Confronto Interistituzionale in Confronto Interistituzionale in Patologia Mammaria: Patologia Mammaria:

determinazione determinazione immunofenotipica di ER/PRimmunofenotipica di ER/PR

Licia Laurino and Angelo P. Dei Licia Laurino and Angelo P. Dei TosTos

Dipartimenti di Patologia ed OncologiaDipartimenti di Patologia ed OncologiaTrevisoTreviso

Breast Cancer DiagnosisBreast Cancer Diagnosis

• Necessary Necessary • DifficultDifficult• Insufficient for planning the Insufficient for planning the

adjuvant treatmentadjuvant treatment

St. Gallen ConferenceSt. Gallen Conference

• Absolute importance of timely, Absolute importance of timely, accurate and reliable accurate and reliable histopathologic assessmenthistopathologic assessment

• Target identification and Target identification and quantitationquantitation

• Enhanced partnership between Enhanced partnership between clinician and pathologists clinician and pathologists substantially improved outcomes.substantially improved outcomes.

Treatment OptionsTreatment Options

• Endocrine therapyEndocrine therapy– Any detectable ERAny detectable ER

• Anti HER2 therapyAnti HER2 therapy– HER2 + (ASCO/CAP)HER2 + (ASCO/CAP)

• ChemotherapyChemotherapy

Gene Epression Gene Epression SignaturesSignatures

“…“…after a long debate, the Panel after a long debate, the Panel supported the use of a validated supported the use of a validated multigene-profiling assay, as an multigene-profiling assay, as an adjunct to adjunct to high quality high quality phenotyping of breast cancerphenotyping of breast cancer in in cases in which the indication for cases in which the indication for adj chemo remained uncertain”adj chemo remained uncertain”

Currently accepted Currently accepted prognostic/predictive parametersprognostic/predictive parameters

• PatientPatient AgeAgecharacteristicscharacteristics ((RaceRace))

• DiseaseDisease Tumor sizeTumor sizecharacteristicscharacteristics Tumor typeTumor type

Axillary statusAxillary statusTumor gradeTumor gradePeritum. vascular invasionPeritum. vascular invasion

• BiomarkersBiomarkers Receptor statusReceptor statusHER2/neu expressionHER2/neu expression Ki-67 labeling indexKi-67 labeling index

The histopathologic reportThe histopathologic report

• Invasive ductal ca, Invasive ductal ca, NOS, G2, negative NOS, G2, negative margins, with 2 margins, with 2 lymph node mets in lymph node mets in post-meno patient.post-meno patient.

• ER: 90%; PgR 90%, ER: 90%; PgR 90%, HER2 negative, HER2 negative, Ki67: 12%Ki67: 12%

• Endocrine-Endocrine-responsive tumor responsive tumor with an intermediate with an intermediate risk. Adjuvant risk. Adjuvant Tamoxifen for 2 yrs, Tamoxifen for 2 yrs, followed by AI for followed by AI for additional 3 yrs. additional 3 yrs. Then wait for the Then wait for the results of current results of current trials of extended trials of extended endocrine treatmentendocrine treatment

The histopathologic reportThe histopathologic report

• Invasive ductal ca, Invasive ductal ca, NOS, G2, negative NOS, G2, negative margins, with 2 margins, with 2 lymph node mets in lymph node mets in post-meno patient.post-meno patient.

• ER: 90%; PgR 90%, ER: 90%; PgR 90%, HER2 negative, HER2 negative, Ki67: 12%Ki67: 12%

• Endocrine-Endocrine-responsive tumor responsive tumor with an intermediate with an intermediate risk. Adjuvant risk. Adjuvant Tamoxifen for 2 yrs, Tamoxifen for 2 yrs, followed by AI for followed by AI for additional 3 yrs. additional 3 yrs. Then wait for the Then wait for the results of current results of current trials of extended trials of extended endocrine treatmentendocrine treatment

• Taxane most effective on endocrine Non or Taxane most effective on endocrine Non or INCOMPLETELY responsive tumorsINCOMPLETELY responsive tumors Optimal ER/PgR/HER2 assessmentOptimal ER/PgR/HER2 assessment

• Microtubule binding protein TAU predicts Microtubule binding protein TAU predicts response to Paclitaxelresponse to Paclitaxel

• Topoisomerase II alpha amplification and protein Topoisomerase II alpha amplification and protein overxpression predict response to anthracyclins overxpression predict response to anthracyclins (?)(?)

• Basal –like tumors (often associated with Basal –like tumors (often associated with BRCA1) more responsive to DNA damaging BRCA1) more responsive to DNA damaging agents (platinum)agents (platinum)

Increasing Roles for Increasing Roles for Pathologist Pathologist

External quality controlsExternal quality controls for for ERER

• UK-NEQAS UK-NEQAS (round #53) (round #53) (#54)(#54)– Score >12/20 Score >12/20 49%49% 69%69%– Score 10-12 Score 10-12 27%27% 16%16%– Score <10/20 Score <10/20 24%24% 15%15%

• German Q.AGerman Q.A.: .: – False-negativeFalse-negative rate rate = 11= 11-24-24%%

(Am J Surg Pathol 2002)(Am J Surg Pathol 2002)

J Nat Cancer Inst 2008, 100:836.

CQ Veneto 09

• Inviate sezioni di mammella normale, carcinoma papillare, (+vo) carcinoma adenoidocistico (-vo), carcinoma lobulare pleomorfo (debolmente +vo)

• 14 centri

NorER

Nor PR

Pos ER

PosPR

Neg ER

Neg PR

Deb ER

Deb PR

Metodica

TV OK OK 100% 100% 0 0 2% 2% SP1 / 636Polimero DAKO

A OK - 100%disomog

100%++

0 Deb pos ?

2% deb

100% deb ?

SP1/Ab8ultravision

C OK OK 100%disomog

100% 0 0 30-40%

?

0?

VectorPolimero DAKO

D Deb Deb 50%disomog

100% 0Contr.

Ins.

0 0Contr. Ins.

0Contr. Ins.

SP1/Ab8Bond-max

E Deb - 90%disomog

100% 0 0 <5% 0 6F11/1A6Bond-max

F OK OK 100% 100%disomog

0 0 2% 0Contr. Ins.

SP1/ 1E2Ventana

G - - 100% 90% debole

0 0 2% 0 SP1/ 1E2Ventana

NorER

Nor PR

Pos ER

PosPR

Neg ER

Neg PR

Deb ER

Deb PR

Metodica

TV

OK OK 100% 100% 0 0 2% 2% SP1 / 636Polimero DAKO

H OK OK 100% 100%disomog

0 0 2% 0 SP1 /1E2Ventana

I Deb OK 100%disomog

100% 0 0 0Contr. Ins.

0Contr. Ins.

SP1 / 636Polimero

L OK np 100%disomog

100%disomog

0 0 2% 0Contr. Ins.

6F11 / 636Bondmax

N Deb OK 100% 100% 0 0 2% 0Contr. Ins.

SP1/1E2?

O OK OK 100% 100% 0 0 2% 0Contr. Ins.

SP1/1E2Ventana

P OK OK 100% np 2% 0 2% 0Contr. Ins.

??

R Deb Deb 60%disomog

60%disomog

0 0 0Contr. Ins.

0Contr. Ins.

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S OK OK 100% 100% 0 0 2% 0Contr. Ins.

?BondMax

NorER

Nor PR

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Metodica

TV OK OK 100% 100% 0 0 2% 2% SP1 / 636Polimero DAKO

A OK - 100%disomog

100%++

0 Deb pos ?

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SP1/Ab8ultravision

C OK OK 100%disomog

100% 0 0 30-40%

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VectorPolimero DAKO

D Deb Deb 50%disomog

100% 0Contr.

Ins.

0 0Contr. Ins.

0Contr. Ins.

SP1/Ab8Bond-max

E Deb - 90%disomog

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F OK OK 100% 100%disomog

0 0 2% 0Contr. Ins.

SP1/ 1E2Ventana

G - - 100% 90% debole

0 0 2% 0 SP1/ 1E2Ventana

NorER

Nor PR

Pos ER

PosPR

Neg ER

Neg PR

Deb ER

Deb PR

Metodica

TV

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H OK OK 100% 100%disomog

0 0 2% 0 SP1 /1E2Ventana

I Deb OK 100%disomog

100% 0 0 0Contr. Ins.

0Contr. Ins.

SP1 / 636Polimero

L OK np 100%disomog

100%disomog

0 0 2% 0Contr. Ins.

6F11 / 636Bondmax

N Deb OK 100% 100% 0 0 2% 0Contr. Ins.

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O OK OK 100% 100% 0 0 2% 0Contr. Ins.

SP1/1E2Ventana

P OK OK 100% np 2% 0 2% 0Contr. Ins.

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R Deb Deb 60%disomog

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0 0 0Contr. Ins.

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S OK OK 100% 100% 0 0 2% 0Contr. Ins.

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NorER

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Neg ER

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Metodica

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A OK - 100%disomog

100%++

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100% deb ?

SP1/Ab8ultravision

C OK OK 100%disomog

100% 0 0 30-40%

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VectorPolimero DAKO

D Deb Deb 50%disomog

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0 0Contr. Ins.

0Contr. Ins.

SP1/Ab8Bond-max

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F OK OK 100% 100%disomog

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SP1/ 1E2Ventana

G - - 100% 90% debole

0 0 2% 0 SP1/ 1E2Ventana

NorER

Nor PR

Pos ER

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Neg ER

Neg PR

Deb ER

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Metodica

TV

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H OK OK 100% 100%disomog

0 0 2% 0 SP1 /1E2Ventana

I Deb OK 100%disomog

100% 0 0 0Contr. Ins.

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SP1 / 636Polimero

L OK np 100%disomog

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6F11 / 636Bondmax

N Deb OK 100% 100% 0 0 2% 0Contr. Ins.

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O OK OK 100% 100% 0 0 2% 0Contr. Ins.

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P OK OK 100% np 2% 0 2% 0Contr. Ins.

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NorER

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Metodica

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A OK - 100%disomog

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SP1/Ab8ultravision

C OK OK 100%disomog

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NorER

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Metodica

TV

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?BondMax

PR normal breast

ER normal breast

ER

PR

ER

ER Low expressing

PR +ve ?

ER

ER

PR-ve

E’ necessario che l’ inclusione scelta per la E’ necessario che l’ inclusione scelta per la determinazione dei parametri biologici includa determinazione dei parametri biologici includa anche parenchima mammario non neoplastico in anche parenchima mammario non neoplastico in tutti i casi in cui ciò sia possibile.tutti i casi in cui ciò sia possibile.

Statement 14.Statement 14. Scelta del campione per la Scelta del campione per la determinazione dei fattori prognostico determinazione dei fattori prognostico predittivipredittivi

Statement 14.Statement 14. Scelta del campione per la Scelta del campione per la determinazione dei fattori prognostico determinazione dei fattori prognostico predittivipredittivi

Statement 15.Statement 15. Scelta del campione per la Scelta del campione per la determinazione dei fattori prognostico determinazione dei fattori prognostico predittivipredittivi

Statement 15.Statement 15. Scelta del campione per la Scelta del campione per la determinazione dei fattori prognostico determinazione dei fattori prognostico predittivipredittivi

La valutazione dei parametri biologici (assetto La valutazione dei parametri biologici (assetto recettoriale, stato di HER2 e Ki-67) deve recettoriale, stato di HER2 e Ki-67) deve essere effettuata anche sulle biopsie pre-essere effettuata anche sulle biopsie pre-operatorie se è prevista terapia neo-adiuvante operatorie se è prevista terapia neo-adiuvante e sulle biopsie di recidive e metastasie sulle biopsie di recidive e metastasi

Nel caso di neoplasie multiple, la Nel caso di neoplasie multiple, la determinazione dei parametri biologici va determinazione dei parametri biologici va effettuata su tutte le lesioni solo se di diverso effettuata su tutte le lesioni solo se di diverso istotipo o gradoistotipo o grado

Statement 16.Statement 16. Scelta del campione per la Scelta del campione per la determinazione dei fattori prognostico determinazione dei fattori prognostico predittivipredittivi

Statement 16.Statement 16. Scelta del campione per la Scelta del campione per la determinazione dei fattori prognostico determinazione dei fattori prognostico predittivipredittivi

La determinazione dell’assetto recettoriale (ER/PR) La determinazione dell’assetto recettoriale (ER/PR) deve essere effettuata anche su neoplasie intraduttali deve essere effettuata anche su neoplasie intraduttali

Statement 17.Statement 17. Determinazione sulle neoplasie Determinazione sulle neoplasie in situ di fattori prognostico predittiviin situ di fattori prognostico predittiviStatement 17.Statement 17. Determinazione sulle neoplasie Determinazione sulle neoplasie in situ di fattori prognostico predittiviin situ di fattori prognostico predittivi

La valutazione dell’assetto dei recettori ormonali La valutazione dell’assetto dei recettori ormonali deve essere espressa in valori percentualideve essere espressa in valori percentualiindipendentemente dalla intensità di colorazioneindipendentemente dalla intensità di colorazione

Statement 18.Statement 18. Determinazione dei recettori Determinazione dei recettori ormonaliormonaliStatement 18.Statement 18. Determinazione dei recettori Determinazione dei recettori ormonaliormonali

Il referto deve riportare il clone utilizzato per la Il referto deve riportare il clone utilizzato per la determinazione immunocitochimica dei recettorideterminazione immunocitochimica dei recettori

La valutazione dell’assetto recettoriale deve La valutazione dell’assetto recettoriale deve corrispondere alla espressione media di corrispondere alla espressione media di recettori dell’ intera sezione esaminatarecettori dell’ intera sezione esaminata

Statement 19.Statement 19. Determinazione dei Determinazione dei recettori ormonalirecettori ormonaliStatement 19.Statement 19. Determinazione dei Determinazione dei recettori ormonalirecettori ormonali

Il controllo positivo interno deve mostrare una Il controllo positivo interno deve mostrare una colorazione eterogenea delle cellule luminali colorazione eterogenea delle cellule luminali normali, con cellule non colorate accanto a cellule normali, con cellule non colorate accanto a cellule debolmente colorate e a cellule intensamente debolmente colorate e a cellule intensamente colorate. colorate. Una colorazione limitata a poche cellule e di uguale Una colorazione limitata a poche cellule e di uguale intensità può essere dovuta ad una scarsa intensità può essere dovuta ad una scarsa sensibilità della reazione. Le cellule mioepiteliali e i sensibilità della reazione. Le cellule mioepiteliali e i fibroblasti rappresentano un utile controllo negativo fibroblasti rappresentano un utile controllo negativo interno: una loro colorazione per quanto debole è interno: una loro colorazione per quanto debole è segno di aspecificità della reazione segno di aspecificità della reazione

Statement 20.Statement 20. Determinazione dei recettori Determinazione dei recettori ormonaliormonaliStatement 20.Statement 20. Determinazione dei recettori Determinazione dei recettori ormonaliormonali

ConclusionsConclusions

• The pathology report of breast cancer The pathology report of breast cancer isis the choice of adjuvant therapythe choice of adjuvant therapy

• The report must be complete and The report must be complete and accurate – in the diagnosis accurate – in the diagnosis andand in the in the assessment of prognostic/predictive assessment of prognostic/predictive parametersparameters

• Pathologists should be more and more Pathologists should be more and more aware of their role in the management aware of their role in the management of patients with breast carcinomaof patients with breast carcinoma

ConclusionsConclusions

• Good laboratory practiceGood laboratory practice• Technical validationTechnical validation• Clinical validationClinical validation

– Correlation with outcomeCorrelation with outcome

• Internal and external quality Internal and external quality control programscontrol programs