MICROSCOPIO OPTICO Estudio Personalizado

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  • 8/18/2019 MICROSCOPIO OPTICO Estudio Personalizado

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    FUNCIONES DELMICROSCOPIO ÓPTICO

    FUNCIONES DELMICROSCOPIO ÓPTICO

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     I N T R O D U C C I Ó N

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    HISTORIA DEL MICROSCOPIO.HISTORIA DEL MICROSCOPIO.

    Durante el siglo XVIII continuó elprogreso y se lograron objetivosacromáticos por asociación devidrios flinty crown, obtenidos en 17! por "# $#"all y mejorados por %o&n Dollond# Deesta 'poca son los estudios efectuadospor Isaac (ewton y )eon&ard *uler#

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    HISTORIA DEL MICROSCOPIO.HISTORIA DEL MICROSCOPIO.

    Durante el siglo XIX el microscopio tuvodiversos adelantos mecánicos +ueaumentaron su estabilidad y su facilidadde uso, aun+ue no se desarrollaron por elmomento mejoras ópticas# )as mejoras

    más importantes de la óptica surgieronen 177, cuando *rnst -bbe publicó suteor.a del microscopio y, por encargo de/arl 0eiss, mejoró la microscop.a de

    inmersión sustituyendo el agua por aceitede cedro, lo +ue permite obteneraumentos de !!!#

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    HISTORIA DEL MICROSCOPIOHISTORIA DEL MICROSCOPIO

    *l microscopio electrónico de transmisión23*$4 fue el primer tipo de microscopioelectrónico desarrollado# 5tili6a un &a6de electrones en lugar de lu6 paraenfocar la muestra consiguiendo

    aumentos de 1!!#!!!X# ue desarrolladopor $a8 9noll y *rnst :us;a en -lemaniaen 1osteriormente, en 1

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     M I C R O S C O P I O

     Ó P T I C O

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    ¿Qué es el microscoio !"ico#¿Qué es el microscoio !"ico#5n microscopio óptico es un microscopio basado

    en lentes ópticos# 3ambi'n se le conocecomo microscopio de lu6 o microscopio de campoclaro# *l desarrollo de este aparato sueleasociarse con los trabajos de -nton van

    )eeuwen&oe;# )os microscopios de )eeuwen&oe;constaban de una @nica lente pe+ueAa y conve8a,montada sobre una planc&a, con un mecanismopara sujetar el material +ue se iba a e8aminar 2la

    muestra o esp'cimen4# *ste uso de una @nicalente conve8a se conoce como microscopiosimple, en el +ue se incluye la lupa, entre otrosaparatos ópticos#

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    Le$"es %el microscoio !"icoLe$"es %el microscoio !"ico)*(3*? B/5)-:*?C )as lentes son

    objetos transparentes 2normalmentede vidrio4, limitados por dos superficies,de las +ue al menos una es curva# ?irvenpara &acer la observación y son los por

    los cuales &ay +ue mirar los objetos,normalmente poseen un aumento de1!X# (o deben tocarse con los dedos olimpiarse, para esto el encargado del

    e+uipo deberá &acerlo tomando loscuidados necesarios para no rayarlos omanc&arlos#

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    Tios %e Le$"es.Tios %e Le$"es.

    )os lentes se usan en anteojos, y combinados los lentescon espejos se utili6an en telescopios y microscopios#

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    Co$ce"os %el microscoio !"icoCo$ce"os %el microscoio !"icoDI?3-(/I- B/-)C )a distancia focal o longitud focal de una

    lente es la distancia entre el centro óptico de la lente o planonodal posterior y el foco 2o punto focal4 cuando enfocamos alinfinito# )a inversa de la distancia focal de una lente esla potencia#

    )5>-C )a lupa es un instrumento óptico +ue consta deuna lente convergente de corta distancia focal, +ue desv.a la lu6incidente de modo +ue se forma una imagen virtual ampliada delobjeto por detrás de una#

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    Co$ce"os %el microscoio !"icoCo$ce"os %el microscoio !"icoB3(C *n f.sica moderna, es la part.cula

    elemental responsable de las manifestaciones cuánticas delfenómeno electromagn'tico# *s la part.cula portadora de todaslas formas de radiación electromagn'tica, incluyendo a los rayosgamma, los rayos X, la lu6 ultravioleta, la lu6 visible 2espectro

    electromagn'tico4, la lu6 infrarroja, las microondas, y las ondasde radio#

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    MICROSCOPIO ÓPTICOC 5n microscoio !"ico es unmicroscopio basado en lentes ópticos# 3ambi'n se le conocecomo microscoio %e lu&, 2+ue utili6a lu6 o EfotonesE4o microscoio %e c'mo cl'ro# *l desarrollo de este aparato suele

    asociarse con los trabajos de -nton van )eeuwen&oe;# )osmicroscopios de )eeuwen&oe; constaban de una @nica lentepe+ueAa y conve8a, montada sobre una planc&a, con un mecanismopara sujetar el material +ue se iba a e8aminar 2la muestra oesp'cimen4# *ste uso de una @nica lente conve8a se conoce como

    microscopio simple, en el +ue se incluye la lupa, entre otros aparatosópticos

    http://es.wikipedia.org/wiki/Microscopiohttp://es.wikipedia.org/wiki/Lentehttp://es.wikipedia.org/wiki/%C3%93pticohttp://es.wikipedia.org/wiki/Fotoneshttp://es.wikipedia.org/wiki/Anton_van_Leeuwenhoekhttp://es.wikipedia.org/wiki/Anton_van_Leeuwenhoekhttp://es.wikipedia.org/wiki/Convexahttp://es.wikipedia.org/wiki/Microscopio_simplehttp://es.wikipedia.org/wiki/Lupahttp://es.wikipedia.org/wiki/Lupahttp://es.wikipedia.org/wiki/Microscopio_simplehttp://es.wikipedia.org/wiki/Convexahttp://es.wikipedia.org/wiki/Anton_van_Leeuwenhoekhttp://es.wikipedia.org/wiki/Anton_van_Leeuwenhoekhttp://es.wikipedia.org/wiki/Fotoneshttp://es.wikipedia.org/wiki/%C3%93pticohttp://es.wikipedia.org/wiki/Lentehttp://es.wikipedia.org/wiki/Microscopio

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    Lentes Oculares: sirven para hacer la observación y son los por los cuales hay que mirar losobjetos, normalmente poseen un aumento de 10X. No deben tocarse

    con los dedos o limpiarse, para esto el encargado del equipo deberá hacerlo tomando los cuidadosnecesarios para no rayarlos o mancharlos.

    n los microscopios binoculares ! dos oculares " hay un mecanismo que permite separarlos paraajustarlos a la separaciónde los ojos de cada usuario.#ara observar por los lentes oculares se deberá tener ambos ojos abiertos, aunque el microscopiosea monocular ! un solo ocular ".

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    El "u(o !"ico tiene como funciónsoportar los oculares#*l tubo óptico se une a la C')' %ePrism's, en la cual &ay un rism' +uienes el +ue se encarga de desviar la imagen

    +ue se recibe desde el lente objetivo &aciael lente ocular formando un ángulo de 1!grados#

    *sta es la ra6ón por la cual no se debe arrastrar o golpear el microscopio a la &ora demovili6arlo, pues estos prismas de pueden mover se su posición, la cual es la +uepermite el enfo+ue# Bbs'rvese +ue el "or$illo %e l' c')' %e rism's se puedeaflojar y con esto se consigue +ue la misma se pueda girar, con la finalidad depermitir a otras personas observar sin mover el microscopio# *l tornillo se debe aflojarsuavemente, nunca &ay +ue girarlo demasiado pues se puede soltar, basta girarlo un

    cuarto de vuelta#?iempre es importante +ue este tornillo +uede ajustado cada ve6 +ue se mueve lacaja de prismas, pues la misma se puede caer# Igualmente, luego de utili6arlo &ay+ue cerciorarse de +ue el mismo +uede ajustado, para evitar +ue esta parte delmicroscopio se mueva y se produ6ca un accidente#

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    *l (r'&o del microscopio, sirve paratransportarlo y soportar algunas pie6as como

    el "or$illo m'cromé"rico 2para enfo+ue grueso4y el "or$illo micromé"rico 2para enfo+ue deprecisión4#L' l'"i$' es una placa metálica con unaperforación central sobre ella se coloca lapreparación +ue se va a observar#Feneralmente posee un par de i$&'s parasostener la lámina y un sistema mecánicodenominado c'rro# *l /arro a veces posee dosescalas +ue permiten fijar una determinadaestructura en la preparación observada, como

    se ve en la fotograf.a anterior, esto se logra pormedio de la utili6ación de coordenadas 2 comoen un mapa 4# *l /arro, tambi'n posee dos3ornillos +ue se utili6an para mover lapreparación de derec&a a i6+uierda y deadelante &acia atrás 2 *ste, Beste, (orte, ?ur 4#

    2Tor$illos %el C'rro 4

    *l !l t l t i f i d l

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    *l re*!l*er  se encuentra en la parte inferior deltubo óptico y en el se encuentran los lentesobjetivos, en los microscopios ópticos puede&aber tres o cuatro de estos lentes objetivos#*stos lentes presentan diferente aumento

    Le$"e +')o Po%er, Feneralmente XLe$"e Me%i'$o Po%er , Feneralmente 1!XLe$"e Al"o Po%er, Feneralmente !XLe$"e I$mersi!$ e$ 'cei"e, 1!!X

    El co$%e$s'%or, se encuentra debajo de laplatina y su función es la de soportar las lentes+ue recogen los rayos luminosos#

    )a base, sirve para darle estabilidad alinstrumento# *n ella generalmente se encuentranubicadas la -ue$"e %e Lu& 2 generalmente unsistema de iluminación de GV con una bombilla&alógena o de lu6 de criptón 4

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    A)us"es %el e$-oue/ >ara enfocar la lámina o lapreparación e8isten dos perillas o tornillos,2M'cromé"rico 0 Micromé"rico 4 las cualesreali6an lo mismo básicamente# su función es&acer subir la platina &asta alcan6ar la distanciade trabajo o distancia de enfo+ue, la diferencia esla magnitud en la +ue ambas funcionan#

    *l m'cromé"rico se utili6a e8clusivamente con lalente de bajo poder, pues mueve en forma

    apreciable la platina, mientras +ue elMicromé"rico se utili6a en cual+uieramplificación# 

    Le$"e ocul'r C *sta se compone de doslentes# )a lente inferior recoge la imagendel objetivo, la reduce y la reforma dentrodel ocular a nivel del limitador del campovisual# )a lente superior forma una imagenvirtual aumentada para ser vista# *laumento de los oculares oscilanormalmente entre XH y X1H 21!X4#

    L " () "i l l t i t t d l

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    Le$"e o()e"i*o es el lente mas importante delmicroscopio la +ue controla la amplificaciónposible y la resolución de la imagen# 3odos losobjetivos se acoplan a los microscopios medianteroscas estándar y pueden ser cambiadas de un

    microscopio a otro independientemente de sumarca#

    )os aumentos mas utili6ados sonC HX,1!X,!X,!X y 1!!X# ?i e8aminamos un objetivoobservamos +ue &ay cifras grabadas por ejemploC !X !,7!C1G! !,17 en dondeC !Xes el aumento del objetivo y !,7! es la abertura num'rica, es decir la medida del

    tamaAo del cono de lu6 +ue el objetivo puede admitir, 1G! es la longitud en mm deltubo ocular +ue debe ser utili6ado con ese objetivo, !,17 es el espesor del cubreobjeto2en mm4 +ue debe utili6arse con ese objetivo#

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    *l co$%e$s'%or  es la lente +ue ilumina la lente

    del objetivo, su abertura num'rica debe sersuficientemente alta para suministrar el cono delu6 re+uerido#*n la parte inferior del condensador &ay unaabertura regulable, o diafragma controlado por unapalanca lateral#

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    )#J# $anuel:am.re6 >#/urso de $icrobiolog.a Feneral

    MICRO+IOLO12AMICRO+IOLO12AEs"ruc"ur' %e u$ microscoio

    5n microscopio se divide en dos partes, el soporte y el sistema óptico#

    I. Soor"e# *n los modelos modernos el soporte es una pie6a fija en la +ue@nicamente la platina y el condensador tienen un cierto movimiento# )aspartes principales sonC

    a4 )a ('se, +ue normalmente alberga la fuente de iluminación 2lámparaincandescente &alógena4# *n determinados modelos la base incorporaademás un sistema portafiltros con varios -il"ros y un %i'-r'3m' de campo

    luminoso#b4 *l (r'&o soporta todo el sistema óptico, el cabe6al portaoculares

    2mono o binocular4 y el revólver portaobjetivos# *n el bra6o se disponetambi'n el mecanismo de anclaje de la platina dotado del correspondientesistema de enfocado de la preparación#

    c4 )a l'"i$' es la pie6a donde se coloca la preparación microscópica

    para su observación# >resenta un orificio central por donde pasa la lu6 y estáe+uipada con un sistema de fijación de la preparación y de despla6amientoen cru6, lo +ue permite posicionar cómodamente la 6ona de la preparación+ue &ay +ue observar# *n su parte inferior se dispone el sistema de fijacióndel condensador#

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    MICRO+IOLO12AMICRO+IOLO12AEs"ruc"ur' %e u$ microscoio

    d4 *l m'cromé"rico y el micromé"rico permiten enfocar la preparación# *l

    primero se emplea para un enfo+ue rápido cuando se trabaja con el objetivo demenor aumento 281!4, mientras +ue el microm'trico permite afinar el enfo+uecuando se utili6an los objetivos de mayor aumento 28!, 81!!4#

    II# Sis"em' !"ico# *l ?istema óptico está formado por un cuerpo tubulardonde se instalan las lentesC los oculares en un e8tremo y los objetivos en el

    e8tremo opuesto# 3anto oculares como objetivos no son lentes simples, sinoconjuntos +ue funcionan como una @nica lente +ue aumenta considerablementela calidad de la imagen# 5n microscopio convencional posee tres sistemas delentesC

    a4 *l co$%e$s'%or , colocado entre la fuente de lu6 y la preparación#/oncentra los rayos de lu6 en un punto o foco, +ue, para una observaciónóptima, debe &acerse coincidir con el plano de la muestra# Incorpora tambi'n undiafragma tipo iris +ue permite ajustar la cantidad de lu6 +ue llega a lapreparación y act@a de un modo muy efica6 sobre el contrastado de lapreparación 2mayores aumentos re+uieren más iluminación, es decir, mayorapertura del diafragma4#

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    b4 )os o()e"i*os proporcionan una imagen ampliada de proyección real e

    invertida +ue se forma en el plano focal anterior del ocular# )os objetivos estánmontados sobre un dispositivo portaobjetos giratorio de re*!l*er # *nbacteriolog.a se &ace uso frecuentemente del objetivo de inmersión2normalmente de 1!! aumentos4# *ste objetivo debe ser empleado incluyendoentre 'l y la preparación 'cei"e %e i$mersi!$ para microscop.a#

    c4 *l ocul'r aumenta a modo de lupa la imagen real proyectada por elobjetivo y permite +ue sea percibida por el ojo# )leva grabado el n@mero deaumentos#

    >ara evitar los defectos ópticos de tipo aberración cromática y esf'ricain&erentes a las lentes @nicas, tanto el ocular como los objetivos están formadospor sistemas o conjuntos de lentes cuyo diseAo reduce al má8imo estosdefectos#

    )a disposición correcta del condensador es de gran importancia a la &orade obtener una imagen clara y contrastada# /uando se emplean grandesaumentos, es fundamental conseguir una iluminación óptimaK en este caso esnecesario reali6ar un centrado tanto de la fuente de la lu6 como delcondensador, además de un correcto diafragmado#

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    I$-orm'ci!$ o()e"i*os

    Lo$3i"u% %el "u(oC Distancia +ue media entre la superficie de cone8ión delobjetivo en el revolver y el e8tremo del tubo en el cual se introduce el ocular#

    N4mero %e c'moC Diámetro en nanómetros 2nm4 del campo de visión +uepuede ser observado a trav's del ocular#

    Dis"'$ci' %e "r'(')oC *s el espacio entre la lente frontal del objetivo y la

    superficie superior del cubreobjetos, cuando está enfocada la imagen de unamuestra# - mayor aumento de objetivo, menor distancia de trabajo#

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    /urso de $icrobiolog.a Feneral

    <

    MICRO+IOLO12AMICRO+IOLO12AM'$e)o %el microscoio

    1# /ompruebe +ue las lentes del ocular y los objetivos están limpias# De no ser

    as., limpiarlas con papel de fumar# ?i el objetivo estuviera muy sucio, se puede&umedecer el papel con un poco de alco&ol# (o tocar las lentes con los dedos#

    # /olo+ue la preparación sobre la pletina sujetándola con el dispositivo móvil#/ompruebe previamente +ue el objetivo de menor aumento está en posición deempleo#

    =# >ara bacteriolog.a, ilumine la preparación bajando casi totalmente elcondensador, con el diafragma abierto totalmente#

    # /olo+ue el objetivo de 1! aumentos 281!4 y enfo+ueCa# -cer+ue al má8imo la lente del objetivo a la preparación, empleando para ello elmacrom'trico# No 5'3' es"' oer'ci!$ mir'$%o or el ocul'r , pues correr.a elriesgo de EclavarE el objetivo en la preparación con el consiguiente destro6o deambos#b# ?uba el tubo lentamente con el macrom'trico observando por el ocular &asta +ue

    obtenga un enfo+ue n.tido#H# >ase al objetivo de ! aumentos 28!4# suba ligeramente el condensador# )aimagen debe de estar casi enfocadaK afine el enfo+ue con el microm'trico# ?i laimagen no está ni medianamente enfocada, es preferible volver a un enfo+ue con elobjetivo 81!

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    )#J# $anuel:am.re6 >#

    /urso de $icrobiolog.a Feneral

    =!

    MICRO+IOLO12AMICRO+IOLO12AEmleo %el o()e"i*o %e i$mersi!$

    a# Fire el revólver &acia el objetivo de inmersión dejándolo a medio camino entre'ste y el objetivo de 8!#

    b# /olo+ue una 3o"' m6$im' de aceite de inmersión sobre el punto de lu6#

    c# 3ermine de girar suavemente el revólver &asta la posición del objeto de inmersión,asegurándose de +ue 'ste no toca la preparación, pero s. la gota de aceite#

    %. E$-oue cui%'%os'me$"e co$ el micromé"rico. )a preparación deber.a estar prácticamente enfocada si se &a reali6ado un enfo+ue cuidadoso con el objetivo de8!# De no ser as., es preferible volver a enfocar de nuevo un campo distintopartiendo del objetivo de 81!# :ecuerde +ue la distancia de trabajo desde la lentefrontal del objetivo de inmersión a la preparación es m.nima, por lo +ue el riesgode accidente es a&ora má8imo#

    e# 5na ve6 +ue &aya puesto aceite de inmersión sobre la preparación, ya no puedevolver a colocar el objetivo de 8! sobre ese campo, pues correr.a el riesgo demanc&arlo de aceite#

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    )#J# $anuel:am.re6 >#

    /urso de $icrobiolog.a Feneral

    MICRO+IOLO12AMICRO+IOLO12AEmleo %el o()e"i*o %e i$mersi!$f# inali6ada la observación de una preparación y antes de retirarla de la platina, secoloca el objetivo de menor aumento girando el revólver en el sentido &acia lalupa# Nu$c' re"ir'r l' re'r'ci!$ co$ el o()e"i*o %e i$mersi!$ e$ osici!$ %eo(ser*'ci!$.

    g# :etire la preparación y limie el o()e"i*o de inmersión cuidadosamenteempleando papel de arro6# /ompruebe tambi'n +ue el objetivo de 8! estáperfectamente limpio#

    )impiar los portas con solución jabonosa# -clararlos abundantemente y dejarlosguardados en un recipiente cerrado con disolución eterLalco&ol 1C1#

    i# )impiar con rapide6 cual+uier suciedad +ue caiga en el microscopio#

     j# Fuardar el microscopio con el revolver en posición Esin objetivoE o con elobjetivo de menor aumento# :ecoger los cables el'ctricos y colocar en el armario

    seg@n las normas indicadas#

    ;# >ara despla6ar el microscopio, sujetar la columna con una mano y el pie con laotra#

    l# (o for6ar los engranajes +ue mueven la platina#78 'rci'l

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