[Med ITA] Microbiologia - Terreni Di Coltura e Procedure

5/9/2018 [Med ITA] Microbiologia - Terreni Di Coltura e Procedure

d--6,~,~'J\~ I\ t 1 't~ t 'F' (.:~'~~'\\lJj p..__< , . '/' \'" I" ,~\." , . I "\ ' " .. \ r o o t \ . . o . C G...'Q:l.:,, La;l&e~c:he...attllac;Ji'U~ .un, ~e:p>a:l'a~!a.}~-!~p~r&fl:~~_~~~~. 0~)g~(j)t..:~"''' 'l:g , com p.0~ a da @g-.gl u l! dtv.el's{) &1t'a~ r , a


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Ja .J::1 \m t,terlstice. dl essere ~ lr l tra llg en L I e (I i eltrnlna m II )'n gg io crdlruu ln.~ - t:!fsrn;-~ tt '~ 'iQja . i i z~~1~r~'il " ' - :p e i H t i ' . t ra 1 ~ -io ~L e i ~ l l l l i n o s l 1_..;....------- ~" -.~tL.pr~pa~~~o,; 11 s~:Q.Q:IlQQ._d.el~2..a ,oa ) i zza to . te ~_]; lqst .o jr a .n weRutatoe l,:pc.chip dell'o:;se~o.[E, ' i 1 , t-. '~U ~ I \': >J .: ..J 't ,j: : \ . "-l'i-~-f\'q\n\It)

18;::;::-'_'- .' o . rT P.J":~"\ r_~. ; - 1 -q~ (l:'l..)f, it\ 'Y'I~ ~~Rlo;'l&l#.tlr.onjtla. ~LmlGroscoPJO i ! l e lhUl11COe II pill .. po~en~e ~-Irrnezz ."Od rndagwe ,r ru cf .{)sGQ E ip l. ;, ! t tu a lm en te u sa bo :E' .cos tltutto da un rilamen lo ill t~U1g:sterio Incandeseen b~_d]e-Lor-nisce l \ '11 [a;;!~-cH~'lettr~~i" c i i velocita unircrrne, da un coride nsatcre,d(l."unsuppo ItO jJottd- o g ge [[0,- a a , _ u ~ i i "~Q.~ i i ti vo, de: un p 1'0i~tfa_re e d < iU~\1 s .cJ! .er : !DC!.. . ! ium .e~cen-t ! ! . ~~ c : l t ! ! i i - P - L ! o ~9s . se r \ ' i 1 re l ' l rnznaglne.

II [< j,sc io di ~ Je~ tr i jr i iem esso ..da l la , su rg en re pL ilL essere accere ra c oco n Lin adattn potenz ia le : g il elettroni Rossano in un t u bo in cul vi e 1 1~uo(6asso! u to in .modo d~e gLi. elettro~i stessl non dE vino ,'

Il oondensatore concsntra ll fa'kia dL eleUrO(1i s_u. t l 'og_get lo , che Iide via iii' i :a g lo i le(j: 'e l1 os_ pesso re delle su e .di verse, pa .. tlL -

( ---iA'. z~~e piu- densi,(i- ~l~~~spe-sse'deviano un magglor nurnero di elet-t J Q q _ ~ _ e~qL.l!ndl appa rono PIU scure ,Le 1! ! .n iL mate nel m l cro sco pto -elettronico scno etett.romagnetiene,! c confer isceno all'oggetLo un lngrandlmento var labile con le v;J.rj;Lzi,o_ni

: del f o . r Q _ _ . .c ~ U JlP _O rn ag n et. ic oE' cos i e-Umin'aia 1 2 necess+ta dl util.inan len ti fnLcl'c:.1.tnljiabiIL - 1 1 0 -_ me a'lVk.!l~ n e i rnicroscopio ol.tice.L'cculsre net rnlcrovcopio elettrcnieo e rappresentale da Ull p ruiet.

lore .che rng randrsce u l ta r iormerite l'immagine e la proietla su unoscherrno fluor-esc-eon Le. 1 mteroscop to elettronico ha U l1 p6tere r isolublvo supyiore a quel-i o . .d e l - - ; P I . c ; o S ~ ( j p J o i f u L T ! 1 . l e pctere r l S o i l i t ' t V o T i f o 1 1 l . L o al~JjJjjgh~z.za(j'on,da, tt5socl:",ta ag l i e lec l ron l a,c ,celera. t i ; -essa a rr tva a .Q,Q~5" , f l -ngst~om"t .. ~n poters iJso!lI . t ly_~~~dunque m n r e vclbe- maggipr e dj quellJ:) b~Le-n w i l e : c . . c l n . ( p l u poten t ! rnlcrcscopl olll.d e~ls tent l , \1&r .,

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(':[T~_.. J_~~ _'. \ f' 'r:\:'~(i'''''-7',,) ~. ( ( Ii.'1 I.M!';:Oi~~~~~,:I~~ L'U~~~~i~t~J. .~!KJ}.E: . in micro ... , II' .. I _Sc(\plile g lt: ls l lnCa Lo da lla luoghl1z.za rl'cnda (4 .0 0 0 - 50 0 o.ngstrom) che. e) .. - , 1 _ ,I.?,\~ );m~aelr2.~li.ir.'gFiez~'ridiidella t~ibile ..4()OO"-' :; ~OO~ng< j trom) . [ -, \ X 1 I .':

~I 1 : 1. . ~ : -~ ~ ~ ~ U r i - mlcroscoplo con !-usa,della !\JC'l1ult.ravie- {.' -'.( .t.:x) JeL la e 1~~!!.~~,t2.~no .a--,~~~~lDK.l;!,er~JlltiQ:aJJ1eA~f,;~due-p~j- I ,)Cs ~ ~ ; ~ e w . r l nl:e con 11 rmcroscopto ~ luce vtsibtle e \J\( l i ? - . , .P0 55L o lle d_ 1_ S~ )~ g l . lu e cu e purrtt dlstan.t:Lt:ra..Jom .O ,l ..m l"Cm n . ..~ ~ ~La lao te Ium ln~s,. ~(~~:e~sso~~;;i:ss~e e '1'[derp;iati, ~ a r m k rb '~.?2PJ.9~.~{~;!_ ~~I.D:Lu~~g~:J.J~~;&se,lgz;~I- ---

'tSsWlQzion; .....,t.:g.CQ_[!lli~te_ .nall'cssersazione de! t 1 i ! a t J .g" . v,~ e_eons;;-t-e'di-,d:i-m-I'l'I~~ t n 1 e : !_ i r . .to~~-r~dEE.0ca disposiziQDe an-~ l ~ r 1 f E d b 1 m : ~ eenomellUQe~e5L:V'lfAQOdUzign:e. . .. ,Vl so~~~cdm"'M~egtenliJ:!je:~S~;.I:yate LW1-crorganisml vivj. -

. _..'\: L~ .p r i l l ) . !Lcm,sJs ~e_J!t.Ui!re...Ul@ic:i~p.sione _q!J . . . .m.fm:og:anJ.s~l(j da- . . ,e _ ; ; '~ Q l l! J . .. .U: ,~ . J !b ' i~Qn~I0J t I~~e . l . :


~ e s s a 5U U_ll _X~, tW.l9. :por tao,gJ; l ! lLL r i! ,op.e.n.qgl~.. . . .p.~!~9..q_1I.t1_...@,~~_ . ~ E . . ~ " ' " " - - - - - = - ~ _ .pno!;g~.,_;9:~-:~sserv8.zione deve essera pmlungata si-evita levaporazione dellfqy.ido, ...lutande imarginl ~ r1~ , ly,e_~P-Qo_.~_qpJt8$get~ospn_ p8._raqina.

{~ La seC:.ruul~~lJns!st,~ neJl~ots..w..2V~1,-~..1l~"."'-t6e_:.~f'g.re_s,,n_ta ..il~~etOdo_p~~~6Aia:U-e.t'i.I .' S!_jmpiegan(l;. percie, ~9J~lLy_etI.inl-p0Iiaj;Jg_~1~.L.ehe,..1~_daOD_:_uiHI.

lntercapedine fra )~ J..~~r !J ly ,y , t~ . f l . . o" ,~be$So; I O _ s G Q P J i . . , e -'qu_ e l l a 'd t "ct t tf!t let1r'un6 :s~ra.to_el:J.~~QZ.!! i ;_~~J0Qt,g.! .Y,9,~p.

- Esistono in cQrnrne rc ! divers! tipi,di vetrml; ilplu lisa to e i t co-- ; ' 1 ' : ; siddetto,lx.elrino iC?0 ce l l3 ! , a . . . . . 9 : !~ch . ~sso e dl dtrnenslomcrdtnarte,'. :Ima. ~ s ~ fm t S .E & . ~ i 9 . _ t ! L . t t e Q U 1 ,j jJ i I ' iW1i , . e p_ossi -e _ g~_n__~ l 1 ?-..Ra r t _~ , centrale. - - ; - ; , r . f UI\~P11l;~oncava~de'! dlarnetro di ci rca 1 em e prolonda L5 mrn,: ",J.,,$ hia p{llica -della .vase l l lna sut margine clrcctare. dellacavita, sj de-.:i ~dhe~f.i" f f tq~~cX~~'iC l i g ~ j ~ Q d a _ ,. ~ s E t t n I U ; [e,~~t,;~trjr:oJPT~;O~

\g~L~O.e si. ca,povolge. q~esto adagiandolo sui prime in m.e~o, ehe la gee-

. __ ,eli! ye.ngaa tI!'lve.rSl dlrettarnente 8.1 centro della ccncavlta.~;-pu6 _g ; ;;s :e re .c .o r u . id e. r~ t a anc~ e - ll.ns Qsse rV3 . z_ i o . n ,,i!. Iresco la.C.Ol~l:a:ztone 'negatlva 'Can Incntost ro eli china, Per l'esecuztcne sella prova 51ae.RQji~~-s! : ! .~!1~vetr i_!1~_.EE~_nogget touna goccia-dl sospenslorie microbicaed una goccia d-i inchiostrc dl china dJ l_uHucaJ 10 r o .ln, acqlJ "" ,-c')1' ' \ .;., ' i . .~.,,~ .-:,_~~\."\,:: \-

. ,r_ .... 4 ' .;;. t ., . -_.~


e - _una sostanza Inct i lor .e , rna se nel su e! anello si Introduccno tre nitrogruppi (crornotori) , In rnolecola (trlni-I t r abenzEne) , dlviene colorata: introducendo ulterlorrnente u n ossldrile

(a u xo crom e) si o tt la ne In rnolecola t 'e lPa elde p lcr lco che o l t re ad es-sere cotorato e anche cclorante.

_! col.9r2.:~~Lsi-:-d:~.U.ulLqgQJ!!,~1W1.S..p.!1-s,1ci,",.,"ij!_CO)f~~.".iI.~.< 'L ~ .$ l"""~ ~ fts . . ldo (OR e .COOH )._ g ,,_ .b a sico (NH ,) .."~':g:L;;iliii'ana g\: l .~EL!.D_.i~l , lJJLrad\ca!e ac.id9.f ~~~~~o d~. po-~~ re CQlql 'Ul te,. m ~ nt[~ f l_Q .! lj~ I,~ . ,~ ~ .: . . . . , 'J ~ , \ lLOf~C. t . l . J ? ,M:S :L .vece, sano, qu ell l m g 1 j_ 1 0 l b a se e . . do~ala d l . _ e o -Lere ~.l)te_mentte-non.10-i) ..l l ,a c in ,o ,- .( . 1 ) ~ , : : . ' r ~Q15~iJij lLi! l i ,ql( lndLto: loJJl .ho" tn genk~t,j..:.


- _ __'. L . . I ! . - : - . . . . . . , ~ . . . . . . . . . , . . . 'I...---l- ....1~~ ...---' .- \:.._. ....~\L'C.,~ ..... ~ \~""=1 l~NCf~ Q _ . _ture!' Per aum~t~Jh;~~~!e.ll, pe~J!~~ ~~s~~"e colora~ltld W i r fis.s!ltlg~LsU!l$!i#l~~rMe4ill~,,!; r!.cE::~~_J;~~,tf~ ' a J A n S f Es se p~~,,~seIe a~IQJ,U;a~~J: ! :~ :EE.~. lO"~ BnR!!i~-te2Eor~~~Wanl~.cQJetantl! ...:'a& !""",;p ..... _.. - - ~ _ _ , ,,~, ,, ,,"" '-B __I rnordenzant! pIli usati in batteriologia scno: i l l 'Jlqiliifo di. Lqgol1 c........-;!_ ~

, che e una soluzlone lodo-lcdurata (iodio gr. I, iaduro ill potassic gr. 2,I ; H.O dist.lllata ml, 3_00...J~ iITdQlfi i~ t l )'acldo tanruco., g lU~ ! . ~ ~ . ! L ~ . g ! Lei ..ill d\lui~LTalvol {aJG.~tl~y.~~.~)t.O::?i~~ il , ~~Q~nQ ..d.~J.~ > metaGrO .' . jiiSi'Stenella proprieta ch~J!Li~~~.aIUl1il,.di~n~

)1111. tre un" ~fl.:":_~-..",.;,!lJ2JQprip~1neJorrnll.ih"ru,cLtoPlas~a-H ..(-c r(es.j..gmDlI1i di velutina present! in aicuni batterrcome to Spirillum-~ -. . .volutans ed iCQfYneEa'Hafii) ._QH .e stD J en ,omeno ..~ .pO;G~ :~ ad un elettroas ..sf2IELIJ l$ l?-JQ.) ra . iI.catrone-baslco del coloraste e le macro '~~lecole"cei i 'u~Ian a cartes negativa, centenett gruppl sollorici, carbcssilicl e Ioslorlci.r princlpall metodi di colcrazione usatl In batteriologia compor-til. I!o"~p!r~?: ianLs_~lJ3 ie i e C010rtl2 iOlli diU erenziali. Le.i.*,t:_~~onl"-Uk."pt@~ci.unonocrnm~h.':1 ~t:?! lO:},~\ : leUeena si ~~guQno_mett~nao...a...c.on~~~ UL . 1 I ~ i q Q ! g a ; ,t 'E ' 1 ! : : _ r , ? : t f ~ ~ J U . fL D a t i l . 1 I l : . f : Q D ~en~~j\m;,~.t.erj~ co-lorareed hanno 1 0 sC ,2Q d1 [el1derl1e pi:u ~

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EeL_pr~l&re: st!:!..di,ar~, in ]abora torio, irniararganlsml . . e . .ln~dJ..g~ensabilepo r i i i~ \Q.! :g l , i i l~~L~l le . . R Q.~ s .a ho .e fe sG f J '~ ~ . : IM l l i p1 iC< iU '&i . .. .E s : ~ i d e v o r l ' O ,intatti, tra rra dall'ambienle tu~te le sostanza necessarte di cui hannou iso g no per Ia siritesl del lero cos QtLH~ntice,1 G :.t l iH ie per ja produslorredl energ la.

G:~J,ellim.:_~Lnutr~ contenutl nel mezzo devono E,ssere_J!1 . .Q,~L i l i _ adeg~J.~UJ.U.e._e~igenze spec if lche .. dei- mlcrorganisml, che hanna~ 1 F 6 p n i n a ftstologiche ed esigenze nutritive diverse. Andie se il cornpor-ta rnen to rneta b c llco d'e i batter! d if 'i 'e ri sc e n et ev o lr ne nt e, a ';&,~QD?,~'g~1g _ e : : : r : I ' : . " ~ , . s ~ . h L ' ! _ _ p . . ~ ~ . ~ , , , ,~1j9no alcuni eventi .comuni. a._.tutti. i..att~ri.Le princlpall eS ige .nze til materiali nutrit! vi PO S9 0no esssre in ~ulteda~~~a-~. : 'mp9.~~on~Chimic '3 : -della- ~ellu,la"'ba.tte~ica. L"a~ua ~e-ve corisidera rsi sem~re l~!w.J;.o.t_~~\';I~~~~~.we; Ia , ,@ l1 r t bat-l er i~ . ,@;~QHre a COil tenere idrqg eno e o ssi 'E "eI'JO , contiene carbonio, az.0to ,_..-.., ~ ... _. ,_" .- ~!lI~-~~ro e z.Qlfo cha rappresentano circa i1~ ,d\5,1.pe[~. sec(:o; rnentrel a - f r f J ,ZH ,'r ;,eresidu a ~ . rappreseritata da .a::rr::_elementi quali ..,p~~~ssi2~caJEiol!!;rc\,rn~." co_~al~o,ams ed etc.S tu di el1 ettL \aL I suUa


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III..

I. J


) t ~ j : : r e : t , " i JH!W;~i '5 .0no quell] che pet'meUdno hi. cresct ta d.eJlam~~gf8repi7fe.cteTb'aiIeri. 'Ita- 'i piu. conmnernerite us-at i ricordlarnol'iAg~r~:I"~Mr sangne, l I 'T~A, : l~ ~fiJ:He.r-Rint.?~, il Q E D;.e .bG o ..~7;~~~n h-en:eno' che 5, 1 ettlene addlz tonando a! lirudo nlJ~rit!YolJ ' l 'I : l . ' ~~a mu:eill,,-!~/ir!Gs-aa~r) , estratta 'dalle 'alght"de-lp:s,clilCO,e coshltu! ta da ,pec'tina ed agare'sio. Essaagi,sce solo _,;pome!pezzo at ~o-l;j~A~m?A essendo 'spro_vvis'_!;~ c l iGa;P i !g~a nulrittve.


Jato; I'Hektoinenleric agar il Wdlson-Blair', l'.fI,gar sale rfIannlte, itChapma-no, I'Ag ar sangue azide scdlca, il Pergola, l'Agar cetrimide, ilSal : t o t iLaud, i. l Pe-tragnani, J'tVTM-, il S:a t l Jon , .il Borde t -0engol ' l , if CTA~4ga r , i ~ .A g a r c lc cc el a to , il \ f l ) ;geJose leu l te , 11J4_onsu r ; I'a ri qu a . _ p ep to n a, ~ at ~~~:n~;::~i~ : e ; t \ o ; . . ; ; ~ ; . : . . ; . l . . ' ' ' ' ' *. ; . n ; . ;1I~~~~~ro~~~~~o~n~e~U~0.;E;S~S:O~.~~-~;=~~~~~

- 0 4 ) _ _~fi~~ 'LIn ~erre~o altamenbe s-el'e,tti.V'o,_ acla:to pe r'0 1'J~~oa.ll!!npa't-o~nj- da, Ieci e m a~ }a l ldj~ ;l"5[_ Con-ti~ne-- s ~ l i t iWari , l_l;l.gOSio,sa$.~rosjo, ~ a i F c i n a e - b~~ . ) .? rGl ! ! I? .~~ !2! .s10-La presenza d.ei tre O,~ft:lQf_dTatipermatte un.ampla difJeren7;iazLone d E "g , 1 i ~nt~ro_batteil jSQiaLi,

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9 1


I I :. 1

- . !' ~ II ; I< l~ l ._~ q f \ \r . r fl - e _nme ' c t J ' r l 5eguenza . un aecumujo di~'m_Qtll~eil. nel 'er ,~el1Q:, che s~"1i . ~veJ: lI -~-dal ' l i r ,9 . [gl f !) dej)'lndi-6j:~u-e;0.~J_""'lllfliD:np- iii ,;~-_ ~ , .~ . .~ ~ 1 4 -R ' tOdu t l aqe 0 1 ' 1Q; r. l )geno so l fo l' -3 i~Q ne l la de -comBe:~ l z- l tj j:W: t l . el ! ' e tlniJelt:m s a1 l6 r~ nt e 1 a~ttiv,ike;- spedfi'ea 'dl a tcu ne. s ,p et : le dl - en t, er o b a ~ te :d . . ,. . l3ile s (m l lO B : l S t a a4G_p ' et i i .1 . ' e un ier , Il !UC COl ; 1 tene lht'e.terr,c, 8!iJt'I:rU fmrm)l ~q !~ol~,ttJ !a&osQI gt l ' l toslo e-dagar. tj'ldTogem\,sel-~Q-! a t0 j :lTadott 9 , c'Ombin;aOQtlslyQn .Il, l 'et1'Q" da " o . rl " l$e aso '1 f ;u . r e~ iii, t 'eumIi: provoca Uri a,mJ~rlmill1tp d , e l , rnezzQ. 1 ' 1 ) . .genere -i~ ba the r i . o l a g i a "'iiEITiei m !' li ~ ii a ot o , pe r , 7 & J e : s~~p;s ij ~S I . ~ u e s : t l i l m e ~ ~c l \ l .b r .a leGonUe:ne , 01 ' t r e.che II sol1El.~Ocil r_e~ro_:'~1uGos i o , annha Jaott'nsjoe saecarosle,e vtene utl-Ir z ; ~ i t ( ; ) , cOfl.liern,po1;cal'l;~m.eh~~ p,er sagg-j 'a' !of 'Ill. fiml-en'ha.zla: rrfj il l q,u~stlG : ~H b o i .e r at i ~ . l 'e "m t~ l ! &\ e _ j )t Q du . 'Z i .e h e-c l l ~ a ' s_

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~ _ B t _ ~ C J l- g _ I ? }' I ~f % t i Q I O : Jl~Jcunt ba:Uetl h ' t !f l l J l !l l.aJ:;_~p;tdJilL dl}ilHi;lI.l-):'t~1'04:0]0' pe r u l i 1 t i 'U i i r .1 i M ' clel trl)l~'Oi-a,TlI;1;, gjJlsta predv.~ro.re vieP'l '! svoel_a~!tC{l1.r"jvartda, j l;jathe-lii 1F t acqua pe-ptoD,g,ta e! l !ml,ung1+clo a!1ri.e:uol a re;;e-sl'!lta~vveh\1t.:i' un reHlilvop.a b'ase .ell pgra-cl l1 'l ' l~tuarnr tnhenta-nw.t t l :e, t ; i ;ql'Hl;l~ l_h.)');re~nz.a (. it Indelo la vtt'~ne II lftrr~[lO al~ps~!1.

l i l f ' ! I~ igll ,~ _ , ' '{IO'gts-'Pj';a!


La cap.acita dL cepp. i bat-L.c:ricitcslo costitu '. iI cr i te r ia prinCiPiW'

~--:--:-~-''--'''----'-eI-m-. -en-:-ta-z7"i .o ' t fdel I~Etosio' d ipen-. ber ica di due eriaimi: fa perrneasl eaUos!tlasL II prlmo, a loca llzzazione par i e t - a l e . permette ladel lattosio nella cellula batterica. Il secondo, Jrttracellu-

I . I S C l h . d , E 1 1 la t to slu ln g lu co sto e gal~tt~slo. N e g H entero 'bM teri pr i~ i~I permeast la Ierrnentasicne del Isttoslo e rltardat'a ed ~ POC,0 eviden.I ~ e . ,A H a scopq, quindi, c i t distinguera gli enterobatteri lattosio Ierrnen-antl , e necsssarto evldenziare la oeta,galaUossidasj medianse la prcva~ eWbNPG (ortollitrofElliloeta-D-galattopiranoside'). eolture -an_a ieroOie . : . : ; t 'Schetn i metodologici diver~i possone essare uti-I'izzatf pe r Ia coltura ,de-! g-ermi anaerobi. II prima problema da ai'fron=tare. e quello della scelta ~el rnate riale clinlco eta sobtoporr a colturae del trasporto dl esse In labors torto. POss(inO esse re cons!drati m aoterial! idone i per la rtcnrca degLi anaernbi . l'asplrato t ra 'c l l :a le , l iqu ie l ib Lo J o g i c l norrnalrne n te st.e r i l i, pus vaspt r a tb da Ie r ie prc; )J ,mde, urmeottenute per punturaeoprapublca, etc, Preievato }l mate riale cia esa.rnlrrare, prelerlbl lmentr con una 'slTil'lg-n a .per'latta t.elilltu, non blso-gna lndugrare a l suo trusuorto in Iancraterro, onde evua re iI cr:mlatlocon [ ' o s s ig .eno . Que~LQ t ipo di traspcttoe possibile sell laboratuno evrcino, in case contrar!o i materlalt aspirat] devono essere tr asportatlin p ro ve tte C J f i8 .1 e no n ccnb enen t l 05si.ge11 Q, rO-'rl"li~1 e l l Ch,USlInl. e r rne -tjc,l', in gamma.

Questl conteruteri sono Iornll! e li un Ier rerio c li trasporto cOIILenente agent! riduceritl. {in gsnere cloruro e li ciste lna, In grade di com-binarsi can l'ossigeno libero eventualrnents mtrodotto) e di un indica-tore della preserrza di osslgeno quale la resaaurlna oil nleu di rnetilene

I mate riali rrasport at! In questl contenttorl debbonc pervenire inIauor a torio entro 4 e ore dal prellevo

1 carnpioni, prerevatl Con tampcnl ,_ 0 i Irammeriti di tcssurc, devono essere inse r i t i lmrnedtatemente dopo U pre lievo ill prcvetbe 'Conte-nenti terrane preridotto ed un lndrcatore e l i osstgeno: anchessl vannslnvia t i in Ja bQ _ I1 I~ o r iQ entre 48 a re .

Durants il trasporto i c amp io r n oebbono essen; mam . enCJ t i a Ism-perature ambrente. I

La prima indaglne daeseguire e quella rnor Iolcgica, previa colo-razione dl Grarn, cnda aecertare 190_resenza dj eventuau rorme. spori-

'- gene. Conternporanearnente, sl precede ad un esarne coltura.ie. I me;z


u n m ez-zo nu tr i t lvo co n tenen te so -"..:;;:;-I mezzi solldl dl isplame.nto sono prevalenternenje quem al sarigue.II piG cemune rne r i t e usato ~ J'Agflt;, sa ngue arrtcchlto can vltarnlna K.

Per ag evo la re It reperirnen to d i dete rm lna ts specie' batterlcne, dacarnplonl con ftlJta mista, pbss.ono 'essen" adope rati dei mezzi a.l sanguecontene nti aritibiotic: quali la kanamiclrra, la vancotnlctna, Ia -collrnl-clna e l'ac, nalidlxtc.

presenza di unr a 1 1 1 l d J O ) _

ti l pra tlca, l'Idrcgeno gassoso si lega auossigeno motecolare for-rnnndo acqua che appars 'caine una nebblavlstblleuulle pa.refi internedel recipienLe. Quando I'ldrogeno non e faoilmenLe dispo'nlbile, I'unaa-robrost pLIOessere prcdcttasostljuendo I'aria d!fl recipieI;1te can un gas,mer te. rn quest'ulurno caso tappareechio sara rnunlto di. una pompaasplrante or ide provocars il vuo to e eli una pornpa one serve per l'in-t roduzione del gas inerte,

Nella prat.ica bRlteriologica Ie prove biolegicl1e vangono e-ftelttratener i dent lftca re g-lirag'tmtl microbic! ed 1 lara prodcttl e'sotos;;icJ. Gila.nirna lj pill cornunemente usati In Ianoratorto sene: 1 l Q!i,_~!g1ig.la 'e~' 1~ \ 1 .il [aUo .ed it tgp i i iQ. La via dl i~ocuia.zione del rrrateriale: pate-logieo e - determlnante per il rrsconfto deti'eventuale presenza di bat-r.eri da l mornenbo che alcu,ni .di essl hanna tropism a solo per deterrni-nat! tessutied organ]:

P T . { J J J e biQ~~,"~~ "~Jj&.ga l .wJ ,~q . ,~I~u: ' I i l l1 . . _ .misrJ l ,Qj r . ;p . Visa-larne ntn e !'ic,lentilicazione di alcunl agentl mtcroblci sl effeUuanQ 01-tre che CO n ricerche rnicroscoplche ecolturall, anche co n prove biolo-

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glche. QUI;~st.'ultim~ vengono piu comunements usats per l'identiftca.~iQrllr del bacllli tu bereelari, delle. Listerlarrion0cytQgelle;:delj~. Lep-tospire e del ClostricildeHa, ga:ngrenU'il:n:hl. I'lden til io:azion'e delle Le ptosp ie la p [ova bie-logiea rappreserrta uno d'ei migllori metadl di dlagncsl, L'arurrrale o iscelta e la cavla, n materla le da 'inoculate pu essere ecstttultc: d?

:. "


una brodoeoltura, f1i\1 sangue ticl paziente prelevato all'lnlzto della rna-lattia, dal ltquide cefalorachidiano e datle urine' p{;elevate nel perlodoavanzate della malattia. L'Inoculazlone puo avvenlre per via endove-nosa, cnngiunt.lvale 0 pre leribllmente pet via sottccutanea 'e perltoneele.

/l.ll'esame eteroptico, si rlscontra ittero generalizzasc, emorragradiffusa, tngrossamento del fegato e del surrenl, E' posstolle isolate IeLeptospire dagll organl colpi,t.ie soprattutto dal !egato.

I s in tomt riscontratl nella cavla scno sitni'lt a quelli risoont rat.lnetl'uorno, Dcpcselglornl circa, sl ha. aumento jf temperatura e di-mag urncntc: '~egue poi, un subittero ed erncrragta. La morte soprav-vlene in ipoterrnia dopo cinque, sei giornt.

!\11'esame ate roptlco. 5 t rlscont ra ltterogeneralizzato, zmorragiu dif-fUM, rngrossamento de'! [ega~oI" dei surrenl. E' posslbf le Iselare le Lep-tospire d?gil organl colpitl e soprattutto dal Legato. '

Per l'identHlcazione delle Pasteurelle, Ie prove blolcgiche .s i eseguo-no su tope e cavia. Le..specie piiJ importanti cne interessano la patolo-~lil umana Salle); P. pestis,p.seudotubercuJosis 'I " tularensis. Mellacavia 0 riel tcpo l'rnoeulazloue sottocutanea 0 intrape-rjtoneale eli P.tulnrensis .e pseudctuberculosts 'provocano edema. locale can inf I : : unmaz ic71e di ll l i n lorrodi reg ipna l i e. f e no rne n i In f e t t tvl g~nerali. canmort.e in due, cinque g.'omi.

AII'Elsamc et~ro}ltko sl evrderizlano linfonodt ing rcssan con IO .SSU-dalo crncrragico. ing rossarnento della m ilza !. ' dwl feg::lto the presen-l.a rio a ree necroUche.Le Pasteurelle SI pesscnc IS01are dagll organ! col-pili e dal s-ari::;Lle.

Le prove bjoi~~ich:' ve ng ono a nche uL.tlizzute per l'identi'fica1.J.onl'del Ctost ridl de la gangrene. gassosa, L'[l1oculazione di una' colt ura dlC. per lrtge.ns, sept.ieurn, novyl, sporigenes. l1ystQli.,~i6um etc. per v iatntrarnuscolare In una cavia, provoca g.enetalmenl~t un edema g e-.J;\tino.s.b can dlstruzlone della' cute, sottecute eel 'eV~ntualmente' delmusccli. a causa delt'azione 'di eneimi Utici. 'Spesso ~'poss\bl1e evlderi-,:;'j(I. re ' , i n queste zone necrotlche il caratteristicc crep'jt!o .dovuto a l l a pro-duzione dl gas. .tFr~~i !&J&T~W.~TL~~~: '1uJi t4w,a9; lk4pf l i i i~1 L'.~c,certarnento diagnosttco lndlretto per alcunl baUeri, avviene !l.nch me

djanl.e 10. dtmostraztene della produzione d i tosstne i~b, Hi genereques to u i o " d i prove biologlcbe vlene :effettuatoper 10 S~apllylococcusenterotosslco. per II C. diphteriae e per il CL 8otuli.num.

Per quanta riguarda 10 .s~aphYlococcus nte-rotossito, si cerea d]dirnostrare ua produzlcne qelIa enterotosslna rasporrsa blle dl tosstnte-zion! alimentari nell'uorno. L'animale eli elezione e ilgattino gio",an~


I i- I -, I , _,{It,t~n ile~L oi Dolman) .1quale vengono lnoculati, per v ia lntrucar-, I ' P ; ~0 f1~er:e.rlbilrnenLe en~oven.a, 15-20 mlnutl dopo LHl,pasto normale,~l1\que mlHllJtu de) rnatertale In esarne: se ,questa contierie enterotcs-"~IAil .Ic1QPO 1-5. ,.20 rnlnutt, lanlrnale preserrta vomlto e diarrsa. L a slnto -, 'bktologia, in gene re .sl rlsolve entre


icccsstvamente si aggtllngorJ9 1 1 clascuna .provet ba volurnl ug,ual! dlI i > sospens tone battertca del g .erm e cne si vuo l e saggiare. Dopa i ncu -zlone in terrnostato a 3'7C per 2J are, sl precede alla lett ura. Dalomento che la cresctta batterlca e sveiata dall'lntorbidamen.t.odeleZZQ coltu ra!e, sl consldera min ima concentraztone Inlbenta 0 MIGpiu bassa concentrazlona dl antfblotloojaresente nella provetta InIi la crescita batsertoa non eupprezsablte,Le prove ill senslbiHta a'i chernieantlnlcblcl, in mezzo solido, con-

ntcno diappr-~ziare centemprrraneamerite J'atHvita dl pill mclecole;j riguardi eli un ceppo batterico, Le molecole dei ehernioantiblotlcilila cunteuute, in quantlta rleterrnlnare, incompresse tii carta bibula.IllLilspemabile st aridardizzare questa quantlta in maniera tale da

pi odu r re "I n viLro" concentrasion I di anubtotleo pangonabili a quelle'Ie 51 ragg iungono netl'organisrnc urnano in seg uito alla somminlst.ra-eme di dosi terapeutiche. Il rnetudc di d\Uusione-in agar si esegue, in-orporands in un me2


famiglie di aritlblotlc! sana prtve di aUiyitn. su a lcune specie ba,tLed-cne. Occorre pertanto Q'p'era1:e una. scelta che tenga coute sra della' for.mula chlrnicache delle spettro d'a_zione degli antibiotic].

~,.~' .

In:duginisu (11atericiLi lJI6!ogini,__ . n ..._ ._ ,. til< :a ' !W i " -Escrea io . L'esarne viene praticabo su camplonl raccol tl prelarlbll-me;re at mEfttino in piastre di Petri. E'conslgllabile invitare 11pazienle

a sciacquarsi la bocca ed espettorare direttamente nel recipiente rer-nlto dal laboratorlo, ande .ndurre al masslmo Ia flora commensale. Igenni pll\ Irequentementa riseontrabttt nelle infezioni respiratorta son 0:Stafilococchi, StrepJococchi, Dip!'.:lC0C~USpneurnonlae, Neisserie, Corlne-batterl, Ente rooa t t e r l , Pseudomonas sPP", Emo{Ili e Miceti.

Le indag;ini battenologtche dell'escreato devono preverlere: un eSJ-me rnaerosceplco, till esarne mic-ros..m p i _ G ; o dlw.~to ed tin 'esarne coll.ura l e .All'esarne rnaeroscoplco viene rilevato I'aspetto pu rujentc, muco-puru-lent.o, rnucoso Iluido 0 sallvare, emorrolco etc:

L'esarne mlcroscoplce previ'R: colorastone eli. Gram, ecnsente una: visions globale tjelle Iorrne bat.Le riche presentled una cat~)-og)l.;done" ' I delle ~te~se. Ira .guelle g1'Rrti-p6~nivee quelle g ram-nega tive. nonehe'. ,- una distinaicne In cocch: ebaClllL

Per l'esarna colturale e opportune ut iliaza re quali rnezel: I'Agar. i) Jylac Cohkey ed ilsabourauca1ma venga richiesto l'esarne cplturale per la ricerea del B. di

IKochl sl eftettua uri asarne batterfoscopleo: previa coloraaione di Ziehl, I Naelsen eel una semina sd Petragrrani a IUTM, natu\a)~enLe dOPQ ar-rfcchimento delcnaterfale prevlo trat~amento c-on NaOH_ Sa l'esarnsI batteriescepico rnette ,inevidenza bacllll 'acidoalcogl resistsntt. pucessere Latta diagrrosl i'lL tubercclosl polmonare, data -che in questo di-stretto I'unlco bacill~ acldo-alcnol resisterite e 11 M. tuberculosis.

Essuda:t Q f ari ngtj. to:nsilloTe. Siin vi ta II pasle n te ad aptl re Is bcccae con l'aiuto c ) i un acbassalingua, a mezzo di un t ampone sterite sipreleva I'essudato presents sulla supertlcie Iaringo-tonsulare 0 sullamucosa nasale. r germl pill Irequeneernenbe presenti scno: Sta[jIOcci1i,Streptococchi, nipIOcQc,::uspneurnoru~e, EUlOfili, Corinebatterl, !'I~js-serie, EnterdbaU,eri, Pseudcmonas spp. 'e Miceti.Per .l'esame colturs le si lnsemenza SU Agar sangue, 'Mac Conkeye sabouraud, .

-Secre-Z,ioni, cbngiunt,ivali. L',eS5udato s! raccog lie con barnpane ste-.~,_",.. YW:"_"'" 'h,.~. _'De' ~- .rile.. 8i possono rtsconbrare mlcrorganlsrm, appartene ntl a specie e. ge-


neri dlversi: -Stafi1ococchi, Streptocotchi, DipLoco~c_us pneumcniasErnofili. Corlnebatterl, N.eisserie, Emolil\.NLaraxelle, EnterobattarlPseudomonas spp, e Micl:;tL La, semina del materlale prelevato si erreetua su Agar sangue, .Mac Conkey e Sabcura ud,~;~~;2;?:r , :~. . L l ! . F ~ ~ _ ; . l i . . , _ ~ Y M J n . ' i l j . : . < > e o nun tarnpone sterile si raccogliencll'uomo. 1I materia le !uoriuscente da! rneato urinarlo e nella donna,, j j : secrete presente nel vestibolo vaginate. I germi pili lrequenternente,

presenti in queste seoreztenl sono: StaJiiocQcchi, St.reptecocehl, Emami,Nelsserie, Cormebatteri, .Mlcobatterl, Enterobatteri, Lattobacllll, Pseu-domonas spp. e Micet-L La semina va tatta su Agar sangue (inatmo-sfcra .E2.S.ma1eed in CO,), Mat: Conkey e Sabouraud .

. ' ! U r i n e ) Generalmeni.e per 1'1 raccolta sterile delle urine, e consi-glia~tle"~r1 catererisrno: questa . ope r az t one non e Indispensabile, .datoche SI ottengono gil stess! risultati raccogliendo it carnpione dl urinein boUiglia sterile, dopo aver lavato accurat.amente igenttalL Il cam-ploneva inviato at laboratorio, il pili presto possibile, in case contra rio,puo essere conservato in [ri:gori-lero rna cia solo per qualcne ora.

Cornunemen t e nelle urine si possono rlscontrare: StafilococchLStrep~ococehi, Enterobatteri, Pseudomonas spp. e I\'fjce'U.

L'ifffezionc delle vic urtna ne puc esse rs monospectflca d mista:nolle infez loni mlste si e spesso in dubbin nell'attribuJre ad un gerrneprutrosto clie ad UI1 altro la respcnsabi lita dell!infezionestessa, L'ur i-ua viene inseruensata su AJar sangue, Mac Conkey e Sabouraud: csn-ternporanearnente si determina Ia corrcentraaiene di germ! per ml. L acarrca m.croblca e deterrnlnata con la semina dl u rlna dilu!~a 1/100 el/lO.OOU in 'piastre (0,1 rill per ptast ra) ; siaggiu-nge poi TSA a lla tern-perat.ura di 50"e, si a'g'ila, sl lascla solidlficare e si incuba a :n'c per2'1 ore. n nurnero delle colonie. evenbualmerrte svi"luppatesi, si rnolt i-plica per i1 tattore dllulztorie e si rtporta at milllli~ro.

Si consldeta non significativo un nume~o dt _germl fino 8 . 10_000 rn l ;sospettc un numero r r a m . o o o e lOO,OOO ml; slgnllleativo un numerosuperiore a 100.000 ml.. ~ / - . . . . - .\[e~9 Vengono raccatt.e, appena ernesse, in recjpient! prefe-r lb l lme-f l-Le stwlt 0 pralevate mediante tarnpone rettals.

La fed contengono norrnalmente una anbondante flora oatterica-che 5l trcva in state di parassitfsmo 0 e li simbiosi coo J'Qrganismo uma-no, Per 10 pill, questa flora battep"ca ~ rappressntata da: E. Cbli, Protel, Klebsielk, Enterobatteri, Citrgbacter. Enterococchi, StaWococchi,vanno riccrdatl: Salrnonelle, Shlgelle, Stafliococchi patogeni e Vib_riocholerae,


! I': t v l [ I L'l~dag~ne batLe~iDlc.gka del.le teel viene :~ridotta, sla per chlarlre.j l'etfblogla dl deterrmnati episodi gastroenteric! acut'i (dlsse nteria be-" r r I . .'ti!la,i", .c?lera, tossin!ez~Oni .a,li~elltari, .enteritl tubercclart etc.). siaper lndlviduare porta tort sam e l l qa.lmoneJle, StafJIocOGchi patdgeni etc.

'Gola in caso i i i enterttt del lattante posscno assumere up sl-gnlflcato patclog ico alcunl ce:ppi d1 R coli, ttplzzabt]! slerologicarnents;

Ferta:nto, la condctta batterieloglea varia a . seconds delle richlestecolturali speciriche i'nolt rate. L'esarne co t tu ra l e pill frequentemente rl-chiesto e la ricerca di Salrncnelle e ShigeUe, Essa s! essgue insemen-zando nri'ansata di feci 0 1 0 stesso t ampone re t ta le , sla in' ter rant selet-trvi solidi qua li WilsonBIB-ir e AgarSS, sia in terrenl liquldi dl arricchlrnento quall II erode Selenite ed il MullerKauffmann.

". .'~7~1t-Y~le.l1 preli~vQ del sa~gl,le e senza dllbbioqu~ll~ r.he ricntedema-g:gJ(TI ' precauzrom contro l 'tnqu lna rnento . essendo )1 sangue un ot-

timo mezzo colturale. Esse puo essere prelevato a con elelle venule chepermettcno il passag igo dlret.to del sangue da lla vena ad una provettaste rile .0' sernpllcemente con una slringa sterile. Ne i casi al seLtkemia,la baUeriernia e disotit o modestisslma per ave re maggioreprbbabllitRche l'esarne battertolog ico d i a estto posl tivo e necessarro Incubare unaquantiLa re lal.Ivamente ahbonda nte di .sarrgue, percio non 51 puo- usareil metadqdeJi'jsolamenEo su terrene solido 0 per 10 rne no non 5i pUOricorrere solo adesse, Gene ra lrnente, it sarigue si lnsemenza iri te rrenlliql)idi di arr iccbrmerrto, universall, quall, .Castanetia, brodo Trip-L\cnseed incuba to in aerobics! e..d anaeroblosi. II sangue insernenzatc va. te-nu to in terrnostato per 14 : g l om i eseguerido da esse delle subculture5 ' . 1 lerren! solidi uruversalfa partire dalle. 2':14B.ore.

J g e r r n l piG f r e q u e n t e m e n t e r i s c o n t r a b i l i s o n o : B r u c e l l e , Slaf!lo-cocchi, St reptocncchl ed Ent.erobaUeri.

J J I J - W c t , 9 . . . .S f > J ! l J . C ? . ! p ; ,! )- H ! :! ; C ; ." ! . " , ! ,E , '! -' ;P . J . ; i. ( . / f _ ,_ r j _ i y e L S . n Iiquido cetalorachi-dlano vlerie prele vato medL,?- t l te puntura lornbar ejrlta 0 bassa, a Cal'! Iapuntura vent rtcnla.re, dopo accurata disinfeiicme della cute can t incurao i iodio. Esso deve essere Jnsernenaato trnmedial.amente poichs la 'pre-senza c ii be tte rl rnclto Jab!!!.' cgme Ia Neisseria [fJeRingi~id[s, pobrebbef.ssere non svelata. 81 dave tenere conto, lnottre, se al paz lEt l1 l .e sanastat! sornmlntstrati Iarrnacl a ntirnlcroblcl.

La sierosita diverse sl possono prelevara dalle cavltaaierose (peri-ltoneo! pleura, ar tlcolaaion l etc.) in modo analogo al liquido cef'alorachi-:U1anD. E' sernpre. conslg liabile, anchs per II jiquidocelal.orac.hidJano"

lerna: la maggior quantlta posslbile .polchs essendo queste infe-


zioni spesso discontinue, Ie probabtlit.a di otl enere un risultato postt.Ivocon l'esame colturale, aurnentano,

SJa II Ilquldo cefalorachidlano che Ie sieroslta diverse vanno inse-rnenza te in L erren i aI a r r tccrm nen to e te rren l sb l idl unlversalt, e~ lncu-bate in a ero blo sl e,d anaerebiosi. I g e rm l piu f requenbemente risccntratiin qucstt liquid] ~one: SLafilococchl, Strept.ococchi; Ne isser le, Emotill,Enterobstter! Clostridi, MlcoQatteri, Micetl,_ ..... ..~."'.....i~;iip"lo.rol. . I, . .. . ,, ~~~ . .. . .RWZi~ I )~&. r2JEJ i j , ~h~ ,_~~:r."""' iLa DJ~~j~t.dl reagln~' con g l! iln~igenil che,I le [ h ! ._ r lD Q . . : : . .I;!~Y 9 .c .a tJU 1 l :_ f~ I~ a ziQ ..l" ! ! -yien ~ u ti l iz za ~ a In di .a g no st ica p e r r i -s~!ir~.,a l J ; eL io log : i a .di. aJt~llQDj che r lca no sc.o no com e agentLcausali' i[lj~IQr[anlsmL

La . speclI ic i t~e ' 1 8 . sen! !~ :~ lle rea i l~ j_ an~ iK ene,anJioCl.! .Po ccn-~ e .n tQno u n a .~ a l u tM iO !i e'. !;, il l. qua_ntitaUva ehY~~!l!i~liTI'l .~ I I ' an~ :co r-p .o stess.o . .81 Pr?~ ano conside ra re pertnn to Je!tlo.nl lqudl fatly~, e[llr~t~~iC " r im e , . j'danno i [ l( d r . 1 1 1 ! i . z i l :: l ! 'f ! ' ' '; ! l ' I t '~ * " ' ' la : ' '' '' t H ! t : S s e d.l ~ar: tenenza(~ I'ng en te pa to .g _ e_ :ro , I _ ,;i>eao n : {Jf to la ziO lfe c1eogli anl!Cospl) r~frmJBe5t-mettohQ.JlL .. :?~ ).l ln ij l :~ lldam , e to ",de[[lmk~IGne.

Le diverse reazloni sierologtch '!!ionorra ,]ort'l"per la naturade Il 'a n t ico rp o, delil!i.ntigene~ e del subssra to SLI eu I le fu nzio n I an tig e .r!1S0110 Jocalizeate.

_ B.~~~. La reaz\Qne ira un 'antjg~Desojubile el '?fHlfti ij(;l sjredlf icIQ , da ,{uogo ' a l reno rneno , dellp.'precipitazione. -

La reaalcnesl svo lg e in.m : l:1 Jl"ia ,s.i:ch la,~primar"l!letitrolita""imHpe.n()len-. . . . . .~ ~ . -tc, perm e t~ e H i r lO rm a zjo ne dl.c! iJm p Jessl , .p r lm ~ ri l 'd~ " ssco nda r ~iettn)LJuadlpendente, ! " . oml :uOe , . aUa f"01 'm_az lonf dl c0mpJ!lsLs~1Jl!ill.. II rapper-Lo ottlmale tra I'antigene ~ l'anttcorpc e indicate da l la p rec ip ila 1 ;lo ne.

La.reazldne,~aJ prectpi tazlone vie9s ."sI ru t ta ta per lU,~;:aagio dell~~ ~ t: lL ~ ! i! .J~ ~ ne,""U li l izzando g ,l i an~t1corpjldel sled im m ull l d i _ l m -pj~.ggJ~eUiliQ:jt In . gene t ! : ! ,Belie. :jdeWJ.1l.c.a~jQne..dl.'iln1lg!1!.L In Mtl-clicina legale (macchie e li sangue, sperms. etc.) 0 in Medicina armona-ria (ideo ~j(ica1.ione deg\i a ntig en I el i spacte neg li insaccatl l"

La reazj,q,ne" j,. v a esegu i re , s i ! l . _Ln_:mgz. .Z_


f_!az ione pu 6 eSS 'E ! fe e segu J t a~p1e sco l an ( i ( L1L_ , ~ _ l ~ ,Q_ e l',a .,!1 tJg ~ lJe in U J1 lpnl,velta; In questo caso ii:l?r.eciEitata,li evIdenziera al Londo della oro,,!(,~tba~,Gene-ralmence questa fte,aziph.e viene 1 : I _ ~ , i l l z z a t a p,er 11 d6$agg.~~)! !n~l :Ts5i f te battericb,~i_j Una modif ieazlone di questo metoda e.data dalla terrnopreclplta

; . zlnne d'j Ascoll per larhagnost del carbonchlc,

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I ! - - ,~ : . i , l :'I

i_4'immunOJU;Waitg~iRtMk1~ una delle pi l i cornunl appllcaaicnEff i l j t t "t ;d~j6Jie di preciplbaeicne in mezzo scildo.5i esegue disponendo l'antigene e l'anticorpc in poz,zetti ssparati

sea vatl nell 'agar sclldirlca to i.riU na plastra d.1 Pe bri. Per il p ri n:c1pi(della di'ft"usione, nella spessore dell'ag ar c.iflunderau no Sill l';t_nti'iremche l'antjcorpo ed allerquando avranno raggtunto un rapporto altl.male 5i veriflchera un preclpitato che 'sara. evtderrsiato cia, una linea c l Jopacamento nello spesscre del gel,

Una appllcazlone di nctevole interesse in campo mitrbui~IICJjritD ecostttulta dalla prova di tosslnogenest in vitro appticata ai corineoa]-Leri dif te rlc i

1 - ' I~ , ~~l~.f 'Hj' 1 H l ..iII '

\Di va!id8 aluta risu Ita la cletcrrriinazionc C J uantltatlva tiella 1~ sis-riche secorrdo II ruetedo ell Manc ini che st rul.ta 1;\ l icnlca della lrnrnuno-,Iiflusione radia le scm pI Ice.

Un antlg ene proteico in scluzlorre !s;c,ro In csame) p()~;L'_' r r Utipezzel.to scavat.o in unsot.t.ile strato tli agirg'cl, in C(lj 1 : \J"qi Inrmcmun-tc dlstr ibui to 11rj antlslero preclp! t an te specl fico ( 1111 tJ.JgC; oli,ivl \ '>' lcnvlasciatc dlfloridere radralrnente.

L'anligene e valuta to qua r r t l t a t l vamen te In base alla qlianLitil,(I,ant Icorpo upeci lleo eon cui sI cornbina in proporzioni equivalent] Jor-mando visl bil men te un alone dl prl!cipi.tazi.one attorno al poizettu.Questa qua ntj ta e deterrninata indirettarnente da ll'arca de l l'a lene for-mates! quando cessa Is. dlftusione, ctoe quando tutto l'aru.igene presente si e legato alt'anticorpo,

, f lea:ziDne. i i i - rlocG!!La2Ji!n~. _QL\es ta reazlone e ea_!"atterjzzata r l l ! L L E l 1 -~qe'"'i' eGrn-~W.Uec6r1dari sl, fonnano ;;,10 }1~lMt~9~~ ,di. eguiyahmza ..

Apptlcazion: pra tiche dl tale indagtrre posseno esse re considerateI .,le d~~~~,JeazTotli utilizzabe per svelare l'inf ezforte luetlca. Ricordla-mo, 4 , 3 . .VDR:~ (,Veheral Diseases Researches Laboratory); 1a reazlone ill~ ~ ' H r H l _ I ~ " " c ~ r~ a \ L~ : IW : ~>~CD:titll1tO ,da u n ,.~ str at to alcO~j~o dl euc re djbue; WMlmlcke (:I\ffiR t rY 'che come Ill. precedente ubllizza quale an-tigene un estrat.to alcelico 'dlcuore di bue, rna che non necesstta disiero. scomp;em~'ntato e !~f ."~Rl inCu1'l'an~jgene ecostttuitc da Cardio-


~z,ione~~l.1'H~.!i!ne. In questa reazlcne l'@tigene utilizZjl,t~ e (Jo tp .uscoJato . E' u na reazlo ne ~ ettr6 1 jta -dju e .nd~ o le e krro.Q"IQ~Oden~ e-, " ,. . '

.S ! patla-di ug_g lL l t i n az i ooe Q 2 s W 8 . a . , q _ l : lu n d o gLL .Mt i iM iP}2P COrp]]scola,ti venJ~.! l0 .~sorbit! n:Tt!fidl1l:1mente'su ueUgle OSl~~lUlJii.tlice 0~ULQ.~lltQlQ.:l.~YJt!g9fl.Q:.,q1it il ; ! U ! l f u e l l . t. a . t, .e _ j : ; .Q O _ U . .. m r o , .Nel}~! . ' ,~I["gnb,5t lqa 'EILhlCa questa reaz~OlHe,!;:a sia ,perjl: tIQlha~p.lmt lttrJ ~ Iii 'cla:ssi.ftcaz' ''".. '. '.' " f(~rjodja. 0-

-~[ . sia __~"':,.!ft'k~h;adl antico' 1,5 ecHici net siet ,d c l e , " " ) , z l e r l t . : e '~je_i6 cIi~ , I'--"-~mrthriodiagriosi si pun eseguire sla in provetta che su vetrtncNcl prlrno case a diluizioni a raddoppio del srero agg'llJ lrra nte no to al;]ggiunge UI"1ll goccia della stipite batterico ottenuto da una coltura di: t < l ore e sospeso jn soluzione fislolcg lca. La lettura st esegue dopa ~.ju re di lncubazione a 31'C,

La prove su vetrino si eseg ue clrnentando una sospensicne batteriescon una gcccla del sicro rete L'i1girl U t rnaz tone 1 ; ben vis: bile, dopa ag;it.azione per qualchc mlnuto,


' "t"-neralrnenLc la rea'done si pO'siUvizza a l So gicrnn el i mala:lU;,La !~ietoaggilitinazione p8f LisLe ria, essendo: questo rnlcrorganlsmn

' p rcNVI! t to ' rn nnt$l'i'i : m \ T ' i " a ~ i C 1 (0 ) e'-ciJ iRri (H), deve anch'essansscrcesogI.Hra~epanttamente per i due ant ig enl

Perl-anto dilulzicnl scalar: delsierosi cimentano, sepal t l L amen lE :con una so spens+one di :,cILigefl!' somatlco e cili8l'e_ L e pruveLL, C!t1 i1 lenenU I'a ntlge.ne sornaucr verigcno posts In nag nornnrta a 52'C per ~ -wore e pol in Irigo per:;: Ol-e , que'lle contene nu l'a nt.ig ene ctliare perrnagnno 2 ore In bagncrna.ria a 5052'C e 15 rni nu t i a ternpe r aturu nrn-blente, Sana constderatl positivi per I'antrg e ne sornatrco u to l i d . i 1:11;0,per 'quello ciHare 1 :320.

L'agglutinazlone passlva puc essere esegulta ind'ii'fer,enLemecrte fa-cerido atlso rbl re un antigerie solubile a parttcel!e di carbone, di I,tl~k('dipoJlstirolo o ,S, g!QbuU rossl. Quest'ar,Wido tecrnco perrnet.te I'CSEC,l-zLorje o l una reaztone dragnostlca cll aggluLi!H1Zione anclre COil a nugeru1 l - p 1 1 'ccrpusco la t l .r e n! slerologiche :uti l i :z'Z2te in dtag nosj.ica sene: la rea-

la cui appl i':i:l,zione pi}ltluo

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