DIAGNOSTICA AUTOIMMUNOLOGICA DI LABORATORIO:

DALLE TECNICHE MANUALI A QUELLE AUTOMATIZZATE

TOLMEZZO (UD)

12 . 12 . 2012

ANA (anticorpi antiANA (anticorpi anti--nucleo)nucleo)

su cellule su cellule HEpHEp 22

ANA in IFI

Screening al

titolo 1:40

anti-dsDNA (dosaggio quantitativo)

ENA Screen ENA Profile

EIAFIA

CLIA

DOT

LINE

TITOLARE

QUADRI FLUOROSCOPICIQUADRI FLUOROSCOPICI

ANA POSITIVIANA POSITIVI

OMOGENEO

SPECKLED

NUCLEOLARE

CENTROMERICO

QUADRI MINORI

CITOPLASMATICO

ANTI LAMINA

MND

RODS & RINGS

PATTERN OMOGENEOPATTERN OMOGENEO

TITOLARE:• TRA 1:40 e 1:160

MONITORARE IL PAZIENTE

• =/> 1:160

EFFETTUARE DOSAGGIO ENA SCREEN E DNA E IN PAZIENTE NOTO SOLO DNA

• ENA SCREEN POSITIVO

EFFETTUARE DOSAGGIO ANTICORPI ENA CON METODI DOT – LINE – ELISA.

• Ev. FARE ANUA Nucleosomi ed Istoni.

Il quadro fluoroscopico correla con: LES

Probabili positività: Anti-dsDNA, Anti Sm

PATTERN SPECKLEDPATTERN SPECKLED

fluorescenza granularefluorescenza granulare�� Si associa a numerose Si associa a numerose

specificitspecificitàà anticorpalianticorpali tra cui:tra cui:

�Anti-topoisomerasi I (Scl 70)

�Anti-SSA/Ro

�Anti-SSB/La

�Anti-Sm

�Anti-Ku

�Anti-DSF70

PATTERN NUCLEOLAREPATTERN NUCLEOLARE�� Fluorescenza Fluorescenza nucleolarenucleolare granularegranulare::

�� AntiAnti--RNARNA Polimerasi I, II e IIIPolimerasi I, II e III

�� AntiAnti--NORNOR 9090

��Fluorescenza Fluorescenza nucleolarenucleolare omogenea:omogenea:

��AntiAnti--PM/PM/SclScl

��AntiAnti--NucleolinaNucleolina

��Fluorescenza Fluorescenza nucleolarenucleolare clumpyclumpy::

��AntiAnti--FibrillarinaFibrillarina (U3 RNP)(U3 RNP)

Il quadro fluoroscopico correla con: SSc

PATTERN CENTROMERICOPATTERN CENTROMERICO

�� Anticorpi diretti Anticorpi diretti contro le proteine contro le proteine centromerichecentromeriche(CENP) soprattutto A (CENP) soprattutto A e B.e B.

�� Dosaggio CENP Dosaggio CENP –– B B in elisa o in elisa o blotblot

Correlazione con: SSc variante CREST, fenomeno di Raynaud, ecc…

PATTERN CITOPLASMATICOPATTERN CITOPLASMATICO

del del citoscheletrocitoscheletro

PATTERN CITOPLASMATICOPATTERN CITOPLASMATICO

del del citoscheletrocitoscheletro

ANTI - VIMENTINA

PATTERN CITOPLASMATICOPATTERN CITOPLASMATICO

del del citoscheletrocitoscheletro

PATTERN CITOPLASMATICOPATTERN CITOPLASMATICO

del del citoscheletrocitoscheletro

ANTI - VIMENTINA

ANTI - ACTINA

PATTERN CITOPLASMATICOPATTERN CITOPLASMATICO

del del citoscheletrocitoscheletro

PATTERN CITOPLASMATICOPATTERN CITOPLASMATICO

del del citoscheletrocitoscheletro

ANTI - VIMENTINA

ANTI - ACTINA

ANTI - CHERATINA

PATTERN CITOPLASMATICO PATTERN CITOPLASMATICO

anticorpi anti mitocondrioanticorpi anti mitocondrio

PATTERN CITOPLASMATICO PATTERN CITOPLASMATICO

granularegranularePATTERN CITOPLASMATICO PATTERN CITOPLASMATICO

anticorpi anti JO anticorpi anti JO -- 11

PATTERN CITOPLASMATICO PATTERN CITOPLASMATICO

granularegranularePATTERN CITOPLASMATICO PATTERN CITOPLASMATICO

anticorpi anti apparato del anticorpi anti apparato del golgigolgi

PATTERN CITOPLASMATICO PATTERN CITOPLASMATICO

granularegranularePATTERN CITOPLASMATICO PATTERN CITOPLASMATICO

anticorpi anti anticorpi anti rodsrods and and ringsrings

PATTERN CITOPLASMATICO PATTERN CITOPLASMATICO

granularegranularePATTERN CITOPLASMATICO PATTERN CITOPLASMATICO

granularegranulare

MITOCONDRIALE ?

RIBOSOMIALE ?

SINTETASI ?

M2

JO – 1 (Istidil-tRNA)

PL – 7 (Treonil-tRNA)

PL – 12 (Alanil-tRNA)

Proteina ribosomiale P0

ANTICORPI ANTI LAMINAANTICORPI ANTI MULTIPLE

NUCLEAR DOTS (MND)

ANTICORPI ANTI LAMINA

&

MULTIPLE NUCLEAR DOTS (MND) MULTIPLE

NUCLEAR

DOTS

(MND)

&

ANTICORPI

ANTI LAMINA

TESSUTITESSUTI

�� Mosaico doppio tessuto Mosaico doppio tessuto (rene e stomaco)(rene e stomaco)AMA AMA –– Anticorpi antiAnticorpi anti--mitocondriomitocondrio

ASMA ASMA –– Anticorpi antiAnticorpi anti--muscolatura lisciamuscolatura liscia

APCA APCA –– Anticorpi anti cellule parietali gastricheAnticorpi anti cellule parietali gastriche

�� Mosaico triplo tessuto Mosaico triplo tessuto (rene, stomaco e fegato)(rene, stomaco e fegato)AMA AMA –– Anticorpi antiAnticorpi anti--mitocondriomitocondrio

ASMA ASMA –– Anticorpi antiAnticorpi anti--muscolatura lisciamuscolatura liscia

APCA APCA –– Anticorpi anti cellule parietali gastricheAnticorpi anti cellule parietali gastriche

LKMA LKMA –– Anticorpi Anticorpi antianti--microsomimicrosomi epatici e renaliepatici e renali

� AMA

� ASMA

� LKMA

� APCA

TESSUTITESSUTI

M2 (esclude anche M6 M9)

confermare con LIA o dot

Confermare con profilo epatico

LIA o dot

Completare con

Fattore Intrinseco di Castle

F-actina (LIA o dot) per conferma specificità per AIH-1

ANTICORPI ANTI MITOCONDRIO

ANTICORPI ANTI MUSCOLATURA

LISCIA

(ASMA)

ANTICORPI ANTI CELLULE

PARIETALI GASTRICHE

APCA

ANTICORPI ANTI CELLULE

PARIETALI GASTRICHE

APCA

Anticorpi anti

microsomi

epatici e renali

� C - ANCA

ANCAanticorpi anti citoplasma

dei granulociti

ANCAanticorpi anti citoplasma

dei granulociti

� P - ANCA

ANCAanticorpi anti citoplasma

dei granulociti neutrofili

� ANCA POS

MPO MIELOPEROSSIDASI

PR3 PROTEINASI 3

QUESTE DUE REATTIVITA’ CI PERMETTONO DI DIFFERENZIAR E

ORIENTATIVAMENTE VARIE FORME DI VASCULITI AUTOIMMU NI

Altri anticorpi organo Altri anticorpi organo

specificispecifici

�� Tessuto specifico Tessuto specifico

��ACA ACA –– Anticorpi antiAnticorpi anti--surrenesurrene

�� ICA ICA –– Anticorpi Anticorpi antianti--insulainsula pancreaticapancreatica

��ASAASA–– anticorpi antianticorpi anti--cutecute

ACA ACA –– Anticorpi antiAnticorpi anti--surrenesurrene ANTICORPI ANTI INSULA

PANCREATICA (ICA)

ASA ASA –– anticorpi anti anticorpi anti -- cutecute

FLOW CHART CELIACHIAFLOW CHART CELIACHIA

A-TG-IgA & IgA Totali

POSITIVI - EMA

NEGATIVI - STOP

ANTICORPI ANTI ENDOMISIO

(EMA)FLOW CHART CELIACHIAFLOW CHART CELIACHIA

aTG-IgA & IgA Totali

POSITIVI - EMA NEGATIVI - STOP

POSITIVI - BIOPSIA

Deficit IgA DGP IgG

SE < A 5 ANNI

NEGATIVI - STOP

POSITIVI - BIOPSIA

DGP IgG & IgA NEGATIVI - STOP

POSITIVI - BIOPSIA

NEGATIVI - STOP

Anticorpi Anti Anticorpi Anti –– fosfolipidifosfolipidi

APSAPS

DOSAGGIO LUPUS ANTICOAGULANS

DOSAGGIO ANTICORPI ANTI-CARDIOLIPINA IGG & IGM

E SE POSITIVI

DOSAGGIO ANTICORPI ANTI β 2 GLICOPROTEINA IGG & IGM

A NOME DI TUTTI E MIO PERSONALE