DGTI Sektion V Immunhämatologie / Gentechnik · Franz F Wagner Sektion Immunhämatologie / Gentechnik Immunhämatologie / Gentechnik Aktuelle Arbeitsgruppen Seltenes Blut (Dr. v

Blutspendedienst der Landesverbände des DRKNiedersachsen, Sachsen-Anhalt, Thüringen,Oldenburg und Bremen gGmbH

Franz F Wagner

DGTI Sektion V

Immunhämatologie / Gentechnik

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Sektion Immunhämatologie / Gentechnik


� Vorstellung der Sektionsarbeit

� Mögliche Anknüpfungspunkte

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� Aktuelle Arbeitsgruppen� Seltenes Blut (Dr. v. Zabern)

� Separate Treffen, angelehnt an Sektionssitzungen

� Molekulare Diagnostik (Prof. Legler)� Aktuell keine separaten Treffen, da Themenspektrum

der Sektionssitzungen mittlerweile sehr „molekular“

� Gentherapie (NN)� Aktuell inaktiv, wird bei Bedarf neu aktiviert

� Redaktionelle Arbeitsgruppe� Erarbeitet Stellungnahmen etc.

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Themenschwerpunkte

� Schwerpunkt: RHD-PCR bei Blutspendern (2006)

� Anwendung molekularer Typisierungsverfahren in der Praxis (2007)

� Indikationen für molekulare Typisierung (2008)

� Problemstellungen in der Praxis (2009)� Welche Proben werden an Servicelabors geschickt?

� Welche Untersuchungen werden extern eingesandt?

� Wie sollte D bestimmt werden (2010)� Mutterschaftsrichtlinien, Ergebnisse RIR

� Geplant: Ringversuche, Gendiagnostikgesetz

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Juni 2006, Ulm

� Stellungnahme der Sektion- „Aufgrund der derzeit vorliegenden Ergebnisse und dem

allgemeinen Wissensstand zur molekularen Grundlage der RH-Antigene ist eine geeignete RHD-PCR für die Erkennung D positiver Blutspender mindestens so sensitiv wie der indirekte Coombs-Test. Eine geeignete RHD-PCR kann deshalb als „sensitive Methode“ zum Nachweis des D-Antigens i. S. der Hämotherapie-Richtlinien betrachtet werden und den indirekten Coombs-Test ersetzen.“

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September 2008, Düsseldorf

� Indikationsliste für molekulare Typisierung� Zellen nicht vorhanden oder nicht benutzbar

� Erkennung sehr schwacher Antigene

� Geeignete Antiseren fehlen

� Feststellung der Zygosität / Antigen dosing

� Ersatz für Serologie

� „Rating“ A – C (obligatorisch – gleichwertig)

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September 2008, Düsseldorf

� Cells are not available for typing or cannot be typed for technical reasons� Typing of the fetus from peripheral blood of the mother

� to avoid exposure to human-derived RhIg (C)� and to advise clinical care in the presence of maternal

antibodies (A)� from amniocytes or chorionic biopsy to predict fetus at risk for

HDFN� if invasive-procedures have been performed for genetic

counselling (B) or for therapy,� or if results from maternal plasma are doubtful (C1)

� Typing after recent transfusion� like in chronically transfused patients (B)� and after massive transfusion (C)

� Typing in the presence of a serologic problem� like in auto- and allo-immunohemolytic anemia with positive

direct antiglobulin test (B2)

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Mögliche Schnittpunkte

� Listung seltener Präparate / Spender

� Alleldatenbank

� Blutgruppenanteil Eurocode

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Seltene Präparate / Spender

� AB0, Rh-Formel und K (Kell) werden routinemäßig bestimmt

� Weitere Antigene werden nur bei einem Teil der Spender bestimmt

� Patienten mit irregulären Antikörpern benötigen speziell passende Präparate� Im Regelfall „Suche bei Bedarf“, z.B. Jk(a-): 1 von 4

Präparaten passt� Es sind meist genug Präparate zum Testen vorhanden

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� Patienten mit irregulären Antikörpern benötigen speziell passende Präparate

� Problemsituationen:� Patient mit Antikörper gegen hoch frequentes Antigen

� Frequenz antigen-negativer Präparate < 1:100

� Patient mit multiplen Antikörpern� Bei unabhängigen Blutgruppensystemen multiplizieren sich

die Frequenzen

� Beispiel: Fy(a-), Jk(a-), s- ist etwa 1:160 Präparaten

� Eine „Austestung bei Bedarf“ ist in diesen Situationen unzureichend

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� Seltsam 2003 (Ausgangspunkt: Sektion): Versorgungssituation für Patienten mit Antikörpern gegen hoch frequente Antigene

� 52 Patienten, 22 Antigen-negativ versorgt

� 23 Patienten Abweichung vom Standard-Vorgehen� Operation ohne bereitstehende Präparate

� Inkompatible Transfusion

� Abgesagte Eingriffe

� Etwa 2/3 Folge von 4 Spezifitäten: Anti-Vel, Anti-Kp(b), Anti-Lu(b), Anti-Yt(a)

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� Versorgungsstrategien

� Kryokonservierte Präparate� Zentren in Deutschland: Hagen, Ulm, München (, Wien)

� Probleme: Kurze Laufzeit nach AuftauenGefahr des Präparateverlustes beim Auftauen

� Frische Präparate� Schwerpunktstrategie in Springe / (Bern)

� Problem:Oft ist nicht das vorhanden, was benötigt wird

� Einbestellte Spender� Probleme:

Längere VorlaufzeitSpender ist nicht spendefähig

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� Probleme bei der Suche in Deutschland:� Mehrere Zentren sind aktiv

� Seltene Spender kleinerer Zentren sind nicht erfasst

� Wann muss auf Präparate „niedrigerer Qualität“ zurückgegriffen werden?

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Ablauf Präparatesuche intern

Suche nach Präparaten

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Angenommen, es kommt eine Anfrage nach Blut für einen Patienten mit Anti-Coa:Man gibt „2“ im gewünschten Antigenfeld ein

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Zeitraster Springe: Die Präparate sind < 10 Tage alt� Die Befürchtung, vortypisierte Präparate würden zu lange „gebunkert“, wurde widerlegt

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Auf Knopfdruck werden die gefundenen Eurocode-Nummern geliefert

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Mit drei weiteren Mausclicks lässt sich das gesamte Typisierungsmuster der gefundenen Präparate nachsehen

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Ablauf Präparatesuche extern

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� Ziel: Ständig aktualisierte Datei � Vorhandene Präparate

� Spendefähige Spender

� Hindernisse:� Welcher Spender ist spendefähig?

� Rückstellungen

� Spendeintervall

� „Verlorene“ Spender

� Zu viele Spender für manuelle Übergabe

� Aktuelles Ziel ist (noch) nicht, automatisiert den genauen Ist-Zustand wiederzugeben

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Alleldatenbanken

� Molekulare Typisierung ist Routine

� Häufige Fragestellungen Abklärung von Problemfällen

� Bestimmung mittels PCR:� Gleichartige Teste –unterschiedliche Ergebnisse

� Ergebnismengen entsprechen oft nicht Stand des Wissens

� Bestimmung mittels Sequenzierung:� Welche Bedeutung hat die Sequenz

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Alleldatenbanken

� Internationale Lösung: dbRBC

� Nationale Lösung: RhesusBase

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dbRBC

� Listung der Allele aller Blutgruppensysteme

� Lange Zeit reine Allellistung

� Mittlerweile Allel-bezogene Zwischeninformation analog Rhesusbase

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dbRBC

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dbRBC

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dbRBC

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dbRBC

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dbRBC

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RhesusBase

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RhesusBase

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RhesusBase

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dbRBC vs RhesusBase

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dbRBC vs RhesusBase

� Der Informationsgehalt steht und fällt mit dem Kurator und den Zusatzinformationen

� Beide Datenbanken sind nicht völlig up to date

� Eine bessere IT-Unterstützung würde den Kuratoren die Arbeit erleichtern

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ERYKA (Name noch vorläufig)

� Projekt: Neue Datenbank für Blutgruppenallele� Erleichterndes Interface für Kurator

� Screening- und Analysetools� Kurator kann sich auf die Bewertung der

„Zusatzinformationen“ konzentrieren

� Aufnahme ergänzender Informationen� Sekundäre Allelbeobachtungen� Angaben zum Phänotyp

� Ziel: Systematische, suchbare Erfassung der ergänzenden Informationen� Welche Allele passen zum Phänotyp?� Mit welchen Allelen muss ich in der vorliegenden

Population rechnen?

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Eurocode / Lieferscheine

� Immunhämatologie könnte know-how einbringen:� Einbeziehung von DEL?� Einbeziehung weiterer Antigene?� Einbeziehung „unsicherer“ Ergebnisse

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