Tumores GastrointestinaisBIOLOGIA MOLECULAR

JOSE CLAUDIO CASALI DA ROCHA

OncogeneticistaClinica COI

Clinica Salus

Renovação e diferenciação epitelial. A – Renovação do epitélio através da divisão mitótica de células-tronco na base da cripta. B – Diferenciação das células-tronco à medida que vão chegando à superfície intestinal. Adaptado de Radtke & Clevers, 2005.

Polipose colônica: pólipo com transformação maligna

Variações fenotípicas dependem da localização e do tipo da mutação no gene

APC

esparsa

FAP profusa

atenuada

FAP - Correlação genótipo-fenótipo

1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15

Gene APC

Polipose profusa

Codon 1249 Codon 1330

Codon 1309 – curso agressivo

Codon 1465Codon 1 Codon 2846

Polipose esparsa Polipose esparsa

Pigmentação retiniana

Tu desmóide

Síndrome Risco familiar Herança Penetrância Genes Testes genéticos

Câncer de mama e

câncer de ovário

hereditário (HBOC)

câncer de mama; câncer de

ovário; carcinomatose

peritoneal primária; câncer de

próstata; câncer de pâncreas;

melanoma; câncer

colorretal.

Autossômica

dominantealta

BRCA1

Sequenciamento,

MLPA

BRCA2

Câncer de mama e

câncer colorretal

hereditário (HBCC)

câncer de mama; câncer

colorretal

Autossômica

dominantemoderada CHEK2 Mutação *1100delC

Li-Fraumeni (LFS) &

Li-Fraumeni-like (LFL)

câncer de mama; sarcoma;

tumor de SNC; carcinoma

adrenocortical; leucemia;

melanoma; câncer

colorretal; câncer de

pâncreas

Autossômica

dominantealta

TP53Sequenciamento

dos éxons 4 ao 10

CHEK2 Mutação *1100delC

Cowdencâncer de tireóide; câncer de

endométrio; câncer gênito-

urinário; pólipos colônicos

Autossômica

dominantealta PTEN Sequenciamento

Câncer colorretal

hereditário sem

polipose (HNPCC ou

síndrome de Lynch)

câncer de mama; câncer

colorretal; câncer de ovário;

câncer de estômago; tumor

de SNC; pólipos gástricos e

adenomas colônicos

Autossômica

dominantealta

MLH1

SequenciamentoMSH2

MSH6

PMS2

Câncer gástrico difuso

hereditário (HDGC)câncer de mama tipo lobular;

câncer gástrico tipo difuso

Autossômica

dominantealta CDH1

Sequenciamento,

MLPA

SÍNDROMES DE CÂNCER COLORRETAL HEREDITÁRIO

SÍNDROME TUMORES CROMOSSOMO GENE

Polipose Adenomatosa Familial (FAP)

Adenomas colorretais múltiplos Câncer de cólon, periampular pancreático, tireóide, SNC

5q21 APC

Síndrome de Gardner ~FAP, cistos epidermóides, osteomas, tumor desmóide

5q21 APC

Síndrome de Turcot Adenomas colorretais em número variável, tumores de SNC

5q21 APC

Polipose Adenomatosa Familial Atenuada (AFAP)

Usualmente 1-50 pólipos (<100) no colon, gástrico, duodenal, carcinoma periampular,

5q21 APC

Câncer colorretal hereditário sem polipose (HNPCC)

Câncer de cólon, reto, estômago, endométrio, ovário, urogenital, SNC

2p16 3p21

2q31-33 7q11.2

hMSH2, hMLH1, hPMS1, hPMS2

Síndrome de Muir-Torre

~HNPCC, adenoma e carcinoma sebáceo, CCB, ceratoacantoma

2p16 3p21

2q31-33 7q11.2

hMSH2, hMLH1, hPMS1, hPMS2

SÍNDROMES RARAS DE CCR HEREDITÁRIOCOM HAMARTOMAS

SÍNDROME TUMORES CROMOSSOMO GENE

Peutz-Jeghers Hamartomas (intestino delgado, estômago e colon), câncer colorretal, gástrico, mama, útero, ovario, testículo

19p13.3 STK11

Polipose juvenil Hamartomas e pólipos tipo juvenil (delgado, colon), câncer colorretal, mama e tireóide; cardiopatia congênita

18q21.1 10q23.3

SMAD4 PTEN

Síndrome de Cowden

Hamartomas intestinais e tireóide, câncer colorretal, mama e tireóide; triquilemoma facial, hiperplasia gengival nodular

10q23.3 PTEN

Bannayan-Zonana (Ruvalcaba-Myhre-Smith)

Pólipos intestinais hamartomatosos, câncer colorretal, macrocefalia, pigmentação da glande

10q23.3 PTEN

KRAS e BRAF (V600E)

Via MAPK

RAS

BRAF

MAPKinase

Outcomes * KRAS

Mutations

KRASselvagem

Response rate (%)

0 17

Stable disease (%)

12 34

Median time to progression, wk

7.4 12.3

(Khambata-Ford S et al. J Clin Oncol. 2007;25:3230-3237)Jose Baselga, MD, Vall d'Hebron University Hospital, in Barcelona, Spain

KRAS e BRAF (V600E)

Via MAPK

RAS

BRAF

MAPKinase*

-EGFR: Panitumumab, cetuximab

Mutacao BRAF V600E

MegaBACE sequencing equipment

Amplificação do microssatélite por PCR

Pesquisa no DNA do tumor

XDNA tecido normal

Marcador

Microssatélite

Classificação Localização

Cromossômica

Gene

BAT-25 Mononucleotídeo 4q12 c-kit, intron 16

BAT-26 Mononucleotídeo 2p16.3-p21 hMSH2, intron 5

D2S123 Dinucleotídeo 2p16 MSH2

D5S346 Dinucleotídeo 5q21/22 APC

D17S250 Dinucleotídeo 17q11.2-q12 BRCA1

Kaplan-Meier survival curves for patients with and without MSI

carcinoma colorretal

Critérios de Amsterdam I• Pelo menos 3 membros de uma mesma família com CCR• Um dos membros parente em primeiro grau dos outros 2• Pelo menos 2 gerações acometidas• Pelo menos 1 dos membros com CCR e idade menor que 50a• Exclusão de polipose adenomatosa familiar

HNPCC (sindrome de Lynch)

Critérios de Amsterdam II• Mesmos Critérios de Amsterdam I• Adenocarcinoma de endométrio• Adenocarcinoma de intestino delgado• Carcinoma de células transicionais (pelve renal)• Adenocarcinoma gastrico

Critérios de Bethesda

1. Paciente dentro de família de HNPCC pelos Critérios de Amsterdam

2. Paciente com CCR e menos de 45 anos3. Paciente com tumor extracolônico relacionado ao HNPCC e

menos de 45 anos 4. Paciente com adenoma colorretal e menos de 40 anos5. Atenção para CCR em jovens, indiferenciados ou com células em

anel de sinete

FdUMP

dUMPTS

DPD5-FU

CH2-THF

Fluoro-5,6-dihydrouracil

MTHFR

Methionine

THF

Homocysteine

DHF

DNAdTTPdTDPdTMP

Fluoro--alanine

CH3-THF

5-FU Metabolism

Mauritz & Peters (2006)

5-FU Dose

5-FU

DPD

5- FUH2

INACTIVE

5-FU FOR ANABOLISM

5-FU LIVER METABOLISM

DPD= DIHYDRO PIRIMIDINE DEHYDROGENASE (polymorphic)

= NORMAL PATIENTS => 80-90% ARE INACTIVATED

= 10-20% AVAILABLE DOSE

5-FU Dose

5-FU

DPD

5- FUH2

INACTIVE

5-FU FOR ANABOLISM

0,1%= COMPLETELY DEFICIENT

3-5%= PARCIALY DEFICIENT DPD

SEVERE TOXICITY

5-FU LIVER METABOLISM