Klinik Örnekten Sonuç Raporuna:Mantar Enfeksiyonlarına Laboratuvar Yaklaşımı14.00-14.45 : Örnek alımı, direkt mikroskopi, kültür yöntemleri

Prof. Dr. Aydın KaraarslanAÜTF, Tıbbi Mikrobiyoloji AD

14.45-15.30 : Serolojik ve moleküler yöntemlerDoç. Dr. Mehmet Ali SaraçlıGATA, Tıbbi Mikrobiyoloji AD

14.45-15.30 : Serolojik ve moleküler yöntemlerDoç. Dr. Mehmet Ali SaraçlıGATA, Tıbbi Mikrobiyoloji AD

15.30-15.50 : Ara

15.50-16.30 : Antifungal duyarlılık testleriProf. Dr. Ayşe KalkancıGÜTF, Tıbbi Mikrobiyoloji AD

16.30-17.00 : KLİMUD Aile Meclisi

“Klinik Örnekten Sonuç Raporuna: Mantar EnfeksiyonlarınaLaboratuvar Yaklaşımı”

ÖRNEK ALIMI, DİREKT MİKROSKOPİ,KÜLTÜR YÖNTEMLERİ

Prof. Dr. Aydın KaraarslanAnkara Üniversitesi Tıp Fakültesi Tıbbi Mikrobiyoloji

“Klinik Örnekten Sonuç Raporuna: Mantar EnfeksiyonlarınaLaboratuvar Yaklaşımı”

ÖRNEK ALIMI, DİREKT MİKROSKOPİ,KÜLTÜR YÖNTEMLERİ

Prof. Dr. Aydın KaraarslanAnkara Üniversitesi Tıp Fakültesi Tıbbi Mikrobiyoloji

• Keratinli doku örnekleri• Solunum yolu örnekleri• Eksüda/Püy• İdrar• Steril vücut sıvıları(BOS, plevra, perikard)• Kan• Mukoza• Doku

• Keratinli doku örnekleri• Solunum yolu örnekleri• Eksüda/Püy• İdrar• Steril vücut sıvıları(BOS, plevra, perikard)• Kan• Mukoza• Doku

DOĞRUMİKOLOJİK TANI• Örnekler,

– enfeksiyonuoluşturabilecek enolası mantar/tanıdüşünülerek alınmalı

– aktif enfeksiyonbölgesinden alınmalı

– aseptik koşullardaalınmalı

• Örnekler,– enfeksiyonu

oluşturabilecek enolası mantar/tanıdüşünülerek alınmalı

– aktif enfeksiyonbölgesinden alınmalı

– aseptik koşullardaalınmalı

– yeterli miktarlardaalınmalı

– uygun bir yöntemlealınmalı

– yeterli miktarlardaalınmalı

– uygun bir yöntemlealınmalı

– Mantarın canlılığı aşırısıcak ve soğuktanetkilenir.

• Taşıma ve saklamaişleminin oda ısısındave 2 saat içindeyapılması önerilir

• Gecikme olmasıdurumunda bakterikontaminasyonuolasılığı fazla olanörnekler 4ºC de bir süretutulabilir.

• SSS örnekleri 30ºC’detutulmalı (E. floccosum,H. capsulatum, B.dermatitidis, C.neoformans soğuğadayanıksız)

– Mantarın canlılığı aşırısıcak ve soğuktanetkilenir.

• Taşıma ve saklamaişleminin oda ısısındave 2 saat içindeyapılması önerilir

• Gecikme olmasıdurumunda bakterikontaminasyonuolasılığı fazla olanörnekler 4ºC de bir süretutulabilir.

• SSS örnekleri 30ºC’detutulmalı (E. floccosum,H. capsulatum, B.dermatitidis, C.neoformans soğuğadayanıksız)

• Örnekler laboratuvaragönderilirken– Hastaya ait bilgiler

• Klinik tanı• Özel kültür isteği• Hasta öyküsü• Kullanılan antifungal varsa• Özellikle tehlikeli mantar içerdiği

düşünülen örnekler belirtilmeli– Deri, balgam gibi steril olmayan

yerlerden alınan örneklerinsonuçlarının yorumlanmasındayararlıdır

– Laboratuvar çalışanlarınınuyanık davranmalarına yardımcıolur (C. immitis, H. capsulatumgibi potansiyel tehlikelipatojenlere karşı)

• Örnekler laboratuvaragönderilirken– Hastaya ait bilgiler

• Klinik tanı• Özel kültür isteği• Hasta öyküsü• Kullanılan antifungal varsa• Özellikle tehlikeli mantar içerdiği

düşünülen örnekler belirtilmeli– Deri, balgam gibi steril olmayan

yerlerden alınan örneklerinsonuçlarının yorumlanmasındayararlıdır

– Laboratuvar çalışanlarınınuyanık davranmalarına yardımcıolur (C. immitis, H. capsulatumgibi potansiyel tehlikelipatojenlere karşı)

Direkt inceleme

Klinik örneklerin direktincelenmesi

– Bazen kültürden dahadeğerli.

– Zaman kazandırıcı, kolay,enhızlı, en ekonomik

• BOS’un çini mürekkebipreparatında kapsüllü mayagörülmesi;

• kistlerin görülmesi (P.jirovecii);

• hücre içi mayalarıngörülmesi (H. capsulatum);

• sferül saptanması (C.İmmitis)

Klinik örneklerin direktincelenmesi

– Bazen kültürden dahadeğerli.

– Zaman kazandırıcı, kolay,enhızlı, en ekonomik

• BOS’un çini mürekkebipreparatında kapsüllü mayagörülmesi;

• kistlerin görülmesi (P.jirovecii);

• hücre içi mayalarıngörülmesi (H. capsulatum);

• sferül saptanması (C.İmmitis)

BAL. P. jirovecii. Giemsa. Trofozoit ve kist

Direkt inceleme

– KOH (%10-25)– Çini mürekkebi– Kalkoflor beyazı– Laktofenol pamuk mavisi– Giemsa– PAS– Gram boyası– Metilen mavisi

– KOH (%10-25)– Çini mürekkebi– Kalkoflor beyazı– Laktofenol pamuk mavisi– Giemsa– PAS– Gram boyası– Metilen mavisi

Kültür• Klinik örneklerin

kültürleri yapılmadanönce mantarınüreme olasılığınıartırmak için bazı önişlemlerdengeçirilmesigerekebilmektedir– Santrifüjleme– Lizis santrifugasyon– Doku örneklerinin

parçalanması

• Klinik örneklerinkültürleri yapılmadanönce mantarınüreme olasılığınıartırmak için bazı önişlemlerdengeçirilmesigerekebilmektedir– Santrifüjleme– Lizis santrifugasyon– Doku örneklerinin

parçalanması

Besiyerleri• İlk izolasyon amacı ile

kullanılacak besiyerleri– Steril olmayan bölgelerden

alınan örneklerde bakteriüremesini engellemelidirAntibiyotikli SDA, BHI,Sabhi agar, Inhibitory moldagar

• B.y.’ne katılanantibiyotikler Kloramfenikol(<16g/ml),Gentamisin (5-100 g/ml),Penisilin (20 U/ml),Streptomisin(40 g/ml),Siprofloksasin (5 g/ml)

• Kloramfenikol+Gentamisin• Penisilin+Streptomisin

• İlk izolasyon amacı ilekullanılacak besiyerleri– Steril olmayan bölgelerden

alınan örneklerde bakteriüremesini engellemelidirAntibiyotikli SDA, BHI,Sabhi agar, Inhibitory moldagar

• B.y.’ne katılanantibiyotikler Kloramfenikol(<16g/ml),Gentamisin (5-100 g/ml),Penisilin (20 U/ml),Streptomisin(40 g/ml),Siprofloksasin (5 g/ml)

• Kloramfenikol+Gentamisin• Penisilin+Streptomisin

• sikloheksimit (ökaryotikprotein sentez inhibitörü)b.y.’ne (0.5 g/ml)oranında katılır. Saprofitmantarları inhibe eder. C.neoformans, Trichosporonasahii,bazıFusarium/Candida/Aspergillus türleri,zigomiçeteslerin çoğununda üremesini engeller.

• sikloheksimit SDAb.y.’ne, SDA’nın %2dekstroz içeren nötr pH’lıEmmonsmodifikasyonuna ya daSabhi agarakloramfenikol ile birliktekatılır.

• İzolasyon içinkullandığımız b.y.nin enaz birisi sikloheksimitiçermelidir

• sikloheksimit (ökaryotikprotein sentez inhibitörü)b.y.’ne (0.5 g/ml)oranında katılır. Saprofitmantarları inhibe eder. C.neoformans, Trichosporonasahii,bazıFusarium/Candida/Aspergillus türleri,zigomiçeteslerin çoğununda üremesini engeller.

• sikloheksimit SDAb.y.’ne, SDA’nın %2dekstroz içeren nötr pH’lıEmmonsmodifikasyonuna ya daSabhi agarakloramfenikol ile birliktekatılır.

• İzolasyon içinkullandığımız b.y.nin enaz birisi sikloheksimitiçermelidir

KOH + Metilen mavisi

Kane formülü = Gliserol + Tween 80 + Fenol + Metilen mavisi

KOH + mürekkep

• Kateterin 5 cm’likdistal ucu birkaçdamla steril FTSiçeren tüpe alınır

• OI15 dk., 4ºC24saat bekletilebilir

• Agar plak besiyerineyuvarlanarak ekilir

• 15 koloniden fazlaüreme anlamlıdır (Makive. ark.’nınsemikantitatif yöntemi)

• Kateter kültürü eşzamanlı kan kültürüile yapılmalıdır

• Agar plak besiyerineyuvarlanarak ekilir

• 15 koloniden fazlaüreme anlamlıdır (Makive. ark.’nınsemikantitatif yöntemi)

• Kateter kültürü eşzamanlı kan kültürüile yapılmalıdır

– SDA– Sabhi agar-

koyun kanlı– BHI agar-koyun

kanlı(Yüzeylerine

zeytinyağısürülmüş)

– Leeming-Notman (tamsüt içeren)

– Dixon agar

– SDA– Sabhi agar-

koyun kanlı– BHI agar-koyun

kanlı(Yüzeylerine

zeytinyağısürülmüş)

– Leeming-Notman (tamsüt içeren)

– Dixon agar

Lezyonların aktif sınırlarından kazıntıSteril bistüri

Alkol (%70) ile dezenfeksiyon

Steril bistüri

KOH + mavi-siyah mürekkep

Alkol (%70) ile dezenfeksiyon(gazlı bez ile)

Tırnak altındaki birikinti kazınır

Tırnaklar küçük parçalar halinde kesilebilir.

KOH + Calcofluor

•Örnekler kuru bir kap içine /bir zarfa alınır

Saçlar steril cımbızla alınır

Dermatofit izolasyonu

– SDA Antibiyotik ya dasikloheksimit içermeyen

– Kloramfenikol+sikloheksimit içerenSDA (ticariMycobiotic/Mycosel)agar kullanılabilir

– 25-30ºC (32 ºC), 4 hafta

– Dermatofit Test Medium(Kloramfenikol+Gentamisin+sikloheksimit)

– Dermatofit identifikasyonMedium (bromkrezolmoru+penisilin+streptomisin+sikloheksimit)

Besiyerine direkt ekimBesiyerine gömerek ekim

– SDA Antibiyotik ya dasikloheksimit içermeyen

– Kloramfenikol+sikloheksimit içerenSDA (ticariMycobiotic/Mycosel)agar kullanılabilir

– 25-30ºC (32 ºC), 4 hafta

Epidermophyton floccosum + PDA

Apse, açık yara, ülser, eksuda, irin,biyopsi örneği, akıntılı sinüsler

• Apse sterilenjektörle aspirasyon

• Açık yaraaspirasyon ya daeküvyonla derinsürüntü alınır

• Apse sterilenjektörle aspirasyon

• Açık yaraaspirasyon ya daeküvyonla derinsürüntü alınır

• Direkt mikroskobinin değeri

Giemsa boyası

• Kültür– (SDA Kloramfenikol +

Sikloheksimit 26ºC)Küf

– BHİ kanlı agar 37ºCmaya dönüşümü

• tanecik ve granülyapıları aranırnodülden, sinüsakıntısndanaspirasyonla ya dacerrahi olarak alınır

• tanecik ve granülyapıları aranırnodülden, sinüsakıntısndanaspirasyonla ya dacerrahi olarak alınır

• KOH preparatı

•iki lam arasında ezilerek mikroskopta incelenir; hif yapısı aranır

• Materyaldeki granüllerinbir kısmı steril distilesu/antibiyotikli FTS ileyıkanır steril koşullarda ezilirantibiyotiklisikloheksimit içeren vesikloheksimit içermeyenSDA’ya ekilir

• Granül içermeyen sıvılar,eksuda ve irinörneklerinin ekimleridirekt olarak izolasyonb.y. ekilir

• Materyaldeki granüllerinbir kısmı steril distilesu/antibiyotikli FTS ileyıkanır steril koşullarda ezilirantibiyotiklisikloheksimit içeren vesikloheksimit içermeyenSDA’ya ekilir

• Granül içermeyen sıvılar,eksuda ve irinörneklerinin ekimleridirekt olarak izolasyonb.y. ekilir

• Laktofenol pamukmavisi

• Laktofenol pamukmavisi

Histoplazmoz

• İncelenecek örnekler– Kemik iliği– Balgam– İdrar– Kan– Deri lezyonu-kazıntı– Deri ve lenf nodu-

biyopsi– Plevral sıvı

• İncelenecek örnekler– Kemik iliği– Balgam– İdrar– Kan– Deri lezyonu-kazıntı– Deri ve lenf nodu-

biyopsi– Plevral sıvı

• Kemik iliği kültürü– En az 0.5 ml– Hasta başında ekim

(heparinize Kİ)Kloramfenikol içeren yeastextract-phosphate /zenginleştirilmiş bazı b.y.(%5-10 koyun kanlı, antibiyotikli,BHİ) (H. capsulatum)

– Lizis santrifügasyonyöntemi(Isolator)

• Kemik iliği kültürü– En az 0.5 ml– Hasta başında ekim

(heparinize Kİ)Kloramfenikol içeren yeastextract-phosphate /zenginleştirilmiş bazı b.y.(%5-10 koyun kanlı, antibiyotikli,BHİ) (H. capsulatum)

– Lizis santrifügasyonyöntemi(Isolator)

Saponin içeren tüp

Alt solunum yolu• Balgam hasta dişlerini

fırçalayıp ağzınıçalkaladıktan sonrasabahın ilk balgamı

• Yayma ve kültür içinkanlı, irinli, kazeözalanlar seçilir

• Yapışkanlığı azaltmak içintoz N-asetil-l-sistein –NaOH kullanılmaz-(birçokmantar üzerine baskılayıcıetkisi var)

• BAL, fırça, yıkama sıvısı,aspirat steril kaplaraalınmalı

• Kanlı-mukuslu-irinlialanlardan sikloheksimitlive sikloheksimitsizantibiyotikli b.y.ekim

• Santrifüjetkeninizolasyon şansını ;kolonize maya vekontaminan bakteri sayısıda

• Balgam hasta dişlerinifırçalayıp ağzınıçalkaladıktan sonrasabahın ilk balgamı

• Yayma ve kültür içinkanlı, irinli, kazeözalanlar seçilir

• Yapışkanlığı azaltmak içintoz N-asetil-l-sistein –NaOH kullanılmaz-(birçokmantar üzerine baskılayıcıetkisi var)

• BAL, fırça, yıkama sıvısı,aspirat steril kaplaraalınmalı

• Kanlı-mukuslu-irinlialanlardan sikloheksimitlive sikloheksimitsizantibiyotikli b.y.ekim

• Santrifüjetkeninizolasyon şansını ;kolonize maya vekontaminan bakteri sayısıda

H. capsulatum. Sabhi agar(kloramfenikol + sikloheksimit).

8 hafta 3 hafta

BAL. Giemsa. Histoplasma capsulatum.

Journal de Mycologie Médicale / Journal of Medical Mycology Volume 22, Issue 2, June 2012,Pages 189–191Fatal histoplasmosis in a non-HIV patient in French Guiana

• Kristalleşmeyi ve bakteriüremesini için idrar enkısa sürede işlemealınmalı

• 10-50 ml• Sabah ilk idrarı• Orta akım idrarı• Santrifüj çökeltiden

sikloheksimitli vesikloheksimitsizantibiyotikli b.y.ekim (H.capsulatum, C.neoformans, B.dermatitidis, C. immitis)

• Kristalleşmeyi ve bakteriüremesini için idrar enkısa sürede işlemealınmalı

• 10-50 ml• Sabah ilk idrarı• Orta akım idrarı• Santrifüj çökeltiden

sikloheksimitli vesikloheksimitsizantibiyotikli b.y.ekim (H.capsulatum, C.neoformans, B.dermatitidis, C. immitis)

İdrar sedimentinde Histoplasma capsulatum (modifiye Giemsa boyası)

Kan kültürü• Kan/Besiyeri oranı 5:1

olmalı• kan kültürü şişeleri

kullanılırsa İki fazlıyeğlenmeli (Septi-Check)

• Otomatik kankültürü sistemleri(Bactec, Trek-ESP,BacT-Alert sistemleri)- Candida türlerininçoğu, C. neoformans)

• Lizis santrifügasyonyöntemi (Isolator) -(özellikle H.capsulatum ve ötekidimorfikler, C.neoformans,filamentöz mantarlar)

• Kan/Besiyeri oranı 5:1olmalı

• kan kültürü şişelerikullanılırsa İki fazlıyeğlenmeli (Septi-Check)

• Otomatik kankültürü sistemleri(Bactec, Trek-ESP,BacT-Alert sistemleri)- Candida türlerininçoğu, C. neoformans)

• Lizis santrifügasyonyöntemi (Isolator) -(özellikle H.capsulatum ve ötekidimorfikler, C.neoformans,filamentöz mantarlar)

• Lizis santrifügasyonyöntemi + BACTECMYCO/F Lytic= seçicimantar kan kültürü

• Isolator ile elde edilensedimentsikloheksimitiçermeyen– zenginleştirilmiş

besiyerlerine– çikolata agara– İnhibitör Mold Agara

ekilmeli

• Lizis santrifügasyonyöntemi + BACTECMYCO/F Lytic= seçicimantar kan kültürü

• Isolator ile elde edilensedimentsikloheksimitiçermeyen– zenginleştirilmiş

besiyerlerine– çikolata agara– İnhibitör Mold Agara

ekilmeliSDA(Kloramfenikol ve gentamisiniçeren) 26ºC ve 35ºC.Beyin kalp infüzyon agar (BHIA) % 5koyun kanı 35ºC. 4 hafta boyunca.

iğne aspirasyonu. Lenf nodu. Histoplasma capsulatum, Wright boyası.

Perianal doku GMS boyası ile histoplasma maya hücreleri

Doku• Biyopsi örneği steril FTS

bulunan bir steril kapiçine konur

• Doku örneklerinin çoğukültürden önce(özellikle H.capsulatumdüşünülüyorsa)

• Ezilerek• Homojenize edilerek• Dilimlenerek bir işlemden

geçirilmelidir

• Zigomiçetes varlığıaraştırılıyorsa dokuöğütülmez. İnce dilimlerşeklinde doğranmalıdır.

• Hem Antibiyotikli hem desikloheksimitlizenginleştirilmiş b.y.’neekim

• Biyopsi örneği steril FTSbulunan bir steril kapiçine konur

• Doku örneklerinin çoğukültürden önce(özellikle H.capsulatumdüşünülüyorsa)

• Ezilerek• Homojenize edilerek• Dilimlenerek bir işlemden

geçirilmelidir

• Zigomiçetes varlığıaraştırılıyorsa dokuöğütülmez. İnce dilimlerşeklinde doğranmalıdır.

• Hem Antibiyotikli hem desikloheksimitlizenginleştirilmiş b.y.’neekim

SDA(Kloramfenikol ve gentamisiniçeren) 26ºC ve 35ºC.Beyin kalp infüzyon agar (BHIA) % 5koyun kanı 35ºC. 4 hafta boyunca.

• Histoplazmoz ağız içi lezyonlarındanalınan örnekler direk b.y. ekilir

• Histoplazmoz ağız içi lezyonlarındanalınan örnekler direk b.y. ekilir

Kloramfenikol içeren yeast extract-phosphate / zenginleştirilmiş bazıb.y.(%5-10 koyun kanlı, antibiyotikli,BHİ)

• Plevra sıvısıSantrifüj Sediment

• % 10 KOH +mürekkep/kalkoflorbeyazı

• Plevra sıvısıSantrifüj Sediment

• % 10 KOH +mürekkep/kalkoflorbeyazı

Steril vücut sıvılarıPlevra/Perikart/periton/eklem

• 2 ml.’den az isedirekt b.y.’ne ekilebilirYa da membranfiltreden süzüldüktensonra filtrenin partikültutan yüzü b.y.’nekonur, filtrenin yerideğiştirilerek üremekontrolü yapılır

• 2 ml.’den fazla ise 10dk. 2000 devirdesantrifüj edilir. Çökeltinin1-2 ml.’si ekilir

• 10 ml’den fazla isekan kültür şişesi mayalariçin kullanılabilir

• Ekim hemenyapılamıyorsabuzdolabında tutulabilir

• 2 ml.’den az isedirekt b.y.’ne ekilebilirYa da membranfiltreden süzüldüktensonra filtrenin partikültutan yüzü b.y.’nekonur, filtrenin yerideğiştirilerek üremekontrolü yapılır

• 2 ml.’den fazla ise 10dk. 2000 devirdesantrifüj edilir. Çökeltinin1-2 ml.’si ekilir

• 10 ml’den fazla isekan kültür şişesi mayalariçin kullanılabilir

• Ekim hemenyapılamıyorsabuzdolabında tutulabilir

H. capsulatum. SDA . 24ºC. Kanlı agar 37 ºC

• Deri kazıntısı• Tırnak kazıntısı• Mukoza sürüntü

örnekleri

• Kan• BOS• Balgam/BAL• İdrar• Eksüdalar• Doku biyopsileri• Damar içi kateter

uçları

• Deri kazıntısı• Tırnak kazıntısı• Mukoza sürüntü

örnekleri

• Kan• BOS• Balgam/BAL• İdrar• Eksüdalar• Doku biyopsileri• Damar içi kateter

uçları

Tırnak kazıntı. KOH + parker mürekkep. Tomurcuklu maya hücreleri, yalancı hifler

• Vajinal kandidozklinik yakınmalar vesürüntü örneğinindirekt mikroskobisi iletanı konur

• Tedaviye yanıtvermeyen - dirençlivajinal kandidozolgularında-kültüryararlı olabilir

• Vajinal kandidozklinik yakınmalar vesürüntü örneğinindirekt mikroskobisi iletanı konur

• Tedaviye yanıtvermeyen - dirençlivajinal kandidozolgularında-kültüryararlı olabilir

Vajinal sürüntü. Gram boya.

• İdrardaki maya sayısı hastanın kliniktablosu (birkaç ortaakım – idrarda mayaüretilmesi vekandidürinin sürmesi)

• Kantitatif ekimsantrifüjlenmemişidrar, kalibreli öze

İdrar. Metilen mavisi

• İdrardaki maya sayısı hastanın kliniktablosu (birkaç ortaakım – idrarda mayaüretilmesi vekandidürinin sürmesi)

• Kantitatif ekimsantrifüjlenmemişidrar, kalibreli öze

• Kristalleşmeyi ve bakteriüremesini için idrar en kısasürede işleme alınmalı

• 10-50 ml• Sabah ilk idrarı• Orta akım idrarı

Steril vida kapaklı tüplerealınmalı2 ml.’den az ise direktb.y.’ne ekilebilir2 ml.’den fazla ise 10 dk.2000 devirde santrifüj edilir.Çökeltinin 1-2 ml.’si ekilirEkim hemen yapılamıyorsaBOS oda sıcaklığındabekletilmeli; buzdolabınakesinlikle konulmamalıdır

BOS + Gram boya.

Steril vida kapaklı tüplerealınmalı2 ml.’den az ise direktb.y.’ne ekilebilir2 ml.’den fazla ise 10 dk.2000 devirde santrifüj edilir.Çökeltinin 1-2 ml.’si ekilirEkim hemen yapılamıyorsaBOS oda sıcaklığındabekletilmeli; buzdolabınakesinlikle konulmamalıdır

SDA (kloramfenikol + gentamisin)inkübasyon (hem 26ºC hem de 35ºC’de)BHIA + %5 koyun kanlı, 35ºC’de

Candida albicans → greenCandida tropicalis → metallic blueCandida krusei → pink, fuzzyOther species → white to mauve

Candida albicans → greenCandida tropicalis → metallic blueCandida krusei → pink, fuzzyOther species → white to mauve

• Deri• Kan• BOS• Balgam/BAL• İdrar• Doku biyopsileri

• Deri• Kan• BOS• Balgam/BAL• İdrar• Doku biyopsileri

• Çini mürekkebi-BOS

BALWright boyasıGram boyası.Santrifüje BOS

BalgamWright boyası Akciğer. GMS boyası

Böbrek biyopsi. Müsicarmin boyası.Human Immunodeficiency Virus Nephropathy and Intraglomerular Cryptococcus Neoformans

Andrea Veatch, M.D., and Steven H. Dikman, M.D.N Engl J Med 1998; 339:887September 24, 1998DOI: 10.1056/NEJM199809243391305

Share:

Sabhi agar. 37°C

•SDA (kloramfenikol + gentamisin)inkübasyon (35ºC)

• Balgam/BAL• Paranazal sinüsler• Deri• Kan• BOS• İdrar• Doku biyopsileri

• Balgam/BAL• Paranazal sinüsler• Deri• Kan• BOS• İdrar• Doku biyopsileri

Balgam. PAS

Balgam GMS

BAL

İdrar. H&E Kornea kazıntısı. Gram.

• Direkt mikroskobi– Kazıntı, balgam, eksudalar KOH + mürekkep ya da kalkoflor beyazı

ile boyama– Doku kesitleri HE ve GMS ile boyanır

• KOH + calcoflor beyazı

PAS

KOH + calcoflor beyazı

(A) Deri zigomikozu(B) KOH preparatı(C) Rhizopusarrhizus (SDAbesiyerinde)

(D) Rhizopus (LPCB)

International Journal of Infectious DiseasesVolume 13, Issue 6, November 2009, Pages e508–e510 Nosocomial cutaneous zygomycosis in apatient with diabetic ketoacidosis Jaya Garg , S. Sujatha, Atul Garg, S.C. Parija

• Temel ve Klinik Mikrobiyoloji. Ed. ŞemsettinUstaçelebi. Güneş Kitabevi, Ankara. 1999

• Klinik Mikrobiyoloji (Manual Of ClinicalMicrobiology. Murray, PR, Baron EJ) Çev Ed.Başustaoğlu A. 9. Basım, Atlas Kitapçılık, 2009.

• Tıbbi Mikrobiyoloji (Medical Microbiology.Murray, Roshental, Pfaller) Çev. Ed.Başustaoğlu A.6. Basım, Atlas Kitapçılık, 2010.

• www.doctorfungus.org• www. mycology.adelaide.edu.au

• Temel ve Klinik Mikrobiyoloji. Ed. ŞemsettinUstaçelebi. Güneş Kitabevi, Ankara. 1999

• Klinik Mikrobiyoloji (Manual Of ClinicalMicrobiology. Murray, PR, Baron EJ) Çev Ed.Başustaoğlu A. 9. Basım, Atlas Kitapçılık, 2009.

• Tıbbi Mikrobiyoloji (Medical Microbiology.Murray, Roshental, Pfaller) Çev. Ed.Başustaoğlu A.6. Basım, Atlas Kitapçılık, 2010.

• www.doctorfungus.org• www. mycology.adelaide.edu.au