Asam Nuklear Plasenta

8/16/2019 Asam Nuklear Plasenta

1/27

I. LATAR BELAKANG

Plasenta bertanggung jawab untuk pertumbuhan dan perkembangan janin

dalam beberapa cara diantaranya transfer gas dan nutrisi dari ibu ke darah

janin, memberikan perlindungan kekebalan tubuh, dan umumnya

bertanggung jawab untuk mengatur lingkungan janin. Oleh karena itu,

penilaian kesehatan plasenta adalah bagian penting dari perawatan kehamilan.

Pendekatan klinis tradisional untuk menilai fungsi plasenta adalah evaluasi

morfologi dan penentukan letak plasenta dengan USG, USG oppler

umbilical dan arteri uterus untuk mengukur aliran darah, dan pengukuran

protein serum ibu yang terutama diekskresikan oleh plasenta dan dapat

mencerminkan perubahan fungsi plasenta.!

Selain protein plasenta, asam nukleat yang dilepaskan plasenta

"deo#yribonucleic acid $%&' dan ribonukleat acid $(%&') dapat memasuki

aliran darah dan cairan tubuh ibu lainnya, menyediakan sumber kaya materi

yang dapat diukur untuk memantau fungsi plasenta dan memungkinkan

diagnosis dini komplikasi dalam kehamilan. *

&nalisis %& janin cell+free dalam darah ibu telah terbukti berharga untuk

diagnosis prenatal mutasi genetik dan kelainan kromosom noninvasif pada

janin. Selain itu, tingkat asam nukleat juga dapat dimanfaatkan sebagai

biomarker dari plasentasi abnormal, seperti halnya pengukuran serum alpha+

fetoprotein "&P) ibu dan beta+human horionic gonadotropin "b+h-G).

Selanjutnya, kuantifikasi messenger (%& "m(%&) untuk encoding protein

dalam serum ibu, mungkin secara langsung mencerminkan ekspresi gen

plasenta. %on+coding micro(%& "mi(%&) adalah subclass molekul

regulatory yang digambarkan sebagai hormon jenis baru karena cara sintesis,

pengiriman, dan efeknya.*

alam referat ini, kita akan membahas bagaimana asam nukleat dilepaskan ke

aliran darah ibu, pendekatan pengukurannya, dan aplikasi mereka sebagai

biomarker untuk menilai kesehatan plasenta.

II. FISIOLOGI PLASENTA

&. mbriologi Plasenta


2/27

Plasentasi adalah proses pembentukan stuktur dan jenis plasenta. Setelah

nidasi embrio ke dalam endometrium, plasentasi dimulai. Pada manusia,

plasentasi berlangsung sampai !*+!/ minggu setelah fertilisasi.!

Pada dasarnya, plasenta berasal dari sel trofoblas yang mulai terbentuk

pada stadium morula dan akhirnya berdifferensiasi sehingga membentuk

satu lapisan sel trofoblas yang mengelilingi blastosis. Sehingga kehamilan

menjadi matang, trofoblas memainkan peranan penting dalam hubungan

antara feto+maternal. 0rofoblas memamerkan pelbagai struktur, fungsi,

dan bentuk pertumbuhan pada semua komponen plasenta.1

Gambar !. 0rofoblas yang berdiferensiasi menjadi sinsiotrofoblas dan sito

trofoblas

ikutip dari2 3ohn - et al, *4!4

Pada hari ke+/ setelah fertilisasi, setelah aposisi, sel trofoblas berdiferensiasi menghasilkan dua lapis trofoblas. 5apisan dalam disebut

sitotrofoblas, merupakan sel mononuklear dengan batas sel yang tegas,

disebut juga dengan sel 5anghan. 5apisan luar disebut sinsitiotrofoblas,

berupa sel multinuklear dengan batas sel yang tidak tegas, berasal dari

lapisan sitotrofoblas.1


3/27

Gambar *. 2 kstravili ditemukan di luar vili dan dapat di bedakan lagikepada tipe endovaskular dan interstisial

ikutip dari2 3ohn - et al, *4!4

Setelah implantasi selesai, trofoblas akan berdiferensiasi mengikuti dua

jalur utama, yang membentuk vili dan ekstravili. 0rofoblas vili akan

menjadi vili korion dimana berfungsi untuk membawa oksigen dan nutrisi

diantara fetus dan ibu. 6anakala trofoblas ektravili akan bermigrasi ke

dalamdesidua dan miometrium dan juga berfungsi untuk menginvasi

pembuluh darah ibu. Oleh itu, trofoblas ekstravili dapat diklasifikasikan

lagi sebagai trofoblas interstisial dan trofoblas endovaskular. 0rofoblas

interstisial akan menginvasi desidua dan akhirnya tembus ke miometrium

untuk membentuk sel giant pada placental bed . Selain itu, trofoblas ini

juga akan bertanggungjawab untuk menginvasi arteri spiralis.1

Setelah aposisi, sel trofoblas akan menginvasi epitel endometrium lebih

dalam, sehingga sekitar hari ke+!4, blastosis akan tertanam di dalamendometrium seluruhnya. Pada hari ke+7 perkembangan, bagian blastosis

yang tertempel pada dinding endometrium terdiri daripada satu lapis sel

yang telah gepeng sedangkan pada arah yang bertentangan, ketebalan

dinding terdiri daripada dua 8ona+ trofoblas dan inner cell mass atau

diskus embrio yang akan berdiferensiasi menjadi plat ektoderm primitif

dan lapisan bawahnya sebagai lapisan endoderm.1

9orion adalah lapisan membran yang terdiri daripada sel trofoblas dan

mesenkim yang melapisi rongga kavitas pada blastosis. Sel mesenkim di


4/27

dalam kavitas sangat banyak dan akan menjadi semakin mampat sehingga

membentuk body stalk.

engan invasi blastosis ke dalam desidua yang semakin mendalam,

sitotrofoblas ekstravili akan membentuk vili pimer yang terdiri daripada

sitotrofoblas yang diselubungi oleh sinsitium sebelum hari ke+!* setelah

fertilisasi. :ili ini awalnya tersebar pada seluruh permukaan blastosis,

tetapi kemudian mulai menghilang kecuali bagian yang tertanam , yang

akan menjadi plasenta. Setelah itu, tepat pada awal hari ke+!* setelah

fertilisasi, vili korion mulai terbentuk. 0ali mesenkim yang terbentuk dari

mesoderem ekstraembrio akan menginvasi kolum trofoblas yang solid,

membentuk vili sekunder. Setelah angiogenesis bermula, vili tertier akan

terbentuk. ;alaupun pada awal implantasi, pembuluh darah ibu di

penetrasi, darah dari ibu tidak akan masuk ke dalam rongga intervili

sehingga hari ke+!agian luar vili dilapisi oleh sinsitium manakala di dalam merupakan

lapisan sitotrofoblas. Sitotrofoblas pada puncak vili akan berproliferasi

menghasilkan sel kolumnar trofoblas yang akan membentuk anchoring

villi. :ili ini tidak diinvasi oleh mesenkim fetus dan akan tertanam pada

lapisan desidua di plat basalis. Oleh itu, dasar rongga intervili merupakan

sisi maternal plasenta yang terdiri daripada sitotrofoblas dari sel

kolumnar, sinsiotrofoblas, dan lapisan desidua pada plat basal. Sedangkan

dasar untuk plat krion yang membentuk atap rongga intervili terdiri

daripada * lapisan+ luar dilapisi oleh trofoblas dan dalam dilapisi oleh

mesoderem. Plat korion yang definit terbentuk pada minggu ke+/+!4

bersamaan dengan amnion dan plat korion bagian mesenkim bergabung.

Pembentukan ini di lengkapi dengan pembesaran kantung amnion ,

dimana pada saat yang sama, akan membentuk tali pusat.1

>. &natomi Plasenta

?stilah plasenta mulai diperkenalkan pada 8aman Renaissance oleh

Realdus Columbus pada tahun !


5/27

sebagai media penyambung@penghubung antara organ fetus dan jaringan

maternal agar pertukaran fisiologi dapat terjadi.A,


6/27

darah fetus membentuk struktur yang dinamakan tali pusat. >iasanya

panjang tali pusat dapat mencapai 14 D 74 sentimeter dan berinsersi pada

tengah permukaan plasenta, tetapi ada juga yang berinsersi di pinggir

plasenta. 0ali pusat berisi * arteri, ! vena umbilikalis dan massa

mukopolisakarida yang disebut jeli ;harton. :ena berisi darah penuh

oksigen sedangkan arteri yang kembali dari janin berisi darah kotor.

Pembuluh darah tali pusat berkembang dan berbentuk seperti heliks agar

terdapat fleksibilitas.!,B

Struktur plasenta hampir keseluruhannya dibentuk oleh vili korion yang

memanjang dan menyebar didalam rongga intervili yang berisi darah.

Oleh itu plasenta sebagai organ yang mempunyai fungsi sebenarnya

adalah rongga yang beisi darah ibu, yang pada sisi maternal tertempel

pada plat desidua, dan pada sisi fetal ditutupi oleh plat korion dengan vili+

vili korion yang bercabang ke dalam takungan darah ibu.B

(ongga intervili adalah kolam yang berisi takungan darah ibu yang keluar

dari pembuluh darah yang ada pada lapisan desidua. 0erdapat sinus+sinus

arteri dan vena yang tersebar pada plat desidua yang berfungsi untuk

mensuplai dan aliran keluar darah dari rongga ini.B

Sebelum plasenta terbentuk dengan sempurna dan sanggup untuk

memelihara janin, fungsinya dilakukan oleh korpus luteum gravidarum

yang dikonversi dari korpus luteum normal akibat pengaruh hormon

korionik gonadotropin "h-G) yang dihasilkan setelah beberapa jam

berlakunya proses implantasi.A,


7/27

Gambar A. "a) Plasenta manusia berbentuk discoidal "b) 9apilari yang

menghubungkan feto+maternal tersusun dalam bentuk pohonan vili yang

terapung di dalam bendungan darah ibu. "c) >arier feto+maternal pada

plasenta tipe hemokorion terdiri dari vili dari trofoblas yang berkontak

langsung dengan bendungan darah ibu. "d) Peredaran darah feto dan

maternal terdiri dari peredaran multivilus.

Sumber2 Cuppert8 et al, *44=


8/27

-. ungsi Plasenta

Plasenta merupakan struktur utama yang menjadi penghubung antara

fetus dan sekelilingnya. Umumnya, lapisan trofoblas dan lapisan endotel

pembuluh darah fetus berfungsi sebagai membran semi permeabel.

dimana molekul air dan molekul yang mempunyai berat molekul yang

rendah dapat melepasi membran mengikuti hukum osmotik. Selain tu, ada

juga mekanisme difusi aktif supaya proses difusi dapat dipercepatkan dan

molekul besar seperti protein dapat melewati plasenta. ungsi plasenta

antara lain adalah untuk respirasi, nutrisi, obat serta sebagai organ

endokrin. Secara garis besar, fungsi plasenta melibatkan proses transfer

molekul dari ibu ke anak, dan proses ini adalah proses difusi, yaitu

pepindahan molekul dari larutan yang berkosentrasi tinggi ke larutan yang

berkosentrasi rendah melalui membran semi+permeabel. Proses difusi

yang telibat adalah difusi pasif, yaitu difusi sederhana dan difusi

terfasilitasi, dan difusi aktif, tansfer yang menggunakan &0P sebagai

sumber tenaga.B,=

!. (espirasi

:askularisasi yang luas di dalam vili dan perjalanan darah ibu dalam

ruang intervilus yang relatif pelan memungkinkan pertukaran oksigen

dan -O* antara darah ibu dan janin melalui difusi pasif. Pertukaran

diperkuat dengan saturasi dalam ruang intervilus sebesar 74 D !44E

dan PO* sebesar 74 D !44 mmCg. Setelah kebutuhan plasenta

terpenuhi, eritrosit janin mengambil oksigen dengan saturasi =4E dan

PO* 14 D A4 mmCg, sudah memadai untuk memenuhi kebutuhan

janin.-O* melewati plasenta dengan difusi pasif. ?on Cidrogen, bicarbonate

dan asam laktat dapat menembus plasenta melalui difusi sederhana

sehingga status keseimbangan asam+basa antara ibu dan anak sangat

berkaitan erat. Oleh karena transfer berlangsung perlahan, janin dapat

melakukan “buffer” pada kejadian penurunan pC, kecuali bila

asidosis maternal diperberat dengan dehidrasi atau ketoasidosis

sebagaimana yang terjadi pada partus lama dimana janin dapat


9/27

mengalami asidosis. fisiensi pertukaran ini tergantung pada pasokan

darah ibu melalui arteri spiralis dan fungsi plasenta. >ila pasokan

darah ibu terbatas seperti yang terjadi pada penyakit hipertensi dalam

kehamilan, penuaan plasenta sebelum saatnya, kehamilan postmatur,

hiperaktivitas uterus atau tekanan talipusat, maka ketoasidosis pada

janin dapat terjadi secara terpisah dari asidosis maternal.!,1,A

*. 0ransfer %utrien

Sebagian besar nutrien mengalami transfer dari ibu ke janin melalui

metode transfer aktif yang melibatkan proses en8imatik. %utrien yang

kompleks akan dipecah menjadi komponen sederhana sebelum di

transfer dan mengalami rekonstruksi ulang pada villi chorialis janin.

Glukosa sebagai sumber energi utama bagi pertumbuhan janin "74E),

!4E sisanya diperoleh dari asam amino. 3umlah glukosa yang

mengalami transfer meningkat setelah minggu ke 14. Sampai akhir

kehamilan, kebutuhan glukosa kira+kira !4 gram per kilogram berat

janin, kelebihan glukosa dikonversi menjadi glikogen dan lemak.

Glikogen disimpan di hepar dan lemak ditimbun disekitar jantung,

belakang skapula. Pada trimester akhir, terjadi sintesa lemak * gram

perhari sehingga pada kehamilan A4 minggu !


10/27

Plasenta adalah tempat pembuatan hormon+hormon, khususnya korionik

gonadotropin, korionik somato+mammotropin " placental lactogen),

estrogen, dan progesteron. 9orionik tirotopin dan relaksin juga dapat

diisolasi dari jaringan plasenta. !,<

!. Gonadotropin 9orion

Penanda pertama diferensiasi trofoblas dan produk plasenta pertama

yang dapat terukur adalah gonadotropin korion "h-G). Pada minggu+

minggu pertama kehamilan, memuncak pada kehamilan sepuluh

minggu dan kemudian lahan+lahan menurun pada trimester ketiga

hingga satu minggu post partum h-G tidak ditemukan lagi di dalamserum dan air kencing. ungsi h-G adalah untuk mempertahankan

korpus luteum yang membuat estrogen dan progesteron sampai saat

plasenta terbentuk sepenuhnya dan dapat membuat sendiri cukup

estrogen dan progesteron. !,<

*. 5aktogen Plasenta

Cormon polipeptida plasenta kedua, yang juga homolog dengan suatu

protein hipofisis, disebut laktogen plasenta "hP5) atau

somatomamotropin korion "h-S). hP5 terdeteksi pada trofoblas muda,

namun kadar serum yang dapat dideteksi belum tercapai hingga

minggu kehamilan ke+A+


11/27

&ktivitas ini dapat terlihat bahkan pada blastokista muda, dan pada

minggu ketujuh kehamilan, yaitu saat korpus luteum mengalami

penuaan relatif, maka plasenta menjadi sumber hormon+hormon

steroid yang dominan. !,<

a. Progesteron

Plasenta bergantung pada kolesterol ibu sebagai substratnya untuk

produksi progesteron. n8im+en8im plasenta memisahkan rantai

samping kolesterol, menghasilkan pregnenolon yang selanjutnya

mengalami isomerisasi parsial menjadi progesteronF *


12/27

janin ataupun ibu merupakan sumber+sumber yang penting.

9ebanyakan estrogen berasal dari androgen janin, terutama

dehidroepiandrosteron sulfat "C& sulfat). C& sulfat janin

terutama dihasilkan oleh adrenal janin, kemudian diubah oleh

sulfatase plasenta menjadi dehidroepiandrosteron bebas "C&),

dan selanjutnya melalui jalur+jalur en8imatik yang la8im untuk

jaringan+jaringan penghasil steroid, menjadi androstenedion dan

testosteron. &ndrogen+androgen ini akhirnya mengalami

aromatisasi dalam plasenta menjadi berturut+turut estron dan

estradiol. Sebagian besar C& sulfat janin dimetabolisir

membentuk suatu estrogen ketiga 2 estriol. 5angkah kunci dalam

sintesis estriol adalah reaksi !B++hidroksilasi molekul steroid.

>ahan untuk reaksi ini terutama C& sulfat janin dan sebagian

besar produksi !B+ +hidroksi+C& sulfat terjadi dalam hati dan

adrenal janin, tidak pada plasenta ataupun jaringan ibu. 5angkah+

langkah akhir yaitu desulfasi dan aromatisasi menjadi estriol

berlangsung di plasenta. 0idak seperti pengukuran kadar

progesteron ataupun hP5, maka pengukuran kadar estriol serum

atau kemih mencerminkan tidak saja fungsi plasenta, namun juga

fungsi janin. engan demikian, produksi estriol normal

mencerminkan keutuhan sirkulasi dan metabolisme janin serta

plasenta. 9adar estriol serum atau kemih yang meninggi

merupakan petunjuk biokimia terbaik dari kesejahteraan janin.

3ika assay estriol dilakukan setiap hari, maka suatu penurunan

bermakna "H


13/27

kedua, hanya sedikit C& yang diproduksi janin karena tidak

adanya rangsang adrenal janin oleh &-0C. !,<

III. PENANDA PLASENTA DALAM SIRKULASI MATERNAL

Selama kehamilan, asam nukleat berasal dari plasenta dan dapat dilepaskan

ke sirkulasi maternal sebagai bagian dari invasi ekstravili trofoblas normal,

pelepasan ikatan trofoblas, pemecahan apoptosis@sel nekrotik dan pelepuhan

microvesicles dari membran trofoblas, dan aktivasi sistem komunikasi seluler

yang melibatkan microvesicles, nanovesicles@e#osomes, dan fragmen

subselular "Gambar !)./+!*

Gambar !. ebris plasenta dalam hubungannya dengan transfer asam nukleat

&.:ili plasenta dengan area diperbesar. >. &rea diperbesar "sitotrofoblas,

sinsitiotrofoblas dan debrisnya). >iru mengindikasikan %&, hijau

mengindikasikan m(%&, dan merah mengindikasikan mi(%&.

&. 0rofoblas ekstravili

?ni adalah sel mononuklear yang diturunkan dari sitotrofoblas dan

diprogram untuk menginvasi uterus ibu dan bermigrasi ke dalam dan

mengubah pembuluh darah ibu. 9arena invasi dari pembuluh darah uterus

ibu adalah peranan normal sel trofoblas ekstravili, maka trofoblas

ekstravili diharapkan akan ditemukan dalam sirkulasi ibu. %amun, intact


14/27

fetal+ atau placental derived cell sulit untuk dideteksi karena umumnya

rasio sel janin@plasenta kurang dari !@!44.444 sel maternal ibu.!1

>. ragmen trofoblas multinuclear

>erbagai struktur syncytial multinuclear digambarkan sebagai deported

trofoblas dan dianggap berasal dari ikatan trofoblas syncytial yang

ditemukan dalam sirkukasi ibu. Struktur deported trofoblas telah

ditemukan di vena uterus kehamilan normal, dengan tingkat yang lebih

tinggi pada wanita yang mengalami preeklamsia "P). %amun, trofoblas

ini jarang ditemukan di sirkulasi perifer maternal karena sebagian besar

terperangkap dalam sistem kapiler paru+paru karena ukurannya yang besar, diikuti dengan lisis dan pelepasan asam nukleat ke sirkulasi. &da

bukti bahwa ikatan deported trofoblas mungkin secara transkripsional

aktif dalam aliran darah maternal dan mensintesis m(%& dan protein

plasenta yang cukup signifikan.!A+!=

-. 6icrovesicles "badan anuclear)

&poptosis dan nekrosis dianggap sebagai mekanisme utama pelepasan

asam nukleat plasenta ke sirkulasi ibu. Partikel tersebut dapat berupa

badan apoptosis, yang timbul karena penyerapan sel dan mungkin

mengandung organel serta asam nukleat, atau berbagai jenis

sinsitiotrofoblas microvesicles "S0>6s), yang muncul karena pelepuhan

plasmalemma sebagai respon apoptosis atau pengaktifan sinyal. fek

patofisiologi S0>6s dalam sirkulasi dikaitkan dengan beberapa molekul

spesifik yang memiliki efek proinflamasi dan efek mengganggu pada

endotelium ibu hanya setelah dilepaskan dari sel "yang disebut molekul

bahaya Idanger moleculesJ, yaitu, faktor jaringan, fibronektin, atau heatshock protein).!/,!7

Peluruhan S0>6s mungkin meningkat sebagai respons terhadap hipoksia

dan stres reoksigenasi yang berhubungan dengan plasentasi dangkal dan

mengarah ke respons imunologi ibu yang berkontribusi terhadap

kerusakan endotel dan hipertensi. %ekrosis ibu mungkin berdampingan

dengan proses apoptosis tetapi lebih sering terjadi ketika digabungkan

dengan stres lingkungan. %ecrosis, sebagai proses kerusakan sel langsung


15/27

diduga menyebabkan pelepasan molekul bahaya proinflamasi serta bentuk

sel bebas %& atau m(%& bentuk bebas yang tidak berhubungan. !/,!7

. #osom@nanovesicles "vektor transportasi aktif)

-ara lain pelepasan asam nukleat ke dalam darah ibu adalah melalui

mekanisme komunikasi sel aktif, dimana molekul yang dipilih menjalani

pengemasan khusus dan kemudian disekresi aktif ke aliran darah ibu di

mana mereka dapat dimasukkan ke dalam sel target dengan endositosis.

Cal ini terutama melibatkan mikro (%& "6irna) dan molekul m(%&,

dan mekanisme transportasi melibatkan kedua vesikel "e#osomes dan

microvesicles) dan kompleks dari komponen subselular "argonaute+* protein, high+density lipoprotein).*4,*!

9onsentrasi e#osomes meningkat "H


16/27

nonassociated

"H*A jam)

9onsentrasi (ata D rata !44

G per milimeter

plasma "trimester

kedua), terbatas

pada usia

kehamilan awal

Spesifik untuk

transkrip dan usia

kehamilan,

terbatas untuk

analisis

Spesifik untuk

transkrop dan usia

kehamilan.

3umlahnya sangat

banyak

9esulitan analisis 6enghambat efek

komponen plasma

9uantitasnya

bergantung padaukuran frammen

yang diamplifikasi

Penanda

sekuensing2

terbatas pada

sekuensi yang

diwariskan

"kromosom L,

(h)

Penanda metilasi2

membutuhkan

langkah proses

yang lebih

destruktif

6embatasi efek

komponen plasma

6embutuhkan

penanganan dan penyimpanan

spesifik

6embatasi efek

komponen plasma

Sekuensi mi(%&

sangat mirip6embutuhkan

pendekatan primer

stem+loop untuk

amplifikasi

0idak ada

konsensus dengan

normalisasi assay

-onfounding

biologis

Usia kehamilan,

kehamilan ganda,

variasi fraksi

maternal akibat

merokok, obesitasdll

Pelepasan m(%&

maternal, sumber

lain m(%& janin

"sel

hematopoietik)

Pelepasan mi(%&

maternal, sumber

lain mi(%& janin

3alur regulator

tidak diketaui?nfeksi

IV. PENDEKATAN ANALISIS

ragmen asam nukleat dilepaskan dari plasenta yang menyediakan sumber

yang kaya biomarker baru untuk memprediksi komplikasi kehamilan. Saat ini

telah banyak diketahui bahwa fragmen kecil dari sel bebas %& janin, yang

ditemukan pada tahun !77= oleh 5o et al, berasal dari sel+sel


17/27

trofoblasplasenta sehingga lebih tepat disebut sebagai sel bebas %& plasenta

"gfp+%&). 0ranskripsi m(%& dan mi(%&s mungkin unik untuk trofoblas

plasenta "misalnya b+h-G m(%&) atau ditemuka juga dalam sirkulasi ibu

tapi dengan kontribusi plasenta yang cukup tinggi sehingga dapat terdeteksi

"misalnya, transforming growth faktor+b! m(%& atau hipoksia terkait mir+

*!4).**,*1

6eskipun beberapa penelitian terakhir sebagian besar fokus untuk

menjelaskan analit spesifik plasenta, sejumlah mi(%& yang tidak spesifik

untuk trofoblas telah disarankan untuk menjadi kandidat biomarker kuat.

Sementara calon biomarker dapat diidentifikasi dengan membandingkan

plasenta normal dengan plasenta patologis, perbandingan langsung dari profil

plasma wanita dengan kehamilan normal dan kehamilan dengan komplikasi

mungkin dapat memunculkan kandidat biomarker baru. Selain plasma darah

ibu, serum darah dan urin dapat menghasilkan konsentrasi fragmen target

yang memadai dan memiliki integritas.**,*1

&da beberapa analisis pendekatan dan isolasi yang mungkin berpotensi

mempengaruhi interpretasi hasil untuk kuantifikasi asam nukleat "0abel !).

&sam nukleat dapat dimurnikan dari plasma dan cairan biologis lainnya

secara langsung atau melalui enrichment fraksi yang menjadi tujuan, yaitu,

(%& berukuran kecil atau e#osome+package mi(%&. 9uantifikasi fragmen

sel bebas juga dapat dipengaruhi oleh tingkat hemolisis dalam sampel, yang

menerima pengaruh biologis "variabilitas antarindividu) dan teknis "misalnya,

penyimpanan sampel dan penanganan sebelum pemisahan plasma) sehingga

mengubah rasio maternal@plasenta atau melalui pelepasan heme dan faktor

lainnya yang dapat menghambat transkripsi berlawanan atau amplifikasi.

Oleh karena standar dan protokol pemurnian yang pasti dan seragam sangat

penting untuk diaplikasikan.*A,*<

9uantifikasi asam nukleat di cairan biologis ibu mungkin ditargetkan untuk

molekul tertentu menggunakan kuantitatif polymerase chain reaction "MP-()

atau digital chain polimerase reaction atau mungkin menilai perubahan

genome+luas melalui berbagai teknik high+throughput, seperti microarray,

analisis ekspresi gen serial, atau seMuencing paralel masif "6PS). Penggunaan


18/27

polymerase chain reaction digital dimaksudkan untuk melampaui standar

emas MP-( sehingga tidak diperlukan persyaratan untuk kontrol internal

untuk mengkalibrasi sinyal fluorescent dan didasarkan pada penghitungan

langsung sinyal positif "urutan target) dalam reaksi terpartisi. %amun,

pendekatan yang relatif baru ini masih perlu divalidasi untuk digunakan

secara rutin.**+*<

0eknik high+throughput memberikan data yang berguna untuk menjelaskan

perubahan penyakit tertentu dalam sampel genom "%&), methylome "profil

%& metilasi $%&m'), atau transcriptome "profil m(%&@mi(%&).*<

V. ASAM NUKLEAT DALAM PLASMA MATERNAL

&. cfp+%&

cfp+%& telah terdeteksi di sirkulasi maternal pada hari ke+!A setelah

fertilisasi in vitro, namun data yang reliabel hanya tersedia pada usia

kehamilan kelima dan keenam. 0ingkat cfp+%& terus meningkat seiring

dengan usia kehamilanF setelah melahirkan hilang dengan cepat dari

sirkulasi ibu. alam plasma ibu hamil, fragmen cfp+%& bersirkulasi

bersamaan dengan yang berasal dari sel. Sementara itu fragmen cfp+%&

merupakan !4E dari total cell+free "cf) %&, konsentrasinya relatif

rendah "rata D rata !44 genom ekuivalen per milimeter plasma). :ariasi

interindividual dalam plasma level cfp+%& cukup tinggi dan biasanya

dipengaruhi oleh sejumlah faktor "misalnya etnisitas). 9adar cfp+%&

abnormal mungkin menggambarkan peluruhan aktif partikel trofoblas

atau pelepasan gradual barier plasenta setelah usia kehamilan 1* minggu.

Sebagian besar penelitian difokuskan pada komplikasi kehamilan terkait

plasenta yang mengevaluasi konsentrasi cfp+%& relatif terhadap volume

plasma, seperti yang dilakukan untuk penanda biokimia "yaitu, sebagai

salinan $atau genom ekuivalen' per mililiter plasma). &tau, cfp+%&

mungkin dinormalkan dengan jumlah total cf+%& dalam sampel plasma,

rasio ini disebut sebagai fraksi janin "ff). ata ini mudah diperoleh dalam

hubungannya dengan 6PS untuk deteksi aneuploidi, pendekatan ini

rentan terhadap pembaur teknis dan biologis karena integritas sampel "sel

ibu lisis) atau kondisi kesehatan yang mempengaruhi fraksi cf+%&


19/27

maternal "obesitas, status merokok). Pendekatan ini tidak efektif biaya

jika diterapkan hanya untuk kesehatan plasenta, tetapi dapat menghasilkan

informasi tambahan tentang kehamilan ketika data tersebut dikumpulkan

untuk pengujian aneuploidi noninvasif.*=,*=

9uantifikasi cfp+%& harus dibedakan dari fragmen %& ibu. itur yang

membedakan dapat berupa polimorfisme yang diwariskan dari ayah dan

urutan atau situs dari %&m spesifik plasenta "tumor suppressor gen,

tidak di metilasi pada jaringan somatik tapi dimetilasi di plasenta).

Pendekatan %&m+spesifik memungkinkan untuk kuantifikasi cfp+%&

plasenta di semua kehamilan, independen dari jenis kelamin atau

polimorfisme. Selain itu, analisis dari %&m di situs -pG tertentu bisa

menghasilkan informasi tambahan, jika patologi yang diteliti terkait

dengan perubahan metilasi tertentu, meskipun aplikasi ini belum

sepenuhnya dieksplorasi. *=,*=

>. cfp+m(%&

0ranskrip crp+m(%& "misalnya, b+h-G) hilang dari plasma ibu pada awal

minggu keempatkehamilan, tetapi tidak terdeteksi sampai minggu ke /.

m(%& plasenta dalam plasma ibu dapat berperan sebagai messenger atau

dikemas dalam puing+puing "badan apoptosis atau microvesicles) sebagai

hasil dari kematian sel. 0idak seperti cfp+%&, perubahan dalam ekspresi

transkrip individual, bukan konsentrasi transkrip (%& plasenta total,

memiliki nilai diagnostik@prediksi setelah mempertimbangkan perubahan

transkrip sesuai dengan usia kehamilan. Setelah persalinan, transkrip

plasental hilang sepenuhnya dari plasma maternal.*/

9eterbatasan utama penggunaan m(%& plasental adalah penggunaanm(%& sebagai biomarker kehamilan adalah bahwa m(%& sangat tidak

stabil, dan pengukurannya dilakukan untuk transkrip individual, bukan

gross m(%& load, pengukuran kadar ini relatif rendah. Sementara cfp+

m(%& dapat distabilkan dengan hubungannya dengan mikropartikel, dan

6PS merupakan pendekatan yang menjanjikan untuk meningkatkan

sensitivitasnya, hingga saat ini metode ini tidak banyak diminati senagai

sumber biomarker darah. */

-. mi(%&


20/27

6ikro+(%& merupakan molekul (%& noncoding pendek, yang sangat

terlibat dalam regulasi gen. Plasenta manusia memiliki profil m(%& yang

unik, yang sebagian ditemukan dalam sirkulasi maternal selama

kehamilan. Proporsi mi(%& plasenta+spesifik berasal dari * kluster

mi(%& besar pada kromosom !A dan !7, disebut dengan -!A6- dan

-!76-. mi(%& trofoblas berhubungan dengan seluruh jenis debris

plasenta dan menunjukkan adanya bukti fungsi regulator ketika berikatan

dengan eksoom dan kompleks protein, 6eskipun investigasi mi(%&

masih baru, diketahui bahwa adanya sejumlah biomarker menarik yang

stabil, spesifik dan jumlahnya sangat besar dalam plasma.*7

&plikasi kuantifikasi mi(%& sebagai penanda penyakit saat ini dibatasi

oleh pengetahuan kami yang terbatas mengenai asal, fungsi biologis dan

hubungannya dengan sel dan komponennya. 6asih diperlukan

pemahaman lebih lanjut mengenai fungsi biologis mi(%& sebelum dapat

diaplikasikan dalam praktek klinis. *7

VI. BIOLOGI PLASENTA DAN PENILAIAN KESEA!TERAAN ANIN

9egagalan mekanisme utama yang terlibat dalam perkembangan plasenta

"proliferasi, migrasi, invasi, dan diferensiasi) dapat dianggap berhubungan

dengan perubahan komposisi sel plasenta, turn over sel dan produksi molekul

regulator, semuanya dapat mempengaruhi debris plasenta apa dan seberapa

banyak debris yang masuk ke sirkulasi maternal. &nalit dari plasenta

seringkali dieksplorasi sebagai pengukuran potensial kesehatan plasenta

dalam kehamilan. Pendekatan terbaik sangat tergantung pada proses spesifik

yang mempengaruhi tiap kondisi.&. 9ehamilan %onviabel

9adar serum maternal b+h-G digunakan untuk mendeteksi kehamilan

serta kesehatan kehamilan. Penurunan kadar b+h-G menunjukkan adanya

kehamilan ektopik atau bortus, sementara peningkatan kadarnya

ditemukan pada kehamilan ganda, triploidi, dan kehamilan mola.

9uantifikasi %&K m(%&K atau mi(%& plasental mungkin dapat

menjadi alternatif monitoring b+h-G. -ontohnya, peningkatan kadar cfp+

%& dan kurangnya coding m(%& untuk b+h-G dan hP5 mungkin


21/27

berhubungan dengan kehamilan ektopik. 9onsentrasi plasma maternal

mi(+

ektopik, abortus spontan dan kehamilan normal. mi(%& plasental+

spesifik juga telah digunakan sebagai metode follow up tambahan pada

wanita dengan neoplasia trofolas gestasional yang mungkin muncul

setelah kehamilan molar.14,1!

>. efek implantasi

9ondisi lain yang berhubungan dengan implantasi abnormal atau

defisiensi adalah plasenta previa atau plasenta akreta. 9ondisi ini

normalnya dapat didiagnosis dengan USG, meskipun teknik ini tidak sepenuhnya reliabel. (espon imun maternal pada invasi otot uterus akan

menyebabkan peningkatan destruksi trofoblas yang menimbulkan

peningkatan cfp+%&, meskipun bukti yang tersedia saat ini masig

berlawanan. 6edian ekspresi m(%& hP5 pada usia kehamilan *4 D 1*

minggu lebih tinggi pada wanita dengan plasenta previa dibandingkan

dengan kehamilan normal dan m(%& sel bebas b+C-G meningkat pada

plasenta akreta. 9onsentrasi b+h-G m(%& dapat digunakan bersamaan

dengan hP5 untuk mengevaluasi efisiensi penanganan konservatif retensi

plasenta akreta.1*,11

-. ?nsufisiensi plasenta

?nvasi sel trofoblas kedalam sistem vaskular maternal dan remodeling

arteri spiralis maternal sangat penting untuk memungkinkan aliran darah

maternal ke plasenta. efisiensi proses ini adalah salah satu penyebab

insufiiensi plasenta yang mungkin berperan dalam P atau ?UG(.

!. Preeklampsia

Pendekatan skrining menggunakan faktor risiko maternal "misalnya

usia ibu yang lebih tua, peningkatan berat badan, riwayat kehamilan

dengan P, dll), dikombinasikan dengan indeks arteri uterina, rata D

rata tekanan ateri dan penanda serum maternal "plasental growth

factor $P?G' dan pregnancy+associated plasma protein &) telah

dilaporkan terdeteksi 7


22/27

dalam banyak populasi, dan aplikasi umum dari model ini belum

diketahui.1A,1<

>eberapa kajian telah mengkonfirmasi potensi prediktif kadar cfp+

%& dalam mengevaluasi P onset awal atau akhir. 6eskipun

demikian, kesimpulan mengenai aplikasinya terbatas karena desain

penelitian yang heterogen. alam sebuah penelitian /7E dari P berat

dan !


23/27

menjadi ada tidak adanya PK hanya kelompok ?UG( yang

berhubungan dengan P yang menunjukkan peningkatan cfp+%&.

Peningkatan kadar protein 50+! dalam plasenta dan darah maternal

diketahui berhubugan dengan P dan ?UG(. Peningkatan 50+!

m(%& telah terdeteksi dalam plasma wanita non hipertensi dengan

janin ?UG( "rata D rata ukuran janin K* S) di trimester pertama

kehamilan. hP5, kelompok retrovirus endogenus ;, member !,

pregnancy spesific b+!+glikoprotein !, plasenta spesifik protein 1 dan

A, tachykinin+1, corticotropin releasing hormone, dan 9iSS+!

metastasis supresor m(%& seluruhnya meningkat saat persalinan

wanita dengan janin ?UG(, hal yang sama tidak tampak dalam kasus

P. Selain itu, skor gen hipoksia, yang didefinisikan sebagai jumlah

ekspresi relatif A m(%& yang menginduksi hipoksia dalam darah

maternal ""hypo#ia+inducible factor+!a, hypo#iainducible factor+*a,

adrenomedullin, and lactate dehydrogenase &) berhubungan dengan

tingkat hipoksia janin yang dievaluasi menggunakan kadar pC darah

janin.1=,1/Peranan perubahan mi(%& pada ?UG( normotensif belum

sepenuhnya dipelajari. >eberapa penelitian telah mendeteksi adanya

perubahan ekspresi ?UG(+spesifik mi(%& pada plasenta namun

perbedaannya tidak terseteksi dalam plasma.1/

1. Persalinan prematur

Persalinan prematur "P0>) mungkin terjadi spontan "persalinan

prematur atau pecah ketuban prematur) atau mungkin disebabkan oleh

induksi obstetrik "misalnya karena PK ?UG( berat). P0> spontanseringkali berhubungan dengan korioamnionitis, sebuah infeksi pada

plasenta, korion dan amnion. (espon imun adanya infeksi, termasuk

peningkatan produksi sel imun, mungkin menyebabkan perubahan

pelepasan sel plasenta dan debris kedalam cairan maternal.17

alam sebuah penelitian oleh arina et al dan 3akobsen et al,

peningkatan kadar cfp+%& berhubungan dengan P0>, meskipun

perubahan ini hanya terdeteksi setelah usia kehamilan *< minggu.

?nterleukin+! receptor+like ! precursor m(%& adalah ! dari 1B


24/27

transkrip yang meningkat secara konsisten selama persalinan

prematur. Profiling ekspresi mi(%& dalam studi high+throughput

"serum maternal dalam A4 kontrol vs A4 P0> dengan uji mi(%&)

menunjukkan A kandidat mi(%& yang berbeda, namun perbedaan

ekspresi kurang dari * pada masing D masing kasus.A4

KESIMPULAN

Selama kehamilan, plasenta melepaskan berbagai jenis asam nukleat "termasuk

deo#yribonucleic acid, messenger ribonucleic acid atau microribonucleic acid)

sebagai hasil dari turnover sel atau sistem messanging aktif antara plasenta dan sel

dalam tubuh maternal. Profil asam nukleat yang dilepaskan berubah selama

kehamilan dan berhubungan dengan parameter maternal dan janin. Profil tersebut

juga secara langsung menggambarkan perubaha patlogis dalam plasenta. &sam

nukleat kemudiaan menjeadi sumber yang kaya akan biomarker baru untuk

memprediksi komplikasi kehamilan. 6eskipun demikian, manfaatnya dalam

situasi klinis membutuhkan pertimbangan klinis dalam kuantifikasinya dan masih

dibutuhkan pemahaman lebih lanjut mengenai faktor + fakor yang mempengaruhi

fungsi dan jumlahnya.

((%S?

!. (achimhadji 0., ;iknjosastro G.C., ?lmu 9ebidanan2 Pembuahan, %idasi dan

Plasentasi, Plasenta dan -airan &mnion, Ath ed, *44/, 3akarta, P0 >ina

Pustaka Sarwono Prawirohardjo, pg !A1+!


25/27

A. Cuppert8 >., 9ingdom 3., ewhursts 0e#tbook of Obstetrics Gynaecology2

0he Placenta and etal 6embranes, =th ed, *44=, ?ndia, >lackwell Publishing,

pg !7+*B


26/27

!=. (ajakumar &, -erdeira &S, (ana S, et al. 0ranscriptionally active syncytial

aggregates in the maternal circulation may contribute to circulating soluble

fms+like tyrosine kinase ! in preeclampsia. Cypertension *4!*F


27/27

14. 0akacs P, 3aramillo S, atar (, ;illiams &, Olc8yk 3, >arnhart 9. Placental

m(%& in maternal plasma as a predictor of ectopic pregnancy. ?nt 3 Gynaecol

Obstet *4!*F!!=2

1!. 6iura 9, Casegawa L, &be S, et al. -linical applications of analysis of plasma

circulating complete hydatidiform mole pregnancyassociated mi(%&s in

gestational trophoblastic neoplasia2 a preliminary investigation. Placenta

*4!AF1

%& predict preeclampsia2 a systematic review. Prenat iagn *4!AF1A2B/

Documents

Asam Nuklear Plasenta