LAPORAN PRAKTIKUM MIKROTEKNIKPERCOBAAN IIIPREPARAT MASERASI
OLEH:NAMA: JAMALUDDINNIM : F1D1 14 009KELOMPOK : III (TIGA)
ASISTEN PEMBIMBING : PUTRI RABIAH A.JURUSAN BIOLOGI
FAKULTAS MATEMATIKA DAN ILMU PENGETAHUAN ALAM
UNIVERSITAS HALU OLEO
KENDARI
2015I. PENDAHULUAN
A. Latar BelakangMikroteknik merupakan salah satu ilmu yang
mempelajari teknik bagaimana pembuatan sediaan secara mikroskopis.
Sediaan yang dibuat di dalam mikroteknik berbahan dasar sel atau
jaringan hewan dan sel tumbuhan. Dewasa ini mikroteknik semakin
berkembang dengan pesat. Banyak metode yang sering digunakan dalam
pembuatan sediaan, salah satunya yaitu metode maserasi.Maserasi
merupakan salah satu preparat yang dengan cara pembusukan buatan
atau pelunakan jaringan atau sel tumbuhan dengan menggunakan cairan
maserator. Jaringan yang mudah hancur akan terbuang, ketika
dilarutkan dengan cairan maserator, sementara jaringan yang tidak
rusak akan tetap bertahan utuh dan bisa dilihat kenampakanya secara
jelas dibawah mikroskop.Preparat maserasi bermanfaat dalam
pengamatan dimensi dan kualitas serat. Serpihan kayu sebesar batang
korek api dipanaskan hingga melunak dan diberi perlakuan dengan
melarutkanya diberbagai larutan. Misalnya seperti alkohol, KOH,
xylol maupun aquades. Preparat maserasi menggunakan organ batang
tumbuhan sebagai sediaan preparat karena batang tumbuhan lebih
variatif dalam bentuk sel. Selain itu, alasan penggunaan batang
sebagai sediaan maserasi karena pada batang tumbuhan mudah diamati
serta memiliki bentuk jaringan yang khas.
Maserasi adalah metoda ekstraksi jaringan tumbuhan dengan sistem
tanpa pemanasan atau dikenal dengan istilah ekstraksi dingin, jadi
pada metoda ini pelarut dan sampel tidak mengalami pemanasan sama
sekali. Metode yang sering digunakan untuk maserasi tumbuhan ada
tiga macam, yakni metode Jeffery, Harlow, dan metode Schultz.
Berdasarkan uraian diatas maka dilakukan praktikum pembuatan
preparat maserasi batang. B. Rumusan Masalah
Rumusan masalah dalam praktikum preparat maserasi batang yaitu
bagaimana membuat sediaan dengan cara menghancurkan lamella tengah
yang menghubungkan antara satu sel dengan sel lainnya sehingga
diperoleh gambaran bentuk sel yang utuh ?C. Tujuan PraktikumTujuan
yang ingin dicapai dari praktikum preparat maserasi batang yaitu
untuk membuat sediaan dengan cara menghancurkan lamella tengah yang
menghubungkan antara satu sel dengan sel lainnya sehingga diperoleh
gambaran bentuk sel yang utuh. D. Manfaat PraktikumManfaat yang
akan diperoleh dari praktikum preparat maserasi batang yaitu agar
praktikan dapat membuat sediaan dengan cara menghancurkan lamella
tengah yang menghubungkan antara satu sel dengan sel lainnya
sehingga diperoleh gambaran bentuk sel yang utuh.II. TINJAUAN
PUSTAKA
Maserasi merupakan proses perendaman sampel menggunakan pelarut.
Proses ini sangat menguntungkan dalam isolasi senyawa bahan alam,
karena selama perendaman terjadi peristiwa plasmolisis yang
menyebabkan terjadi pemecahan dinding sel akibat perbedaan tekanan
di dalam dan di luar sel, sehingga senyawa yang ada dalam
sitoplasma akan terlarut dalam pelarut organic dan proses ekstraksi
senyawa akan sempurna karena dapat diatur lama perendaman yang
diinginkan (Nurdiansyah, 2011).
Preparat maserasi merupakan preparat yang dibuat dengan cara
memanaskan potongan kayu menggunakan campuran hidrogen peroksida
dan asam asetat glasial dengan perbandingan 2 : 1 dalam tabung
reaksi hingga berwarna putih. Filtrat dibuang dan dicuci dengan air
hingga bebas asam, selanjutnya dikocok hingga seratserat terpisah.
Serat diwarnai dengan safranin dan didiamkan 6-8 jam. Serat dicuci
dengan aquades kemudian didehidrasi dengan alkohol absolut kemudian
ditambahkan xylol, sampai serat siap untuk diamati (Asdar,
2007).Sel serat merupakan sel meristematik yang telah mengalami
diferensiasi. Pertumbuhan dan perkembangan serat merupakan hasil
dari proses pertambahan jumlah dan ukuran sel. Pertambahan jumlah
sel suatu organisme terjadi karena proses pembelahan sedangkan
proses penambahan ukuran sel terjadi karena proses pembentangan
sel. Proses pembelahan sel menentukan dasar untuk pertumbuhan yang
merupakan serangkaian proses yang diatur secara biokimia. Jaringan
ini harus dilengkapi dengan cadangan makanan yang cukup, hormon dan
vitamin untuk dapat membelah. Sel-sel baru hasil pembelahan
memerlukan karbohidrat dalam jumlah yang besar, karena
dinding-dindingnya terbuat dari selulosa dan protoplasmanya terbuat
dari gula. Serat merupakan salah satu jenis sel yang panjang dan
meruncing biasanya penyusun daripada xilem (Fosket, 1994 dalam
Astuti, 2012). Xilem sebagian besar tersusun atas dua tipe sel
utama yaitu trakeid dan pembuluh (vessel). Trakeid adalah sel-sel
tipis dan panjang dengan banyak ceruk atau noktah (pit) tipis
disepanjang sel tersebut. Berkas-berkas trakeid menyusun sebuah
saluran yang sambung-menyambung bagi air, sebab zat cair mudah
mudah melalui ceruk dari suuatu trakeid ke trakeid lainnya.
Beberapa jenis pembuluh di duga telah berevolusi dri
trakeid-trakeid yang lebih primitif. Sejumlah pembuluh memiliki
cincin (pembuluh anular), sehingga meningkatkan kelenturan pembuluh
tersebut (Fried, 2005).
Bahan-bahan yang digunakan dalam pembuatan media preparat
maserasi kebanyakan adalah zat warna. Zat warna yang biasa
digunakan dalam pembuatan preparat maserasi adalah safranin dan
fast green. Tujuan pewarnaan jaringan tumbuhan adalah dapat
membedakan bagian setiap jaringan sehingga mudah diamati dibawah
mikroskop. Menurut Handari (1983) zat warna memiliki afinitas
selektif terhadap organela sel dan jaringan sehingga sel-sel dan
jaringan yang berbeda dalam suatu organ tumbuhan dapat lebih mudah
untuk dibedakan dan bisa diektraksi bahan-bahannya (Indasari,
2013).
III. METODE PRAKTIKUM
A. Waktu dan Tempat
Praktikum ini dilaksanakan pada hari Sabtu, tanggal 14 November
2015, pukul 11.30 selesai WITA dan bertempat di Laboratorium
Ekologi dan Taksonomi, Jurusan Biologi, Fakultas Matematika dan
Ilmu Pengetahuan Alam, Universitas Halu oleo, Kendari.B. Alat dan
Bahan
Alat yang digunakan dalam praktikum ini dapat dilihat pada Tabel
1.
Tabel 1. Alat dan Kegunaan No.Nama AlatKegunaan
1.Beker gelasUntuk memasak batang kayu yang sudah dipotong
kecil-kecil
2.Hot plateUntuk memanaskan beker gelas
3.PinsetUntuk mengambil kayu yang direbus
4.Pipet tetesUntuk mengambil larutan
5.Kaca objekTempat mengamati preparat
6.Kaca penutupUntuk menutup organ pada kaca objek
7.TissueUntuk membersihkan peralatan yang digunakan
8.Kertas labelUntuk memberi label pada preparat
9.MikroskopUntuk mengamati preparat
10.Kamera Untuk mendokumentasikan hasil pengamatan
12.StopwatchUntuk menghitung lamanya perendaman batang pada
pemanas air.
13.Cutter/siletUntuk memotong batang yang diamati
Bahan yang digunakan dalam praktikum ini dapat dilihat pada
Tabel 2. Tabel 2. Bahan dan Kegunaan No.Nama BahanKegunaan
1Batang Jati putih (Gmelina arborea), Pinus (Pinus merkusii),
kembang sepatu (Hibiscus rosa sinensis), akasia (Acasia sp), dan
bugenfil (Beuginfil spektabilis)) Sebagai sampel preparat
maserasi
2Air bersihUntuk merebus batang kayu
3KOH 10%Untuk menghilangkan air pada jaringan kayu dan
memisahkan serat satu dengan serat lainnya
4Asam nitrat 10%Untuk melunakkan jaringan kayu
5Safranin 1%Untuk mewarnai preparat
C. Prosedur Kerja
Prosedur kerja yang dilakukan pada praktikum preparat maserasi
adalah sebagai berikut:
1. Memotong kayu menjadi bagian-bagian kecil dengan diameter
seperti batang korek api
2. Merebus potongan bahan dalam air sampai tenggelam.
3. Memotong bahan menjadi potongan kecil 5 mm.
4. Merebus potongan-potongan tersebut dalam KOH 10% mendidih
selama 3 menit.
5. Mencuci dalam air mengalir.
6. Memasukkan dalam larutan campuran yang terdiri dari asam
nitrat 10% sampai bahan menjadi lunak.
7. Mencuci preparat dalam air mengalir kalau sudah lunak.
8. Mewarnai preparat dengan safranin 1% (aquosa) selama 3-5
menit.
9. Mengambil sedikit bahan kemudian meletakkannya di atas kaca
objek.
10. Memisah - misahkan dengan menggunakan jarum pentul.11.
Menutupnya dengan kaca penutup.
12. Memberi label dan mengamati dibawah mikroskop.IV. HASIL DAN
PEMBAHASAN
A. Hasil PengamatanHasil pengamatan pada praktikum ini yaitu
dapat dilihat pada Tabel 3.
Tabel 3. Hasil Pengamatan Preparat MaserasiNama SpesiesHasil
PengamatanKeterangan
Gamabar PengamatanGambar Literatur
Batang akasia (Acasia sp.)
1. Trakea
2. Trakeid
Batang kembang kertas (Bogenfillae spectabilis)
1. Trakea2. Trakeid
Batang melinjo (Gnetum gnemon)1. Trakeid2. Trakea
Batang pinus (Pinus merkusi)1. Trakeid
Batang jati (Tectonagrandis)1. Trakeid2. Trakea
Batang kembang sepatu (Hibiscus rosa-sinensis)1. Trakea
2. Trakeid
B. PembahasanPreparat maserasi adalah suatu preparat yang proses
pembuatannya dengan cara pembusukan buatan atau pelunakkan jaringan
organisme tertentu dengan menggunakan cairan maserator. Proses
pembusukan bertujuan untuk menghilangkan bagian sel yang
menghalangi jaringan yang diamati, sehingga kenampakan-kenampakan
jaringan dibawahnya dapat terlihat dengan jelas pada proses
pengamatan. Metode maserasi menggunakan beberapa jenis larutan yang
bersifat maserator, misalnya larutan KOH yang berfungsi sebagai
melunakan jaringan tumbuhan tetapi tidak sampai merusak
jaringan-jaringan didalamnya. Hal yang sama dengan larutan asam
nitrat 10 % dan asam kromat 10 % yaitu sebagai larutan pelunak
jaringan. Larutan gliserin dalam metode maserasi berfungsi sebagai
zat pewarna sehingga kenampakan jaringan dapat terlihat dengan
jelas.Secara umum jaringan tumbuhan ada dua macam yaitu jaringan
meristem dan jaringan permanen. Jaringan meristem tersusun sel-sel
muda sehingga selalu membelah dan belum terdiferensiasi sedangkan
jaringan permanen sel-selnya sudah tidak membelah, tapi telah
terdiferensiasi untuk menjalankan fungsi tertentu sampai membentuk
jaringan yang kompleks. misalnya pada jaringan jaringan epidermis,
parenkim, kolenkim, skrenkim, xylem dan floem.
Batang adalah bagian sumbu tumbuhan yang pada umumnya tegak,
berada di atas tanah dan menjadi tempat melekatnya daun serta
struktur refroduktif. Batang memiliki susunan anatomi yang kompleks
mulai dari lapisan epidermis, korteks, endodermis maupun stele.
Batang juga disusun oleh berkas pengangkut yaitu xylem dan floem
yang disusun berupa serat trakea dan trakeid. Trakeid merupakan
bagian dari berkas pengangkut yang memiliki bentuk panjang dengan
ujung meruncing sedangkan trakea berbentuk pendek dengan ujung
bulat. Kenampakan trakea dan trakeid pada setiap tumbuhan
berbeda-beda.
Pengamatan pada Acasia sp. terlihat adanya trakea dan trakeid.
Terlihatnya trakea dan trakeid dibawah mikroskop karena ada zat
pewarna yang membantu memberikan pigmen pada kedua sel tersebut.
Bentuk trakeid panjang dengan ujung meruncing. Jika dibandingkan
dengan gambar literatur serat-serat trakea dan trakeid terlihat
sangat jelas tegak lurus. Hal yang sama juga terlihat trakea pada
batang kembang kertas (Bougainvillea spectabilis). Trakeida pada
kembang kertas (Bougainvillea spectabilis) berasal dari sel
tunggal, selnya panjang dengan ujung runcing.Pengamatan yang
dilakukan pada batang pinus (Pinus mercusii) secara maserasi yang
dilakukan pengamatan dibawah mikroskop terdapat jaringan pengangkut
(xylem) yang berfungsi mengangkut air dan unsur hara dari akar
menuju ke daun. Dari hasil pengamatan terlihat trakeid dan serabut
xylem. Trakeid berasal dari sel tunggal, selnya panjang dengan
ujung runcing. Trakeid dibedakan dengan trakea karena tidak
mengalami perforasi dan hanya mempunyai pasangan noktah pada
dindingnya dengan ujung yang tumpul dan berbentuk
pendek.Pengamataan anatomi batang kembang sepatu (Hibiscus
rosa-sinensisi) yang juga dilakukan dengan metode jefferey dan
diamati dibawah mikroskop terlihat trakeid dan juga trakea. Pada
dasarnya pada pembuatan preparat maserasi dengan menggunakan metode
semi permanen menunjukan dalam sistem vaskuler tumbuhan terdapat
serat yang berbentuk panjang yang disebut dengan trakeid dan yang
berbentuk pendek yang disebut trakea. Hanya saja pada hasil
pengamatan diperoleh hasil yang agak berbeda, hal tersebut terjadi
karena perbedaan pengirisan dan merupakan ciri khas dari
masing-masing spesies tumbuhan.V. PENUTUPA. KesimpulanBerdasarkan
hasil pengamatan maka dapat diperoleh kesimpulan dari praktikum ini
yaitu untuk bisa membuat sediaan dengan cara menghancurkan lamella
tengah yang menghubungkan antara satu sel dengan sel lainnya
sehingga diperoleh gambaran bentuk sel yang utuh yaitu dapat
dilakukan dengan cara perebusan batang tumbuhan yang sudah
dipotong-potong kecil. Setelah dilakukan proses perebusan dilakukan
proses penambahn KOH untuk menjaga bentuk jaringan, dilanjutkan
dengan proses pelunakan spesimen dengan menggunakan spesimen asam
nitrat 10 % dan asam kromat 10 % hingga sampai pada tahap pewarnaan
dan pengamatan dibawah mikroskop. B. Saran
Saran yang dapat saya ajukan pada praktikum kali ini adalah agar
supaya perlengkapan seperti alat dan bahan yang berupa larutan
untuk pratek mikrotenik diperbanyak lagi agar pelaksanaan
praktikumnya berjalan dengan lancar.
DAFTAR PUSTAKAAsdar, M., 2007, Perubahan Sifat Fisik Dan
Stabilitas Dimensi Kayu Akibat Pengawetan Menggunakan Impregnasi
Karbondioksida.J. Perennial,3(1): 6-10.Astuti, T., & Darmanti,
S., 2010., Perkembangan Serat Batang Rosella (Hibiscus sabdariffa
var. Sabdariffa) dengan Perlakuan Naungan dan Volume Penyiraman
yang Berbeda.J. Anatomi Fisiologi,18(2).Fried, G. H., 2005, Biologi
edisi kedua, Erlangga, Jakarta.
Indasari, I. N., 2013, Wenter Sebagai Pewarna Alternatif Dalam
Pewarnaan Media Preparat Jaringan Batang Dan Akar Tumbuhan Pletekan
(Ruellia sp.) Dan Beluntas (Pluchea indica).
BioEdu,2(1).Nurdiansyah dan Redha, A., 2011, Efek Lama Maserasi
Bubuk Kopra Terhadap Rendemen, Densitas, dan Bilangan Asam
Biodiesel yang Dihasilkan dengan Metode Transesterifikasi In Situ,
J. Belian, X (2) : 218-2241
2
1
2
2
1
1
2
1
1
2
