolniacute halovyacute sloup (3)

vznikajiacuteciacute odrazem a lomem světelnyacutech paprsků na krystalciacutech ledu

Lom světla a dějiny

httptmagazineblogsnytimescom20121126halo-effect_r=0

1

3

2 2

3

Ohyb (difrakce) a interference

světla

Foto Pavla Vaacutelovaacute Bukovany 2015 Rozklad světla na CD - světlo žaacuterovky

Rozklad biacuteleacuteho světla na mřiacutežce

Pevnost poznaacuteniacute Olomouc 2015

Foto Pavla Vaacutelovaacute Olomouc 2015

Ohyb (difrakce) a interference

světla

Ohyb (difrakce) a interference

Difrakčniacute obrazec obsahuje světlaacute a tmavaacute miacutesta kteraacute se

střiacutedajiacute - světlaacute miacutesta nazyacutevaacuteme maxima a tmavaacute minima

Interference světla = sklaacutedaacuteniacute světelnyacutech vln

Předpoklad světlo musiacute byacutet koherentniacute

Podmiacutenka koherence

- paprsky musiacute miacutet stejnou frekvenci

- paprsky musiacute byacutet navzaacutejem rovnoběžneacute

- paprsky musiacute miacutet na sobě nezaacutevislyacute draacutehovyacute (faacutezovyacute) rozdiacutel

Vznik koherentniacuteho zaacuteřeniacute

rozděleniacutem světla

- buď odrazem pomociacute zrcadel

- nebo lomem pomociacute hranolů

Foto Pavla Vaacutelovaacute Praha 151 2016

Interference světla

stejnyacute způsob vlněniacute

(faacuteze je vzaacutejemně posunuta o sudeacute

naacutesobky λ2)

vznik interferenčniacuteho maxima

(konstruktivniacute interference)

Interference světla

asynchronniacute vlněniacute

(vzaacutejemně posunutaacute faacuteze

o licheacute naacutesobky λ2)

vznik interferenčniacuteho

minima

(destruktivniacute interference)

rarr zaacuteřeniacute zanikaacute

rarr zeslabeniacute zaacuteřeniacute

Interference dvou vrstev elektromagnetickeacuteho zaacuteřeniacute u Slunce

Čočky ndash zaacutekladniacute součaacutesti

mikroskopu

= průhlednaacute (nejčastěji skleněnaacute) tělesa omezenaacute

vypuklyacutemi nebo vydutyacutemi kulovityacutemi plochami lišiacuteciacute se od sveacuteho okoliacute odlišnyacutem indexem lomu

Zaacutekladniacute typy čoček

spojky (vypukleacute neboli konvexniacute)

rozptylky (vyduteacute konkaacutevniacute)

Pazourek 1975

Optickaacute osa ( o ) prochaacuteziacute středem čočky

Ohnisko ( F ) - bod do ktereacuteho se soustřeďujiacute paprsky probiacutehajiacuteciacute rovnoběžně s optickou osou

- 2 ohniska - předmětoveacute ohnisko ( F )

obrazoveacute ohnisko ( Facute )

- ohniskovaacute vzdaacutelenost ( f )

vzdaacutelenost ohniska od hlavniacute roviny proloženeacute středem čočky

- dvojnaacutesobnaacute ohniskovaacute vzdaacutelenost ( P Pacute )

Obrazovyacute prostor - prostor v němž vznikaacute obraz

Důležiteacute charakteristiky čočky

f

o

hlavniacute rovina

Pazourek 1975

V přiacutepadě velmi tenkeacute čočky

bull Obraz za optickou soustavou

rarr obraz s k u t e č n yacute

Skutečnyacute obraz je možneacute zachytit na stiacuteniacutetko

nebo na fotografickou desku neskutečnyacute nikoliv

bull Obraz před soustavou

rarr obraz n e s k u t e č n yacute (zdaacutenlivyacute virtuaacutelniacute)

Obraz skutečnyacute a neskutečnyacute

A ndash předmět Aacute- obraz předmětu

Upraveno podle Pazourek 1975

Francouz Augustin Jean Fresnel (1788-1827) [frenel]

Fresnelova čočka [frenelova]

- plochyacute tvar (zachovaacuteny pouze čaacutesti ktereacute měniacute směr chodu světelnyacutech paprsků)

- vyacuterazně nižšiacute hmotnost při zachovaacuteniacute podobnyacutech parametrů

Využitiacute infračidla pohybu semafory světlomety (majaacuteky) a reflektory (světla aut

divadelniacutech a filmovyacutech osvětlovaciacutech zařiacutezeniacute) zpětneacute projektory slunečniacute kolektory

na zaacutekladě tohoto principu takeacute vyacuteroba 3D displejů k mobilniacutem telefonům a televiziacutem

httpwwwmffcuniczverejnostzpravicky03_lupahtm

čočka na majaacuteku

Čočky v budoucnosti

Pokus o vyacuterobu tzv dokonaleacute čočky

Prototyp - upraveneacute tzv Maxwellovo rybiacute oko

- paprsky světla se v něm pohybujiacute po kružniciacutech a

na rozdiacutel od běžnyacutech čoček se při zobrazeniacute využijiacute

všechny paprsky

- superčočky využiacutevajiacute geometrie k tomu aby se světlo

soustředilo do oblasti menšiacute než je jeho vlnovaacute deacutelka

(zatiacutem se neviacute jak do čočky vyhovujiacuteciacutem způsobem

doveacutest světlo)

Využitiacute v budoucnu

mimo jineacute v pozorovaacuteniacute živyacutech buněk při velkeacutem zvětšeniacute

pomociacute obyčejneacuteho světla bez jejich narušeniacute

Viacutece viz Plaacutešek J Mikroskopy se superčočkami httpwwwvesmircz | Vesmiacuter 91 531 zaacuteřiacute 2012

Hranoly

- doplňky optickyacutech systeacutemů

- většinou tvar rovnostranneacuteho trojuacutehelniacuteka

- využiacutevajiacute uacuteplneacuteho odrazu

Funkce

- změna chodu paprsků pod různyacutemi uacutehly

- rozdvojeniacute paprsků

Pazourek 1975

Různeacute typy odraznyacutech hranolů

Hranoly

Různeacute typy hranolů

httplaserykvalitneczimagestext_25_zakladyoptiky1odrazne_hranolyjpg

Viz dichroickeacute zrcadlo u fluorescenčniacuteho mikroskopu

Chod paprsků v binokulaacuterniacutem tubusu

Pazourek 1975

Nikol = hranol z islandskeacuteho vaacutepence

rarr polarizace světla

Dvojlomnyacute vaacutepencovyacute

krystal

ř ndash paprsek řaacutednyacute (zanikaacute na začerněneacute ploše)

mř ndash paprsek mimořaacutednyacute (lineaacuterně polarizovanyacute

využit k osvětleniacute)

začerněnaacute plocha

Nikol

Pazourek 1975

vzduchovaacute štěrbina

- rychlost světla je

v různyacutech směrech různaacute

- uacutehel paprsku řaacutedneacuteho a

mimořaacutedneacuteho je odlišnyacute

(u Vikingů - slunečniacute kaacutemen

soacutelarsteinn)

Chod paprsků ve světlovodneacutem vlaacuteknu

Princip uacuteplnyacute odraz paprsku

- uvnitř skleněneacuteho vlaacutekna je opticky hustšiacute prostřediacute

- nutnost dostatečně silneacuteho světelneacuteho zdroje

Světlovodnaacute vlaacutekna

Pazourek 1975

Širokeacute využitiacute v praxi optickeacute kabely ndash přenos signaacutelů ve sdělovaciacute technice

světlovody umožňujiacuteciacute veacutest denniacute světlo vedeniacute světla u stereolup endoskopů hellip

Page 26: Světelná a elektronová mikroskopie...(AMF – Atomic Force Miroscope) - skenování povrchu materiálu pomocí hrotu zavěšeném na pružném výkyvném raménku, který je přitahován

Laserovyacute fluorescenčniacute mikroskop bdquoLight Sheetldquo Centrum regionu Hanaacute pro biotechnologickyacute a zemědělskyacute vyacutezkum Odděleniacute buněčneacute biologie

21 stol

21 stol

Digitaacutelniacute holografickyacute mikroskop firmy Lynceacutee Tec

Důležitaacute data při rozvoji moderniacute světelneacute mikroskopie

1847 - Zahaacutejeniacute vyacuteroby mikroskopů firmou Carl Zeiss v Jeně

1903 - Ultramikroskop (Richard Zsigmondy NC 1925)

1911 - Fluorescenčniacute mikroskop (Carl Reichert)

1935 - Faacutezovyacute kontrast (Fritz Zernike NC 1953)

1955 - Diferenciaacutelniacute interferenčniacute kontrast (DIC ndash Nomarski)

1968 - Rastrovaciacute tandemovyacute konfokaacutelniacute mikroskop (TSCM)

1978 - Laserovyacute konfokaacutelniacute rastrovaciacute mikroskop

1994 - Princip STED mikroskopie (S W Hell NC 2014)

(Stimulated Emission Depletion ndash redukce fluorescence stimulovanou emisiacute)

po roce 2000 - rozvoj tzv superrozlišovaciacute mikroskopie

2006 - Super-resolučniacute fluorescenčniacute mikroskop (Eric Betzig

Stefan W Hell a William E Moerner NC za chemii 2014)

NC = Nobelova cena

30 leacuteta 20 stoletiacute

ndash hranice vyacutevoje optickeacuteho (paprskoveacuteho) mikroskopu

(hranice rozlišeniacute světelneacuteho mikroskopu je diacuteky velikosti deacutelky světla 02 microm)

- dalšiacute zvětšovaacuteniacute pozorovanyacutech objektů na jineacutem principu

- miacutesto světelneacuteho paprsku elektronovyacute paprsek

(= tok rychlyacutech elektronů)

- miacutesto skleněneacute čočky magnetickaacute čočka

1931 - Ernst Ruska Max Knoll

prvniacute elektronovyacute mikroskop

tzv prozařovaciacute transmisniacute EM

(TEM ndash Transmission Electron Microscope)

- originaacutelniacute zvětšeniacute 1 000 - 250 000x

Ernst Ruska (1906-1988)

1942 - rastrovaciacute EM

(SEM ndash Scanning Electron Microscope) - postupneacute bombardovaacuteniacute vzorku elektrony

- zvětšeniacute až 30 000x

EM UacuteMG AV ČR Praha-Krč

FEI ndash TECHNAIG2TEM + kryozařiacutezeniacute

200 kV (λ el = 00025 nm)

RS 01 nm

prvkovaacute analyacuteza vzorků

zařiacutezeniacute pro

prvkovou analyacutezu

vzorků

Foto Pavla Vaacutelovaacute 2010

Brněnštiacute vědci z Uacutestavu přiacutestrojoveacute techniky AV ČR (UacutePT) a Mendelovy

univerzity představili novou metodu pozorovaacuteniacute rostlinnyacutech vzorků v jejich

přirozeneacutem stavu (za využitiacute kryoprotektiv)

Viacutece na httpe-svete15cztechnikacesti-vedci-posunuli-hranice-elektronove-mikroskopie-1174818

Enviromentaacutelniacute rastrovaciacute elektronovyacute mikroskop Aquasem II

TEM TITAN FEI Company Mgr Klaacutera Čeacutepe PhD

Vysokorozlišovaciacute transmisniacute elektronovyacute mikroskop

schopnyacute nahleacutednout do struktury materiaacutelů až na uacuterovni atomů

a současně přesně zmapovat jejich chemickeacute složeniacute

Regionaacutelniacute centrum pokročilyacutech

materiaacutelů (RCPTM)

Odd uhliacutekoveacute nanostruktury

PřF UP OL

Vysokorozlišovaciacute transmisniacute

elektronovyacute mikroskop TITAN (FEI)

Foto Pavla Vaacutelovaacute 2015

Transmisniacute elektronovyacute

mikroskop Jeol

Regionaacutelniacute centrum pokročilyacutech materiaacutelů (RCPTM)

Odd uhliacutekoveacute nanostruktury PřF UP OL

Neoptickeacute mikroskopy

1981

Řaacutedkovaciacute tunelovyacute mikroskop (STM ndash Scanning Tunnelling Microscope)

- mapovaacuteniacute povrchu pomociacute pohybu vodiveacuteho hrotu nad vodivyacutem povrchem sledovaneacuteho materiaacutelu

1986

Mikroskop atomaacuterniacutech sil (AMF ndash Atomic Force Miroscope)

- skenovaacuteniacute povrchu materiaacutelu pomociacute hrotu zavěšeneacutem na pružneacutem vyacutekyvneacutem rameacutenku kteryacute je přitahovaacuten elektrostatickyacutemi a Van der Walsovyacutemi silami

Rozlišeniacute v řaacutedech pikometrů (10-12 m) ndash rozeznaacuteniacute struktur

jednotlivyacutech atomů

O p t i c k eacute p r i n c i p y

světelneacute mikroskopie

Reichl J Všetička M Encyklopedie fyziky [online] copy2006-2014

[vid 2014] Dostupneacute z httpfyzikajreichlcommainarticleview431-optika Lepil O (2013) Fyzika pro gymnaacutezia Optika Prometheus Praha 4 přepracovaneacute vydaacuteniacute

Murphy DB Davidson MW (2013) Fundamentals of Light

Microscopy and Electronic Imaging Willey-Blackwell Published

2013 by John Wiley amp Sons Inc Hoboken New Jersey

S v ě t l o

= čaacutest rozsaacutehleacute oblasti elektromagnetickeacuteho zaacuteřeniacute

kterou vniacutemaacuteme zrakem

Rozhlasoveacute a raacutedioveacute vlny 250 km - 1 mm

Infračerveneacute zaacuteřeniacute 05 mm - 08 μm

Světlo (viditelneacute zaacuteřeniacute) 08 μm - 04 μm

Ultrafialoveacute zaacuteřeniacute 04 microm - 01 microm

Roumlntgenovo zaacuteřeniacute (X-paprsky) 15 nm - 0005 nm

γ-zaacuteřeniacute pod 00001 nm

Přibližneacute hodnoty ndash individuaacutelniacute vlastnosti zraku různyacutech lidiacute

S v ě t l o

= čaacutest rozsaacutehleacute oblasti elektromagnetickeacuteho zaacuteřeniacute

kterou vniacutemaacuteme zrakem

rarr se zkracujiacuteciacute se vlnovou deacutelkou se zvyšuje frekvence (energie)

Viditelneacute

Vlnoveacute deacutelky světla a relativniacute citlivost oka

Murphy DB Davidson MW (2013) Fundamentals of Light Microscopy and Electronic

Imaging Willey-Blackwell Published 2013 by John Wiley amp Sons Inc Hoboken New Jersey

= zrakovyacute pigment citlivyacute na

světlo nachaacutezejiacuteciacute se v tyčinkaacutech Jodopsin = zrakovyacute pigment citlivyacute na

barvu nachaacutezejiacuteciacute se v čiacutepciacutech

S v ě t l o

Duaacutelniacute charakter světla ndash vlněniacute i proud čaacutestic (fotonů)

Vlnovyacute model světla

vlna elektrickaacute a magnetickaacute (elektromagnetickaacute vlna je tvořena oscilujiacuteciacutem elektrickyacutem a

magnetickyacutem polem na sebe kolmyacutech a nesouciacutech vpřed energii)

Pro uacutečinky světla v mikroskopu je důležitaacute vlna elektrickaacute

= přiacutečneacute vlněniacute

postupneacute kmitaacuteniacute

jednotlivyacutech vedle sebe

ležiacuteciacutech bodů

Scheacutema světla jako elektromagnetickeacute vlny

Obr httpwwwprosoundwebcomarticleprintinvaders_from_

outer_space_electromagnetic_radiation_interference

λ - vlnovaacute deacutelka

(v oblasti svět zaacuteřeniacute

v rozmeziacute od 380 do 780 nm)

určuje barvu světla

a - amplituda

nejvyššiacute hodnota

určuje intenzitu světla

Z hlediska vlnoveacute deacutelky rozlišujeme

polychromatickeacute x monochromatickeacute světlo (selekce pomociacute barevnyacutech filtrů rarr jednotnaacute vlnovaacute deacutelka světlo zeleneacute červeneacute hellip)

Elektrickaacute vlna - sinusoida

Charakterizovaacutena dvěma veličinami

Pazourek 1975

Vlastnosti světla

Rovnoměrneacute šiacuteřeniacute světla ze zaacuteřiacuteciacuteho bodu na všechny strany rarr vlnovaacute plocha tvaru koule

Paprsek ndash směr kteryacutem se vlněniacute šiacuteřiacute a kteryacute je kolmyacute

na vlnoplochu

Pazourek 1975

- paprsek nepolarizovanyacute (A C) ndash kmitaacute v každeacutem

miacutestě a v průběhu času ve všech možnyacutech směrech

kolmyacutech na směr šiacuteřeniacute paprsku

- paprsek polarizovanyacute (B D1 D2) - kmitaacute v jedneacute

rovině přičemž rovina kmitů (vlněniacute) jednoho z nich je

kolmaacute k rovině kmitů druheacuteho

Pazourek 1975

Polarizovaneacute světlo viz

httpswwwyoutubecomwatchv=gP751qpm4n4

Murphy DB Davidson MW (2013) Fundamentals of Light Microscopy and

Electronic Imaging Jonh Wkiley amp Sons Inc Hoboken New Jersey

Osm různyacutech vlnovyacutech forem světla (znaacutezorňujiacuteciacutech různou kvalitu světla)

Odraz a lom světelnyacutech paprsků

v prostřediacutech různeacute hustoty

Důležitaacute charakteristika prostřediacute

index lomu ( n ) (= optickaacute hustota prostřediacute)

c = rychlost světla ve vakuu (stejnaacute pro všechny λ )

v = rychlost světla určiteacute vlnoveacute deacutelky ve zkoumaneacute laacutetce

c

n =

v

zde absolutniacute index lomu

(bezrozměrnaacute fyzikaacutelniacute veličina jeho jednotka je 1)

Rychlost světla (c) určiteacute vlnoveacute

deacutelky v různyacutech prostřediacutech

c ve vakuu

= 300 000 kms

Index lomu (n) některyacutech laacutetek

vzduch (vakuum) helliphellip 100 (vzduch 10002718)

voda helliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 133

plexisklo helliphelliphelliphelliphelliphellip 140 ndash 152

křemenneacute sklo helliphellip hellip 145 (čočka z křemene z Ninive ndash 7 stol přnl)

běžneacute sklo helliphelliphelliphelliphellip 151

cedrovyacute olej helliphelliphelliphelliphellip 151

imerzniacute olej Olympus hellip 1516 pro fluorescenci 1404

kanadskyacute balzaacutem helliphellip 150

krystal NaCl helliphelliphelliphellip 154

korunoveacute sklo helliphelliphelliphellip 145 ndash 156 (sodno-draselneacute bezolovnateacute)

flintoveacute sklo helliphelliphelliphellip 162 ndash 180 (olovnateacute)

diamant helliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 242

Index lomu je vždy většiacute než 100

očniacute čočka hellip 1406

sklivec helliphelliphellip 1336

Odraz světla rovnyacutem zrcadlem (reflexe)

Zaacutekony

1 Paprsek dopadajiacuteciacute kolmice dopadu a paprsek odraženyacute

ležiacute v jedneacute rovině

2 Uacutehel odrazu se rovnaacute uacutehlu dopadu

Odraz a lom paprsku

k

Důležiteacute pro mikroskopii (astronomii)

- neniacute zaacutevislost na vlnoveacute deacutelce světla (λ)

- na rozdiacutel od lomu paprsků se světelneacute

paprsky se odraacutežejiacute stejně

Pazourek 1975

Zaacutekony

1 Paprsek dopadajiacuteciacute kolmice lomu a paprsek lomenyacute ležiacute v teacuteže rovině

Lom světla (refrakce)

2 Při přechodu z prostřediacute opticky řidšiacuteho do prostřediacute opticky hustšiacuteho se paprsek laacuteme ke kolmici (A)

a z prostřediacute opticky hustšiacuteho

do prostřediacute opticky řidšiacuteho

se laacuteme od kolmice (B)

(C a D) ndash uacuteplnyacute odraz při tzv

mezniacutem uacutehlu dopadu paprsku

v přiacutepadě lomu od kolmice (B)

(viz Nikol odrazneacute hranoly světlovodneacute vlaacutekno nebo fluorescenčniacute metoda TIRFM ndash totaacutelniacute odraz exitačniacuteho zaacuteřeniacute)

Pazourek 1975

Svatyacute Kryštof od

švyacutecarskeacuteho maliacuteře

Konrada Witze (kolem 1400ndash1446)

Witz byl jedniacutem z prvniacutech

maliacuteřů kteryacute namaloval

přesnyacute způsob odrazu

světla na vodě

Disperze (rozklad) světla

= důsledek zaacutevislosti rychlosti světla v laacutetkaacutech na frekvenci světla

(λ = c f)

světlo různyacutech barev (λ)

se laacuteme různě

(červeneacute se lomiacute meacuteně než modreacute)

Přiacuteklad disperze (rozkladu) světla

Primaacuterniacute a sekundaacuterniacute duha Severniacute Čechy Foto Pavla Vaacutelovaacute 2010

D u h a

Jeden z mnoha

optickyacutech

jevů (fotometeorů)

v atmosfeacuteře

Rok 312 nl - před bitvou byzantskeacuteho ciacutesaře Konstantina I (272-337) s

konkurenčniacutem ciacutesařem Maxentiem u bran Řiacutema (tzv bitva u Milvijskeacuteho mostu) se

na obloze objevily tři zaacuteřiacuteciacute křiacuteže (halovyacute sloup parheacutelia a parhelickyacute oblouk)

Konstantin bitvu proti přesile vyhraacutel sjednotil řiacuteši a povolil v niacute vyznaacutevat křesťanstviacute

Maleacute halo (22deg) (viz 1) vedlejšiacute slunce (2) a horniacute a dolniacute halovyacute sloup (3)

vznikajiacuteciacute odrazem a lomem světelnyacutech paprsků na krystalciacutech ledu

Lom světla a dějiny

httptmagazineblogsnytimescom20121126halo-effect_r=0

1

3

2 2

3

Ohyb (difrakce) a interference

světla

Foto Pavla Vaacutelovaacute Bukovany 2015 Rozklad světla na CD - světlo žaacuterovky

Rozklad biacuteleacuteho světla na mřiacutežce

Pevnost poznaacuteniacute Olomouc 2015

Foto Pavla Vaacutelovaacute Olomouc 2015

Ohyb (difrakce) a interference

světla

Ohyb (difrakce) a interference

Difrakčniacute obrazec obsahuje světlaacute a tmavaacute miacutesta kteraacute se

střiacutedajiacute - světlaacute miacutesta nazyacutevaacuteme maxima a tmavaacute minima

Interference světla = sklaacutedaacuteniacute světelnyacutech vln

Předpoklad světlo musiacute byacutet koherentniacute

Podmiacutenka koherence

- paprsky musiacute miacutet stejnou frekvenci

- paprsky musiacute byacutet navzaacutejem rovnoběžneacute

- paprsky musiacute miacutet na sobě nezaacutevislyacute draacutehovyacute (faacutezovyacute) rozdiacutel

Vznik koherentniacuteho zaacuteřeniacute

rozděleniacutem světla

- buď odrazem pomociacute zrcadel

- nebo lomem pomociacute hranolů

Foto Pavla Vaacutelovaacute Praha 151 2016

Interference světla

stejnyacute způsob vlněniacute

(faacuteze je vzaacutejemně posunuta o sudeacute

naacutesobky λ2)

vznik interferenčniacuteho maxima

(konstruktivniacute interference)

Interference světla

asynchronniacute vlněniacute

(vzaacutejemně posunutaacute faacuteze

o licheacute naacutesobky λ2)

vznik interferenčniacuteho

minima

(destruktivniacute interference)

rarr zaacuteřeniacute zanikaacute

rarr zeslabeniacute zaacuteřeniacute

Interference dvou vrstev elektromagnetickeacuteho zaacuteřeniacute u Slunce

Čočky ndash zaacutekladniacute součaacutesti

mikroskopu

= průhlednaacute (nejčastěji skleněnaacute) tělesa omezenaacute

vypuklyacutemi nebo vydutyacutemi kulovityacutemi plochami lišiacuteciacute se od sveacuteho okoliacute odlišnyacutem indexem lomu

Zaacutekladniacute typy čoček

spojky (vypukleacute neboli konvexniacute)

rozptylky (vyduteacute konkaacutevniacute)

Pazourek 1975

Optickaacute osa ( o ) prochaacuteziacute středem čočky

Ohnisko ( F ) - bod do ktereacuteho se soustřeďujiacute paprsky probiacutehajiacuteciacute rovnoběžně s optickou osou

- 2 ohniska - předmětoveacute ohnisko ( F )

obrazoveacute ohnisko ( Facute )

- ohniskovaacute vzdaacutelenost ( f )

vzdaacutelenost ohniska od hlavniacute roviny proloženeacute středem čočky

- dvojnaacutesobnaacute ohniskovaacute vzdaacutelenost ( P Pacute )

Obrazovyacute prostor - prostor v němž vznikaacute obraz

Důležiteacute charakteristiky čočky

f

o

hlavniacute rovina

Pazourek 1975

V přiacutepadě velmi tenkeacute čočky

bull Obraz za optickou soustavou

rarr obraz s k u t e č n yacute

Skutečnyacute obraz je možneacute zachytit na stiacuteniacutetko

nebo na fotografickou desku neskutečnyacute nikoliv

bull Obraz před soustavou

rarr obraz n e s k u t e č n yacute (zdaacutenlivyacute virtuaacutelniacute)

Obraz skutečnyacute a neskutečnyacute

A ndash předmět Aacute- obraz předmětu

Upraveno podle Pazourek 1975

Francouz Augustin Jean Fresnel (1788-1827) [frenel]

Fresnelova čočka [frenelova]

- plochyacute tvar (zachovaacuteny pouze čaacutesti ktereacute měniacute směr chodu světelnyacutech paprsků)

- vyacuterazně nižšiacute hmotnost při zachovaacuteniacute podobnyacutech parametrů

Využitiacute infračidla pohybu semafory světlomety (majaacuteky) a reflektory (světla aut

divadelniacutech a filmovyacutech osvětlovaciacutech zařiacutezeniacute) zpětneacute projektory slunečniacute kolektory

na zaacutekladě tohoto principu takeacute vyacuteroba 3D displejů k mobilniacutem telefonům a televiziacutem

httpwwwmffcuniczverejnostzpravicky03_lupahtm

čočka na majaacuteku

Čočky v budoucnosti

Pokus o vyacuterobu tzv dokonaleacute čočky

Prototyp - upraveneacute tzv Maxwellovo rybiacute oko

- paprsky světla se v něm pohybujiacute po kružniciacutech a

na rozdiacutel od běžnyacutech čoček se při zobrazeniacute využijiacute

všechny paprsky

- superčočky využiacutevajiacute geometrie k tomu aby se světlo

soustředilo do oblasti menšiacute než je jeho vlnovaacute deacutelka

(zatiacutem se neviacute jak do čočky vyhovujiacuteciacutem způsobem

doveacutest světlo)

Využitiacute v budoucnu

mimo jineacute v pozorovaacuteniacute živyacutech buněk při velkeacutem zvětšeniacute

pomociacute obyčejneacuteho světla bez jejich narušeniacute

Viacutece viz Plaacutešek J Mikroskopy se superčočkami httpwwwvesmircz | Vesmiacuter 91 531 zaacuteřiacute 2012

Hranoly

- doplňky optickyacutech systeacutemů

- většinou tvar rovnostranneacuteho trojuacutehelniacuteka

- využiacutevajiacute uacuteplneacuteho odrazu

Funkce

- změna chodu paprsků pod různyacutemi uacutehly

- rozdvojeniacute paprsků

Pazourek 1975

Různeacute typy odraznyacutech hranolů

Hranoly

Různeacute typy hranolů

httplaserykvalitneczimagestext_25_zakladyoptiky1odrazne_hranolyjpg

Viz dichroickeacute zrcadlo u fluorescenčniacuteho mikroskopu

Chod paprsků v binokulaacuterniacutem tubusu

Pazourek 1975

Nikol = hranol z islandskeacuteho vaacutepence

rarr polarizace světla

Dvojlomnyacute vaacutepencovyacute

krystal

ř ndash paprsek řaacutednyacute (zanikaacute na začerněneacute ploše)

mř ndash paprsek mimořaacutednyacute (lineaacuterně polarizovanyacute

využit k osvětleniacute)

začerněnaacute plocha

Nikol

Pazourek 1975

vzduchovaacute štěrbina

- rychlost světla je

v různyacutech směrech různaacute

- uacutehel paprsku řaacutedneacuteho a

mimořaacutedneacuteho je odlišnyacute

(u Vikingů - slunečniacute kaacutemen

soacutelarsteinn)

Chod paprsků ve světlovodneacutem vlaacuteknu

Princip uacuteplnyacute odraz paprsku

- uvnitř skleněneacuteho vlaacutekna je opticky hustšiacute prostřediacute

- nutnost dostatečně silneacuteho světelneacuteho zdroje

Světlovodnaacute vlaacutekna

Pazourek 1975

Širokeacute využitiacute v praxi optickeacute kabely ndash přenos signaacutelů ve sdělovaciacute technice

světlovody umožňujiacuteciacute veacutest denniacute světlo vedeniacute světla u stereolup endoskopů hellip

Page 27: Světelná a elektronová mikroskopie...(AMF – Atomic Force Miroscope) - skenování povrchu materiálu pomocí hrotu zavěšeném na pružném výkyvném raménku, který je přitahován

21 stol

Digitaacutelniacute holografickyacute mikroskop firmy Lynceacutee Tec

Důležitaacute data při rozvoji moderniacute světelneacute mikroskopie

1847 - Zahaacutejeniacute vyacuteroby mikroskopů firmou Carl Zeiss v Jeně

1903 - Ultramikroskop (Richard Zsigmondy NC 1925)

1911 - Fluorescenčniacute mikroskop (Carl Reichert)

1935 - Faacutezovyacute kontrast (Fritz Zernike NC 1953)

1955 - Diferenciaacutelniacute interferenčniacute kontrast (DIC ndash Nomarski)

1968 - Rastrovaciacute tandemovyacute konfokaacutelniacute mikroskop (TSCM)

1978 - Laserovyacute konfokaacutelniacute rastrovaciacute mikroskop

1994 - Princip STED mikroskopie (S W Hell NC 2014)

(Stimulated Emission Depletion ndash redukce fluorescence stimulovanou emisiacute)

po roce 2000 - rozvoj tzv superrozlišovaciacute mikroskopie

2006 - Super-resolučniacute fluorescenčniacute mikroskop (Eric Betzig

Stefan W Hell a William E Moerner NC za chemii 2014)

NC = Nobelova cena

30 leacuteta 20 stoletiacute

ndash hranice vyacutevoje optickeacuteho (paprskoveacuteho) mikroskopu

(hranice rozlišeniacute světelneacuteho mikroskopu je diacuteky velikosti deacutelky světla 02 microm)

- dalšiacute zvětšovaacuteniacute pozorovanyacutech objektů na jineacutem principu

- miacutesto světelneacuteho paprsku elektronovyacute paprsek

(= tok rychlyacutech elektronů)

- miacutesto skleněneacute čočky magnetickaacute čočka

1931 - Ernst Ruska Max Knoll

prvniacute elektronovyacute mikroskop

tzv prozařovaciacute transmisniacute EM

(TEM ndash Transmission Electron Microscope)

- originaacutelniacute zvětšeniacute 1 000 - 250 000x

Ernst Ruska (1906-1988)

1942 - rastrovaciacute EM

(SEM ndash Scanning Electron Microscope) - postupneacute bombardovaacuteniacute vzorku elektrony

- zvětšeniacute až 30 000x

EM UacuteMG AV ČR Praha-Krč

FEI ndash TECHNAIG2TEM + kryozařiacutezeniacute

200 kV (λ el = 00025 nm)

RS 01 nm

prvkovaacute analyacuteza vzorků

zařiacutezeniacute pro

prvkovou analyacutezu

vzorků

Foto Pavla Vaacutelovaacute 2010

Brněnštiacute vědci z Uacutestavu přiacutestrojoveacute techniky AV ČR (UacutePT) a Mendelovy

univerzity představili novou metodu pozorovaacuteniacute rostlinnyacutech vzorků v jejich

přirozeneacutem stavu (za využitiacute kryoprotektiv)

Viacutece na httpe-svete15cztechnikacesti-vedci-posunuli-hranice-elektronove-mikroskopie-1174818

Enviromentaacutelniacute rastrovaciacute elektronovyacute mikroskop Aquasem II

TEM TITAN FEI Company Mgr Klaacutera Čeacutepe PhD

Vysokorozlišovaciacute transmisniacute elektronovyacute mikroskop

schopnyacute nahleacutednout do struktury materiaacutelů až na uacuterovni atomů

a současně přesně zmapovat jejich chemickeacute složeniacute

Regionaacutelniacute centrum pokročilyacutech

materiaacutelů (RCPTM)

Odd uhliacutekoveacute nanostruktury

PřF UP OL

Vysokorozlišovaciacute transmisniacute

elektronovyacute mikroskop TITAN (FEI)

Foto Pavla Vaacutelovaacute 2015

Transmisniacute elektronovyacute

mikroskop Jeol

Regionaacutelniacute centrum pokročilyacutech materiaacutelů (RCPTM)

Odd uhliacutekoveacute nanostruktury PřF UP OL

Neoptickeacute mikroskopy

1981

Řaacutedkovaciacute tunelovyacute mikroskop (STM ndash Scanning Tunnelling Microscope)

- mapovaacuteniacute povrchu pomociacute pohybu vodiveacuteho hrotu nad vodivyacutem povrchem sledovaneacuteho materiaacutelu

1986

Mikroskop atomaacuterniacutech sil (AMF ndash Atomic Force Miroscope)

- skenovaacuteniacute povrchu materiaacutelu pomociacute hrotu zavěšeneacutem na pružneacutem vyacutekyvneacutem rameacutenku kteryacute je přitahovaacuten elektrostatickyacutemi a Van der Walsovyacutemi silami

Rozlišeniacute v řaacutedech pikometrů (10-12 m) ndash rozeznaacuteniacute struktur

jednotlivyacutech atomů

O p t i c k eacute p r i n c i p y

světelneacute mikroskopie

Reichl J Všetička M Encyklopedie fyziky [online] copy2006-2014

[vid 2014] Dostupneacute z httpfyzikajreichlcommainarticleview431-optika Lepil O (2013) Fyzika pro gymnaacutezia Optika Prometheus Praha 4 přepracovaneacute vydaacuteniacute

Murphy DB Davidson MW (2013) Fundamentals of Light

Microscopy and Electronic Imaging Willey-Blackwell Published

2013 by John Wiley amp Sons Inc Hoboken New Jersey

S v ě t l o

= čaacutest rozsaacutehleacute oblasti elektromagnetickeacuteho zaacuteřeniacute

kterou vniacutemaacuteme zrakem

Rozhlasoveacute a raacutedioveacute vlny 250 km - 1 mm

Infračerveneacute zaacuteřeniacute 05 mm - 08 μm

Světlo (viditelneacute zaacuteřeniacute) 08 μm - 04 μm

Ultrafialoveacute zaacuteřeniacute 04 microm - 01 microm

Roumlntgenovo zaacuteřeniacute (X-paprsky) 15 nm - 0005 nm

γ-zaacuteřeniacute pod 00001 nm

Přibližneacute hodnoty ndash individuaacutelniacute vlastnosti zraku různyacutech lidiacute

S v ě t l o

= čaacutest rozsaacutehleacute oblasti elektromagnetickeacuteho zaacuteřeniacute

kterou vniacutemaacuteme zrakem

rarr se zkracujiacuteciacute se vlnovou deacutelkou se zvyšuje frekvence (energie)

Viditelneacute

Vlnoveacute deacutelky světla a relativniacute citlivost oka

Murphy DB Davidson MW (2013) Fundamentals of Light Microscopy and Electronic

Imaging Willey-Blackwell Published 2013 by John Wiley amp Sons Inc Hoboken New Jersey

= zrakovyacute pigment citlivyacute na

světlo nachaacutezejiacuteciacute se v tyčinkaacutech Jodopsin = zrakovyacute pigment citlivyacute na

barvu nachaacutezejiacuteciacute se v čiacutepciacutech

S v ě t l o

Duaacutelniacute charakter světla ndash vlněniacute i proud čaacutestic (fotonů)

Vlnovyacute model světla

vlna elektrickaacute a magnetickaacute (elektromagnetickaacute vlna je tvořena oscilujiacuteciacutem elektrickyacutem a

magnetickyacutem polem na sebe kolmyacutech a nesouciacutech vpřed energii)

Pro uacutečinky světla v mikroskopu je důležitaacute vlna elektrickaacute

= přiacutečneacute vlněniacute

postupneacute kmitaacuteniacute

jednotlivyacutech vedle sebe

ležiacuteciacutech bodů

Scheacutema světla jako elektromagnetickeacute vlny

Obr httpwwwprosoundwebcomarticleprintinvaders_from_

outer_space_electromagnetic_radiation_interference

λ - vlnovaacute deacutelka

(v oblasti svět zaacuteřeniacute

v rozmeziacute od 380 do 780 nm)

určuje barvu světla

a - amplituda

nejvyššiacute hodnota

určuje intenzitu světla

Z hlediska vlnoveacute deacutelky rozlišujeme

polychromatickeacute x monochromatickeacute světlo (selekce pomociacute barevnyacutech filtrů rarr jednotnaacute vlnovaacute deacutelka světlo zeleneacute červeneacute hellip)

Elektrickaacute vlna - sinusoida

Charakterizovaacutena dvěma veličinami

Pazourek 1975

Vlastnosti světla

Rovnoměrneacute šiacuteřeniacute světla ze zaacuteřiacuteciacuteho bodu na všechny strany rarr vlnovaacute plocha tvaru koule

Paprsek ndash směr kteryacutem se vlněniacute šiacuteřiacute a kteryacute je kolmyacute

na vlnoplochu

Pazourek 1975

- paprsek nepolarizovanyacute (A C) ndash kmitaacute v každeacutem

miacutestě a v průběhu času ve všech možnyacutech směrech

kolmyacutech na směr šiacuteřeniacute paprsku

- paprsek polarizovanyacute (B D1 D2) - kmitaacute v jedneacute

rovině přičemž rovina kmitů (vlněniacute) jednoho z nich je

kolmaacute k rovině kmitů druheacuteho

Pazourek 1975

Polarizovaneacute světlo viz

httpswwwyoutubecomwatchv=gP751qpm4n4

Murphy DB Davidson MW (2013) Fundamentals of Light Microscopy and

Electronic Imaging Jonh Wkiley amp Sons Inc Hoboken New Jersey

Osm různyacutech vlnovyacutech forem světla (znaacutezorňujiacuteciacutech různou kvalitu světla)

Odraz a lom světelnyacutech paprsků

v prostřediacutech různeacute hustoty

Důležitaacute charakteristika prostřediacute

index lomu ( n ) (= optickaacute hustota prostřediacute)

c = rychlost světla ve vakuu (stejnaacute pro všechny λ )

v = rychlost světla určiteacute vlnoveacute deacutelky ve zkoumaneacute laacutetce

c

n =

v

zde absolutniacute index lomu

(bezrozměrnaacute fyzikaacutelniacute veličina jeho jednotka je 1)

Rychlost světla (c) určiteacute vlnoveacute

deacutelky v různyacutech prostřediacutech

c ve vakuu

= 300 000 kms

Index lomu (n) některyacutech laacutetek

vzduch (vakuum) helliphellip 100 (vzduch 10002718)

voda helliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 133

plexisklo helliphelliphelliphelliphelliphellip 140 ndash 152

křemenneacute sklo helliphellip hellip 145 (čočka z křemene z Ninive ndash 7 stol přnl)

běžneacute sklo helliphelliphelliphelliphellip 151

cedrovyacute olej helliphelliphelliphelliphellip 151

imerzniacute olej Olympus hellip 1516 pro fluorescenci 1404

kanadskyacute balzaacutem helliphellip 150

krystal NaCl helliphelliphelliphellip 154

korunoveacute sklo helliphelliphelliphellip 145 ndash 156 (sodno-draselneacute bezolovnateacute)

flintoveacute sklo helliphelliphelliphellip 162 ndash 180 (olovnateacute)

diamant helliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 242

Index lomu je vždy většiacute než 100

očniacute čočka hellip 1406

sklivec helliphelliphellip 1336

Odraz světla rovnyacutem zrcadlem (reflexe)

Zaacutekony

1 Paprsek dopadajiacuteciacute kolmice dopadu a paprsek odraženyacute

ležiacute v jedneacute rovině

2 Uacutehel odrazu se rovnaacute uacutehlu dopadu

Odraz a lom paprsku

k

Důležiteacute pro mikroskopii (astronomii)

- neniacute zaacutevislost na vlnoveacute deacutelce světla (λ)

- na rozdiacutel od lomu paprsků se světelneacute

paprsky se odraacutežejiacute stejně

Pazourek 1975

Zaacutekony

1 Paprsek dopadajiacuteciacute kolmice lomu a paprsek lomenyacute ležiacute v teacuteže rovině

Lom světla (refrakce)

2 Při přechodu z prostřediacute opticky řidšiacuteho do prostřediacute opticky hustšiacuteho se paprsek laacuteme ke kolmici (A)

a z prostřediacute opticky hustšiacuteho

do prostřediacute opticky řidšiacuteho

se laacuteme od kolmice (B)

(C a D) ndash uacuteplnyacute odraz při tzv

mezniacutem uacutehlu dopadu paprsku

v přiacutepadě lomu od kolmice (B)

(viz Nikol odrazneacute hranoly světlovodneacute vlaacutekno nebo fluorescenčniacute metoda TIRFM ndash totaacutelniacute odraz exitačniacuteho zaacuteřeniacute)

Pazourek 1975

Svatyacute Kryštof od

švyacutecarskeacuteho maliacuteře

Konrada Witze (kolem 1400ndash1446)

Witz byl jedniacutem z prvniacutech

maliacuteřů kteryacute namaloval

přesnyacute způsob odrazu

světla na vodě

Disperze (rozklad) světla

= důsledek zaacutevislosti rychlosti světla v laacutetkaacutech na frekvenci světla

(λ = c f)

světlo různyacutech barev (λ)

se laacuteme různě

(červeneacute se lomiacute meacuteně než modreacute)

Přiacuteklad disperze (rozkladu) světla

Primaacuterniacute a sekundaacuterniacute duha Severniacute Čechy Foto Pavla Vaacutelovaacute 2010

D u h a

Jeden z mnoha

optickyacutech

jevů (fotometeorů)

v atmosfeacuteře

Rok 312 nl - před bitvou byzantskeacuteho ciacutesaře Konstantina I (272-337) s

konkurenčniacutem ciacutesařem Maxentiem u bran Řiacutema (tzv bitva u Milvijskeacuteho mostu) se

na obloze objevily tři zaacuteřiacuteciacute křiacuteže (halovyacute sloup parheacutelia a parhelickyacute oblouk)

Konstantin bitvu proti přesile vyhraacutel sjednotil řiacuteši a povolil v niacute vyznaacutevat křesťanstviacute

Maleacute halo (22deg) (viz 1) vedlejšiacute slunce (2) a horniacute a dolniacute halovyacute sloup (3)

vznikajiacuteciacute odrazem a lomem světelnyacutech paprsků na krystalciacutech ledu

Lom světla a dějiny

httptmagazineblogsnytimescom20121126halo-effect_r=0

1

3

2 2

3

Ohyb (difrakce) a interference

světla

Foto Pavla Vaacutelovaacute Bukovany 2015 Rozklad světla na CD - světlo žaacuterovky

Rozklad biacuteleacuteho světla na mřiacutežce

Pevnost poznaacuteniacute Olomouc 2015

Foto Pavla Vaacutelovaacute Olomouc 2015

Ohyb (difrakce) a interference

světla

Ohyb (difrakce) a interference

Difrakčniacute obrazec obsahuje světlaacute a tmavaacute miacutesta kteraacute se

střiacutedajiacute - světlaacute miacutesta nazyacutevaacuteme maxima a tmavaacute minima

Interference světla = sklaacutedaacuteniacute světelnyacutech vln

Předpoklad světlo musiacute byacutet koherentniacute

Podmiacutenka koherence

- paprsky musiacute miacutet stejnou frekvenci

- paprsky musiacute byacutet navzaacutejem rovnoběžneacute

- paprsky musiacute miacutet na sobě nezaacutevislyacute draacutehovyacute (faacutezovyacute) rozdiacutel

Vznik koherentniacuteho zaacuteřeniacute

rozděleniacutem světla

- buď odrazem pomociacute zrcadel

- nebo lomem pomociacute hranolů

Foto Pavla Vaacutelovaacute Praha 151 2016

Interference světla

stejnyacute způsob vlněniacute

(faacuteze je vzaacutejemně posunuta o sudeacute

naacutesobky λ2)

vznik interferenčniacuteho maxima

(konstruktivniacute interference)

Interference světla

asynchronniacute vlněniacute

(vzaacutejemně posunutaacute faacuteze

o licheacute naacutesobky λ2)

vznik interferenčniacuteho

minima

(destruktivniacute interference)

rarr zaacuteřeniacute zanikaacute

rarr zeslabeniacute zaacuteřeniacute

Interference dvou vrstev elektromagnetickeacuteho zaacuteřeniacute u Slunce

Čočky ndash zaacutekladniacute součaacutesti

mikroskopu

= průhlednaacute (nejčastěji skleněnaacute) tělesa omezenaacute

vypuklyacutemi nebo vydutyacutemi kulovityacutemi plochami lišiacuteciacute se od sveacuteho okoliacute odlišnyacutem indexem lomu

Zaacutekladniacute typy čoček

spojky (vypukleacute neboli konvexniacute)

rozptylky (vyduteacute konkaacutevniacute)

Pazourek 1975

Optickaacute osa ( o ) prochaacuteziacute středem čočky

Ohnisko ( F ) - bod do ktereacuteho se soustřeďujiacute paprsky probiacutehajiacuteciacute rovnoběžně s optickou osou

- 2 ohniska - předmětoveacute ohnisko ( F )

obrazoveacute ohnisko ( Facute )

- ohniskovaacute vzdaacutelenost ( f )

vzdaacutelenost ohniska od hlavniacute roviny proloženeacute středem čočky

- dvojnaacutesobnaacute ohniskovaacute vzdaacutelenost ( P Pacute )

Obrazovyacute prostor - prostor v němž vznikaacute obraz

Důležiteacute charakteristiky čočky

f

o

hlavniacute rovina

Pazourek 1975

V přiacutepadě velmi tenkeacute čočky

bull Obraz za optickou soustavou

rarr obraz s k u t e č n yacute

Skutečnyacute obraz je možneacute zachytit na stiacuteniacutetko

nebo na fotografickou desku neskutečnyacute nikoliv

bull Obraz před soustavou

rarr obraz n e s k u t e č n yacute (zdaacutenlivyacute virtuaacutelniacute)

Obraz skutečnyacute a neskutečnyacute

A ndash předmět Aacute- obraz předmětu

Upraveno podle Pazourek 1975

Francouz Augustin Jean Fresnel (1788-1827) [frenel]

Fresnelova čočka [frenelova]

- plochyacute tvar (zachovaacuteny pouze čaacutesti ktereacute měniacute směr chodu světelnyacutech paprsků)

- vyacuterazně nižšiacute hmotnost při zachovaacuteniacute podobnyacutech parametrů

Využitiacute infračidla pohybu semafory světlomety (majaacuteky) a reflektory (světla aut

divadelniacutech a filmovyacutech osvětlovaciacutech zařiacutezeniacute) zpětneacute projektory slunečniacute kolektory

na zaacutekladě tohoto principu takeacute vyacuteroba 3D displejů k mobilniacutem telefonům a televiziacutem

httpwwwmffcuniczverejnostzpravicky03_lupahtm

čočka na majaacuteku

Čočky v budoucnosti

Pokus o vyacuterobu tzv dokonaleacute čočky

Prototyp - upraveneacute tzv Maxwellovo rybiacute oko

- paprsky světla se v něm pohybujiacute po kružniciacutech a

na rozdiacutel od běžnyacutech čoček se při zobrazeniacute využijiacute

všechny paprsky

- superčočky využiacutevajiacute geometrie k tomu aby se světlo

soustředilo do oblasti menšiacute než je jeho vlnovaacute deacutelka

(zatiacutem se neviacute jak do čočky vyhovujiacuteciacutem způsobem

doveacutest světlo)

Využitiacute v budoucnu

mimo jineacute v pozorovaacuteniacute živyacutech buněk při velkeacutem zvětšeniacute

pomociacute obyčejneacuteho světla bez jejich narušeniacute

Viacutece viz Plaacutešek J Mikroskopy se superčočkami httpwwwvesmircz | Vesmiacuter 91 531 zaacuteřiacute 2012

Hranoly

- doplňky optickyacutech systeacutemů

- většinou tvar rovnostranneacuteho trojuacutehelniacuteka

- využiacutevajiacute uacuteplneacuteho odrazu

Funkce

- změna chodu paprsků pod různyacutemi uacutehly

- rozdvojeniacute paprsků

Pazourek 1975

Různeacute typy odraznyacutech hranolů

Hranoly

Různeacute typy hranolů

httplaserykvalitneczimagestext_25_zakladyoptiky1odrazne_hranolyjpg

Viz dichroickeacute zrcadlo u fluorescenčniacuteho mikroskopu

Chod paprsků v binokulaacuterniacutem tubusu

Pazourek 1975

Nikol = hranol z islandskeacuteho vaacutepence

rarr polarizace světla

Dvojlomnyacute vaacutepencovyacute

krystal

ř ndash paprsek řaacutednyacute (zanikaacute na začerněneacute ploše)

mř ndash paprsek mimořaacutednyacute (lineaacuterně polarizovanyacute

využit k osvětleniacute)

začerněnaacute plocha

Nikol

Pazourek 1975

vzduchovaacute štěrbina

- rychlost světla je

v různyacutech směrech různaacute

- uacutehel paprsku řaacutedneacuteho a

mimořaacutedneacuteho je odlišnyacute

(u Vikingů - slunečniacute kaacutemen

soacutelarsteinn)

Chod paprsků ve světlovodneacutem vlaacuteknu

Princip uacuteplnyacute odraz paprsku

- uvnitř skleněneacuteho vlaacutekna je opticky hustšiacute prostřediacute

- nutnost dostatečně silneacuteho světelneacuteho zdroje

Světlovodnaacute vlaacutekna

Pazourek 1975

Širokeacute využitiacute v praxi optickeacute kabely ndash přenos signaacutelů ve sdělovaciacute technice

světlovody umožňujiacuteciacute veacutest denniacute světlo vedeniacute světla u stereolup endoskopů hellip

Page 28: Světelná a elektronová mikroskopie...(AMF – Atomic Force Miroscope) - skenování povrchu materiálu pomocí hrotu zavěšeném na pružném výkyvném raménku, který je přitahován

Důležitaacute data při rozvoji moderniacute světelneacute mikroskopie

1847 - Zahaacutejeniacute vyacuteroby mikroskopů firmou Carl Zeiss v Jeně

1903 - Ultramikroskop (Richard Zsigmondy NC 1925)

1911 - Fluorescenčniacute mikroskop (Carl Reichert)

1935 - Faacutezovyacute kontrast (Fritz Zernike NC 1953)

1955 - Diferenciaacutelniacute interferenčniacute kontrast (DIC ndash Nomarski)

1968 - Rastrovaciacute tandemovyacute konfokaacutelniacute mikroskop (TSCM)

1978 - Laserovyacute konfokaacutelniacute rastrovaciacute mikroskop

1994 - Princip STED mikroskopie (S W Hell NC 2014)

(Stimulated Emission Depletion ndash redukce fluorescence stimulovanou emisiacute)

po roce 2000 - rozvoj tzv superrozlišovaciacute mikroskopie

2006 - Super-resolučniacute fluorescenčniacute mikroskop (Eric Betzig

Stefan W Hell a William E Moerner NC za chemii 2014)

NC = Nobelova cena

30 leacuteta 20 stoletiacute

ndash hranice vyacutevoje optickeacuteho (paprskoveacuteho) mikroskopu

(hranice rozlišeniacute světelneacuteho mikroskopu je diacuteky velikosti deacutelky světla 02 microm)

- dalšiacute zvětšovaacuteniacute pozorovanyacutech objektů na jineacutem principu

- miacutesto světelneacuteho paprsku elektronovyacute paprsek

(= tok rychlyacutech elektronů)

- miacutesto skleněneacute čočky magnetickaacute čočka

1931 - Ernst Ruska Max Knoll

prvniacute elektronovyacute mikroskop

tzv prozařovaciacute transmisniacute EM

(TEM ndash Transmission Electron Microscope)

- originaacutelniacute zvětšeniacute 1 000 - 250 000x

Ernst Ruska (1906-1988)

1942 - rastrovaciacute EM

(SEM ndash Scanning Electron Microscope) - postupneacute bombardovaacuteniacute vzorku elektrony

- zvětšeniacute až 30 000x

EM UacuteMG AV ČR Praha-Krč

FEI ndash TECHNAIG2TEM + kryozařiacutezeniacute

200 kV (λ el = 00025 nm)

RS 01 nm

prvkovaacute analyacuteza vzorků

zařiacutezeniacute pro

prvkovou analyacutezu

vzorků

Foto Pavla Vaacutelovaacute 2010

Brněnštiacute vědci z Uacutestavu přiacutestrojoveacute techniky AV ČR (UacutePT) a Mendelovy

univerzity představili novou metodu pozorovaacuteniacute rostlinnyacutech vzorků v jejich

přirozeneacutem stavu (za využitiacute kryoprotektiv)

Viacutece na httpe-svete15cztechnikacesti-vedci-posunuli-hranice-elektronove-mikroskopie-1174818

Enviromentaacutelniacute rastrovaciacute elektronovyacute mikroskop Aquasem II

TEM TITAN FEI Company Mgr Klaacutera Čeacutepe PhD

Vysokorozlišovaciacute transmisniacute elektronovyacute mikroskop

schopnyacute nahleacutednout do struktury materiaacutelů až na uacuterovni atomů

a současně přesně zmapovat jejich chemickeacute složeniacute

Regionaacutelniacute centrum pokročilyacutech

materiaacutelů (RCPTM)

Odd uhliacutekoveacute nanostruktury

PřF UP OL

Vysokorozlišovaciacute transmisniacute

elektronovyacute mikroskop TITAN (FEI)

Foto Pavla Vaacutelovaacute 2015

Transmisniacute elektronovyacute

mikroskop Jeol

Regionaacutelniacute centrum pokročilyacutech materiaacutelů (RCPTM)

Odd uhliacutekoveacute nanostruktury PřF UP OL

Neoptickeacute mikroskopy

1981

Řaacutedkovaciacute tunelovyacute mikroskop (STM ndash Scanning Tunnelling Microscope)

- mapovaacuteniacute povrchu pomociacute pohybu vodiveacuteho hrotu nad vodivyacutem povrchem sledovaneacuteho materiaacutelu

1986

Mikroskop atomaacuterniacutech sil (AMF ndash Atomic Force Miroscope)

- skenovaacuteniacute povrchu materiaacutelu pomociacute hrotu zavěšeneacutem na pružneacutem vyacutekyvneacutem rameacutenku kteryacute je přitahovaacuten elektrostatickyacutemi a Van der Walsovyacutemi silami

Rozlišeniacute v řaacutedech pikometrů (10-12 m) ndash rozeznaacuteniacute struktur

jednotlivyacutech atomů

O p t i c k eacute p r i n c i p y

světelneacute mikroskopie

Reichl J Všetička M Encyklopedie fyziky [online] copy2006-2014

[vid 2014] Dostupneacute z httpfyzikajreichlcommainarticleview431-optika Lepil O (2013) Fyzika pro gymnaacutezia Optika Prometheus Praha 4 přepracovaneacute vydaacuteniacute

Murphy DB Davidson MW (2013) Fundamentals of Light

Microscopy and Electronic Imaging Willey-Blackwell Published

2013 by John Wiley amp Sons Inc Hoboken New Jersey

S v ě t l o

= čaacutest rozsaacutehleacute oblasti elektromagnetickeacuteho zaacuteřeniacute

kterou vniacutemaacuteme zrakem

Rozhlasoveacute a raacutedioveacute vlny 250 km - 1 mm

Infračerveneacute zaacuteřeniacute 05 mm - 08 μm

Světlo (viditelneacute zaacuteřeniacute) 08 μm - 04 μm

Ultrafialoveacute zaacuteřeniacute 04 microm - 01 microm

Roumlntgenovo zaacuteřeniacute (X-paprsky) 15 nm - 0005 nm

γ-zaacuteřeniacute pod 00001 nm

Přibližneacute hodnoty ndash individuaacutelniacute vlastnosti zraku různyacutech lidiacute

S v ě t l o

= čaacutest rozsaacutehleacute oblasti elektromagnetickeacuteho zaacuteřeniacute

kterou vniacutemaacuteme zrakem

rarr se zkracujiacuteciacute se vlnovou deacutelkou se zvyšuje frekvence (energie)

Viditelneacute

Vlnoveacute deacutelky světla a relativniacute citlivost oka

Murphy DB Davidson MW (2013) Fundamentals of Light Microscopy and Electronic

Imaging Willey-Blackwell Published 2013 by John Wiley amp Sons Inc Hoboken New Jersey

= zrakovyacute pigment citlivyacute na

světlo nachaacutezejiacuteciacute se v tyčinkaacutech Jodopsin = zrakovyacute pigment citlivyacute na

barvu nachaacutezejiacuteciacute se v čiacutepciacutech

S v ě t l o

Duaacutelniacute charakter světla ndash vlněniacute i proud čaacutestic (fotonů)

Vlnovyacute model světla

vlna elektrickaacute a magnetickaacute (elektromagnetickaacute vlna je tvořena oscilujiacuteciacutem elektrickyacutem a

magnetickyacutem polem na sebe kolmyacutech a nesouciacutech vpřed energii)

Pro uacutečinky světla v mikroskopu je důležitaacute vlna elektrickaacute

= přiacutečneacute vlněniacute

postupneacute kmitaacuteniacute

jednotlivyacutech vedle sebe

ležiacuteciacutech bodů

Scheacutema světla jako elektromagnetickeacute vlny

Obr httpwwwprosoundwebcomarticleprintinvaders_from_

outer_space_electromagnetic_radiation_interference

λ - vlnovaacute deacutelka

(v oblasti svět zaacuteřeniacute

v rozmeziacute od 380 do 780 nm)

určuje barvu světla

a - amplituda

nejvyššiacute hodnota

určuje intenzitu světla

Z hlediska vlnoveacute deacutelky rozlišujeme

polychromatickeacute x monochromatickeacute světlo (selekce pomociacute barevnyacutech filtrů rarr jednotnaacute vlnovaacute deacutelka světlo zeleneacute červeneacute hellip)

Elektrickaacute vlna - sinusoida

Charakterizovaacutena dvěma veličinami

Pazourek 1975

Vlastnosti světla

Rovnoměrneacute šiacuteřeniacute světla ze zaacuteřiacuteciacuteho bodu na všechny strany rarr vlnovaacute plocha tvaru koule

Paprsek ndash směr kteryacutem se vlněniacute šiacuteřiacute a kteryacute je kolmyacute

na vlnoplochu

Pazourek 1975

- paprsek nepolarizovanyacute (A C) ndash kmitaacute v každeacutem

miacutestě a v průběhu času ve všech možnyacutech směrech

kolmyacutech na směr šiacuteřeniacute paprsku

- paprsek polarizovanyacute (B D1 D2) - kmitaacute v jedneacute

rovině přičemž rovina kmitů (vlněniacute) jednoho z nich je

kolmaacute k rovině kmitů druheacuteho

Pazourek 1975

Polarizovaneacute světlo viz

httpswwwyoutubecomwatchv=gP751qpm4n4

Murphy DB Davidson MW (2013) Fundamentals of Light Microscopy and

Electronic Imaging Jonh Wkiley amp Sons Inc Hoboken New Jersey

Osm různyacutech vlnovyacutech forem světla (znaacutezorňujiacuteciacutech různou kvalitu světla)

Odraz a lom světelnyacutech paprsků

v prostřediacutech různeacute hustoty

Důležitaacute charakteristika prostřediacute

index lomu ( n ) (= optickaacute hustota prostřediacute)

c = rychlost světla ve vakuu (stejnaacute pro všechny λ )

v = rychlost světla určiteacute vlnoveacute deacutelky ve zkoumaneacute laacutetce

c

n =

v

zde absolutniacute index lomu

(bezrozměrnaacute fyzikaacutelniacute veličina jeho jednotka je 1)

Rychlost světla (c) určiteacute vlnoveacute

deacutelky v různyacutech prostřediacutech

c ve vakuu

= 300 000 kms

Index lomu (n) některyacutech laacutetek

vzduch (vakuum) helliphellip 100 (vzduch 10002718)

voda helliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 133

plexisklo helliphelliphelliphelliphelliphellip 140 ndash 152

křemenneacute sklo helliphellip hellip 145 (čočka z křemene z Ninive ndash 7 stol přnl)

běžneacute sklo helliphelliphelliphelliphellip 151

cedrovyacute olej helliphelliphelliphelliphellip 151

imerzniacute olej Olympus hellip 1516 pro fluorescenci 1404

kanadskyacute balzaacutem helliphellip 150

krystal NaCl helliphelliphelliphellip 154

korunoveacute sklo helliphelliphelliphellip 145 ndash 156 (sodno-draselneacute bezolovnateacute)

flintoveacute sklo helliphelliphelliphellip 162 ndash 180 (olovnateacute)

diamant helliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 242

Index lomu je vždy většiacute než 100

očniacute čočka hellip 1406

sklivec helliphelliphellip 1336

Odraz světla rovnyacutem zrcadlem (reflexe)

Zaacutekony

1 Paprsek dopadajiacuteciacute kolmice dopadu a paprsek odraženyacute

ležiacute v jedneacute rovině

2 Uacutehel odrazu se rovnaacute uacutehlu dopadu

Odraz a lom paprsku

k

Důležiteacute pro mikroskopii (astronomii)

- neniacute zaacutevislost na vlnoveacute deacutelce světla (λ)

- na rozdiacutel od lomu paprsků se světelneacute

paprsky se odraacutežejiacute stejně

Pazourek 1975

Zaacutekony

1 Paprsek dopadajiacuteciacute kolmice lomu a paprsek lomenyacute ležiacute v teacuteže rovině

Lom světla (refrakce)

2 Při přechodu z prostřediacute opticky řidšiacuteho do prostřediacute opticky hustšiacuteho se paprsek laacuteme ke kolmici (A)

a z prostřediacute opticky hustšiacuteho

do prostřediacute opticky řidšiacuteho

se laacuteme od kolmice (B)

(C a D) ndash uacuteplnyacute odraz při tzv

mezniacutem uacutehlu dopadu paprsku

v přiacutepadě lomu od kolmice (B)

(viz Nikol odrazneacute hranoly světlovodneacute vlaacutekno nebo fluorescenčniacute metoda TIRFM ndash totaacutelniacute odraz exitačniacuteho zaacuteřeniacute)

Pazourek 1975

Svatyacute Kryštof od

švyacutecarskeacuteho maliacuteře

Konrada Witze (kolem 1400ndash1446)

Witz byl jedniacutem z prvniacutech

maliacuteřů kteryacute namaloval

přesnyacute způsob odrazu

světla na vodě

Disperze (rozklad) světla

= důsledek zaacutevislosti rychlosti světla v laacutetkaacutech na frekvenci světla

(λ = c f)

světlo různyacutech barev (λ)

se laacuteme různě

(červeneacute se lomiacute meacuteně než modreacute)

Přiacuteklad disperze (rozkladu) světla

Primaacuterniacute a sekundaacuterniacute duha Severniacute Čechy Foto Pavla Vaacutelovaacute 2010

D u h a

Jeden z mnoha

optickyacutech

jevů (fotometeorů)

v atmosfeacuteře

Rok 312 nl - před bitvou byzantskeacuteho ciacutesaře Konstantina I (272-337) s

konkurenčniacutem ciacutesařem Maxentiem u bran Řiacutema (tzv bitva u Milvijskeacuteho mostu) se

na obloze objevily tři zaacuteřiacuteciacute křiacuteže (halovyacute sloup parheacutelia a parhelickyacute oblouk)

Konstantin bitvu proti přesile vyhraacutel sjednotil řiacuteši a povolil v niacute vyznaacutevat křesťanstviacute

Maleacute halo (22deg) (viz 1) vedlejšiacute slunce (2) a horniacute a dolniacute halovyacute sloup (3)

vznikajiacuteciacute odrazem a lomem světelnyacutech paprsků na krystalciacutech ledu

Lom světla a dějiny

httptmagazineblogsnytimescom20121126halo-effect_r=0

1

3

2 2

3

Ohyb (difrakce) a interference

světla

Foto Pavla Vaacutelovaacute Bukovany 2015 Rozklad světla na CD - světlo žaacuterovky

Rozklad biacuteleacuteho světla na mřiacutežce

Pevnost poznaacuteniacute Olomouc 2015

Foto Pavla Vaacutelovaacute Olomouc 2015

Ohyb (difrakce) a interference

světla

Ohyb (difrakce) a interference

Difrakčniacute obrazec obsahuje světlaacute a tmavaacute miacutesta kteraacute se

střiacutedajiacute - světlaacute miacutesta nazyacutevaacuteme maxima a tmavaacute minima

Interference světla = sklaacutedaacuteniacute světelnyacutech vln

Předpoklad světlo musiacute byacutet koherentniacute

Podmiacutenka koherence

- paprsky musiacute miacutet stejnou frekvenci

- paprsky musiacute byacutet navzaacutejem rovnoběžneacute

- paprsky musiacute miacutet na sobě nezaacutevislyacute draacutehovyacute (faacutezovyacute) rozdiacutel

Vznik koherentniacuteho zaacuteřeniacute

rozděleniacutem světla

- buď odrazem pomociacute zrcadel

- nebo lomem pomociacute hranolů

Foto Pavla Vaacutelovaacute Praha 151 2016

Interference světla

stejnyacute způsob vlněniacute

(faacuteze je vzaacutejemně posunuta o sudeacute

naacutesobky λ2)

vznik interferenčniacuteho maxima

(konstruktivniacute interference)

Interference světla

asynchronniacute vlněniacute

(vzaacutejemně posunutaacute faacuteze

o licheacute naacutesobky λ2)

vznik interferenčniacuteho

minima

(destruktivniacute interference)

rarr zaacuteřeniacute zanikaacute

rarr zeslabeniacute zaacuteřeniacute

Interference dvou vrstev elektromagnetickeacuteho zaacuteřeniacute u Slunce

Čočky ndash zaacutekladniacute součaacutesti

mikroskopu

= průhlednaacute (nejčastěji skleněnaacute) tělesa omezenaacute

vypuklyacutemi nebo vydutyacutemi kulovityacutemi plochami lišiacuteciacute se od sveacuteho okoliacute odlišnyacutem indexem lomu

Zaacutekladniacute typy čoček

spojky (vypukleacute neboli konvexniacute)

rozptylky (vyduteacute konkaacutevniacute)

Pazourek 1975

Optickaacute osa ( o ) prochaacuteziacute středem čočky

Ohnisko ( F ) - bod do ktereacuteho se soustřeďujiacute paprsky probiacutehajiacuteciacute rovnoběžně s optickou osou

- 2 ohniska - předmětoveacute ohnisko ( F )

obrazoveacute ohnisko ( Facute )

- ohniskovaacute vzdaacutelenost ( f )

vzdaacutelenost ohniska od hlavniacute roviny proloženeacute středem čočky

- dvojnaacutesobnaacute ohniskovaacute vzdaacutelenost ( P Pacute )

Obrazovyacute prostor - prostor v němž vznikaacute obraz

Důležiteacute charakteristiky čočky

f

o

hlavniacute rovina

Pazourek 1975

V přiacutepadě velmi tenkeacute čočky

bull Obraz za optickou soustavou

rarr obraz s k u t e č n yacute

Skutečnyacute obraz je možneacute zachytit na stiacuteniacutetko

nebo na fotografickou desku neskutečnyacute nikoliv

bull Obraz před soustavou

rarr obraz n e s k u t e č n yacute (zdaacutenlivyacute virtuaacutelniacute)

Obraz skutečnyacute a neskutečnyacute

A ndash předmět Aacute- obraz předmětu

Upraveno podle Pazourek 1975

Francouz Augustin Jean Fresnel (1788-1827) [frenel]

Fresnelova čočka [frenelova]

- plochyacute tvar (zachovaacuteny pouze čaacutesti ktereacute měniacute směr chodu světelnyacutech paprsků)

- vyacuterazně nižšiacute hmotnost při zachovaacuteniacute podobnyacutech parametrů

Využitiacute infračidla pohybu semafory světlomety (majaacuteky) a reflektory (světla aut

divadelniacutech a filmovyacutech osvětlovaciacutech zařiacutezeniacute) zpětneacute projektory slunečniacute kolektory

na zaacutekladě tohoto principu takeacute vyacuteroba 3D displejů k mobilniacutem telefonům a televiziacutem

httpwwwmffcuniczverejnostzpravicky03_lupahtm

čočka na majaacuteku

Čočky v budoucnosti

Pokus o vyacuterobu tzv dokonaleacute čočky

Prototyp - upraveneacute tzv Maxwellovo rybiacute oko

- paprsky světla se v něm pohybujiacute po kružniciacutech a

na rozdiacutel od běžnyacutech čoček se při zobrazeniacute využijiacute

všechny paprsky

- superčočky využiacutevajiacute geometrie k tomu aby se světlo

soustředilo do oblasti menšiacute než je jeho vlnovaacute deacutelka

(zatiacutem se neviacute jak do čočky vyhovujiacuteciacutem způsobem

doveacutest světlo)

Využitiacute v budoucnu

mimo jineacute v pozorovaacuteniacute živyacutech buněk při velkeacutem zvětšeniacute

pomociacute obyčejneacuteho světla bez jejich narušeniacute

Viacutece viz Plaacutešek J Mikroskopy se superčočkami httpwwwvesmircz | Vesmiacuter 91 531 zaacuteřiacute 2012

Hranoly

- doplňky optickyacutech systeacutemů

- většinou tvar rovnostranneacuteho trojuacutehelniacuteka

- využiacutevajiacute uacuteplneacuteho odrazu

Funkce

- změna chodu paprsků pod různyacutemi uacutehly

- rozdvojeniacute paprsků

Pazourek 1975

Různeacute typy odraznyacutech hranolů

Hranoly

Různeacute typy hranolů

httplaserykvalitneczimagestext_25_zakladyoptiky1odrazne_hranolyjpg

Viz dichroickeacute zrcadlo u fluorescenčniacuteho mikroskopu

Chod paprsků v binokulaacuterniacutem tubusu

Pazourek 1975

Nikol = hranol z islandskeacuteho vaacutepence

rarr polarizace světla

Dvojlomnyacute vaacutepencovyacute

krystal

ř ndash paprsek řaacutednyacute (zanikaacute na začerněneacute ploše)

mř ndash paprsek mimořaacutednyacute (lineaacuterně polarizovanyacute

využit k osvětleniacute)

začerněnaacute plocha

Nikol

Pazourek 1975

vzduchovaacute štěrbina

- rychlost světla je

v různyacutech směrech různaacute

- uacutehel paprsku řaacutedneacuteho a

mimořaacutedneacuteho je odlišnyacute

(u Vikingů - slunečniacute kaacutemen

soacutelarsteinn)

Chod paprsků ve světlovodneacutem vlaacuteknu

Princip uacuteplnyacute odraz paprsku

- uvnitř skleněneacuteho vlaacutekna je opticky hustšiacute prostřediacute

- nutnost dostatečně silneacuteho světelneacuteho zdroje

Světlovodnaacute vlaacutekna

Pazourek 1975

Širokeacute využitiacute v praxi optickeacute kabely ndash přenos signaacutelů ve sdělovaciacute technice

světlovody umožňujiacuteciacute veacutest denniacute světlo vedeniacute světla u stereolup endoskopů hellip

Page 29: Světelná a elektronová mikroskopie...(AMF – Atomic Force Miroscope) - skenování povrchu materiálu pomocí hrotu zavěšeném na pružném výkyvném raménku, který je přitahován

30 leacuteta 20 stoletiacute

ndash hranice vyacutevoje optickeacuteho (paprskoveacuteho) mikroskopu

(hranice rozlišeniacute světelneacuteho mikroskopu je diacuteky velikosti deacutelky světla 02 microm)

- dalšiacute zvětšovaacuteniacute pozorovanyacutech objektů na jineacutem principu

- miacutesto světelneacuteho paprsku elektronovyacute paprsek

(= tok rychlyacutech elektronů)

- miacutesto skleněneacute čočky magnetickaacute čočka

1931 - Ernst Ruska Max Knoll

prvniacute elektronovyacute mikroskop

tzv prozařovaciacute transmisniacute EM

(TEM ndash Transmission Electron Microscope)

- originaacutelniacute zvětšeniacute 1 000 - 250 000x

Ernst Ruska (1906-1988)

1942 - rastrovaciacute EM

(SEM ndash Scanning Electron Microscope) - postupneacute bombardovaacuteniacute vzorku elektrony

- zvětšeniacute až 30 000x

EM UacuteMG AV ČR Praha-Krč

FEI ndash TECHNAIG2TEM + kryozařiacutezeniacute

200 kV (λ el = 00025 nm)

RS 01 nm

prvkovaacute analyacuteza vzorků

zařiacutezeniacute pro

prvkovou analyacutezu

vzorků

Foto Pavla Vaacutelovaacute 2010

Brněnštiacute vědci z Uacutestavu přiacutestrojoveacute techniky AV ČR (UacutePT) a Mendelovy

univerzity představili novou metodu pozorovaacuteniacute rostlinnyacutech vzorků v jejich

přirozeneacutem stavu (za využitiacute kryoprotektiv)

Viacutece na httpe-svete15cztechnikacesti-vedci-posunuli-hranice-elektronove-mikroskopie-1174818

Enviromentaacutelniacute rastrovaciacute elektronovyacute mikroskop Aquasem II

TEM TITAN FEI Company Mgr Klaacutera Čeacutepe PhD

Vysokorozlišovaciacute transmisniacute elektronovyacute mikroskop

schopnyacute nahleacutednout do struktury materiaacutelů až na uacuterovni atomů

a současně přesně zmapovat jejich chemickeacute složeniacute

Regionaacutelniacute centrum pokročilyacutech

materiaacutelů (RCPTM)

Odd uhliacutekoveacute nanostruktury

PřF UP OL

Vysokorozlišovaciacute transmisniacute

elektronovyacute mikroskop TITAN (FEI)

Foto Pavla Vaacutelovaacute 2015

Transmisniacute elektronovyacute

mikroskop Jeol

Regionaacutelniacute centrum pokročilyacutech materiaacutelů (RCPTM)

Odd uhliacutekoveacute nanostruktury PřF UP OL

Neoptickeacute mikroskopy

1981

Řaacutedkovaciacute tunelovyacute mikroskop (STM ndash Scanning Tunnelling Microscope)

- mapovaacuteniacute povrchu pomociacute pohybu vodiveacuteho hrotu nad vodivyacutem povrchem sledovaneacuteho materiaacutelu

1986

Mikroskop atomaacuterniacutech sil (AMF ndash Atomic Force Miroscope)

- skenovaacuteniacute povrchu materiaacutelu pomociacute hrotu zavěšeneacutem na pružneacutem vyacutekyvneacutem rameacutenku kteryacute je přitahovaacuten elektrostatickyacutemi a Van der Walsovyacutemi silami

Rozlišeniacute v řaacutedech pikometrů (10-12 m) ndash rozeznaacuteniacute struktur

jednotlivyacutech atomů

O p t i c k eacute p r i n c i p y

světelneacute mikroskopie

Reichl J Všetička M Encyklopedie fyziky [online] copy2006-2014

[vid 2014] Dostupneacute z httpfyzikajreichlcommainarticleview431-optika Lepil O (2013) Fyzika pro gymnaacutezia Optika Prometheus Praha 4 přepracovaneacute vydaacuteniacute

Murphy DB Davidson MW (2013) Fundamentals of Light

Microscopy and Electronic Imaging Willey-Blackwell Published

2013 by John Wiley amp Sons Inc Hoboken New Jersey

S v ě t l o

= čaacutest rozsaacutehleacute oblasti elektromagnetickeacuteho zaacuteřeniacute

kterou vniacutemaacuteme zrakem

Rozhlasoveacute a raacutedioveacute vlny 250 km - 1 mm

Infračerveneacute zaacuteřeniacute 05 mm - 08 μm

Světlo (viditelneacute zaacuteřeniacute) 08 μm - 04 μm

Ultrafialoveacute zaacuteřeniacute 04 microm - 01 microm

Roumlntgenovo zaacuteřeniacute (X-paprsky) 15 nm - 0005 nm

γ-zaacuteřeniacute pod 00001 nm

Přibližneacute hodnoty ndash individuaacutelniacute vlastnosti zraku různyacutech lidiacute

S v ě t l o

= čaacutest rozsaacutehleacute oblasti elektromagnetickeacuteho zaacuteřeniacute

kterou vniacutemaacuteme zrakem

rarr se zkracujiacuteciacute se vlnovou deacutelkou se zvyšuje frekvence (energie)

Viditelneacute

Vlnoveacute deacutelky světla a relativniacute citlivost oka

Murphy DB Davidson MW (2013) Fundamentals of Light Microscopy and Electronic

Imaging Willey-Blackwell Published 2013 by John Wiley amp Sons Inc Hoboken New Jersey

= zrakovyacute pigment citlivyacute na

světlo nachaacutezejiacuteciacute se v tyčinkaacutech Jodopsin = zrakovyacute pigment citlivyacute na

barvu nachaacutezejiacuteciacute se v čiacutepciacutech

S v ě t l o

Duaacutelniacute charakter světla ndash vlněniacute i proud čaacutestic (fotonů)

Vlnovyacute model světla

vlna elektrickaacute a magnetickaacute (elektromagnetickaacute vlna je tvořena oscilujiacuteciacutem elektrickyacutem a

magnetickyacutem polem na sebe kolmyacutech a nesouciacutech vpřed energii)

Pro uacutečinky světla v mikroskopu je důležitaacute vlna elektrickaacute

= přiacutečneacute vlněniacute

postupneacute kmitaacuteniacute

jednotlivyacutech vedle sebe

ležiacuteciacutech bodů

Scheacutema světla jako elektromagnetickeacute vlny

Obr httpwwwprosoundwebcomarticleprintinvaders_from_

outer_space_electromagnetic_radiation_interference

λ - vlnovaacute deacutelka

(v oblasti svět zaacuteřeniacute

v rozmeziacute od 380 do 780 nm)

určuje barvu světla

a - amplituda

nejvyššiacute hodnota

určuje intenzitu světla

Z hlediska vlnoveacute deacutelky rozlišujeme

polychromatickeacute x monochromatickeacute světlo (selekce pomociacute barevnyacutech filtrů rarr jednotnaacute vlnovaacute deacutelka světlo zeleneacute červeneacute hellip)

Elektrickaacute vlna - sinusoida

Charakterizovaacutena dvěma veličinami

Pazourek 1975

Vlastnosti světla

Rovnoměrneacute šiacuteřeniacute světla ze zaacuteřiacuteciacuteho bodu na všechny strany rarr vlnovaacute plocha tvaru koule

Paprsek ndash směr kteryacutem se vlněniacute šiacuteřiacute a kteryacute je kolmyacute

na vlnoplochu

Pazourek 1975

- paprsek nepolarizovanyacute (A C) ndash kmitaacute v každeacutem

miacutestě a v průběhu času ve všech možnyacutech směrech

kolmyacutech na směr šiacuteřeniacute paprsku

- paprsek polarizovanyacute (B D1 D2) - kmitaacute v jedneacute

rovině přičemž rovina kmitů (vlněniacute) jednoho z nich je

kolmaacute k rovině kmitů druheacuteho

Pazourek 1975

Polarizovaneacute světlo viz

httpswwwyoutubecomwatchv=gP751qpm4n4

Murphy DB Davidson MW (2013) Fundamentals of Light Microscopy and

Electronic Imaging Jonh Wkiley amp Sons Inc Hoboken New Jersey

Osm různyacutech vlnovyacutech forem světla (znaacutezorňujiacuteciacutech různou kvalitu světla)

Odraz a lom světelnyacutech paprsků

v prostřediacutech různeacute hustoty

Důležitaacute charakteristika prostřediacute

index lomu ( n ) (= optickaacute hustota prostřediacute)

c = rychlost světla ve vakuu (stejnaacute pro všechny λ )

v = rychlost světla určiteacute vlnoveacute deacutelky ve zkoumaneacute laacutetce

c

n =

v

zde absolutniacute index lomu

(bezrozměrnaacute fyzikaacutelniacute veličina jeho jednotka je 1)

Rychlost světla (c) určiteacute vlnoveacute

deacutelky v různyacutech prostřediacutech

c ve vakuu

= 300 000 kms

Index lomu (n) některyacutech laacutetek

vzduch (vakuum) helliphellip 100 (vzduch 10002718)

voda helliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 133

plexisklo helliphelliphelliphelliphelliphellip 140 ndash 152

křemenneacute sklo helliphellip hellip 145 (čočka z křemene z Ninive ndash 7 stol přnl)

běžneacute sklo helliphelliphelliphelliphellip 151

cedrovyacute olej helliphelliphelliphelliphellip 151

imerzniacute olej Olympus hellip 1516 pro fluorescenci 1404

kanadskyacute balzaacutem helliphellip 150

krystal NaCl helliphelliphelliphellip 154

korunoveacute sklo helliphelliphelliphellip 145 ndash 156 (sodno-draselneacute bezolovnateacute)

flintoveacute sklo helliphelliphelliphellip 162 ndash 180 (olovnateacute)

diamant helliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 242

Index lomu je vždy většiacute než 100

očniacute čočka hellip 1406

sklivec helliphelliphellip 1336

Odraz světla rovnyacutem zrcadlem (reflexe)

Zaacutekony

1 Paprsek dopadajiacuteciacute kolmice dopadu a paprsek odraženyacute

ležiacute v jedneacute rovině

2 Uacutehel odrazu se rovnaacute uacutehlu dopadu

Odraz a lom paprsku

k

Důležiteacute pro mikroskopii (astronomii)

- neniacute zaacutevislost na vlnoveacute deacutelce světla (λ)

- na rozdiacutel od lomu paprsků se světelneacute

paprsky se odraacutežejiacute stejně

Pazourek 1975

Zaacutekony

1 Paprsek dopadajiacuteciacute kolmice lomu a paprsek lomenyacute ležiacute v teacuteže rovině

Lom světla (refrakce)

2 Při přechodu z prostřediacute opticky řidšiacuteho do prostřediacute opticky hustšiacuteho se paprsek laacuteme ke kolmici (A)

a z prostřediacute opticky hustšiacuteho

do prostřediacute opticky řidšiacuteho

se laacuteme od kolmice (B)

(C a D) ndash uacuteplnyacute odraz při tzv

mezniacutem uacutehlu dopadu paprsku

v přiacutepadě lomu od kolmice (B)

(viz Nikol odrazneacute hranoly světlovodneacute vlaacutekno nebo fluorescenčniacute metoda TIRFM ndash totaacutelniacute odraz exitačniacuteho zaacuteřeniacute)

Pazourek 1975

Svatyacute Kryštof od

švyacutecarskeacuteho maliacuteře

Konrada Witze (kolem 1400ndash1446)

Witz byl jedniacutem z prvniacutech

maliacuteřů kteryacute namaloval

přesnyacute způsob odrazu

světla na vodě

Disperze (rozklad) světla

= důsledek zaacutevislosti rychlosti světla v laacutetkaacutech na frekvenci světla

(λ = c f)

světlo různyacutech barev (λ)

se laacuteme různě

(červeneacute se lomiacute meacuteně než modreacute)

Přiacuteklad disperze (rozkladu) světla

Primaacuterniacute a sekundaacuterniacute duha Severniacute Čechy Foto Pavla Vaacutelovaacute 2010

D u h a

Jeden z mnoha

optickyacutech

jevů (fotometeorů)

v atmosfeacuteře

Rok 312 nl - před bitvou byzantskeacuteho ciacutesaře Konstantina I (272-337) s

konkurenčniacutem ciacutesařem Maxentiem u bran Řiacutema (tzv bitva u Milvijskeacuteho mostu) se

na obloze objevily tři zaacuteřiacuteciacute křiacuteže (halovyacute sloup parheacutelia a parhelickyacute oblouk)

Konstantin bitvu proti přesile vyhraacutel sjednotil řiacuteši a povolil v niacute vyznaacutevat křesťanstviacute

Maleacute halo (22deg) (viz 1) vedlejšiacute slunce (2) a horniacute a dolniacute halovyacute sloup (3)

vznikajiacuteciacute odrazem a lomem světelnyacutech paprsků na krystalciacutech ledu

Lom světla a dějiny

httptmagazineblogsnytimescom20121126halo-effect_r=0

1

3

2 2

3

Ohyb (difrakce) a interference

světla

Foto Pavla Vaacutelovaacute Bukovany 2015 Rozklad světla na CD - světlo žaacuterovky

Rozklad biacuteleacuteho světla na mřiacutežce

Pevnost poznaacuteniacute Olomouc 2015

Foto Pavla Vaacutelovaacute Olomouc 2015

Ohyb (difrakce) a interference

světla

Ohyb (difrakce) a interference

Difrakčniacute obrazec obsahuje světlaacute a tmavaacute miacutesta kteraacute se

střiacutedajiacute - světlaacute miacutesta nazyacutevaacuteme maxima a tmavaacute minima

Interference světla = sklaacutedaacuteniacute světelnyacutech vln

Předpoklad světlo musiacute byacutet koherentniacute

Podmiacutenka koherence

- paprsky musiacute miacutet stejnou frekvenci

- paprsky musiacute byacutet navzaacutejem rovnoběžneacute

- paprsky musiacute miacutet na sobě nezaacutevislyacute draacutehovyacute (faacutezovyacute) rozdiacutel

Vznik koherentniacuteho zaacuteřeniacute

rozděleniacutem světla

- buď odrazem pomociacute zrcadel

- nebo lomem pomociacute hranolů

Foto Pavla Vaacutelovaacute Praha 151 2016

Interference světla

stejnyacute způsob vlněniacute

(faacuteze je vzaacutejemně posunuta o sudeacute

naacutesobky λ2)

vznik interferenčniacuteho maxima

(konstruktivniacute interference)

Interference světla

asynchronniacute vlněniacute

(vzaacutejemně posunutaacute faacuteze

o licheacute naacutesobky λ2)

vznik interferenčniacuteho

minima

(destruktivniacute interference)

rarr zaacuteřeniacute zanikaacute

rarr zeslabeniacute zaacuteřeniacute

Interference dvou vrstev elektromagnetickeacuteho zaacuteřeniacute u Slunce

Čočky ndash zaacutekladniacute součaacutesti

mikroskopu

= průhlednaacute (nejčastěji skleněnaacute) tělesa omezenaacute

vypuklyacutemi nebo vydutyacutemi kulovityacutemi plochami lišiacuteciacute se od sveacuteho okoliacute odlišnyacutem indexem lomu

Zaacutekladniacute typy čoček

spojky (vypukleacute neboli konvexniacute)

rozptylky (vyduteacute konkaacutevniacute)

Pazourek 1975

Optickaacute osa ( o ) prochaacuteziacute středem čočky

Ohnisko ( F ) - bod do ktereacuteho se soustřeďujiacute paprsky probiacutehajiacuteciacute rovnoběžně s optickou osou

- 2 ohniska - předmětoveacute ohnisko ( F )

obrazoveacute ohnisko ( Facute )

- ohniskovaacute vzdaacutelenost ( f )

vzdaacutelenost ohniska od hlavniacute roviny proloženeacute středem čočky

- dvojnaacutesobnaacute ohniskovaacute vzdaacutelenost ( P Pacute )

Obrazovyacute prostor - prostor v němž vznikaacute obraz

Důležiteacute charakteristiky čočky

f

o

hlavniacute rovina

Pazourek 1975

V přiacutepadě velmi tenkeacute čočky

bull Obraz za optickou soustavou

rarr obraz s k u t e č n yacute

Skutečnyacute obraz je možneacute zachytit na stiacuteniacutetko

nebo na fotografickou desku neskutečnyacute nikoliv

bull Obraz před soustavou

rarr obraz n e s k u t e č n yacute (zdaacutenlivyacute virtuaacutelniacute)

Obraz skutečnyacute a neskutečnyacute

A ndash předmět Aacute- obraz předmětu

Upraveno podle Pazourek 1975

Francouz Augustin Jean Fresnel (1788-1827) [frenel]

Fresnelova čočka [frenelova]

- plochyacute tvar (zachovaacuteny pouze čaacutesti ktereacute měniacute směr chodu světelnyacutech paprsků)

- vyacuterazně nižšiacute hmotnost při zachovaacuteniacute podobnyacutech parametrů

Využitiacute infračidla pohybu semafory světlomety (majaacuteky) a reflektory (světla aut

divadelniacutech a filmovyacutech osvětlovaciacutech zařiacutezeniacute) zpětneacute projektory slunečniacute kolektory

na zaacutekladě tohoto principu takeacute vyacuteroba 3D displejů k mobilniacutem telefonům a televiziacutem

httpwwwmffcuniczverejnostzpravicky03_lupahtm

čočka na majaacuteku

Čočky v budoucnosti

Pokus o vyacuterobu tzv dokonaleacute čočky

Prototyp - upraveneacute tzv Maxwellovo rybiacute oko

- paprsky světla se v něm pohybujiacute po kružniciacutech a

na rozdiacutel od běžnyacutech čoček se při zobrazeniacute využijiacute

všechny paprsky

- superčočky využiacutevajiacute geometrie k tomu aby se světlo

soustředilo do oblasti menšiacute než je jeho vlnovaacute deacutelka

(zatiacutem se neviacute jak do čočky vyhovujiacuteciacutem způsobem

doveacutest světlo)

Využitiacute v budoucnu

mimo jineacute v pozorovaacuteniacute živyacutech buněk při velkeacutem zvětšeniacute

pomociacute obyčejneacuteho světla bez jejich narušeniacute

Viacutece viz Plaacutešek J Mikroskopy se superčočkami httpwwwvesmircz | Vesmiacuter 91 531 zaacuteřiacute 2012

Hranoly

- doplňky optickyacutech systeacutemů

- většinou tvar rovnostranneacuteho trojuacutehelniacuteka

- využiacutevajiacute uacuteplneacuteho odrazu

Funkce

- změna chodu paprsků pod různyacutemi uacutehly

- rozdvojeniacute paprsků

Pazourek 1975

Různeacute typy odraznyacutech hranolů

Hranoly

Různeacute typy hranolů

httplaserykvalitneczimagestext_25_zakladyoptiky1odrazne_hranolyjpg

Viz dichroickeacute zrcadlo u fluorescenčniacuteho mikroskopu

Chod paprsků v binokulaacuterniacutem tubusu

Pazourek 1975

Nikol = hranol z islandskeacuteho vaacutepence

rarr polarizace světla

Dvojlomnyacute vaacutepencovyacute

krystal

ř ndash paprsek řaacutednyacute (zanikaacute na začerněneacute ploše)

mř ndash paprsek mimořaacutednyacute (lineaacuterně polarizovanyacute

využit k osvětleniacute)

začerněnaacute plocha

Nikol

Pazourek 1975

vzduchovaacute štěrbina

- rychlost světla je

v různyacutech směrech různaacute

- uacutehel paprsku řaacutedneacuteho a

mimořaacutedneacuteho je odlišnyacute

(u Vikingů - slunečniacute kaacutemen

soacutelarsteinn)

Chod paprsků ve světlovodneacutem vlaacuteknu

Princip uacuteplnyacute odraz paprsku

- uvnitř skleněneacuteho vlaacutekna je opticky hustšiacute prostřediacute

- nutnost dostatečně silneacuteho světelneacuteho zdroje

Světlovodnaacute vlaacutekna

Pazourek 1975

Širokeacute využitiacute v praxi optickeacute kabely ndash přenos signaacutelů ve sdělovaciacute technice

světlovody umožňujiacuteciacute veacutest denniacute světlo vedeniacute světla u stereolup endoskopů hellip

Page 30: Světelná a elektronová mikroskopie...(AMF – Atomic Force Miroscope) - skenování povrchu materiálu pomocí hrotu zavěšeném na pružném výkyvném raménku, který je přitahován

1931 - Ernst Ruska Max Knoll

prvniacute elektronovyacute mikroskop

tzv prozařovaciacute transmisniacute EM

(TEM ndash Transmission Electron Microscope)

- originaacutelniacute zvětšeniacute 1 000 - 250 000x

Ernst Ruska (1906-1988)

1942 - rastrovaciacute EM

(SEM ndash Scanning Electron Microscope) - postupneacute bombardovaacuteniacute vzorku elektrony

- zvětšeniacute až 30 000x

EM UacuteMG AV ČR Praha-Krč

FEI ndash TECHNAIG2TEM + kryozařiacutezeniacute

200 kV (λ el = 00025 nm)

RS 01 nm

prvkovaacute analyacuteza vzorků

zařiacutezeniacute pro

prvkovou analyacutezu

vzorků

Foto Pavla Vaacutelovaacute 2010

Brněnštiacute vědci z Uacutestavu přiacutestrojoveacute techniky AV ČR (UacutePT) a Mendelovy

univerzity představili novou metodu pozorovaacuteniacute rostlinnyacutech vzorků v jejich

přirozeneacutem stavu (za využitiacute kryoprotektiv)

Viacutece na httpe-svete15cztechnikacesti-vedci-posunuli-hranice-elektronove-mikroskopie-1174818

Enviromentaacutelniacute rastrovaciacute elektronovyacute mikroskop Aquasem II

TEM TITAN FEI Company Mgr Klaacutera Čeacutepe PhD

Vysokorozlišovaciacute transmisniacute elektronovyacute mikroskop

schopnyacute nahleacutednout do struktury materiaacutelů až na uacuterovni atomů

a současně přesně zmapovat jejich chemickeacute složeniacute

Regionaacutelniacute centrum pokročilyacutech

materiaacutelů (RCPTM)

Odd uhliacutekoveacute nanostruktury

PřF UP OL

Vysokorozlišovaciacute transmisniacute

elektronovyacute mikroskop TITAN (FEI)

Foto Pavla Vaacutelovaacute 2015

Transmisniacute elektronovyacute

mikroskop Jeol

Regionaacutelniacute centrum pokročilyacutech materiaacutelů (RCPTM)

Odd uhliacutekoveacute nanostruktury PřF UP OL

Neoptickeacute mikroskopy

1981

Řaacutedkovaciacute tunelovyacute mikroskop (STM ndash Scanning Tunnelling Microscope)

- mapovaacuteniacute povrchu pomociacute pohybu vodiveacuteho hrotu nad vodivyacutem povrchem sledovaneacuteho materiaacutelu

1986

Mikroskop atomaacuterniacutech sil (AMF ndash Atomic Force Miroscope)

- skenovaacuteniacute povrchu materiaacutelu pomociacute hrotu zavěšeneacutem na pružneacutem vyacutekyvneacutem rameacutenku kteryacute je přitahovaacuten elektrostatickyacutemi a Van der Walsovyacutemi silami

Rozlišeniacute v řaacutedech pikometrů (10-12 m) ndash rozeznaacuteniacute struktur

jednotlivyacutech atomů

O p t i c k eacute p r i n c i p y

světelneacute mikroskopie

Reichl J Všetička M Encyklopedie fyziky [online] copy2006-2014

[vid 2014] Dostupneacute z httpfyzikajreichlcommainarticleview431-optika Lepil O (2013) Fyzika pro gymnaacutezia Optika Prometheus Praha 4 přepracovaneacute vydaacuteniacute

Murphy DB Davidson MW (2013) Fundamentals of Light

Microscopy and Electronic Imaging Willey-Blackwell Published

2013 by John Wiley amp Sons Inc Hoboken New Jersey

S v ě t l o

= čaacutest rozsaacutehleacute oblasti elektromagnetickeacuteho zaacuteřeniacute

kterou vniacutemaacuteme zrakem

Rozhlasoveacute a raacutedioveacute vlny 250 km - 1 mm

Infračerveneacute zaacuteřeniacute 05 mm - 08 μm

Světlo (viditelneacute zaacuteřeniacute) 08 μm - 04 μm

Ultrafialoveacute zaacuteřeniacute 04 microm - 01 microm

Roumlntgenovo zaacuteřeniacute (X-paprsky) 15 nm - 0005 nm

γ-zaacuteřeniacute pod 00001 nm

Přibližneacute hodnoty ndash individuaacutelniacute vlastnosti zraku různyacutech lidiacute

S v ě t l o

= čaacutest rozsaacutehleacute oblasti elektromagnetickeacuteho zaacuteřeniacute

kterou vniacutemaacuteme zrakem

rarr se zkracujiacuteciacute se vlnovou deacutelkou se zvyšuje frekvence (energie)

Viditelneacute

Vlnoveacute deacutelky světla a relativniacute citlivost oka

Murphy DB Davidson MW (2013) Fundamentals of Light Microscopy and Electronic

Imaging Willey-Blackwell Published 2013 by John Wiley amp Sons Inc Hoboken New Jersey

= zrakovyacute pigment citlivyacute na

světlo nachaacutezejiacuteciacute se v tyčinkaacutech Jodopsin = zrakovyacute pigment citlivyacute na

barvu nachaacutezejiacuteciacute se v čiacutepciacutech

S v ě t l o

Duaacutelniacute charakter světla ndash vlněniacute i proud čaacutestic (fotonů)

Vlnovyacute model světla

vlna elektrickaacute a magnetickaacute (elektromagnetickaacute vlna je tvořena oscilujiacuteciacutem elektrickyacutem a

magnetickyacutem polem na sebe kolmyacutech a nesouciacutech vpřed energii)

Pro uacutečinky světla v mikroskopu je důležitaacute vlna elektrickaacute

= přiacutečneacute vlněniacute

postupneacute kmitaacuteniacute

jednotlivyacutech vedle sebe

ležiacuteciacutech bodů

Scheacutema světla jako elektromagnetickeacute vlny

Obr httpwwwprosoundwebcomarticleprintinvaders_from_

outer_space_electromagnetic_radiation_interference

λ - vlnovaacute deacutelka

(v oblasti svět zaacuteřeniacute

v rozmeziacute od 380 do 780 nm)

určuje barvu světla

a - amplituda

nejvyššiacute hodnota

určuje intenzitu světla

Z hlediska vlnoveacute deacutelky rozlišujeme

polychromatickeacute x monochromatickeacute světlo (selekce pomociacute barevnyacutech filtrů rarr jednotnaacute vlnovaacute deacutelka světlo zeleneacute červeneacute hellip)

Elektrickaacute vlna - sinusoida

Charakterizovaacutena dvěma veličinami

Pazourek 1975

Vlastnosti světla

Rovnoměrneacute šiacuteřeniacute světla ze zaacuteřiacuteciacuteho bodu na všechny strany rarr vlnovaacute plocha tvaru koule

Paprsek ndash směr kteryacutem se vlněniacute šiacuteřiacute a kteryacute je kolmyacute

na vlnoplochu

Pazourek 1975

- paprsek nepolarizovanyacute (A C) ndash kmitaacute v každeacutem

miacutestě a v průběhu času ve všech možnyacutech směrech

kolmyacutech na směr šiacuteřeniacute paprsku

- paprsek polarizovanyacute (B D1 D2) - kmitaacute v jedneacute

rovině přičemž rovina kmitů (vlněniacute) jednoho z nich je

kolmaacute k rovině kmitů druheacuteho

Pazourek 1975

Polarizovaneacute světlo viz

httpswwwyoutubecomwatchv=gP751qpm4n4

Murphy DB Davidson MW (2013) Fundamentals of Light Microscopy and

Electronic Imaging Jonh Wkiley amp Sons Inc Hoboken New Jersey

Osm různyacutech vlnovyacutech forem světla (znaacutezorňujiacuteciacutech různou kvalitu světla)

Odraz a lom světelnyacutech paprsků

v prostřediacutech různeacute hustoty

Důležitaacute charakteristika prostřediacute

index lomu ( n ) (= optickaacute hustota prostřediacute)

c = rychlost světla ve vakuu (stejnaacute pro všechny λ )

v = rychlost světla určiteacute vlnoveacute deacutelky ve zkoumaneacute laacutetce

c

n =

v

zde absolutniacute index lomu

(bezrozměrnaacute fyzikaacutelniacute veličina jeho jednotka je 1)

Rychlost světla (c) určiteacute vlnoveacute

deacutelky v různyacutech prostřediacutech

c ve vakuu

= 300 000 kms

Index lomu (n) některyacutech laacutetek

vzduch (vakuum) helliphellip 100 (vzduch 10002718)

voda helliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 133

plexisklo helliphelliphelliphelliphelliphellip 140 ndash 152

křemenneacute sklo helliphellip hellip 145 (čočka z křemene z Ninive ndash 7 stol přnl)

běžneacute sklo helliphelliphelliphelliphellip 151

cedrovyacute olej helliphelliphelliphelliphellip 151

imerzniacute olej Olympus hellip 1516 pro fluorescenci 1404

kanadskyacute balzaacutem helliphellip 150

krystal NaCl helliphelliphelliphellip 154

korunoveacute sklo helliphelliphelliphellip 145 ndash 156 (sodno-draselneacute bezolovnateacute)

flintoveacute sklo helliphelliphelliphellip 162 ndash 180 (olovnateacute)

diamant helliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 242

Index lomu je vždy většiacute než 100

očniacute čočka hellip 1406

sklivec helliphelliphellip 1336

Odraz světla rovnyacutem zrcadlem (reflexe)

Zaacutekony

1 Paprsek dopadajiacuteciacute kolmice dopadu a paprsek odraženyacute

ležiacute v jedneacute rovině

2 Uacutehel odrazu se rovnaacute uacutehlu dopadu

Odraz a lom paprsku

k

Důležiteacute pro mikroskopii (astronomii)

- neniacute zaacutevislost na vlnoveacute deacutelce světla (λ)

- na rozdiacutel od lomu paprsků se světelneacute

paprsky se odraacutežejiacute stejně

Pazourek 1975

Zaacutekony

1 Paprsek dopadajiacuteciacute kolmice lomu a paprsek lomenyacute ležiacute v teacuteže rovině

Lom světla (refrakce)

2 Při přechodu z prostřediacute opticky řidšiacuteho do prostřediacute opticky hustšiacuteho se paprsek laacuteme ke kolmici (A)

a z prostřediacute opticky hustšiacuteho

do prostřediacute opticky řidšiacuteho

se laacuteme od kolmice (B)

(C a D) ndash uacuteplnyacute odraz při tzv

mezniacutem uacutehlu dopadu paprsku

v přiacutepadě lomu od kolmice (B)

(viz Nikol odrazneacute hranoly světlovodneacute vlaacutekno nebo fluorescenčniacute metoda TIRFM ndash totaacutelniacute odraz exitačniacuteho zaacuteřeniacute)

Pazourek 1975

Svatyacute Kryštof od

švyacutecarskeacuteho maliacuteře

Konrada Witze (kolem 1400ndash1446)

Witz byl jedniacutem z prvniacutech

maliacuteřů kteryacute namaloval

přesnyacute způsob odrazu

světla na vodě

Disperze (rozklad) světla

= důsledek zaacutevislosti rychlosti světla v laacutetkaacutech na frekvenci světla

(λ = c f)

světlo různyacutech barev (λ)

se laacuteme různě

(červeneacute se lomiacute meacuteně než modreacute)

Přiacuteklad disperze (rozkladu) světla

Primaacuterniacute a sekundaacuterniacute duha Severniacute Čechy Foto Pavla Vaacutelovaacute 2010

D u h a

Jeden z mnoha

optickyacutech

jevů (fotometeorů)

v atmosfeacuteře

Rok 312 nl - před bitvou byzantskeacuteho ciacutesaře Konstantina I (272-337) s

konkurenčniacutem ciacutesařem Maxentiem u bran Řiacutema (tzv bitva u Milvijskeacuteho mostu) se

na obloze objevily tři zaacuteřiacuteciacute křiacuteže (halovyacute sloup parheacutelia a parhelickyacute oblouk)

Konstantin bitvu proti přesile vyhraacutel sjednotil řiacuteši a povolil v niacute vyznaacutevat křesťanstviacute

Maleacute halo (22deg) (viz 1) vedlejšiacute slunce (2) a horniacute a dolniacute halovyacute sloup (3)

vznikajiacuteciacute odrazem a lomem světelnyacutech paprsků na krystalciacutech ledu

Lom světla a dějiny

httptmagazineblogsnytimescom20121126halo-effect_r=0

1

3

2 2

3

Ohyb (difrakce) a interference

světla

Foto Pavla Vaacutelovaacute Bukovany 2015 Rozklad světla na CD - světlo žaacuterovky

Rozklad biacuteleacuteho světla na mřiacutežce

Pevnost poznaacuteniacute Olomouc 2015

Foto Pavla Vaacutelovaacute Olomouc 2015

Ohyb (difrakce) a interference

světla

Ohyb (difrakce) a interference

Difrakčniacute obrazec obsahuje světlaacute a tmavaacute miacutesta kteraacute se

střiacutedajiacute - světlaacute miacutesta nazyacutevaacuteme maxima a tmavaacute minima

Interference světla = sklaacutedaacuteniacute světelnyacutech vln

Předpoklad světlo musiacute byacutet koherentniacute

Podmiacutenka koherence

- paprsky musiacute miacutet stejnou frekvenci

- paprsky musiacute byacutet navzaacutejem rovnoběžneacute

- paprsky musiacute miacutet na sobě nezaacutevislyacute draacutehovyacute (faacutezovyacute) rozdiacutel

Vznik koherentniacuteho zaacuteřeniacute

rozděleniacutem světla

- buď odrazem pomociacute zrcadel

- nebo lomem pomociacute hranolů

Foto Pavla Vaacutelovaacute Praha 151 2016

Interference světla

stejnyacute způsob vlněniacute

(faacuteze je vzaacutejemně posunuta o sudeacute

naacutesobky λ2)

vznik interferenčniacuteho maxima

(konstruktivniacute interference)

Interference světla

asynchronniacute vlněniacute

(vzaacutejemně posunutaacute faacuteze

o licheacute naacutesobky λ2)

vznik interferenčniacuteho

minima

(destruktivniacute interference)

rarr zaacuteřeniacute zanikaacute

rarr zeslabeniacute zaacuteřeniacute

Interference dvou vrstev elektromagnetickeacuteho zaacuteřeniacute u Slunce

Čočky ndash zaacutekladniacute součaacutesti

mikroskopu

= průhlednaacute (nejčastěji skleněnaacute) tělesa omezenaacute

vypuklyacutemi nebo vydutyacutemi kulovityacutemi plochami lišiacuteciacute se od sveacuteho okoliacute odlišnyacutem indexem lomu

Zaacutekladniacute typy čoček

spojky (vypukleacute neboli konvexniacute)

rozptylky (vyduteacute konkaacutevniacute)

Pazourek 1975

Optickaacute osa ( o ) prochaacuteziacute středem čočky

Ohnisko ( F ) - bod do ktereacuteho se soustřeďujiacute paprsky probiacutehajiacuteciacute rovnoběžně s optickou osou

- 2 ohniska - předmětoveacute ohnisko ( F )

obrazoveacute ohnisko ( Facute )

- ohniskovaacute vzdaacutelenost ( f )

vzdaacutelenost ohniska od hlavniacute roviny proloženeacute středem čočky

- dvojnaacutesobnaacute ohniskovaacute vzdaacutelenost ( P Pacute )

Obrazovyacute prostor - prostor v němž vznikaacute obraz

Důležiteacute charakteristiky čočky

f

o

hlavniacute rovina

Pazourek 1975

V přiacutepadě velmi tenkeacute čočky

bull Obraz za optickou soustavou

rarr obraz s k u t e č n yacute

Skutečnyacute obraz je možneacute zachytit na stiacuteniacutetko

nebo na fotografickou desku neskutečnyacute nikoliv

bull Obraz před soustavou

rarr obraz n e s k u t e č n yacute (zdaacutenlivyacute virtuaacutelniacute)

Obraz skutečnyacute a neskutečnyacute

A ndash předmět Aacute- obraz předmětu

Upraveno podle Pazourek 1975

Francouz Augustin Jean Fresnel (1788-1827) [frenel]

Fresnelova čočka [frenelova]

- plochyacute tvar (zachovaacuteny pouze čaacutesti ktereacute měniacute směr chodu světelnyacutech paprsků)

- vyacuterazně nižšiacute hmotnost při zachovaacuteniacute podobnyacutech parametrů

Využitiacute infračidla pohybu semafory světlomety (majaacuteky) a reflektory (světla aut

divadelniacutech a filmovyacutech osvětlovaciacutech zařiacutezeniacute) zpětneacute projektory slunečniacute kolektory

na zaacutekladě tohoto principu takeacute vyacuteroba 3D displejů k mobilniacutem telefonům a televiziacutem

httpwwwmffcuniczverejnostzpravicky03_lupahtm

čočka na majaacuteku

Čočky v budoucnosti

Pokus o vyacuterobu tzv dokonaleacute čočky

Prototyp - upraveneacute tzv Maxwellovo rybiacute oko

- paprsky světla se v něm pohybujiacute po kružniciacutech a

na rozdiacutel od běžnyacutech čoček se při zobrazeniacute využijiacute

všechny paprsky

- superčočky využiacutevajiacute geometrie k tomu aby se světlo

soustředilo do oblasti menšiacute než je jeho vlnovaacute deacutelka

(zatiacutem se neviacute jak do čočky vyhovujiacuteciacutem způsobem

doveacutest světlo)

Využitiacute v budoucnu

mimo jineacute v pozorovaacuteniacute živyacutech buněk při velkeacutem zvětšeniacute

pomociacute obyčejneacuteho světla bez jejich narušeniacute

Viacutece viz Plaacutešek J Mikroskopy se superčočkami httpwwwvesmircz | Vesmiacuter 91 531 zaacuteřiacute 2012

Hranoly

- doplňky optickyacutech systeacutemů

- většinou tvar rovnostranneacuteho trojuacutehelniacuteka

- využiacutevajiacute uacuteplneacuteho odrazu

Funkce

- změna chodu paprsků pod různyacutemi uacutehly

- rozdvojeniacute paprsků

Pazourek 1975

Různeacute typy odraznyacutech hranolů

Hranoly

Různeacute typy hranolů

httplaserykvalitneczimagestext_25_zakladyoptiky1odrazne_hranolyjpg

Viz dichroickeacute zrcadlo u fluorescenčniacuteho mikroskopu

Chod paprsků v binokulaacuterniacutem tubusu

Pazourek 1975

Nikol = hranol z islandskeacuteho vaacutepence

rarr polarizace světla

Dvojlomnyacute vaacutepencovyacute

krystal

ř ndash paprsek řaacutednyacute (zanikaacute na začerněneacute ploše)

mř ndash paprsek mimořaacutednyacute (lineaacuterně polarizovanyacute

využit k osvětleniacute)

začerněnaacute plocha

Nikol

Pazourek 1975

vzduchovaacute štěrbina

- rychlost světla je

v různyacutech směrech různaacute

- uacutehel paprsku řaacutedneacuteho a

mimořaacutedneacuteho je odlišnyacute

(u Vikingů - slunečniacute kaacutemen

soacutelarsteinn)

Chod paprsků ve světlovodneacutem vlaacuteknu

Princip uacuteplnyacute odraz paprsku

- uvnitř skleněneacuteho vlaacutekna je opticky hustšiacute prostřediacute

- nutnost dostatečně silneacuteho světelneacuteho zdroje

Světlovodnaacute vlaacutekna

Pazourek 1975

Širokeacute využitiacute v praxi optickeacute kabely ndash přenos signaacutelů ve sdělovaciacute technice

světlovody umožňujiacuteciacute veacutest denniacute světlo vedeniacute světla u stereolup endoskopů hellip

Page 31: Světelná a elektronová mikroskopie...(AMF – Atomic Force Miroscope) - skenování povrchu materiálu pomocí hrotu zavěšeném na pružném výkyvném raménku, který je přitahován

EM UacuteMG AV ČR Praha-Krč

FEI ndash TECHNAIG2TEM + kryozařiacutezeniacute

200 kV (λ el = 00025 nm)

RS 01 nm

prvkovaacute analyacuteza vzorků

zařiacutezeniacute pro

prvkovou analyacutezu

vzorků

Foto Pavla Vaacutelovaacute 2010

Brněnštiacute vědci z Uacutestavu přiacutestrojoveacute techniky AV ČR (UacutePT) a Mendelovy

univerzity představili novou metodu pozorovaacuteniacute rostlinnyacutech vzorků v jejich

přirozeneacutem stavu (za využitiacute kryoprotektiv)

Viacutece na httpe-svete15cztechnikacesti-vedci-posunuli-hranice-elektronove-mikroskopie-1174818

Enviromentaacutelniacute rastrovaciacute elektronovyacute mikroskop Aquasem II

TEM TITAN FEI Company Mgr Klaacutera Čeacutepe PhD

Vysokorozlišovaciacute transmisniacute elektronovyacute mikroskop

schopnyacute nahleacutednout do struktury materiaacutelů až na uacuterovni atomů

a současně přesně zmapovat jejich chemickeacute složeniacute

Regionaacutelniacute centrum pokročilyacutech

materiaacutelů (RCPTM)

Odd uhliacutekoveacute nanostruktury

PřF UP OL

Vysokorozlišovaciacute transmisniacute

elektronovyacute mikroskop TITAN (FEI)

Foto Pavla Vaacutelovaacute 2015

Transmisniacute elektronovyacute

mikroskop Jeol

Regionaacutelniacute centrum pokročilyacutech materiaacutelů (RCPTM)

Odd uhliacutekoveacute nanostruktury PřF UP OL

Neoptickeacute mikroskopy

1981

Řaacutedkovaciacute tunelovyacute mikroskop (STM ndash Scanning Tunnelling Microscope)

- mapovaacuteniacute povrchu pomociacute pohybu vodiveacuteho hrotu nad vodivyacutem povrchem sledovaneacuteho materiaacutelu

1986

Mikroskop atomaacuterniacutech sil (AMF ndash Atomic Force Miroscope)

- skenovaacuteniacute povrchu materiaacutelu pomociacute hrotu zavěšeneacutem na pružneacutem vyacutekyvneacutem rameacutenku kteryacute je přitahovaacuten elektrostatickyacutemi a Van der Walsovyacutemi silami

Rozlišeniacute v řaacutedech pikometrů (10-12 m) ndash rozeznaacuteniacute struktur

jednotlivyacutech atomů

O p t i c k eacute p r i n c i p y

světelneacute mikroskopie

Reichl J Všetička M Encyklopedie fyziky [online] copy2006-2014

[vid 2014] Dostupneacute z httpfyzikajreichlcommainarticleview431-optika Lepil O (2013) Fyzika pro gymnaacutezia Optika Prometheus Praha 4 přepracovaneacute vydaacuteniacute

Murphy DB Davidson MW (2013) Fundamentals of Light

Microscopy and Electronic Imaging Willey-Blackwell Published

2013 by John Wiley amp Sons Inc Hoboken New Jersey

S v ě t l o

= čaacutest rozsaacutehleacute oblasti elektromagnetickeacuteho zaacuteřeniacute

kterou vniacutemaacuteme zrakem

Rozhlasoveacute a raacutedioveacute vlny 250 km - 1 mm

Infračerveneacute zaacuteřeniacute 05 mm - 08 μm

Světlo (viditelneacute zaacuteřeniacute) 08 μm - 04 μm

Ultrafialoveacute zaacuteřeniacute 04 microm - 01 microm

Roumlntgenovo zaacuteřeniacute (X-paprsky) 15 nm - 0005 nm

γ-zaacuteřeniacute pod 00001 nm

Přibližneacute hodnoty ndash individuaacutelniacute vlastnosti zraku různyacutech lidiacute

S v ě t l o

= čaacutest rozsaacutehleacute oblasti elektromagnetickeacuteho zaacuteřeniacute

kterou vniacutemaacuteme zrakem

rarr se zkracujiacuteciacute se vlnovou deacutelkou se zvyšuje frekvence (energie)

Viditelneacute

Vlnoveacute deacutelky světla a relativniacute citlivost oka

Murphy DB Davidson MW (2013) Fundamentals of Light Microscopy and Electronic

Imaging Willey-Blackwell Published 2013 by John Wiley amp Sons Inc Hoboken New Jersey

= zrakovyacute pigment citlivyacute na

světlo nachaacutezejiacuteciacute se v tyčinkaacutech Jodopsin = zrakovyacute pigment citlivyacute na

barvu nachaacutezejiacuteciacute se v čiacutepciacutech

S v ě t l o

Duaacutelniacute charakter světla ndash vlněniacute i proud čaacutestic (fotonů)

Vlnovyacute model světla

vlna elektrickaacute a magnetickaacute (elektromagnetickaacute vlna je tvořena oscilujiacuteciacutem elektrickyacutem a

magnetickyacutem polem na sebe kolmyacutech a nesouciacutech vpřed energii)

Pro uacutečinky světla v mikroskopu je důležitaacute vlna elektrickaacute

= přiacutečneacute vlněniacute

postupneacute kmitaacuteniacute

jednotlivyacutech vedle sebe

ležiacuteciacutech bodů

Scheacutema světla jako elektromagnetickeacute vlny

Obr httpwwwprosoundwebcomarticleprintinvaders_from_

outer_space_electromagnetic_radiation_interference

λ - vlnovaacute deacutelka

(v oblasti svět zaacuteřeniacute

v rozmeziacute od 380 do 780 nm)

určuje barvu světla

a - amplituda

nejvyššiacute hodnota

určuje intenzitu světla

Z hlediska vlnoveacute deacutelky rozlišujeme

polychromatickeacute x monochromatickeacute světlo (selekce pomociacute barevnyacutech filtrů rarr jednotnaacute vlnovaacute deacutelka světlo zeleneacute červeneacute hellip)

Elektrickaacute vlna - sinusoida

Charakterizovaacutena dvěma veličinami

Pazourek 1975

Vlastnosti světla

Rovnoměrneacute šiacuteřeniacute světla ze zaacuteřiacuteciacuteho bodu na všechny strany rarr vlnovaacute plocha tvaru koule

Paprsek ndash směr kteryacutem se vlněniacute šiacuteřiacute a kteryacute je kolmyacute

na vlnoplochu

Pazourek 1975

- paprsek nepolarizovanyacute (A C) ndash kmitaacute v každeacutem

miacutestě a v průběhu času ve všech možnyacutech směrech

kolmyacutech na směr šiacuteřeniacute paprsku

- paprsek polarizovanyacute (B D1 D2) - kmitaacute v jedneacute

rovině přičemž rovina kmitů (vlněniacute) jednoho z nich je

kolmaacute k rovině kmitů druheacuteho

Pazourek 1975

Polarizovaneacute světlo viz

httpswwwyoutubecomwatchv=gP751qpm4n4

Murphy DB Davidson MW (2013) Fundamentals of Light Microscopy and

Electronic Imaging Jonh Wkiley amp Sons Inc Hoboken New Jersey

Osm různyacutech vlnovyacutech forem světla (znaacutezorňujiacuteciacutech různou kvalitu světla)

Odraz a lom světelnyacutech paprsků

v prostřediacutech různeacute hustoty

Důležitaacute charakteristika prostřediacute

index lomu ( n ) (= optickaacute hustota prostřediacute)

c = rychlost světla ve vakuu (stejnaacute pro všechny λ )

v = rychlost světla určiteacute vlnoveacute deacutelky ve zkoumaneacute laacutetce

c

n =

v

zde absolutniacute index lomu

(bezrozměrnaacute fyzikaacutelniacute veličina jeho jednotka je 1)

Rychlost světla (c) určiteacute vlnoveacute

deacutelky v různyacutech prostřediacutech

c ve vakuu

= 300 000 kms

Index lomu (n) některyacutech laacutetek

vzduch (vakuum) helliphellip 100 (vzduch 10002718)

voda helliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 133

plexisklo helliphelliphelliphelliphelliphellip 140 ndash 152

křemenneacute sklo helliphellip hellip 145 (čočka z křemene z Ninive ndash 7 stol přnl)

běžneacute sklo helliphelliphelliphelliphellip 151

cedrovyacute olej helliphelliphelliphelliphellip 151

imerzniacute olej Olympus hellip 1516 pro fluorescenci 1404

kanadskyacute balzaacutem helliphellip 150

krystal NaCl helliphelliphelliphellip 154

korunoveacute sklo helliphelliphelliphellip 145 ndash 156 (sodno-draselneacute bezolovnateacute)

flintoveacute sklo helliphelliphelliphellip 162 ndash 180 (olovnateacute)

diamant helliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 242

Index lomu je vždy většiacute než 100

očniacute čočka hellip 1406

sklivec helliphelliphellip 1336

Odraz světla rovnyacutem zrcadlem (reflexe)

Zaacutekony

1 Paprsek dopadajiacuteciacute kolmice dopadu a paprsek odraženyacute

ležiacute v jedneacute rovině

2 Uacutehel odrazu se rovnaacute uacutehlu dopadu

Odraz a lom paprsku

k

Důležiteacute pro mikroskopii (astronomii)

- neniacute zaacutevislost na vlnoveacute deacutelce světla (λ)

- na rozdiacutel od lomu paprsků se světelneacute

paprsky se odraacutežejiacute stejně

Pazourek 1975

Zaacutekony

1 Paprsek dopadajiacuteciacute kolmice lomu a paprsek lomenyacute ležiacute v teacuteže rovině

Lom světla (refrakce)

2 Při přechodu z prostřediacute opticky řidšiacuteho do prostřediacute opticky hustšiacuteho se paprsek laacuteme ke kolmici (A)

a z prostřediacute opticky hustšiacuteho

do prostřediacute opticky řidšiacuteho

se laacuteme od kolmice (B)

(C a D) ndash uacuteplnyacute odraz při tzv

mezniacutem uacutehlu dopadu paprsku

v přiacutepadě lomu od kolmice (B)

(viz Nikol odrazneacute hranoly světlovodneacute vlaacutekno nebo fluorescenčniacute metoda TIRFM ndash totaacutelniacute odraz exitačniacuteho zaacuteřeniacute)

Pazourek 1975

Svatyacute Kryštof od

švyacutecarskeacuteho maliacuteře

Konrada Witze (kolem 1400ndash1446)

Witz byl jedniacutem z prvniacutech

maliacuteřů kteryacute namaloval

přesnyacute způsob odrazu

světla na vodě

Disperze (rozklad) světla

= důsledek zaacutevislosti rychlosti světla v laacutetkaacutech na frekvenci světla

(λ = c f)

světlo různyacutech barev (λ)

se laacuteme různě

(červeneacute se lomiacute meacuteně než modreacute)

Přiacuteklad disperze (rozkladu) světla

Primaacuterniacute a sekundaacuterniacute duha Severniacute Čechy Foto Pavla Vaacutelovaacute 2010

D u h a

Jeden z mnoha

optickyacutech

jevů (fotometeorů)

v atmosfeacuteře

Rok 312 nl - před bitvou byzantskeacuteho ciacutesaře Konstantina I (272-337) s

konkurenčniacutem ciacutesařem Maxentiem u bran Řiacutema (tzv bitva u Milvijskeacuteho mostu) se

na obloze objevily tři zaacuteřiacuteciacute křiacuteže (halovyacute sloup parheacutelia a parhelickyacute oblouk)

Konstantin bitvu proti přesile vyhraacutel sjednotil řiacuteši a povolil v niacute vyznaacutevat křesťanstviacute

Maleacute halo (22deg) (viz 1) vedlejšiacute slunce (2) a horniacute a dolniacute halovyacute sloup (3)

vznikajiacuteciacute odrazem a lomem světelnyacutech paprsků na krystalciacutech ledu

Lom světla a dějiny

httptmagazineblogsnytimescom20121126halo-effect_r=0

1

3

2 2

3

Ohyb (difrakce) a interference

světla

Foto Pavla Vaacutelovaacute Bukovany 2015 Rozklad světla na CD - světlo žaacuterovky

Rozklad biacuteleacuteho světla na mřiacutežce

Pevnost poznaacuteniacute Olomouc 2015

Foto Pavla Vaacutelovaacute Olomouc 2015

Ohyb (difrakce) a interference

světla

Ohyb (difrakce) a interference

Difrakčniacute obrazec obsahuje světlaacute a tmavaacute miacutesta kteraacute se

střiacutedajiacute - světlaacute miacutesta nazyacutevaacuteme maxima a tmavaacute minima

Interference světla = sklaacutedaacuteniacute světelnyacutech vln

Předpoklad světlo musiacute byacutet koherentniacute

Podmiacutenka koherence

- paprsky musiacute miacutet stejnou frekvenci

- paprsky musiacute byacutet navzaacutejem rovnoběžneacute

- paprsky musiacute miacutet na sobě nezaacutevislyacute draacutehovyacute (faacutezovyacute) rozdiacutel

Vznik koherentniacuteho zaacuteřeniacute

rozděleniacutem světla

- buď odrazem pomociacute zrcadel

- nebo lomem pomociacute hranolů

Foto Pavla Vaacutelovaacute Praha 151 2016

Interference světla

stejnyacute způsob vlněniacute

(faacuteze je vzaacutejemně posunuta o sudeacute

naacutesobky λ2)

vznik interferenčniacuteho maxima

(konstruktivniacute interference)

Interference světla

asynchronniacute vlněniacute

(vzaacutejemně posunutaacute faacuteze

o licheacute naacutesobky λ2)

vznik interferenčniacuteho

minima

(destruktivniacute interference)

rarr zaacuteřeniacute zanikaacute

rarr zeslabeniacute zaacuteřeniacute

Interference dvou vrstev elektromagnetickeacuteho zaacuteřeniacute u Slunce

Čočky ndash zaacutekladniacute součaacutesti

mikroskopu

= průhlednaacute (nejčastěji skleněnaacute) tělesa omezenaacute

vypuklyacutemi nebo vydutyacutemi kulovityacutemi plochami lišiacuteciacute se od sveacuteho okoliacute odlišnyacutem indexem lomu

Zaacutekladniacute typy čoček

spojky (vypukleacute neboli konvexniacute)

rozptylky (vyduteacute konkaacutevniacute)

Pazourek 1975

Optickaacute osa ( o ) prochaacuteziacute středem čočky

Ohnisko ( F ) - bod do ktereacuteho se soustřeďujiacute paprsky probiacutehajiacuteciacute rovnoběžně s optickou osou

- 2 ohniska - předmětoveacute ohnisko ( F )

obrazoveacute ohnisko ( Facute )

- ohniskovaacute vzdaacutelenost ( f )

vzdaacutelenost ohniska od hlavniacute roviny proloženeacute středem čočky

- dvojnaacutesobnaacute ohniskovaacute vzdaacutelenost ( P Pacute )

Obrazovyacute prostor - prostor v němž vznikaacute obraz

Důležiteacute charakteristiky čočky

f

o

hlavniacute rovina

Pazourek 1975

V přiacutepadě velmi tenkeacute čočky

bull Obraz za optickou soustavou

rarr obraz s k u t e č n yacute

Skutečnyacute obraz je možneacute zachytit na stiacuteniacutetko

nebo na fotografickou desku neskutečnyacute nikoliv

bull Obraz před soustavou

rarr obraz n e s k u t e č n yacute (zdaacutenlivyacute virtuaacutelniacute)

Obraz skutečnyacute a neskutečnyacute

A ndash předmět Aacute- obraz předmětu

Upraveno podle Pazourek 1975

Francouz Augustin Jean Fresnel (1788-1827) [frenel]

Fresnelova čočka [frenelova]

- plochyacute tvar (zachovaacuteny pouze čaacutesti ktereacute měniacute směr chodu světelnyacutech paprsků)

- vyacuterazně nižšiacute hmotnost při zachovaacuteniacute podobnyacutech parametrů

Využitiacute infračidla pohybu semafory světlomety (majaacuteky) a reflektory (světla aut

divadelniacutech a filmovyacutech osvětlovaciacutech zařiacutezeniacute) zpětneacute projektory slunečniacute kolektory

na zaacutekladě tohoto principu takeacute vyacuteroba 3D displejů k mobilniacutem telefonům a televiziacutem

httpwwwmffcuniczverejnostzpravicky03_lupahtm

čočka na majaacuteku

Čočky v budoucnosti

Pokus o vyacuterobu tzv dokonaleacute čočky

Prototyp - upraveneacute tzv Maxwellovo rybiacute oko

- paprsky světla se v něm pohybujiacute po kružniciacutech a

na rozdiacutel od běžnyacutech čoček se při zobrazeniacute využijiacute

všechny paprsky

- superčočky využiacutevajiacute geometrie k tomu aby se světlo

soustředilo do oblasti menšiacute než je jeho vlnovaacute deacutelka

(zatiacutem se neviacute jak do čočky vyhovujiacuteciacutem způsobem

doveacutest světlo)

Využitiacute v budoucnu

mimo jineacute v pozorovaacuteniacute živyacutech buněk při velkeacutem zvětšeniacute

pomociacute obyčejneacuteho světla bez jejich narušeniacute

Viacutece viz Plaacutešek J Mikroskopy se superčočkami httpwwwvesmircz | Vesmiacuter 91 531 zaacuteřiacute 2012

Hranoly

- doplňky optickyacutech systeacutemů

- většinou tvar rovnostranneacuteho trojuacutehelniacuteka

- využiacutevajiacute uacuteplneacuteho odrazu

Funkce

- změna chodu paprsků pod různyacutemi uacutehly

- rozdvojeniacute paprsků

Pazourek 1975

Různeacute typy odraznyacutech hranolů

Hranoly

Různeacute typy hranolů

httplaserykvalitneczimagestext_25_zakladyoptiky1odrazne_hranolyjpg

Viz dichroickeacute zrcadlo u fluorescenčniacuteho mikroskopu

Chod paprsků v binokulaacuterniacutem tubusu

Pazourek 1975

Nikol = hranol z islandskeacuteho vaacutepence

rarr polarizace světla

Dvojlomnyacute vaacutepencovyacute

krystal

ř ndash paprsek řaacutednyacute (zanikaacute na začerněneacute ploše)

mř ndash paprsek mimořaacutednyacute (lineaacuterně polarizovanyacute

využit k osvětleniacute)

začerněnaacute plocha

Nikol

Pazourek 1975

vzduchovaacute štěrbina

- rychlost světla je

v různyacutech směrech různaacute

- uacutehel paprsku řaacutedneacuteho a

mimořaacutedneacuteho je odlišnyacute

(u Vikingů - slunečniacute kaacutemen

soacutelarsteinn)

Chod paprsků ve světlovodneacutem vlaacuteknu

Princip uacuteplnyacute odraz paprsku

- uvnitř skleněneacuteho vlaacutekna je opticky hustšiacute prostřediacute

- nutnost dostatečně silneacuteho světelneacuteho zdroje

Světlovodnaacute vlaacutekna

Pazourek 1975

Širokeacute využitiacute v praxi optickeacute kabely ndash přenos signaacutelů ve sdělovaciacute technice

světlovody umožňujiacuteciacute veacutest denniacute světlo vedeniacute světla u stereolup endoskopů hellip

Page 32: Světelná a elektronová mikroskopie...(AMF – Atomic Force Miroscope) - skenování povrchu materiálu pomocí hrotu zavěšeném na pružném výkyvném raménku, který je přitahován

Brněnštiacute vědci z Uacutestavu přiacutestrojoveacute techniky AV ČR (UacutePT) a Mendelovy

univerzity představili novou metodu pozorovaacuteniacute rostlinnyacutech vzorků v jejich

přirozeneacutem stavu (za využitiacute kryoprotektiv)

Viacutece na httpe-svete15cztechnikacesti-vedci-posunuli-hranice-elektronove-mikroskopie-1174818

Enviromentaacutelniacute rastrovaciacute elektronovyacute mikroskop Aquasem II

TEM TITAN FEI Company Mgr Klaacutera Čeacutepe PhD

Vysokorozlišovaciacute transmisniacute elektronovyacute mikroskop

schopnyacute nahleacutednout do struktury materiaacutelů až na uacuterovni atomů

a současně přesně zmapovat jejich chemickeacute složeniacute

Regionaacutelniacute centrum pokročilyacutech

materiaacutelů (RCPTM)

Odd uhliacutekoveacute nanostruktury

PřF UP OL

Vysokorozlišovaciacute transmisniacute

elektronovyacute mikroskop TITAN (FEI)

Foto Pavla Vaacutelovaacute 2015

Transmisniacute elektronovyacute

mikroskop Jeol

Regionaacutelniacute centrum pokročilyacutech materiaacutelů (RCPTM)

Odd uhliacutekoveacute nanostruktury PřF UP OL

Neoptickeacute mikroskopy

1981

Řaacutedkovaciacute tunelovyacute mikroskop (STM ndash Scanning Tunnelling Microscope)

- mapovaacuteniacute povrchu pomociacute pohybu vodiveacuteho hrotu nad vodivyacutem povrchem sledovaneacuteho materiaacutelu

1986

Mikroskop atomaacuterniacutech sil (AMF ndash Atomic Force Miroscope)

- skenovaacuteniacute povrchu materiaacutelu pomociacute hrotu zavěšeneacutem na pružneacutem vyacutekyvneacutem rameacutenku kteryacute je přitahovaacuten elektrostatickyacutemi a Van der Walsovyacutemi silami

Rozlišeniacute v řaacutedech pikometrů (10-12 m) ndash rozeznaacuteniacute struktur

jednotlivyacutech atomů

O p t i c k eacute p r i n c i p y

světelneacute mikroskopie

Reichl J Všetička M Encyklopedie fyziky [online] copy2006-2014

[vid 2014] Dostupneacute z httpfyzikajreichlcommainarticleview431-optika Lepil O (2013) Fyzika pro gymnaacutezia Optika Prometheus Praha 4 přepracovaneacute vydaacuteniacute

Murphy DB Davidson MW (2013) Fundamentals of Light

Microscopy and Electronic Imaging Willey-Blackwell Published

2013 by John Wiley amp Sons Inc Hoboken New Jersey

S v ě t l o

= čaacutest rozsaacutehleacute oblasti elektromagnetickeacuteho zaacuteřeniacute

kterou vniacutemaacuteme zrakem

Rozhlasoveacute a raacutedioveacute vlny 250 km - 1 mm

Infračerveneacute zaacuteřeniacute 05 mm - 08 μm

Světlo (viditelneacute zaacuteřeniacute) 08 μm - 04 μm

Ultrafialoveacute zaacuteřeniacute 04 microm - 01 microm

Roumlntgenovo zaacuteřeniacute (X-paprsky) 15 nm - 0005 nm

γ-zaacuteřeniacute pod 00001 nm

Přibližneacute hodnoty ndash individuaacutelniacute vlastnosti zraku různyacutech lidiacute

S v ě t l o

= čaacutest rozsaacutehleacute oblasti elektromagnetickeacuteho zaacuteřeniacute

kterou vniacutemaacuteme zrakem

rarr se zkracujiacuteciacute se vlnovou deacutelkou se zvyšuje frekvence (energie)

Viditelneacute

Vlnoveacute deacutelky světla a relativniacute citlivost oka

Murphy DB Davidson MW (2013) Fundamentals of Light Microscopy and Electronic

Imaging Willey-Blackwell Published 2013 by John Wiley amp Sons Inc Hoboken New Jersey

= zrakovyacute pigment citlivyacute na

světlo nachaacutezejiacuteciacute se v tyčinkaacutech Jodopsin = zrakovyacute pigment citlivyacute na

barvu nachaacutezejiacuteciacute se v čiacutepciacutech

S v ě t l o

Duaacutelniacute charakter světla ndash vlněniacute i proud čaacutestic (fotonů)

Vlnovyacute model světla

vlna elektrickaacute a magnetickaacute (elektromagnetickaacute vlna je tvořena oscilujiacuteciacutem elektrickyacutem a

magnetickyacutem polem na sebe kolmyacutech a nesouciacutech vpřed energii)

Pro uacutečinky světla v mikroskopu je důležitaacute vlna elektrickaacute

= přiacutečneacute vlněniacute

postupneacute kmitaacuteniacute

jednotlivyacutech vedle sebe

ležiacuteciacutech bodů

Scheacutema světla jako elektromagnetickeacute vlny

Obr httpwwwprosoundwebcomarticleprintinvaders_from_

outer_space_electromagnetic_radiation_interference

λ - vlnovaacute deacutelka

(v oblasti svět zaacuteřeniacute

v rozmeziacute od 380 do 780 nm)

určuje barvu světla

a - amplituda

nejvyššiacute hodnota

určuje intenzitu světla

Z hlediska vlnoveacute deacutelky rozlišujeme

polychromatickeacute x monochromatickeacute světlo (selekce pomociacute barevnyacutech filtrů rarr jednotnaacute vlnovaacute deacutelka světlo zeleneacute červeneacute hellip)

Elektrickaacute vlna - sinusoida

Charakterizovaacutena dvěma veličinami

Pazourek 1975

Vlastnosti světla

Rovnoměrneacute šiacuteřeniacute světla ze zaacuteřiacuteciacuteho bodu na všechny strany rarr vlnovaacute plocha tvaru koule

Paprsek ndash směr kteryacutem se vlněniacute šiacuteřiacute a kteryacute je kolmyacute

na vlnoplochu

Pazourek 1975

- paprsek nepolarizovanyacute (A C) ndash kmitaacute v každeacutem

miacutestě a v průběhu času ve všech možnyacutech směrech

kolmyacutech na směr šiacuteřeniacute paprsku

- paprsek polarizovanyacute (B D1 D2) - kmitaacute v jedneacute

rovině přičemž rovina kmitů (vlněniacute) jednoho z nich je

kolmaacute k rovině kmitů druheacuteho

Pazourek 1975

Polarizovaneacute světlo viz

httpswwwyoutubecomwatchv=gP751qpm4n4

Murphy DB Davidson MW (2013) Fundamentals of Light Microscopy and

Electronic Imaging Jonh Wkiley amp Sons Inc Hoboken New Jersey

Osm různyacutech vlnovyacutech forem světla (znaacutezorňujiacuteciacutech různou kvalitu světla)

Odraz a lom světelnyacutech paprsků

v prostřediacutech různeacute hustoty

Důležitaacute charakteristika prostřediacute

index lomu ( n ) (= optickaacute hustota prostřediacute)

c = rychlost světla ve vakuu (stejnaacute pro všechny λ )

v = rychlost světla určiteacute vlnoveacute deacutelky ve zkoumaneacute laacutetce

c

n =

v

zde absolutniacute index lomu

(bezrozměrnaacute fyzikaacutelniacute veličina jeho jednotka je 1)

Rychlost světla (c) určiteacute vlnoveacute

deacutelky v různyacutech prostřediacutech

c ve vakuu

= 300 000 kms

Index lomu (n) některyacutech laacutetek

vzduch (vakuum) helliphellip 100 (vzduch 10002718)

voda helliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 133

plexisklo helliphelliphelliphelliphelliphellip 140 ndash 152

křemenneacute sklo helliphellip hellip 145 (čočka z křemene z Ninive ndash 7 stol přnl)

běžneacute sklo helliphelliphelliphelliphellip 151

cedrovyacute olej helliphelliphelliphelliphellip 151

imerzniacute olej Olympus hellip 1516 pro fluorescenci 1404

kanadskyacute balzaacutem helliphellip 150

krystal NaCl helliphelliphelliphellip 154

korunoveacute sklo helliphelliphelliphellip 145 ndash 156 (sodno-draselneacute bezolovnateacute)

flintoveacute sklo helliphelliphelliphellip 162 ndash 180 (olovnateacute)

diamant helliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 242

Index lomu je vždy většiacute než 100

očniacute čočka hellip 1406

sklivec helliphelliphellip 1336

Odraz světla rovnyacutem zrcadlem (reflexe)

Zaacutekony

1 Paprsek dopadajiacuteciacute kolmice dopadu a paprsek odraženyacute

ležiacute v jedneacute rovině

2 Uacutehel odrazu se rovnaacute uacutehlu dopadu

Odraz a lom paprsku

k

Důležiteacute pro mikroskopii (astronomii)

- neniacute zaacutevislost na vlnoveacute deacutelce světla (λ)

- na rozdiacutel od lomu paprsků se světelneacute

paprsky se odraacutežejiacute stejně

Pazourek 1975

Zaacutekony

1 Paprsek dopadajiacuteciacute kolmice lomu a paprsek lomenyacute ležiacute v teacuteže rovině

Lom světla (refrakce)

2 Při přechodu z prostřediacute opticky řidšiacuteho do prostřediacute opticky hustšiacuteho se paprsek laacuteme ke kolmici (A)

a z prostřediacute opticky hustšiacuteho

do prostřediacute opticky řidšiacuteho

se laacuteme od kolmice (B)

(C a D) ndash uacuteplnyacute odraz při tzv

mezniacutem uacutehlu dopadu paprsku

v přiacutepadě lomu od kolmice (B)

(viz Nikol odrazneacute hranoly světlovodneacute vlaacutekno nebo fluorescenčniacute metoda TIRFM ndash totaacutelniacute odraz exitačniacuteho zaacuteřeniacute)

Pazourek 1975

Svatyacute Kryštof od

švyacutecarskeacuteho maliacuteře

Konrada Witze (kolem 1400ndash1446)

Witz byl jedniacutem z prvniacutech

maliacuteřů kteryacute namaloval

přesnyacute způsob odrazu

světla na vodě

Disperze (rozklad) světla

= důsledek zaacutevislosti rychlosti světla v laacutetkaacutech na frekvenci světla

(λ = c f)

světlo různyacutech barev (λ)

se laacuteme různě

(červeneacute se lomiacute meacuteně než modreacute)

Přiacuteklad disperze (rozkladu) světla

Primaacuterniacute a sekundaacuterniacute duha Severniacute Čechy Foto Pavla Vaacutelovaacute 2010

D u h a

Jeden z mnoha

optickyacutech

jevů (fotometeorů)

v atmosfeacuteře

Rok 312 nl - před bitvou byzantskeacuteho ciacutesaře Konstantina I (272-337) s

konkurenčniacutem ciacutesařem Maxentiem u bran Řiacutema (tzv bitva u Milvijskeacuteho mostu) se

na obloze objevily tři zaacuteřiacuteciacute křiacuteže (halovyacute sloup parheacutelia a parhelickyacute oblouk)

Konstantin bitvu proti přesile vyhraacutel sjednotil řiacuteši a povolil v niacute vyznaacutevat křesťanstviacute

Maleacute halo (22deg) (viz 1) vedlejšiacute slunce (2) a horniacute a dolniacute halovyacute sloup (3)

vznikajiacuteciacute odrazem a lomem světelnyacutech paprsků na krystalciacutech ledu

Lom světla a dějiny

httptmagazineblogsnytimescom20121126halo-effect_r=0

1

3

2 2

3

Ohyb (difrakce) a interference

světla

Foto Pavla Vaacutelovaacute Bukovany 2015 Rozklad světla na CD - světlo žaacuterovky

Rozklad biacuteleacuteho světla na mřiacutežce

Pevnost poznaacuteniacute Olomouc 2015

Foto Pavla Vaacutelovaacute Olomouc 2015

Ohyb (difrakce) a interference

světla

Ohyb (difrakce) a interference

Difrakčniacute obrazec obsahuje světlaacute a tmavaacute miacutesta kteraacute se

střiacutedajiacute - světlaacute miacutesta nazyacutevaacuteme maxima a tmavaacute minima

Interference světla = sklaacutedaacuteniacute světelnyacutech vln

Předpoklad světlo musiacute byacutet koherentniacute

Podmiacutenka koherence

- paprsky musiacute miacutet stejnou frekvenci

- paprsky musiacute byacutet navzaacutejem rovnoběžneacute

- paprsky musiacute miacutet na sobě nezaacutevislyacute draacutehovyacute (faacutezovyacute) rozdiacutel

Vznik koherentniacuteho zaacuteřeniacute

rozděleniacutem světla

- buď odrazem pomociacute zrcadel

- nebo lomem pomociacute hranolů

Foto Pavla Vaacutelovaacute Praha 151 2016

Interference světla

stejnyacute způsob vlněniacute

(faacuteze je vzaacutejemně posunuta o sudeacute

naacutesobky λ2)

vznik interferenčniacuteho maxima

(konstruktivniacute interference)

Interference světla

asynchronniacute vlněniacute

(vzaacutejemně posunutaacute faacuteze

o licheacute naacutesobky λ2)

vznik interferenčniacuteho

minima

(destruktivniacute interference)

rarr zaacuteřeniacute zanikaacute

rarr zeslabeniacute zaacuteřeniacute

Interference dvou vrstev elektromagnetickeacuteho zaacuteřeniacute u Slunce

Čočky ndash zaacutekladniacute součaacutesti

mikroskopu

= průhlednaacute (nejčastěji skleněnaacute) tělesa omezenaacute

vypuklyacutemi nebo vydutyacutemi kulovityacutemi plochami lišiacuteciacute se od sveacuteho okoliacute odlišnyacutem indexem lomu

Zaacutekladniacute typy čoček

spojky (vypukleacute neboli konvexniacute)

rozptylky (vyduteacute konkaacutevniacute)

Pazourek 1975

Optickaacute osa ( o ) prochaacuteziacute středem čočky

Ohnisko ( F ) - bod do ktereacuteho se soustřeďujiacute paprsky probiacutehajiacuteciacute rovnoběžně s optickou osou

- 2 ohniska - předmětoveacute ohnisko ( F )

obrazoveacute ohnisko ( Facute )

- ohniskovaacute vzdaacutelenost ( f )

vzdaacutelenost ohniska od hlavniacute roviny proloženeacute středem čočky

- dvojnaacutesobnaacute ohniskovaacute vzdaacutelenost ( P Pacute )

Obrazovyacute prostor - prostor v němž vznikaacute obraz

Důležiteacute charakteristiky čočky

f

o

hlavniacute rovina

Pazourek 1975

V přiacutepadě velmi tenkeacute čočky

bull Obraz za optickou soustavou

rarr obraz s k u t e č n yacute

Skutečnyacute obraz je možneacute zachytit na stiacuteniacutetko

nebo na fotografickou desku neskutečnyacute nikoliv

bull Obraz před soustavou

rarr obraz n e s k u t e č n yacute (zdaacutenlivyacute virtuaacutelniacute)

Obraz skutečnyacute a neskutečnyacute

A ndash předmět Aacute- obraz předmětu

Upraveno podle Pazourek 1975

Francouz Augustin Jean Fresnel (1788-1827) [frenel]

Fresnelova čočka [frenelova]

- plochyacute tvar (zachovaacuteny pouze čaacutesti ktereacute měniacute směr chodu světelnyacutech paprsků)

- vyacuterazně nižšiacute hmotnost při zachovaacuteniacute podobnyacutech parametrů

Využitiacute infračidla pohybu semafory světlomety (majaacuteky) a reflektory (světla aut

divadelniacutech a filmovyacutech osvětlovaciacutech zařiacutezeniacute) zpětneacute projektory slunečniacute kolektory

na zaacutekladě tohoto principu takeacute vyacuteroba 3D displejů k mobilniacutem telefonům a televiziacutem

httpwwwmffcuniczverejnostzpravicky03_lupahtm

čočka na majaacuteku

Čočky v budoucnosti

Pokus o vyacuterobu tzv dokonaleacute čočky

Prototyp - upraveneacute tzv Maxwellovo rybiacute oko

- paprsky světla se v něm pohybujiacute po kružniciacutech a

na rozdiacutel od běžnyacutech čoček se při zobrazeniacute využijiacute

všechny paprsky

- superčočky využiacutevajiacute geometrie k tomu aby se světlo

soustředilo do oblasti menšiacute než je jeho vlnovaacute deacutelka

(zatiacutem se neviacute jak do čočky vyhovujiacuteciacutem způsobem

doveacutest světlo)

Využitiacute v budoucnu

mimo jineacute v pozorovaacuteniacute živyacutech buněk při velkeacutem zvětšeniacute

pomociacute obyčejneacuteho světla bez jejich narušeniacute

Viacutece viz Plaacutešek J Mikroskopy se superčočkami httpwwwvesmircz | Vesmiacuter 91 531 zaacuteřiacute 2012

Hranoly

- doplňky optickyacutech systeacutemů

- většinou tvar rovnostranneacuteho trojuacutehelniacuteka

- využiacutevajiacute uacuteplneacuteho odrazu

Funkce

- změna chodu paprsků pod různyacutemi uacutehly

- rozdvojeniacute paprsků

Pazourek 1975

Různeacute typy odraznyacutech hranolů

Hranoly

Různeacute typy hranolů

httplaserykvalitneczimagestext_25_zakladyoptiky1odrazne_hranolyjpg

Viz dichroickeacute zrcadlo u fluorescenčniacuteho mikroskopu

Chod paprsků v binokulaacuterniacutem tubusu

Pazourek 1975

Nikol = hranol z islandskeacuteho vaacutepence

rarr polarizace světla

Dvojlomnyacute vaacutepencovyacute

krystal

ř ndash paprsek řaacutednyacute (zanikaacute na začerněneacute ploše)

mř ndash paprsek mimořaacutednyacute (lineaacuterně polarizovanyacute

využit k osvětleniacute)

začerněnaacute plocha

Nikol

Pazourek 1975

vzduchovaacute štěrbina

- rychlost světla je

v různyacutech směrech různaacute

- uacutehel paprsku řaacutedneacuteho a

mimořaacutedneacuteho je odlišnyacute

(u Vikingů - slunečniacute kaacutemen

soacutelarsteinn)

Chod paprsků ve světlovodneacutem vlaacuteknu

Princip uacuteplnyacute odraz paprsku

- uvnitř skleněneacuteho vlaacutekna je opticky hustšiacute prostřediacute

- nutnost dostatečně silneacuteho světelneacuteho zdroje

Světlovodnaacute vlaacutekna

Pazourek 1975

Širokeacute využitiacute v praxi optickeacute kabely ndash přenos signaacutelů ve sdělovaciacute technice

světlovody umožňujiacuteciacute veacutest denniacute světlo vedeniacute světla u stereolup endoskopů hellip

Page 33: Světelná a elektronová mikroskopie...(AMF – Atomic Force Miroscope) - skenování povrchu materiálu pomocí hrotu zavěšeném na pružném výkyvném raménku, který je přitahován

TEM TITAN FEI Company Mgr Klaacutera Čeacutepe PhD

Vysokorozlišovaciacute transmisniacute elektronovyacute mikroskop

schopnyacute nahleacutednout do struktury materiaacutelů až na uacuterovni atomů

a současně přesně zmapovat jejich chemickeacute složeniacute

Regionaacutelniacute centrum pokročilyacutech

materiaacutelů (RCPTM)

Odd uhliacutekoveacute nanostruktury

PřF UP OL

Vysokorozlišovaciacute transmisniacute

elektronovyacute mikroskop TITAN (FEI)

Foto Pavla Vaacutelovaacute 2015

Transmisniacute elektronovyacute

mikroskop Jeol

Regionaacutelniacute centrum pokročilyacutech materiaacutelů (RCPTM)

Odd uhliacutekoveacute nanostruktury PřF UP OL

Neoptickeacute mikroskopy

1981

Řaacutedkovaciacute tunelovyacute mikroskop (STM ndash Scanning Tunnelling Microscope)

- mapovaacuteniacute povrchu pomociacute pohybu vodiveacuteho hrotu nad vodivyacutem povrchem sledovaneacuteho materiaacutelu

1986

Mikroskop atomaacuterniacutech sil (AMF ndash Atomic Force Miroscope)

- skenovaacuteniacute povrchu materiaacutelu pomociacute hrotu zavěšeneacutem na pružneacutem vyacutekyvneacutem rameacutenku kteryacute je přitahovaacuten elektrostatickyacutemi a Van der Walsovyacutemi silami

Rozlišeniacute v řaacutedech pikometrů (10-12 m) ndash rozeznaacuteniacute struktur

jednotlivyacutech atomů

O p t i c k eacute p r i n c i p y

světelneacute mikroskopie

Reichl J Všetička M Encyklopedie fyziky [online] copy2006-2014

[vid 2014] Dostupneacute z httpfyzikajreichlcommainarticleview431-optika Lepil O (2013) Fyzika pro gymnaacutezia Optika Prometheus Praha 4 přepracovaneacute vydaacuteniacute

Murphy DB Davidson MW (2013) Fundamentals of Light

Microscopy and Electronic Imaging Willey-Blackwell Published

2013 by John Wiley amp Sons Inc Hoboken New Jersey

S v ě t l o

= čaacutest rozsaacutehleacute oblasti elektromagnetickeacuteho zaacuteřeniacute

kterou vniacutemaacuteme zrakem

Rozhlasoveacute a raacutedioveacute vlny 250 km - 1 mm

Infračerveneacute zaacuteřeniacute 05 mm - 08 μm

Světlo (viditelneacute zaacuteřeniacute) 08 μm - 04 μm

Ultrafialoveacute zaacuteřeniacute 04 microm - 01 microm

Roumlntgenovo zaacuteřeniacute (X-paprsky) 15 nm - 0005 nm

γ-zaacuteřeniacute pod 00001 nm

Přibližneacute hodnoty ndash individuaacutelniacute vlastnosti zraku různyacutech lidiacute

S v ě t l o

= čaacutest rozsaacutehleacute oblasti elektromagnetickeacuteho zaacuteřeniacute

kterou vniacutemaacuteme zrakem

rarr se zkracujiacuteciacute se vlnovou deacutelkou se zvyšuje frekvence (energie)

Viditelneacute

Vlnoveacute deacutelky světla a relativniacute citlivost oka

Murphy DB Davidson MW (2013) Fundamentals of Light Microscopy and Electronic

Imaging Willey-Blackwell Published 2013 by John Wiley amp Sons Inc Hoboken New Jersey

= zrakovyacute pigment citlivyacute na

světlo nachaacutezejiacuteciacute se v tyčinkaacutech Jodopsin = zrakovyacute pigment citlivyacute na

barvu nachaacutezejiacuteciacute se v čiacutepciacutech

S v ě t l o

Duaacutelniacute charakter světla ndash vlněniacute i proud čaacutestic (fotonů)

Vlnovyacute model světla

vlna elektrickaacute a magnetickaacute (elektromagnetickaacute vlna je tvořena oscilujiacuteciacutem elektrickyacutem a

magnetickyacutem polem na sebe kolmyacutech a nesouciacutech vpřed energii)

Pro uacutečinky světla v mikroskopu je důležitaacute vlna elektrickaacute

= přiacutečneacute vlněniacute

postupneacute kmitaacuteniacute

jednotlivyacutech vedle sebe

ležiacuteciacutech bodů

Scheacutema světla jako elektromagnetickeacute vlny

Obr httpwwwprosoundwebcomarticleprintinvaders_from_

outer_space_electromagnetic_radiation_interference

λ - vlnovaacute deacutelka

(v oblasti svět zaacuteřeniacute

v rozmeziacute od 380 do 780 nm)

určuje barvu světla

a - amplituda

nejvyššiacute hodnota

určuje intenzitu světla

Z hlediska vlnoveacute deacutelky rozlišujeme

polychromatickeacute x monochromatickeacute světlo (selekce pomociacute barevnyacutech filtrů rarr jednotnaacute vlnovaacute deacutelka světlo zeleneacute červeneacute hellip)

Elektrickaacute vlna - sinusoida

Charakterizovaacutena dvěma veličinami

Pazourek 1975

Vlastnosti světla

Rovnoměrneacute šiacuteřeniacute světla ze zaacuteřiacuteciacuteho bodu na všechny strany rarr vlnovaacute plocha tvaru koule

Paprsek ndash směr kteryacutem se vlněniacute šiacuteřiacute a kteryacute je kolmyacute

na vlnoplochu

Pazourek 1975

- paprsek nepolarizovanyacute (A C) ndash kmitaacute v každeacutem

miacutestě a v průběhu času ve všech možnyacutech směrech

kolmyacutech na směr šiacuteřeniacute paprsku

- paprsek polarizovanyacute (B D1 D2) - kmitaacute v jedneacute

rovině přičemž rovina kmitů (vlněniacute) jednoho z nich je

kolmaacute k rovině kmitů druheacuteho

Pazourek 1975

Polarizovaneacute světlo viz

httpswwwyoutubecomwatchv=gP751qpm4n4

Murphy DB Davidson MW (2013) Fundamentals of Light Microscopy and

Electronic Imaging Jonh Wkiley amp Sons Inc Hoboken New Jersey

Osm různyacutech vlnovyacutech forem světla (znaacutezorňujiacuteciacutech různou kvalitu světla)

Odraz a lom světelnyacutech paprsků

v prostřediacutech různeacute hustoty

Důležitaacute charakteristika prostřediacute

index lomu ( n ) (= optickaacute hustota prostřediacute)

c = rychlost světla ve vakuu (stejnaacute pro všechny λ )

v = rychlost světla určiteacute vlnoveacute deacutelky ve zkoumaneacute laacutetce

c

n =

v

zde absolutniacute index lomu

(bezrozměrnaacute fyzikaacutelniacute veličina jeho jednotka je 1)

Rychlost světla (c) určiteacute vlnoveacute

deacutelky v různyacutech prostřediacutech

c ve vakuu

= 300 000 kms

Index lomu (n) některyacutech laacutetek

vzduch (vakuum) helliphellip 100 (vzduch 10002718)

voda helliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 133

plexisklo helliphelliphelliphelliphelliphellip 140 ndash 152

křemenneacute sklo helliphellip hellip 145 (čočka z křemene z Ninive ndash 7 stol přnl)

běžneacute sklo helliphelliphelliphelliphellip 151

cedrovyacute olej helliphelliphelliphelliphellip 151

imerzniacute olej Olympus hellip 1516 pro fluorescenci 1404

kanadskyacute balzaacutem helliphellip 150

krystal NaCl helliphelliphelliphellip 154

korunoveacute sklo helliphelliphelliphellip 145 ndash 156 (sodno-draselneacute bezolovnateacute)

flintoveacute sklo helliphelliphelliphellip 162 ndash 180 (olovnateacute)

diamant helliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 242

Index lomu je vždy většiacute než 100

očniacute čočka hellip 1406

sklivec helliphelliphellip 1336

Odraz světla rovnyacutem zrcadlem (reflexe)

Zaacutekony

1 Paprsek dopadajiacuteciacute kolmice dopadu a paprsek odraženyacute

ležiacute v jedneacute rovině

2 Uacutehel odrazu se rovnaacute uacutehlu dopadu

Odraz a lom paprsku

k

Důležiteacute pro mikroskopii (astronomii)

- neniacute zaacutevislost na vlnoveacute deacutelce světla (λ)

- na rozdiacutel od lomu paprsků se světelneacute

paprsky se odraacutežejiacute stejně

Pazourek 1975

Zaacutekony

1 Paprsek dopadajiacuteciacute kolmice lomu a paprsek lomenyacute ležiacute v teacuteže rovině

Lom světla (refrakce)

2 Při přechodu z prostřediacute opticky řidšiacuteho do prostřediacute opticky hustšiacuteho se paprsek laacuteme ke kolmici (A)

a z prostřediacute opticky hustšiacuteho

do prostřediacute opticky řidšiacuteho

se laacuteme od kolmice (B)

(C a D) ndash uacuteplnyacute odraz při tzv

mezniacutem uacutehlu dopadu paprsku

v přiacutepadě lomu od kolmice (B)

(viz Nikol odrazneacute hranoly světlovodneacute vlaacutekno nebo fluorescenčniacute metoda TIRFM ndash totaacutelniacute odraz exitačniacuteho zaacuteřeniacute)

Pazourek 1975

Svatyacute Kryštof od

švyacutecarskeacuteho maliacuteře

Konrada Witze (kolem 1400ndash1446)

Witz byl jedniacutem z prvniacutech

maliacuteřů kteryacute namaloval

přesnyacute způsob odrazu

světla na vodě

Disperze (rozklad) světla

= důsledek zaacutevislosti rychlosti světla v laacutetkaacutech na frekvenci světla

(λ = c f)

světlo různyacutech barev (λ)

se laacuteme různě

(červeneacute se lomiacute meacuteně než modreacute)

Přiacuteklad disperze (rozkladu) světla

Primaacuterniacute a sekundaacuterniacute duha Severniacute Čechy Foto Pavla Vaacutelovaacute 2010

D u h a

Jeden z mnoha

optickyacutech

jevů (fotometeorů)

v atmosfeacuteře

Rok 312 nl - před bitvou byzantskeacuteho ciacutesaře Konstantina I (272-337) s

konkurenčniacutem ciacutesařem Maxentiem u bran Řiacutema (tzv bitva u Milvijskeacuteho mostu) se

na obloze objevily tři zaacuteřiacuteciacute křiacuteže (halovyacute sloup parheacutelia a parhelickyacute oblouk)

Konstantin bitvu proti přesile vyhraacutel sjednotil řiacuteši a povolil v niacute vyznaacutevat křesťanstviacute

Maleacute halo (22deg) (viz 1) vedlejšiacute slunce (2) a horniacute a dolniacute halovyacute sloup (3)

vznikajiacuteciacute odrazem a lomem světelnyacutech paprsků na krystalciacutech ledu

Lom světla a dějiny

httptmagazineblogsnytimescom20121126halo-effect_r=0

1

3

2 2

3

Ohyb (difrakce) a interference

světla

Foto Pavla Vaacutelovaacute Bukovany 2015 Rozklad světla na CD - světlo žaacuterovky

Rozklad biacuteleacuteho světla na mřiacutežce

Pevnost poznaacuteniacute Olomouc 2015

Foto Pavla Vaacutelovaacute Olomouc 2015

Ohyb (difrakce) a interference

světla

Ohyb (difrakce) a interference

Difrakčniacute obrazec obsahuje světlaacute a tmavaacute miacutesta kteraacute se

střiacutedajiacute - světlaacute miacutesta nazyacutevaacuteme maxima a tmavaacute minima

Interference světla = sklaacutedaacuteniacute světelnyacutech vln

Předpoklad světlo musiacute byacutet koherentniacute

Podmiacutenka koherence

- paprsky musiacute miacutet stejnou frekvenci

- paprsky musiacute byacutet navzaacutejem rovnoběžneacute

- paprsky musiacute miacutet na sobě nezaacutevislyacute draacutehovyacute (faacutezovyacute) rozdiacutel

Vznik koherentniacuteho zaacuteřeniacute

rozděleniacutem světla

- buď odrazem pomociacute zrcadel

- nebo lomem pomociacute hranolů

Foto Pavla Vaacutelovaacute Praha 151 2016

Interference světla

stejnyacute způsob vlněniacute

(faacuteze je vzaacutejemně posunuta o sudeacute

naacutesobky λ2)

vznik interferenčniacuteho maxima

(konstruktivniacute interference)

Interference světla

asynchronniacute vlněniacute

(vzaacutejemně posunutaacute faacuteze

o licheacute naacutesobky λ2)

vznik interferenčniacuteho

minima

(destruktivniacute interference)

rarr zaacuteřeniacute zanikaacute

rarr zeslabeniacute zaacuteřeniacute

Interference dvou vrstev elektromagnetickeacuteho zaacuteřeniacute u Slunce

Čočky ndash zaacutekladniacute součaacutesti

mikroskopu

= průhlednaacute (nejčastěji skleněnaacute) tělesa omezenaacute

vypuklyacutemi nebo vydutyacutemi kulovityacutemi plochami lišiacuteciacute se od sveacuteho okoliacute odlišnyacutem indexem lomu

Zaacutekladniacute typy čoček

spojky (vypukleacute neboli konvexniacute)

rozptylky (vyduteacute konkaacutevniacute)

Pazourek 1975

Optickaacute osa ( o ) prochaacuteziacute středem čočky

Ohnisko ( F ) - bod do ktereacuteho se soustřeďujiacute paprsky probiacutehajiacuteciacute rovnoběžně s optickou osou

- 2 ohniska - předmětoveacute ohnisko ( F )

obrazoveacute ohnisko ( Facute )

- ohniskovaacute vzdaacutelenost ( f )

vzdaacutelenost ohniska od hlavniacute roviny proloženeacute středem čočky

- dvojnaacutesobnaacute ohniskovaacute vzdaacutelenost ( P Pacute )

Obrazovyacute prostor - prostor v němž vznikaacute obraz

Důležiteacute charakteristiky čočky

f

o

hlavniacute rovina

Pazourek 1975

V přiacutepadě velmi tenkeacute čočky

bull Obraz za optickou soustavou

rarr obraz s k u t e č n yacute

Skutečnyacute obraz je možneacute zachytit na stiacuteniacutetko

nebo na fotografickou desku neskutečnyacute nikoliv

bull Obraz před soustavou

rarr obraz n e s k u t e č n yacute (zdaacutenlivyacute virtuaacutelniacute)

Obraz skutečnyacute a neskutečnyacute

A ndash předmět Aacute- obraz předmětu

Upraveno podle Pazourek 1975

Francouz Augustin Jean Fresnel (1788-1827) [frenel]

Fresnelova čočka [frenelova]

- plochyacute tvar (zachovaacuteny pouze čaacutesti ktereacute měniacute směr chodu světelnyacutech paprsků)

- vyacuterazně nižšiacute hmotnost při zachovaacuteniacute podobnyacutech parametrů

Využitiacute infračidla pohybu semafory světlomety (majaacuteky) a reflektory (světla aut

divadelniacutech a filmovyacutech osvětlovaciacutech zařiacutezeniacute) zpětneacute projektory slunečniacute kolektory

na zaacutekladě tohoto principu takeacute vyacuteroba 3D displejů k mobilniacutem telefonům a televiziacutem

httpwwwmffcuniczverejnostzpravicky03_lupahtm

čočka na majaacuteku

Čočky v budoucnosti

Pokus o vyacuterobu tzv dokonaleacute čočky

Prototyp - upraveneacute tzv Maxwellovo rybiacute oko

- paprsky světla se v něm pohybujiacute po kružniciacutech a

na rozdiacutel od běžnyacutech čoček se při zobrazeniacute využijiacute

všechny paprsky

- superčočky využiacutevajiacute geometrie k tomu aby se světlo

soustředilo do oblasti menšiacute než je jeho vlnovaacute deacutelka

(zatiacutem se neviacute jak do čočky vyhovujiacuteciacutem způsobem

doveacutest světlo)

Využitiacute v budoucnu

mimo jineacute v pozorovaacuteniacute živyacutech buněk při velkeacutem zvětšeniacute

pomociacute obyčejneacuteho světla bez jejich narušeniacute

Viacutece viz Plaacutešek J Mikroskopy se superčočkami httpwwwvesmircz | Vesmiacuter 91 531 zaacuteřiacute 2012

Hranoly

- doplňky optickyacutech systeacutemů

- většinou tvar rovnostranneacuteho trojuacutehelniacuteka

- využiacutevajiacute uacuteplneacuteho odrazu

Funkce

- změna chodu paprsků pod různyacutemi uacutehly

- rozdvojeniacute paprsků

Pazourek 1975

Různeacute typy odraznyacutech hranolů

Hranoly

Různeacute typy hranolů

httplaserykvalitneczimagestext_25_zakladyoptiky1odrazne_hranolyjpg

Viz dichroickeacute zrcadlo u fluorescenčniacuteho mikroskopu

Chod paprsků v binokulaacuterniacutem tubusu

Pazourek 1975

Nikol = hranol z islandskeacuteho vaacutepence

rarr polarizace světla

Dvojlomnyacute vaacutepencovyacute

krystal

ř ndash paprsek řaacutednyacute (zanikaacute na začerněneacute ploše)

mř ndash paprsek mimořaacutednyacute (lineaacuterně polarizovanyacute

využit k osvětleniacute)

začerněnaacute plocha

Nikol

Pazourek 1975

vzduchovaacute štěrbina

- rychlost světla je

v různyacutech směrech různaacute

- uacutehel paprsku řaacutedneacuteho a

mimořaacutedneacuteho je odlišnyacute

(u Vikingů - slunečniacute kaacutemen

soacutelarsteinn)

Chod paprsků ve světlovodneacutem vlaacuteknu

Princip uacuteplnyacute odraz paprsku

- uvnitř skleněneacuteho vlaacutekna je opticky hustšiacute prostřediacute

- nutnost dostatečně silneacuteho světelneacuteho zdroje

Světlovodnaacute vlaacutekna

Pazourek 1975

Širokeacute využitiacute v praxi optickeacute kabely ndash přenos signaacutelů ve sdělovaciacute technice

světlovody umožňujiacuteciacute veacutest denniacute světlo vedeniacute světla u stereolup endoskopů hellip

Page 34: Světelná a elektronová mikroskopie...(AMF – Atomic Force Miroscope) - skenování povrchu materiálu pomocí hrotu zavěšeném na pružném výkyvném raménku, který je přitahován

Vysokorozlišovaciacute transmisniacute

elektronovyacute mikroskop TITAN (FEI)

Foto Pavla Vaacutelovaacute 2015

Transmisniacute elektronovyacute

mikroskop Jeol

Regionaacutelniacute centrum pokročilyacutech materiaacutelů (RCPTM)

Odd uhliacutekoveacute nanostruktury PřF UP OL

Neoptickeacute mikroskopy

1981

Řaacutedkovaciacute tunelovyacute mikroskop (STM ndash Scanning Tunnelling Microscope)

- mapovaacuteniacute povrchu pomociacute pohybu vodiveacuteho hrotu nad vodivyacutem povrchem sledovaneacuteho materiaacutelu

1986

Mikroskop atomaacuterniacutech sil (AMF ndash Atomic Force Miroscope)

- skenovaacuteniacute povrchu materiaacutelu pomociacute hrotu zavěšeneacutem na pružneacutem vyacutekyvneacutem rameacutenku kteryacute je přitahovaacuten elektrostatickyacutemi a Van der Walsovyacutemi silami

Rozlišeniacute v řaacutedech pikometrů (10-12 m) ndash rozeznaacuteniacute struktur

jednotlivyacutech atomů

O p t i c k eacute p r i n c i p y

světelneacute mikroskopie

Reichl J Všetička M Encyklopedie fyziky [online] copy2006-2014

[vid 2014] Dostupneacute z httpfyzikajreichlcommainarticleview431-optika Lepil O (2013) Fyzika pro gymnaacutezia Optika Prometheus Praha 4 přepracovaneacute vydaacuteniacute

Murphy DB Davidson MW (2013) Fundamentals of Light

Microscopy and Electronic Imaging Willey-Blackwell Published

2013 by John Wiley amp Sons Inc Hoboken New Jersey

S v ě t l o

= čaacutest rozsaacutehleacute oblasti elektromagnetickeacuteho zaacuteřeniacute

kterou vniacutemaacuteme zrakem

Rozhlasoveacute a raacutedioveacute vlny 250 km - 1 mm

Infračerveneacute zaacuteřeniacute 05 mm - 08 μm

Světlo (viditelneacute zaacuteřeniacute) 08 μm - 04 μm

Ultrafialoveacute zaacuteřeniacute 04 microm - 01 microm

Roumlntgenovo zaacuteřeniacute (X-paprsky) 15 nm - 0005 nm

γ-zaacuteřeniacute pod 00001 nm

Přibližneacute hodnoty ndash individuaacutelniacute vlastnosti zraku různyacutech lidiacute

S v ě t l o

= čaacutest rozsaacutehleacute oblasti elektromagnetickeacuteho zaacuteřeniacute

kterou vniacutemaacuteme zrakem

rarr se zkracujiacuteciacute se vlnovou deacutelkou se zvyšuje frekvence (energie)

Viditelneacute

Vlnoveacute deacutelky světla a relativniacute citlivost oka

Murphy DB Davidson MW (2013) Fundamentals of Light Microscopy and Electronic

Imaging Willey-Blackwell Published 2013 by John Wiley amp Sons Inc Hoboken New Jersey

= zrakovyacute pigment citlivyacute na

světlo nachaacutezejiacuteciacute se v tyčinkaacutech Jodopsin = zrakovyacute pigment citlivyacute na

barvu nachaacutezejiacuteciacute se v čiacutepciacutech

S v ě t l o

Duaacutelniacute charakter světla ndash vlněniacute i proud čaacutestic (fotonů)

Vlnovyacute model světla

vlna elektrickaacute a magnetickaacute (elektromagnetickaacute vlna je tvořena oscilujiacuteciacutem elektrickyacutem a

magnetickyacutem polem na sebe kolmyacutech a nesouciacutech vpřed energii)

Pro uacutečinky světla v mikroskopu je důležitaacute vlna elektrickaacute

= přiacutečneacute vlněniacute

postupneacute kmitaacuteniacute

jednotlivyacutech vedle sebe

ležiacuteciacutech bodů

Scheacutema světla jako elektromagnetickeacute vlny

Obr httpwwwprosoundwebcomarticleprintinvaders_from_

outer_space_electromagnetic_radiation_interference

λ - vlnovaacute deacutelka

(v oblasti svět zaacuteřeniacute

v rozmeziacute od 380 do 780 nm)

určuje barvu světla

a - amplituda

nejvyššiacute hodnota

určuje intenzitu světla

Z hlediska vlnoveacute deacutelky rozlišujeme

polychromatickeacute x monochromatickeacute světlo (selekce pomociacute barevnyacutech filtrů rarr jednotnaacute vlnovaacute deacutelka světlo zeleneacute červeneacute hellip)

Elektrickaacute vlna - sinusoida

Charakterizovaacutena dvěma veličinami

Pazourek 1975

Vlastnosti světla

Rovnoměrneacute šiacuteřeniacute světla ze zaacuteřiacuteciacuteho bodu na všechny strany rarr vlnovaacute plocha tvaru koule

Paprsek ndash směr kteryacutem se vlněniacute šiacuteřiacute a kteryacute je kolmyacute

na vlnoplochu

Pazourek 1975

- paprsek nepolarizovanyacute (A C) ndash kmitaacute v každeacutem

miacutestě a v průběhu času ve všech možnyacutech směrech

kolmyacutech na směr šiacuteřeniacute paprsku

- paprsek polarizovanyacute (B D1 D2) - kmitaacute v jedneacute

rovině přičemž rovina kmitů (vlněniacute) jednoho z nich je

kolmaacute k rovině kmitů druheacuteho

Pazourek 1975

Polarizovaneacute světlo viz

httpswwwyoutubecomwatchv=gP751qpm4n4

Murphy DB Davidson MW (2013) Fundamentals of Light Microscopy and

Electronic Imaging Jonh Wkiley amp Sons Inc Hoboken New Jersey

Osm různyacutech vlnovyacutech forem světla (znaacutezorňujiacuteciacutech různou kvalitu světla)

Odraz a lom světelnyacutech paprsků

v prostřediacutech různeacute hustoty

Důležitaacute charakteristika prostřediacute

index lomu ( n ) (= optickaacute hustota prostřediacute)

c = rychlost světla ve vakuu (stejnaacute pro všechny λ )

v = rychlost světla určiteacute vlnoveacute deacutelky ve zkoumaneacute laacutetce

c

n =

v

zde absolutniacute index lomu

(bezrozměrnaacute fyzikaacutelniacute veličina jeho jednotka je 1)

Rychlost světla (c) určiteacute vlnoveacute

deacutelky v různyacutech prostřediacutech

c ve vakuu

= 300 000 kms

Index lomu (n) některyacutech laacutetek

vzduch (vakuum) helliphellip 100 (vzduch 10002718)

voda helliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 133

plexisklo helliphelliphelliphelliphelliphellip 140 ndash 152

křemenneacute sklo helliphellip hellip 145 (čočka z křemene z Ninive ndash 7 stol přnl)

běžneacute sklo helliphelliphelliphelliphellip 151

cedrovyacute olej helliphelliphelliphelliphellip 151

imerzniacute olej Olympus hellip 1516 pro fluorescenci 1404

kanadskyacute balzaacutem helliphellip 150

krystal NaCl helliphelliphelliphellip 154

korunoveacute sklo helliphelliphelliphellip 145 ndash 156 (sodno-draselneacute bezolovnateacute)

flintoveacute sklo helliphelliphelliphellip 162 ndash 180 (olovnateacute)

diamant helliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 242

Index lomu je vždy většiacute než 100

očniacute čočka hellip 1406

sklivec helliphelliphellip 1336

Odraz světla rovnyacutem zrcadlem (reflexe)

Zaacutekony

1 Paprsek dopadajiacuteciacute kolmice dopadu a paprsek odraženyacute

ležiacute v jedneacute rovině

2 Uacutehel odrazu se rovnaacute uacutehlu dopadu

Odraz a lom paprsku

k

Důležiteacute pro mikroskopii (astronomii)

- neniacute zaacutevislost na vlnoveacute deacutelce světla (λ)

- na rozdiacutel od lomu paprsků se světelneacute

paprsky se odraacutežejiacute stejně

Pazourek 1975

Zaacutekony

1 Paprsek dopadajiacuteciacute kolmice lomu a paprsek lomenyacute ležiacute v teacuteže rovině

Lom světla (refrakce)

2 Při přechodu z prostřediacute opticky řidšiacuteho do prostřediacute opticky hustšiacuteho se paprsek laacuteme ke kolmici (A)

a z prostřediacute opticky hustšiacuteho

do prostřediacute opticky řidšiacuteho

se laacuteme od kolmice (B)

(C a D) ndash uacuteplnyacute odraz při tzv

mezniacutem uacutehlu dopadu paprsku

v přiacutepadě lomu od kolmice (B)

(viz Nikol odrazneacute hranoly světlovodneacute vlaacutekno nebo fluorescenčniacute metoda TIRFM ndash totaacutelniacute odraz exitačniacuteho zaacuteřeniacute)

Pazourek 1975

Svatyacute Kryštof od

švyacutecarskeacuteho maliacuteře

Konrada Witze (kolem 1400ndash1446)

Witz byl jedniacutem z prvniacutech

maliacuteřů kteryacute namaloval

přesnyacute způsob odrazu

světla na vodě

Disperze (rozklad) světla

= důsledek zaacutevislosti rychlosti světla v laacutetkaacutech na frekvenci světla

(λ = c f)

světlo různyacutech barev (λ)

se laacuteme různě

(červeneacute se lomiacute meacuteně než modreacute)

Přiacuteklad disperze (rozkladu) světla

Primaacuterniacute a sekundaacuterniacute duha Severniacute Čechy Foto Pavla Vaacutelovaacute 2010

D u h a

Jeden z mnoha

optickyacutech

jevů (fotometeorů)

v atmosfeacuteře

Rok 312 nl - před bitvou byzantskeacuteho ciacutesaře Konstantina I (272-337) s

konkurenčniacutem ciacutesařem Maxentiem u bran Řiacutema (tzv bitva u Milvijskeacuteho mostu) se

na obloze objevily tři zaacuteřiacuteciacute křiacuteže (halovyacute sloup parheacutelia a parhelickyacute oblouk)

Konstantin bitvu proti přesile vyhraacutel sjednotil řiacuteši a povolil v niacute vyznaacutevat křesťanstviacute

Maleacute halo (22deg) (viz 1) vedlejšiacute slunce (2) a horniacute a dolniacute halovyacute sloup (3)

vznikajiacuteciacute odrazem a lomem světelnyacutech paprsků na krystalciacutech ledu

Lom světla a dějiny

httptmagazineblogsnytimescom20121126halo-effect_r=0

1

3

2 2

3

Ohyb (difrakce) a interference

světla

Foto Pavla Vaacutelovaacute Bukovany 2015 Rozklad světla na CD - světlo žaacuterovky

Rozklad biacuteleacuteho světla na mřiacutežce

Pevnost poznaacuteniacute Olomouc 2015

Foto Pavla Vaacutelovaacute Olomouc 2015

Ohyb (difrakce) a interference

světla

Ohyb (difrakce) a interference

Difrakčniacute obrazec obsahuje světlaacute a tmavaacute miacutesta kteraacute se

střiacutedajiacute - světlaacute miacutesta nazyacutevaacuteme maxima a tmavaacute minima

Interference světla = sklaacutedaacuteniacute světelnyacutech vln

Předpoklad světlo musiacute byacutet koherentniacute

Podmiacutenka koherence

- paprsky musiacute miacutet stejnou frekvenci

- paprsky musiacute byacutet navzaacutejem rovnoběžneacute

- paprsky musiacute miacutet na sobě nezaacutevislyacute draacutehovyacute (faacutezovyacute) rozdiacutel

Vznik koherentniacuteho zaacuteřeniacute

rozděleniacutem světla

- buď odrazem pomociacute zrcadel

- nebo lomem pomociacute hranolů

Foto Pavla Vaacutelovaacute Praha 151 2016

Interference světla

stejnyacute způsob vlněniacute

(faacuteze je vzaacutejemně posunuta o sudeacute

naacutesobky λ2)

vznik interferenčniacuteho maxima

(konstruktivniacute interference)

Interference světla

asynchronniacute vlněniacute

(vzaacutejemně posunutaacute faacuteze

o licheacute naacutesobky λ2)

vznik interferenčniacuteho

minima

(destruktivniacute interference)

rarr zaacuteřeniacute zanikaacute

rarr zeslabeniacute zaacuteřeniacute

Interference dvou vrstev elektromagnetickeacuteho zaacuteřeniacute u Slunce

Čočky ndash zaacutekladniacute součaacutesti

mikroskopu

= průhlednaacute (nejčastěji skleněnaacute) tělesa omezenaacute

vypuklyacutemi nebo vydutyacutemi kulovityacutemi plochami lišiacuteciacute se od sveacuteho okoliacute odlišnyacutem indexem lomu

Zaacutekladniacute typy čoček

spojky (vypukleacute neboli konvexniacute)

rozptylky (vyduteacute konkaacutevniacute)

Pazourek 1975

Optickaacute osa ( o ) prochaacuteziacute středem čočky

Ohnisko ( F ) - bod do ktereacuteho se soustřeďujiacute paprsky probiacutehajiacuteciacute rovnoběžně s optickou osou

- 2 ohniska - předmětoveacute ohnisko ( F )

obrazoveacute ohnisko ( Facute )

- ohniskovaacute vzdaacutelenost ( f )

vzdaacutelenost ohniska od hlavniacute roviny proloženeacute středem čočky

- dvojnaacutesobnaacute ohniskovaacute vzdaacutelenost ( P Pacute )

Obrazovyacute prostor - prostor v němž vznikaacute obraz

Důležiteacute charakteristiky čočky

f

o

hlavniacute rovina

Pazourek 1975

V přiacutepadě velmi tenkeacute čočky

bull Obraz za optickou soustavou

rarr obraz s k u t e č n yacute

Skutečnyacute obraz je možneacute zachytit na stiacuteniacutetko

nebo na fotografickou desku neskutečnyacute nikoliv

bull Obraz před soustavou

rarr obraz n e s k u t e č n yacute (zdaacutenlivyacute virtuaacutelniacute)

Obraz skutečnyacute a neskutečnyacute

A ndash předmět Aacute- obraz předmětu

Upraveno podle Pazourek 1975

Francouz Augustin Jean Fresnel (1788-1827) [frenel]

Fresnelova čočka [frenelova]

- plochyacute tvar (zachovaacuteny pouze čaacutesti ktereacute měniacute směr chodu světelnyacutech paprsků)

- vyacuterazně nižšiacute hmotnost při zachovaacuteniacute podobnyacutech parametrů

Využitiacute infračidla pohybu semafory světlomety (majaacuteky) a reflektory (světla aut

divadelniacutech a filmovyacutech osvětlovaciacutech zařiacutezeniacute) zpětneacute projektory slunečniacute kolektory

na zaacutekladě tohoto principu takeacute vyacuteroba 3D displejů k mobilniacutem telefonům a televiziacutem

httpwwwmffcuniczverejnostzpravicky03_lupahtm

čočka na majaacuteku

Čočky v budoucnosti

Pokus o vyacuterobu tzv dokonaleacute čočky

Prototyp - upraveneacute tzv Maxwellovo rybiacute oko

- paprsky světla se v něm pohybujiacute po kružniciacutech a

na rozdiacutel od běžnyacutech čoček se při zobrazeniacute využijiacute

všechny paprsky

- superčočky využiacutevajiacute geometrie k tomu aby se světlo

soustředilo do oblasti menšiacute než je jeho vlnovaacute deacutelka

(zatiacutem se neviacute jak do čočky vyhovujiacuteciacutem způsobem

doveacutest světlo)

Využitiacute v budoucnu

mimo jineacute v pozorovaacuteniacute živyacutech buněk při velkeacutem zvětšeniacute

pomociacute obyčejneacuteho světla bez jejich narušeniacute

Viacutece viz Plaacutešek J Mikroskopy se superčočkami httpwwwvesmircz | Vesmiacuter 91 531 zaacuteřiacute 2012

Hranoly

- doplňky optickyacutech systeacutemů

- většinou tvar rovnostranneacuteho trojuacutehelniacuteka

- využiacutevajiacute uacuteplneacuteho odrazu

Funkce

- změna chodu paprsků pod různyacutemi uacutehly

- rozdvojeniacute paprsků

Pazourek 1975

Různeacute typy odraznyacutech hranolů

Hranoly

Různeacute typy hranolů

httplaserykvalitneczimagestext_25_zakladyoptiky1odrazne_hranolyjpg

Viz dichroickeacute zrcadlo u fluorescenčniacuteho mikroskopu

Chod paprsků v binokulaacuterniacutem tubusu

Pazourek 1975

Nikol = hranol z islandskeacuteho vaacutepence

rarr polarizace světla

Dvojlomnyacute vaacutepencovyacute

krystal

ř ndash paprsek řaacutednyacute (zanikaacute na začerněneacute ploše)

mř ndash paprsek mimořaacutednyacute (lineaacuterně polarizovanyacute

využit k osvětleniacute)

začerněnaacute plocha

Nikol

Pazourek 1975

vzduchovaacute štěrbina

- rychlost světla je

v různyacutech směrech různaacute

- uacutehel paprsku řaacutedneacuteho a

mimořaacutedneacuteho je odlišnyacute

(u Vikingů - slunečniacute kaacutemen

soacutelarsteinn)

Chod paprsků ve světlovodneacutem vlaacuteknu

Princip uacuteplnyacute odraz paprsku

- uvnitř skleněneacuteho vlaacutekna je opticky hustšiacute prostřediacute

- nutnost dostatečně silneacuteho světelneacuteho zdroje

Světlovodnaacute vlaacutekna

Pazourek 1975

Širokeacute využitiacute v praxi optickeacute kabely ndash přenos signaacutelů ve sdělovaciacute technice

světlovody umožňujiacuteciacute veacutest denniacute světlo vedeniacute světla u stereolup endoskopů hellip

Page 35: Světelná a elektronová mikroskopie...(AMF – Atomic Force Miroscope) - skenování povrchu materiálu pomocí hrotu zavěšeném na pružném výkyvném raménku, který je přitahován

Neoptickeacute mikroskopy

1981

Řaacutedkovaciacute tunelovyacute mikroskop (STM ndash Scanning Tunnelling Microscope)

- mapovaacuteniacute povrchu pomociacute pohybu vodiveacuteho hrotu nad vodivyacutem povrchem sledovaneacuteho materiaacutelu

1986

Mikroskop atomaacuterniacutech sil (AMF ndash Atomic Force Miroscope)

- skenovaacuteniacute povrchu materiaacutelu pomociacute hrotu zavěšeneacutem na pružneacutem vyacutekyvneacutem rameacutenku kteryacute je přitahovaacuten elektrostatickyacutemi a Van der Walsovyacutemi silami

Rozlišeniacute v řaacutedech pikometrů (10-12 m) ndash rozeznaacuteniacute struktur

jednotlivyacutech atomů

O p t i c k eacute p r i n c i p y

světelneacute mikroskopie

Reichl J Všetička M Encyklopedie fyziky [online] copy2006-2014

[vid 2014] Dostupneacute z httpfyzikajreichlcommainarticleview431-optika Lepil O (2013) Fyzika pro gymnaacutezia Optika Prometheus Praha 4 přepracovaneacute vydaacuteniacute

Murphy DB Davidson MW (2013) Fundamentals of Light

Microscopy and Electronic Imaging Willey-Blackwell Published

2013 by John Wiley amp Sons Inc Hoboken New Jersey

S v ě t l o

= čaacutest rozsaacutehleacute oblasti elektromagnetickeacuteho zaacuteřeniacute

kterou vniacutemaacuteme zrakem

Rozhlasoveacute a raacutedioveacute vlny 250 km - 1 mm

Infračerveneacute zaacuteřeniacute 05 mm - 08 μm

Světlo (viditelneacute zaacuteřeniacute) 08 μm - 04 μm

Ultrafialoveacute zaacuteřeniacute 04 microm - 01 microm

Roumlntgenovo zaacuteřeniacute (X-paprsky) 15 nm - 0005 nm

γ-zaacuteřeniacute pod 00001 nm

Přibližneacute hodnoty ndash individuaacutelniacute vlastnosti zraku různyacutech lidiacute

S v ě t l o

= čaacutest rozsaacutehleacute oblasti elektromagnetickeacuteho zaacuteřeniacute

kterou vniacutemaacuteme zrakem

rarr se zkracujiacuteciacute se vlnovou deacutelkou se zvyšuje frekvence (energie)

Viditelneacute

Vlnoveacute deacutelky světla a relativniacute citlivost oka

Murphy DB Davidson MW (2013) Fundamentals of Light Microscopy and Electronic

Imaging Willey-Blackwell Published 2013 by John Wiley amp Sons Inc Hoboken New Jersey

= zrakovyacute pigment citlivyacute na

světlo nachaacutezejiacuteciacute se v tyčinkaacutech Jodopsin = zrakovyacute pigment citlivyacute na

barvu nachaacutezejiacuteciacute se v čiacutepciacutech

S v ě t l o

Duaacutelniacute charakter světla ndash vlněniacute i proud čaacutestic (fotonů)

Vlnovyacute model světla

vlna elektrickaacute a magnetickaacute (elektromagnetickaacute vlna je tvořena oscilujiacuteciacutem elektrickyacutem a

magnetickyacutem polem na sebe kolmyacutech a nesouciacutech vpřed energii)

Pro uacutečinky světla v mikroskopu je důležitaacute vlna elektrickaacute

= přiacutečneacute vlněniacute

postupneacute kmitaacuteniacute

jednotlivyacutech vedle sebe

ležiacuteciacutech bodů

Scheacutema světla jako elektromagnetickeacute vlny

Obr httpwwwprosoundwebcomarticleprintinvaders_from_

outer_space_electromagnetic_radiation_interference

λ - vlnovaacute deacutelka

(v oblasti svět zaacuteřeniacute

v rozmeziacute od 380 do 780 nm)

určuje barvu světla

a - amplituda

nejvyššiacute hodnota

určuje intenzitu světla

Z hlediska vlnoveacute deacutelky rozlišujeme

polychromatickeacute x monochromatickeacute světlo (selekce pomociacute barevnyacutech filtrů rarr jednotnaacute vlnovaacute deacutelka světlo zeleneacute červeneacute hellip)

Elektrickaacute vlna - sinusoida

Charakterizovaacutena dvěma veličinami

Pazourek 1975

Vlastnosti světla

Rovnoměrneacute šiacuteřeniacute světla ze zaacuteřiacuteciacuteho bodu na všechny strany rarr vlnovaacute plocha tvaru koule

Paprsek ndash směr kteryacutem se vlněniacute šiacuteřiacute a kteryacute je kolmyacute

na vlnoplochu

Pazourek 1975

- paprsek nepolarizovanyacute (A C) ndash kmitaacute v každeacutem

miacutestě a v průběhu času ve všech možnyacutech směrech

kolmyacutech na směr šiacuteřeniacute paprsku

- paprsek polarizovanyacute (B D1 D2) - kmitaacute v jedneacute

rovině přičemž rovina kmitů (vlněniacute) jednoho z nich je

kolmaacute k rovině kmitů druheacuteho

Pazourek 1975

Polarizovaneacute světlo viz

httpswwwyoutubecomwatchv=gP751qpm4n4

Murphy DB Davidson MW (2013) Fundamentals of Light Microscopy and

Electronic Imaging Jonh Wkiley amp Sons Inc Hoboken New Jersey

Osm různyacutech vlnovyacutech forem světla (znaacutezorňujiacuteciacutech různou kvalitu světla)

Odraz a lom světelnyacutech paprsků

v prostřediacutech různeacute hustoty

Důležitaacute charakteristika prostřediacute

index lomu ( n ) (= optickaacute hustota prostřediacute)

c = rychlost světla ve vakuu (stejnaacute pro všechny λ )

v = rychlost světla určiteacute vlnoveacute deacutelky ve zkoumaneacute laacutetce

c

n =

v

zde absolutniacute index lomu

(bezrozměrnaacute fyzikaacutelniacute veličina jeho jednotka je 1)

Rychlost světla (c) určiteacute vlnoveacute

deacutelky v různyacutech prostřediacutech

c ve vakuu

= 300 000 kms

Index lomu (n) některyacutech laacutetek

vzduch (vakuum) helliphellip 100 (vzduch 10002718)

voda helliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 133

plexisklo helliphelliphelliphelliphelliphellip 140 ndash 152

křemenneacute sklo helliphellip hellip 145 (čočka z křemene z Ninive ndash 7 stol přnl)

běžneacute sklo helliphelliphelliphelliphellip 151

cedrovyacute olej helliphelliphelliphelliphellip 151

imerzniacute olej Olympus hellip 1516 pro fluorescenci 1404

kanadskyacute balzaacutem helliphellip 150

krystal NaCl helliphelliphelliphellip 154

korunoveacute sklo helliphelliphelliphellip 145 ndash 156 (sodno-draselneacute bezolovnateacute)

flintoveacute sklo helliphelliphelliphellip 162 ndash 180 (olovnateacute)

diamant helliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 242

Index lomu je vždy většiacute než 100

očniacute čočka hellip 1406

sklivec helliphelliphellip 1336

Odraz světla rovnyacutem zrcadlem (reflexe)

Zaacutekony

1 Paprsek dopadajiacuteciacute kolmice dopadu a paprsek odraženyacute

ležiacute v jedneacute rovině

2 Uacutehel odrazu se rovnaacute uacutehlu dopadu

Odraz a lom paprsku

k

Důležiteacute pro mikroskopii (astronomii)

- neniacute zaacutevislost na vlnoveacute deacutelce světla (λ)

- na rozdiacutel od lomu paprsků se světelneacute

paprsky se odraacutežejiacute stejně

Pazourek 1975

Zaacutekony

1 Paprsek dopadajiacuteciacute kolmice lomu a paprsek lomenyacute ležiacute v teacuteže rovině

Lom světla (refrakce)

2 Při přechodu z prostřediacute opticky řidšiacuteho do prostřediacute opticky hustšiacuteho se paprsek laacuteme ke kolmici (A)

a z prostřediacute opticky hustšiacuteho

do prostřediacute opticky řidšiacuteho

se laacuteme od kolmice (B)

(C a D) ndash uacuteplnyacute odraz při tzv

mezniacutem uacutehlu dopadu paprsku

v přiacutepadě lomu od kolmice (B)

(viz Nikol odrazneacute hranoly světlovodneacute vlaacutekno nebo fluorescenčniacute metoda TIRFM ndash totaacutelniacute odraz exitačniacuteho zaacuteřeniacute)

Pazourek 1975

Svatyacute Kryštof od

švyacutecarskeacuteho maliacuteře

Konrada Witze (kolem 1400ndash1446)

Witz byl jedniacutem z prvniacutech

maliacuteřů kteryacute namaloval

přesnyacute způsob odrazu

světla na vodě

Disperze (rozklad) světla

= důsledek zaacutevislosti rychlosti světla v laacutetkaacutech na frekvenci světla

(λ = c f)

světlo různyacutech barev (λ)

se laacuteme různě

(červeneacute se lomiacute meacuteně než modreacute)

Přiacuteklad disperze (rozkladu) světla

Primaacuterniacute a sekundaacuterniacute duha Severniacute Čechy Foto Pavla Vaacutelovaacute 2010

D u h a

Jeden z mnoha

optickyacutech

jevů (fotometeorů)

v atmosfeacuteře

Rok 312 nl - před bitvou byzantskeacuteho ciacutesaře Konstantina I (272-337) s

konkurenčniacutem ciacutesařem Maxentiem u bran Řiacutema (tzv bitva u Milvijskeacuteho mostu) se

na obloze objevily tři zaacuteřiacuteciacute křiacuteže (halovyacute sloup parheacutelia a parhelickyacute oblouk)

Konstantin bitvu proti přesile vyhraacutel sjednotil řiacuteši a povolil v niacute vyznaacutevat křesťanstviacute

Maleacute halo (22deg) (viz 1) vedlejšiacute slunce (2) a horniacute a dolniacute halovyacute sloup (3)

vznikajiacuteciacute odrazem a lomem světelnyacutech paprsků na krystalciacutech ledu

Lom světla a dějiny

httptmagazineblogsnytimescom20121126halo-effect_r=0

1

3

2 2

3

Ohyb (difrakce) a interference

světla

Foto Pavla Vaacutelovaacute Bukovany 2015 Rozklad světla na CD - světlo žaacuterovky

Rozklad biacuteleacuteho světla na mřiacutežce

Pevnost poznaacuteniacute Olomouc 2015

Foto Pavla Vaacutelovaacute Olomouc 2015

Ohyb (difrakce) a interference

světla

Ohyb (difrakce) a interference

Difrakčniacute obrazec obsahuje světlaacute a tmavaacute miacutesta kteraacute se

střiacutedajiacute - světlaacute miacutesta nazyacutevaacuteme maxima a tmavaacute minima

Interference světla = sklaacutedaacuteniacute světelnyacutech vln

Předpoklad světlo musiacute byacutet koherentniacute

Podmiacutenka koherence

- paprsky musiacute miacutet stejnou frekvenci

- paprsky musiacute byacutet navzaacutejem rovnoběžneacute

- paprsky musiacute miacutet na sobě nezaacutevislyacute draacutehovyacute (faacutezovyacute) rozdiacutel

Vznik koherentniacuteho zaacuteřeniacute

rozděleniacutem světla

- buď odrazem pomociacute zrcadel

- nebo lomem pomociacute hranolů

Foto Pavla Vaacutelovaacute Praha 151 2016

Interference světla

stejnyacute způsob vlněniacute

(faacuteze je vzaacutejemně posunuta o sudeacute

naacutesobky λ2)

vznik interferenčniacuteho maxima

(konstruktivniacute interference)

Interference světla

asynchronniacute vlněniacute

(vzaacutejemně posunutaacute faacuteze

o licheacute naacutesobky λ2)

vznik interferenčniacuteho

minima

(destruktivniacute interference)

rarr zaacuteřeniacute zanikaacute

rarr zeslabeniacute zaacuteřeniacute

Interference dvou vrstev elektromagnetickeacuteho zaacuteřeniacute u Slunce

Čočky ndash zaacutekladniacute součaacutesti

mikroskopu

= průhlednaacute (nejčastěji skleněnaacute) tělesa omezenaacute

vypuklyacutemi nebo vydutyacutemi kulovityacutemi plochami lišiacuteciacute se od sveacuteho okoliacute odlišnyacutem indexem lomu

Zaacutekladniacute typy čoček

spojky (vypukleacute neboli konvexniacute)

rozptylky (vyduteacute konkaacutevniacute)

Pazourek 1975

Optickaacute osa ( o ) prochaacuteziacute středem čočky

Ohnisko ( F ) - bod do ktereacuteho se soustřeďujiacute paprsky probiacutehajiacuteciacute rovnoběžně s optickou osou

- 2 ohniska - předmětoveacute ohnisko ( F )

obrazoveacute ohnisko ( Facute )

- ohniskovaacute vzdaacutelenost ( f )

vzdaacutelenost ohniska od hlavniacute roviny proloženeacute středem čočky

- dvojnaacutesobnaacute ohniskovaacute vzdaacutelenost ( P Pacute )

Obrazovyacute prostor - prostor v němž vznikaacute obraz

Důležiteacute charakteristiky čočky

f

o

hlavniacute rovina

Pazourek 1975

V přiacutepadě velmi tenkeacute čočky

bull Obraz za optickou soustavou

rarr obraz s k u t e č n yacute

Skutečnyacute obraz je možneacute zachytit na stiacuteniacutetko

nebo na fotografickou desku neskutečnyacute nikoliv

bull Obraz před soustavou

rarr obraz n e s k u t e č n yacute (zdaacutenlivyacute virtuaacutelniacute)

Obraz skutečnyacute a neskutečnyacute

A ndash předmět Aacute- obraz předmětu

Upraveno podle Pazourek 1975

Francouz Augustin Jean Fresnel (1788-1827) [frenel]

Fresnelova čočka [frenelova]

- plochyacute tvar (zachovaacuteny pouze čaacutesti ktereacute měniacute směr chodu světelnyacutech paprsků)

- vyacuterazně nižšiacute hmotnost při zachovaacuteniacute podobnyacutech parametrů

Využitiacute infračidla pohybu semafory světlomety (majaacuteky) a reflektory (světla aut

divadelniacutech a filmovyacutech osvětlovaciacutech zařiacutezeniacute) zpětneacute projektory slunečniacute kolektory

na zaacutekladě tohoto principu takeacute vyacuteroba 3D displejů k mobilniacutem telefonům a televiziacutem

httpwwwmffcuniczverejnostzpravicky03_lupahtm

čočka na majaacuteku

Čočky v budoucnosti

Pokus o vyacuterobu tzv dokonaleacute čočky

Prototyp - upraveneacute tzv Maxwellovo rybiacute oko

- paprsky světla se v něm pohybujiacute po kružniciacutech a

na rozdiacutel od běžnyacutech čoček se při zobrazeniacute využijiacute

všechny paprsky

- superčočky využiacutevajiacute geometrie k tomu aby se světlo

soustředilo do oblasti menšiacute než je jeho vlnovaacute deacutelka

(zatiacutem se neviacute jak do čočky vyhovujiacuteciacutem způsobem

doveacutest světlo)

Využitiacute v budoucnu

mimo jineacute v pozorovaacuteniacute živyacutech buněk při velkeacutem zvětšeniacute

pomociacute obyčejneacuteho světla bez jejich narušeniacute

Viacutece viz Plaacutešek J Mikroskopy se superčočkami httpwwwvesmircz | Vesmiacuter 91 531 zaacuteřiacute 2012

Hranoly

- doplňky optickyacutech systeacutemů

- většinou tvar rovnostranneacuteho trojuacutehelniacuteka

- využiacutevajiacute uacuteplneacuteho odrazu

Funkce

- změna chodu paprsků pod různyacutemi uacutehly

- rozdvojeniacute paprsků

Pazourek 1975

Různeacute typy odraznyacutech hranolů

Hranoly

Různeacute typy hranolů

httplaserykvalitneczimagestext_25_zakladyoptiky1odrazne_hranolyjpg

Viz dichroickeacute zrcadlo u fluorescenčniacuteho mikroskopu

Chod paprsků v binokulaacuterniacutem tubusu

Pazourek 1975

Nikol = hranol z islandskeacuteho vaacutepence

rarr polarizace světla

Dvojlomnyacute vaacutepencovyacute

krystal

ř ndash paprsek řaacutednyacute (zanikaacute na začerněneacute ploše)

mř ndash paprsek mimořaacutednyacute (lineaacuterně polarizovanyacute

využit k osvětleniacute)

začerněnaacute plocha

Nikol

Pazourek 1975

vzduchovaacute štěrbina

- rychlost světla je

v různyacutech směrech různaacute

- uacutehel paprsku řaacutedneacuteho a

mimořaacutedneacuteho je odlišnyacute

(u Vikingů - slunečniacute kaacutemen

soacutelarsteinn)

Chod paprsků ve světlovodneacutem vlaacuteknu

Princip uacuteplnyacute odraz paprsku

- uvnitř skleněneacuteho vlaacutekna je opticky hustšiacute prostřediacute

- nutnost dostatečně silneacuteho světelneacuteho zdroje

Světlovodnaacute vlaacutekna

Pazourek 1975

Širokeacute využitiacute v praxi optickeacute kabely ndash přenos signaacutelů ve sdělovaciacute technice

světlovody umožňujiacuteciacute veacutest denniacute světlo vedeniacute světla u stereolup endoskopů hellip

Page 36: Světelná a elektronová mikroskopie...(AMF – Atomic Force Miroscope) - skenování povrchu materiálu pomocí hrotu zavěšeném na pružném výkyvném raménku, který je přitahován

O p t i c k eacute p r i n c i p y

světelneacute mikroskopie

Reichl J Všetička M Encyklopedie fyziky [online] copy2006-2014

[vid 2014] Dostupneacute z httpfyzikajreichlcommainarticleview431-optika Lepil O (2013) Fyzika pro gymnaacutezia Optika Prometheus Praha 4 přepracovaneacute vydaacuteniacute

Murphy DB Davidson MW (2013) Fundamentals of Light

Microscopy and Electronic Imaging Willey-Blackwell Published

2013 by John Wiley amp Sons Inc Hoboken New Jersey

S v ě t l o

= čaacutest rozsaacutehleacute oblasti elektromagnetickeacuteho zaacuteřeniacute

kterou vniacutemaacuteme zrakem

Rozhlasoveacute a raacutedioveacute vlny 250 km - 1 mm

Infračerveneacute zaacuteřeniacute 05 mm - 08 μm

Světlo (viditelneacute zaacuteřeniacute) 08 μm - 04 μm

Ultrafialoveacute zaacuteřeniacute 04 microm - 01 microm

Roumlntgenovo zaacuteřeniacute (X-paprsky) 15 nm - 0005 nm

γ-zaacuteřeniacute pod 00001 nm

Přibližneacute hodnoty ndash individuaacutelniacute vlastnosti zraku různyacutech lidiacute

S v ě t l o

= čaacutest rozsaacutehleacute oblasti elektromagnetickeacuteho zaacuteřeniacute

kterou vniacutemaacuteme zrakem

rarr se zkracujiacuteciacute se vlnovou deacutelkou se zvyšuje frekvence (energie)

Viditelneacute

Vlnoveacute deacutelky světla a relativniacute citlivost oka

Murphy DB Davidson MW (2013) Fundamentals of Light Microscopy and Electronic

Imaging Willey-Blackwell Published 2013 by John Wiley amp Sons Inc Hoboken New Jersey

= zrakovyacute pigment citlivyacute na

světlo nachaacutezejiacuteciacute se v tyčinkaacutech Jodopsin = zrakovyacute pigment citlivyacute na

barvu nachaacutezejiacuteciacute se v čiacutepciacutech

S v ě t l o

Duaacutelniacute charakter světla ndash vlněniacute i proud čaacutestic (fotonů)

Vlnovyacute model světla

vlna elektrickaacute a magnetickaacute (elektromagnetickaacute vlna je tvořena oscilujiacuteciacutem elektrickyacutem a

magnetickyacutem polem na sebe kolmyacutech a nesouciacutech vpřed energii)

Pro uacutečinky světla v mikroskopu je důležitaacute vlna elektrickaacute

= přiacutečneacute vlněniacute

postupneacute kmitaacuteniacute

jednotlivyacutech vedle sebe

ležiacuteciacutech bodů

Scheacutema světla jako elektromagnetickeacute vlny

Obr httpwwwprosoundwebcomarticleprintinvaders_from_

outer_space_electromagnetic_radiation_interference

λ - vlnovaacute deacutelka

(v oblasti svět zaacuteřeniacute

v rozmeziacute od 380 do 780 nm)

určuje barvu světla

a - amplituda

nejvyššiacute hodnota

určuje intenzitu světla

Z hlediska vlnoveacute deacutelky rozlišujeme

polychromatickeacute x monochromatickeacute světlo (selekce pomociacute barevnyacutech filtrů rarr jednotnaacute vlnovaacute deacutelka světlo zeleneacute červeneacute hellip)

Elektrickaacute vlna - sinusoida

Charakterizovaacutena dvěma veličinami

Pazourek 1975

Vlastnosti světla

Rovnoměrneacute šiacuteřeniacute světla ze zaacuteřiacuteciacuteho bodu na všechny strany rarr vlnovaacute plocha tvaru koule

Paprsek ndash směr kteryacutem se vlněniacute šiacuteřiacute a kteryacute je kolmyacute

na vlnoplochu

Pazourek 1975

- paprsek nepolarizovanyacute (A C) ndash kmitaacute v každeacutem

miacutestě a v průběhu času ve všech možnyacutech směrech

kolmyacutech na směr šiacuteřeniacute paprsku

- paprsek polarizovanyacute (B D1 D2) - kmitaacute v jedneacute

rovině přičemž rovina kmitů (vlněniacute) jednoho z nich je

kolmaacute k rovině kmitů druheacuteho

Pazourek 1975

Polarizovaneacute světlo viz

httpswwwyoutubecomwatchv=gP751qpm4n4

Murphy DB Davidson MW (2013) Fundamentals of Light Microscopy and

Electronic Imaging Jonh Wkiley amp Sons Inc Hoboken New Jersey

Osm různyacutech vlnovyacutech forem světla (znaacutezorňujiacuteciacutech různou kvalitu světla)

Odraz a lom světelnyacutech paprsků

v prostřediacutech různeacute hustoty

Důležitaacute charakteristika prostřediacute

index lomu ( n ) (= optickaacute hustota prostřediacute)

c = rychlost světla ve vakuu (stejnaacute pro všechny λ )

v = rychlost světla určiteacute vlnoveacute deacutelky ve zkoumaneacute laacutetce

c

n =

v

zde absolutniacute index lomu

(bezrozměrnaacute fyzikaacutelniacute veličina jeho jednotka je 1)

Rychlost světla (c) určiteacute vlnoveacute

deacutelky v různyacutech prostřediacutech

c ve vakuu

= 300 000 kms

Index lomu (n) některyacutech laacutetek

vzduch (vakuum) helliphellip 100 (vzduch 10002718)

voda helliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 133

plexisklo helliphelliphelliphelliphelliphellip 140 ndash 152

křemenneacute sklo helliphellip hellip 145 (čočka z křemene z Ninive ndash 7 stol přnl)

běžneacute sklo helliphelliphelliphelliphellip 151

cedrovyacute olej helliphelliphelliphelliphellip 151

imerzniacute olej Olympus hellip 1516 pro fluorescenci 1404

kanadskyacute balzaacutem helliphellip 150

krystal NaCl helliphelliphelliphellip 154

korunoveacute sklo helliphelliphelliphellip 145 ndash 156 (sodno-draselneacute bezolovnateacute)

flintoveacute sklo helliphelliphelliphellip 162 ndash 180 (olovnateacute)

diamant helliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 242

Index lomu je vždy většiacute než 100

očniacute čočka hellip 1406

sklivec helliphelliphellip 1336

Odraz světla rovnyacutem zrcadlem (reflexe)

Zaacutekony

1 Paprsek dopadajiacuteciacute kolmice dopadu a paprsek odraženyacute

ležiacute v jedneacute rovině

2 Uacutehel odrazu se rovnaacute uacutehlu dopadu

Odraz a lom paprsku

k

Důležiteacute pro mikroskopii (astronomii)

- neniacute zaacutevislost na vlnoveacute deacutelce světla (λ)

- na rozdiacutel od lomu paprsků se světelneacute

paprsky se odraacutežejiacute stejně

Pazourek 1975

Zaacutekony

1 Paprsek dopadajiacuteciacute kolmice lomu a paprsek lomenyacute ležiacute v teacuteže rovině

Lom světla (refrakce)

2 Při přechodu z prostřediacute opticky řidšiacuteho do prostřediacute opticky hustšiacuteho se paprsek laacuteme ke kolmici (A)

a z prostřediacute opticky hustšiacuteho

do prostřediacute opticky řidšiacuteho

se laacuteme od kolmice (B)

(C a D) ndash uacuteplnyacute odraz při tzv

mezniacutem uacutehlu dopadu paprsku

v přiacutepadě lomu od kolmice (B)

(viz Nikol odrazneacute hranoly světlovodneacute vlaacutekno nebo fluorescenčniacute metoda TIRFM ndash totaacutelniacute odraz exitačniacuteho zaacuteřeniacute)

Pazourek 1975

Svatyacute Kryštof od

švyacutecarskeacuteho maliacuteře

Konrada Witze (kolem 1400ndash1446)

Witz byl jedniacutem z prvniacutech

maliacuteřů kteryacute namaloval

přesnyacute způsob odrazu

světla na vodě

Disperze (rozklad) světla

= důsledek zaacutevislosti rychlosti světla v laacutetkaacutech na frekvenci světla

(λ = c f)

světlo různyacutech barev (λ)

se laacuteme různě

(červeneacute se lomiacute meacuteně než modreacute)

Přiacuteklad disperze (rozkladu) světla

Primaacuterniacute a sekundaacuterniacute duha Severniacute Čechy Foto Pavla Vaacutelovaacute 2010

D u h a

Jeden z mnoha

optickyacutech

jevů (fotometeorů)

v atmosfeacuteře

Rok 312 nl - před bitvou byzantskeacuteho ciacutesaře Konstantina I (272-337) s

konkurenčniacutem ciacutesařem Maxentiem u bran Řiacutema (tzv bitva u Milvijskeacuteho mostu) se

na obloze objevily tři zaacuteřiacuteciacute křiacuteže (halovyacute sloup parheacutelia a parhelickyacute oblouk)

Konstantin bitvu proti přesile vyhraacutel sjednotil řiacuteši a povolil v niacute vyznaacutevat křesťanstviacute

Maleacute halo (22deg) (viz 1) vedlejšiacute slunce (2) a horniacute a dolniacute halovyacute sloup (3)

vznikajiacuteciacute odrazem a lomem světelnyacutech paprsků na krystalciacutech ledu

Lom světla a dějiny

httptmagazineblogsnytimescom20121126halo-effect_r=0

1

3

2 2

3

Ohyb (difrakce) a interference

světla

Foto Pavla Vaacutelovaacute Bukovany 2015 Rozklad světla na CD - světlo žaacuterovky

Rozklad biacuteleacuteho světla na mřiacutežce

Pevnost poznaacuteniacute Olomouc 2015

Foto Pavla Vaacutelovaacute Olomouc 2015

Ohyb (difrakce) a interference

světla

Ohyb (difrakce) a interference

Difrakčniacute obrazec obsahuje světlaacute a tmavaacute miacutesta kteraacute se

střiacutedajiacute - světlaacute miacutesta nazyacutevaacuteme maxima a tmavaacute minima

Interference světla = sklaacutedaacuteniacute světelnyacutech vln

Předpoklad světlo musiacute byacutet koherentniacute

Podmiacutenka koherence

- paprsky musiacute miacutet stejnou frekvenci

- paprsky musiacute byacutet navzaacutejem rovnoběžneacute

- paprsky musiacute miacutet na sobě nezaacutevislyacute draacutehovyacute (faacutezovyacute) rozdiacutel

Vznik koherentniacuteho zaacuteřeniacute

rozděleniacutem světla

- buď odrazem pomociacute zrcadel

- nebo lomem pomociacute hranolů

Foto Pavla Vaacutelovaacute Praha 151 2016

Interference světla

stejnyacute způsob vlněniacute

(faacuteze je vzaacutejemně posunuta o sudeacute

naacutesobky λ2)

vznik interferenčniacuteho maxima

(konstruktivniacute interference)

Interference světla

asynchronniacute vlněniacute

(vzaacutejemně posunutaacute faacuteze

o licheacute naacutesobky λ2)

vznik interferenčniacuteho

minima

(destruktivniacute interference)

rarr zaacuteřeniacute zanikaacute

rarr zeslabeniacute zaacuteřeniacute

Interference dvou vrstev elektromagnetickeacuteho zaacuteřeniacute u Slunce

Čočky ndash zaacutekladniacute součaacutesti

mikroskopu

= průhlednaacute (nejčastěji skleněnaacute) tělesa omezenaacute

vypuklyacutemi nebo vydutyacutemi kulovityacutemi plochami lišiacuteciacute se od sveacuteho okoliacute odlišnyacutem indexem lomu

Zaacutekladniacute typy čoček

spojky (vypukleacute neboli konvexniacute)

rozptylky (vyduteacute konkaacutevniacute)

Pazourek 1975

Optickaacute osa ( o ) prochaacuteziacute středem čočky

Ohnisko ( F ) - bod do ktereacuteho se soustřeďujiacute paprsky probiacutehajiacuteciacute rovnoběžně s optickou osou

- 2 ohniska - předmětoveacute ohnisko ( F )

obrazoveacute ohnisko ( Facute )

- ohniskovaacute vzdaacutelenost ( f )

vzdaacutelenost ohniska od hlavniacute roviny proloženeacute středem čočky

- dvojnaacutesobnaacute ohniskovaacute vzdaacutelenost ( P Pacute )

Obrazovyacute prostor - prostor v němž vznikaacute obraz

Důležiteacute charakteristiky čočky

f

o

hlavniacute rovina

Pazourek 1975

V přiacutepadě velmi tenkeacute čočky

bull Obraz za optickou soustavou

rarr obraz s k u t e č n yacute

Skutečnyacute obraz je možneacute zachytit na stiacuteniacutetko

nebo na fotografickou desku neskutečnyacute nikoliv

bull Obraz před soustavou

rarr obraz n e s k u t e č n yacute (zdaacutenlivyacute virtuaacutelniacute)

Obraz skutečnyacute a neskutečnyacute

A ndash předmět Aacute- obraz předmětu

Upraveno podle Pazourek 1975

Francouz Augustin Jean Fresnel (1788-1827) [frenel]

Fresnelova čočka [frenelova]

- plochyacute tvar (zachovaacuteny pouze čaacutesti ktereacute měniacute směr chodu světelnyacutech paprsků)

- vyacuterazně nižšiacute hmotnost při zachovaacuteniacute podobnyacutech parametrů

Využitiacute infračidla pohybu semafory světlomety (majaacuteky) a reflektory (světla aut

divadelniacutech a filmovyacutech osvětlovaciacutech zařiacutezeniacute) zpětneacute projektory slunečniacute kolektory

na zaacutekladě tohoto principu takeacute vyacuteroba 3D displejů k mobilniacutem telefonům a televiziacutem

httpwwwmffcuniczverejnostzpravicky03_lupahtm

čočka na majaacuteku

Čočky v budoucnosti

Pokus o vyacuterobu tzv dokonaleacute čočky

Prototyp - upraveneacute tzv Maxwellovo rybiacute oko

- paprsky světla se v něm pohybujiacute po kružniciacutech a

na rozdiacutel od běžnyacutech čoček se při zobrazeniacute využijiacute

všechny paprsky

- superčočky využiacutevajiacute geometrie k tomu aby se světlo

soustředilo do oblasti menšiacute než je jeho vlnovaacute deacutelka

(zatiacutem se neviacute jak do čočky vyhovujiacuteciacutem způsobem

doveacutest světlo)

Využitiacute v budoucnu

mimo jineacute v pozorovaacuteniacute živyacutech buněk při velkeacutem zvětšeniacute

pomociacute obyčejneacuteho světla bez jejich narušeniacute

Viacutece viz Plaacutešek J Mikroskopy se superčočkami httpwwwvesmircz | Vesmiacuter 91 531 zaacuteřiacute 2012

Hranoly

- doplňky optickyacutech systeacutemů

- většinou tvar rovnostranneacuteho trojuacutehelniacuteka

- využiacutevajiacute uacuteplneacuteho odrazu

Funkce

- změna chodu paprsků pod různyacutemi uacutehly

- rozdvojeniacute paprsků

Pazourek 1975

Různeacute typy odraznyacutech hranolů

Hranoly

Různeacute typy hranolů

httplaserykvalitneczimagestext_25_zakladyoptiky1odrazne_hranolyjpg

Viz dichroickeacute zrcadlo u fluorescenčniacuteho mikroskopu

Chod paprsků v binokulaacuterniacutem tubusu

Pazourek 1975

Nikol = hranol z islandskeacuteho vaacutepence

rarr polarizace světla

Dvojlomnyacute vaacutepencovyacute

krystal

ř ndash paprsek řaacutednyacute (zanikaacute na začerněneacute ploše)

mř ndash paprsek mimořaacutednyacute (lineaacuterně polarizovanyacute

využit k osvětleniacute)

začerněnaacute plocha

Nikol

Pazourek 1975

vzduchovaacute štěrbina

- rychlost světla je

v různyacutech směrech různaacute

- uacutehel paprsku řaacutedneacuteho a

mimořaacutedneacuteho je odlišnyacute

(u Vikingů - slunečniacute kaacutemen

soacutelarsteinn)

Chod paprsků ve světlovodneacutem vlaacuteknu

Princip uacuteplnyacute odraz paprsku

- uvnitř skleněneacuteho vlaacutekna je opticky hustšiacute prostřediacute

- nutnost dostatečně silneacuteho světelneacuteho zdroje

Světlovodnaacute vlaacutekna

Pazourek 1975

Širokeacute využitiacute v praxi optickeacute kabely ndash přenos signaacutelů ve sdělovaciacute technice

světlovody umožňujiacuteciacute veacutest denniacute světlo vedeniacute světla u stereolup endoskopů hellip

Page 37: Světelná a elektronová mikroskopie...(AMF – Atomic Force Miroscope) - skenování povrchu materiálu pomocí hrotu zavěšeném na pružném výkyvném raménku, který je přitahován

S v ě t l o

= čaacutest rozsaacutehleacute oblasti elektromagnetickeacuteho zaacuteřeniacute

kterou vniacutemaacuteme zrakem

Rozhlasoveacute a raacutedioveacute vlny 250 km - 1 mm

Infračerveneacute zaacuteřeniacute 05 mm - 08 μm

Světlo (viditelneacute zaacuteřeniacute) 08 μm - 04 μm

Ultrafialoveacute zaacuteřeniacute 04 microm - 01 microm

Roumlntgenovo zaacuteřeniacute (X-paprsky) 15 nm - 0005 nm

γ-zaacuteřeniacute pod 00001 nm

Přibližneacute hodnoty ndash individuaacutelniacute vlastnosti zraku různyacutech lidiacute

S v ě t l o

= čaacutest rozsaacutehleacute oblasti elektromagnetickeacuteho zaacuteřeniacute

kterou vniacutemaacuteme zrakem

rarr se zkracujiacuteciacute se vlnovou deacutelkou se zvyšuje frekvence (energie)

Viditelneacute

Vlnoveacute deacutelky světla a relativniacute citlivost oka

Murphy DB Davidson MW (2013) Fundamentals of Light Microscopy and Electronic

Imaging Willey-Blackwell Published 2013 by John Wiley amp Sons Inc Hoboken New Jersey

= zrakovyacute pigment citlivyacute na

světlo nachaacutezejiacuteciacute se v tyčinkaacutech Jodopsin = zrakovyacute pigment citlivyacute na

barvu nachaacutezejiacuteciacute se v čiacutepciacutech

S v ě t l o

Duaacutelniacute charakter světla ndash vlněniacute i proud čaacutestic (fotonů)

Vlnovyacute model světla

vlna elektrickaacute a magnetickaacute (elektromagnetickaacute vlna je tvořena oscilujiacuteciacutem elektrickyacutem a

magnetickyacutem polem na sebe kolmyacutech a nesouciacutech vpřed energii)

Pro uacutečinky světla v mikroskopu je důležitaacute vlna elektrickaacute

= přiacutečneacute vlněniacute

postupneacute kmitaacuteniacute

jednotlivyacutech vedle sebe

ležiacuteciacutech bodů

Scheacutema světla jako elektromagnetickeacute vlny

Obr httpwwwprosoundwebcomarticleprintinvaders_from_

outer_space_electromagnetic_radiation_interference

λ - vlnovaacute deacutelka

(v oblasti svět zaacuteřeniacute

v rozmeziacute od 380 do 780 nm)

určuje barvu světla

a - amplituda

nejvyššiacute hodnota

určuje intenzitu světla

Z hlediska vlnoveacute deacutelky rozlišujeme

polychromatickeacute x monochromatickeacute světlo (selekce pomociacute barevnyacutech filtrů rarr jednotnaacute vlnovaacute deacutelka světlo zeleneacute červeneacute hellip)

Elektrickaacute vlna - sinusoida

Charakterizovaacutena dvěma veličinami

Pazourek 1975

Vlastnosti světla

Rovnoměrneacute šiacuteřeniacute světla ze zaacuteřiacuteciacuteho bodu na všechny strany rarr vlnovaacute plocha tvaru koule

Paprsek ndash směr kteryacutem se vlněniacute šiacuteřiacute a kteryacute je kolmyacute

na vlnoplochu

Pazourek 1975

- paprsek nepolarizovanyacute (A C) ndash kmitaacute v každeacutem

miacutestě a v průběhu času ve všech možnyacutech směrech

kolmyacutech na směr šiacuteřeniacute paprsku

- paprsek polarizovanyacute (B D1 D2) - kmitaacute v jedneacute

rovině přičemž rovina kmitů (vlněniacute) jednoho z nich je

kolmaacute k rovině kmitů druheacuteho

Pazourek 1975

Polarizovaneacute světlo viz

httpswwwyoutubecomwatchv=gP751qpm4n4

Murphy DB Davidson MW (2013) Fundamentals of Light Microscopy and

Electronic Imaging Jonh Wkiley amp Sons Inc Hoboken New Jersey

Osm různyacutech vlnovyacutech forem světla (znaacutezorňujiacuteciacutech různou kvalitu světla)

Odraz a lom světelnyacutech paprsků

v prostřediacutech různeacute hustoty

Důležitaacute charakteristika prostřediacute

index lomu ( n ) (= optickaacute hustota prostřediacute)

c = rychlost světla ve vakuu (stejnaacute pro všechny λ )

v = rychlost světla určiteacute vlnoveacute deacutelky ve zkoumaneacute laacutetce

c

n =

v

zde absolutniacute index lomu

(bezrozměrnaacute fyzikaacutelniacute veličina jeho jednotka je 1)

Rychlost světla (c) určiteacute vlnoveacute

deacutelky v různyacutech prostřediacutech

c ve vakuu

= 300 000 kms

Index lomu (n) některyacutech laacutetek

vzduch (vakuum) helliphellip 100 (vzduch 10002718)

voda helliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 133

plexisklo helliphelliphelliphelliphelliphellip 140 ndash 152

křemenneacute sklo helliphellip hellip 145 (čočka z křemene z Ninive ndash 7 stol přnl)

běžneacute sklo helliphelliphelliphelliphellip 151

cedrovyacute olej helliphelliphelliphelliphellip 151

imerzniacute olej Olympus hellip 1516 pro fluorescenci 1404

kanadskyacute balzaacutem helliphellip 150

krystal NaCl helliphelliphelliphellip 154

korunoveacute sklo helliphelliphelliphellip 145 ndash 156 (sodno-draselneacute bezolovnateacute)

flintoveacute sklo helliphelliphelliphellip 162 ndash 180 (olovnateacute)

diamant helliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 242

Index lomu je vždy většiacute než 100

očniacute čočka hellip 1406

sklivec helliphelliphellip 1336

Odraz světla rovnyacutem zrcadlem (reflexe)

Zaacutekony

1 Paprsek dopadajiacuteciacute kolmice dopadu a paprsek odraženyacute

ležiacute v jedneacute rovině

2 Uacutehel odrazu se rovnaacute uacutehlu dopadu

Odraz a lom paprsku

k

Důležiteacute pro mikroskopii (astronomii)

- neniacute zaacutevislost na vlnoveacute deacutelce světla (λ)

- na rozdiacutel od lomu paprsků se světelneacute

paprsky se odraacutežejiacute stejně

Pazourek 1975

Zaacutekony

1 Paprsek dopadajiacuteciacute kolmice lomu a paprsek lomenyacute ležiacute v teacuteže rovině

Lom světla (refrakce)

2 Při přechodu z prostřediacute opticky řidšiacuteho do prostřediacute opticky hustšiacuteho se paprsek laacuteme ke kolmici (A)

a z prostřediacute opticky hustšiacuteho

do prostřediacute opticky řidšiacuteho

se laacuteme od kolmice (B)

(C a D) ndash uacuteplnyacute odraz při tzv

mezniacutem uacutehlu dopadu paprsku

v přiacutepadě lomu od kolmice (B)

(viz Nikol odrazneacute hranoly světlovodneacute vlaacutekno nebo fluorescenčniacute metoda TIRFM ndash totaacutelniacute odraz exitačniacuteho zaacuteřeniacute)

Pazourek 1975

Svatyacute Kryštof od

švyacutecarskeacuteho maliacuteře

Konrada Witze (kolem 1400ndash1446)

Witz byl jedniacutem z prvniacutech

maliacuteřů kteryacute namaloval

přesnyacute způsob odrazu

světla na vodě

Disperze (rozklad) světla

= důsledek zaacutevislosti rychlosti světla v laacutetkaacutech na frekvenci světla

(λ = c f)

světlo různyacutech barev (λ)

se laacuteme různě

(červeneacute se lomiacute meacuteně než modreacute)

Přiacuteklad disperze (rozkladu) světla

Primaacuterniacute a sekundaacuterniacute duha Severniacute Čechy Foto Pavla Vaacutelovaacute 2010

D u h a

Jeden z mnoha

optickyacutech

jevů (fotometeorů)

v atmosfeacuteře

Rok 312 nl - před bitvou byzantskeacuteho ciacutesaře Konstantina I (272-337) s

konkurenčniacutem ciacutesařem Maxentiem u bran Řiacutema (tzv bitva u Milvijskeacuteho mostu) se

na obloze objevily tři zaacuteřiacuteciacute křiacuteže (halovyacute sloup parheacutelia a parhelickyacute oblouk)

Konstantin bitvu proti přesile vyhraacutel sjednotil řiacuteši a povolil v niacute vyznaacutevat křesťanstviacute

Maleacute halo (22deg) (viz 1) vedlejšiacute slunce (2) a horniacute a dolniacute halovyacute sloup (3)

vznikajiacuteciacute odrazem a lomem světelnyacutech paprsků na krystalciacutech ledu

Lom světla a dějiny

httptmagazineblogsnytimescom20121126halo-effect_r=0

1

3

2 2

3

Ohyb (difrakce) a interference

světla

Foto Pavla Vaacutelovaacute Bukovany 2015 Rozklad světla na CD - světlo žaacuterovky

Rozklad biacuteleacuteho světla na mřiacutežce

Pevnost poznaacuteniacute Olomouc 2015

Foto Pavla Vaacutelovaacute Olomouc 2015

Ohyb (difrakce) a interference

světla

Ohyb (difrakce) a interference

Difrakčniacute obrazec obsahuje světlaacute a tmavaacute miacutesta kteraacute se

střiacutedajiacute - světlaacute miacutesta nazyacutevaacuteme maxima a tmavaacute minima

Interference světla = sklaacutedaacuteniacute světelnyacutech vln

Předpoklad světlo musiacute byacutet koherentniacute

Podmiacutenka koherence

- paprsky musiacute miacutet stejnou frekvenci

- paprsky musiacute byacutet navzaacutejem rovnoběžneacute

- paprsky musiacute miacutet na sobě nezaacutevislyacute draacutehovyacute (faacutezovyacute) rozdiacutel

Vznik koherentniacuteho zaacuteřeniacute

rozděleniacutem světla

- buď odrazem pomociacute zrcadel

- nebo lomem pomociacute hranolů

Foto Pavla Vaacutelovaacute Praha 151 2016

Interference světla

stejnyacute způsob vlněniacute

(faacuteze je vzaacutejemně posunuta o sudeacute

naacutesobky λ2)

vznik interferenčniacuteho maxima

(konstruktivniacute interference)

Interference světla

asynchronniacute vlněniacute

(vzaacutejemně posunutaacute faacuteze

o licheacute naacutesobky λ2)

vznik interferenčniacuteho

minima

(destruktivniacute interference)

rarr zaacuteřeniacute zanikaacute

rarr zeslabeniacute zaacuteřeniacute

Interference dvou vrstev elektromagnetickeacuteho zaacuteřeniacute u Slunce

Čočky ndash zaacutekladniacute součaacutesti

mikroskopu

= průhlednaacute (nejčastěji skleněnaacute) tělesa omezenaacute

vypuklyacutemi nebo vydutyacutemi kulovityacutemi plochami lišiacuteciacute se od sveacuteho okoliacute odlišnyacutem indexem lomu

Zaacutekladniacute typy čoček

spojky (vypukleacute neboli konvexniacute)

rozptylky (vyduteacute konkaacutevniacute)

Pazourek 1975

Optickaacute osa ( o ) prochaacuteziacute středem čočky

Ohnisko ( F ) - bod do ktereacuteho se soustřeďujiacute paprsky probiacutehajiacuteciacute rovnoběžně s optickou osou

- 2 ohniska - předmětoveacute ohnisko ( F )

obrazoveacute ohnisko ( Facute )

- ohniskovaacute vzdaacutelenost ( f )

vzdaacutelenost ohniska od hlavniacute roviny proloženeacute středem čočky

- dvojnaacutesobnaacute ohniskovaacute vzdaacutelenost ( P Pacute )

Obrazovyacute prostor - prostor v němž vznikaacute obraz

Důležiteacute charakteristiky čočky

f

o

hlavniacute rovina

Pazourek 1975

V přiacutepadě velmi tenkeacute čočky

bull Obraz za optickou soustavou

rarr obraz s k u t e č n yacute

Skutečnyacute obraz je možneacute zachytit na stiacuteniacutetko

nebo na fotografickou desku neskutečnyacute nikoliv

bull Obraz před soustavou

rarr obraz n e s k u t e č n yacute (zdaacutenlivyacute virtuaacutelniacute)

Obraz skutečnyacute a neskutečnyacute

A ndash předmět Aacute- obraz předmětu

Upraveno podle Pazourek 1975

Francouz Augustin Jean Fresnel (1788-1827) [frenel]

Fresnelova čočka [frenelova]

- plochyacute tvar (zachovaacuteny pouze čaacutesti ktereacute měniacute směr chodu světelnyacutech paprsků)

- vyacuterazně nižšiacute hmotnost při zachovaacuteniacute podobnyacutech parametrů

Využitiacute infračidla pohybu semafory světlomety (majaacuteky) a reflektory (světla aut

divadelniacutech a filmovyacutech osvětlovaciacutech zařiacutezeniacute) zpětneacute projektory slunečniacute kolektory

na zaacutekladě tohoto principu takeacute vyacuteroba 3D displejů k mobilniacutem telefonům a televiziacutem

httpwwwmffcuniczverejnostzpravicky03_lupahtm

čočka na majaacuteku

Čočky v budoucnosti

Pokus o vyacuterobu tzv dokonaleacute čočky

Prototyp - upraveneacute tzv Maxwellovo rybiacute oko

- paprsky světla se v něm pohybujiacute po kružniciacutech a

na rozdiacutel od běžnyacutech čoček se při zobrazeniacute využijiacute

všechny paprsky

- superčočky využiacutevajiacute geometrie k tomu aby se světlo

soustředilo do oblasti menšiacute než je jeho vlnovaacute deacutelka

(zatiacutem se neviacute jak do čočky vyhovujiacuteciacutem způsobem

doveacutest světlo)

Využitiacute v budoucnu

mimo jineacute v pozorovaacuteniacute živyacutech buněk při velkeacutem zvětšeniacute

pomociacute obyčejneacuteho světla bez jejich narušeniacute

Viacutece viz Plaacutešek J Mikroskopy se superčočkami httpwwwvesmircz | Vesmiacuter 91 531 zaacuteřiacute 2012

Hranoly

- doplňky optickyacutech systeacutemů

- většinou tvar rovnostranneacuteho trojuacutehelniacuteka

- využiacutevajiacute uacuteplneacuteho odrazu

Funkce

- změna chodu paprsků pod různyacutemi uacutehly

- rozdvojeniacute paprsků

Pazourek 1975

Různeacute typy odraznyacutech hranolů

Hranoly

Různeacute typy hranolů

httplaserykvalitneczimagestext_25_zakladyoptiky1odrazne_hranolyjpg

Viz dichroickeacute zrcadlo u fluorescenčniacuteho mikroskopu

Chod paprsků v binokulaacuterniacutem tubusu

Pazourek 1975

Nikol = hranol z islandskeacuteho vaacutepence

rarr polarizace světla

Dvojlomnyacute vaacutepencovyacute

krystal

ř ndash paprsek řaacutednyacute (zanikaacute na začerněneacute ploše)

mř ndash paprsek mimořaacutednyacute (lineaacuterně polarizovanyacute

využit k osvětleniacute)

začerněnaacute plocha

Nikol

Pazourek 1975

vzduchovaacute štěrbina

- rychlost světla je

v různyacutech směrech různaacute

- uacutehel paprsku řaacutedneacuteho a

mimořaacutedneacuteho je odlišnyacute

(u Vikingů - slunečniacute kaacutemen

soacutelarsteinn)

Chod paprsků ve světlovodneacutem vlaacuteknu

Princip uacuteplnyacute odraz paprsku

- uvnitř skleněneacuteho vlaacutekna je opticky hustšiacute prostřediacute

- nutnost dostatečně silneacuteho světelneacuteho zdroje

Světlovodnaacute vlaacutekna

Pazourek 1975

Širokeacute využitiacute v praxi optickeacute kabely ndash přenos signaacutelů ve sdělovaciacute technice

světlovody umožňujiacuteciacute veacutest denniacute světlo vedeniacute světla u stereolup endoskopů hellip

Page 38: Světelná a elektronová mikroskopie...(AMF – Atomic Force Miroscope) - skenování povrchu materiálu pomocí hrotu zavěšeném na pružném výkyvném raménku, který je přitahován

S v ě t l o

= čaacutest rozsaacutehleacute oblasti elektromagnetickeacuteho zaacuteřeniacute

kterou vniacutemaacuteme zrakem

rarr se zkracujiacuteciacute se vlnovou deacutelkou se zvyšuje frekvence (energie)

Viditelneacute

Vlnoveacute deacutelky světla a relativniacute citlivost oka

Murphy DB Davidson MW (2013) Fundamentals of Light Microscopy and Electronic

Imaging Willey-Blackwell Published 2013 by John Wiley amp Sons Inc Hoboken New Jersey

= zrakovyacute pigment citlivyacute na

světlo nachaacutezejiacuteciacute se v tyčinkaacutech Jodopsin = zrakovyacute pigment citlivyacute na

barvu nachaacutezejiacuteciacute se v čiacutepciacutech

S v ě t l o

Duaacutelniacute charakter světla ndash vlněniacute i proud čaacutestic (fotonů)

Vlnovyacute model světla

vlna elektrickaacute a magnetickaacute (elektromagnetickaacute vlna je tvořena oscilujiacuteciacutem elektrickyacutem a

magnetickyacutem polem na sebe kolmyacutech a nesouciacutech vpřed energii)

Pro uacutečinky světla v mikroskopu je důležitaacute vlna elektrickaacute

= přiacutečneacute vlněniacute

postupneacute kmitaacuteniacute

jednotlivyacutech vedle sebe

ležiacuteciacutech bodů

Scheacutema světla jako elektromagnetickeacute vlny

Obr httpwwwprosoundwebcomarticleprintinvaders_from_

outer_space_electromagnetic_radiation_interference

λ - vlnovaacute deacutelka

(v oblasti svět zaacuteřeniacute

v rozmeziacute od 380 do 780 nm)

určuje barvu světla

a - amplituda

nejvyššiacute hodnota

určuje intenzitu světla

Z hlediska vlnoveacute deacutelky rozlišujeme

polychromatickeacute x monochromatickeacute světlo (selekce pomociacute barevnyacutech filtrů rarr jednotnaacute vlnovaacute deacutelka světlo zeleneacute červeneacute hellip)

Elektrickaacute vlna - sinusoida

Charakterizovaacutena dvěma veličinami

Pazourek 1975

Vlastnosti světla

Rovnoměrneacute šiacuteřeniacute světla ze zaacuteřiacuteciacuteho bodu na všechny strany rarr vlnovaacute plocha tvaru koule

Paprsek ndash směr kteryacutem se vlněniacute šiacuteřiacute a kteryacute je kolmyacute

na vlnoplochu

Pazourek 1975

- paprsek nepolarizovanyacute (A C) ndash kmitaacute v každeacutem

miacutestě a v průběhu času ve všech možnyacutech směrech

kolmyacutech na směr šiacuteřeniacute paprsku

- paprsek polarizovanyacute (B D1 D2) - kmitaacute v jedneacute

rovině přičemž rovina kmitů (vlněniacute) jednoho z nich je

kolmaacute k rovině kmitů druheacuteho

Pazourek 1975

Polarizovaneacute světlo viz

httpswwwyoutubecomwatchv=gP751qpm4n4

Murphy DB Davidson MW (2013) Fundamentals of Light Microscopy and

Electronic Imaging Jonh Wkiley amp Sons Inc Hoboken New Jersey

Osm různyacutech vlnovyacutech forem světla (znaacutezorňujiacuteciacutech různou kvalitu světla)

Odraz a lom světelnyacutech paprsků

v prostřediacutech různeacute hustoty

Důležitaacute charakteristika prostřediacute

index lomu ( n ) (= optickaacute hustota prostřediacute)

c = rychlost světla ve vakuu (stejnaacute pro všechny λ )

v = rychlost světla určiteacute vlnoveacute deacutelky ve zkoumaneacute laacutetce

c

n =

v

zde absolutniacute index lomu

(bezrozměrnaacute fyzikaacutelniacute veličina jeho jednotka je 1)

Rychlost světla (c) určiteacute vlnoveacute

deacutelky v různyacutech prostřediacutech

c ve vakuu

= 300 000 kms

Index lomu (n) některyacutech laacutetek

vzduch (vakuum) helliphellip 100 (vzduch 10002718)

voda helliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 133

plexisklo helliphelliphelliphelliphelliphellip 140 ndash 152

křemenneacute sklo helliphellip hellip 145 (čočka z křemene z Ninive ndash 7 stol přnl)

běžneacute sklo helliphelliphelliphelliphellip 151

cedrovyacute olej helliphelliphelliphelliphellip 151

imerzniacute olej Olympus hellip 1516 pro fluorescenci 1404

kanadskyacute balzaacutem helliphellip 150

krystal NaCl helliphelliphelliphellip 154

korunoveacute sklo helliphelliphelliphellip 145 ndash 156 (sodno-draselneacute bezolovnateacute)

flintoveacute sklo helliphelliphelliphellip 162 ndash 180 (olovnateacute)

diamant helliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 242

Index lomu je vždy většiacute než 100

očniacute čočka hellip 1406

sklivec helliphelliphellip 1336

Odraz světla rovnyacutem zrcadlem (reflexe)

Zaacutekony

1 Paprsek dopadajiacuteciacute kolmice dopadu a paprsek odraženyacute

ležiacute v jedneacute rovině

2 Uacutehel odrazu se rovnaacute uacutehlu dopadu

Odraz a lom paprsku

k

Důležiteacute pro mikroskopii (astronomii)

- neniacute zaacutevislost na vlnoveacute deacutelce světla (λ)

- na rozdiacutel od lomu paprsků se světelneacute

paprsky se odraacutežejiacute stejně

Pazourek 1975

Zaacutekony

1 Paprsek dopadajiacuteciacute kolmice lomu a paprsek lomenyacute ležiacute v teacuteže rovině

Lom světla (refrakce)

2 Při přechodu z prostřediacute opticky řidšiacuteho do prostřediacute opticky hustšiacuteho se paprsek laacuteme ke kolmici (A)

a z prostřediacute opticky hustšiacuteho

do prostřediacute opticky řidšiacuteho

se laacuteme od kolmice (B)

(C a D) ndash uacuteplnyacute odraz při tzv

mezniacutem uacutehlu dopadu paprsku

v přiacutepadě lomu od kolmice (B)

(viz Nikol odrazneacute hranoly světlovodneacute vlaacutekno nebo fluorescenčniacute metoda TIRFM ndash totaacutelniacute odraz exitačniacuteho zaacuteřeniacute)

Pazourek 1975

Svatyacute Kryštof od

švyacutecarskeacuteho maliacuteře

Konrada Witze (kolem 1400ndash1446)

Witz byl jedniacutem z prvniacutech

maliacuteřů kteryacute namaloval

přesnyacute způsob odrazu

světla na vodě

Disperze (rozklad) světla

= důsledek zaacutevislosti rychlosti světla v laacutetkaacutech na frekvenci světla

(λ = c f)

světlo různyacutech barev (λ)

se laacuteme různě

(červeneacute se lomiacute meacuteně než modreacute)

Přiacuteklad disperze (rozkladu) světla

Primaacuterniacute a sekundaacuterniacute duha Severniacute Čechy Foto Pavla Vaacutelovaacute 2010

D u h a

Jeden z mnoha

optickyacutech

jevů (fotometeorů)

v atmosfeacuteře

Rok 312 nl - před bitvou byzantskeacuteho ciacutesaře Konstantina I (272-337) s

konkurenčniacutem ciacutesařem Maxentiem u bran Řiacutema (tzv bitva u Milvijskeacuteho mostu) se

na obloze objevily tři zaacuteřiacuteciacute křiacuteže (halovyacute sloup parheacutelia a parhelickyacute oblouk)

Konstantin bitvu proti přesile vyhraacutel sjednotil řiacuteši a povolil v niacute vyznaacutevat křesťanstviacute

Maleacute halo (22deg) (viz 1) vedlejšiacute slunce (2) a horniacute a dolniacute halovyacute sloup (3)

vznikajiacuteciacute odrazem a lomem světelnyacutech paprsků na krystalciacutech ledu

Lom světla a dějiny

httptmagazineblogsnytimescom20121126halo-effect_r=0

1

3

2 2

3

Ohyb (difrakce) a interference

světla

Foto Pavla Vaacutelovaacute Bukovany 2015 Rozklad světla na CD - světlo žaacuterovky

Rozklad biacuteleacuteho světla na mřiacutežce

Pevnost poznaacuteniacute Olomouc 2015

Foto Pavla Vaacutelovaacute Olomouc 2015

Ohyb (difrakce) a interference

světla

Ohyb (difrakce) a interference

Difrakčniacute obrazec obsahuje světlaacute a tmavaacute miacutesta kteraacute se

střiacutedajiacute - světlaacute miacutesta nazyacutevaacuteme maxima a tmavaacute minima

Interference světla = sklaacutedaacuteniacute světelnyacutech vln

Předpoklad světlo musiacute byacutet koherentniacute

Podmiacutenka koherence

- paprsky musiacute miacutet stejnou frekvenci

- paprsky musiacute byacutet navzaacutejem rovnoběžneacute

- paprsky musiacute miacutet na sobě nezaacutevislyacute draacutehovyacute (faacutezovyacute) rozdiacutel

Vznik koherentniacuteho zaacuteřeniacute

rozděleniacutem světla

- buď odrazem pomociacute zrcadel

- nebo lomem pomociacute hranolů

Foto Pavla Vaacutelovaacute Praha 151 2016

Interference světla

stejnyacute způsob vlněniacute

(faacuteze je vzaacutejemně posunuta o sudeacute

naacutesobky λ2)

vznik interferenčniacuteho maxima

(konstruktivniacute interference)

Interference světla

asynchronniacute vlněniacute

(vzaacutejemně posunutaacute faacuteze

o licheacute naacutesobky λ2)

vznik interferenčniacuteho

minima

(destruktivniacute interference)

rarr zaacuteřeniacute zanikaacute

rarr zeslabeniacute zaacuteřeniacute

Interference dvou vrstev elektromagnetickeacuteho zaacuteřeniacute u Slunce

Čočky ndash zaacutekladniacute součaacutesti

mikroskopu

= průhlednaacute (nejčastěji skleněnaacute) tělesa omezenaacute

vypuklyacutemi nebo vydutyacutemi kulovityacutemi plochami lišiacuteciacute se od sveacuteho okoliacute odlišnyacutem indexem lomu

Zaacutekladniacute typy čoček

spojky (vypukleacute neboli konvexniacute)

rozptylky (vyduteacute konkaacutevniacute)

Pazourek 1975

Optickaacute osa ( o ) prochaacuteziacute středem čočky

Ohnisko ( F ) - bod do ktereacuteho se soustřeďujiacute paprsky probiacutehajiacuteciacute rovnoběžně s optickou osou

- 2 ohniska - předmětoveacute ohnisko ( F )

obrazoveacute ohnisko ( Facute )

- ohniskovaacute vzdaacutelenost ( f )

vzdaacutelenost ohniska od hlavniacute roviny proloženeacute středem čočky

- dvojnaacutesobnaacute ohniskovaacute vzdaacutelenost ( P Pacute )

Obrazovyacute prostor - prostor v němž vznikaacute obraz

Důležiteacute charakteristiky čočky

f

o

hlavniacute rovina

Pazourek 1975

V přiacutepadě velmi tenkeacute čočky

bull Obraz za optickou soustavou

rarr obraz s k u t e č n yacute

Skutečnyacute obraz je možneacute zachytit na stiacuteniacutetko

nebo na fotografickou desku neskutečnyacute nikoliv

bull Obraz před soustavou

rarr obraz n e s k u t e č n yacute (zdaacutenlivyacute virtuaacutelniacute)

Obraz skutečnyacute a neskutečnyacute

A ndash předmět Aacute- obraz předmětu

Upraveno podle Pazourek 1975

Francouz Augustin Jean Fresnel (1788-1827) [frenel]

Fresnelova čočka [frenelova]

- plochyacute tvar (zachovaacuteny pouze čaacutesti ktereacute měniacute směr chodu světelnyacutech paprsků)

- vyacuterazně nižšiacute hmotnost při zachovaacuteniacute podobnyacutech parametrů

Využitiacute infračidla pohybu semafory světlomety (majaacuteky) a reflektory (světla aut

divadelniacutech a filmovyacutech osvětlovaciacutech zařiacutezeniacute) zpětneacute projektory slunečniacute kolektory

na zaacutekladě tohoto principu takeacute vyacuteroba 3D displejů k mobilniacutem telefonům a televiziacutem

httpwwwmffcuniczverejnostzpravicky03_lupahtm

čočka na majaacuteku

Čočky v budoucnosti

Pokus o vyacuterobu tzv dokonaleacute čočky

Prototyp - upraveneacute tzv Maxwellovo rybiacute oko

- paprsky světla se v něm pohybujiacute po kružniciacutech a

na rozdiacutel od běžnyacutech čoček se při zobrazeniacute využijiacute

všechny paprsky

- superčočky využiacutevajiacute geometrie k tomu aby se světlo

soustředilo do oblasti menšiacute než je jeho vlnovaacute deacutelka

(zatiacutem se neviacute jak do čočky vyhovujiacuteciacutem způsobem

doveacutest světlo)

Využitiacute v budoucnu

mimo jineacute v pozorovaacuteniacute živyacutech buněk při velkeacutem zvětšeniacute

pomociacute obyčejneacuteho světla bez jejich narušeniacute

Viacutece viz Plaacutešek J Mikroskopy se superčočkami httpwwwvesmircz | Vesmiacuter 91 531 zaacuteřiacute 2012

Hranoly

- doplňky optickyacutech systeacutemů

- většinou tvar rovnostranneacuteho trojuacutehelniacuteka

- využiacutevajiacute uacuteplneacuteho odrazu

Funkce

- změna chodu paprsků pod různyacutemi uacutehly

- rozdvojeniacute paprsků

Pazourek 1975

Různeacute typy odraznyacutech hranolů

Hranoly

Různeacute typy hranolů

httplaserykvalitneczimagestext_25_zakladyoptiky1odrazne_hranolyjpg

Viz dichroickeacute zrcadlo u fluorescenčniacuteho mikroskopu

Chod paprsků v binokulaacuterniacutem tubusu

Pazourek 1975

Nikol = hranol z islandskeacuteho vaacutepence

rarr polarizace světla

Dvojlomnyacute vaacutepencovyacute

krystal

ř ndash paprsek řaacutednyacute (zanikaacute na začerněneacute ploše)

mř ndash paprsek mimořaacutednyacute (lineaacuterně polarizovanyacute

využit k osvětleniacute)

začerněnaacute plocha

Nikol

Pazourek 1975

vzduchovaacute štěrbina

- rychlost světla je

v různyacutech směrech různaacute

- uacutehel paprsku řaacutedneacuteho a

mimořaacutedneacuteho je odlišnyacute

(u Vikingů - slunečniacute kaacutemen

soacutelarsteinn)

Chod paprsků ve světlovodneacutem vlaacuteknu

Princip uacuteplnyacute odraz paprsku

- uvnitř skleněneacuteho vlaacutekna je opticky hustšiacute prostřediacute

- nutnost dostatečně silneacuteho světelneacuteho zdroje

Světlovodnaacute vlaacutekna

Pazourek 1975

Širokeacute využitiacute v praxi optickeacute kabely ndash přenos signaacutelů ve sdělovaciacute technice

světlovody umožňujiacuteciacute veacutest denniacute světlo vedeniacute světla u stereolup endoskopů hellip

Page 39: Světelná a elektronová mikroskopie...(AMF – Atomic Force Miroscope) - skenování povrchu materiálu pomocí hrotu zavěšeném na pružném výkyvném raménku, který je přitahován

Vlnoveacute deacutelky světla a relativniacute citlivost oka

Murphy DB Davidson MW (2013) Fundamentals of Light Microscopy and Electronic

Imaging Willey-Blackwell Published 2013 by John Wiley amp Sons Inc Hoboken New Jersey

= zrakovyacute pigment citlivyacute na

světlo nachaacutezejiacuteciacute se v tyčinkaacutech Jodopsin = zrakovyacute pigment citlivyacute na

barvu nachaacutezejiacuteciacute se v čiacutepciacutech

S v ě t l o

Duaacutelniacute charakter světla ndash vlněniacute i proud čaacutestic (fotonů)

Vlnovyacute model světla

vlna elektrickaacute a magnetickaacute (elektromagnetickaacute vlna je tvořena oscilujiacuteciacutem elektrickyacutem a

magnetickyacutem polem na sebe kolmyacutech a nesouciacutech vpřed energii)

Pro uacutečinky světla v mikroskopu je důležitaacute vlna elektrickaacute

= přiacutečneacute vlněniacute

postupneacute kmitaacuteniacute

jednotlivyacutech vedle sebe

ležiacuteciacutech bodů

Scheacutema světla jako elektromagnetickeacute vlny

Obr httpwwwprosoundwebcomarticleprintinvaders_from_

outer_space_electromagnetic_radiation_interference

λ - vlnovaacute deacutelka

(v oblasti svět zaacuteřeniacute

v rozmeziacute od 380 do 780 nm)

určuje barvu světla

a - amplituda

nejvyššiacute hodnota

určuje intenzitu světla

Z hlediska vlnoveacute deacutelky rozlišujeme

polychromatickeacute x monochromatickeacute světlo (selekce pomociacute barevnyacutech filtrů rarr jednotnaacute vlnovaacute deacutelka světlo zeleneacute červeneacute hellip)

Elektrickaacute vlna - sinusoida

Charakterizovaacutena dvěma veličinami

Pazourek 1975

Vlastnosti světla

Rovnoměrneacute šiacuteřeniacute světla ze zaacuteřiacuteciacuteho bodu na všechny strany rarr vlnovaacute plocha tvaru koule

Paprsek ndash směr kteryacutem se vlněniacute šiacuteřiacute a kteryacute je kolmyacute

na vlnoplochu

Pazourek 1975

- paprsek nepolarizovanyacute (A C) ndash kmitaacute v každeacutem

miacutestě a v průběhu času ve všech možnyacutech směrech

kolmyacutech na směr šiacuteřeniacute paprsku

- paprsek polarizovanyacute (B D1 D2) - kmitaacute v jedneacute

rovině přičemž rovina kmitů (vlněniacute) jednoho z nich je

kolmaacute k rovině kmitů druheacuteho

Pazourek 1975

Polarizovaneacute světlo viz

httpswwwyoutubecomwatchv=gP751qpm4n4

Murphy DB Davidson MW (2013) Fundamentals of Light Microscopy and

Electronic Imaging Jonh Wkiley amp Sons Inc Hoboken New Jersey

Osm různyacutech vlnovyacutech forem světla (znaacutezorňujiacuteciacutech různou kvalitu světla)

Odraz a lom světelnyacutech paprsků

v prostřediacutech různeacute hustoty

Důležitaacute charakteristika prostřediacute

index lomu ( n ) (= optickaacute hustota prostřediacute)

c = rychlost světla ve vakuu (stejnaacute pro všechny λ )

v = rychlost světla určiteacute vlnoveacute deacutelky ve zkoumaneacute laacutetce

c

n =

v

zde absolutniacute index lomu

(bezrozměrnaacute fyzikaacutelniacute veličina jeho jednotka je 1)

Rychlost světla (c) určiteacute vlnoveacute

deacutelky v různyacutech prostřediacutech

c ve vakuu

= 300 000 kms

Index lomu (n) některyacutech laacutetek

vzduch (vakuum) helliphellip 100 (vzduch 10002718)

voda helliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 133

plexisklo helliphelliphelliphelliphelliphellip 140 ndash 152

křemenneacute sklo helliphellip hellip 145 (čočka z křemene z Ninive ndash 7 stol přnl)

běžneacute sklo helliphelliphelliphelliphellip 151

cedrovyacute olej helliphelliphelliphelliphellip 151

imerzniacute olej Olympus hellip 1516 pro fluorescenci 1404

kanadskyacute balzaacutem helliphellip 150

krystal NaCl helliphelliphelliphellip 154

korunoveacute sklo helliphelliphelliphellip 145 ndash 156 (sodno-draselneacute bezolovnateacute)

flintoveacute sklo helliphelliphelliphellip 162 ndash 180 (olovnateacute)

diamant helliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 242

Index lomu je vždy většiacute než 100

očniacute čočka hellip 1406

sklivec helliphelliphellip 1336

Odraz světla rovnyacutem zrcadlem (reflexe)

Zaacutekony

1 Paprsek dopadajiacuteciacute kolmice dopadu a paprsek odraženyacute

ležiacute v jedneacute rovině

2 Uacutehel odrazu se rovnaacute uacutehlu dopadu

Odraz a lom paprsku

k

Důležiteacute pro mikroskopii (astronomii)

- neniacute zaacutevislost na vlnoveacute deacutelce světla (λ)

- na rozdiacutel od lomu paprsků se světelneacute

paprsky se odraacutežejiacute stejně

Pazourek 1975

Zaacutekony

1 Paprsek dopadajiacuteciacute kolmice lomu a paprsek lomenyacute ležiacute v teacuteže rovině

Lom světla (refrakce)

2 Při přechodu z prostřediacute opticky řidšiacuteho do prostřediacute opticky hustšiacuteho se paprsek laacuteme ke kolmici (A)

a z prostřediacute opticky hustšiacuteho

do prostřediacute opticky řidšiacuteho

se laacuteme od kolmice (B)

(C a D) ndash uacuteplnyacute odraz při tzv

mezniacutem uacutehlu dopadu paprsku

v přiacutepadě lomu od kolmice (B)

(viz Nikol odrazneacute hranoly světlovodneacute vlaacutekno nebo fluorescenčniacute metoda TIRFM ndash totaacutelniacute odraz exitačniacuteho zaacuteřeniacute)

Pazourek 1975

Svatyacute Kryštof od

švyacutecarskeacuteho maliacuteře

Konrada Witze (kolem 1400ndash1446)

Witz byl jedniacutem z prvniacutech

maliacuteřů kteryacute namaloval

přesnyacute způsob odrazu

světla na vodě

Disperze (rozklad) světla

= důsledek zaacutevislosti rychlosti světla v laacutetkaacutech na frekvenci světla

(λ = c f)

světlo různyacutech barev (λ)

se laacuteme různě

(červeneacute se lomiacute meacuteně než modreacute)

Přiacuteklad disperze (rozkladu) světla

Primaacuterniacute a sekundaacuterniacute duha Severniacute Čechy Foto Pavla Vaacutelovaacute 2010

D u h a

Jeden z mnoha

optickyacutech

jevů (fotometeorů)

v atmosfeacuteře

Rok 312 nl - před bitvou byzantskeacuteho ciacutesaře Konstantina I (272-337) s

konkurenčniacutem ciacutesařem Maxentiem u bran Řiacutema (tzv bitva u Milvijskeacuteho mostu) se

na obloze objevily tři zaacuteřiacuteciacute křiacuteže (halovyacute sloup parheacutelia a parhelickyacute oblouk)

Konstantin bitvu proti přesile vyhraacutel sjednotil řiacuteši a povolil v niacute vyznaacutevat křesťanstviacute

Maleacute halo (22deg) (viz 1) vedlejšiacute slunce (2) a horniacute a dolniacute halovyacute sloup (3)

vznikajiacuteciacute odrazem a lomem světelnyacutech paprsků na krystalciacutech ledu

Lom světla a dějiny

httptmagazineblogsnytimescom20121126halo-effect_r=0

1

3

2 2

3

Ohyb (difrakce) a interference

světla

Foto Pavla Vaacutelovaacute Bukovany 2015 Rozklad světla na CD - světlo žaacuterovky

Rozklad biacuteleacuteho světla na mřiacutežce

Pevnost poznaacuteniacute Olomouc 2015

Foto Pavla Vaacutelovaacute Olomouc 2015

Ohyb (difrakce) a interference

světla

Ohyb (difrakce) a interference

Difrakčniacute obrazec obsahuje světlaacute a tmavaacute miacutesta kteraacute se

střiacutedajiacute - světlaacute miacutesta nazyacutevaacuteme maxima a tmavaacute minima

Interference světla = sklaacutedaacuteniacute světelnyacutech vln

Předpoklad světlo musiacute byacutet koherentniacute

Podmiacutenka koherence

- paprsky musiacute miacutet stejnou frekvenci

- paprsky musiacute byacutet navzaacutejem rovnoběžneacute

- paprsky musiacute miacutet na sobě nezaacutevislyacute draacutehovyacute (faacutezovyacute) rozdiacutel

Vznik koherentniacuteho zaacuteřeniacute

rozděleniacutem světla

- buď odrazem pomociacute zrcadel

- nebo lomem pomociacute hranolů

Foto Pavla Vaacutelovaacute Praha 151 2016

Interference světla

stejnyacute způsob vlněniacute

(faacuteze je vzaacutejemně posunuta o sudeacute

naacutesobky λ2)

vznik interferenčniacuteho maxima

(konstruktivniacute interference)

Interference světla

asynchronniacute vlněniacute

(vzaacutejemně posunutaacute faacuteze

o licheacute naacutesobky λ2)

vznik interferenčniacuteho

minima

(destruktivniacute interference)

rarr zaacuteřeniacute zanikaacute

rarr zeslabeniacute zaacuteřeniacute

Interference dvou vrstev elektromagnetickeacuteho zaacuteřeniacute u Slunce

Čočky ndash zaacutekladniacute součaacutesti

mikroskopu

= průhlednaacute (nejčastěji skleněnaacute) tělesa omezenaacute

vypuklyacutemi nebo vydutyacutemi kulovityacutemi plochami lišiacuteciacute se od sveacuteho okoliacute odlišnyacutem indexem lomu

Zaacutekladniacute typy čoček

spojky (vypukleacute neboli konvexniacute)

rozptylky (vyduteacute konkaacutevniacute)

Pazourek 1975

Optickaacute osa ( o ) prochaacuteziacute středem čočky

Ohnisko ( F ) - bod do ktereacuteho se soustřeďujiacute paprsky probiacutehajiacuteciacute rovnoběžně s optickou osou

- 2 ohniska - předmětoveacute ohnisko ( F )

obrazoveacute ohnisko ( Facute )

- ohniskovaacute vzdaacutelenost ( f )

vzdaacutelenost ohniska od hlavniacute roviny proloženeacute středem čočky

- dvojnaacutesobnaacute ohniskovaacute vzdaacutelenost ( P Pacute )

Obrazovyacute prostor - prostor v němž vznikaacute obraz

Důležiteacute charakteristiky čočky

f

o

hlavniacute rovina

Pazourek 1975

V přiacutepadě velmi tenkeacute čočky

bull Obraz za optickou soustavou

rarr obraz s k u t e č n yacute

Skutečnyacute obraz je možneacute zachytit na stiacuteniacutetko

nebo na fotografickou desku neskutečnyacute nikoliv

bull Obraz před soustavou

rarr obraz n e s k u t e č n yacute (zdaacutenlivyacute virtuaacutelniacute)

Obraz skutečnyacute a neskutečnyacute

A ndash předmět Aacute- obraz předmětu

Upraveno podle Pazourek 1975

Francouz Augustin Jean Fresnel (1788-1827) [frenel]

Fresnelova čočka [frenelova]

- plochyacute tvar (zachovaacuteny pouze čaacutesti ktereacute měniacute směr chodu světelnyacutech paprsků)

- vyacuterazně nižšiacute hmotnost při zachovaacuteniacute podobnyacutech parametrů

Využitiacute infračidla pohybu semafory světlomety (majaacuteky) a reflektory (světla aut

divadelniacutech a filmovyacutech osvětlovaciacutech zařiacutezeniacute) zpětneacute projektory slunečniacute kolektory

na zaacutekladě tohoto principu takeacute vyacuteroba 3D displejů k mobilniacutem telefonům a televiziacutem

httpwwwmffcuniczverejnostzpravicky03_lupahtm

čočka na majaacuteku

Čočky v budoucnosti

Pokus o vyacuterobu tzv dokonaleacute čočky

Prototyp - upraveneacute tzv Maxwellovo rybiacute oko

- paprsky světla se v něm pohybujiacute po kružniciacutech a

na rozdiacutel od běžnyacutech čoček se při zobrazeniacute využijiacute

všechny paprsky

- superčočky využiacutevajiacute geometrie k tomu aby se světlo

soustředilo do oblasti menšiacute než je jeho vlnovaacute deacutelka

(zatiacutem se neviacute jak do čočky vyhovujiacuteciacutem způsobem

doveacutest světlo)

Využitiacute v budoucnu

mimo jineacute v pozorovaacuteniacute živyacutech buněk při velkeacutem zvětšeniacute

pomociacute obyčejneacuteho světla bez jejich narušeniacute

Viacutece viz Plaacutešek J Mikroskopy se superčočkami httpwwwvesmircz | Vesmiacuter 91 531 zaacuteřiacute 2012

Hranoly

- doplňky optickyacutech systeacutemů

- většinou tvar rovnostranneacuteho trojuacutehelniacuteka

- využiacutevajiacute uacuteplneacuteho odrazu

Funkce

- změna chodu paprsků pod různyacutemi uacutehly

- rozdvojeniacute paprsků

Pazourek 1975

Různeacute typy odraznyacutech hranolů

Hranoly

Různeacute typy hranolů

httplaserykvalitneczimagestext_25_zakladyoptiky1odrazne_hranolyjpg

Viz dichroickeacute zrcadlo u fluorescenčniacuteho mikroskopu

Chod paprsků v binokulaacuterniacutem tubusu

Pazourek 1975

Nikol = hranol z islandskeacuteho vaacutepence

rarr polarizace světla

Dvojlomnyacute vaacutepencovyacute

krystal

ř ndash paprsek řaacutednyacute (zanikaacute na začerněneacute ploše)

mř ndash paprsek mimořaacutednyacute (lineaacuterně polarizovanyacute

využit k osvětleniacute)

začerněnaacute plocha

Nikol

Pazourek 1975

vzduchovaacute štěrbina

- rychlost světla je

v různyacutech směrech různaacute

- uacutehel paprsku řaacutedneacuteho a

mimořaacutedneacuteho je odlišnyacute

(u Vikingů - slunečniacute kaacutemen

soacutelarsteinn)

Chod paprsků ve světlovodneacutem vlaacuteknu

Princip uacuteplnyacute odraz paprsku

- uvnitř skleněneacuteho vlaacutekna je opticky hustšiacute prostřediacute

- nutnost dostatečně silneacuteho světelneacuteho zdroje

Světlovodnaacute vlaacutekna

Pazourek 1975

Širokeacute využitiacute v praxi optickeacute kabely ndash přenos signaacutelů ve sdělovaciacute technice

světlovody umožňujiacuteciacute veacutest denniacute světlo vedeniacute světla u stereolup endoskopů hellip

Page 40: Světelná a elektronová mikroskopie...(AMF – Atomic Force Miroscope) - skenování povrchu materiálu pomocí hrotu zavěšeném na pružném výkyvném raménku, který je přitahován

S v ě t l o

Duaacutelniacute charakter světla ndash vlněniacute i proud čaacutestic (fotonů)

Vlnovyacute model světla

vlna elektrickaacute a magnetickaacute (elektromagnetickaacute vlna je tvořena oscilujiacuteciacutem elektrickyacutem a

magnetickyacutem polem na sebe kolmyacutech a nesouciacutech vpřed energii)

Pro uacutečinky světla v mikroskopu je důležitaacute vlna elektrickaacute

= přiacutečneacute vlněniacute

postupneacute kmitaacuteniacute

jednotlivyacutech vedle sebe

ležiacuteciacutech bodů

Scheacutema světla jako elektromagnetickeacute vlny

Obr httpwwwprosoundwebcomarticleprintinvaders_from_

outer_space_electromagnetic_radiation_interference

λ - vlnovaacute deacutelka

(v oblasti svět zaacuteřeniacute

v rozmeziacute od 380 do 780 nm)

určuje barvu světla

a - amplituda

nejvyššiacute hodnota

určuje intenzitu světla

Z hlediska vlnoveacute deacutelky rozlišujeme

polychromatickeacute x monochromatickeacute světlo (selekce pomociacute barevnyacutech filtrů rarr jednotnaacute vlnovaacute deacutelka světlo zeleneacute červeneacute hellip)

Elektrickaacute vlna - sinusoida

Charakterizovaacutena dvěma veličinami

Pazourek 1975

Vlastnosti světla

Rovnoměrneacute šiacuteřeniacute světla ze zaacuteřiacuteciacuteho bodu na všechny strany rarr vlnovaacute plocha tvaru koule

Paprsek ndash směr kteryacutem se vlněniacute šiacuteřiacute a kteryacute je kolmyacute

na vlnoplochu

Pazourek 1975

- paprsek nepolarizovanyacute (A C) ndash kmitaacute v každeacutem

miacutestě a v průběhu času ve všech možnyacutech směrech

kolmyacutech na směr šiacuteřeniacute paprsku

- paprsek polarizovanyacute (B D1 D2) - kmitaacute v jedneacute

rovině přičemž rovina kmitů (vlněniacute) jednoho z nich je

kolmaacute k rovině kmitů druheacuteho

Pazourek 1975

Polarizovaneacute světlo viz

httpswwwyoutubecomwatchv=gP751qpm4n4

Murphy DB Davidson MW (2013) Fundamentals of Light Microscopy and

Electronic Imaging Jonh Wkiley amp Sons Inc Hoboken New Jersey

Osm různyacutech vlnovyacutech forem světla (znaacutezorňujiacuteciacutech různou kvalitu světla)

Odraz a lom světelnyacutech paprsků

v prostřediacutech různeacute hustoty

Důležitaacute charakteristika prostřediacute

index lomu ( n ) (= optickaacute hustota prostřediacute)

c = rychlost světla ve vakuu (stejnaacute pro všechny λ )

v = rychlost světla určiteacute vlnoveacute deacutelky ve zkoumaneacute laacutetce

c

n =

v

zde absolutniacute index lomu

(bezrozměrnaacute fyzikaacutelniacute veličina jeho jednotka je 1)

Rychlost světla (c) určiteacute vlnoveacute

deacutelky v různyacutech prostřediacutech

c ve vakuu

= 300 000 kms

Index lomu (n) některyacutech laacutetek

vzduch (vakuum) helliphellip 100 (vzduch 10002718)

voda helliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 133

plexisklo helliphelliphelliphelliphelliphellip 140 ndash 152

křemenneacute sklo helliphellip hellip 145 (čočka z křemene z Ninive ndash 7 stol přnl)

běžneacute sklo helliphelliphelliphelliphellip 151

cedrovyacute olej helliphelliphelliphelliphellip 151

imerzniacute olej Olympus hellip 1516 pro fluorescenci 1404

kanadskyacute balzaacutem helliphellip 150

krystal NaCl helliphelliphelliphellip 154

korunoveacute sklo helliphelliphelliphellip 145 ndash 156 (sodno-draselneacute bezolovnateacute)

flintoveacute sklo helliphelliphelliphellip 162 ndash 180 (olovnateacute)

diamant helliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 242

Index lomu je vždy většiacute než 100

očniacute čočka hellip 1406

sklivec helliphelliphellip 1336

Odraz světla rovnyacutem zrcadlem (reflexe)

Zaacutekony

1 Paprsek dopadajiacuteciacute kolmice dopadu a paprsek odraženyacute

ležiacute v jedneacute rovině

2 Uacutehel odrazu se rovnaacute uacutehlu dopadu

Odraz a lom paprsku

k

Důležiteacute pro mikroskopii (astronomii)

- neniacute zaacutevislost na vlnoveacute deacutelce světla (λ)

- na rozdiacutel od lomu paprsků se světelneacute

paprsky se odraacutežejiacute stejně

Pazourek 1975

Zaacutekony

1 Paprsek dopadajiacuteciacute kolmice lomu a paprsek lomenyacute ležiacute v teacuteže rovině

Lom světla (refrakce)

2 Při přechodu z prostřediacute opticky řidšiacuteho do prostřediacute opticky hustšiacuteho se paprsek laacuteme ke kolmici (A)

a z prostřediacute opticky hustšiacuteho

do prostřediacute opticky řidšiacuteho

se laacuteme od kolmice (B)

(C a D) ndash uacuteplnyacute odraz při tzv

mezniacutem uacutehlu dopadu paprsku

v přiacutepadě lomu od kolmice (B)

(viz Nikol odrazneacute hranoly světlovodneacute vlaacutekno nebo fluorescenčniacute metoda TIRFM ndash totaacutelniacute odraz exitačniacuteho zaacuteřeniacute)

Pazourek 1975

Svatyacute Kryštof od

švyacutecarskeacuteho maliacuteře

Konrada Witze (kolem 1400ndash1446)

Witz byl jedniacutem z prvniacutech

maliacuteřů kteryacute namaloval

přesnyacute způsob odrazu

světla na vodě

Disperze (rozklad) světla

= důsledek zaacutevislosti rychlosti světla v laacutetkaacutech na frekvenci světla

(λ = c f)

světlo různyacutech barev (λ)

se laacuteme různě

(červeneacute se lomiacute meacuteně než modreacute)

Přiacuteklad disperze (rozkladu) světla

Primaacuterniacute a sekundaacuterniacute duha Severniacute Čechy Foto Pavla Vaacutelovaacute 2010

D u h a

Jeden z mnoha

optickyacutech

jevů (fotometeorů)

v atmosfeacuteře

Rok 312 nl - před bitvou byzantskeacuteho ciacutesaře Konstantina I (272-337) s

konkurenčniacutem ciacutesařem Maxentiem u bran Řiacutema (tzv bitva u Milvijskeacuteho mostu) se

na obloze objevily tři zaacuteřiacuteciacute křiacuteže (halovyacute sloup parheacutelia a parhelickyacute oblouk)

Konstantin bitvu proti přesile vyhraacutel sjednotil řiacuteši a povolil v niacute vyznaacutevat křesťanstviacute

Maleacute halo (22deg) (viz 1) vedlejšiacute slunce (2) a horniacute a dolniacute halovyacute sloup (3)

vznikajiacuteciacute odrazem a lomem světelnyacutech paprsků na krystalciacutech ledu

Lom světla a dějiny

httptmagazineblogsnytimescom20121126halo-effect_r=0

1

3

2 2

3

Ohyb (difrakce) a interference

světla

Foto Pavla Vaacutelovaacute Bukovany 2015 Rozklad světla na CD - světlo žaacuterovky

Rozklad biacuteleacuteho světla na mřiacutežce

Pevnost poznaacuteniacute Olomouc 2015

Foto Pavla Vaacutelovaacute Olomouc 2015

Ohyb (difrakce) a interference

světla

Ohyb (difrakce) a interference

Difrakčniacute obrazec obsahuje světlaacute a tmavaacute miacutesta kteraacute se

střiacutedajiacute - světlaacute miacutesta nazyacutevaacuteme maxima a tmavaacute minima

Interference světla = sklaacutedaacuteniacute světelnyacutech vln

Předpoklad světlo musiacute byacutet koherentniacute

Podmiacutenka koherence

- paprsky musiacute miacutet stejnou frekvenci

- paprsky musiacute byacutet navzaacutejem rovnoběžneacute

- paprsky musiacute miacutet na sobě nezaacutevislyacute draacutehovyacute (faacutezovyacute) rozdiacutel

Vznik koherentniacuteho zaacuteřeniacute

rozděleniacutem světla

- buď odrazem pomociacute zrcadel

- nebo lomem pomociacute hranolů

Foto Pavla Vaacutelovaacute Praha 151 2016

Interference světla

stejnyacute způsob vlněniacute

(faacuteze je vzaacutejemně posunuta o sudeacute

naacutesobky λ2)

vznik interferenčniacuteho maxima

(konstruktivniacute interference)

Interference světla

asynchronniacute vlněniacute

(vzaacutejemně posunutaacute faacuteze

o licheacute naacutesobky λ2)

vznik interferenčniacuteho

minima

(destruktivniacute interference)

rarr zaacuteřeniacute zanikaacute

rarr zeslabeniacute zaacuteřeniacute

Interference dvou vrstev elektromagnetickeacuteho zaacuteřeniacute u Slunce

Čočky ndash zaacutekladniacute součaacutesti

mikroskopu

= průhlednaacute (nejčastěji skleněnaacute) tělesa omezenaacute

vypuklyacutemi nebo vydutyacutemi kulovityacutemi plochami lišiacuteciacute se od sveacuteho okoliacute odlišnyacutem indexem lomu

Zaacutekladniacute typy čoček

spojky (vypukleacute neboli konvexniacute)

rozptylky (vyduteacute konkaacutevniacute)

Pazourek 1975

Optickaacute osa ( o ) prochaacuteziacute středem čočky

Ohnisko ( F ) - bod do ktereacuteho se soustřeďujiacute paprsky probiacutehajiacuteciacute rovnoběžně s optickou osou

- 2 ohniska - předmětoveacute ohnisko ( F )

obrazoveacute ohnisko ( Facute )

- ohniskovaacute vzdaacutelenost ( f )

vzdaacutelenost ohniska od hlavniacute roviny proloženeacute středem čočky

- dvojnaacutesobnaacute ohniskovaacute vzdaacutelenost ( P Pacute )

Obrazovyacute prostor - prostor v němž vznikaacute obraz

Důležiteacute charakteristiky čočky

f

o

hlavniacute rovina

Pazourek 1975

V přiacutepadě velmi tenkeacute čočky

bull Obraz za optickou soustavou

rarr obraz s k u t e č n yacute

Skutečnyacute obraz je možneacute zachytit na stiacuteniacutetko

nebo na fotografickou desku neskutečnyacute nikoliv

bull Obraz před soustavou

rarr obraz n e s k u t e č n yacute (zdaacutenlivyacute virtuaacutelniacute)

Obraz skutečnyacute a neskutečnyacute

A ndash předmět Aacute- obraz předmětu

Upraveno podle Pazourek 1975

Francouz Augustin Jean Fresnel (1788-1827) [frenel]

Fresnelova čočka [frenelova]

- plochyacute tvar (zachovaacuteny pouze čaacutesti ktereacute měniacute směr chodu světelnyacutech paprsků)

- vyacuterazně nižšiacute hmotnost při zachovaacuteniacute podobnyacutech parametrů

Využitiacute infračidla pohybu semafory světlomety (majaacuteky) a reflektory (světla aut

divadelniacutech a filmovyacutech osvětlovaciacutech zařiacutezeniacute) zpětneacute projektory slunečniacute kolektory

na zaacutekladě tohoto principu takeacute vyacuteroba 3D displejů k mobilniacutem telefonům a televiziacutem

httpwwwmffcuniczverejnostzpravicky03_lupahtm

čočka na majaacuteku

Čočky v budoucnosti

Pokus o vyacuterobu tzv dokonaleacute čočky

Prototyp - upraveneacute tzv Maxwellovo rybiacute oko

- paprsky světla se v něm pohybujiacute po kružniciacutech a

na rozdiacutel od běžnyacutech čoček se při zobrazeniacute využijiacute

všechny paprsky

- superčočky využiacutevajiacute geometrie k tomu aby se světlo

soustředilo do oblasti menšiacute než je jeho vlnovaacute deacutelka

(zatiacutem se neviacute jak do čočky vyhovujiacuteciacutem způsobem

doveacutest světlo)

Využitiacute v budoucnu

mimo jineacute v pozorovaacuteniacute živyacutech buněk při velkeacutem zvětšeniacute

pomociacute obyčejneacuteho světla bez jejich narušeniacute

Viacutece viz Plaacutešek J Mikroskopy se superčočkami httpwwwvesmircz | Vesmiacuter 91 531 zaacuteřiacute 2012

Hranoly

- doplňky optickyacutech systeacutemů

- většinou tvar rovnostranneacuteho trojuacutehelniacuteka

- využiacutevajiacute uacuteplneacuteho odrazu

Funkce

- změna chodu paprsků pod různyacutemi uacutehly

- rozdvojeniacute paprsků

Pazourek 1975

Různeacute typy odraznyacutech hranolů

Hranoly

Různeacute typy hranolů

httplaserykvalitneczimagestext_25_zakladyoptiky1odrazne_hranolyjpg

Viz dichroickeacute zrcadlo u fluorescenčniacuteho mikroskopu

Chod paprsků v binokulaacuterniacutem tubusu

Pazourek 1975

Nikol = hranol z islandskeacuteho vaacutepence

rarr polarizace světla

Dvojlomnyacute vaacutepencovyacute

krystal

ř ndash paprsek řaacutednyacute (zanikaacute na začerněneacute ploše)

mř ndash paprsek mimořaacutednyacute (lineaacuterně polarizovanyacute

využit k osvětleniacute)

začerněnaacute plocha

Nikol

Pazourek 1975

vzduchovaacute štěrbina

- rychlost světla je

v různyacutech směrech různaacute

- uacutehel paprsku řaacutedneacuteho a

mimořaacutedneacuteho je odlišnyacute

(u Vikingů - slunečniacute kaacutemen

soacutelarsteinn)

Chod paprsků ve světlovodneacutem vlaacuteknu

Princip uacuteplnyacute odraz paprsku

- uvnitř skleněneacuteho vlaacutekna je opticky hustšiacute prostřediacute

- nutnost dostatečně silneacuteho světelneacuteho zdroje

Světlovodnaacute vlaacutekna

Pazourek 1975

Širokeacute využitiacute v praxi optickeacute kabely ndash přenos signaacutelů ve sdělovaciacute technice

světlovody umožňujiacuteciacute veacutest denniacute světlo vedeniacute světla u stereolup endoskopů hellip

Page 41: Světelná a elektronová mikroskopie...(AMF – Atomic Force Miroscope) - skenování povrchu materiálu pomocí hrotu zavěšeném na pružném výkyvném raménku, který je přitahován

λ - vlnovaacute deacutelka

(v oblasti svět zaacuteřeniacute

v rozmeziacute od 380 do 780 nm)

určuje barvu světla

a - amplituda

nejvyššiacute hodnota

určuje intenzitu světla

Z hlediska vlnoveacute deacutelky rozlišujeme

polychromatickeacute x monochromatickeacute světlo (selekce pomociacute barevnyacutech filtrů rarr jednotnaacute vlnovaacute deacutelka světlo zeleneacute červeneacute hellip)

Elektrickaacute vlna - sinusoida

Charakterizovaacutena dvěma veličinami

Pazourek 1975

Vlastnosti světla

Rovnoměrneacute šiacuteřeniacute světla ze zaacuteřiacuteciacuteho bodu na všechny strany rarr vlnovaacute plocha tvaru koule

Paprsek ndash směr kteryacutem se vlněniacute šiacuteřiacute a kteryacute je kolmyacute

na vlnoplochu

Pazourek 1975

- paprsek nepolarizovanyacute (A C) ndash kmitaacute v každeacutem

miacutestě a v průběhu času ve všech možnyacutech směrech

kolmyacutech na směr šiacuteřeniacute paprsku

- paprsek polarizovanyacute (B D1 D2) - kmitaacute v jedneacute

rovině přičemž rovina kmitů (vlněniacute) jednoho z nich je

kolmaacute k rovině kmitů druheacuteho

Pazourek 1975

Polarizovaneacute světlo viz

httpswwwyoutubecomwatchv=gP751qpm4n4

Murphy DB Davidson MW (2013) Fundamentals of Light Microscopy and

Electronic Imaging Jonh Wkiley amp Sons Inc Hoboken New Jersey

Osm různyacutech vlnovyacutech forem světla (znaacutezorňujiacuteciacutech různou kvalitu světla)

Odraz a lom světelnyacutech paprsků

v prostřediacutech různeacute hustoty

Důležitaacute charakteristika prostřediacute

index lomu ( n ) (= optickaacute hustota prostřediacute)

c = rychlost světla ve vakuu (stejnaacute pro všechny λ )

v = rychlost světla určiteacute vlnoveacute deacutelky ve zkoumaneacute laacutetce

c

n =

v

zde absolutniacute index lomu

(bezrozměrnaacute fyzikaacutelniacute veličina jeho jednotka je 1)

Rychlost světla (c) určiteacute vlnoveacute

deacutelky v různyacutech prostřediacutech

c ve vakuu

= 300 000 kms

Index lomu (n) některyacutech laacutetek

vzduch (vakuum) helliphellip 100 (vzduch 10002718)

voda helliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 133

plexisklo helliphelliphelliphelliphelliphellip 140 ndash 152

křemenneacute sklo helliphellip hellip 145 (čočka z křemene z Ninive ndash 7 stol přnl)

běžneacute sklo helliphelliphelliphelliphellip 151

cedrovyacute olej helliphelliphelliphelliphellip 151

imerzniacute olej Olympus hellip 1516 pro fluorescenci 1404

kanadskyacute balzaacutem helliphellip 150

krystal NaCl helliphelliphelliphellip 154

korunoveacute sklo helliphelliphelliphellip 145 ndash 156 (sodno-draselneacute bezolovnateacute)

flintoveacute sklo helliphelliphelliphellip 162 ndash 180 (olovnateacute)

diamant helliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 242

Index lomu je vždy většiacute než 100

očniacute čočka hellip 1406

sklivec helliphelliphellip 1336

Odraz světla rovnyacutem zrcadlem (reflexe)

Zaacutekony

1 Paprsek dopadajiacuteciacute kolmice dopadu a paprsek odraženyacute

ležiacute v jedneacute rovině

2 Uacutehel odrazu se rovnaacute uacutehlu dopadu

Odraz a lom paprsku

k

Důležiteacute pro mikroskopii (astronomii)

- neniacute zaacutevislost na vlnoveacute deacutelce světla (λ)

- na rozdiacutel od lomu paprsků se světelneacute

paprsky se odraacutežejiacute stejně

Pazourek 1975

Zaacutekony

1 Paprsek dopadajiacuteciacute kolmice lomu a paprsek lomenyacute ležiacute v teacuteže rovině

Lom světla (refrakce)

2 Při přechodu z prostřediacute opticky řidšiacuteho do prostřediacute opticky hustšiacuteho se paprsek laacuteme ke kolmici (A)

a z prostřediacute opticky hustšiacuteho

do prostřediacute opticky řidšiacuteho

se laacuteme od kolmice (B)

(C a D) ndash uacuteplnyacute odraz při tzv

mezniacutem uacutehlu dopadu paprsku

v přiacutepadě lomu od kolmice (B)

(viz Nikol odrazneacute hranoly světlovodneacute vlaacutekno nebo fluorescenčniacute metoda TIRFM ndash totaacutelniacute odraz exitačniacuteho zaacuteřeniacute)

Pazourek 1975

Svatyacute Kryštof od

švyacutecarskeacuteho maliacuteře

Konrada Witze (kolem 1400ndash1446)

Witz byl jedniacutem z prvniacutech

maliacuteřů kteryacute namaloval

přesnyacute způsob odrazu

světla na vodě

Disperze (rozklad) světla

= důsledek zaacutevislosti rychlosti světla v laacutetkaacutech na frekvenci světla

(λ = c f)

světlo různyacutech barev (λ)

se laacuteme různě

(červeneacute se lomiacute meacuteně než modreacute)

Přiacuteklad disperze (rozkladu) světla

Primaacuterniacute a sekundaacuterniacute duha Severniacute Čechy Foto Pavla Vaacutelovaacute 2010

D u h a

Jeden z mnoha

optickyacutech

jevů (fotometeorů)

v atmosfeacuteře

Rok 312 nl - před bitvou byzantskeacuteho ciacutesaře Konstantina I (272-337) s

konkurenčniacutem ciacutesařem Maxentiem u bran Řiacutema (tzv bitva u Milvijskeacuteho mostu) se

na obloze objevily tři zaacuteřiacuteciacute křiacuteže (halovyacute sloup parheacutelia a parhelickyacute oblouk)

Konstantin bitvu proti přesile vyhraacutel sjednotil řiacuteši a povolil v niacute vyznaacutevat křesťanstviacute

Maleacute halo (22deg) (viz 1) vedlejšiacute slunce (2) a horniacute a dolniacute halovyacute sloup (3)

vznikajiacuteciacute odrazem a lomem světelnyacutech paprsků na krystalciacutech ledu

Lom světla a dějiny

httptmagazineblogsnytimescom20121126halo-effect_r=0

1

3

2 2

3

Ohyb (difrakce) a interference

světla

Foto Pavla Vaacutelovaacute Bukovany 2015 Rozklad světla na CD - světlo žaacuterovky

Rozklad biacuteleacuteho světla na mřiacutežce

Pevnost poznaacuteniacute Olomouc 2015

Foto Pavla Vaacutelovaacute Olomouc 2015

Ohyb (difrakce) a interference

světla

Ohyb (difrakce) a interference

Difrakčniacute obrazec obsahuje světlaacute a tmavaacute miacutesta kteraacute se

střiacutedajiacute - světlaacute miacutesta nazyacutevaacuteme maxima a tmavaacute minima

Interference světla = sklaacutedaacuteniacute světelnyacutech vln

Předpoklad světlo musiacute byacutet koherentniacute

Podmiacutenka koherence

- paprsky musiacute miacutet stejnou frekvenci

- paprsky musiacute byacutet navzaacutejem rovnoběžneacute

- paprsky musiacute miacutet na sobě nezaacutevislyacute draacutehovyacute (faacutezovyacute) rozdiacutel

Vznik koherentniacuteho zaacuteřeniacute

rozděleniacutem světla

- buď odrazem pomociacute zrcadel

- nebo lomem pomociacute hranolů

Foto Pavla Vaacutelovaacute Praha 151 2016

Interference světla

stejnyacute způsob vlněniacute

(faacuteze je vzaacutejemně posunuta o sudeacute

naacutesobky λ2)

vznik interferenčniacuteho maxima

(konstruktivniacute interference)

Interference světla

asynchronniacute vlněniacute

(vzaacutejemně posunutaacute faacuteze

o licheacute naacutesobky λ2)

vznik interferenčniacuteho

minima

(destruktivniacute interference)

rarr zaacuteřeniacute zanikaacute

rarr zeslabeniacute zaacuteřeniacute

Interference dvou vrstev elektromagnetickeacuteho zaacuteřeniacute u Slunce

Čočky ndash zaacutekladniacute součaacutesti

mikroskopu

= průhlednaacute (nejčastěji skleněnaacute) tělesa omezenaacute

vypuklyacutemi nebo vydutyacutemi kulovityacutemi plochami lišiacuteciacute se od sveacuteho okoliacute odlišnyacutem indexem lomu

Zaacutekladniacute typy čoček

spojky (vypukleacute neboli konvexniacute)

rozptylky (vyduteacute konkaacutevniacute)

Pazourek 1975

Optickaacute osa ( o ) prochaacuteziacute středem čočky

Ohnisko ( F ) - bod do ktereacuteho se soustřeďujiacute paprsky probiacutehajiacuteciacute rovnoběžně s optickou osou

- 2 ohniska - předmětoveacute ohnisko ( F )

obrazoveacute ohnisko ( Facute )

- ohniskovaacute vzdaacutelenost ( f )

vzdaacutelenost ohniska od hlavniacute roviny proloženeacute středem čočky

- dvojnaacutesobnaacute ohniskovaacute vzdaacutelenost ( P Pacute )

Obrazovyacute prostor - prostor v němž vznikaacute obraz

Důležiteacute charakteristiky čočky

f

o

hlavniacute rovina

Pazourek 1975

V přiacutepadě velmi tenkeacute čočky

bull Obraz za optickou soustavou

rarr obraz s k u t e č n yacute

Skutečnyacute obraz je možneacute zachytit na stiacuteniacutetko

nebo na fotografickou desku neskutečnyacute nikoliv

bull Obraz před soustavou

rarr obraz n e s k u t e č n yacute (zdaacutenlivyacute virtuaacutelniacute)

Obraz skutečnyacute a neskutečnyacute

A ndash předmět Aacute- obraz předmětu

Upraveno podle Pazourek 1975

Francouz Augustin Jean Fresnel (1788-1827) [frenel]

Fresnelova čočka [frenelova]

- plochyacute tvar (zachovaacuteny pouze čaacutesti ktereacute měniacute směr chodu světelnyacutech paprsků)

- vyacuterazně nižšiacute hmotnost při zachovaacuteniacute podobnyacutech parametrů

Využitiacute infračidla pohybu semafory světlomety (majaacuteky) a reflektory (světla aut

divadelniacutech a filmovyacutech osvětlovaciacutech zařiacutezeniacute) zpětneacute projektory slunečniacute kolektory

na zaacutekladě tohoto principu takeacute vyacuteroba 3D displejů k mobilniacutem telefonům a televiziacutem

httpwwwmffcuniczverejnostzpravicky03_lupahtm

čočka na majaacuteku

Čočky v budoucnosti

Pokus o vyacuterobu tzv dokonaleacute čočky

Prototyp - upraveneacute tzv Maxwellovo rybiacute oko

- paprsky světla se v něm pohybujiacute po kružniciacutech a

na rozdiacutel od běžnyacutech čoček se při zobrazeniacute využijiacute

všechny paprsky

- superčočky využiacutevajiacute geometrie k tomu aby se světlo

soustředilo do oblasti menšiacute než je jeho vlnovaacute deacutelka

(zatiacutem se neviacute jak do čočky vyhovujiacuteciacutem způsobem

doveacutest světlo)

Využitiacute v budoucnu

mimo jineacute v pozorovaacuteniacute živyacutech buněk při velkeacutem zvětšeniacute

pomociacute obyčejneacuteho světla bez jejich narušeniacute

Viacutece viz Plaacutešek J Mikroskopy se superčočkami httpwwwvesmircz | Vesmiacuter 91 531 zaacuteřiacute 2012

Hranoly

- doplňky optickyacutech systeacutemů

- většinou tvar rovnostranneacuteho trojuacutehelniacuteka

- využiacutevajiacute uacuteplneacuteho odrazu

Funkce

- změna chodu paprsků pod různyacutemi uacutehly

- rozdvojeniacute paprsků

Pazourek 1975

Různeacute typy odraznyacutech hranolů

Hranoly

Různeacute typy hranolů

httplaserykvalitneczimagestext_25_zakladyoptiky1odrazne_hranolyjpg

Viz dichroickeacute zrcadlo u fluorescenčniacuteho mikroskopu

Chod paprsků v binokulaacuterniacutem tubusu

Pazourek 1975

Nikol = hranol z islandskeacuteho vaacutepence

rarr polarizace světla

Dvojlomnyacute vaacutepencovyacute

krystal

ř ndash paprsek řaacutednyacute (zanikaacute na začerněneacute ploše)

mř ndash paprsek mimořaacutednyacute (lineaacuterně polarizovanyacute

využit k osvětleniacute)

začerněnaacute plocha

Nikol

Pazourek 1975

vzduchovaacute štěrbina

- rychlost světla je

v různyacutech směrech různaacute

- uacutehel paprsku řaacutedneacuteho a

mimořaacutedneacuteho je odlišnyacute

(u Vikingů - slunečniacute kaacutemen

soacutelarsteinn)

Chod paprsků ve světlovodneacutem vlaacuteknu

Princip uacuteplnyacute odraz paprsku

- uvnitř skleněneacuteho vlaacutekna je opticky hustšiacute prostřediacute

- nutnost dostatečně silneacuteho světelneacuteho zdroje

Světlovodnaacute vlaacutekna

Pazourek 1975

Širokeacute využitiacute v praxi optickeacute kabely ndash přenos signaacutelů ve sdělovaciacute technice

světlovody umožňujiacuteciacute veacutest denniacute světlo vedeniacute světla u stereolup endoskopů hellip

Page 42: Světelná a elektronová mikroskopie...(AMF – Atomic Force Miroscope) - skenování povrchu materiálu pomocí hrotu zavěšeném na pružném výkyvném raménku, který je přitahován

Vlastnosti světla

Rovnoměrneacute šiacuteřeniacute světla ze zaacuteřiacuteciacuteho bodu na všechny strany rarr vlnovaacute plocha tvaru koule

Paprsek ndash směr kteryacutem se vlněniacute šiacuteřiacute a kteryacute je kolmyacute

na vlnoplochu

Pazourek 1975

- paprsek nepolarizovanyacute (A C) ndash kmitaacute v každeacutem

miacutestě a v průběhu času ve všech možnyacutech směrech

kolmyacutech na směr šiacuteřeniacute paprsku

- paprsek polarizovanyacute (B D1 D2) - kmitaacute v jedneacute

rovině přičemž rovina kmitů (vlněniacute) jednoho z nich je

kolmaacute k rovině kmitů druheacuteho

Pazourek 1975

Polarizovaneacute světlo viz

httpswwwyoutubecomwatchv=gP751qpm4n4

Murphy DB Davidson MW (2013) Fundamentals of Light Microscopy and

Electronic Imaging Jonh Wkiley amp Sons Inc Hoboken New Jersey

Osm různyacutech vlnovyacutech forem světla (znaacutezorňujiacuteciacutech různou kvalitu světla)

Odraz a lom světelnyacutech paprsků

v prostřediacutech různeacute hustoty

Důležitaacute charakteristika prostřediacute

index lomu ( n ) (= optickaacute hustota prostřediacute)

c = rychlost světla ve vakuu (stejnaacute pro všechny λ )

v = rychlost světla určiteacute vlnoveacute deacutelky ve zkoumaneacute laacutetce

c

n =

v

zde absolutniacute index lomu

(bezrozměrnaacute fyzikaacutelniacute veličina jeho jednotka je 1)

Rychlost světla (c) určiteacute vlnoveacute

deacutelky v různyacutech prostřediacutech

c ve vakuu

= 300 000 kms

Index lomu (n) některyacutech laacutetek

vzduch (vakuum) helliphellip 100 (vzduch 10002718)

voda helliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 133

plexisklo helliphelliphelliphelliphelliphellip 140 ndash 152

křemenneacute sklo helliphellip hellip 145 (čočka z křemene z Ninive ndash 7 stol přnl)

běžneacute sklo helliphelliphelliphelliphellip 151

cedrovyacute olej helliphelliphelliphelliphellip 151

imerzniacute olej Olympus hellip 1516 pro fluorescenci 1404

kanadskyacute balzaacutem helliphellip 150

krystal NaCl helliphelliphelliphellip 154

korunoveacute sklo helliphelliphelliphellip 145 ndash 156 (sodno-draselneacute bezolovnateacute)

flintoveacute sklo helliphelliphelliphellip 162 ndash 180 (olovnateacute)

diamant helliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 242

Index lomu je vždy většiacute než 100

očniacute čočka hellip 1406

sklivec helliphelliphellip 1336

Odraz světla rovnyacutem zrcadlem (reflexe)

Zaacutekony

1 Paprsek dopadajiacuteciacute kolmice dopadu a paprsek odraženyacute

ležiacute v jedneacute rovině

2 Uacutehel odrazu se rovnaacute uacutehlu dopadu

Odraz a lom paprsku

k

Důležiteacute pro mikroskopii (astronomii)

- neniacute zaacutevislost na vlnoveacute deacutelce světla (λ)

- na rozdiacutel od lomu paprsků se světelneacute

paprsky se odraacutežejiacute stejně

Pazourek 1975

Zaacutekony

1 Paprsek dopadajiacuteciacute kolmice lomu a paprsek lomenyacute ležiacute v teacuteže rovině

Lom světla (refrakce)

2 Při přechodu z prostřediacute opticky řidšiacuteho do prostřediacute opticky hustšiacuteho se paprsek laacuteme ke kolmici (A)

a z prostřediacute opticky hustšiacuteho

do prostřediacute opticky řidšiacuteho

se laacuteme od kolmice (B)

(C a D) ndash uacuteplnyacute odraz při tzv

mezniacutem uacutehlu dopadu paprsku

v přiacutepadě lomu od kolmice (B)

(viz Nikol odrazneacute hranoly světlovodneacute vlaacutekno nebo fluorescenčniacute metoda TIRFM ndash totaacutelniacute odraz exitačniacuteho zaacuteřeniacute)

Pazourek 1975

Svatyacute Kryštof od

švyacutecarskeacuteho maliacuteře

Konrada Witze (kolem 1400ndash1446)

Witz byl jedniacutem z prvniacutech

maliacuteřů kteryacute namaloval

přesnyacute způsob odrazu

světla na vodě

Disperze (rozklad) světla

= důsledek zaacutevislosti rychlosti světla v laacutetkaacutech na frekvenci světla

(λ = c f)

světlo různyacutech barev (λ)

se laacuteme různě

(červeneacute se lomiacute meacuteně než modreacute)

Přiacuteklad disperze (rozkladu) světla

Primaacuterniacute a sekundaacuterniacute duha Severniacute Čechy Foto Pavla Vaacutelovaacute 2010

D u h a

Jeden z mnoha

optickyacutech

jevů (fotometeorů)

v atmosfeacuteře

Rok 312 nl - před bitvou byzantskeacuteho ciacutesaře Konstantina I (272-337) s

konkurenčniacutem ciacutesařem Maxentiem u bran Řiacutema (tzv bitva u Milvijskeacuteho mostu) se

na obloze objevily tři zaacuteřiacuteciacute křiacuteže (halovyacute sloup parheacutelia a parhelickyacute oblouk)

Konstantin bitvu proti přesile vyhraacutel sjednotil řiacuteši a povolil v niacute vyznaacutevat křesťanstviacute

Maleacute halo (22deg) (viz 1) vedlejšiacute slunce (2) a horniacute a dolniacute halovyacute sloup (3)

vznikajiacuteciacute odrazem a lomem světelnyacutech paprsků na krystalciacutech ledu

Lom světla a dějiny

httptmagazineblogsnytimescom20121126halo-effect_r=0

1

3

2 2

3

Ohyb (difrakce) a interference

světla

Foto Pavla Vaacutelovaacute Bukovany 2015 Rozklad světla na CD - světlo žaacuterovky

Rozklad biacuteleacuteho světla na mřiacutežce

Pevnost poznaacuteniacute Olomouc 2015

Foto Pavla Vaacutelovaacute Olomouc 2015

Ohyb (difrakce) a interference

světla

Ohyb (difrakce) a interference

Difrakčniacute obrazec obsahuje světlaacute a tmavaacute miacutesta kteraacute se

střiacutedajiacute - světlaacute miacutesta nazyacutevaacuteme maxima a tmavaacute minima

Interference světla = sklaacutedaacuteniacute světelnyacutech vln

Předpoklad světlo musiacute byacutet koherentniacute

Podmiacutenka koherence

- paprsky musiacute miacutet stejnou frekvenci

- paprsky musiacute byacutet navzaacutejem rovnoběžneacute

- paprsky musiacute miacutet na sobě nezaacutevislyacute draacutehovyacute (faacutezovyacute) rozdiacutel

Vznik koherentniacuteho zaacuteřeniacute

rozděleniacutem světla

- buď odrazem pomociacute zrcadel

- nebo lomem pomociacute hranolů

Foto Pavla Vaacutelovaacute Praha 151 2016

Interference světla

stejnyacute způsob vlněniacute

(faacuteze je vzaacutejemně posunuta o sudeacute

naacutesobky λ2)

vznik interferenčniacuteho maxima

(konstruktivniacute interference)

Interference světla

asynchronniacute vlněniacute

(vzaacutejemně posunutaacute faacuteze

o licheacute naacutesobky λ2)

vznik interferenčniacuteho

minima

(destruktivniacute interference)

rarr zaacuteřeniacute zanikaacute

rarr zeslabeniacute zaacuteřeniacute

Interference dvou vrstev elektromagnetickeacuteho zaacuteřeniacute u Slunce

Čočky ndash zaacutekladniacute součaacutesti

mikroskopu

= průhlednaacute (nejčastěji skleněnaacute) tělesa omezenaacute

vypuklyacutemi nebo vydutyacutemi kulovityacutemi plochami lišiacuteciacute se od sveacuteho okoliacute odlišnyacutem indexem lomu

Zaacutekladniacute typy čoček

spojky (vypukleacute neboli konvexniacute)

rozptylky (vyduteacute konkaacutevniacute)

Pazourek 1975

Optickaacute osa ( o ) prochaacuteziacute středem čočky

Ohnisko ( F ) - bod do ktereacuteho se soustřeďujiacute paprsky probiacutehajiacuteciacute rovnoběžně s optickou osou

- 2 ohniska - předmětoveacute ohnisko ( F )

obrazoveacute ohnisko ( Facute )

- ohniskovaacute vzdaacutelenost ( f )

vzdaacutelenost ohniska od hlavniacute roviny proloženeacute středem čočky

- dvojnaacutesobnaacute ohniskovaacute vzdaacutelenost ( P Pacute )

Obrazovyacute prostor - prostor v němž vznikaacute obraz

Důležiteacute charakteristiky čočky

f

o

hlavniacute rovina

Pazourek 1975

V přiacutepadě velmi tenkeacute čočky

bull Obraz za optickou soustavou

rarr obraz s k u t e č n yacute

Skutečnyacute obraz je možneacute zachytit na stiacuteniacutetko

nebo na fotografickou desku neskutečnyacute nikoliv

bull Obraz před soustavou

rarr obraz n e s k u t e č n yacute (zdaacutenlivyacute virtuaacutelniacute)

Obraz skutečnyacute a neskutečnyacute

A ndash předmět Aacute- obraz předmětu

Upraveno podle Pazourek 1975

Francouz Augustin Jean Fresnel (1788-1827) [frenel]

Fresnelova čočka [frenelova]

- plochyacute tvar (zachovaacuteny pouze čaacutesti ktereacute měniacute směr chodu světelnyacutech paprsků)

- vyacuterazně nižšiacute hmotnost při zachovaacuteniacute podobnyacutech parametrů

Využitiacute infračidla pohybu semafory světlomety (majaacuteky) a reflektory (světla aut

divadelniacutech a filmovyacutech osvětlovaciacutech zařiacutezeniacute) zpětneacute projektory slunečniacute kolektory

na zaacutekladě tohoto principu takeacute vyacuteroba 3D displejů k mobilniacutem telefonům a televiziacutem

httpwwwmffcuniczverejnostzpravicky03_lupahtm

čočka na majaacuteku

Čočky v budoucnosti

Pokus o vyacuterobu tzv dokonaleacute čočky

Prototyp - upraveneacute tzv Maxwellovo rybiacute oko

- paprsky světla se v něm pohybujiacute po kružniciacutech a

na rozdiacutel od běžnyacutech čoček se při zobrazeniacute využijiacute

všechny paprsky

- superčočky využiacutevajiacute geometrie k tomu aby se světlo

soustředilo do oblasti menšiacute než je jeho vlnovaacute deacutelka

(zatiacutem se neviacute jak do čočky vyhovujiacuteciacutem způsobem

doveacutest světlo)

Využitiacute v budoucnu

mimo jineacute v pozorovaacuteniacute živyacutech buněk při velkeacutem zvětšeniacute

pomociacute obyčejneacuteho světla bez jejich narušeniacute

Viacutece viz Plaacutešek J Mikroskopy se superčočkami httpwwwvesmircz | Vesmiacuter 91 531 zaacuteřiacute 2012

Hranoly

- doplňky optickyacutech systeacutemů

- většinou tvar rovnostranneacuteho trojuacutehelniacuteka

- využiacutevajiacute uacuteplneacuteho odrazu

Funkce

- změna chodu paprsků pod různyacutemi uacutehly

- rozdvojeniacute paprsků

Pazourek 1975

Různeacute typy odraznyacutech hranolů

Hranoly

Různeacute typy hranolů

httplaserykvalitneczimagestext_25_zakladyoptiky1odrazne_hranolyjpg

Viz dichroickeacute zrcadlo u fluorescenčniacuteho mikroskopu

Chod paprsků v binokulaacuterniacutem tubusu

Pazourek 1975

Nikol = hranol z islandskeacuteho vaacutepence

rarr polarizace světla

Dvojlomnyacute vaacutepencovyacute

krystal

ř ndash paprsek řaacutednyacute (zanikaacute na začerněneacute ploše)

mř ndash paprsek mimořaacutednyacute (lineaacuterně polarizovanyacute

využit k osvětleniacute)

začerněnaacute plocha

Nikol

Pazourek 1975

vzduchovaacute štěrbina

- rychlost světla je

v různyacutech směrech různaacute

- uacutehel paprsku řaacutedneacuteho a

mimořaacutedneacuteho je odlišnyacute

(u Vikingů - slunečniacute kaacutemen

soacutelarsteinn)

Chod paprsků ve světlovodneacutem vlaacuteknu

Princip uacuteplnyacute odraz paprsku

- uvnitř skleněneacuteho vlaacutekna je opticky hustšiacute prostřediacute

- nutnost dostatečně silneacuteho světelneacuteho zdroje

Světlovodnaacute vlaacutekna

Pazourek 1975

Širokeacute využitiacute v praxi optickeacute kabely ndash přenos signaacutelů ve sdělovaciacute technice

světlovody umožňujiacuteciacute veacutest denniacute světlo vedeniacute světla u stereolup endoskopů hellip

Page 43: Světelná a elektronová mikroskopie...(AMF – Atomic Force Miroscope) - skenování povrchu materiálu pomocí hrotu zavěšeném na pružném výkyvném raménku, který je přitahován

- paprsek nepolarizovanyacute (A C) ndash kmitaacute v každeacutem

miacutestě a v průběhu času ve všech možnyacutech směrech

kolmyacutech na směr šiacuteřeniacute paprsku

- paprsek polarizovanyacute (B D1 D2) - kmitaacute v jedneacute

rovině přičemž rovina kmitů (vlněniacute) jednoho z nich je

kolmaacute k rovině kmitů druheacuteho

Pazourek 1975

Polarizovaneacute světlo viz

httpswwwyoutubecomwatchv=gP751qpm4n4

Murphy DB Davidson MW (2013) Fundamentals of Light Microscopy and

Electronic Imaging Jonh Wkiley amp Sons Inc Hoboken New Jersey

Osm různyacutech vlnovyacutech forem světla (znaacutezorňujiacuteciacutech různou kvalitu světla)

Odraz a lom světelnyacutech paprsků

v prostřediacutech různeacute hustoty

Důležitaacute charakteristika prostřediacute

index lomu ( n ) (= optickaacute hustota prostřediacute)

c = rychlost světla ve vakuu (stejnaacute pro všechny λ )

v = rychlost světla určiteacute vlnoveacute deacutelky ve zkoumaneacute laacutetce

c

n =

v

zde absolutniacute index lomu

(bezrozměrnaacute fyzikaacutelniacute veličina jeho jednotka je 1)

Rychlost světla (c) určiteacute vlnoveacute

deacutelky v různyacutech prostřediacutech

c ve vakuu

= 300 000 kms

Index lomu (n) některyacutech laacutetek

vzduch (vakuum) helliphellip 100 (vzduch 10002718)

voda helliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 133

plexisklo helliphelliphelliphelliphelliphellip 140 ndash 152

křemenneacute sklo helliphellip hellip 145 (čočka z křemene z Ninive ndash 7 stol přnl)

běžneacute sklo helliphelliphelliphelliphellip 151

cedrovyacute olej helliphelliphelliphelliphellip 151

imerzniacute olej Olympus hellip 1516 pro fluorescenci 1404

kanadskyacute balzaacutem helliphellip 150

krystal NaCl helliphelliphelliphellip 154

korunoveacute sklo helliphelliphelliphellip 145 ndash 156 (sodno-draselneacute bezolovnateacute)

flintoveacute sklo helliphelliphelliphellip 162 ndash 180 (olovnateacute)

diamant helliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 242

Index lomu je vždy většiacute než 100

očniacute čočka hellip 1406

sklivec helliphelliphellip 1336

Odraz světla rovnyacutem zrcadlem (reflexe)

Zaacutekony

1 Paprsek dopadajiacuteciacute kolmice dopadu a paprsek odraženyacute

ležiacute v jedneacute rovině

2 Uacutehel odrazu se rovnaacute uacutehlu dopadu

Odraz a lom paprsku

k

Důležiteacute pro mikroskopii (astronomii)

- neniacute zaacutevislost na vlnoveacute deacutelce světla (λ)

- na rozdiacutel od lomu paprsků se světelneacute

paprsky se odraacutežejiacute stejně

Pazourek 1975

Zaacutekony

1 Paprsek dopadajiacuteciacute kolmice lomu a paprsek lomenyacute ležiacute v teacuteže rovině

Lom světla (refrakce)

2 Při přechodu z prostřediacute opticky řidšiacuteho do prostřediacute opticky hustšiacuteho se paprsek laacuteme ke kolmici (A)

a z prostřediacute opticky hustšiacuteho

do prostřediacute opticky řidšiacuteho

se laacuteme od kolmice (B)

(C a D) ndash uacuteplnyacute odraz při tzv

mezniacutem uacutehlu dopadu paprsku

v přiacutepadě lomu od kolmice (B)

(viz Nikol odrazneacute hranoly světlovodneacute vlaacutekno nebo fluorescenčniacute metoda TIRFM ndash totaacutelniacute odraz exitačniacuteho zaacuteřeniacute)

Pazourek 1975

Svatyacute Kryštof od

švyacutecarskeacuteho maliacuteře

Konrada Witze (kolem 1400ndash1446)

Witz byl jedniacutem z prvniacutech

maliacuteřů kteryacute namaloval

přesnyacute způsob odrazu

světla na vodě

Disperze (rozklad) světla

= důsledek zaacutevislosti rychlosti světla v laacutetkaacutech na frekvenci světla

(λ = c f)

světlo různyacutech barev (λ)

se laacuteme různě

(červeneacute se lomiacute meacuteně než modreacute)

Přiacuteklad disperze (rozkladu) světla

Primaacuterniacute a sekundaacuterniacute duha Severniacute Čechy Foto Pavla Vaacutelovaacute 2010

D u h a

Jeden z mnoha

optickyacutech

jevů (fotometeorů)

v atmosfeacuteře

Rok 312 nl - před bitvou byzantskeacuteho ciacutesaře Konstantina I (272-337) s

konkurenčniacutem ciacutesařem Maxentiem u bran Řiacutema (tzv bitva u Milvijskeacuteho mostu) se

na obloze objevily tři zaacuteřiacuteciacute křiacuteže (halovyacute sloup parheacutelia a parhelickyacute oblouk)

Konstantin bitvu proti přesile vyhraacutel sjednotil řiacuteši a povolil v niacute vyznaacutevat křesťanstviacute

Maleacute halo (22deg) (viz 1) vedlejšiacute slunce (2) a horniacute a dolniacute halovyacute sloup (3)

vznikajiacuteciacute odrazem a lomem světelnyacutech paprsků na krystalciacutech ledu

Lom světla a dějiny

httptmagazineblogsnytimescom20121126halo-effect_r=0

1

3

2 2

3

Ohyb (difrakce) a interference

světla

Foto Pavla Vaacutelovaacute Bukovany 2015 Rozklad světla na CD - světlo žaacuterovky

Rozklad biacuteleacuteho světla na mřiacutežce

Pevnost poznaacuteniacute Olomouc 2015

Foto Pavla Vaacutelovaacute Olomouc 2015

Ohyb (difrakce) a interference

světla

Ohyb (difrakce) a interference

Difrakčniacute obrazec obsahuje světlaacute a tmavaacute miacutesta kteraacute se

střiacutedajiacute - světlaacute miacutesta nazyacutevaacuteme maxima a tmavaacute minima

Interference světla = sklaacutedaacuteniacute světelnyacutech vln

Předpoklad světlo musiacute byacutet koherentniacute

Podmiacutenka koherence

- paprsky musiacute miacutet stejnou frekvenci

- paprsky musiacute byacutet navzaacutejem rovnoběžneacute

- paprsky musiacute miacutet na sobě nezaacutevislyacute draacutehovyacute (faacutezovyacute) rozdiacutel

Vznik koherentniacuteho zaacuteřeniacute

rozděleniacutem světla

- buď odrazem pomociacute zrcadel

- nebo lomem pomociacute hranolů

Foto Pavla Vaacutelovaacute Praha 151 2016

Interference světla

stejnyacute způsob vlněniacute

(faacuteze je vzaacutejemně posunuta o sudeacute

naacutesobky λ2)

vznik interferenčniacuteho maxima

(konstruktivniacute interference)

Interference světla

asynchronniacute vlněniacute

(vzaacutejemně posunutaacute faacuteze

o licheacute naacutesobky λ2)

vznik interferenčniacuteho

minima

(destruktivniacute interference)

rarr zaacuteřeniacute zanikaacute

rarr zeslabeniacute zaacuteřeniacute

Interference dvou vrstev elektromagnetickeacuteho zaacuteřeniacute u Slunce

Čočky ndash zaacutekladniacute součaacutesti

mikroskopu

= průhlednaacute (nejčastěji skleněnaacute) tělesa omezenaacute

vypuklyacutemi nebo vydutyacutemi kulovityacutemi plochami lišiacuteciacute se od sveacuteho okoliacute odlišnyacutem indexem lomu

Zaacutekladniacute typy čoček

spojky (vypukleacute neboli konvexniacute)

rozptylky (vyduteacute konkaacutevniacute)

Pazourek 1975

Optickaacute osa ( o ) prochaacuteziacute středem čočky

Ohnisko ( F ) - bod do ktereacuteho se soustřeďujiacute paprsky probiacutehajiacuteciacute rovnoběžně s optickou osou

- 2 ohniska - předmětoveacute ohnisko ( F )

obrazoveacute ohnisko ( Facute )

- ohniskovaacute vzdaacutelenost ( f )

vzdaacutelenost ohniska od hlavniacute roviny proloženeacute středem čočky

- dvojnaacutesobnaacute ohniskovaacute vzdaacutelenost ( P Pacute )

Obrazovyacute prostor - prostor v němž vznikaacute obraz

Důležiteacute charakteristiky čočky

f

o

hlavniacute rovina

Pazourek 1975

V přiacutepadě velmi tenkeacute čočky

bull Obraz za optickou soustavou

rarr obraz s k u t e č n yacute

Skutečnyacute obraz je možneacute zachytit na stiacuteniacutetko

nebo na fotografickou desku neskutečnyacute nikoliv

bull Obraz před soustavou

rarr obraz n e s k u t e č n yacute (zdaacutenlivyacute virtuaacutelniacute)

Obraz skutečnyacute a neskutečnyacute

A ndash předmět Aacute- obraz předmětu

Upraveno podle Pazourek 1975

Francouz Augustin Jean Fresnel (1788-1827) [frenel]

Fresnelova čočka [frenelova]

- plochyacute tvar (zachovaacuteny pouze čaacutesti ktereacute měniacute směr chodu světelnyacutech paprsků)

- vyacuterazně nižšiacute hmotnost při zachovaacuteniacute podobnyacutech parametrů

Využitiacute infračidla pohybu semafory světlomety (majaacuteky) a reflektory (světla aut

divadelniacutech a filmovyacutech osvětlovaciacutech zařiacutezeniacute) zpětneacute projektory slunečniacute kolektory

na zaacutekladě tohoto principu takeacute vyacuteroba 3D displejů k mobilniacutem telefonům a televiziacutem

httpwwwmffcuniczverejnostzpravicky03_lupahtm

čočka na majaacuteku

Čočky v budoucnosti

Pokus o vyacuterobu tzv dokonaleacute čočky

Prototyp - upraveneacute tzv Maxwellovo rybiacute oko

- paprsky světla se v něm pohybujiacute po kružniciacutech a

na rozdiacutel od běžnyacutech čoček se při zobrazeniacute využijiacute

všechny paprsky

- superčočky využiacutevajiacute geometrie k tomu aby se světlo

soustředilo do oblasti menšiacute než je jeho vlnovaacute deacutelka

(zatiacutem se neviacute jak do čočky vyhovujiacuteciacutem způsobem

doveacutest světlo)

Využitiacute v budoucnu

mimo jineacute v pozorovaacuteniacute živyacutech buněk při velkeacutem zvětšeniacute

pomociacute obyčejneacuteho světla bez jejich narušeniacute

Viacutece viz Plaacutešek J Mikroskopy se superčočkami httpwwwvesmircz | Vesmiacuter 91 531 zaacuteřiacute 2012

Hranoly

- doplňky optickyacutech systeacutemů

- většinou tvar rovnostranneacuteho trojuacutehelniacuteka

- využiacutevajiacute uacuteplneacuteho odrazu

Funkce

- změna chodu paprsků pod různyacutemi uacutehly

- rozdvojeniacute paprsků

Pazourek 1975

Různeacute typy odraznyacutech hranolů

Hranoly

Různeacute typy hranolů

httplaserykvalitneczimagestext_25_zakladyoptiky1odrazne_hranolyjpg

Viz dichroickeacute zrcadlo u fluorescenčniacuteho mikroskopu

Chod paprsků v binokulaacuterniacutem tubusu

Pazourek 1975

Nikol = hranol z islandskeacuteho vaacutepence

rarr polarizace světla

Dvojlomnyacute vaacutepencovyacute

krystal

ř ndash paprsek řaacutednyacute (zanikaacute na začerněneacute ploše)

mř ndash paprsek mimořaacutednyacute (lineaacuterně polarizovanyacute

využit k osvětleniacute)

začerněnaacute plocha

Nikol

Pazourek 1975

vzduchovaacute štěrbina

- rychlost světla je

v různyacutech směrech různaacute

- uacutehel paprsku řaacutedneacuteho a

mimořaacutedneacuteho je odlišnyacute

(u Vikingů - slunečniacute kaacutemen

soacutelarsteinn)

Chod paprsků ve světlovodneacutem vlaacuteknu

Princip uacuteplnyacute odraz paprsku

- uvnitř skleněneacuteho vlaacutekna je opticky hustšiacute prostřediacute

- nutnost dostatečně silneacuteho světelneacuteho zdroje

Světlovodnaacute vlaacutekna

Pazourek 1975

Širokeacute využitiacute v praxi optickeacute kabely ndash přenos signaacutelů ve sdělovaciacute technice

světlovody umožňujiacuteciacute veacutest denniacute světlo vedeniacute světla u stereolup endoskopů hellip

Page 44: Světelná a elektronová mikroskopie...(AMF – Atomic Force Miroscope) - skenování povrchu materiálu pomocí hrotu zavěšeném na pružném výkyvném raménku, který je přitahován

Murphy DB Davidson MW (2013) Fundamentals of Light Microscopy and

Electronic Imaging Jonh Wkiley amp Sons Inc Hoboken New Jersey

Osm různyacutech vlnovyacutech forem světla (znaacutezorňujiacuteciacutech různou kvalitu světla)

Odraz a lom světelnyacutech paprsků

v prostřediacutech různeacute hustoty

Důležitaacute charakteristika prostřediacute

index lomu ( n ) (= optickaacute hustota prostřediacute)

c = rychlost světla ve vakuu (stejnaacute pro všechny λ )

v = rychlost světla určiteacute vlnoveacute deacutelky ve zkoumaneacute laacutetce

c

n =

v

zde absolutniacute index lomu

(bezrozměrnaacute fyzikaacutelniacute veličina jeho jednotka je 1)

Rychlost světla (c) určiteacute vlnoveacute

deacutelky v různyacutech prostřediacutech

c ve vakuu

= 300 000 kms

Index lomu (n) některyacutech laacutetek

vzduch (vakuum) helliphellip 100 (vzduch 10002718)

voda helliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 133

plexisklo helliphelliphelliphelliphelliphellip 140 ndash 152

křemenneacute sklo helliphellip hellip 145 (čočka z křemene z Ninive ndash 7 stol přnl)

běžneacute sklo helliphelliphelliphelliphellip 151

cedrovyacute olej helliphelliphelliphelliphellip 151

imerzniacute olej Olympus hellip 1516 pro fluorescenci 1404

kanadskyacute balzaacutem helliphellip 150

krystal NaCl helliphelliphelliphellip 154

korunoveacute sklo helliphelliphelliphellip 145 ndash 156 (sodno-draselneacute bezolovnateacute)

flintoveacute sklo helliphelliphelliphellip 162 ndash 180 (olovnateacute)

diamant helliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 242

Index lomu je vždy většiacute než 100

očniacute čočka hellip 1406

sklivec helliphelliphellip 1336

Odraz světla rovnyacutem zrcadlem (reflexe)

Zaacutekony

1 Paprsek dopadajiacuteciacute kolmice dopadu a paprsek odraženyacute

ležiacute v jedneacute rovině

2 Uacutehel odrazu se rovnaacute uacutehlu dopadu

Odraz a lom paprsku

k

Důležiteacute pro mikroskopii (astronomii)

- neniacute zaacutevislost na vlnoveacute deacutelce světla (λ)

- na rozdiacutel od lomu paprsků se světelneacute

paprsky se odraacutežejiacute stejně

Pazourek 1975

Zaacutekony

1 Paprsek dopadajiacuteciacute kolmice lomu a paprsek lomenyacute ležiacute v teacuteže rovině

Lom světla (refrakce)

2 Při přechodu z prostřediacute opticky řidšiacuteho do prostřediacute opticky hustšiacuteho se paprsek laacuteme ke kolmici (A)

a z prostřediacute opticky hustšiacuteho

do prostřediacute opticky řidšiacuteho

se laacuteme od kolmice (B)

(C a D) ndash uacuteplnyacute odraz při tzv

mezniacutem uacutehlu dopadu paprsku

v přiacutepadě lomu od kolmice (B)

(viz Nikol odrazneacute hranoly světlovodneacute vlaacutekno nebo fluorescenčniacute metoda TIRFM ndash totaacutelniacute odraz exitačniacuteho zaacuteřeniacute)

Pazourek 1975

Svatyacute Kryštof od

švyacutecarskeacuteho maliacuteře

Konrada Witze (kolem 1400ndash1446)

Witz byl jedniacutem z prvniacutech

maliacuteřů kteryacute namaloval

přesnyacute způsob odrazu

světla na vodě

Disperze (rozklad) světla

= důsledek zaacutevislosti rychlosti světla v laacutetkaacutech na frekvenci světla

(λ = c f)

světlo různyacutech barev (λ)

se laacuteme různě

(červeneacute se lomiacute meacuteně než modreacute)

Přiacuteklad disperze (rozkladu) světla

Primaacuterniacute a sekundaacuterniacute duha Severniacute Čechy Foto Pavla Vaacutelovaacute 2010

D u h a

Jeden z mnoha

optickyacutech

jevů (fotometeorů)

v atmosfeacuteře

Rok 312 nl - před bitvou byzantskeacuteho ciacutesaře Konstantina I (272-337) s

konkurenčniacutem ciacutesařem Maxentiem u bran Řiacutema (tzv bitva u Milvijskeacuteho mostu) se

na obloze objevily tři zaacuteřiacuteciacute křiacuteže (halovyacute sloup parheacutelia a parhelickyacute oblouk)

Konstantin bitvu proti přesile vyhraacutel sjednotil řiacuteši a povolil v niacute vyznaacutevat křesťanstviacute

Maleacute halo (22deg) (viz 1) vedlejšiacute slunce (2) a horniacute a dolniacute halovyacute sloup (3)

vznikajiacuteciacute odrazem a lomem světelnyacutech paprsků na krystalciacutech ledu

Lom světla a dějiny

httptmagazineblogsnytimescom20121126halo-effect_r=0

1

3

2 2

3

Ohyb (difrakce) a interference

světla

Foto Pavla Vaacutelovaacute Bukovany 2015 Rozklad světla na CD - světlo žaacuterovky

Rozklad biacuteleacuteho světla na mřiacutežce

Pevnost poznaacuteniacute Olomouc 2015

Foto Pavla Vaacutelovaacute Olomouc 2015

Ohyb (difrakce) a interference

světla

Ohyb (difrakce) a interference

Difrakčniacute obrazec obsahuje světlaacute a tmavaacute miacutesta kteraacute se

střiacutedajiacute - světlaacute miacutesta nazyacutevaacuteme maxima a tmavaacute minima

Interference světla = sklaacutedaacuteniacute světelnyacutech vln

Předpoklad světlo musiacute byacutet koherentniacute

Podmiacutenka koherence

- paprsky musiacute miacutet stejnou frekvenci

- paprsky musiacute byacutet navzaacutejem rovnoběžneacute

- paprsky musiacute miacutet na sobě nezaacutevislyacute draacutehovyacute (faacutezovyacute) rozdiacutel

Vznik koherentniacuteho zaacuteřeniacute

rozděleniacutem světla

- buď odrazem pomociacute zrcadel

- nebo lomem pomociacute hranolů

Foto Pavla Vaacutelovaacute Praha 151 2016

Interference světla

stejnyacute způsob vlněniacute

(faacuteze je vzaacutejemně posunuta o sudeacute

naacutesobky λ2)

vznik interferenčniacuteho maxima

(konstruktivniacute interference)

Interference světla

asynchronniacute vlněniacute

(vzaacutejemně posunutaacute faacuteze

o licheacute naacutesobky λ2)

vznik interferenčniacuteho

minima

(destruktivniacute interference)

rarr zaacuteřeniacute zanikaacute

rarr zeslabeniacute zaacuteřeniacute

Interference dvou vrstev elektromagnetickeacuteho zaacuteřeniacute u Slunce

Čočky ndash zaacutekladniacute součaacutesti

mikroskopu

= průhlednaacute (nejčastěji skleněnaacute) tělesa omezenaacute

vypuklyacutemi nebo vydutyacutemi kulovityacutemi plochami lišiacuteciacute se od sveacuteho okoliacute odlišnyacutem indexem lomu

Zaacutekladniacute typy čoček

spojky (vypukleacute neboli konvexniacute)

rozptylky (vyduteacute konkaacutevniacute)

Pazourek 1975

Optickaacute osa ( o ) prochaacuteziacute středem čočky

Ohnisko ( F ) - bod do ktereacuteho se soustřeďujiacute paprsky probiacutehajiacuteciacute rovnoběžně s optickou osou

- 2 ohniska - předmětoveacute ohnisko ( F )

obrazoveacute ohnisko ( Facute )

- ohniskovaacute vzdaacutelenost ( f )

vzdaacutelenost ohniska od hlavniacute roviny proloženeacute středem čočky

- dvojnaacutesobnaacute ohniskovaacute vzdaacutelenost ( P Pacute )

Obrazovyacute prostor - prostor v němž vznikaacute obraz

Důležiteacute charakteristiky čočky

f

o

hlavniacute rovina

Pazourek 1975

V přiacutepadě velmi tenkeacute čočky

bull Obraz za optickou soustavou

rarr obraz s k u t e č n yacute

Skutečnyacute obraz je možneacute zachytit na stiacuteniacutetko

nebo na fotografickou desku neskutečnyacute nikoliv

bull Obraz před soustavou

rarr obraz n e s k u t e č n yacute (zdaacutenlivyacute virtuaacutelniacute)

Obraz skutečnyacute a neskutečnyacute

A ndash předmět Aacute- obraz předmětu

Upraveno podle Pazourek 1975

Francouz Augustin Jean Fresnel (1788-1827) [frenel]

Fresnelova čočka [frenelova]

- plochyacute tvar (zachovaacuteny pouze čaacutesti ktereacute měniacute směr chodu světelnyacutech paprsků)

- vyacuterazně nižšiacute hmotnost při zachovaacuteniacute podobnyacutech parametrů

Využitiacute infračidla pohybu semafory světlomety (majaacuteky) a reflektory (světla aut

divadelniacutech a filmovyacutech osvětlovaciacutech zařiacutezeniacute) zpětneacute projektory slunečniacute kolektory

na zaacutekladě tohoto principu takeacute vyacuteroba 3D displejů k mobilniacutem telefonům a televiziacutem

httpwwwmffcuniczverejnostzpravicky03_lupahtm

čočka na majaacuteku

Čočky v budoucnosti

Pokus o vyacuterobu tzv dokonaleacute čočky

Prototyp - upraveneacute tzv Maxwellovo rybiacute oko

- paprsky světla se v něm pohybujiacute po kružniciacutech a

na rozdiacutel od běžnyacutech čoček se při zobrazeniacute využijiacute

všechny paprsky

- superčočky využiacutevajiacute geometrie k tomu aby se světlo

soustředilo do oblasti menšiacute než je jeho vlnovaacute deacutelka

(zatiacutem se neviacute jak do čočky vyhovujiacuteciacutem způsobem

doveacutest světlo)

Využitiacute v budoucnu

mimo jineacute v pozorovaacuteniacute živyacutech buněk při velkeacutem zvětšeniacute

pomociacute obyčejneacuteho světla bez jejich narušeniacute

Viacutece viz Plaacutešek J Mikroskopy se superčočkami httpwwwvesmircz | Vesmiacuter 91 531 zaacuteřiacute 2012

Hranoly

- doplňky optickyacutech systeacutemů

- většinou tvar rovnostranneacuteho trojuacutehelniacuteka

- využiacutevajiacute uacuteplneacuteho odrazu

Funkce

- změna chodu paprsků pod různyacutemi uacutehly

- rozdvojeniacute paprsků

Pazourek 1975

Různeacute typy odraznyacutech hranolů

Hranoly

Různeacute typy hranolů

httplaserykvalitneczimagestext_25_zakladyoptiky1odrazne_hranolyjpg

Viz dichroickeacute zrcadlo u fluorescenčniacuteho mikroskopu

Chod paprsků v binokulaacuterniacutem tubusu

Pazourek 1975

Nikol = hranol z islandskeacuteho vaacutepence

rarr polarizace světla

Dvojlomnyacute vaacutepencovyacute

krystal

ř ndash paprsek řaacutednyacute (zanikaacute na začerněneacute ploše)

mř ndash paprsek mimořaacutednyacute (lineaacuterně polarizovanyacute

využit k osvětleniacute)

začerněnaacute plocha

Nikol

Pazourek 1975

vzduchovaacute štěrbina

- rychlost světla je

v různyacutech směrech různaacute

- uacutehel paprsku řaacutedneacuteho a

mimořaacutedneacuteho je odlišnyacute

(u Vikingů - slunečniacute kaacutemen

soacutelarsteinn)

Chod paprsků ve světlovodneacutem vlaacuteknu

Princip uacuteplnyacute odraz paprsku

- uvnitř skleněneacuteho vlaacutekna je opticky hustšiacute prostřediacute

- nutnost dostatečně silneacuteho světelneacuteho zdroje

Světlovodnaacute vlaacutekna

Pazourek 1975

Širokeacute využitiacute v praxi optickeacute kabely ndash přenos signaacutelů ve sdělovaciacute technice

světlovody umožňujiacuteciacute veacutest denniacute světlo vedeniacute světla u stereolup endoskopů hellip

Page 45: Světelná a elektronová mikroskopie...(AMF – Atomic Force Miroscope) - skenování povrchu materiálu pomocí hrotu zavěšeném na pružném výkyvném raménku, který je přitahován

Odraz a lom světelnyacutech paprsků

v prostřediacutech různeacute hustoty

Důležitaacute charakteristika prostřediacute

index lomu ( n ) (= optickaacute hustota prostřediacute)

c = rychlost světla ve vakuu (stejnaacute pro všechny λ )

v = rychlost světla určiteacute vlnoveacute deacutelky ve zkoumaneacute laacutetce

c

n =

v

zde absolutniacute index lomu

(bezrozměrnaacute fyzikaacutelniacute veličina jeho jednotka je 1)

Rychlost světla (c) určiteacute vlnoveacute

deacutelky v různyacutech prostřediacutech

c ve vakuu

= 300 000 kms

Index lomu (n) některyacutech laacutetek

vzduch (vakuum) helliphellip 100 (vzduch 10002718)

voda helliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 133

plexisklo helliphelliphelliphelliphelliphellip 140 ndash 152

křemenneacute sklo helliphellip hellip 145 (čočka z křemene z Ninive ndash 7 stol přnl)

běžneacute sklo helliphelliphelliphelliphellip 151

cedrovyacute olej helliphelliphelliphelliphellip 151

imerzniacute olej Olympus hellip 1516 pro fluorescenci 1404

kanadskyacute balzaacutem helliphellip 150

krystal NaCl helliphelliphelliphellip 154

korunoveacute sklo helliphelliphelliphellip 145 ndash 156 (sodno-draselneacute bezolovnateacute)

flintoveacute sklo helliphelliphelliphellip 162 ndash 180 (olovnateacute)

diamant helliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 242

Index lomu je vždy většiacute než 100

očniacute čočka hellip 1406

sklivec helliphelliphellip 1336

Odraz světla rovnyacutem zrcadlem (reflexe)

Zaacutekony

1 Paprsek dopadajiacuteciacute kolmice dopadu a paprsek odraženyacute

ležiacute v jedneacute rovině

2 Uacutehel odrazu se rovnaacute uacutehlu dopadu

Odraz a lom paprsku

k

Důležiteacute pro mikroskopii (astronomii)

- neniacute zaacutevislost na vlnoveacute deacutelce světla (λ)

- na rozdiacutel od lomu paprsků se světelneacute

paprsky se odraacutežejiacute stejně

Pazourek 1975

Zaacutekony

1 Paprsek dopadajiacuteciacute kolmice lomu a paprsek lomenyacute ležiacute v teacuteže rovině

Lom světla (refrakce)

2 Při přechodu z prostřediacute opticky řidšiacuteho do prostřediacute opticky hustšiacuteho se paprsek laacuteme ke kolmici (A)

a z prostřediacute opticky hustšiacuteho

do prostřediacute opticky řidšiacuteho

se laacuteme od kolmice (B)

(C a D) ndash uacuteplnyacute odraz při tzv

mezniacutem uacutehlu dopadu paprsku

v přiacutepadě lomu od kolmice (B)

(viz Nikol odrazneacute hranoly světlovodneacute vlaacutekno nebo fluorescenčniacute metoda TIRFM ndash totaacutelniacute odraz exitačniacuteho zaacuteřeniacute)

Pazourek 1975

Svatyacute Kryštof od

švyacutecarskeacuteho maliacuteře

Konrada Witze (kolem 1400ndash1446)

Witz byl jedniacutem z prvniacutech

maliacuteřů kteryacute namaloval

přesnyacute způsob odrazu

světla na vodě

Disperze (rozklad) světla

= důsledek zaacutevislosti rychlosti světla v laacutetkaacutech na frekvenci světla

(λ = c f)

světlo různyacutech barev (λ)

se laacuteme různě

(červeneacute se lomiacute meacuteně než modreacute)

Přiacuteklad disperze (rozkladu) světla

Primaacuterniacute a sekundaacuterniacute duha Severniacute Čechy Foto Pavla Vaacutelovaacute 2010

D u h a

Jeden z mnoha

optickyacutech

jevů (fotometeorů)

v atmosfeacuteře

Rok 312 nl - před bitvou byzantskeacuteho ciacutesaře Konstantina I (272-337) s

konkurenčniacutem ciacutesařem Maxentiem u bran Řiacutema (tzv bitva u Milvijskeacuteho mostu) se

na obloze objevily tři zaacuteřiacuteciacute křiacuteže (halovyacute sloup parheacutelia a parhelickyacute oblouk)

Konstantin bitvu proti přesile vyhraacutel sjednotil řiacuteši a povolil v niacute vyznaacutevat křesťanstviacute

Maleacute halo (22deg) (viz 1) vedlejšiacute slunce (2) a horniacute a dolniacute halovyacute sloup (3)

vznikajiacuteciacute odrazem a lomem světelnyacutech paprsků na krystalciacutech ledu

Lom světla a dějiny

httptmagazineblogsnytimescom20121126halo-effect_r=0

1

3

2 2

3

Ohyb (difrakce) a interference

světla

Foto Pavla Vaacutelovaacute Bukovany 2015 Rozklad světla na CD - světlo žaacuterovky

Rozklad biacuteleacuteho světla na mřiacutežce

Pevnost poznaacuteniacute Olomouc 2015

Foto Pavla Vaacutelovaacute Olomouc 2015

Ohyb (difrakce) a interference

světla

Ohyb (difrakce) a interference

Difrakčniacute obrazec obsahuje světlaacute a tmavaacute miacutesta kteraacute se

střiacutedajiacute - světlaacute miacutesta nazyacutevaacuteme maxima a tmavaacute minima

Interference světla = sklaacutedaacuteniacute světelnyacutech vln

Předpoklad světlo musiacute byacutet koherentniacute

Podmiacutenka koherence

- paprsky musiacute miacutet stejnou frekvenci

- paprsky musiacute byacutet navzaacutejem rovnoběžneacute

- paprsky musiacute miacutet na sobě nezaacutevislyacute draacutehovyacute (faacutezovyacute) rozdiacutel

Vznik koherentniacuteho zaacuteřeniacute

rozděleniacutem světla

- buď odrazem pomociacute zrcadel

- nebo lomem pomociacute hranolů

Foto Pavla Vaacutelovaacute Praha 151 2016

Interference světla

stejnyacute způsob vlněniacute

(faacuteze je vzaacutejemně posunuta o sudeacute

naacutesobky λ2)

vznik interferenčniacuteho maxima

(konstruktivniacute interference)

Interference světla

asynchronniacute vlněniacute

(vzaacutejemně posunutaacute faacuteze

o licheacute naacutesobky λ2)

vznik interferenčniacuteho

minima

(destruktivniacute interference)

rarr zaacuteřeniacute zanikaacute

rarr zeslabeniacute zaacuteřeniacute

Interference dvou vrstev elektromagnetickeacuteho zaacuteřeniacute u Slunce

Čočky ndash zaacutekladniacute součaacutesti

mikroskopu

= průhlednaacute (nejčastěji skleněnaacute) tělesa omezenaacute

vypuklyacutemi nebo vydutyacutemi kulovityacutemi plochami lišiacuteciacute se od sveacuteho okoliacute odlišnyacutem indexem lomu

Zaacutekladniacute typy čoček

spojky (vypukleacute neboli konvexniacute)

rozptylky (vyduteacute konkaacutevniacute)

Pazourek 1975

Optickaacute osa ( o ) prochaacuteziacute středem čočky

Ohnisko ( F ) - bod do ktereacuteho se soustřeďujiacute paprsky probiacutehajiacuteciacute rovnoběžně s optickou osou

- 2 ohniska - předmětoveacute ohnisko ( F )

obrazoveacute ohnisko ( Facute )

- ohniskovaacute vzdaacutelenost ( f )

vzdaacutelenost ohniska od hlavniacute roviny proloženeacute středem čočky

- dvojnaacutesobnaacute ohniskovaacute vzdaacutelenost ( P Pacute )

Obrazovyacute prostor - prostor v němž vznikaacute obraz

Důležiteacute charakteristiky čočky

f

o

hlavniacute rovina

Pazourek 1975

V přiacutepadě velmi tenkeacute čočky

bull Obraz za optickou soustavou

rarr obraz s k u t e č n yacute

Skutečnyacute obraz je možneacute zachytit na stiacuteniacutetko

nebo na fotografickou desku neskutečnyacute nikoliv

bull Obraz před soustavou

rarr obraz n e s k u t e č n yacute (zdaacutenlivyacute virtuaacutelniacute)

Obraz skutečnyacute a neskutečnyacute

A ndash předmět Aacute- obraz předmětu

Upraveno podle Pazourek 1975

Francouz Augustin Jean Fresnel (1788-1827) [frenel]

Fresnelova čočka [frenelova]

- plochyacute tvar (zachovaacuteny pouze čaacutesti ktereacute měniacute směr chodu světelnyacutech paprsků)

- vyacuterazně nižšiacute hmotnost při zachovaacuteniacute podobnyacutech parametrů

Využitiacute infračidla pohybu semafory světlomety (majaacuteky) a reflektory (světla aut

divadelniacutech a filmovyacutech osvětlovaciacutech zařiacutezeniacute) zpětneacute projektory slunečniacute kolektory

na zaacutekladě tohoto principu takeacute vyacuteroba 3D displejů k mobilniacutem telefonům a televiziacutem

httpwwwmffcuniczverejnostzpravicky03_lupahtm

čočka na majaacuteku

Čočky v budoucnosti

Pokus o vyacuterobu tzv dokonaleacute čočky

Prototyp - upraveneacute tzv Maxwellovo rybiacute oko

- paprsky světla se v něm pohybujiacute po kružniciacutech a

na rozdiacutel od běžnyacutech čoček se při zobrazeniacute využijiacute

všechny paprsky

- superčočky využiacutevajiacute geometrie k tomu aby se světlo

soustředilo do oblasti menšiacute než je jeho vlnovaacute deacutelka

(zatiacutem se neviacute jak do čočky vyhovujiacuteciacutem způsobem

doveacutest světlo)

Využitiacute v budoucnu

mimo jineacute v pozorovaacuteniacute živyacutech buněk při velkeacutem zvětšeniacute

pomociacute obyčejneacuteho světla bez jejich narušeniacute

Viacutece viz Plaacutešek J Mikroskopy se superčočkami httpwwwvesmircz | Vesmiacuter 91 531 zaacuteřiacute 2012

Hranoly

- doplňky optickyacutech systeacutemů

- většinou tvar rovnostranneacuteho trojuacutehelniacuteka

- využiacutevajiacute uacuteplneacuteho odrazu

Funkce

- změna chodu paprsků pod různyacutemi uacutehly

- rozdvojeniacute paprsků

Pazourek 1975

Různeacute typy odraznyacutech hranolů

Hranoly

Různeacute typy hranolů

httplaserykvalitneczimagestext_25_zakladyoptiky1odrazne_hranolyjpg

Viz dichroickeacute zrcadlo u fluorescenčniacuteho mikroskopu

Chod paprsků v binokulaacuterniacutem tubusu

Pazourek 1975

Nikol = hranol z islandskeacuteho vaacutepence

rarr polarizace světla

Dvojlomnyacute vaacutepencovyacute

krystal

ř ndash paprsek řaacutednyacute (zanikaacute na začerněneacute ploše)

mř ndash paprsek mimořaacutednyacute (lineaacuterně polarizovanyacute

využit k osvětleniacute)

začerněnaacute plocha

Nikol

Pazourek 1975

vzduchovaacute štěrbina

- rychlost světla je

v různyacutech směrech různaacute

- uacutehel paprsku řaacutedneacuteho a

mimořaacutedneacuteho je odlišnyacute

(u Vikingů - slunečniacute kaacutemen

soacutelarsteinn)

Chod paprsků ve světlovodneacutem vlaacuteknu

Princip uacuteplnyacute odraz paprsku

- uvnitř skleněneacuteho vlaacutekna je opticky hustšiacute prostřediacute

- nutnost dostatečně silneacuteho světelneacuteho zdroje

Světlovodnaacute vlaacutekna

Pazourek 1975

Širokeacute využitiacute v praxi optickeacute kabely ndash přenos signaacutelů ve sdělovaciacute technice

světlovody umožňujiacuteciacute veacutest denniacute světlo vedeniacute světla u stereolup endoskopů hellip

Page 46: Světelná a elektronová mikroskopie...(AMF – Atomic Force Miroscope) - skenování povrchu materiálu pomocí hrotu zavěšeném na pružném výkyvném raménku, který je přitahován

Rychlost světla (c) určiteacute vlnoveacute

deacutelky v různyacutech prostřediacutech

c ve vakuu

= 300 000 kms

Index lomu (n) některyacutech laacutetek

vzduch (vakuum) helliphellip 100 (vzduch 10002718)

voda helliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 133

plexisklo helliphelliphelliphelliphelliphellip 140 ndash 152

křemenneacute sklo helliphellip hellip 145 (čočka z křemene z Ninive ndash 7 stol přnl)

běžneacute sklo helliphelliphelliphelliphellip 151

cedrovyacute olej helliphelliphelliphelliphellip 151

imerzniacute olej Olympus hellip 1516 pro fluorescenci 1404

kanadskyacute balzaacutem helliphellip 150

krystal NaCl helliphelliphelliphellip 154

korunoveacute sklo helliphelliphelliphellip 145 ndash 156 (sodno-draselneacute bezolovnateacute)

flintoveacute sklo helliphelliphelliphellip 162 ndash 180 (olovnateacute)

diamant helliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 242

Index lomu je vždy většiacute než 100

očniacute čočka hellip 1406

sklivec helliphelliphellip 1336

Odraz světla rovnyacutem zrcadlem (reflexe)

Zaacutekony

1 Paprsek dopadajiacuteciacute kolmice dopadu a paprsek odraženyacute

ležiacute v jedneacute rovině

2 Uacutehel odrazu se rovnaacute uacutehlu dopadu

Odraz a lom paprsku

k

Důležiteacute pro mikroskopii (astronomii)

- neniacute zaacutevislost na vlnoveacute deacutelce světla (λ)

- na rozdiacutel od lomu paprsků se světelneacute

paprsky se odraacutežejiacute stejně

Pazourek 1975

Zaacutekony

1 Paprsek dopadajiacuteciacute kolmice lomu a paprsek lomenyacute ležiacute v teacuteže rovině

Lom světla (refrakce)

2 Při přechodu z prostřediacute opticky řidšiacuteho do prostřediacute opticky hustšiacuteho se paprsek laacuteme ke kolmici (A)

a z prostřediacute opticky hustšiacuteho

do prostřediacute opticky řidšiacuteho

se laacuteme od kolmice (B)

(C a D) ndash uacuteplnyacute odraz při tzv

mezniacutem uacutehlu dopadu paprsku

v přiacutepadě lomu od kolmice (B)

(viz Nikol odrazneacute hranoly světlovodneacute vlaacutekno nebo fluorescenčniacute metoda TIRFM ndash totaacutelniacute odraz exitačniacuteho zaacuteřeniacute)

Pazourek 1975

Svatyacute Kryštof od

švyacutecarskeacuteho maliacuteře

Konrada Witze (kolem 1400ndash1446)

Witz byl jedniacutem z prvniacutech

maliacuteřů kteryacute namaloval

přesnyacute způsob odrazu

světla na vodě

Disperze (rozklad) světla

= důsledek zaacutevislosti rychlosti světla v laacutetkaacutech na frekvenci světla

(λ = c f)

světlo různyacutech barev (λ)

se laacuteme různě

(červeneacute se lomiacute meacuteně než modreacute)

Přiacuteklad disperze (rozkladu) světla

Primaacuterniacute a sekundaacuterniacute duha Severniacute Čechy Foto Pavla Vaacutelovaacute 2010

D u h a

Jeden z mnoha

optickyacutech

jevů (fotometeorů)

v atmosfeacuteře

Rok 312 nl - před bitvou byzantskeacuteho ciacutesaře Konstantina I (272-337) s

konkurenčniacutem ciacutesařem Maxentiem u bran Řiacutema (tzv bitva u Milvijskeacuteho mostu) se

na obloze objevily tři zaacuteřiacuteciacute křiacuteže (halovyacute sloup parheacutelia a parhelickyacute oblouk)

Konstantin bitvu proti přesile vyhraacutel sjednotil řiacuteši a povolil v niacute vyznaacutevat křesťanstviacute

Maleacute halo (22deg) (viz 1) vedlejšiacute slunce (2) a horniacute a dolniacute halovyacute sloup (3)

vznikajiacuteciacute odrazem a lomem světelnyacutech paprsků na krystalciacutech ledu

Lom světla a dějiny

httptmagazineblogsnytimescom20121126halo-effect_r=0

1

3

2 2

3

Ohyb (difrakce) a interference

světla

Foto Pavla Vaacutelovaacute Bukovany 2015 Rozklad světla na CD - světlo žaacuterovky

Rozklad biacuteleacuteho světla na mřiacutežce

Pevnost poznaacuteniacute Olomouc 2015

Foto Pavla Vaacutelovaacute Olomouc 2015

Ohyb (difrakce) a interference

světla

Ohyb (difrakce) a interference

Difrakčniacute obrazec obsahuje světlaacute a tmavaacute miacutesta kteraacute se

střiacutedajiacute - světlaacute miacutesta nazyacutevaacuteme maxima a tmavaacute minima

Interference světla = sklaacutedaacuteniacute světelnyacutech vln

Předpoklad světlo musiacute byacutet koherentniacute

Podmiacutenka koherence

- paprsky musiacute miacutet stejnou frekvenci

- paprsky musiacute byacutet navzaacutejem rovnoběžneacute

- paprsky musiacute miacutet na sobě nezaacutevislyacute draacutehovyacute (faacutezovyacute) rozdiacutel

Vznik koherentniacuteho zaacuteřeniacute

rozděleniacutem světla

- buď odrazem pomociacute zrcadel

- nebo lomem pomociacute hranolů

Foto Pavla Vaacutelovaacute Praha 151 2016

Interference světla

stejnyacute způsob vlněniacute

(faacuteze je vzaacutejemně posunuta o sudeacute

naacutesobky λ2)

vznik interferenčniacuteho maxima

(konstruktivniacute interference)

Interference světla

asynchronniacute vlněniacute

(vzaacutejemně posunutaacute faacuteze

o licheacute naacutesobky λ2)

vznik interferenčniacuteho

minima

(destruktivniacute interference)

rarr zaacuteřeniacute zanikaacute

rarr zeslabeniacute zaacuteřeniacute

Interference dvou vrstev elektromagnetickeacuteho zaacuteřeniacute u Slunce

Čočky ndash zaacutekladniacute součaacutesti

mikroskopu

= průhlednaacute (nejčastěji skleněnaacute) tělesa omezenaacute

vypuklyacutemi nebo vydutyacutemi kulovityacutemi plochami lišiacuteciacute se od sveacuteho okoliacute odlišnyacutem indexem lomu

Zaacutekladniacute typy čoček

spojky (vypukleacute neboli konvexniacute)

rozptylky (vyduteacute konkaacutevniacute)

Pazourek 1975

Optickaacute osa ( o ) prochaacuteziacute středem čočky

Ohnisko ( F ) - bod do ktereacuteho se soustřeďujiacute paprsky probiacutehajiacuteciacute rovnoběžně s optickou osou

- 2 ohniska - předmětoveacute ohnisko ( F )

obrazoveacute ohnisko ( Facute )

- ohniskovaacute vzdaacutelenost ( f )

vzdaacutelenost ohniska od hlavniacute roviny proloženeacute středem čočky

- dvojnaacutesobnaacute ohniskovaacute vzdaacutelenost ( P Pacute )

Obrazovyacute prostor - prostor v němž vznikaacute obraz

Důležiteacute charakteristiky čočky

f

o

hlavniacute rovina

Pazourek 1975

V přiacutepadě velmi tenkeacute čočky

bull Obraz za optickou soustavou

rarr obraz s k u t e č n yacute

Skutečnyacute obraz je možneacute zachytit na stiacuteniacutetko

nebo na fotografickou desku neskutečnyacute nikoliv

bull Obraz před soustavou

rarr obraz n e s k u t e č n yacute (zdaacutenlivyacute virtuaacutelniacute)

Obraz skutečnyacute a neskutečnyacute

A ndash předmět Aacute- obraz předmětu

Upraveno podle Pazourek 1975

Francouz Augustin Jean Fresnel (1788-1827) [frenel]

Fresnelova čočka [frenelova]

- plochyacute tvar (zachovaacuteny pouze čaacutesti ktereacute měniacute směr chodu světelnyacutech paprsků)

- vyacuterazně nižšiacute hmotnost při zachovaacuteniacute podobnyacutech parametrů

Využitiacute infračidla pohybu semafory světlomety (majaacuteky) a reflektory (světla aut

divadelniacutech a filmovyacutech osvětlovaciacutech zařiacutezeniacute) zpětneacute projektory slunečniacute kolektory

na zaacutekladě tohoto principu takeacute vyacuteroba 3D displejů k mobilniacutem telefonům a televiziacutem

httpwwwmffcuniczverejnostzpravicky03_lupahtm

čočka na majaacuteku

Čočky v budoucnosti

Pokus o vyacuterobu tzv dokonaleacute čočky

Prototyp - upraveneacute tzv Maxwellovo rybiacute oko

- paprsky světla se v něm pohybujiacute po kružniciacutech a

na rozdiacutel od běžnyacutech čoček se při zobrazeniacute využijiacute

všechny paprsky

- superčočky využiacutevajiacute geometrie k tomu aby se světlo

soustředilo do oblasti menšiacute než je jeho vlnovaacute deacutelka

(zatiacutem se neviacute jak do čočky vyhovujiacuteciacutem způsobem

doveacutest světlo)

Využitiacute v budoucnu

mimo jineacute v pozorovaacuteniacute živyacutech buněk při velkeacutem zvětšeniacute

pomociacute obyčejneacuteho světla bez jejich narušeniacute

Viacutece viz Plaacutešek J Mikroskopy se superčočkami httpwwwvesmircz | Vesmiacuter 91 531 zaacuteřiacute 2012

Hranoly

- doplňky optickyacutech systeacutemů

- většinou tvar rovnostranneacuteho trojuacutehelniacuteka

- využiacutevajiacute uacuteplneacuteho odrazu

Funkce

- změna chodu paprsků pod různyacutemi uacutehly

- rozdvojeniacute paprsků

Pazourek 1975

Různeacute typy odraznyacutech hranolů

Hranoly

Různeacute typy hranolů

httplaserykvalitneczimagestext_25_zakladyoptiky1odrazne_hranolyjpg

Viz dichroickeacute zrcadlo u fluorescenčniacuteho mikroskopu

Chod paprsků v binokulaacuterniacutem tubusu

Pazourek 1975

Nikol = hranol z islandskeacuteho vaacutepence

rarr polarizace světla

Dvojlomnyacute vaacutepencovyacute

krystal

ř ndash paprsek řaacutednyacute (zanikaacute na začerněneacute ploše)

mř ndash paprsek mimořaacutednyacute (lineaacuterně polarizovanyacute

využit k osvětleniacute)

začerněnaacute plocha

Nikol

Pazourek 1975

vzduchovaacute štěrbina

- rychlost světla je

v různyacutech směrech různaacute

- uacutehel paprsku řaacutedneacuteho a

mimořaacutedneacuteho je odlišnyacute

(u Vikingů - slunečniacute kaacutemen

soacutelarsteinn)

Chod paprsků ve světlovodneacutem vlaacuteknu

Princip uacuteplnyacute odraz paprsku

- uvnitř skleněneacuteho vlaacutekna je opticky hustšiacute prostřediacute

- nutnost dostatečně silneacuteho světelneacuteho zdroje

Světlovodnaacute vlaacutekna

Pazourek 1975

Širokeacute využitiacute v praxi optickeacute kabely ndash přenos signaacutelů ve sdělovaciacute technice

světlovody umožňujiacuteciacute veacutest denniacute světlo vedeniacute světla u stereolup endoskopů hellip

Page 47: Světelná a elektronová mikroskopie...(AMF – Atomic Force Miroscope) - skenování povrchu materiálu pomocí hrotu zavěšeném na pružném výkyvném raménku, který je přitahován

Index lomu (n) některyacutech laacutetek

vzduch (vakuum) helliphellip 100 (vzduch 10002718)

voda helliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 133

plexisklo helliphelliphelliphelliphelliphellip 140 ndash 152

křemenneacute sklo helliphellip hellip 145 (čočka z křemene z Ninive ndash 7 stol přnl)

běžneacute sklo helliphelliphelliphelliphellip 151

cedrovyacute olej helliphelliphelliphelliphellip 151

imerzniacute olej Olympus hellip 1516 pro fluorescenci 1404

kanadskyacute balzaacutem helliphellip 150

krystal NaCl helliphelliphelliphellip 154

korunoveacute sklo helliphelliphelliphellip 145 ndash 156 (sodno-draselneacute bezolovnateacute)

flintoveacute sklo helliphelliphelliphellip 162 ndash 180 (olovnateacute)

diamant helliphelliphelliphelliphelliphelliphellip 242

Index lomu je vždy většiacute než 100

očniacute čočka hellip 1406

sklivec helliphelliphellip 1336

Odraz světla rovnyacutem zrcadlem (reflexe)

Zaacutekony

1 Paprsek dopadajiacuteciacute kolmice dopadu a paprsek odraženyacute

ležiacute v jedneacute rovině

2 Uacutehel odrazu se rovnaacute uacutehlu dopadu

Odraz a lom paprsku

k

Důležiteacute pro mikroskopii (astronomii)

- neniacute zaacutevislost na vlnoveacute deacutelce světla (λ)

- na rozdiacutel od lomu paprsků se světelneacute

paprsky se odraacutežejiacute stejně

Pazourek 1975

Zaacutekony

1 Paprsek dopadajiacuteciacute kolmice lomu a paprsek lomenyacute ležiacute v teacuteže rovině

Lom světla (refrakce)

2 Při přechodu z prostřediacute opticky řidšiacuteho do prostřediacute opticky hustšiacuteho se paprsek laacuteme ke kolmici (A)

a z prostřediacute opticky hustšiacuteho

do prostřediacute opticky řidšiacuteho

se laacuteme od kolmice (B)

(C a D) ndash uacuteplnyacute odraz při tzv

mezniacutem uacutehlu dopadu paprsku

v přiacutepadě lomu od kolmice (B)

(viz Nikol odrazneacute hranoly světlovodneacute vlaacutekno nebo fluorescenčniacute metoda TIRFM ndash totaacutelniacute odraz exitačniacuteho zaacuteřeniacute)

Pazourek 1975

Svatyacute Kryštof od

švyacutecarskeacuteho maliacuteře

Konrada Witze (kolem 1400ndash1446)

Witz byl jedniacutem z prvniacutech

maliacuteřů kteryacute namaloval

přesnyacute způsob odrazu

světla na vodě

Disperze (rozklad) světla

= důsledek zaacutevislosti rychlosti světla v laacutetkaacutech na frekvenci světla

(λ = c f)

světlo různyacutech barev (λ)

se laacuteme různě

(červeneacute se lomiacute meacuteně než modreacute)

Přiacuteklad disperze (rozkladu) světla

Primaacuterniacute a sekundaacuterniacute duha Severniacute Čechy Foto Pavla Vaacutelovaacute 2010

D u h a

Jeden z mnoha

optickyacutech

jevů (fotometeorů)

v atmosfeacuteře

Rok 312 nl - před bitvou byzantskeacuteho ciacutesaře Konstantina I (272-337) s

konkurenčniacutem ciacutesařem Maxentiem u bran Řiacutema (tzv bitva u Milvijskeacuteho mostu) se

na obloze objevily tři zaacuteřiacuteciacute křiacuteže (halovyacute sloup parheacutelia a parhelickyacute oblouk)

Konstantin bitvu proti přesile vyhraacutel sjednotil řiacuteši a povolil v niacute vyznaacutevat křesťanstviacute

Maleacute halo (22deg) (viz 1) vedlejšiacute slunce (2) a horniacute a dolniacute halovyacute sloup (3)

vznikajiacuteciacute odrazem a lomem světelnyacutech paprsků na krystalciacutech ledu

Lom světla a dějiny

httptmagazineblogsnytimescom20121126halo-effect_r=0

1

3

2 2

3

Ohyb (difrakce) a interference

světla

Foto Pavla Vaacutelovaacute Bukovany 2015 Rozklad světla na CD - světlo žaacuterovky

Rozklad biacuteleacuteho světla na mřiacutežce

Pevnost poznaacuteniacute Olomouc 2015

Foto Pavla Vaacutelovaacute Olomouc 2015

Ohyb (difrakce) a interference

světla

Ohyb (difrakce) a interference

Difrakčniacute obrazec obsahuje světlaacute a tmavaacute miacutesta kteraacute se

střiacutedajiacute - světlaacute miacutesta nazyacutevaacuteme maxima a tmavaacute minima

Interference světla = sklaacutedaacuteniacute světelnyacutech vln

Předpoklad světlo musiacute byacutet koherentniacute

Podmiacutenka koherence

- paprsky musiacute miacutet stejnou frekvenci

- paprsky musiacute byacutet navzaacutejem rovnoběžneacute

- paprsky musiacute miacutet na sobě nezaacutevislyacute draacutehovyacute (faacutezovyacute) rozdiacutel

Vznik koherentniacuteho zaacuteřeniacute

rozděleniacutem světla

- buď odrazem pomociacute zrcadel

- nebo lomem pomociacute hranolů

Foto Pavla Vaacutelovaacute Praha 151 2016

Interference světla

stejnyacute způsob vlněniacute

(faacuteze je vzaacutejemně posunuta o sudeacute

naacutesobky λ2)

vznik interferenčniacuteho maxima

(konstruktivniacute interference)

Interference světla

asynchronniacute vlněniacute

(vzaacutejemně posunutaacute faacuteze

o licheacute naacutesobky λ2)

vznik interferenčniacuteho

minima

(destruktivniacute interference)

rarr zaacuteřeniacute zanikaacute

rarr zeslabeniacute zaacuteřeniacute

Interference dvou vrstev elektromagnetickeacuteho zaacuteřeniacute u Slunce

Čočky ndash zaacutekladniacute součaacutesti

mikroskopu

= průhlednaacute (nejčastěji skleněnaacute) tělesa omezenaacute

vypuklyacutemi nebo vydutyacutemi kulovityacutemi plochami lišiacuteciacute se od sveacuteho okoliacute odlišnyacutem indexem lomu

Zaacutekladniacute typy čoček

spojky (vypukleacute neboli konvexniacute)

rozptylky (vyduteacute konkaacutevniacute)

Pazourek 1975

Optickaacute osa ( o ) prochaacuteziacute středem čočky

Ohnisko ( F ) - bod do ktereacuteho se soustřeďujiacute paprsky probiacutehajiacuteciacute rovnoběžně s optickou osou

- 2 ohniska - předmětoveacute ohnisko ( F )

obrazoveacute ohnisko ( Facute )

- ohniskovaacute vzdaacutelenost ( f )

vzdaacutelenost ohniska od hlavniacute roviny proloženeacute středem čočky

- dvojnaacutesobnaacute ohniskovaacute vzdaacutelenost ( P Pacute )

Obrazovyacute prostor - prostor v němž vznikaacute obraz

Důležiteacute charakteristiky čočky

f

o

hlavniacute rovina

Pazourek 1975

V přiacutepadě velmi tenkeacute čočky

bull Obraz za optickou soustavou

rarr obraz s k u t e č n yacute

Skutečnyacute obraz je možneacute zachytit na stiacuteniacutetko

nebo na fotografickou desku neskutečnyacute nikoliv

bull Obraz před soustavou

rarr obraz n e s k u t e č n yacute (zdaacutenlivyacute virtuaacutelniacute)

Obraz skutečnyacute a neskutečnyacute

A ndash předmět Aacute- obraz předmětu

Upraveno podle Pazourek 1975

Francouz Augustin Jean Fresnel (1788-1827) [frenel]

Fresnelova čočka [frenelova]

- plochyacute tvar (zachovaacuteny pouze čaacutesti ktereacute měniacute směr chodu světelnyacutech paprsků)

- vyacuterazně nižšiacute hmotnost při zachovaacuteniacute podobnyacutech parametrů

Využitiacute infračidla pohybu semafory světlomety (majaacuteky) a reflektory (světla aut

divadelniacutech a filmovyacutech osvětlovaciacutech zařiacutezeniacute) zpětneacute projektory slunečniacute kolektory

na zaacutekladě tohoto principu takeacute vyacuteroba 3D displejů k mobilniacutem telefonům a televiziacutem

httpwwwmffcuniczverejnostzpravicky03_lupahtm

čočka na majaacuteku

Čočky v budoucnosti

Pokus o vyacuterobu tzv dokonaleacute čočky

Prototyp - upraveneacute tzv Maxwellovo rybiacute oko

- paprsky světla se v něm pohybujiacute po kružniciacutech a

na rozdiacutel od běžnyacutech čoček se při zobrazeniacute využijiacute

všechny paprsky

- superčočky využiacutevajiacute geometrie k tomu aby se světlo

soustředilo do oblasti menšiacute než je jeho vlnovaacute deacutelka

(zatiacutem se neviacute jak do čočky vyhovujiacuteciacutem způsobem

doveacutest světlo)

Využitiacute v budoucnu

mimo jineacute v pozorovaacuteniacute živyacutech buněk při velkeacutem zvětšeniacute

pomociacute obyčejneacuteho světla bez jejich narušeniacute

Viacutece viz Plaacutešek J Mikroskopy se superčočkami httpwwwvesmircz | Vesmiacuter 91 531 zaacuteřiacute 2012

Hranoly

- doplňky optickyacutech systeacutemů

- většinou tvar rovnostranneacuteho trojuacutehelniacuteka

- využiacutevajiacute uacuteplneacuteho odrazu

Funkce

- změna chodu paprsků pod různyacutemi uacutehly

- rozdvojeniacute paprsků

Pazourek 1975

Různeacute typy odraznyacutech hranolů

Hranoly

Různeacute typy hranolů

httplaserykvalitneczimagestext_25_zakladyoptiky1odrazne_hranolyjpg

Viz dichroickeacute zrcadlo u fluorescenčniacuteho mikroskopu

Chod paprsků v binokulaacuterniacutem tubusu

Pazourek 1975

Nikol = hranol z islandskeacuteho vaacutepence

rarr polarizace světla

Dvojlomnyacute vaacutepencovyacute

krystal

ř ndash paprsek řaacutednyacute (zanikaacute na začerněneacute ploše)

mř ndash paprsek mimořaacutednyacute (lineaacuterně polarizovanyacute

využit k osvětleniacute)

začerněnaacute plocha

Nikol

Pazourek 1975

vzduchovaacute štěrbina

- rychlost světla je

v různyacutech směrech různaacute

- uacutehel paprsku řaacutedneacuteho a

mimořaacutedneacuteho je odlišnyacute

(u Vikingů - slunečniacute kaacutemen

soacutelarsteinn)

Chod paprsků ve světlovodneacutem vlaacuteknu

Princip uacuteplnyacute odraz paprsku

- uvnitř skleněneacuteho vlaacutekna je opticky hustšiacute prostřediacute

- nutnost dostatečně silneacuteho světelneacuteho zdroje

Světlovodnaacute vlaacutekna

Pazourek 1975

Širokeacute využitiacute v praxi optickeacute kabely ndash přenos signaacutelů ve sdělovaciacute technice

světlovody umožňujiacuteciacute veacutest denniacute světlo vedeniacute světla u stereolup endoskopů hellip

Page 48: Světelná a elektronová mikroskopie...(AMF – Atomic Force Miroscope) - skenování povrchu materiálu pomocí hrotu zavěšeném na pružném výkyvném raménku, který je přitahován

Odraz světla rovnyacutem zrcadlem (reflexe)

Zaacutekony

1 Paprsek dopadajiacuteciacute kolmice dopadu a paprsek odraženyacute

ležiacute v jedneacute rovině

2 Uacutehel odrazu se rovnaacute uacutehlu dopadu

Odraz a lom paprsku

k

Důležiteacute pro mikroskopii (astronomii)

- neniacute zaacutevislost na vlnoveacute deacutelce světla (λ)

- na rozdiacutel od lomu paprsků se světelneacute

paprsky se odraacutežejiacute stejně

Pazourek 1975

Zaacutekony

1 Paprsek dopadajiacuteciacute kolmice lomu a paprsek lomenyacute ležiacute v teacuteže rovině

Lom světla (refrakce)

2 Při přechodu z prostřediacute opticky řidšiacuteho do prostřediacute opticky hustšiacuteho se paprsek laacuteme ke kolmici (A)

a z prostřediacute opticky hustšiacuteho

do prostřediacute opticky řidšiacuteho

se laacuteme od kolmice (B)

(C a D) ndash uacuteplnyacute odraz při tzv

mezniacutem uacutehlu dopadu paprsku

v přiacutepadě lomu od kolmice (B)

(viz Nikol odrazneacute hranoly světlovodneacute vlaacutekno nebo fluorescenčniacute metoda TIRFM ndash totaacutelniacute odraz exitačniacuteho zaacuteřeniacute)

Pazourek 1975

Svatyacute Kryštof od

švyacutecarskeacuteho maliacuteře

Konrada Witze (kolem 1400ndash1446)

Witz byl jedniacutem z prvniacutech

maliacuteřů kteryacute namaloval

přesnyacute způsob odrazu

světla na vodě

Disperze (rozklad) světla

= důsledek zaacutevislosti rychlosti světla v laacutetkaacutech na frekvenci světla

(λ = c f)

světlo různyacutech barev (λ)

se laacuteme různě

(červeneacute se lomiacute meacuteně než modreacute)

Přiacuteklad disperze (rozkladu) světla

Primaacuterniacute a sekundaacuterniacute duha Severniacute Čechy Foto Pavla Vaacutelovaacute 2010

D u h a

Jeden z mnoha

optickyacutech

jevů (fotometeorů)

v atmosfeacuteře

Rok 312 nl - před bitvou byzantskeacuteho ciacutesaře Konstantina I (272-337) s

konkurenčniacutem ciacutesařem Maxentiem u bran Řiacutema (tzv bitva u Milvijskeacuteho mostu) se

na obloze objevily tři zaacuteřiacuteciacute křiacuteže (halovyacute sloup parheacutelia a parhelickyacute oblouk)

Konstantin bitvu proti přesile vyhraacutel sjednotil řiacuteši a povolil v niacute vyznaacutevat křesťanstviacute

Maleacute halo (22deg) (viz 1) vedlejšiacute slunce (2) a horniacute a dolniacute halovyacute sloup (3)

vznikajiacuteciacute odrazem a lomem světelnyacutech paprsků na krystalciacutech ledu

Lom světla a dějiny

httptmagazineblogsnytimescom20121126halo-effect_r=0

1

3

2 2

3

Ohyb (difrakce) a interference

světla

Foto Pavla Vaacutelovaacute Bukovany 2015 Rozklad světla na CD - světlo žaacuterovky

Rozklad biacuteleacuteho světla na mřiacutežce

Pevnost poznaacuteniacute Olomouc 2015

Foto Pavla Vaacutelovaacute Olomouc 2015

Ohyb (difrakce) a interference

světla

Ohyb (difrakce) a interference

Difrakčniacute obrazec obsahuje světlaacute a tmavaacute miacutesta kteraacute se

střiacutedajiacute - světlaacute miacutesta nazyacutevaacuteme maxima a tmavaacute minima

Interference světla = sklaacutedaacuteniacute světelnyacutech vln

Předpoklad světlo musiacute byacutet koherentniacute

Podmiacutenka koherence

- paprsky musiacute miacutet stejnou frekvenci

- paprsky musiacute byacutet navzaacutejem rovnoběžneacute

- paprsky musiacute miacutet na sobě nezaacutevislyacute draacutehovyacute (faacutezovyacute) rozdiacutel

Vznik koherentniacuteho zaacuteřeniacute

rozděleniacutem světla

- buď odrazem pomociacute zrcadel

- nebo lomem pomociacute hranolů

Foto Pavla Vaacutelovaacute Praha 151 2016

Interference světla

stejnyacute způsob vlněniacute

(faacuteze je vzaacutejemně posunuta o sudeacute

naacutesobky λ2)

vznik interferenčniacuteho maxima

(konstruktivniacute interference)

Interference světla

asynchronniacute vlněniacute

(vzaacutejemně posunutaacute faacuteze

o licheacute naacutesobky λ2)

vznik interferenčniacuteho

minima

(destruktivniacute interference)

rarr zaacuteřeniacute zanikaacute

rarr zeslabeniacute zaacuteřeniacute

Interference dvou vrstev elektromagnetickeacuteho zaacuteřeniacute u Slunce

Čočky ndash zaacutekladniacute součaacutesti

mikroskopu

= průhlednaacute (nejčastěji skleněnaacute) tělesa omezenaacute

vypuklyacutemi nebo vydutyacutemi kulovityacutemi plochami lišiacuteciacute se od sveacuteho okoliacute odlišnyacutem indexem lomu

Zaacutekladniacute typy čoček

spojky (vypukleacute neboli konvexniacute)

rozptylky (vyduteacute konkaacutevniacute)

Pazourek 1975

Optickaacute osa ( o ) prochaacuteziacute středem čočky

Ohnisko ( F ) - bod do ktereacuteho se soustřeďujiacute paprsky probiacutehajiacuteciacute rovnoběžně s optickou osou

- 2 ohniska - předmětoveacute ohnisko ( F )

obrazoveacute ohnisko ( Facute )

- ohniskovaacute vzdaacutelenost ( f )

vzdaacutelenost ohniska od hlavniacute roviny proloženeacute středem čočky

- dvojnaacutesobnaacute ohniskovaacute vzdaacutelenost ( P Pacute )

Obrazovyacute prostor - prostor v němž vznikaacute obraz

Důležiteacute charakteristiky čočky

f

o

hlavniacute rovina

Pazourek 1975

V přiacutepadě velmi tenkeacute čočky

bull Obraz za optickou soustavou

rarr obraz s k u t e č n yacute

Skutečnyacute obraz je možneacute zachytit na stiacuteniacutetko

nebo na fotografickou desku neskutečnyacute nikoliv

bull Obraz před soustavou

rarr obraz n e s k u t e č n yacute (zdaacutenlivyacute virtuaacutelniacute)

Obraz skutečnyacute a neskutečnyacute

A ndash předmět Aacute- obraz předmětu

Upraveno podle Pazourek 1975

Francouz Augustin Jean Fresnel (1788-1827) [frenel]

Fresnelova čočka [frenelova]

- plochyacute tvar (zachovaacuteny pouze čaacutesti ktereacute měniacute směr chodu světelnyacutech paprsků)

- vyacuterazně nižšiacute hmotnost při zachovaacuteniacute podobnyacutech parametrů

Využitiacute infračidla pohybu semafory světlomety (majaacuteky) a reflektory (světla aut

divadelniacutech a filmovyacutech osvětlovaciacutech zařiacutezeniacute) zpětneacute projektory slunečniacute kolektory

na zaacutekladě tohoto principu takeacute vyacuteroba 3D displejů k mobilniacutem telefonům a televiziacutem

httpwwwmffcuniczverejnostzpravicky03_lupahtm

čočka na majaacuteku

Čočky v budoucnosti

Pokus o vyacuterobu tzv dokonaleacute čočky

Prototyp - upraveneacute tzv Maxwellovo rybiacute oko

- paprsky světla se v něm pohybujiacute po kružniciacutech a

na rozdiacutel od běžnyacutech čoček se při zobrazeniacute využijiacute

všechny paprsky

- superčočky využiacutevajiacute geometrie k tomu aby se světlo

soustředilo do oblasti menšiacute než je jeho vlnovaacute deacutelka

(zatiacutem se neviacute jak do čočky vyhovujiacuteciacutem způsobem

doveacutest světlo)

Využitiacute v budoucnu

mimo jineacute v pozorovaacuteniacute živyacutech buněk při velkeacutem zvětšeniacute

pomociacute obyčejneacuteho světla bez jejich narušeniacute

Viacutece viz Plaacutešek J Mikroskopy se superčočkami httpwwwvesmircz | Vesmiacuter 91 531 zaacuteřiacute 2012

Hranoly

- doplňky optickyacutech systeacutemů

- většinou tvar rovnostranneacuteho trojuacutehelniacuteka

- využiacutevajiacute uacuteplneacuteho odrazu

Funkce

- změna chodu paprsků pod různyacutemi uacutehly

- rozdvojeniacute paprsků

Pazourek 1975

Různeacute typy odraznyacutech hranolů

Hranoly

Různeacute typy hranolů

httplaserykvalitneczimagestext_25_zakladyoptiky1odrazne_hranolyjpg

Viz dichroickeacute zrcadlo u fluorescenčniacuteho mikroskopu

Chod paprsků v binokulaacuterniacutem tubusu

Pazourek 1975

Nikol = hranol z islandskeacuteho vaacutepence

rarr polarizace světla

Dvojlomnyacute vaacutepencovyacute

krystal

ř ndash paprsek řaacutednyacute (zanikaacute na začerněneacute ploše)

mř ndash paprsek mimořaacutednyacute (lineaacuterně polarizovanyacute

využit k osvětleniacute)

začerněnaacute plocha

Nikol

Pazourek 1975

vzduchovaacute štěrbina

- rychlost světla je

v různyacutech směrech různaacute

- uacutehel paprsku řaacutedneacuteho a

mimořaacutedneacuteho je odlišnyacute

(u Vikingů - slunečniacute kaacutemen

soacutelarsteinn)

Chod paprsků ve světlovodneacutem vlaacuteknu

Princip uacuteplnyacute odraz paprsku

- uvnitř skleněneacuteho vlaacutekna je opticky hustšiacute prostřediacute

- nutnost dostatečně silneacuteho světelneacuteho zdroje

Světlovodnaacute vlaacutekna

Pazourek 1975

Širokeacute využitiacute v praxi optickeacute kabely ndash přenos signaacutelů ve sdělovaciacute technice

světlovody umožňujiacuteciacute veacutest denniacute světlo vedeniacute světla u stereolup endoskopů hellip

Page 49: Světelná a elektronová mikroskopie...(AMF – Atomic Force Miroscope) - skenování povrchu materiálu pomocí hrotu zavěšeném na pružném výkyvném raménku, který je přitahován

Zaacutekony

1 Paprsek dopadajiacuteciacute kolmice lomu a paprsek lomenyacute ležiacute v teacuteže rovině

Lom světla (refrakce)

2 Při přechodu z prostřediacute opticky řidšiacuteho do prostřediacute opticky hustšiacuteho se paprsek laacuteme ke kolmici (A)

a z prostřediacute opticky hustšiacuteho

do prostřediacute opticky řidšiacuteho

se laacuteme od kolmice (B)

(C a D) ndash uacuteplnyacute odraz při tzv

mezniacutem uacutehlu dopadu paprsku

v přiacutepadě lomu od kolmice (B)

(viz Nikol odrazneacute hranoly světlovodneacute vlaacutekno nebo fluorescenčniacute metoda TIRFM ndash totaacutelniacute odraz exitačniacuteho zaacuteřeniacute)

Pazourek 1975

Svatyacute Kryštof od

švyacutecarskeacuteho maliacuteře

Konrada Witze (kolem 1400ndash1446)

Witz byl jedniacutem z prvniacutech

maliacuteřů kteryacute namaloval

přesnyacute způsob odrazu

světla na vodě

Disperze (rozklad) světla

= důsledek zaacutevislosti rychlosti světla v laacutetkaacutech na frekvenci světla

(λ = c f)

světlo různyacutech barev (λ)

se laacuteme různě

(červeneacute se lomiacute meacuteně než modreacute)

Přiacuteklad disperze (rozkladu) světla

Primaacuterniacute a sekundaacuterniacute duha Severniacute Čechy Foto Pavla Vaacutelovaacute 2010

D u h a

Jeden z mnoha

optickyacutech

jevů (fotometeorů)

v atmosfeacuteře

Rok 312 nl - před bitvou byzantskeacuteho ciacutesaře Konstantina I (272-337) s

konkurenčniacutem ciacutesařem Maxentiem u bran Řiacutema (tzv bitva u Milvijskeacuteho mostu) se

na obloze objevily tři zaacuteřiacuteciacute křiacuteže (halovyacute sloup parheacutelia a parhelickyacute oblouk)

Konstantin bitvu proti přesile vyhraacutel sjednotil řiacuteši a povolil v niacute vyznaacutevat křesťanstviacute

Maleacute halo (22deg) (viz 1) vedlejšiacute slunce (2) a horniacute a dolniacute halovyacute sloup (3)

vznikajiacuteciacute odrazem a lomem světelnyacutech paprsků na krystalciacutech ledu

Lom světla a dějiny

httptmagazineblogsnytimescom20121126halo-effect_r=0

1

3

2 2

3

Ohyb (difrakce) a interference

světla

Foto Pavla Vaacutelovaacute Bukovany 2015 Rozklad světla na CD - světlo žaacuterovky

Rozklad biacuteleacuteho světla na mřiacutežce

Pevnost poznaacuteniacute Olomouc 2015

Foto Pavla Vaacutelovaacute Olomouc 2015

Ohyb (difrakce) a interference

světla

Ohyb (difrakce) a interference

Difrakčniacute obrazec obsahuje světlaacute a tmavaacute miacutesta kteraacute se

střiacutedajiacute - světlaacute miacutesta nazyacutevaacuteme maxima a tmavaacute minima

Interference světla = sklaacutedaacuteniacute světelnyacutech vln

Předpoklad světlo musiacute byacutet koherentniacute

Podmiacutenka koherence

- paprsky musiacute miacutet stejnou frekvenci

- paprsky musiacute byacutet navzaacutejem rovnoběžneacute

- paprsky musiacute miacutet na sobě nezaacutevislyacute draacutehovyacute (faacutezovyacute) rozdiacutel

Vznik koherentniacuteho zaacuteřeniacute

rozděleniacutem světla

- buď odrazem pomociacute zrcadel

- nebo lomem pomociacute hranolů

Foto Pavla Vaacutelovaacute Praha 151 2016

Interference světla

stejnyacute způsob vlněniacute

(faacuteze je vzaacutejemně posunuta o sudeacute

naacutesobky λ2)

vznik interferenčniacuteho maxima

(konstruktivniacute interference)

Interference světla

asynchronniacute vlněniacute

(vzaacutejemně posunutaacute faacuteze

o licheacute naacutesobky λ2)

vznik interferenčniacuteho

minima

(destruktivniacute interference)

rarr zaacuteřeniacute zanikaacute

rarr zeslabeniacute zaacuteřeniacute

Interference dvou vrstev elektromagnetickeacuteho zaacuteřeniacute u Slunce

Čočky ndash zaacutekladniacute součaacutesti

mikroskopu

= průhlednaacute (nejčastěji skleněnaacute) tělesa omezenaacute

vypuklyacutemi nebo vydutyacutemi kulovityacutemi plochami lišiacuteciacute se od sveacuteho okoliacute odlišnyacutem indexem lomu

Zaacutekladniacute typy čoček

spojky (vypukleacute neboli konvexniacute)

rozptylky (vyduteacute konkaacutevniacute)

Pazourek 1975

Optickaacute osa ( o ) prochaacuteziacute středem čočky

Ohnisko ( F ) - bod do ktereacuteho se soustřeďujiacute paprsky probiacutehajiacuteciacute rovnoběžně s optickou osou

- 2 ohniska - předmětoveacute ohnisko ( F )

obrazoveacute ohnisko ( Facute )

- ohniskovaacute vzdaacutelenost ( f )

vzdaacutelenost ohniska od hlavniacute roviny proloženeacute středem čočky

- dvojnaacutesobnaacute ohniskovaacute vzdaacutelenost ( P Pacute )

Obrazovyacute prostor - prostor v němž vznikaacute obraz

Důležiteacute charakteristiky čočky

f

o

hlavniacute rovina

Pazourek 1975

V přiacutepadě velmi tenkeacute čočky

bull Obraz za optickou soustavou

rarr obraz s k u t e č n yacute

Skutečnyacute obraz je možneacute zachytit na stiacuteniacutetko

nebo na fotografickou desku neskutečnyacute nikoliv

bull Obraz před soustavou

rarr obraz n e s k u t e č n yacute (zdaacutenlivyacute virtuaacutelniacute)

Obraz skutečnyacute a neskutečnyacute

A ndash předmět Aacute- obraz předmětu

Upraveno podle Pazourek 1975

Francouz Augustin Jean Fresnel (1788-1827) [frenel]

Fresnelova čočka [frenelova]

- plochyacute tvar (zachovaacuteny pouze čaacutesti ktereacute měniacute směr chodu světelnyacutech paprsků)

- vyacuterazně nižšiacute hmotnost při zachovaacuteniacute podobnyacutech parametrů

Využitiacute infračidla pohybu semafory světlomety (majaacuteky) a reflektory (světla aut

divadelniacutech a filmovyacutech osvětlovaciacutech zařiacutezeniacute) zpětneacute projektory slunečniacute kolektory

na zaacutekladě tohoto principu takeacute vyacuteroba 3D displejů k mobilniacutem telefonům a televiziacutem

httpwwwmffcuniczverejnostzpravicky03_lupahtm

čočka na majaacuteku

Čočky v budoucnosti

Pokus o vyacuterobu tzv dokonaleacute čočky

Prototyp - upraveneacute tzv Maxwellovo rybiacute oko

- paprsky světla se v něm pohybujiacute po kružniciacutech a

na rozdiacutel od běžnyacutech čoček se při zobrazeniacute využijiacute

všechny paprsky

- superčočky využiacutevajiacute geometrie k tomu aby se světlo

soustředilo do oblasti menšiacute než je jeho vlnovaacute deacutelka

(zatiacutem se neviacute jak do čočky vyhovujiacuteciacutem způsobem

doveacutest světlo)

Využitiacute v budoucnu

mimo jineacute v pozorovaacuteniacute živyacutech buněk při velkeacutem zvětšeniacute

pomociacute obyčejneacuteho světla bez jejich narušeniacute

Viacutece viz Plaacutešek J Mikroskopy se superčočkami httpwwwvesmircz | Vesmiacuter 91 531 zaacuteřiacute 2012

Hranoly

- doplňky optickyacutech systeacutemů

- většinou tvar rovnostranneacuteho trojuacutehelniacuteka

- využiacutevajiacute uacuteplneacuteho odrazu

Funkce

- změna chodu paprsků pod různyacutemi uacutehly

- rozdvojeniacute paprsků

Pazourek 1975

Různeacute typy odraznyacutech hranolů

Hranoly

Různeacute typy hranolů

httplaserykvalitneczimagestext_25_zakladyoptiky1odrazne_hranolyjpg

Viz dichroickeacute zrcadlo u fluorescenčniacuteho mikroskopu

Chod paprsků v binokulaacuterniacutem tubusu

Pazourek 1975

Nikol = hranol z islandskeacuteho vaacutepence

rarr polarizace světla

Dvojlomnyacute vaacutepencovyacute

krystal

ř ndash paprsek řaacutednyacute (zanikaacute na začerněneacute ploše)

mř ndash paprsek mimořaacutednyacute (lineaacuterně polarizovanyacute

využit k osvětleniacute)

začerněnaacute plocha

Nikol

Pazourek 1975

vzduchovaacute štěrbina

- rychlost světla je

v různyacutech směrech různaacute

- uacutehel paprsku řaacutedneacuteho a

mimořaacutedneacuteho je odlišnyacute

(u Vikingů - slunečniacute kaacutemen

soacutelarsteinn)

Chod paprsků ve světlovodneacutem vlaacuteknu

Princip uacuteplnyacute odraz paprsku

- uvnitř skleněneacuteho vlaacutekna je opticky hustšiacute prostřediacute

- nutnost dostatečně silneacuteho světelneacuteho zdroje

Světlovodnaacute vlaacutekna

Pazourek 1975

Širokeacute využitiacute v praxi optickeacute kabely ndash přenos signaacutelů ve sdělovaciacute technice

světlovody umožňujiacuteciacute veacutest denniacute světlo vedeniacute světla u stereolup endoskopů hellip

Page 50: Světelná a elektronová mikroskopie...(AMF – Atomic Force Miroscope) - skenování povrchu materiálu pomocí hrotu zavěšeném na pružném výkyvném raménku, který je přitahován

Svatyacute Kryštof od

švyacutecarskeacuteho maliacuteře

Konrada Witze (kolem 1400ndash1446)

Witz byl jedniacutem z prvniacutech

maliacuteřů kteryacute namaloval

přesnyacute způsob odrazu

světla na vodě

Disperze (rozklad) světla

= důsledek zaacutevislosti rychlosti světla v laacutetkaacutech na frekvenci světla

(λ = c f)

světlo různyacutech barev (λ)

se laacuteme různě

(červeneacute se lomiacute meacuteně než modreacute)

Přiacuteklad disperze (rozkladu) světla

Primaacuterniacute a sekundaacuterniacute duha Severniacute Čechy Foto Pavla Vaacutelovaacute 2010

D u h a

Jeden z mnoha

optickyacutech

jevů (fotometeorů)

v atmosfeacuteře

Rok 312 nl - před bitvou byzantskeacuteho ciacutesaře Konstantina I (272-337) s

konkurenčniacutem ciacutesařem Maxentiem u bran Řiacutema (tzv bitva u Milvijskeacuteho mostu) se

na obloze objevily tři zaacuteřiacuteciacute křiacuteže (halovyacute sloup parheacutelia a parhelickyacute oblouk)

Konstantin bitvu proti přesile vyhraacutel sjednotil řiacuteši a povolil v niacute vyznaacutevat křesťanstviacute

Maleacute halo (22deg) (viz 1) vedlejšiacute slunce (2) a horniacute a dolniacute halovyacute sloup (3)

vznikajiacuteciacute odrazem a lomem světelnyacutech paprsků na krystalciacutech ledu

Lom světla a dějiny

httptmagazineblogsnytimescom20121126halo-effect_r=0

1

3

2 2

3

Ohyb (difrakce) a interference

světla

Foto Pavla Vaacutelovaacute Bukovany 2015 Rozklad světla na CD - světlo žaacuterovky

Rozklad biacuteleacuteho světla na mřiacutežce

Pevnost poznaacuteniacute Olomouc 2015

Foto Pavla Vaacutelovaacute Olomouc 2015

Ohyb (difrakce) a interference

světla

Ohyb (difrakce) a interference

Difrakčniacute obrazec obsahuje světlaacute a tmavaacute miacutesta kteraacute se

střiacutedajiacute - světlaacute miacutesta nazyacutevaacuteme maxima a tmavaacute minima

Interference světla = sklaacutedaacuteniacute světelnyacutech vln

Předpoklad světlo musiacute byacutet koherentniacute

Podmiacutenka koherence

- paprsky musiacute miacutet stejnou frekvenci

- paprsky musiacute byacutet navzaacutejem rovnoběžneacute

- paprsky musiacute miacutet na sobě nezaacutevislyacute draacutehovyacute (faacutezovyacute) rozdiacutel

Vznik koherentniacuteho zaacuteřeniacute

rozděleniacutem světla

- buď odrazem pomociacute zrcadel

- nebo lomem pomociacute hranolů

Foto Pavla Vaacutelovaacute Praha 151 2016

Interference světla

stejnyacute způsob vlněniacute

(faacuteze je vzaacutejemně posunuta o sudeacute

naacutesobky λ2)

vznik interferenčniacuteho maxima

(konstruktivniacute interference)

Interference světla

asynchronniacute vlněniacute

(vzaacutejemně posunutaacute faacuteze

o licheacute naacutesobky λ2)

vznik interferenčniacuteho

minima

(destruktivniacute interference)

rarr zaacuteřeniacute zanikaacute

rarr zeslabeniacute zaacuteřeniacute

Interference dvou vrstev elektromagnetickeacuteho zaacuteřeniacute u Slunce

Čočky ndash zaacutekladniacute součaacutesti

mikroskopu

= průhlednaacute (nejčastěji skleněnaacute) tělesa omezenaacute

vypuklyacutemi nebo vydutyacutemi kulovityacutemi plochami lišiacuteciacute se od sveacuteho okoliacute odlišnyacutem indexem lomu

Zaacutekladniacute typy čoček

spojky (vypukleacute neboli konvexniacute)

rozptylky (vyduteacute konkaacutevniacute)

Pazourek 1975

Optickaacute osa ( o ) prochaacuteziacute středem čočky

Ohnisko ( F ) - bod do ktereacuteho se soustřeďujiacute paprsky probiacutehajiacuteciacute rovnoběžně s optickou osou

- 2 ohniska - předmětoveacute ohnisko ( F )

obrazoveacute ohnisko ( Facute )

- ohniskovaacute vzdaacutelenost ( f )

vzdaacutelenost ohniska od hlavniacute roviny proloženeacute středem čočky

- dvojnaacutesobnaacute ohniskovaacute vzdaacutelenost ( P Pacute )

Obrazovyacute prostor - prostor v němž vznikaacute obraz

Důležiteacute charakteristiky čočky

f

o

hlavniacute rovina

Pazourek 1975

V přiacutepadě velmi tenkeacute čočky

bull Obraz za optickou soustavou

rarr obraz s k u t e č n yacute

Skutečnyacute obraz je možneacute zachytit na stiacuteniacutetko

nebo na fotografickou desku neskutečnyacute nikoliv

bull Obraz před soustavou

rarr obraz n e s k u t e č n yacute (zdaacutenlivyacute virtuaacutelniacute)

Obraz skutečnyacute a neskutečnyacute

A ndash předmět Aacute- obraz předmětu

Upraveno podle Pazourek 1975

Francouz Augustin Jean Fresnel (1788-1827) [frenel]

Fresnelova čočka [frenelova]

- plochyacute tvar (zachovaacuteny pouze čaacutesti ktereacute měniacute směr chodu světelnyacutech paprsků)

- vyacuterazně nižšiacute hmotnost při zachovaacuteniacute podobnyacutech parametrů

Využitiacute infračidla pohybu semafory světlomety (majaacuteky) a reflektory (světla aut

divadelniacutech a filmovyacutech osvětlovaciacutech zařiacutezeniacute) zpětneacute projektory slunečniacute kolektory

na zaacutekladě tohoto principu takeacute vyacuteroba 3D displejů k mobilniacutem telefonům a televiziacutem

httpwwwmffcuniczverejnostzpravicky03_lupahtm

čočka na majaacuteku

Čočky v budoucnosti

Pokus o vyacuterobu tzv dokonaleacute čočky

Prototyp - upraveneacute tzv Maxwellovo rybiacute oko

- paprsky světla se v něm pohybujiacute po kružniciacutech a

na rozdiacutel od běžnyacutech čoček se při zobrazeniacute využijiacute

všechny paprsky

- superčočky využiacutevajiacute geometrie k tomu aby se světlo

soustředilo do oblasti menšiacute než je jeho vlnovaacute deacutelka

(zatiacutem se neviacute jak do čočky vyhovujiacuteciacutem způsobem

doveacutest světlo)

Využitiacute v budoucnu

mimo jineacute v pozorovaacuteniacute živyacutech buněk při velkeacutem zvětšeniacute

pomociacute obyčejneacuteho světla bez jejich narušeniacute

Viacutece viz Plaacutešek J Mikroskopy se superčočkami httpwwwvesmircz | Vesmiacuter 91 531 zaacuteřiacute 2012

Hranoly

- doplňky optickyacutech systeacutemů

- většinou tvar rovnostranneacuteho trojuacutehelniacuteka

- využiacutevajiacute uacuteplneacuteho odrazu

Funkce

- změna chodu paprsků pod různyacutemi uacutehly

- rozdvojeniacute paprsků

Pazourek 1975

Různeacute typy odraznyacutech hranolů

Hranoly

Různeacute typy hranolů

httplaserykvalitneczimagestext_25_zakladyoptiky1odrazne_hranolyjpg

Viz dichroickeacute zrcadlo u fluorescenčniacuteho mikroskopu

Chod paprsků v binokulaacuterniacutem tubusu

Pazourek 1975

Nikol = hranol z islandskeacuteho vaacutepence

rarr polarizace světla

Dvojlomnyacute vaacutepencovyacute

krystal

ř ndash paprsek řaacutednyacute (zanikaacute na začerněneacute ploše)

mř ndash paprsek mimořaacutednyacute (lineaacuterně polarizovanyacute

využit k osvětleniacute)

začerněnaacute plocha

Nikol

Pazourek 1975

vzduchovaacute štěrbina

- rychlost světla je

v různyacutech směrech různaacute

- uacutehel paprsku řaacutedneacuteho a

mimořaacutedneacuteho je odlišnyacute

(u Vikingů - slunečniacute kaacutemen

soacutelarsteinn)

Chod paprsků ve světlovodneacutem vlaacuteknu

Princip uacuteplnyacute odraz paprsku

- uvnitř skleněneacuteho vlaacutekna je opticky hustšiacute prostřediacute

- nutnost dostatečně silneacuteho světelneacuteho zdroje

Světlovodnaacute vlaacutekna

Pazourek 1975

Širokeacute využitiacute v praxi optickeacute kabely ndash přenos signaacutelů ve sdělovaciacute technice

světlovody umožňujiacuteciacute veacutest denniacute světlo vedeniacute světla u stereolup endoskopů hellip

Page 51: Světelná a elektronová mikroskopie...(AMF – Atomic Force Miroscope) - skenování povrchu materiálu pomocí hrotu zavěšeném na pružném výkyvném raménku, který je přitahován

Disperze (rozklad) světla

= důsledek zaacutevislosti rychlosti světla v laacutetkaacutech na frekvenci světla

(λ = c f)

světlo různyacutech barev (λ)

se laacuteme různě

(červeneacute se lomiacute meacuteně než modreacute)

Přiacuteklad disperze (rozkladu) světla

Primaacuterniacute a sekundaacuterniacute duha Severniacute Čechy Foto Pavla Vaacutelovaacute 2010

D u h a

Jeden z mnoha

optickyacutech

jevů (fotometeorů)

v atmosfeacuteře

Rok 312 nl - před bitvou byzantskeacuteho ciacutesaře Konstantina I (272-337) s

konkurenčniacutem ciacutesařem Maxentiem u bran Řiacutema (tzv bitva u Milvijskeacuteho mostu) se

na obloze objevily tři zaacuteřiacuteciacute křiacuteže (halovyacute sloup parheacutelia a parhelickyacute oblouk)

Konstantin bitvu proti přesile vyhraacutel sjednotil řiacuteši a povolil v niacute vyznaacutevat křesťanstviacute

Maleacute halo (22deg) (viz 1) vedlejšiacute slunce (2) a horniacute a dolniacute halovyacute sloup (3)

vznikajiacuteciacute odrazem a lomem světelnyacutech paprsků na krystalciacutech ledu

Lom světla a dějiny

httptmagazineblogsnytimescom20121126halo-effect_r=0

1

3

2 2

3

Ohyb (difrakce) a interference

světla

Foto Pavla Vaacutelovaacute Bukovany 2015 Rozklad světla na CD - světlo žaacuterovky

Rozklad biacuteleacuteho světla na mřiacutežce

Pevnost poznaacuteniacute Olomouc 2015

Foto Pavla Vaacutelovaacute Olomouc 2015

Ohyb (difrakce) a interference

světla

Ohyb (difrakce) a interference

Difrakčniacute obrazec obsahuje světlaacute a tmavaacute miacutesta kteraacute se

střiacutedajiacute - světlaacute miacutesta nazyacutevaacuteme maxima a tmavaacute minima

Interference světla = sklaacutedaacuteniacute světelnyacutech vln

Předpoklad světlo musiacute byacutet koherentniacute

Podmiacutenka koherence

- paprsky musiacute miacutet stejnou frekvenci

- paprsky musiacute byacutet navzaacutejem rovnoběžneacute

- paprsky musiacute miacutet na sobě nezaacutevislyacute draacutehovyacute (faacutezovyacute) rozdiacutel

Vznik koherentniacuteho zaacuteřeniacute

rozděleniacutem světla

- buď odrazem pomociacute zrcadel

- nebo lomem pomociacute hranolů

Foto Pavla Vaacutelovaacute Praha 151 2016

Interference světla

stejnyacute způsob vlněniacute

(faacuteze je vzaacutejemně posunuta o sudeacute

naacutesobky λ2)

vznik interferenčniacuteho maxima

(konstruktivniacute interference)

Interference světla

asynchronniacute vlněniacute

(vzaacutejemně posunutaacute faacuteze

o licheacute naacutesobky λ2)

vznik interferenčniacuteho

minima

(destruktivniacute interference)

rarr zaacuteřeniacute zanikaacute

rarr zeslabeniacute zaacuteřeniacute

Interference dvou vrstev elektromagnetickeacuteho zaacuteřeniacute u Slunce

Čočky ndash zaacutekladniacute součaacutesti

mikroskopu

= průhlednaacute (nejčastěji skleněnaacute) tělesa omezenaacute

vypuklyacutemi nebo vydutyacutemi kulovityacutemi plochami lišiacuteciacute se od sveacuteho okoliacute odlišnyacutem indexem lomu

Zaacutekladniacute typy čoček

spojky (vypukleacute neboli konvexniacute)

rozptylky (vyduteacute konkaacutevniacute)

Pazourek 1975

Optickaacute osa ( o ) prochaacuteziacute středem čočky

Ohnisko ( F ) - bod do ktereacuteho se soustřeďujiacute paprsky probiacutehajiacuteciacute rovnoběžně s optickou osou

- 2 ohniska - předmětoveacute ohnisko ( F )

obrazoveacute ohnisko ( Facute )

- ohniskovaacute vzdaacutelenost ( f )

vzdaacutelenost ohniska od hlavniacute roviny proloženeacute středem čočky

- dvojnaacutesobnaacute ohniskovaacute vzdaacutelenost ( P Pacute )

Obrazovyacute prostor - prostor v němž vznikaacute obraz

Důležiteacute charakteristiky čočky

f

o

hlavniacute rovina

Pazourek 1975

V přiacutepadě velmi tenkeacute čočky

bull Obraz za optickou soustavou

rarr obraz s k u t e č n yacute

Skutečnyacute obraz je možneacute zachytit na stiacuteniacutetko

nebo na fotografickou desku neskutečnyacute nikoliv

bull Obraz před soustavou

rarr obraz n e s k u t e č n yacute (zdaacutenlivyacute virtuaacutelniacute)

Obraz skutečnyacute a neskutečnyacute

A ndash předmět Aacute- obraz předmětu

Upraveno podle Pazourek 1975

Francouz Augustin Jean Fresnel (1788-1827) [frenel]

Fresnelova čočka [frenelova]

- plochyacute tvar (zachovaacuteny pouze čaacutesti ktereacute měniacute směr chodu světelnyacutech paprsků)

- vyacuterazně nižšiacute hmotnost při zachovaacuteniacute podobnyacutech parametrů

Využitiacute infračidla pohybu semafory světlomety (majaacuteky) a reflektory (světla aut

divadelniacutech a filmovyacutech osvětlovaciacutech zařiacutezeniacute) zpětneacute projektory slunečniacute kolektory

na zaacutekladě tohoto principu takeacute vyacuteroba 3D displejů k mobilniacutem telefonům a televiziacutem

httpwwwmffcuniczverejnostzpravicky03_lupahtm

čočka na majaacuteku

Čočky v budoucnosti

Pokus o vyacuterobu tzv dokonaleacute čočky

Prototyp - upraveneacute tzv Maxwellovo rybiacute oko

- paprsky světla se v něm pohybujiacute po kružniciacutech a

na rozdiacutel od běžnyacutech čoček se při zobrazeniacute využijiacute

všechny paprsky

- superčočky využiacutevajiacute geometrie k tomu aby se světlo

soustředilo do oblasti menšiacute než je jeho vlnovaacute deacutelka

(zatiacutem se neviacute jak do čočky vyhovujiacuteciacutem způsobem

doveacutest světlo)

Využitiacute v budoucnu

mimo jineacute v pozorovaacuteniacute živyacutech buněk při velkeacutem zvětšeniacute

pomociacute obyčejneacuteho světla bez jejich narušeniacute

Viacutece viz Plaacutešek J Mikroskopy se superčočkami httpwwwvesmircz | Vesmiacuter 91 531 zaacuteřiacute 2012

Hranoly

- doplňky optickyacutech systeacutemů

- většinou tvar rovnostranneacuteho trojuacutehelniacuteka

- využiacutevajiacute uacuteplneacuteho odrazu

Funkce

- změna chodu paprsků pod různyacutemi uacutehly

- rozdvojeniacute paprsků

Pazourek 1975

Různeacute typy odraznyacutech hranolů

Hranoly

Různeacute typy hranolů

httplaserykvalitneczimagestext_25_zakladyoptiky1odrazne_hranolyjpg

Viz dichroickeacute zrcadlo u fluorescenčniacuteho mikroskopu

Chod paprsků v binokulaacuterniacutem tubusu

Pazourek 1975

Nikol = hranol z islandskeacuteho vaacutepence

rarr polarizace světla

Dvojlomnyacute vaacutepencovyacute

krystal

ř ndash paprsek řaacutednyacute (zanikaacute na začerněneacute ploše)

mř ndash paprsek mimořaacutednyacute (lineaacuterně polarizovanyacute

využit k osvětleniacute)

začerněnaacute plocha

Nikol

Pazourek 1975

vzduchovaacute štěrbina

- rychlost světla je

v různyacutech směrech různaacute

- uacutehel paprsku řaacutedneacuteho a

mimořaacutedneacuteho je odlišnyacute

(u Vikingů - slunečniacute kaacutemen

soacutelarsteinn)

Chod paprsků ve světlovodneacutem vlaacuteknu

Princip uacuteplnyacute odraz paprsku

- uvnitř skleněneacuteho vlaacutekna je opticky hustšiacute prostřediacute

- nutnost dostatečně silneacuteho světelneacuteho zdroje

Světlovodnaacute vlaacutekna

Pazourek 1975

Širokeacute využitiacute v praxi optickeacute kabely ndash přenos signaacutelů ve sdělovaciacute technice

světlovody umožňujiacuteciacute veacutest denniacute světlo vedeniacute světla u stereolup endoskopů hellip

Page 52: Světelná a elektronová mikroskopie...(AMF – Atomic Force Miroscope) - skenování povrchu materiálu pomocí hrotu zavěšeném na pružném výkyvném raménku, který je přitahován

Přiacuteklad disperze (rozkladu) světla

Primaacuterniacute a sekundaacuterniacute duha Severniacute Čechy Foto Pavla Vaacutelovaacute 2010

D u h a

Jeden z mnoha

optickyacutech

jevů (fotometeorů)

v atmosfeacuteře

Rok 312 nl - před bitvou byzantskeacuteho ciacutesaře Konstantina I (272-337) s

konkurenčniacutem ciacutesařem Maxentiem u bran Řiacutema (tzv bitva u Milvijskeacuteho mostu) se

na obloze objevily tři zaacuteřiacuteciacute křiacuteže (halovyacute sloup parheacutelia a parhelickyacute oblouk)

Konstantin bitvu proti přesile vyhraacutel sjednotil řiacuteši a povolil v niacute vyznaacutevat křesťanstviacute

Maleacute halo (22deg) (viz 1) vedlejšiacute slunce (2) a horniacute a dolniacute halovyacute sloup (3)

vznikajiacuteciacute odrazem a lomem světelnyacutech paprsků na krystalciacutech ledu

Lom světla a dějiny

httptmagazineblogsnytimescom20121126halo-effect_r=0

1

3

2 2

3

Ohyb (difrakce) a interference

světla

Foto Pavla Vaacutelovaacute Bukovany 2015 Rozklad světla na CD - světlo žaacuterovky

Rozklad biacuteleacuteho světla na mřiacutežce

Pevnost poznaacuteniacute Olomouc 2015

Foto Pavla Vaacutelovaacute Olomouc 2015

Ohyb (difrakce) a interference

světla

Ohyb (difrakce) a interference

Difrakčniacute obrazec obsahuje světlaacute a tmavaacute miacutesta kteraacute se

střiacutedajiacute - světlaacute miacutesta nazyacutevaacuteme maxima a tmavaacute minima

Interference světla = sklaacutedaacuteniacute světelnyacutech vln

Předpoklad světlo musiacute byacutet koherentniacute

Podmiacutenka koherence

- paprsky musiacute miacutet stejnou frekvenci

- paprsky musiacute byacutet navzaacutejem rovnoběžneacute

- paprsky musiacute miacutet na sobě nezaacutevislyacute draacutehovyacute (faacutezovyacute) rozdiacutel

Vznik koherentniacuteho zaacuteřeniacute

rozděleniacutem světla

- buď odrazem pomociacute zrcadel

- nebo lomem pomociacute hranolů

Foto Pavla Vaacutelovaacute Praha 151 2016

Interference světla

stejnyacute způsob vlněniacute

(faacuteze je vzaacutejemně posunuta o sudeacute

naacutesobky λ2)

vznik interferenčniacuteho maxima

(konstruktivniacute interference)

Interference světla

asynchronniacute vlněniacute

(vzaacutejemně posunutaacute faacuteze

o licheacute naacutesobky λ2)

vznik interferenčniacuteho

minima

(destruktivniacute interference)

rarr zaacuteřeniacute zanikaacute

rarr zeslabeniacute zaacuteřeniacute

Interference dvou vrstev elektromagnetickeacuteho zaacuteřeniacute u Slunce

Čočky ndash zaacutekladniacute součaacutesti

mikroskopu

= průhlednaacute (nejčastěji skleněnaacute) tělesa omezenaacute

vypuklyacutemi nebo vydutyacutemi kulovityacutemi plochami lišiacuteciacute se od sveacuteho okoliacute odlišnyacutem indexem lomu

Zaacutekladniacute typy čoček

spojky (vypukleacute neboli konvexniacute)

rozptylky (vyduteacute konkaacutevniacute)

Pazourek 1975

Optickaacute osa ( o ) prochaacuteziacute středem čočky

Ohnisko ( F ) - bod do ktereacuteho se soustřeďujiacute paprsky probiacutehajiacuteciacute rovnoběžně s optickou osou

- 2 ohniska - předmětoveacute ohnisko ( F )

obrazoveacute ohnisko ( Facute )

- ohniskovaacute vzdaacutelenost ( f )

vzdaacutelenost ohniska od hlavniacute roviny proloženeacute středem čočky

- dvojnaacutesobnaacute ohniskovaacute vzdaacutelenost ( P Pacute )

Obrazovyacute prostor - prostor v němž vznikaacute obraz

Důležiteacute charakteristiky čočky

f

o

hlavniacute rovina

Pazourek 1975

V přiacutepadě velmi tenkeacute čočky

bull Obraz za optickou soustavou

rarr obraz s k u t e č n yacute

Skutečnyacute obraz je možneacute zachytit na stiacuteniacutetko

nebo na fotografickou desku neskutečnyacute nikoliv

bull Obraz před soustavou

rarr obraz n e s k u t e č n yacute (zdaacutenlivyacute virtuaacutelniacute)

Obraz skutečnyacute a neskutečnyacute

A ndash předmět Aacute- obraz předmětu

Upraveno podle Pazourek 1975

Francouz Augustin Jean Fresnel (1788-1827) [frenel]

Fresnelova čočka [frenelova]

- plochyacute tvar (zachovaacuteny pouze čaacutesti ktereacute měniacute směr chodu světelnyacutech paprsků)

- vyacuterazně nižšiacute hmotnost při zachovaacuteniacute podobnyacutech parametrů

Využitiacute infračidla pohybu semafory světlomety (majaacuteky) a reflektory (světla aut

divadelniacutech a filmovyacutech osvětlovaciacutech zařiacutezeniacute) zpětneacute projektory slunečniacute kolektory

na zaacutekladě tohoto principu takeacute vyacuteroba 3D displejů k mobilniacutem telefonům a televiziacutem

httpwwwmffcuniczverejnostzpravicky03_lupahtm

čočka na majaacuteku

Čočky v budoucnosti

Pokus o vyacuterobu tzv dokonaleacute čočky

Prototyp - upraveneacute tzv Maxwellovo rybiacute oko

- paprsky světla se v něm pohybujiacute po kružniciacutech a

na rozdiacutel od běžnyacutech čoček se při zobrazeniacute využijiacute

všechny paprsky

- superčočky využiacutevajiacute geometrie k tomu aby se světlo

soustředilo do oblasti menšiacute než je jeho vlnovaacute deacutelka

(zatiacutem se neviacute jak do čočky vyhovujiacuteciacutem způsobem

doveacutest světlo)

Využitiacute v budoucnu

mimo jineacute v pozorovaacuteniacute živyacutech buněk při velkeacutem zvětšeniacute

pomociacute obyčejneacuteho světla bez jejich narušeniacute

Viacutece viz Plaacutešek J Mikroskopy se superčočkami httpwwwvesmircz | Vesmiacuter 91 531 zaacuteřiacute 2012

Hranoly

- doplňky optickyacutech systeacutemů

- většinou tvar rovnostranneacuteho trojuacutehelniacuteka

- využiacutevajiacute uacuteplneacuteho odrazu

Funkce

- změna chodu paprsků pod různyacutemi uacutehly

- rozdvojeniacute paprsků

Pazourek 1975

Různeacute typy odraznyacutech hranolů

Hranoly

Různeacute typy hranolů

httplaserykvalitneczimagestext_25_zakladyoptiky1odrazne_hranolyjpg

Viz dichroickeacute zrcadlo u fluorescenčniacuteho mikroskopu

Chod paprsků v binokulaacuterniacutem tubusu

Pazourek 1975

Nikol = hranol z islandskeacuteho vaacutepence

rarr polarizace světla

Dvojlomnyacute vaacutepencovyacute

krystal

ř ndash paprsek řaacutednyacute (zanikaacute na začerněneacute ploše)

mř ndash paprsek mimořaacutednyacute (lineaacuterně polarizovanyacute

využit k osvětleniacute)

začerněnaacute plocha

Nikol

Pazourek 1975

vzduchovaacute štěrbina

- rychlost světla je

v různyacutech směrech různaacute

- uacutehel paprsku řaacutedneacuteho a

mimořaacutedneacuteho je odlišnyacute

(u Vikingů - slunečniacute kaacutemen

soacutelarsteinn)

Chod paprsků ve světlovodneacutem vlaacuteknu

Princip uacuteplnyacute odraz paprsku

- uvnitř skleněneacuteho vlaacutekna je opticky hustšiacute prostřediacute

- nutnost dostatečně silneacuteho světelneacuteho zdroje

Světlovodnaacute vlaacutekna

Pazourek 1975

Širokeacute využitiacute v praxi optickeacute kabely ndash přenos signaacutelů ve sdělovaciacute technice

světlovody umožňujiacuteciacute veacutest denniacute světlo vedeniacute světla u stereolup endoskopů hellip

Page 53: Světelná a elektronová mikroskopie...(AMF – Atomic Force Miroscope) - skenování povrchu materiálu pomocí hrotu zavěšeném na pružném výkyvném raménku, který je přitahován

Rok 312 nl - před bitvou byzantskeacuteho ciacutesaře Konstantina I (272-337) s

konkurenčniacutem ciacutesařem Maxentiem u bran Řiacutema (tzv bitva u Milvijskeacuteho mostu) se

na obloze objevily tři zaacuteřiacuteciacute křiacuteže (halovyacute sloup parheacutelia a parhelickyacute oblouk)

Konstantin bitvu proti přesile vyhraacutel sjednotil řiacuteši a povolil v niacute vyznaacutevat křesťanstviacute

Maleacute halo (22deg) (viz 1) vedlejšiacute slunce (2) a horniacute a dolniacute halovyacute sloup (3)

vznikajiacuteciacute odrazem a lomem světelnyacutech paprsků na krystalciacutech ledu

Lom světla a dějiny

httptmagazineblogsnytimescom20121126halo-effect_r=0

1

3

2 2

3

Ohyb (difrakce) a interference

světla

Foto Pavla Vaacutelovaacute Bukovany 2015 Rozklad světla na CD - světlo žaacuterovky

Rozklad biacuteleacuteho světla na mřiacutežce

Pevnost poznaacuteniacute Olomouc 2015

Foto Pavla Vaacutelovaacute Olomouc 2015

Ohyb (difrakce) a interference

světla

Ohyb (difrakce) a interference

Difrakčniacute obrazec obsahuje světlaacute a tmavaacute miacutesta kteraacute se

střiacutedajiacute - světlaacute miacutesta nazyacutevaacuteme maxima a tmavaacute minima

Interference světla = sklaacutedaacuteniacute světelnyacutech vln

Předpoklad světlo musiacute byacutet koherentniacute

Podmiacutenka koherence

- paprsky musiacute miacutet stejnou frekvenci

- paprsky musiacute byacutet navzaacutejem rovnoběžneacute

- paprsky musiacute miacutet na sobě nezaacutevislyacute draacutehovyacute (faacutezovyacute) rozdiacutel

Vznik koherentniacuteho zaacuteřeniacute

rozděleniacutem světla

- buď odrazem pomociacute zrcadel

- nebo lomem pomociacute hranolů

Foto Pavla Vaacutelovaacute Praha 151 2016

Interference světla

stejnyacute způsob vlněniacute

(faacuteze je vzaacutejemně posunuta o sudeacute

naacutesobky λ2)

vznik interferenčniacuteho maxima

(konstruktivniacute interference)

Interference světla

asynchronniacute vlněniacute

(vzaacutejemně posunutaacute faacuteze

o licheacute naacutesobky λ2)

vznik interferenčniacuteho

minima

(destruktivniacute interference)

rarr zaacuteřeniacute zanikaacute

rarr zeslabeniacute zaacuteřeniacute

Interference dvou vrstev elektromagnetickeacuteho zaacuteřeniacute u Slunce

Čočky ndash zaacutekladniacute součaacutesti

mikroskopu

= průhlednaacute (nejčastěji skleněnaacute) tělesa omezenaacute

vypuklyacutemi nebo vydutyacutemi kulovityacutemi plochami lišiacuteciacute se od sveacuteho okoliacute odlišnyacutem indexem lomu

Zaacutekladniacute typy čoček

spojky (vypukleacute neboli konvexniacute)

rozptylky (vyduteacute konkaacutevniacute)

Pazourek 1975

Optickaacute osa ( o ) prochaacuteziacute středem čočky

Ohnisko ( F ) - bod do ktereacuteho se soustřeďujiacute paprsky probiacutehajiacuteciacute rovnoběžně s optickou osou

- 2 ohniska - předmětoveacute ohnisko ( F )

obrazoveacute ohnisko ( Facute )

- ohniskovaacute vzdaacutelenost ( f )

vzdaacutelenost ohniska od hlavniacute roviny proloženeacute středem čočky

- dvojnaacutesobnaacute ohniskovaacute vzdaacutelenost ( P Pacute )

Obrazovyacute prostor - prostor v němž vznikaacute obraz

Důležiteacute charakteristiky čočky

f

o

hlavniacute rovina

Pazourek 1975

V přiacutepadě velmi tenkeacute čočky

bull Obraz za optickou soustavou

rarr obraz s k u t e č n yacute

Skutečnyacute obraz je možneacute zachytit na stiacuteniacutetko

nebo na fotografickou desku neskutečnyacute nikoliv

bull Obraz před soustavou

rarr obraz n e s k u t e č n yacute (zdaacutenlivyacute virtuaacutelniacute)

Obraz skutečnyacute a neskutečnyacute

A ndash předmět Aacute- obraz předmětu

Upraveno podle Pazourek 1975

Francouz Augustin Jean Fresnel (1788-1827) [frenel]

Fresnelova čočka [frenelova]

- plochyacute tvar (zachovaacuteny pouze čaacutesti ktereacute měniacute směr chodu světelnyacutech paprsků)

- vyacuterazně nižšiacute hmotnost při zachovaacuteniacute podobnyacutech parametrů

Využitiacute infračidla pohybu semafory světlomety (majaacuteky) a reflektory (světla aut

divadelniacutech a filmovyacutech osvětlovaciacutech zařiacutezeniacute) zpětneacute projektory slunečniacute kolektory

na zaacutekladě tohoto principu takeacute vyacuteroba 3D displejů k mobilniacutem telefonům a televiziacutem

httpwwwmffcuniczverejnostzpravicky03_lupahtm

čočka na majaacuteku

Čočky v budoucnosti

Pokus o vyacuterobu tzv dokonaleacute čočky

Prototyp - upraveneacute tzv Maxwellovo rybiacute oko

- paprsky světla se v něm pohybujiacute po kružniciacutech a

na rozdiacutel od běžnyacutech čoček se při zobrazeniacute využijiacute

všechny paprsky

- superčočky využiacutevajiacute geometrie k tomu aby se světlo

soustředilo do oblasti menšiacute než je jeho vlnovaacute deacutelka

(zatiacutem se neviacute jak do čočky vyhovujiacuteciacutem způsobem

doveacutest světlo)

Využitiacute v budoucnu

mimo jineacute v pozorovaacuteniacute živyacutech buněk při velkeacutem zvětšeniacute

pomociacute obyčejneacuteho světla bez jejich narušeniacute

Viacutece viz Plaacutešek J Mikroskopy se superčočkami httpwwwvesmircz | Vesmiacuter 91 531 zaacuteřiacute 2012

Hranoly

- doplňky optickyacutech systeacutemů

- většinou tvar rovnostranneacuteho trojuacutehelniacuteka

- využiacutevajiacute uacuteplneacuteho odrazu

Funkce

- změna chodu paprsků pod různyacutemi uacutehly

- rozdvojeniacute paprsků

Pazourek 1975

Různeacute typy odraznyacutech hranolů

Hranoly

Různeacute typy hranolů

httplaserykvalitneczimagestext_25_zakladyoptiky1odrazne_hranolyjpg

Viz dichroickeacute zrcadlo u fluorescenčniacuteho mikroskopu

Chod paprsků v binokulaacuterniacutem tubusu

Pazourek 1975

Nikol = hranol z islandskeacuteho vaacutepence

rarr polarizace světla

Dvojlomnyacute vaacutepencovyacute

krystal

ř ndash paprsek řaacutednyacute (zanikaacute na začerněneacute ploše)

mř ndash paprsek mimořaacutednyacute (lineaacuterně polarizovanyacute

využit k osvětleniacute)

začerněnaacute plocha

Nikol

Pazourek 1975

vzduchovaacute štěrbina

- rychlost světla je

v různyacutech směrech různaacute

- uacutehel paprsku řaacutedneacuteho a

mimořaacutedneacuteho je odlišnyacute

(u Vikingů - slunečniacute kaacutemen

soacutelarsteinn)

Chod paprsků ve světlovodneacutem vlaacuteknu

Princip uacuteplnyacute odraz paprsku

- uvnitř skleněneacuteho vlaacutekna je opticky hustšiacute prostřediacute

- nutnost dostatečně silneacuteho světelneacuteho zdroje

Světlovodnaacute vlaacutekna

Pazourek 1975

Širokeacute využitiacute v praxi optickeacute kabely ndash přenos signaacutelů ve sdělovaciacute technice

světlovody umožňujiacuteciacute veacutest denniacute světlo vedeniacute světla u stereolup endoskopů hellip

Page 54: Světelná a elektronová mikroskopie...(AMF – Atomic Force Miroscope) - skenování povrchu materiálu pomocí hrotu zavěšeném na pružném výkyvném raménku, který je přitahován

Ohyb (difrakce) a interference

světla

Foto Pavla Vaacutelovaacute Bukovany 2015 Rozklad světla na CD - světlo žaacuterovky

Rozklad biacuteleacuteho světla na mřiacutežce

Pevnost poznaacuteniacute Olomouc 2015

Foto Pavla Vaacutelovaacute Olomouc 2015

Ohyb (difrakce) a interference

světla

Ohyb (difrakce) a interference

Difrakčniacute obrazec obsahuje světlaacute a tmavaacute miacutesta kteraacute se

střiacutedajiacute - světlaacute miacutesta nazyacutevaacuteme maxima a tmavaacute minima

Interference světla = sklaacutedaacuteniacute světelnyacutech vln

Předpoklad světlo musiacute byacutet koherentniacute

Podmiacutenka koherence

- paprsky musiacute miacutet stejnou frekvenci

- paprsky musiacute byacutet navzaacutejem rovnoběžneacute

- paprsky musiacute miacutet na sobě nezaacutevislyacute draacutehovyacute (faacutezovyacute) rozdiacutel

Vznik koherentniacuteho zaacuteřeniacute

rozděleniacutem světla

- buď odrazem pomociacute zrcadel

- nebo lomem pomociacute hranolů

Foto Pavla Vaacutelovaacute Praha 151 2016

Interference světla

stejnyacute způsob vlněniacute

(faacuteze je vzaacutejemně posunuta o sudeacute

naacutesobky λ2)

vznik interferenčniacuteho maxima

(konstruktivniacute interference)

Interference světla

asynchronniacute vlněniacute

(vzaacutejemně posunutaacute faacuteze

o licheacute naacutesobky λ2)

vznik interferenčniacuteho

minima

(destruktivniacute interference)

rarr zaacuteřeniacute zanikaacute

rarr zeslabeniacute zaacuteřeniacute

Interference dvou vrstev elektromagnetickeacuteho zaacuteřeniacute u Slunce

Čočky ndash zaacutekladniacute součaacutesti

mikroskopu

= průhlednaacute (nejčastěji skleněnaacute) tělesa omezenaacute

vypuklyacutemi nebo vydutyacutemi kulovityacutemi plochami lišiacuteciacute se od sveacuteho okoliacute odlišnyacutem indexem lomu

Zaacutekladniacute typy čoček

spojky (vypukleacute neboli konvexniacute)

rozptylky (vyduteacute konkaacutevniacute)

Pazourek 1975

Optickaacute osa ( o ) prochaacuteziacute středem čočky

Ohnisko ( F ) - bod do ktereacuteho se soustřeďujiacute paprsky probiacutehajiacuteciacute rovnoběžně s optickou osou

- 2 ohniska - předmětoveacute ohnisko ( F )

obrazoveacute ohnisko ( Facute )

- ohniskovaacute vzdaacutelenost ( f )

vzdaacutelenost ohniska od hlavniacute roviny proloženeacute středem čočky

- dvojnaacutesobnaacute ohniskovaacute vzdaacutelenost ( P Pacute )

Obrazovyacute prostor - prostor v němž vznikaacute obraz

Důležiteacute charakteristiky čočky

f

o

hlavniacute rovina

Pazourek 1975

V přiacutepadě velmi tenkeacute čočky

bull Obraz za optickou soustavou

rarr obraz s k u t e č n yacute

Skutečnyacute obraz je možneacute zachytit na stiacuteniacutetko

nebo na fotografickou desku neskutečnyacute nikoliv

bull Obraz před soustavou

rarr obraz n e s k u t e č n yacute (zdaacutenlivyacute virtuaacutelniacute)

Obraz skutečnyacute a neskutečnyacute

A ndash předmět Aacute- obraz předmětu

Upraveno podle Pazourek 1975

Francouz Augustin Jean Fresnel (1788-1827) [frenel]

Fresnelova čočka [frenelova]

- plochyacute tvar (zachovaacuteny pouze čaacutesti ktereacute měniacute směr chodu světelnyacutech paprsků)

- vyacuterazně nižšiacute hmotnost při zachovaacuteniacute podobnyacutech parametrů

Využitiacute infračidla pohybu semafory světlomety (majaacuteky) a reflektory (světla aut

divadelniacutech a filmovyacutech osvětlovaciacutech zařiacutezeniacute) zpětneacute projektory slunečniacute kolektory

na zaacutekladě tohoto principu takeacute vyacuteroba 3D displejů k mobilniacutem telefonům a televiziacutem

httpwwwmffcuniczverejnostzpravicky03_lupahtm

čočka na majaacuteku

Čočky v budoucnosti

Pokus o vyacuterobu tzv dokonaleacute čočky

Prototyp - upraveneacute tzv Maxwellovo rybiacute oko

- paprsky světla se v něm pohybujiacute po kružniciacutech a

na rozdiacutel od běžnyacutech čoček se při zobrazeniacute využijiacute

všechny paprsky

- superčočky využiacutevajiacute geometrie k tomu aby se světlo

soustředilo do oblasti menšiacute než je jeho vlnovaacute deacutelka

(zatiacutem se neviacute jak do čočky vyhovujiacuteciacutem způsobem

doveacutest světlo)

Využitiacute v budoucnu

mimo jineacute v pozorovaacuteniacute živyacutech buněk při velkeacutem zvětšeniacute

pomociacute obyčejneacuteho světla bez jejich narušeniacute

Viacutece viz Plaacutešek J Mikroskopy se superčočkami httpwwwvesmircz | Vesmiacuter 91 531 zaacuteřiacute 2012

Hranoly

- doplňky optickyacutech systeacutemů

- většinou tvar rovnostranneacuteho trojuacutehelniacuteka

- využiacutevajiacute uacuteplneacuteho odrazu

Funkce

- změna chodu paprsků pod různyacutemi uacutehly

- rozdvojeniacute paprsků

Pazourek 1975

Různeacute typy odraznyacutech hranolů

Hranoly

Různeacute typy hranolů

httplaserykvalitneczimagestext_25_zakladyoptiky1odrazne_hranolyjpg

Viz dichroickeacute zrcadlo u fluorescenčniacuteho mikroskopu

Chod paprsků v binokulaacuterniacutem tubusu

Pazourek 1975

Nikol = hranol z islandskeacuteho vaacutepence

rarr polarizace světla

Dvojlomnyacute vaacutepencovyacute

krystal

ř ndash paprsek řaacutednyacute (zanikaacute na začerněneacute ploše)

mř ndash paprsek mimořaacutednyacute (lineaacuterně polarizovanyacute

využit k osvětleniacute)

začerněnaacute plocha

Nikol

Pazourek 1975

vzduchovaacute štěrbina

- rychlost světla je

v různyacutech směrech různaacute

- uacutehel paprsku řaacutedneacuteho a

mimořaacutedneacuteho je odlišnyacute

(u Vikingů - slunečniacute kaacutemen

soacutelarsteinn)

Chod paprsků ve světlovodneacutem vlaacuteknu

Princip uacuteplnyacute odraz paprsku

- uvnitř skleněneacuteho vlaacutekna je opticky hustšiacute prostřediacute

- nutnost dostatečně silneacuteho světelneacuteho zdroje

Světlovodnaacute vlaacutekna

Pazourek 1975

Širokeacute využitiacute v praxi optickeacute kabely ndash přenos signaacutelů ve sdělovaciacute technice

světlovody umožňujiacuteciacute veacutest denniacute světlo vedeniacute světla u stereolup endoskopů hellip

Page 55: Světelná a elektronová mikroskopie...(AMF – Atomic Force Miroscope) - skenování povrchu materiálu pomocí hrotu zavěšeném na pružném výkyvném raménku, který je přitahován

Foto Pavla Vaacutelovaacute Bukovany 2015 Rozklad světla na CD - světlo žaacuterovky

Rozklad biacuteleacuteho světla na mřiacutežce

Pevnost poznaacuteniacute Olomouc 2015

Foto Pavla Vaacutelovaacute Olomouc 2015

Ohyb (difrakce) a interference

světla

Ohyb (difrakce) a interference

Difrakčniacute obrazec obsahuje světlaacute a tmavaacute miacutesta kteraacute se

střiacutedajiacute - světlaacute miacutesta nazyacutevaacuteme maxima a tmavaacute minima

Interference světla = sklaacutedaacuteniacute světelnyacutech vln

Předpoklad světlo musiacute byacutet koherentniacute

Podmiacutenka koherence

- paprsky musiacute miacutet stejnou frekvenci

- paprsky musiacute byacutet navzaacutejem rovnoběžneacute

- paprsky musiacute miacutet na sobě nezaacutevislyacute draacutehovyacute (faacutezovyacute) rozdiacutel

Vznik koherentniacuteho zaacuteřeniacute

rozděleniacutem světla

- buď odrazem pomociacute zrcadel

- nebo lomem pomociacute hranolů

Foto Pavla Vaacutelovaacute Praha 151 2016

Interference světla

stejnyacute způsob vlněniacute

(faacuteze je vzaacutejemně posunuta o sudeacute

naacutesobky λ2)

vznik interferenčniacuteho maxima

(konstruktivniacute interference)

Interference světla

asynchronniacute vlněniacute

(vzaacutejemně posunutaacute faacuteze

o licheacute naacutesobky λ2)

vznik interferenčniacuteho

minima

(destruktivniacute interference)

rarr zaacuteřeniacute zanikaacute

rarr zeslabeniacute zaacuteřeniacute

Interference dvou vrstev elektromagnetickeacuteho zaacuteřeniacute u Slunce

Čočky ndash zaacutekladniacute součaacutesti

mikroskopu

= průhlednaacute (nejčastěji skleněnaacute) tělesa omezenaacute

vypuklyacutemi nebo vydutyacutemi kulovityacutemi plochami lišiacuteciacute se od sveacuteho okoliacute odlišnyacutem indexem lomu

Zaacutekladniacute typy čoček

spojky (vypukleacute neboli konvexniacute)

rozptylky (vyduteacute konkaacutevniacute)

Pazourek 1975

Optickaacute osa ( o ) prochaacuteziacute středem čočky

Ohnisko ( F ) - bod do ktereacuteho se soustřeďujiacute paprsky probiacutehajiacuteciacute rovnoběžně s optickou osou

- 2 ohniska - předmětoveacute ohnisko ( F )

obrazoveacute ohnisko ( Facute )

- ohniskovaacute vzdaacutelenost ( f )

vzdaacutelenost ohniska od hlavniacute roviny proloženeacute středem čočky

- dvojnaacutesobnaacute ohniskovaacute vzdaacutelenost ( P Pacute )

Obrazovyacute prostor - prostor v němž vznikaacute obraz

Důležiteacute charakteristiky čočky

f

o

hlavniacute rovina

Pazourek 1975

V přiacutepadě velmi tenkeacute čočky

bull Obraz za optickou soustavou

rarr obraz s k u t e č n yacute

Skutečnyacute obraz je možneacute zachytit na stiacuteniacutetko

nebo na fotografickou desku neskutečnyacute nikoliv

bull Obraz před soustavou

rarr obraz n e s k u t e č n yacute (zdaacutenlivyacute virtuaacutelniacute)

Obraz skutečnyacute a neskutečnyacute

A ndash předmět Aacute- obraz předmětu

Upraveno podle Pazourek 1975

Francouz Augustin Jean Fresnel (1788-1827) [frenel]

Fresnelova čočka [frenelova]

- plochyacute tvar (zachovaacuteny pouze čaacutesti ktereacute měniacute směr chodu světelnyacutech paprsků)

- vyacuterazně nižšiacute hmotnost při zachovaacuteniacute podobnyacutech parametrů

Využitiacute infračidla pohybu semafory světlomety (majaacuteky) a reflektory (světla aut

divadelniacutech a filmovyacutech osvětlovaciacutech zařiacutezeniacute) zpětneacute projektory slunečniacute kolektory

na zaacutekladě tohoto principu takeacute vyacuteroba 3D displejů k mobilniacutem telefonům a televiziacutem

httpwwwmffcuniczverejnostzpravicky03_lupahtm

čočka na majaacuteku

Čočky v budoucnosti

Pokus o vyacuterobu tzv dokonaleacute čočky

Prototyp - upraveneacute tzv Maxwellovo rybiacute oko

- paprsky světla se v něm pohybujiacute po kružniciacutech a

na rozdiacutel od běžnyacutech čoček se při zobrazeniacute využijiacute

všechny paprsky

- superčočky využiacutevajiacute geometrie k tomu aby se světlo

soustředilo do oblasti menšiacute než je jeho vlnovaacute deacutelka

(zatiacutem se neviacute jak do čočky vyhovujiacuteciacutem způsobem

doveacutest světlo)

Využitiacute v budoucnu

mimo jineacute v pozorovaacuteniacute živyacutech buněk při velkeacutem zvětšeniacute

pomociacute obyčejneacuteho světla bez jejich narušeniacute

Viacutece viz Plaacutešek J Mikroskopy se superčočkami httpwwwvesmircz | Vesmiacuter 91 531 zaacuteřiacute 2012

Hranoly

- doplňky optickyacutech systeacutemů

- většinou tvar rovnostranneacuteho trojuacutehelniacuteka

- využiacutevajiacute uacuteplneacuteho odrazu

Funkce

- změna chodu paprsků pod různyacutemi uacutehly

- rozdvojeniacute paprsků

Pazourek 1975

Různeacute typy odraznyacutech hranolů

Hranoly

Různeacute typy hranolů

httplaserykvalitneczimagestext_25_zakladyoptiky1odrazne_hranolyjpg

Viz dichroickeacute zrcadlo u fluorescenčniacuteho mikroskopu

Chod paprsků v binokulaacuterniacutem tubusu

Pazourek 1975

Nikol = hranol z islandskeacuteho vaacutepence

rarr polarizace světla

Dvojlomnyacute vaacutepencovyacute

krystal

ř ndash paprsek řaacutednyacute (zanikaacute na začerněneacute ploše)

mř ndash paprsek mimořaacutednyacute (lineaacuterně polarizovanyacute

využit k osvětleniacute)

začerněnaacute plocha

Nikol

Pazourek 1975

vzduchovaacute štěrbina

- rychlost světla je

v různyacutech směrech různaacute

- uacutehel paprsku řaacutedneacuteho a

mimořaacutedneacuteho je odlišnyacute

(u Vikingů - slunečniacute kaacutemen

soacutelarsteinn)

Chod paprsků ve světlovodneacutem vlaacuteknu

Princip uacuteplnyacute odraz paprsku

- uvnitř skleněneacuteho vlaacutekna je opticky hustšiacute prostřediacute

- nutnost dostatečně silneacuteho světelneacuteho zdroje

Světlovodnaacute vlaacutekna

Pazourek 1975

Širokeacute využitiacute v praxi optickeacute kabely ndash přenos signaacutelů ve sdělovaciacute technice

světlovody umožňujiacuteciacute veacutest denniacute světlo vedeniacute světla u stereolup endoskopů hellip

Page 56: Světelná a elektronová mikroskopie...(AMF – Atomic Force Miroscope) - skenování povrchu materiálu pomocí hrotu zavěšeném na pružném výkyvném raménku, který je přitahován

Rozklad biacuteleacuteho světla na mřiacutežce

Pevnost poznaacuteniacute Olomouc 2015

Foto Pavla Vaacutelovaacute Olomouc 2015

Ohyb (difrakce) a interference

světla

Ohyb (difrakce) a interference

Difrakčniacute obrazec obsahuje světlaacute a tmavaacute miacutesta kteraacute se

střiacutedajiacute - světlaacute miacutesta nazyacutevaacuteme maxima a tmavaacute minima

Interference světla = sklaacutedaacuteniacute světelnyacutech vln

Předpoklad světlo musiacute byacutet koherentniacute

Podmiacutenka koherence

- paprsky musiacute miacutet stejnou frekvenci

- paprsky musiacute byacutet navzaacutejem rovnoběžneacute

- paprsky musiacute miacutet na sobě nezaacutevislyacute draacutehovyacute (faacutezovyacute) rozdiacutel

Vznik koherentniacuteho zaacuteřeniacute

rozděleniacutem světla

- buď odrazem pomociacute zrcadel

- nebo lomem pomociacute hranolů

Foto Pavla Vaacutelovaacute Praha 151 2016

Interference světla

stejnyacute způsob vlněniacute

(faacuteze je vzaacutejemně posunuta o sudeacute

naacutesobky λ2)

vznik interferenčniacuteho maxima

(konstruktivniacute interference)

Interference světla

asynchronniacute vlněniacute

(vzaacutejemně posunutaacute faacuteze

o licheacute naacutesobky λ2)

vznik interferenčniacuteho

minima

(destruktivniacute interference)

rarr zaacuteřeniacute zanikaacute

rarr zeslabeniacute zaacuteřeniacute

Interference dvou vrstev elektromagnetickeacuteho zaacuteřeniacute u Slunce

Čočky ndash zaacutekladniacute součaacutesti

mikroskopu

= průhlednaacute (nejčastěji skleněnaacute) tělesa omezenaacute

vypuklyacutemi nebo vydutyacutemi kulovityacutemi plochami lišiacuteciacute se od sveacuteho okoliacute odlišnyacutem indexem lomu

Zaacutekladniacute typy čoček

spojky (vypukleacute neboli konvexniacute)

rozptylky (vyduteacute konkaacutevniacute)

Pazourek 1975

Optickaacute osa ( o ) prochaacuteziacute středem čočky

Ohnisko ( F ) - bod do ktereacuteho se soustřeďujiacute paprsky probiacutehajiacuteciacute rovnoběžně s optickou osou

- 2 ohniska - předmětoveacute ohnisko ( F )

obrazoveacute ohnisko ( Facute )

- ohniskovaacute vzdaacutelenost ( f )

vzdaacutelenost ohniska od hlavniacute roviny proloženeacute středem čočky

- dvojnaacutesobnaacute ohniskovaacute vzdaacutelenost ( P Pacute )

Obrazovyacute prostor - prostor v němž vznikaacute obraz

Důležiteacute charakteristiky čočky

f

o

hlavniacute rovina

Pazourek 1975

V přiacutepadě velmi tenkeacute čočky

bull Obraz za optickou soustavou

rarr obraz s k u t e č n yacute

Skutečnyacute obraz je možneacute zachytit na stiacuteniacutetko

nebo na fotografickou desku neskutečnyacute nikoliv

bull Obraz před soustavou

rarr obraz n e s k u t e č n yacute (zdaacutenlivyacute virtuaacutelniacute)

Obraz skutečnyacute a neskutečnyacute

A ndash předmět Aacute- obraz předmětu

Upraveno podle Pazourek 1975

Francouz Augustin Jean Fresnel (1788-1827) [frenel]

Fresnelova čočka [frenelova]

- plochyacute tvar (zachovaacuteny pouze čaacutesti ktereacute měniacute směr chodu světelnyacutech paprsků)

- vyacuterazně nižšiacute hmotnost při zachovaacuteniacute podobnyacutech parametrů

Využitiacute infračidla pohybu semafory světlomety (majaacuteky) a reflektory (světla aut

divadelniacutech a filmovyacutech osvětlovaciacutech zařiacutezeniacute) zpětneacute projektory slunečniacute kolektory

na zaacutekladě tohoto principu takeacute vyacuteroba 3D displejů k mobilniacutem telefonům a televiziacutem

httpwwwmffcuniczverejnostzpravicky03_lupahtm

čočka na majaacuteku

Čočky v budoucnosti

Pokus o vyacuterobu tzv dokonaleacute čočky

Prototyp - upraveneacute tzv Maxwellovo rybiacute oko

- paprsky světla se v něm pohybujiacute po kružniciacutech a

na rozdiacutel od běžnyacutech čoček se při zobrazeniacute využijiacute

všechny paprsky

- superčočky využiacutevajiacute geometrie k tomu aby se světlo

soustředilo do oblasti menšiacute než je jeho vlnovaacute deacutelka

(zatiacutem se neviacute jak do čočky vyhovujiacuteciacutem způsobem

doveacutest světlo)

Využitiacute v budoucnu

mimo jineacute v pozorovaacuteniacute živyacutech buněk při velkeacutem zvětšeniacute

pomociacute obyčejneacuteho světla bez jejich narušeniacute

Viacutece viz Plaacutešek J Mikroskopy se superčočkami httpwwwvesmircz | Vesmiacuter 91 531 zaacuteřiacute 2012

Hranoly

- doplňky optickyacutech systeacutemů

- většinou tvar rovnostranneacuteho trojuacutehelniacuteka

- využiacutevajiacute uacuteplneacuteho odrazu

Funkce

- změna chodu paprsků pod různyacutemi uacutehly

- rozdvojeniacute paprsků

Pazourek 1975

Různeacute typy odraznyacutech hranolů

Hranoly

Různeacute typy hranolů

httplaserykvalitneczimagestext_25_zakladyoptiky1odrazne_hranolyjpg

Viz dichroickeacute zrcadlo u fluorescenčniacuteho mikroskopu

Chod paprsků v binokulaacuterniacutem tubusu

Pazourek 1975

Nikol = hranol z islandskeacuteho vaacutepence

rarr polarizace světla

Dvojlomnyacute vaacutepencovyacute

krystal

ř ndash paprsek řaacutednyacute (zanikaacute na začerněneacute ploše)

mř ndash paprsek mimořaacutednyacute (lineaacuterně polarizovanyacute

využit k osvětleniacute)

začerněnaacute plocha

Nikol

Pazourek 1975

vzduchovaacute štěrbina

- rychlost světla je

v různyacutech směrech různaacute

- uacutehel paprsku řaacutedneacuteho a

mimořaacutedneacuteho je odlišnyacute

(u Vikingů - slunečniacute kaacutemen

soacutelarsteinn)

Chod paprsků ve světlovodneacutem vlaacuteknu

Princip uacuteplnyacute odraz paprsku

- uvnitř skleněneacuteho vlaacutekna je opticky hustšiacute prostřediacute

- nutnost dostatečně silneacuteho světelneacuteho zdroje

Světlovodnaacute vlaacutekna

Pazourek 1975

Širokeacute využitiacute v praxi optickeacute kabely ndash přenos signaacutelů ve sdělovaciacute technice

světlovody umožňujiacuteciacute veacutest denniacute světlo vedeniacute světla u stereolup endoskopů hellip

Page 57: Světelná a elektronová mikroskopie...(AMF – Atomic Force Miroscope) - skenování povrchu materiálu pomocí hrotu zavěšeném na pružném výkyvném raménku, který je přitahován

Ohyb (difrakce) a interference

světla

Ohyb (difrakce) a interference

Difrakčniacute obrazec obsahuje světlaacute a tmavaacute miacutesta kteraacute se

střiacutedajiacute - světlaacute miacutesta nazyacutevaacuteme maxima a tmavaacute minima

Interference světla = sklaacutedaacuteniacute světelnyacutech vln

Předpoklad světlo musiacute byacutet koherentniacute

Podmiacutenka koherence

- paprsky musiacute miacutet stejnou frekvenci

- paprsky musiacute byacutet navzaacutejem rovnoběžneacute

- paprsky musiacute miacutet na sobě nezaacutevislyacute draacutehovyacute (faacutezovyacute) rozdiacutel

Vznik koherentniacuteho zaacuteřeniacute

rozděleniacutem světla

- buď odrazem pomociacute zrcadel

- nebo lomem pomociacute hranolů

Foto Pavla Vaacutelovaacute Praha 151 2016

Interference světla

stejnyacute způsob vlněniacute

(faacuteze je vzaacutejemně posunuta o sudeacute

naacutesobky λ2)

vznik interferenčniacuteho maxima

(konstruktivniacute interference)

Interference světla

asynchronniacute vlněniacute

(vzaacutejemně posunutaacute faacuteze

o licheacute naacutesobky λ2)

vznik interferenčniacuteho

minima

(destruktivniacute interference)

rarr zaacuteřeniacute zanikaacute

rarr zeslabeniacute zaacuteřeniacute

Interference dvou vrstev elektromagnetickeacuteho zaacuteřeniacute u Slunce

Čočky ndash zaacutekladniacute součaacutesti

mikroskopu

= průhlednaacute (nejčastěji skleněnaacute) tělesa omezenaacute

vypuklyacutemi nebo vydutyacutemi kulovityacutemi plochami lišiacuteciacute se od sveacuteho okoliacute odlišnyacutem indexem lomu

Zaacutekladniacute typy čoček

spojky (vypukleacute neboli konvexniacute)

rozptylky (vyduteacute konkaacutevniacute)

Pazourek 1975

Optickaacute osa ( o ) prochaacuteziacute středem čočky

Ohnisko ( F ) - bod do ktereacuteho se soustřeďujiacute paprsky probiacutehajiacuteciacute rovnoběžně s optickou osou

- 2 ohniska - předmětoveacute ohnisko ( F )

obrazoveacute ohnisko ( Facute )

- ohniskovaacute vzdaacutelenost ( f )

vzdaacutelenost ohniska od hlavniacute roviny proloženeacute středem čočky

- dvojnaacutesobnaacute ohniskovaacute vzdaacutelenost ( P Pacute )

Obrazovyacute prostor - prostor v němž vznikaacute obraz

Důležiteacute charakteristiky čočky

f

o

hlavniacute rovina

Pazourek 1975

V přiacutepadě velmi tenkeacute čočky

bull Obraz za optickou soustavou

rarr obraz s k u t e č n yacute

Skutečnyacute obraz je možneacute zachytit na stiacuteniacutetko

nebo na fotografickou desku neskutečnyacute nikoliv

bull Obraz před soustavou

rarr obraz n e s k u t e č n yacute (zdaacutenlivyacute virtuaacutelniacute)

Obraz skutečnyacute a neskutečnyacute

A ndash předmět Aacute- obraz předmětu

Upraveno podle Pazourek 1975

Francouz Augustin Jean Fresnel (1788-1827) [frenel]

Fresnelova čočka [frenelova]

- plochyacute tvar (zachovaacuteny pouze čaacutesti ktereacute měniacute směr chodu světelnyacutech paprsků)

- vyacuterazně nižšiacute hmotnost při zachovaacuteniacute podobnyacutech parametrů

Využitiacute infračidla pohybu semafory světlomety (majaacuteky) a reflektory (světla aut

divadelniacutech a filmovyacutech osvětlovaciacutech zařiacutezeniacute) zpětneacute projektory slunečniacute kolektory

na zaacutekladě tohoto principu takeacute vyacuteroba 3D displejů k mobilniacutem telefonům a televiziacutem

httpwwwmffcuniczverejnostzpravicky03_lupahtm

čočka na majaacuteku

Čočky v budoucnosti

Pokus o vyacuterobu tzv dokonaleacute čočky

Prototyp - upraveneacute tzv Maxwellovo rybiacute oko

- paprsky světla se v něm pohybujiacute po kružniciacutech a

na rozdiacutel od běžnyacutech čoček se při zobrazeniacute využijiacute

všechny paprsky

- superčočky využiacutevajiacute geometrie k tomu aby se světlo

soustředilo do oblasti menšiacute než je jeho vlnovaacute deacutelka

(zatiacutem se neviacute jak do čočky vyhovujiacuteciacutem způsobem

doveacutest světlo)

Využitiacute v budoucnu

mimo jineacute v pozorovaacuteniacute živyacutech buněk při velkeacutem zvětšeniacute

pomociacute obyčejneacuteho světla bez jejich narušeniacute

Viacutece viz Plaacutešek J Mikroskopy se superčočkami httpwwwvesmircz | Vesmiacuter 91 531 zaacuteřiacute 2012

Hranoly

- doplňky optickyacutech systeacutemů

- většinou tvar rovnostranneacuteho trojuacutehelniacuteka

- využiacutevajiacute uacuteplneacuteho odrazu

Funkce

- změna chodu paprsků pod různyacutemi uacutehly

- rozdvojeniacute paprsků

Pazourek 1975

Různeacute typy odraznyacutech hranolů

Hranoly

Různeacute typy hranolů

httplaserykvalitneczimagestext_25_zakladyoptiky1odrazne_hranolyjpg

Viz dichroickeacute zrcadlo u fluorescenčniacuteho mikroskopu

Chod paprsků v binokulaacuterniacutem tubusu

Pazourek 1975

Nikol = hranol z islandskeacuteho vaacutepence

rarr polarizace světla

Dvojlomnyacute vaacutepencovyacute

krystal

ř ndash paprsek řaacutednyacute (zanikaacute na začerněneacute ploše)

mř ndash paprsek mimořaacutednyacute (lineaacuterně polarizovanyacute

využit k osvětleniacute)

začerněnaacute plocha

Nikol

Pazourek 1975

vzduchovaacute štěrbina

- rychlost světla je

v různyacutech směrech různaacute

- uacutehel paprsku řaacutedneacuteho a

mimořaacutedneacuteho je odlišnyacute

(u Vikingů - slunečniacute kaacutemen

soacutelarsteinn)

Chod paprsků ve světlovodneacutem vlaacuteknu

Princip uacuteplnyacute odraz paprsku

- uvnitř skleněneacuteho vlaacutekna je opticky hustšiacute prostřediacute

- nutnost dostatečně silneacuteho světelneacuteho zdroje

Světlovodnaacute vlaacutekna

Pazourek 1975

Širokeacute využitiacute v praxi optickeacute kabely ndash přenos signaacutelů ve sdělovaciacute technice

světlovody umožňujiacuteciacute veacutest denniacute světlo vedeniacute světla u stereolup endoskopů hellip

Page 58: Světelná a elektronová mikroskopie...(AMF – Atomic Force Miroscope) - skenování povrchu materiálu pomocí hrotu zavěšeném na pružném výkyvném raménku, který je přitahován

Ohyb (difrakce) a interference

Difrakčniacute obrazec obsahuje světlaacute a tmavaacute miacutesta kteraacute se

střiacutedajiacute - světlaacute miacutesta nazyacutevaacuteme maxima a tmavaacute minima

Interference světla = sklaacutedaacuteniacute světelnyacutech vln

Předpoklad světlo musiacute byacutet koherentniacute

Podmiacutenka koherence

- paprsky musiacute miacutet stejnou frekvenci

- paprsky musiacute byacutet navzaacutejem rovnoběžneacute

- paprsky musiacute miacutet na sobě nezaacutevislyacute draacutehovyacute (faacutezovyacute) rozdiacutel

Vznik koherentniacuteho zaacuteřeniacute

rozděleniacutem světla

- buď odrazem pomociacute zrcadel

- nebo lomem pomociacute hranolů

Foto Pavla Vaacutelovaacute Praha 151 2016

Interference světla

stejnyacute způsob vlněniacute

(faacuteze je vzaacutejemně posunuta o sudeacute

naacutesobky λ2)

vznik interferenčniacuteho maxima

(konstruktivniacute interference)

Interference světla

asynchronniacute vlněniacute

(vzaacutejemně posunutaacute faacuteze

o licheacute naacutesobky λ2)

vznik interferenčniacuteho

minima

(destruktivniacute interference)

rarr zaacuteřeniacute zanikaacute

rarr zeslabeniacute zaacuteřeniacute

Interference dvou vrstev elektromagnetickeacuteho zaacuteřeniacute u Slunce

Čočky ndash zaacutekladniacute součaacutesti

mikroskopu

= průhlednaacute (nejčastěji skleněnaacute) tělesa omezenaacute

vypuklyacutemi nebo vydutyacutemi kulovityacutemi plochami lišiacuteciacute se od sveacuteho okoliacute odlišnyacutem indexem lomu

Zaacutekladniacute typy čoček

spojky (vypukleacute neboli konvexniacute)

rozptylky (vyduteacute konkaacutevniacute)

Pazourek 1975

Optickaacute osa ( o ) prochaacuteziacute středem čočky

Ohnisko ( F ) - bod do ktereacuteho se soustřeďujiacute paprsky probiacutehajiacuteciacute rovnoběžně s optickou osou

- 2 ohniska - předmětoveacute ohnisko ( F )

obrazoveacute ohnisko ( Facute )

- ohniskovaacute vzdaacutelenost ( f )

vzdaacutelenost ohniska od hlavniacute roviny proloženeacute středem čočky

- dvojnaacutesobnaacute ohniskovaacute vzdaacutelenost ( P Pacute )

Obrazovyacute prostor - prostor v němž vznikaacute obraz

Důležiteacute charakteristiky čočky

f

o

hlavniacute rovina

Pazourek 1975

V přiacutepadě velmi tenkeacute čočky

bull Obraz za optickou soustavou

rarr obraz s k u t e č n yacute

Skutečnyacute obraz je možneacute zachytit na stiacuteniacutetko

nebo na fotografickou desku neskutečnyacute nikoliv

bull Obraz před soustavou

rarr obraz n e s k u t e č n yacute (zdaacutenlivyacute virtuaacutelniacute)

Obraz skutečnyacute a neskutečnyacute

A ndash předmět Aacute- obraz předmětu

Upraveno podle Pazourek 1975

Francouz Augustin Jean Fresnel (1788-1827) [frenel]

Fresnelova čočka [frenelova]

- plochyacute tvar (zachovaacuteny pouze čaacutesti ktereacute měniacute směr chodu světelnyacutech paprsků)

- vyacuterazně nižšiacute hmotnost při zachovaacuteniacute podobnyacutech parametrů

Využitiacute infračidla pohybu semafory světlomety (majaacuteky) a reflektory (světla aut

divadelniacutech a filmovyacutech osvětlovaciacutech zařiacutezeniacute) zpětneacute projektory slunečniacute kolektory

na zaacutekladě tohoto principu takeacute vyacuteroba 3D displejů k mobilniacutem telefonům a televiziacutem

httpwwwmffcuniczverejnostzpravicky03_lupahtm

čočka na majaacuteku

Čočky v budoucnosti

Pokus o vyacuterobu tzv dokonaleacute čočky

Prototyp - upraveneacute tzv Maxwellovo rybiacute oko

- paprsky světla se v něm pohybujiacute po kružniciacutech a

na rozdiacutel od běžnyacutech čoček se při zobrazeniacute využijiacute

všechny paprsky

- superčočky využiacutevajiacute geometrie k tomu aby se světlo

soustředilo do oblasti menšiacute než je jeho vlnovaacute deacutelka

(zatiacutem se neviacute jak do čočky vyhovujiacuteciacutem způsobem

doveacutest světlo)

Využitiacute v budoucnu

mimo jineacute v pozorovaacuteniacute živyacutech buněk při velkeacutem zvětšeniacute

pomociacute obyčejneacuteho světla bez jejich narušeniacute

Viacutece viz Plaacutešek J Mikroskopy se superčočkami httpwwwvesmircz | Vesmiacuter 91 531 zaacuteřiacute 2012

Hranoly

- doplňky optickyacutech systeacutemů

- většinou tvar rovnostranneacuteho trojuacutehelniacuteka

- využiacutevajiacute uacuteplneacuteho odrazu

Funkce

- změna chodu paprsků pod různyacutemi uacutehly

- rozdvojeniacute paprsků

Pazourek 1975

Různeacute typy odraznyacutech hranolů

Hranoly

Různeacute typy hranolů

httplaserykvalitneczimagestext_25_zakladyoptiky1odrazne_hranolyjpg

Viz dichroickeacute zrcadlo u fluorescenčniacuteho mikroskopu

Chod paprsků v binokulaacuterniacutem tubusu

Pazourek 1975

Nikol = hranol z islandskeacuteho vaacutepence

rarr polarizace světla

Dvojlomnyacute vaacutepencovyacute

krystal

ř ndash paprsek řaacutednyacute (zanikaacute na začerněneacute ploše)

mř ndash paprsek mimořaacutednyacute (lineaacuterně polarizovanyacute

využit k osvětleniacute)

začerněnaacute plocha

Nikol

Pazourek 1975

vzduchovaacute štěrbina

- rychlost světla je

v různyacutech směrech různaacute

- uacutehel paprsku řaacutedneacuteho a

mimořaacutedneacuteho je odlišnyacute

(u Vikingů - slunečniacute kaacutemen

soacutelarsteinn)

Chod paprsků ve světlovodneacutem vlaacuteknu

Princip uacuteplnyacute odraz paprsku

- uvnitř skleněneacuteho vlaacutekna je opticky hustšiacute prostřediacute

- nutnost dostatečně silneacuteho světelneacuteho zdroje

Světlovodnaacute vlaacutekna

Pazourek 1975

Širokeacute využitiacute v praxi optickeacute kabely ndash přenos signaacutelů ve sdělovaciacute technice

světlovody umožňujiacuteciacute veacutest denniacute světlo vedeniacute světla u stereolup endoskopů hellip

Page 59: Světelná a elektronová mikroskopie...(AMF – Atomic Force Miroscope) - skenování povrchu materiálu pomocí hrotu zavěšeném na pružném výkyvném raménku, který je přitahován

Interference světla = sklaacutedaacuteniacute světelnyacutech vln

Předpoklad světlo musiacute byacutet koherentniacute

Podmiacutenka koherence

- paprsky musiacute miacutet stejnou frekvenci

- paprsky musiacute byacutet navzaacutejem rovnoběžneacute

- paprsky musiacute miacutet na sobě nezaacutevislyacute draacutehovyacute (faacutezovyacute) rozdiacutel

Vznik koherentniacuteho zaacuteřeniacute

rozděleniacutem světla

- buď odrazem pomociacute zrcadel

- nebo lomem pomociacute hranolů

Foto Pavla Vaacutelovaacute Praha 151 2016

Interference světla

stejnyacute způsob vlněniacute

(faacuteze je vzaacutejemně posunuta o sudeacute

naacutesobky λ2)

vznik interferenčniacuteho maxima

(konstruktivniacute interference)

Interference světla

asynchronniacute vlněniacute

(vzaacutejemně posunutaacute faacuteze

o licheacute naacutesobky λ2)

vznik interferenčniacuteho

minima

(destruktivniacute interference)

rarr zaacuteřeniacute zanikaacute

rarr zeslabeniacute zaacuteřeniacute

Interference dvou vrstev elektromagnetickeacuteho zaacuteřeniacute u Slunce

Čočky ndash zaacutekladniacute součaacutesti

mikroskopu

= průhlednaacute (nejčastěji skleněnaacute) tělesa omezenaacute

vypuklyacutemi nebo vydutyacutemi kulovityacutemi plochami lišiacuteciacute se od sveacuteho okoliacute odlišnyacutem indexem lomu

Zaacutekladniacute typy čoček

spojky (vypukleacute neboli konvexniacute)

rozptylky (vyduteacute konkaacutevniacute)

Pazourek 1975

Optickaacute osa ( o ) prochaacuteziacute středem čočky

Ohnisko ( F ) - bod do ktereacuteho se soustřeďujiacute paprsky probiacutehajiacuteciacute rovnoběžně s optickou osou

- 2 ohniska - předmětoveacute ohnisko ( F )

obrazoveacute ohnisko ( Facute )

- ohniskovaacute vzdaacutelenost ( f )

vzdaacutelenost ohniska od hlavniacute roviny proloženeacute středem čočky

- dvojnaacutesobnaacute ohniskovaacute vzdaacutelenost ( P Pacute )

Obrazovyacute prostor - prostor v němž vznikaacute obraz

Důležiteacute charakteristiky čočky

f

o

hlavniacute rovina

Pazourek 1975

V přiacutepadě velmi tenkeacute čočky

bull Obraz za optickou soustavou

rarr obraz s k u t e č n yacute

Skutečnyacute obraz je možneacute zachytit na stiacuteniacutetko

nebo na fotografickou desku neskutečnyacute nikoliv

bull Obraz před soustavou

rarr obraz n e s k u t e č n yacute (zdaacutenlivyacute virtuaacutelniacute)

Obraz skutečnyacute a neskutečnyacute

A ndash předmět Aacute- obraz předmětu

Upraveno podle Pazourek 1975

Francouz Augustin Jean Fresnel (1788-1827) [frenel]

Fresnelova čočka [frenelova]

- plochyacute tvar (zachovaacuteny pouze čaacutesti ktereacute měniacute směr chodu světelnyacutech paprsků)

- vyacuterazně nižšiacute hmotnost při zachovaacuteniacute podobnyacutech parametrů

Využitiacute infračidla pohybu semafory světlomety (majaacuteky) a reflektory (světla aut

divadelniacutech a filmovyacutech osvětlovaciacutech zařiacutezeniacute) zpětneacute projektory slunečniacute kolektory

na zaacutekladě tohoto principu takeacute vyacuteroba 3D displejů k mobilniacutem telefonům a televiziacutem

httpwwwmffcuniczverejnostzpravicky03_lupahtm

čočka na majaacuteku

Čočky v budoucnosti

Pokus o vyacuterobu tzv dokonaleacute čočky

Prototyp - upraveneacute tzv Maxwellovo rybiacute oko

- paprsky světla se v něm pohybujiacute po kružniciacutech a

na rozdiacutel od běžnyacutech čoček se při zobrazeniacute využijiacute

všechny paprsky

- superčočky využiacutevajiacute geometrie k tomu aby se světlo

soustředilo do oblasti menšiacute než je jeho vlnovaacute deacutelka

(zatiacutem se neviacute jak do čočky vyhovujiacuteciacutem způsobem

doveacutest světlo)

Využitiacute v budoucnu

mimo jineacute v pozorovaacuteniacute živyacutech buněk při velkeacutem zvětšeniacute

pomociacute obyčejneacuteho světla bez jejich narušeniacute

Viacutece viz Plaacutešek J Mikroskopy se superčočkami httpwwwvesmircz | Vesmiacuter 91 531 zaacuteřiacute 2012

Hranoly

- doplňky optickyacutech systeacutemů

- většinou tvar rovnostranneacuteho trojuacutehelniacuteka

- využiacutevajiacute uacuteplneacuteho odrazu

Funkce

- změna chodu paprsků pod různyacutemi uacutehly

- rozdvojeniacute paprsků

Pazourek 1975

Různeacute typy odraznyacutech hranolů

Hranoly

Různeacute typy hranolů

httplaserykvalitneczimagestext_25_zakladyoptiky1odrazne_hranolyjpg

Viz dichroickeacute zrcadlo u fluorescenčniacuteho mikroskopu

Chod paprsků v binokulaacuterniacutem tubusu

Pazourek 1975

Nikol = hranol z islandskeacuteho vaacutepence

rarr polarizace světla

Dvojlomnyacute vaacutepencovyacute

krystal

ř ndash paprsek řaacutednyacute (zanikaacute na začerněneacute ploše)

mř ndash paprsek mimořaacutednyacute (lineaacuterně polarizovanyacute

využit k osvětleniacute)

začerněnaacute plocha

Nikol

Pazourek 1975

vzduchovaacute štěrbina

- rychlost světla je

v různyacutech směrech různaacute

- uacutehel paprsku řaacutedneacuteho a

mimořaacutedneacuteho je odlišnyacute

(u Vikingů - slunečniacute kaacutemen

soacutelarsteinn)

Chod paprsků ve světlovodneacutem vlaacuteknu

Princip uacuteplnyacute odraz paprsku

- uvnitř skleněneacuteho vlaacutekna je opticky hustšiacute prostřediacute

- nutnost dostatečně silneacuteho světelneacuteho zdroje

Světlovodnaacute vlaacutekna

Pazourek 1975

Širokeacute využitiacute v praxi optickeacute kabely ndash přenos signaacutelů ve sdělovaciacute technice

světlovody umožňujiacuteciacute veacutest denniacute světlo vedeniacute světla u stereolup endoskopů hellip

Page 60: Světelná a elektronová mikroskopie...(AMF – Atomic Force Miroscope) - skenování povrchu materiálu pomocí hrotu zavěšeném na pružném výkyvném raménku, který je přitahován

Interference světla

stejnyacute způsob vlněniacute

(faacuteze je vzaacutejemně posunuta o sudeacute

naacutesobky λ2)

vznik interferenčniacuteho maxima

(konstruktivniacute interference)

Interference světla

asynchronniacute vlněniacute

(vzaacutejemně posunutaacute faacuteze

o licheacute naacutesobky λ2)

vznik interferenčniacuteho

minima

(destruktivniacute interference)

rarr zaacuteřeniacute zanikaacute

rarr zeslabeniacute zaacuteřeniacute

Interference dvou vrstev elektromagnetickeacuteho zaacuteřeniacute u Slunce

Čočky ndash zaacutekladniacute součaacutesti

mikroskopu

= průhlednaacute (nejčastěji skleněnaacute) tělesa omezenaacute

vypuklyacutemi nebo vydutyacutemi kulovityacutemi plochami lišiacuteciacute se od sveacuteho okoliacute odlišnyacutem indexem lomu

Zaacutekladniacute typy čoček

spojky (vypukleacute neboli konvexniacute)

rozptylky (vyduteacute konkaacutevniacute)

Pazourek 1975

Optickaacute osa ( o ) prochaacuteziacute středem čočky

Ohnisko ( F ) - bod do ktereacuteho se soustřeďujiacute paprsky probiacutehajiacuteciacute rovnoběžně s optickou osou

- 2 ohniska - předmětoveacute ohnisko ( F )

obrazoveacute ohnisko ( Facute )

- ohniskovaacute vzdaacutelenost ( f )

vzdaacutelenost ohniska od hlavniacute roviny proloženeacute středem čočky

- dvojnaacutesobnaacute ohniskovaacute vzdaacutelenost ( P Pacute )

Obrazovyacute prostor - prostor v němž vznikaacute obraz

Důležiteacute charakteristiky čočky

f

o

hlavniacute rovina

Pazourek 1975

V přiacutepadě velmi tenkeacute čočky

bull Obraz za optickou soustavou

rarr obraz s k u t e č n yacute

Skutečnyacute obraz je možneacute zachytit na stiacuteniacutetko

nebo na fotografickou desku neskutečnyacute nikoliv

bull Obraz před soustavou

rarr obraz n e s k u t e č n yacute (zdaacutenlivyacute virtuaacutelniacute)

Obraz skutečnyacute a neskutečnyacute

A ndash předmět Aacute- obraz předmětu

Upraveno podle Pazourek 1975

Francouz Augustin Jean Fresnel (1788-1827) [frenel]

Fresnelova čočka [frenelova]

- plochyacute tvar (zachovaacuteny pouze čaacutesti ktereacute měniacute směr chodu světelnyacutech paprsků)

- vyacuterazně nižšiacute hmotnost při zachovaacuteniacute podobnyacutech parametrů

Využitiacute infračidla pohybu semafory světlomety (majaacuteky) a reflektory (světla aut

divadelniacutech a filmovyacutech osvětlovaciacutech zařiacutezeniacute) zpětneacute projektory slunečniacute kolektory

na zaacutekladě tohoto principu takeacute vyacuteroba 3D displejů k mobilniacutem telefonům a televiziacutem

httpwwwmffcuniczverejnostzpravicky03_lupahtm

čočka na majaacuteku

Čočky v budoucnosti

Pokus o vyacuterobu tzv dokonaleacute čočky

Prototyp - upraveneacute tzv Maxwellovo rybiacute oko

- paprsky světla se v něm pohybujiacute po kružniciacutech a

na rozdiacutel od běžnyacutech čoček se při zobrazeniacute využijiacute

všechny paprsky

- superčočky využiacutevajiacute geometrie k tomu aby se světlo

soustředilo do oblasti menšiacute než je jeho vlnovaacute deacutelka

(zatiacutem se neviacute jak do čočky vyhovujiacuteciacutem způsobem

doveacutest světlo)

Využitiacute v budoucnu

mimo jineacute v pozorovaacuteniacute živyacutech buněk při velkeacutem zvětšeniacute

pomociacute obyčejneacuteho světla bez jejich narušeniacute

Viacutece viz Plaacutešek J Mikroskopy se superčočkami httpwwwvesmircz | Vesmiacuter 91 531 zaacuteřiacute 2012

Hranoly

- doplňky optickyacutech systeacutemů

- většinou tvar rovnostranneacuteho trojuacutehelniacuteka

- využiacutevajiacute uacuteplneacuteho odrazu

Funkce

- změna chodu paprsků pod různyacutemi uacutehly

- rozdvojeniacute paprsků

Pazourek 1975

Různeacute typy odraznyacutech hranolů

Hranoly

Různeacute typy hranolů

httplaserykvalitneczimagestext_25_zakladyoptiky1odrazne_hranolyjpg

Viz dichroickeacute zrcadlo u fluorescenčniacuteho mikroskopu

Chod paprsků v binokulaacuterniacutem tubusu

Pazourek 1975

Nikol = hranol z islandskeacuteho vaacutepence

rarr polarizace světla

Dvojlomnyacute vaacutepencovyacute

krystal

ř ndash paprsek řaacutednyacute (zanikaacute na začerněneacute ploše)

mř ndash paprsek mimořaacutednyacute (lineaacuterně polarizovanyacute

využit k osvětleniacute)

začerněnaacute plocha

Nikol

Pazourek 1975

vzduchovaacute štěrbina

- rychlost světla je

v různyacutech směrech různaacute

- uacutehel paprsku řaacutedneacuteho a

mimořaacutedneacuteho je odlišnyacute

(u Vikingů - slunečniacute kaacutemen

soacutelarsteinn)

Chod paprsků ve světlovodneacutem vlaacuteknu

Princip uacuteplnyacute odraz paprsku

- uvnitř skleněneacuteho vlaacutekna je opticky hustšiacute prostřediacute

- nutnost dostatečně silneacuteho světelneacuteho zdroje

Světlovodnaacute vlaacutekna

Pazourek 1975

Širokeacute využitiacute v praxi optickeacute kabely ndash přenos signaacutelů ve sdělovaciacute technice

světlovody umožňujiacuteciacute veacutest denniacute světlo vedeniacute světla u stereolup endoskopů hellip

Page 61: Světelná a elektronová mikroskopie...(AMF – Atomic Force Miroscope) - skenování povrchu materiálu pomocí hrotu zavěšeném na pružném výkyvném raménku, který je přitahován

Interference světla

asynchronniacute vlněniacute

(vzaacutejemně posunutaacute faacuteze

o licheacute naacutesobky λ2)

vznik interferenčniacuteho

minima

(destruktivniacute interference)

rarr zaacuteřeniacute zanikaacute

rarr zeslabeniacute zaacuteřeniacute

Interference dvou vrstev elektromagnetickeacuteho zaacuteřeniacute u Slunce

Čočky ndash zaacutekladniacute součaacutesti

mikroskopu

= průhlednaacute (nejčastěji skleněnaacute) tělesa omezenaacute

vypuklyacutemi nebo vydutyacutemi kulovityacutemi plochami lišiacuteciacute se od sveacuteho okoliacute odlišnyacutem indexem lomu

Zaacutekladniacute typy čoček

spojky (vypukleacute neboli konvexniacute)

rozptylky (vyduteacute konkaacutevniacute)

Pazourek 1975

Optickaacute osa ( o ) prochaacuteziacute středem čočky

Ohnisko ( F ) - bod do ktereacuteho se soustřeďujiacute paprsky probiacutehajiacuteciacute rovnoběžně s optickou osou

- 2 ohniska - předmětoveacute ohnisko ( F )

obrazoveacute ohnisko ( Facute )

- ohniskovaacute vzdaacutelenost ( f )

vzdaacutelenost ohniska od hlavniacute roviny proloženeacute středem čočky

- dvojnaacutesobnaacute ohniskovaacute vzdaacutelenost ( P Pacute )

Obrazovyacute prostor - prostor v němž vznikaacute obraz

Důležiteacute charakteristiky čočky

f

o

hlavniacute rovina

Pazourek 1975

V přiacutepadě velmi tenkeacute čočky

bull Obraz za optickou soustavou

rarr obraz s k u t e č n yacute

Skutečnyacute obraz je možneacute zachytit na stiacuteniacutetko

nebo na fotografickou desku neskutečnyacute nikoliv

bull Obraz před soustavou

rarr obraz n e s k u t e č n yacute (zdaacutenlivyacute virtuaacutelniacute)

Obraz skutečnyacute a neskutečnyacute

A ndash předmět Aacute- obraz předmětu

Upraveno podle Pazourek 1975

Francouz Augustin Jean Fresnel (1788-1827) [frenel]

Fresnelova čočka [frenelova]

- plochyacute tvar (zachovaacuteny pouze čaacutesti ktereacute měniacute směr chodu světelnyacutech paprsků)

- vyacuterazně nižšiacute hmotnost při zachovaacuteniacute podobnyacutech parametrů

Využitiacute infračidla pohybu semafory světlomety (majaacuteky) a reflektory (světla aut

divadelniacutech a filmovyacutech osvětlovaciacutech zařiacutezeniacute) zpětneacute projektory slunečniacute kolektory

na zaacutekladě tohoto principu takeacute vyacuteroba 3D displejů k mobilniacutem telefonům a televiziacutem

httpwwwmffcuniczverejnostzpravicky03_lupahtm

čočka na majaacuteku

Čočky v budoucnosti

Pokus o vyacuterobu tzv dokonaleacute čočky

Prototyp - upraveneacute tzv Maxwellovo rybiacute oko

- paprsky světla se v něm pohybujiacute po kružniciacutech a

na rozdiacutel od běžnyacutech čoček se při zobrazeniacute využijiacute

všechny paprsky

- superčočky využiacutevajiacute geometrie k tomu aby se světlo

soustředilo do oblasti menšiacute než je jeho vlnovaacute deacutelka

(zatiacutem se neviacute jak do čočky vyhovujiacuteciacutem způsobem

doveacutest světlo)

Využitiacute v budoucnu

mimo jineacute v pozorovaacuteniacute živyacutech buněk při velkeacutem zvětšeniacute

pomociacute obyčejneacuteho světla bez jejich narušeniacute

Viacutece viz Plaacutešek J Mikroskopy se superčočkami httpwwwvesmircz | Vesmiacuter 91 531 zaacuteřiacute 2012

Hranoly

- doplňky optickyacutech systeacutemů

- většinou tvar rovnostranneacuteho trojuacutehelniacuteka

- využiacutevajiacute uacuteplneacuteho odrazu

Funkce

- změna chodu paprsků pod různyacutemi uacutehly

- rozdvojeniacute paprsků

Pazourek 1975

Různeacute typy odraznyacutech hranolů

Hranoly

Různeacute typy hranolů

httplaserykvalitneczimagestext_25_zakladyoptiky1odrazne_hranolyjpg

Viz dichroickeacute zrcadlo u fluorescenčniacuteho mikroskopu

Chod paprsků v binokulaacuterniacutem tubusu

Pazourek 1975

Nikol = hranol z islandskeacuteho vaacutepence

rarr polarizace světla

Dvojlomnyacute vaacutepencovyacute

krystal

ř ndash paprsek řaacutednyacute (zanikaacute na začerněneacute ploše)

mř ndash paprsek mimořaacutednyacute (lineaacuterně polarizovanyacute

využit k osvětleniacute)

začerněnaacute plocha

Nikol

Pazourek 1975

vzduchovaacute štěrbina

- rychlost světla je

v různyacutech směrech různaacute

- uacutehel paprsku řaacutedneacuteho a

mimořaacutedneacuteho je odlišnyacute

(u Vikingů - slunečniacute kaacutemen

soacutelarsteinn)

Chod paprsků ve světlovodneacutem vlaacuteknu

Princip uacuteplnyacute odraz paprsku

- uvnitř skleněneacuteho vlaacutekna je opticky hustšiacute prostřediacute

- nutnost dostatečně silneacuteho světelneacuteho zdroje

Světlovodnaacute vlaacutekna

Pazourek 1975

Širokeacute využitiacute v praxi optickeacute kabely ndash přenos signaacutelů ve sdělovaciacute technice

světlovody umožňujiacuteciacute veacutest denniacute světlo vedeniacute světla u stereolup endoskopů hellip

Page 62: Světelná a elektronová mikroskopie...(AMF – Atomic Force Miroscope) - skenování povrchu materiálu pomocí hrotu zavěšeném na pružném výkyvném raménku, který je přitahován

Čočky ndash zaacutekladniacute součaacutesti

mikroskopu

= průhlednaacute (nejčastěji skleněnaacute) tělesa omezenaacute

vypuklyacutemi nebo vydutyacutemi kulovityacutemi plochami lišiacuteciacute se od sveacuteho okoliacute odlišnyacutem indexem lomu

Zaacutekladniacute typy čoček

spojky (vypukleacute neboli konvexniacute)

rozptylky (vyduteacute konkaacutevniacute)

Pazourek 1975

Optickaacute osa ( o ) prochaacuteziacute středem čočky

Ohnisko ( F ) - bod do ktereacuteho se soustřeďujiacute paprsky probiacutehajiacuteciacute rovnoběžně s optickou osou

- 2 ohniska - předmětoveacute ohnisko ( F )

obrazoveacute ohnisko ( Facute )

- ohniskovaacute vzdaacutelenost ( f )

vzdaacutelenost ohniska od hlavniacute roviny proloženeacute středem čočky

- dvojnaacutesobnaacute ohniskovaacute vzdaacutelenost ( P Pacute )

Obrazovyacute prostor - prostor v němž vznikaacute obraz

Důležiteacute charakteristiky čočky

f

o

hlavniacute rovina

Pazourek 1975

V přiacutepadě velmi tenkeacute čočky

bull Obraz za optickou soustavou

rarr obraz s k u t e č n yacute

Skutečnyacute obraz je možneacute zachytit na stiacuteniacutetko

nebo na fotografickou desku neskutečnyacute nikoliv

bull Obraz před soustavou

rarr obraz n e s k u t e č n yacute (zdaacutenlivyacute virtuaacutelniacute)

Obraz skutečnyacute a neskutečnyacute

A ndash předmět Aacute- obraz předmětu

Upraveno podle Pazourek 1975

Francouz Augustin Jean Fresnel (1788-1827) [frenel]

Fresnelova čočka [frenelova]

- plochyacute tvar (zachovaacuteny pouze čaacutesti ktereacute měniacute směr chodu světelnyacutech paprsků)

- vyacuterazně nižšiacute hmotnost při zachovaacuteniacute podobnyacutech parametrů

Využitiacute infračidla pohybu semafory světlomety (majaacuteky) a reflektory (světla aut

divadelniacutech a filmovyacutech osvětlovaciacutech zařiacutezeniacute) zpětneacute projektory slunečniacute kolektory

na zaacutekladě tohoto principu takeacute vyacuteroba 3D displejů k mobilniacutem telefonům a televiziacutem

httpwwwmffcuniczverejnostzpravicky03_lupahtm

čočka na majaacuteku

Čočky v budoucnosti

Pokus o vyacuterobu tzv dokonaleacute čočky

Prototyp - upraveneacute tzv Maxwellovo rybiacute oko

- paprsky světla se v něm pohybujiacute po kružniciacutech a

na rozdiacutel od běžnyacutech čoček se při zobrazeniacute využijiacute

všechny paprsky

- superčočky využiacutevajiacute geometrie k tomu aby se světlo

soustředilo do oblasti menšiacute než je jeho vlnovaacute deacutelka

(zatiacutem se neviacute jak do čočky vyhovujiacuteciacutem způsobem

doveacutest světlo)

Využitiacute v budoucnu

mimo jineacute v pozorovaacuteniacute živyacutech buněk při velkeacutem zvětšeniacute

pomociacute obyčejneacuteho světla bez jejich narušeniacute

Viacutece viz Plaacutešek J Mikroskopy se superčočkami httpwwwvesmircz | Vesmiacuter 91 531 zaacuteřiacute 2012

Hranoly

- doplňky optickyacutech systeacutemů

- většinou tvar rovnostranneacuteho trojuacutehelniacuteka

- využiacutevajiacute uacuteplneacuteho odrazu

Funkce

- změna chodu paprsků pod různyacutemi uacutehly

- rozdvojeniacute paprsků

Pazourek 1975

Různeacute typy odraznyacutech hranolů

Hranoly

Různeacute typy hranolů

httplaserykvalitneczimagestext_25_zakladyoptiky1odrazne_hranolyjpg

Viz dichroickeacute zrcadlo u fluorescenčniacuteho mikroskopu

Chod paprsků v binokulaacuterniacutem tubusu

Pazourek 1975

Nikol = hranol z islandskeacuteho vaacutepence

rarr polarizace světla

Dvojlomnyacute vaacutepencovyacute

krystal

ř ndash paprsek řaacutednyacute (zanikaacute na začerněneacute ploše)

mř ndash paprsek mimořaacutednyacute (lineaacuterně polarizovanyacute

využit k osvětleniacute)

začerněnaacute plocha

Nikol

Pazourek 1975

vzduchovaacute štěrbina

- rychlost světla je

v různyacutech směrech různaacute

- uacutehel paprsku řaacutedneacuteho a

mimořaacutedneacuteho je odlišnyacute

(u Vikingů - slunečniacute kaacutemen

soacutelarsteinn)

Chod paprsků ve světlovodneacutem vlaacuteknu

Princip uacuteplnyacute odraz paprsku

- uvnitř skleněneacuteho vlaacutekna je opticky hustšiacute prostřediacute

- nutnost dostatečně silneacuteho světelneacuteho zdroje

Světlovodnaacute vlaacutekna

Pazourek 1975

Širokeacute využitiacute v praxi optickeacute kabely ndash přenos signaacutelů ve sdělovaciacute technice

světlovody umožňujiacuteciacute veacutest denniacute světlo vedeniacute světla u stereolup endoskopů hellip

Page 63: Světelná a elektronová mikroskopie...(AMF – Atomic Force Miroscope) - skenování povrchu materiálu pomocí hrotu zavěšeném na pružném výkyvném raménku, který je přitahován

Optickaacute osa ( o ) prochaacuteziacute středem čočky

Ohnisko ( F ) - bod do ktereacuteho se soustřeďujiacute paprsky probiacutehajiacuteciacute rovnoběžně s optickou osou

- 2 ohniska - předmětoveacute ohnisko ( F )

obrazoveacute ohnisko ( Facute )

- ohniskovaacute vzdaacutelenost ( f )

vzdaacutelenost ohniska od hlavniacute roviny proloženeacute středem čočky

- dvojnaacutesobnaacute ohniskovaacute vzdaacutelenost ( P Pacute )

Obrazovyacute prostor - prostor v němž vznikaacute obraz

Důležiteacute charakteristiky čočky

f

o

hlavniacute rovina

Pazourek 1975

V přiacutepadě velmi tenkeacute čočky

bull Obraz za optickou soustavou

rarr obraz s k u t e č n yacute

Skutečnyacute obraz je možneacute zachytit na stiacuteniacutetko

nebo na fotografickou desku neskutečnyacute nikoliv

bull Obraz před soustavou

rarr obraz n e s k u t e č n yacute (zdaacutenlivyacute virtuaacutelniacute)

Obraz skutečnyacute a neskutečnyacute

A ndash předmět Aacute- obraz předmětu

Upraveno podle Pazourek 1975

Francouz Augustin Jean Fresnel (1788-1827) [frenel]

Fresnelova čočka [frenelova]

- plochyacute tvar (zachovaacuteny pouze čaacutesti ktereacute měniacute směr chodu světelnyacutech paprsků)

- vyacuterazně nižšiacute hmotnost při zachovaacuteniacute podobnyacutech parametrů

Využitiacute infračidla pohybu semafory světlomety (majaacuteky) a reflektory (světla aut

divadelniacutech a filmovyacutech osvětlovaciacutech zařiacutezeniacute) zpětneacute projektory slunečniacute kolektory

na zaacutekladě tohoto principu takeacute vyacuteroba 3D displejů k mobilniacutem telefonům a televiziacutem

httpwwwmffcuniczverejnostzpravicky03_lupahtm

čočka na majaacuteku

Čočky v budoucnosti

Pokus o vyacuterobu tzv dokonaleacute čočky

Prototyp - upraveneacute tzv Maxwellovo rybiacute oko

- paprsky světla se v něm pohybujiacute po kružniciacutech a

na rozdiacutel od běžnyacutech čoček se při zobrazeniacute využijiacute

všechny paprsky

- superčočky využiacutevajiacute geometrie k tomu aby se světlo

soustředilo do oblasti menšiacute než je jeho vlnovaacute deacutelka

(zatiacutem se neviacute jak do čočky vyhovujiacuteciacutem způsobem

doveacutest světlo)

Využitiacute v budoucnu

mimo jineacute v pozorovaacuteniacute živyacutech buněk při velkeacutem zvětšeniacute

pomociacute obyčejneacuteho světla bez jejich narušeniacute

Viacutece viz Plaacutešek J Mikroskopy se superčočkami httpwwwvesmircz | Vesmiacuter 91 531 zaacuteřiacute 2012

Hranoly

- doplňky optickyacutech systeacutemů

- většinou tvar rovnostranneacuteho trojuacutehelniacuteka

- využiacutevajiacute uacuteplneacuteho odrazu

Funkce

- změna chodu paprsků pod různyacutemi uacutehly

- rozdvojeniacute paprsků

Pazourek 1975

Různeacute typy odraznyacutech hranolů

Hranoly

Různeacute typy hranolů

httplaserykvalitneczimagestext_25_zakladyoptiky1odrazne_hranolyjpg

Viz dichroickeacute zrcadlo u fluorescenčniacuteho mikroskopu

Chod paprsků v binokulaacuterniacutem tubusu

Pazourek 1975

Nikol = hranol z islandskeacuteho vaacutepence

rarr polarizace světla

Dvojlomnyacute vaacutepencovyacute

krystal

ř ndash paprsek řaacutednyacute (zanikaacute na začerněneacute ploše)

mř ndash paprsek mimořaacutednyacute (lineaacuterně polarizovanyacute

využit k osvětleniacute)

začerněnaacute plocha

Nikol

Pazourek 1975

vzduchovaacute štěrbina

- rychlost světla je

v různyacutech směrech různaacute

- uacutehel paprsku řaacutedneacuteho a

mimořaacutedneacuteho je odlišnyacute

(u Vikingů - slunečniacute kaacutemen

soacutelarsteinn)

Chod paprsků ve světlovodneacutem vlaacuteknu

Princip uacuteplnyacute odraz paprsku

- uvnitř skleněneacuteho vlaacutekna je opticky hustšiacute prostřediacute

- nutnost dostatečně silneacuteho světelneacuteho zdroje

Světlovodnaacute vlaacutekna

Pazourek 1975

Širokeacute využitiacute v praxi optickeacute kabely ndash přenos signaacutelů ve sdělovaciacute technice

světlovody umožňujiacuteciacute veacutest denniacute světlo vedeniacute světla u stereolup endoskopů hellip

Page 64: Světelná a elektronová mikroskopie...(AMF – Atomic Force Miroscope) - skenování povrchu materiálu pomocí hrotu zavěšeném na pružném výkyvném raménku, který je přitahován

bull Obraz za optickou soustavou

rarr obraz s k u t e č n yacute

Skutečnyacute obraz je možneacute zachytit na stiacuteniacutetko

nebo na fotografickou desku neskutečnyacute nikoliv

bull Obraz před soustavou

rarr obraz n e s k u t e č n yacute (zdaacutenlivyacute virtuaacutelniacute)

Obraz skutečnyacute a neskutečnyacute

A ndash předmět Aacute- obraz předmětu

Upraveno podle Pazourek 1975

Francouz Augustin Jean Fresnel (1788-1827) [frenel]

Fresnelova čočka [frenelova]

- plochyacute tvar (zachovaacuteny pouze čaacutesti ktereacute měniacute směr chodu světelnyacutech paprsků)

- vyacuterazně nižšiacute hmotnost při zachovaacuteniacute podobnyacutech parametrů

Využitiacute infračidla pohybu semafory světlomety (majaacuteky) a reflektory (světla aut

divadelniacutech a filmovyacutech osvětlovaciacutech zařiacutezeniacute) zpětneacute projektory slunečniacute kolektory

na zaacutekladě tohoto principu takeacute vyacuteroba 3D displejů k mobilniacutem telefonům a televiziacutem

httpwwwmffcuniczverejnostzpravicky03_lupahtm

čočka na majaacuteku

Čočky v budoucnosti

Pokus o vyacuterobu tzv dokonaleacute čočky

Prototyp - upraveneacute tzv Maxwellovo rybiacute oko

- paprsky světla se v něm pohybujiacute po kružniciacutech a

na rozdiacutel od běžnyacutech čoček se při zobrazeniacute využijiacute

všechny paprsky

- superčočky využiacutevajiacute geometrie k tomu aby se světlo

soustředilo do oblasti menšiacute než je jeho vlnovaacute deacutelka

(zatiacutem se neviacute jak do čočky vyhovujiacuteciacutem způsobem

doveacutest světlo)

Využitiacute v budoucnu

mimo jineacute v pozorovaacuteniacute živyacutech buněk při velkeacutem zvětšeniacute

pomociacute obyčejneacuteho světla bez jejich narušeniacute

Viacutece viz Plaacutešek J Mikroskopy se superčočkami httpwwwvesmircz | Vesmiacuter 91 531 zaacuteřiacute 2012

Hranoly

- doplňky optickyacutech systeacutemů

- většinou tvar rovnostranneacuteho trojuacutehelniacuteka

- využiacutevajiacute uacuteplneacuteho odrazu

Funkce

- změna chodu paprsků pod různyacutemi uacutehly

- rozdvojeniacute paprsků

Pazourek 1975

Různeacute typy odraznyacutech hranolů

Hranoly

Různeacute typy hranolů

httplaserykvalitneczimagestext_25_zakladyoptiky1odrazne_hranolyjpg

Viz dichroickeacute zrcadlo u fluorescenčniacuteho mikroskopu

Chod paprsků v binokulaacuterniacutem tubusu

Pazourek 1975

Nikol = hranol z islandskeacuteho vaacutepence

rarr polarizace světla

Dvojlomnyacute vaacutepencovyacute

krystal

ř ndash paprsek řaacutednyacute (zanikaacute na začerněneacute ploše)

mř ndash paprsek mimořaacutednyacute (lineaacuterně polarizovanyacute

využit k osvětleniacute)

začerněnaacute plocha

Nikol

Pazourek 1975

vzduchovaacute štěrbina

- rychlost světla je

v různyacutech směrech různaacute

- uacutehel paprsku řaacutedneacuteho a

mimořaacutedneacuteho je odlišnyacute

(u Vikingů - slunečniacute kaacutemen

soacutelarsteinn)

Chod paprsků ve světlovodneacutem vlaacuteknu

Princip uacuteplnyacute odraz paprsku

- uvnitř skleněneacuteho vlaacutekna je opticky hustšiacute prostřediacute

- nutnost dostatečně silneacuteho světelneacuteho zdroje

Světlovodnaacute vlaacutekna

Pazourek 1975

Širokeacute využitiacute v praxi optickeacute kabely ndash přenos signaacutelů ve sdělovaciacute technice

světlovody umožňujiacuteciacute veacutest denniacute světlo vedeniacute světla u stereolup endoskopů hellip

Page 65: Světelná a elektronová mikroskopie...(AMF – Atomic Force Miroscope) - skenování povrchu materiálu pomocí hrotu zavěšeném na pružném výkyvném raménku, který je přitahován

Francouz Augustin Jean Fresnel (1788-1827) [frenel]

Fresnelova čočka [frenelova]

- plochyacute tvar (zachovaacuteny pouze čaacutesti ktereacute měniacute směr chodu světelnyacutech paprsků)

- vyacuterazně nižšiacute hmotnost při zachovaacuteniacute podobnyacutech parametrů

Využitiacute infračidla pohybu semafory světlomety (majaacuteky) a reflektory (světla aut

divadelniacutech a filmovyacutech osvětlovaciacutech zařiacutezeniacute) zpětneacute projektory slunečniacute kolektory

na zaacutekladě tohoto principu takeacute vyacuteroba 3D displejů k mobilniacutem telefonům a televiziacutem

httpwwwmffcuniczverejnostzpravicky03_lupahtm

čočka na majaacuteku

Čočky v budoucnosti

Pokus o vyacuterobu tzv dokonaleacute čočky

Prototyp - upraveneacute tzv Maxwellovo rybiacute oko

- paprsky světla se v něm pohybujiacute po kružniciacutech a

na rozdiacutel od běžnyacutech čoček se při zobrazeniacute využijiacute

všechny paprsky

- superčočky využiacutevajiacute geometrie k tomu aby se světlo

soustředilo do oblasti menšiacute než je jeho vlnovaacute deacutelka

(zatiacutem se neviacute jak do čočky vyhovujiacuteciacutem způsobem

doveacutest světlo)

Využitiacute v budoucnu

mimo jineacute v pozorovaacuteniacute živyacutech buněk při velkeacutem zvětšeniacute

pomociacute obyčejneacuteho světla bez jejich narušeniacute

Viacutece viz Plaacutešek J Mikroskopy se superčočkami httpwwwvesmircz | Vesmiacuter 91 531 zaacuteřiacute 2012

Hranoly

- doplňky optickyacutech systeacutemů

- většinou tvar rovnostranneacuteho trojuacutehelniacuteka

- využiacutevajiacute uacuteplneacuteho odrazu

Funkce

- změna chodu paprsků pod různyacutemi uacutehly

- rozdvojeniacute paprsků

Pazourek 1975

Různeacute typy odraznyacutech hranolů

Hranoly

Různeacute typy hranolů

httplaserykvalitneczimagestext_25_zakladyoptiky1odrazne_hranolyjpg

Viz dichroickeacute zrcadlo u fluorescenčniacuteho mikroskopu

Chod paprsků v binokulaacuterniacutem tubusu

Pazourek 1975

Nikol = hranol z islandskeacuteho vaacutepence

rarr polarizace světla

Dvojlomnyacute vaacutepencovyacute

krystal

ř ndash paprsek řaacutednyacute (zanikaacute na začerněneacute ploše)

mř ndash paprsek mimořaacutednyacute (lineaacuterně polarizovanyacute

využit k osvětleniacute)

začerněnaacute plocha

Nikol

Pazourek 1975

vzduchovaacute štěrbina

- rychlost světla je

v různyacutech směrech různaacute

- uacutehel paprsku řaacutedneacuteho a

mimořaacutedneacuteho je odlišnyacute

(u Vikingů - slunečniacute kaacutemen

soacutelarsteinn)

Chod paprsků ve světlovodneacutem vlaacuteknu

Princip uacuteplnyacute odraz paprsku

- uvnitř skleněneacuteho vlaacutekna je opticky hustšiacute prostřediacute

- nutnost dostatečně silneacuteho světelneacuteho zdroje

Světlovodnaacute vlaacutekna

Pazourek 1975

Širokeacute využitiacute v praxi optickeacute kabely ndash přenos signaacutelů ve sdělovaciacute technice

světlovody umožňujiacuteciacute veacutest denniacute světlo vedeniacute světla u stereolup endoskopů hellip

Page 66: Světelná a elektronová mikroskopie...(AMF – Atomic Force Miroscope) - skenování povrchu materiálu pomocí hrotu zavěšeném na pružném výkyvném raménku, který je přitahován

Čočky v budoucnosti

Pokus o vyacuterobu tzv dokonaleacute čočky

Prototyp - upraveneacute tzv Maxwellovo rybiacute oko

- paprsky světla se v něm pohybujiacute po kružniciacutech a

na rozdiacutel od běžnyacutech čoček se při zobrazeniacute využijiacute

všechny paprsky

- superčočky využiacutevajiacute geometrie k tomu aby se světlo

soustředilo do oblasti menšiacute než je jeho vlnovaacute deacutelka

(zatiacutem se neviacute jak do čočky vyhovujiacuteciacutem způsobem

doveacutest světlo)

Využitiacute v budoucnu

mimo jineacute v pozorovaacuteniacute živyacutech buněk při velkeacutem zvětšeniacute

pomociacute obyčejneacuteho světla bez jejich narušeniacute

Viacutece viz Plaacutešek J Mikroskopy se superčočkami httpwwwvesmircz | Vesmiacuter 91 531 zaacuteřiacute 2012

Hranoly

- doplňky optickyacutech systeacutemů

- většinou tvar rovnostranneacuteho trojuacutehelniacuteka

- využiacutevajiacute uacuteplneacuteho odrazu

Funkce

- změna chodu paprsků pod různyacutemi uacutehly

- rozdvojeniacute paprsků

Pazourek 1975

Různeacute typy odraznyacutech hranolů

Hranoly

Různeacute typy hranolů

httplaserykvalitneczimagestext_25_zakladyoptiky1odrazne_hranolyjpg

Viz dichroickeacute zrcadlo u fluorescenčniacuteho mikroskopu

Chod paprsků v binokulaacuterniacutem tubusu

Pazourek 1975

Nikol = hranol z islandskeacuteho vaacutepence

rarr polarizace světla

Dvojlomnyacute vaacutepencovyacute

krystal

ř ndash paprsek řaacutednyacute (zanikaacute na začerněneacute ploše)

mř ndash paprsek mimořaacutednyacute (lineaacuterně polarizovanyacute

využit k osvětleniacute)

začerněnaacute plocha

Nikol

Pazourek 1975

vzduchovaacute štěrbina

- rychlost světla je

v různyacutech směrech různaacute

- uacutehel paprsku řaacutedneacuteho a

mimořaacutedneacuteho je odlišnyacute

(u Vikingů - slunečniacute kaacutemen

soacutelarsteinn)

Chod paprsků ve světlovodneacutem vlaacuteknu

Princip uacuteplnyacute odraz paprsku

- uvnitř skleněneacuteho vlaacutekna je opticky hustšiacute prostřediacute

- nutnost dostatečně silneacuteho světelneacuteho zdroje

Světlovodnaacute vlaacutekna

Pazourek 1975

Širokeacute využitiacute v praxi optickeacute kabely ndash přenos signaacutelů ve sdělovaciacute technice

světlovody umožňujiacuteciacute veacutest denniacute světlo vedeniacute světla u stereolup endoskopů hellip

Page 67: Světelná a elektronová mikroskopie...(AMF – Atomic Force Miroscope) - skenování povrchu materiálu pomocí hrotu zavěšeném na pružném výkyvném raménku, který je přitahován

Hranoly

- doplňky optickyacutech systeacutemů

- většinou tvar rovnostranneacuteho trojuacutehelniacuteka

- využiacutevajiacute uacuteplneacuteho odrazu

Funkce

- změna chodu paprsků pod různyacutemi uacutehly

- rozdvojeniacute paprsků

Pazourek 1975

Různeacute typy odraznyacutech hranolů

Hranoly

Různeacute typy hranolů

httplaserykvalitneczimagestext_25_zakladyoptiky1odrazne_hranolyjpg

Viz dichroickeacute zrcadlo u fluorescenčniacuteho mikroskopu

Chod paprsků v binokulaacuterniacutem tubusu

Pazourek 1975

Nikol = hranol z islandskeacuteho vaacutepence

rarr polarizace světla

Dvojlomnyacute vaacutepencovyacute

krystal

ř ndash paprsek řaacutednyacute (zanikaacute na začerněneacute ploše)

mř ndash paprsek mimořaacutednyacute (lineaacuterně polarizovanyacute

využit k osvětleniacute)

začerněnaacute plocha

Nikol

Pazourek 1975

vzduchovaacute štěrbina

- rychlost světla je

v různyacutech směrech různaacute

- uacutehel paprsku řaacutedneacuteho a

mimořaacutedneacuteho je odlišnyacute

(u Vikingů - slunečniacute kaacutemen

soacutelarsteinn)

Chod paprsků ve světlovodneacutem vlaacuteknu

Princip uacuteplnyacute odraz paprsku

- uvnitř skleněneacuteho vlaacutekna je opticky hustšiacute prostřediacute

- nutnost dostatečně silneacuteho světelneacuteho zdroje

Světlovodnaacute vlaacutekna

Pazourek 1975

Širokeacute využitiacute v praxi optickeacute kabely ndash přenos signaacutelů ve sdělovaciacute technice

světlovody umožňujiacuteciacute veacutest denniacute světlo vedeniacute světla u stereolup endoskopů hellip

Page 68: Světelná a elektronová mikroskopie...(AMF – Atomic Force Miroscope) - skenování povrchu materiálu pomocí hrotu zavěšeném na pružném výkyvném raménku, který je přitahován

Hranoly

Různeacute typy hranolů

httplaserykvalitneczimagestext_25_zakladyoptiky1odrazne_hranolyjpg

Viz dichroickeacute zrcadlo u fluorescenčniacuteho mikroskopu

Chod paprsků v binokulaacuterniacutem tubusu

Pazourek 1975

Nikol = hranol z islandskeacuteho vaacutepence

rarr polarizace světla

Dvojlomnyacute vaacutepencovyacute

krystal

ř ndash paprsek řaacutednyacute (zanikaacute na začerněneacute ploše)

mř ndash paprsek mimořaacutednyacute (lineaacuterně polarizovanyacute

využit k osvětleniacute)

začerněnaacute plocha

Nikol

Pazourek 1975

vzduchovaacute štěrbina

- rychlost světla je

v různyacutech směrech různaacute

- uacutehel paprsku řaacutedneacuteho a

mimořaacutedneacuteho je odlišnyacute

(u Vikingů - slunečniacute kaacutemen

soacutelarsteinn)

Chod paprsků ve světlovodneacutem vlaacuteknu

Princip uacuteplnyacute odraz paprsku

- uvnitř skleněneacuteho vlaacutekna je opticky hustšiacute prostřediacute

- nutnost dostatečně silneacuteho světelneacuteho zdroje

Světlovodnaacute vlaacutekna

Pazourek 1975

Širokeacute využitiacute v praxi optickeacute kabely ndash přenos signaacutelů ve sdělovaciacute technice

světlovody umožňujiacuteciacute veacutest denniacute světlo vedeniacute světla u stereolup endoskopů hellip

Page 69: Světelná a elektronová mikroskopie...(AMF – Atomic Force Miroscope) - skenování povrchu materiálu pomocí hrotu zavěšeném na pružném výkyvném raménku, který je přitahován

Chod paprsků v binokulaacuterniacutem tubusu

Pazourek 1975

Nikol = hranol z islandskeacuteho vaacutepence

rarr polarizace světla

Dvojlomnyacute vaacutepencovyacute

krystal

ř ndash paprsek řaacutednyacute (zanikaacute na začerněneacute ploše)

mř ndash paprsek mimořaacutednyacute (lineaacuterně polarizovanyacute

využit k osvětleniacute)

začerněnaacute plocha

Nikol

Pazourek 1975

vzduchovaacute štěrbina

- rychlost světla je

v různyacutech směrech různaacute

- uacutehel paprsku řaacutedneacuteho a

mimořaacutedneacuteho je odlišnyacute

(u Vikingů - slunečniacute kaacutemen

soacutelarsteinn)

Chod paprsků ve světlovodneacutem vlaacuteknu

Princip uacuteplnyacute odraz paprsku

- uvnitř skleněneacuteho vlaacutekna je opticky hustšiacute prostřediacute

- nutnost dostatečně silneacuteho světelneacuteho zdroje

Světlovodnaacute vlaacutekna

Pazourek 1975

Širokeacute využitiacute v praxi optickeacute kabely ndash přenos signaacutelů ve sdělovaciacute technice

světlovody umožňujiacuteciacute veacutest denniacute světlo vedeniacute světla u stereolup endoskopů hellip

Page 70: Světelná a elektronová mikroskopie...(AMF – Atomic Force Miroscope) - skenování povrchu materiálu pomocí hrotu zavěšeném na pružném výkyvném raménku, který je přitahován

Nikol = hranol z islandskeacuteho vaacutepence

rarr polarizace světla

Dvojlomnyacute vaacutepencovyacute

krystal

ř ndash paprsek řaacutednyacute (zanikaacute na začerněneacute ploše)

mř ndash paprsek mimořaacutednyacute (lineaacuterně polarizovanyacute

využit k osvětleniacute)

začerněnaacute plocha

Nikol

Pazourek 1975

vzduchovaacute štěrbina

- rychlost světla je

v různyacutech směrech různaacute

- uacutehel paprsku řaacutedneacuteho a

mimořaacutedneacuteho je odlišnyacute

(u Vikingů - slunečniacute kaacutemen

soacutelarsteinn)

Chod paprsků ve světlovodneacutem vlaacuteknu

Princip uacuteplnyacute odraz paprsku

- uvnitř skleněneacuteho vlaacutekna je opticky hustšiacute prostřediacute

- nutnost dostatečně silneacuteho světelneacuteho zdroje

Světlovodnaacute vlaacutekna

Pazourek 1975

Širokeacute využitiacute v praxi optickeacute kabely ndash přenos signaacutelů ve sdělovaciacute technice

světlovody umožňujiacuteciacute veacutest denniacute světlo vedeniacute světla u stereolup endoskopů hellip

Page 71: Světelná a elektronová mikroskopie...(AMF – Atomic Force Miroscope) - skenování povrchu materiálu pomocí hrotu zavěšeném na pružném výkyvném raménku, který je přitahován

Chod paprsků ve světlovodneacutem vlaacuteknu

Princip uacuteplnyacute odraz paprsku

- uvnitř skleněneacuteho vlaacutekna je opticky hustšiacute prostřediacute

- nutnost dostatečně silneacuteho světelneacuteho zdroje

Světlovodnaacute vlaacutekna

Pazourek 1975

Širokeacute využitiacute v praxi optickeacute kabely ndash přenos signaacutelů ve sdělovaciacute technice

světlovody umožňujiacuteciacute veacutest denniacute světlo vedeniacute světla u stereolup endoskopů hellip