新型新型 TPZTPZ 类化合物类化合物Q39Q39

低氧抗肿瘤活性研究低氧抗肿瘤活性研究汇报人：张俊 导师：杨 波 教授 何俏军 教授

浙江大学 药学院浙江大学 药学院药理毒理与生化药学研究所药理毒理与生化药学研究所

研究背景研究背景

Nuclear

Cytoplasm

Transcription

HIF-1HIF-1αα

Degradation

HypoxiaHypoxia

HIF-1βHIF-1β

HIF-1HIF-1

Angiogenesis/VEGF……

Metabolism/GLUT1……

Erythropoiesis/EPO……

Cell proliferation and viability/BINP3 ……

Tirapazamine (TPZ) Q39

Q39—Tirapazamine 的类似物

生物前体药生物前体药 TPZTPZ ，是一种有效的低氧选择性药物，可以，是一种有效的低氧选择性药物，可以

在某些微环境中（缺氧或存在还原酶）释放出具有强大细胞在某些微环境中（缺氧或存在还原酶）释放出具有强大细胞

毒作用的活性成分而发挥治疗效应。毒作用的活性成分而发挥治疗效应。

Q39的低氧选择性与 HIF-1α的表达水平相关

无低氧选择性有低氧选择性 ?

Q39 具有体内外的抗肿瘤活性

Q39 具有体内外的抗肿瘤活性

CC

A. Q39浓度依赖性引起 HIF-1α蛋白的下调

B. Q39不影响 HIF-1α 的 mRNA水平

Q39 下调细胞内 HIF-1α 的表达

CC

A & B. A & B. Q39引起 VEGF蛋白的下调

C. C. Q39引起 VEGF mRNA水平的下降

Q39 下调细胞内 VEGF 的表达

AA BB

Q39 在体内模型上显示良好的降 HIF-1α 和 VEGF 的活性

A.A. 瘤组织的免疫组化实验瘤组织的免疫组化实验

B.B. 鸡胚尿囊膜实验鸡胚尿囊膜实验

Q39 下调 VEGF 的表达是 HIF-1α 介导的

A & B. Q39 A & B. Q39 和和 siRNA (HIF-siRNA (HIF-

11αα))发挥同等的降发挥同等的降 HIF-1HIF-1αα

作用作用

C. C. Q39 Q39 和和 siRNA(HIF-1siRNA(HIF-1αα))

发挥同等的降发挥同等的降 VEGF VEGF

mRNAmRNA的作用的作用

D. Q39 D. Q39 和和 siRNA(HIF-1siRNA(HIF-1αα))

发挥同等的降发挥同等的降 VEGFVEGF蛋白蛋白

的作用的作用

Q39 不影响 HIF-1α 的降解速率

HIF1αsynthesis degradation

CHX

X

Q39 减少 HIF-1α 的合成速率

HIF1αHIF1αsynthesissynthesis degradationdegradation

MG132MG132

X

3h 4h

wash

+CHX -CHX-TPZ +TPZ

HIF1α

21%O2 0.6%O2

Akt/mTOR/4E-BP1Akt/mTOR/4E-BP1 信号通路在信号通路在 Q39Q39降降

HIF-1HIF-1αα过程中起关键作用过程中起关键作用

A.PI3K抑制剂 -LY294002下调 HIF-1α的表达水平B. Q39浓度依赖性的降低 P-AKT的表达水平C. Q39引起引起mTOR信号通路关键蛋白发生变化发生变化

D.D. Q39 促进 4E-BP1 和 eIF4E蛋白间的相互作用

小结