Laporan Praktikum
Hari/tanggal : Senin/ 24 September 2012
Biokimia
Waktu : 11.00 12.40 WIB
Kelompok : 2
Asisten :Ratna Aditya N, A.Md
PJP :Waras Nurcholis, M.Si
PROTEIN II( Uji Pengendapan oleh logam, Uji pengendapan oleh
garam, Uji Koagulasi, Uji pengendapan oleh alkohol, Uji Denaturasi
alkohol)
NO
NAMA
NIM
1. Endang Marsiska SS J3L111031
2. Mona Yuniarsah CH J3L111121
3. Ranny Yulianti Suhada J3L111023
4. Tito Pambudhi J3L111075
PROGRAM KEAHLIAN ANALISIS KIMIA
PROGRAM DIPLOMA
INSTITUT PERTANIAN BOGOR
BOGOR
2012Pendahuluan
Latar belakang
Protein merupakan suatu polimer dari asam amino yang
dihubungkandengan ikatan peptida. Molekul protein mengandung
unsur-umsur C, H, O, N, P,S, dan terkadang mengandung unsur logam
seperti besi dan tembaga. Ikatanpeptida dalam struktur primer
protein dapat diuji dengan uji biuret. (Winarno 1992). Protein
merupakan komponen terpenting atau komponen utama sel hewandan sel
manusia. Karena sel merupakan penyusun tubuh manusia, maka
proteinyang terdapat dalam makanan berfungsi sebagai zat utama
dalam pembentukandan pertumbuhan tubuh. Akan tetapi, struktur
protein tidak stabil karena mudah mengalami denaturasi yaitu
keadaan dimana protein terurai menjadi strukturprimernya, baik
reversibel maupun ireversibel. Ada berbagai cara dalampengujian
terhadap protein yaitu dengan reaksi uji asam amino dan reaksi
ujiprotein yaitu berdasarkan pada pengendapan oleh garam,
pengendapan oleh logamdan alkohol serta uji koagulasi dan
denaturasi protein. (Poedjiadi 2009)Berdasarkan fungsinya, protein
dapat digolongkan dalam bentuk enzim (ribonuklease, tripsin),
protein transport (hemoglobin, albumin serum, mioglobin,
lipoprotein), protein nutrient dan penyimpanan (gliadin = gandum,
ovalbumin = telur, kasein = susu, feritin), protein kontraktil
(aktin, myosin, tubulin, dynein), protein structural (keratin,
fibroin, kolagen, elastin, proteoglikan), protein pelindung
(antibody, fibrinogen, trombin, toksin botuluni, toksin difteri,
bias ular, risin), protein pengatur (insulin, hormone tumbuh,
kortikotropin, repressor). Atas dasar kelarutannya dalam zat
pelarut tertentu, protein dibagi : albumin, globulin, dan glutelin.
Protein dapat juga dikelompokkan berdasarkan atas jenis utama
konformasinya. Berdasarkan penggolongan ini terdapat 2 kelas utama
protein, yaitu protein fibrosa (serat) dan protein globular.
Protein serat mempunyai konformasi yang terikat saling secara
lateral oleh beberapa jenis ikatan. Protein konformasi ini sering
dimanfaatkan sebagai elemen struktural jaringan karena mempunyai
sifat fisik yang kuat dan tidak larut dalam air. Contoh protein
serat adalah kolagen, alfa-keratin, dan sutera. Protein globular
merupakan protein biologis aktif yang umum dalam sistem kehidupan.
Protein ini berbentuk bulat, kompak dan larut dalam air. Protein
globular biasanya memiliki struktur tersier dan kuartener,
contohnya enzim dan antibody (Hawab 2004).Rumusan masalah
Apa prinsip uji pengendapan protein oleh logam,ammonium sulfat ?
Bagaimana reaksi uji pengendapan protein dengan logam, ammonium
sulfat, serta alkohol? Bagaimana proses pengendapan dalam sel-sel
tubuh oleh cemaran logam yang masuk ke tubuh ? Apakah hasil
pengendapan protein dengan ammonium sulfat larut dalam air ? Apa
yang dimaksud dengan titik jenuh ? Apa yang dimaksud dengan titik
isolistrik ? Apa saja yang dapat mempengaruhi titik isolistrik ?
Apa perbedaan pengendapan protein oleh logam, garam (ammonium
sulfat ) serta alkohol ? Bagaimana struktur primer dan sekunder
dari protein ? Apa uang dimaksud dengan koagulasi dan denaturasi
protein ? Apakah suhu mempengaruhi denaturasi protein ? Bagaimana
rekonstruksi denaturasi protein ?Tujuan praktikum
Praktikum bertujuan untuk mempelajari beberapa reaksi uji
terhadap asam amino dan protein terhadap pengendapan oleh logam,
pengendapan oleh garam , uji koagulasi, uji denaturasi, serta
pengendapan alkohol.
Metode praktikum
Alat-alat yang digunakan dalam praktikum ini adalah tabung
reaksi, rak tabung, corong, bulp merah,bulp hitam, gelas piala
500ml, gelas piala 250ml,gegep kayu, pipet tetes, asbes, kaki tiga,
batang pengaduk, sudip, botol semprot, pipet mohr 10ml, kaca arloji
serta kertas saring.
Bahan-bahan yang digunakan adalah larutan albumin, putih telur,
HgCl2 2%, Pb-asetat 5%, AgNO3 5%, larutan (NH4)2SO4, pereaksi
millon, pereaksi biuret, asam asetat 1 M, HCl 0,1M, NaOH 0,1 M,
buffer asetat pH 4,7, etanol 95%, akuades.
Uji protein pengendapan logam : sebanyak 3ml albumin ditambahkan
5 tetes larutan HgCl2 2%. Percobaan ini diulangi dengan menggunakan
Pb-asetat 5 % dan AgNO3 5%.
Uji protein dengan pengendapan oleh garam : sebanyak 10 ml
larutan protein dijenuhkan dengan larutan (NH4)2SO4. Larutan
(NH4)2SO4 ditambahkan sedikit demi sedikit, kemudian diaduk hingga
mencapai titik jenuh, dan setelah itu disaring. Kelarutan di uji
dengan air, dan endapan diuji dengan pereaksi millon serta filtrat
diuji dengan pereaksi biuret.
Uji Koagulasi : sebanyak 5 ml larutan protein ditambahkan 2
tetes larutan asam asetat 1 M, kemudian tabung diletakkan dalam air
memdidih selama 5 menit. Endapan diambil dengan menggunakan batang
pengaduk. Endapan tersebut diuji kelarutannya didalam air serta
diuji dengan pereaksi millon.Uji pengendapan alkohol : sebanyak 3
buah tabung disediakan, kedalam tabung reaksi pertama sebanyak 5 mL
larutan protein dimasukkan. Kemudian ditambahkan 1 ml HCl 0,1 M dan
6 mL etanol 95%. Tabung reaksi kedua sebanyak 5 mL larutan protein
dimasukkan. Kemudian ditambahkan 1 ml NaOH 0,1 M dan 6 mL etanol
95%. Tabung reaksi ketiga sebanyak 5 mL larutan protein dimasukkan.
Kemudian ditambahkan 1 ml buffer asetat pH 4,7 dan 6 mL etanol 95%.
Tabung-tabung manakah yang menunjukkan protein tidak larut
ditentukan.
Uji denaturasi protein : sebanyak 3 buah tabung disediakan,
kedalam tabung reaksi pertama sebanyak 9 mL larutan protein
dimasukkan, kemudian ditambahkan 1 ml HCl 0,1 M. Tabung reaksi
kedua sebanyak 9 mL larutan protein dimasukkan, kemudian
ditambahkan 1 ml NaOH 0,1 M. Tabung reaksi ketiga sebanyak 9 mL
larutan protein dimasukkan,setelah itu ditambahkan 1 ml buffer
asetat pH 4,7. Ketiga tabung tersebut ditempatkan dalam air
mendidih selama 15 menit dan didinginkan pada temperatur kamar.
Tabung 1 dan tabung 2 setelah didinginkan, ditambahkan 10ml buffer
asetat pH4,7.
Hasil dan pembahasan
Protein merupakan unit penyusun utama tubuh. Protein juga
merupakan suatupolimer yang mempunyai monomer suatu asam amino.
Asam amino sendiri merupakan senyawa kimia yang mengandung 2 gugus
fungsi yang berbeda. Oleh karena itu reaksi identifikasi suatu
protein tidak jauh dari reaksi kedua gugus fungsi tersebut. Salah
satu identifikasi protein adalah dengan cara denaturasi protein
(perubahan struktur protein) . Denaturasi protein ini dapat
dilakukan dengan penambahan asam atauion logam berat (Poedjiadi
2009).
Tabel 1 Uji Pengendapan Protein Oleh Logam Berat No.Logam
BeratPengamatanIntensitas EndapanFoto
1.HgCl2Larutan keruh, ada endapan++
2.Pb-AsetatLarutan keruh+
3.AgNO3Larutan keruh, ada endapan+++
Keterangan :
+ : Protein terendapkan oleh logam dengan warna larutan sedikit
keruh dan sedikit endapan
++ : Protein terendapkan oleh logam dengan warna larutan keruh
dan banyak endapan
+++ : Protein terendapkan oleh logam dengan warna larutan sangat
keruh dan sangat banyak endapan
- : Protein tidak terendapkan oleh logam
Prinsip uji didasarkan pada percobaan pengendapan protein oleh
logam berat, protein berikatan dengan logam berat melalui elektron
bebas atom N sehingga merusak keutuhan protein dan merusak struktur
sekunder, tersier, dan kuartener protein membentuk gumpalan dan
endapan putih. Dimana sampel yang mengandung protein ditambahkan
logam berat dari HgCl2, Pb-Asetat, dan AgNO3 menghasilkan gumpalan
putih. Semakin besar molekul logam berat yang ditambahkan, maka
semakin banyak endapan yang dihasilkan dan warna larutan semakin
keruh. Pengendapan protein dengan logam berat bersifat
irreversibel. Irreversibel yaitu dimana protein tidak bisa
mendapatkan kembali bentuk asal mereka.
Gambar 1. Reaksi protein dengan penambahan logam berat ( Suwandi
1989 )
Pada uji pengendapan protein oleh logam berat, albumin sintetik
dan albumin telur semuanya terendapkan oleh garam logam dengan
jumlah endapan yang berbeda-beda. Pada albumin yang ditambahkan
AgNO3 endapan yang dihasilkan paling banyak dibandingkan dengan
penambahan logam lainnya. Penambahan Pb-asetat membentuk endapan
yang paling sedikit dibandingkan dengan penambahan HgCl2 dan AgNO3.
Penambahan garam logam berat seperti AgCl2, Pb-asetat, dan AgNO3
akan membentuk endapan logam proteinat. Ikatan yang terbentuk amat
kuat dan akan memutuskan jembatan garam, sehingga protein mengalami
denaturasi. Secara gugus COOH dan gugus NH2 yang terdapat dalam
protein dapat bereaksi dengan ion logam berat dan membentuk senyawa
kelat seperti pada gambar 1. Ion-ion yang dapat membentuk endapan
logam dengan protein antara lain adalah Ag+, Ca++, Zn++, Hg++,
Fe++, Cu++, Co++, Mn++, dan Pb++. Selain gugus COOH dan gugus NH2,
gugus R pada molekul asam amino tertentu dapat pula mengadakan
reaksi dengan ion atau senyawa lain. Contohnya gugus sulfihidril (
-SH ) pada molekul sistein akan bereaksi dengan ion Ag+ atau Hg++ (
Poedjiadi 2009 ). Jumlah endapan yang dihasilkan dipengaruhi oleh
kereaktifan logam berat yang ditambahkan. Logam Ag dan Hg lebih
reaktif daripada Pb karena kedua logam tersebut merupakan logam
transisi pada sistem periodik unsur. Maka dari itu endapan yang
dihasilkan AgNO3 >HgCl2>Pb-asetat. Garam logam berat sangat
berbahaya bila sampai tertelan karena garam tersebut akan
mendenaturasi sekaligus mengendapkan protein sel-sel tubuh.
Larutan garam yang ditambahkan pada larutan sampel tentunya
mengandung anion, untuk larutan Pb2+ anionnya adalah CH3COO-
sedangkan untuk larutan Hg2+ anionnya adalah Cl- dan larutan Ag2+
anionnya adalah NO3. Penambahan ketiga anion tersebut menyebabkan
suasana larutan menjadi sedikit asam, sehingga protein yang
terdapat dalam larutan akan bertindak/mengkondisikan diri sebagai
basa dan sebagian besar terdapat sebagai anion. Anion dari protein
inilah yang bereaksi dengan logam berat membentuk garam proteinat
yang tidak larut dalam air. Reaksi yang terjadi :
Gambar 2. Persamaan reaksi antara protein dengan HgCl2 ( Redhana
2010 )
Gambar 3. Persamaan reaksi antara protein dengan Pb-Asetat (
Redhana 2010 )
Gambar 4. Persamaan reaksi antara protei dengan AgNO3 ( Redhana
2010 )
Pengendapan protein terjadi karena adanya reaksi penetralan
muatan antara ion logam berat dengan anion dari protein. Protein
merupakan suatu koloid elektrolit yang bersifat amfoter, sehingga
dalam bentuk netral senyawa protein berbentuk dua kutub yang
kondisinya dikenal dengan titik isoelektrik.
Tabel 2 Hasil Uji Pengendapan Ammonium Sulfat (NH4SO2)
No.Nama UjiKenampakkan Hasil UjiPengamatan (+/-)Foto
1KelarutanTidak teridentifikasi--
2Uji MillonTidak teridentifikasi--
Keterangan : (-) : tidak dilakukan
Pengendapan protein oleh garam, prinsipnya mengetahui besarnya
daya kelarutan protein setelah diberi garam. Proses yang terjadi
adalah kelarutan protein yang berkurang karena larutan protein
ditambahkan oleh garam-garam anorganik, akibatnya protein akan
terpisah sebagai endapan. Peristiwa pemisahan protein ini
disebutsalting out. Jila garamnetral yangditambahkan berkonsentrasi
tinggi, maka protein akan mengendap. Pengendapan terus terjadi
karena kemampuan ion garam untuk menghidrasi, sehingga terjadi
kompetisi antara garam anorganikdengan molekul protein untuk
mengikat air (Poedjiadi 2009). Karena garam anorganik lebih menarik
air maka jumlah air yang tersedia untuk molekul protein akan
berkurang (Winarno 2008). Protein yang mengalami salting out akan
berikatan dengan garam membentuk endapan. Jika proses salting out
sempurna maka setelah disaring, didalam filtrat tidak akan terdapat
protein, tetapi jika belum sempurna, maka didalam filtrat masih
terdapat protein. Sesuai pada percobaan proses salting out belum
sempurna, maka didalam filtrat masih terdapat protein sehingga
protein mengikat air kemudian protein tersebut larut dalam air.
Garam anorganik yang digunakan dalam percobaan ini adalah
ammonium sulfat. Hal ini terjadi karena ammonium sulfat memiliki
tingkat kelarutan yang lebih tinggi dari pada protein. Sehingga
pada saat penambahan ammonium sulfat, ammounium sulfat akan melarut
dalam air atau pelarutnya dan mendesak protein keluar, kembali
dalam bentuk solidnya, sehingga terbentuklah protein yang
terendapkan.(Poedjiadi 2009). Tetapi dalam percobaan konsentrasi
yang digunakan pada ammonium sulfat tidak cukp tinggi sehingga
tidak dapat mendesak protein berupa albumin keluar untuk dan
kembali ke bentuk solidnya. Kesamaan tingkat kelarutan lah yang
menyebabkan protein dan ammonium sulfat larut, dan tidak membentuk
endapan kembali. Tabel 3 Uji Pengendapan Oleh Alkohol
No.PerlakuanPengamatanHasil ( +/- )Foto
1.HCl 0,1 MLarut dan tidak berwarna-
2.NaOH 0,1 MLarut dan tidak berwarna-
3.Buffer pH 4,7Tidak larut dan terbentuk endapan putih+
Keterangan : (+) : Nilai pH pada titik isoelektrik
(-) : Bukan nilai pH pada titik isoelektrik
Terdapatnya gugus amino bebas pada gugus karboksil pada
ujung-ujung rantai molekul protein menyebabkan protein bersifat
amfoter yaitu dapat bereaksi dengan asam maupun basa. Pada pH
tertentu muatan gugus amino dan karboksilat saling menetralkan
sehingga molekul protein tidak bermuatan. Titik isoelektrik adalah
pH suatu asam tidak mengandung muatan ion netto. Titik isoelektrik
suatu asam amino adalah besaran fisis. Titik isoelektrik terdapat
kesetimbangan antara bentuk-bentuk asam amino sebagai ion amfoter,
anion, dan kation. Setiap pH diatas titik isoelektrik asam amino
memiliki muatan negatif, sedangkan pada pH dibawah titik
isoelektrik asam amino mempunyai muatan posiitif (Fessenden
1986)
Protein bersifat amfoter, yaitu dapat bereaksi dengan larutan
asam dan basa. Daya larut protein berbeda di dalam air, asam, dan
basa; ada yang mudah larut dan ada yang sukar larut. Namun, semua
protein tidak larut dalam pelarut lemak seperti eter dan kloroform.
Apabila protein dipanaskan atau ditambah etanol absolut, maka
protein akan menggumpal (terkoagulasi). Hal ini disebabkan etanol
menarik mantel air yang melingkupi molekul-molekul protein Albumin
adalah protein yang dapat larut dalam air serta dapat terkoagulasi
oleh panas. Albumin terdapat dalam serum darah dan putih telur
(Poedjiadi 2009).
Pengendapan protein oleh alkohol, albumin yang diuji menunjukkan
hasil uji positif (terbentuk endapan) pada perlakuan buffer pH
4.74. Buffer pH 4,7 merupakan nilai pI atau nilai pH pada titik
isoelektrik. Proses yang terjadi adalah pelarut organik akan
mengubah (mengurangi) konstanta dielektrika dari air,sehingga
kelarutan protein berkurang. Selain itu, alkohol juga akan
berkompetisi dengan protein terhadap air.
Pada saat diuji kelarutannya dalam air, endapan dari albumin
telur tidak dapat larut dalam air sedangkan albumin sintetik
sedikit larut dalam air. Karena itu sangat disarankan untuk tidak
mengkonsumsi alkohol karena alkohol tersebut nantinya akan
mengendapkanprotein dalam tubuh yang merupakan komponen penyusun
sel tubuh dan akhirnya dapatmerusak fungsi sel-sel tubuh.
Pengendapan dengan alkohol pada larutan albumin dengan
penambahan HCl (tabung I), protein tersebut larut dan warnanya
bening. Ketika larutan albumin ditambahkan dengan NaOH (tabung II)
larutan albumin larut, berwarna bening. Sedangkan pada saat
penambahan Buffer pH 4,7 (tabung III) larutan albumin tersebut
tidak larut dan ditemukannya endapan yang berwarna putih. Adanya
endapan disebabkan karena turunnya kelarutan protein. Kelarutan
protein tergantung pada kedudukan dan distribusi dari gugus
hidrifil polar dan hidrofob polar di dalam molekul sehingga
menghasilkan protein yang dipol. Uji pengendapan oleh alkohol,
hanya tabung-tabung yang mengandung asam (ber-pH rendah) yang
menunjukkan pengendapan protein. Protein dengan ujung C asam amino
yang terbuka dapat bereaksi dengan alkohol dalam suasana asam
membentuk senyawa protein ester. Pembentukan ester ini ditunjukkan
oleh adanya endapan yang terbentuk. Reaksi-reaksi yang terjadi
sebagai berikut (Winarno 2008) :
Perbedaan pengendapan protein antara pengendapan protein dengan
logam ialah perbedaan reaksi terhadap protein. Semua ion logam ini
akan menghasilkan gumpalan (endapan) pada larutan protein, karena
ion logam ini akan membentuk kompleks dengan protein dengan adanya
gaya tarik antara gugus NH- dengan ion logam yang bermutatan
positf. Secara bersama gugus -COOH dan gugus NH2 yang terdapat
dalam protein dapat bereaksi dengan ion logam berat dan membentuk
senyawa kelat. Ion-ion yang dapat membentuk endapan logam dengan
protein antara lain adalah Ag+, Ca2+, Zn2+, Hg2+, Fe2+, Cu2+, Co2+,
Mn2+ dan Pb2+. Selain gugus -COOH dan gugus NH2, gugus -R pada
molekul asam amino tertentu dapat pula mengadakan reaksi dengan ion
atau senyawa lain. Gugus sulfihidril (-SH) pada molekul sistein
akan bereaksi dengan ion Ag+ atau Hg2+ (Poedjiadi 2009). Pengujian
pengendapan dengan garam mengakibatkan kelarutan protein berkurang
dan protein terpisah sebagai endapan yang sering disebut dengan
salting out. Garam netral yang ditambahkan berkonsentrasi tinggi,
maka protein akan mengendap. Pengendapan terus terjadi karena
kemampuan ion garam untuk menghidrasi, sehingga terjadi kompetisi
antara garam anorganik dengan molekul protein untuk mengikat air.
Karena garam anorganik lebih menarik air maka jumlah air yang
tersedia untuk molekul protein akan berkurang (Winarno 2008).Tabel
4 Uji Koagulasi Pada Protein
TabungCampuranHasil Pengamatan (+/-)Perubahan warna
larutanFoto
1Albumin + HCl + etanol-Tidak berwarna
2Albumin +NaOH + etanol-Tidak berwarna
3Albumin +Buffer+etanol+Putih keruh
Keterangan : +
= sedikit gumpalan protein
= tidak terbentuk gumpalan proteinTabel 5. Denaturasi
proteinNoPerlakuanHasil PengamatanFoto
Sebelum ditambah buffer pH 4,7Sesudah ditambah buffer pH
4,7Sebelum ditambah buffer pH 4,7 Sesudah ditambah buffer pH
4,7
1HCl 0,1 Mberwarna putih dan menggumpalada 2 lapisan, atas:
larutan putih keruh, bawah: gumpalan putih
2Buffer asetat pH 4,7larutan putih keruh dan menggumpalada 2
lapisan, atas: larutan putih keruh, bawah: gumpalan putih
3NaOH 0,1 Mgumpalan berwarna putih -
-
Protein sering mengalami perlakuan tertentu meskipun sangat
sedikit atau dalam kondisi yang ringan belum menyebabkan
terpecahnya ikatan kovalen atau ikatan kovalen atau peptide
perubahan inilah yang dinamakan denaturasi protein. Denaturasi
protein dapat terjadi dalam beberapa perlakuan antara lain
perlakuan pemanasan, pH, garam dan tegangan permukaan. Laju
denaturasi protein dapat mencapai 600 kali untuk setiap kenaikan
suhu 10. Suhu terjadinya denaturasi sebagian besar protein terjadi
berkisar antara 55-75C. Protein yang mengalami denaturasi akan
mengendap karena gugus-gugus bermuatan positif atau negatif dalam
jumlah sama atau netral keadaan tersebut dinamakan titik
isolestrik. Proses denaturasi akan memutuskan iktan
hydrogen,interaksi hidrofobik, dan ikatan garam sehingga molekul
protein tidak memiliki ikatan lagi (Girindra 1993).Pengendapan
protein penting untuk dilakukan dalam pemisahan protein dari
larutan atau campuran protein. Protein memiliki empat dasar
struktur diantaranya yaitu struktur primer, sekunder, tersier dan
kuarterner. Struktur primer menunjukkan jumlah, jenis dan urutan
asam amino dalam molekul protein, oleh karena itu ikatan yang
terbentuk dalam asam amino adalah ikatan peptide sehingga struktur
primer protein juga menunjukan ikatan peptide yang urutanya
diketahui. Rantai polipeptida terdapat banyak gugus > C=O dan
gugus >N=H, kedua gugus ini dapat berikatan karena terdapat
ikatan hidrogen antara atom oksigen dari gugus >C=O dan atom
hydrogen dari gugus >N=H. Ikatan hidrogen yang terbentuk pada
rantai polipeptida akan terbentuk struktur heliks (berpilin).
Ikatan hydrogen ini dapat terjadi antara dua atau lebih rantai
polipeptida yang akan membentuk konfigurasi yaitu sejajar dan
berkelok-kelok sehingga terbentuk struktur lembaran berlipat (
pleated sheet structure). Ikatan jenis ini tergolong dalam sekunder
jenis protein. (Hard 2003)Struktur tersier menunjukan kecendrungan
polipeptida membentuk lipatan sehinnga membentuk struktur yang
lebih kompleks. Struktur ini dibantu dengan adanya gugus R pada
molekul asam amino yang membentuk protein. Jenis ikatan yang
tergabung pada struktur tersier diantaranya ikatan elektrostatik,
ikatan hidrogen hidrogen, interaksi hidrofobik antara rantai
samping non polar, ikatan disulfida dan interaksi dipol-dipol.
Struktur kuarterner menunjukan derajat persekutuan uni-unit protein
sebagian besar protein globular terdiri dari berbagai rantai
polipeptida yang terpisah sehinnga mmbentuk rantai persekutuan
(Hard 2003)Larutan yang bersifat asam akan mendonorkan proton (H+)
sedangkan larutan basa mendonorkan (OH-). Ion H+ dan ion OH- yang
ditambahkan akan menganggu stuktur tersier protein yang diakibatkan
adanya ikatan elektrostatik. Jika ikatan elektrosatik terganggu
maka protein akan mengalami denaturasi. Protein yang mengalami
denaturasi dapat dicirikan terbentuknya endapan atau gumpalan. Jika
konsentrasi dalam larutan kecil atau asam dan basa yang digunakan
adalah asam dan basa lemah atau konsentrasi encer maka akan
terbentuk koloid putih. (Fessenden RJ & Fessenden JS)Penambahan
HCl sebagai asam kuat pada percobaan maka akan terdapat ion H+
berlebih karena HCl merupakan asam kuat sehingga pada saat
praktikum penambahan HCl membntuk kekeruhan dan terbentuk endapan
setelah dipanaskan kemudian didiamkan. Larutan NaOH tergolong basa
kuat dalam percobaan menunjukan adanya endapan setelah dilakukan
pemanasan sedangkan setelah didiamkan tidak tampak adanya
perubahan. Hal ini disebabkan karena NaOH yang ditambahkan tidak
cukup banyak sehingga belum mampu untuk mendenaturasikan protein
yang terdapat dalam larutan.
Gambar 6. Struktur Primer Protein 1
Gambar 7. Struktur sekunder, tersier, dan kuartener dari
protein
Simpulan
Berdasarkan Data dan Pembahasan dapat disimpulkan bahwa Uji
pengendapan protein oleh logam mengahsilkan hasil positif logapada
ketiga logam yang di uji yaitu AgNO3, Pb-Asetat dan HgCl2. Uji
kougulasi protein menhasilkan hasil positif pada ketiga tabung
karena tidak terbentuknya endapan pada ketiga tabung tersebut, Uji
denaturasi protein menghasilkan hasil positif karena pada ketiga
larutan uji dapat membentuk endapan. Pengendapan protein oleh garam
menghasilkan uji yang negatif untuk kelarutan dalam air dan uji
millonnya karena tidak membentuk endapan. Pengendapan alkohol
menghasilkan uji positif pada perlakuan buffer pH 4,7 dengan
membentuk endapan.Daftar pustakaFessenden RJ&Fesseden JS.1986.
Kimia Organik. Jilid ke-2. Pudjaatmaka AH, Penerjemah;
Jakarta:Erlangga . Terjemahan dari: Organik Chemistry.Girindra
A.1993. Biokimia 1. Jakarta: Gramedia Pustaka UtamaHard. 2003.
Kimia Organik: Suatu Kuliah Singkat. Achmadi SS, Penerjemah;
Jakarta:Erlangga. Terjemahan dari: Organik Chemistry: A Shourt
Course . Edisi ke -11Hawab HM..2004. Pengantar Biokimia. Jakarta :
Bayu Media PublishingMartoharsono, Soeharsono. 2000. Biokimia Jilid
II. Yogyakarta : Penerbit Universitas Gadjah Mada PressPoedjiadi A.
2009. Dasar-dasar Biokimia. Jakarta: UI-Press
Redhana. 2010. Penuntun Praktikum Biokimia. Singaraja:
Universitas Pendidikan GaneshSuwandi M. 1989. Kimia Organik :
Karbohidrat, Lipid, Protein. Jakarta: FKUI
Winarno F G .2008. Kimia Pangan dan Gizi. Jakarta: PT Gramedia
Pustaka Utama_1411183285.unknown
