DIAGNOSTICUL GESTATIEI PRIN METODE DE LABORATOR

  • Published on
    13-Jan-2016

  • View
    99

  • Download
    0

Embed Size (px)

DESCRIPTION

DIAGNOSTICUL GESTATIEI PRIN METODE DE LABORATOR. Metode fizice Metode chimice Metode histologice Metode biologice Metode imunologice. Metode fizice. Radiografia si radioscopia : La animalele de talie mica si mijlocie - PowerPoint PPT Presentation

Transcript

  • DIAGNOSTICUL GESTATIEI PRIN METODE DE LABORATORMetode fiziceMetode chimiceMetode histologiceMetode biologiceMetode imunologice

  • Metode fiziceRadiografia si radioscopia:La animalele de talie mica si mijlociePermit diagn. gestatiei tardiv, dupa initierea osificarii scheletului fetalAvantaje: precizeaza nr. produsilor, asezarea si dispunerea lor in uter, diagn. malformatiilor si monstruozitatilor fetale. Riscuri: aproape nule, atata timp cat organogeneza este terminata

  • Golden Retriever, gestatie 49 zile- Rx lateral si dorsal

  • 2. Electrocardiografia

    Inregistrarea grafica a activitatii cardiace materne (secusele mari) peste care se suprapun secusele mici (activitatea cardiaca fetala)Martor al viabilitatii fetale- clinica animalelor mici

    3. Metoda SokolovskaiaVaca, fidelitate 80%: cresterea densitatii mucusului cervical la vacile gestante evidentiata printr-o reactie cu sulfat de cupruCu(SO4)2 sol.+ 1 pic mucus in 5-6 sec. mucusul cade la fundul paharului (react.+,femela gestanta)

  • 4. CRISTALIZAREA MUCUSULUI CERVICAL LA VACAMetoda de diagn. a starii de negestatie, fidelitate Se realizeaza un frotiu din mucusul cervical- se examineaza la microscop:In proestru si estru: mucusul cristalizeaza sub forma unei frunze de feriga, excluzandu-se gestatia

    Frotiu din mucus cervical- imagine de feriga

  • 5. Examinarea ecograficaDiagnosticul ecografic reprezint o metod neinvaziv i nedureroas de vizualizare a diferitelor structuri ale organismului.Ultrasunetele- se propaga liniar (f. bine in mediu lichid, nu si in aer sau mediu solid) si genereaza un ecou la suprafata de separare intre doua medii cu densitate diferita.Efectul Doppler: la limita de separare intre cele doua medii exista particule in miscare (circulatie fetala, placentara, cord fetal, circ. materna) ce det. modificarea frecventei undei ultrasoniceEfectul puls-ecou: ecoul este captat si convertit in semnal acustic/luminosFrecventa sondei mare = imagine mai clara = penetrabilitate mai redusa

  • Diagnosticul ecografic al gestatiei la catea

  • Aspect ecografic Doppler

  • Diagnosticul ecografic al gestatiei la cateaGestaie, 24 zile: se observ ecoul hiperecogen dat de embrion

  • Gestaie, 35 de zile: se observ capul i corpul fetal, precum i brul placentar

    Gestaie, 35 de zile: seciune transversal la nivelul fetusului, vezicula vitelin, brul placentar i ampula fetal

  • GESTAIE 31 ZILE SE POT DECELA BCF, SEMN AL VIABILITII FETALE

    GESTAIE 32 ZILE SAC GESTAIONAL N CONTACT CU APEXUL VEZICII URINARE

  • GESTAIE 35 ZILE BRUL PLACENTAR UOR DE EVIDENIAT

  • Diagnosticul ecografic al gestatiei la iapaGestatie iapa, 57 zileGestatie gemelara iapa, 30 zile

  • Diagnosticul ecografic al gestatiei la scroafaGestatie scroafa, 28 zileEmbrioni 28 zile

  • Metode chimiceReactia Cuboni-evidentierea calitativa a hormonilor estrogeni, printr-o reactie de fluorescenta a estrogenilor in prezenta acidului sulfuric-folosita la iapa intre lunile 4-9 de gestatie (estrogeni la nivel urinar), fidelitate 98%-15 ml urina+ 3 ml HCl (incalzire, filtrare, decantare, racire)- examinare la UV-fluorescenta verde= reactie+

  • Metode histologice1.Metoda Benesch-Kurasava, folosita la iapa- Evidentierea in frotiul de la nivelul mucusului cervical a celulelor epiteliate ciliate,in mici conglomerate, fara leucocite2. Metoda Ciurea la scroafa si oaie, fidelitate precoce- 95%-aprecierea modificarilor histologice ale epiteliului vaginal anterior (recoltare biopsica, includere in gheata, sectiuni, colorare) -la scroafa: in estru epiteliul =20-25 straturi, in metestru 4-5 straturi, in gestatie 2-3 straturi-la oaie: 10-12 strauturi la negestante, la gestante 3-4 straturi, cu celule cubice (dupa ziua 40 de gestatie)

  • Metode biologicePrincipiu: evidentierea modificarilor specifice induse de gonadotropina serica asupra aparatului genital la animalele de laborator-gonadotropina serica = h. glicoproteic secretat de cel. trofoblastului fetal ce invadeaza cupele endometriale in intervalul 36-120 de zile de gestatie, cu un maxim intre 55-75

    MetodaAnimal de experientaReactie pozitiva= femela de testat gestanta1. Ascheim ZondeckSoricele impubere 3-4 saptamaniOvare cu foliculi maturi, edem tract genital2. Freidman- SchneiderIepuroiace impubereFoliculi numerosi, hipertrofie uterina3. Brouha-Hinglais SimmonetSoareci masculi impuberiHipertrofia vez.sem. & testiculara4. Zavadovschi-NesmeianovaCocosi impuberiHipertrofia crestei si a testiculelor5. Galli- MaininiBroscoiex.microsc.al urinii: spermatozoizi6. Allen-DoisySoricele impubere/castrateFrotiu din fluidul vaginal:cel Schollen

  • Metode imunologiceInhibarea reactiei de aglutinare dintre eritrocitele de oaie si un ser antiPMSG, daca aceste eritrocite sunt puse in prealabil in contact cu serul provenit de la iapa de testat, cand aceasta este gestanta

    ERITROCITEERITROCITEERITROCITESer anti PMSGSer iapa de testatSer iapa de testatSer anti PMSGAglutinare (martor)Fara reactii vizibileAglutinare=reactie -Lipsa aglutinarii=reactie+(iapa gestanta)

  • 2.Imunoforeza in gel de geloza-ser antiPMSG concentrat si specific se introduce intr-un godeu central, intr-o placa Petri, seruri de la iepele de testat introduse in godeuri periferice-camp electroforetic - proteinele vor migra specific in functie de masa lor moleculara, intensitatea liniilor de precipitare ce se formeaza este d.p. cu cant. de PMSG din serul de analizat

    Ser antiPMSGser 4ser 3ser 2ser 6ser 1ser 5

  • 3.Determinarea factorului de gestatie timpurie-complex proteic dependent de gestatie, produs de ovar si oviduct care impiedica rejectia embrionului de catre mama-se identifica la 24 de ore dupa monta la oaie si 4 ore la scroafa4. RIA- Ac.antiP se obtin prin inj.repetata a P la iapaAc.antiP+ Ag(P din ser,lapte) Ac-Ag+Ac.antiP (excesul)Ac.antiP + Ag (P marcat cu tritiu) Ac - Ag + Ag (excesul)-cu ajutorul unui spectometru de scintilatie se determina numarul dezintegrarilor radioactive- se raporteaza la o curba etalon si se precizeaza astfel cantitatea de P (ng/ml) din ser sau lapte.

  • 5. ELISA (Enzyme Linked Immunosorbent Assay)Acelasi principiu ca RIA, doar Ag este marcat cu o enzima. Ag+enzima - determina degradarea unui substrat, apare o reactie de culoare, a carei intensitate se determina spectofotometricDiverse valori ale progesteronemiei la cateva specii domestice

    P ng/mlIAPAVACASCROAFAOAIENIVEL BAZAL 0.50.50.30.2-0.3Faza luteala>5-6>52In gestatie>2 >297-8Mom.recoltarii dupa monta18-23 zile23-24 zile17-24 zile>50 zile

  • 1. Godeurile sunt captusite cu un anticorp specific.2. Se adauga proba (Ac poate capta Ag din proba).3. Se adauga un Ac secundar de detectie, care se fixeaza pe Ag capturat de primul Ac.4. Se adauga substratul enzimatic, care se fixeaza pe complexul format. 5. Intensitatea culorii complexului format este d.p. cu cant. de Ag din proba de analizat.6. Intensitatea se apreciaza spectofotometric la 450 nm.

Recommended

View more >