C.C. INMUNOLOGIA

  • View
    446

  • Download
    0

Embed Size (px)

Transcript

Manual de Procedimientos y Control de Calidad en Inmunoserologa para Centros de Hemoterapia y Bancos de Sangre

MANUAL DE PROCEDIMIENTOS Y CONTROL DE CALIDAD EN INMUNOSEROLOGIA PARA CENTROS DE HEMOTERAPIA Y BANCOS DE SANGREINDICE 1. Introduccin ..... 3 3 3 4 4 4

2. Finalidad.. 3. Objetivos....

4. Base Legal

........................

5. mbito de Aplicacin....................... 6. Condiciones de Bioseguridad... CAPITULO I Procedimientos de las Pruebas en Inmunoserologa de las Infecciones Hemotransmisibles............... 1. 1.1 1.2 1.3 Aspectos Generales de los Principales Agentes Hemotransmisibles a Tamizar... Virus de la Inmunodeficiencia Humana (VIH)... Virus Linfotrpico de las Clulas T Humano (HTLV I /II). Hepatitis Virales.

5 5 5 6 6 7 8 8 9 10 10 16

1.3.1 Virus de Hepatitis B (VHB) 1.3.2 Virus de Hepatitis C (VHC).............. 1.4 1.5 2. 2.1 2.2 Trypanosoma Cuzi (Enfermedad de Chagas)................ Treponema Pallidum (Sfilis)............................................ Mtodos serolgicos para tamizaje .. Tcnica ELISA Tcnica de RPR.

CAPITULO IIControl de Calidad Interno en Inmunoserologa 2. 2.1 2.2 2.3 2.3.1 2.4 2.5 2.5.1 para Centros de Hemoterapia y 19 19 20 21 21 23 23 24 Bancos de Sangre.....................................................................................19 Control de Calidad. Procedimientos generales. Fuentes de variacin Evaluacin de los mtodos serolgicos Indicadores del valor de las pruebas de tamizaje.. Estudio estadstico de los datos serolgicos.. Monitoreo de los procesos serolgicos del tamizaje Control Interno

1

Manual de Procedimientos y Control de Calidad en Inmunoserologa para Centros de Hemoterapia y Bancos de Sangre

2.5.2 2.5.3 2.5.4 2.5.5 2.6 2.7 3 3.1 3.2 3.3 3.4 3.5 3.6

Grficas de control Uso de suero control externo. Interpretacin de la grfica de control de Levey Jennings Reglas mltiples de Sheward.. Control de calidad de la prueba ELISA. Control de calidad del RPR Mantenimiento y calibracin de equipos.. Analizador de ELISA. Lavador de microplacas ELISA. Equipo automatizado.............. Incubadora.............................. Rotador serolgico.................... Micropipetas............................

24 24 26 26 27 28 30 30 30 31 31 31 31 34 34 35 36 37 38 39 40 42 42 47

ANEXOS.......... Anexo A HIV y HTLV........................ Anexo B HBs Ag y Anti-HBc ........................... Anexo C HVC ........................ Anexo D Sifilis ........................ Anexo E Enfermedad de Chagas............................ Anexo F 7. 8. 9. Protocolo de trabajo ELISA .......................... Anexo G Protocolo de trabajo RPR .......................... Responsabilidad..... Abreviaturas...................

Glosario de trminos... 43

10. Bibliografa ..................................

2

Manual de Procedimientos y Control de Calidad en Inmunoserologa para Centros de Hemoterapia y Bancos de Sangre

1.- INTRODUCCIONEl control de la transmisin de las enfermedades infecciosas hemotransmisibles es un reto no slo para quienes desarrollan sus actividades en el campo de la medicina transfusional, sino tambin para quienes se encuentran comprometidos en la salud pblica de un pas. Segn lo establece el Art. 6 de la Ley N 26454, que declar de Orden pblico e inters nacional , Los Bancos de Sangre son establecimientos destinados a la extraccin de sangre humana, para transfusiones, terapias preventivas y a investigacin; funcionan con licencia sanitaria y estn encargados de asegurar la calidad de esta y sus componentes durante la obtencin, procesamiento y almacenamiento; y el Art. 7 especifica: Los Bancos de Sangre deben realizar obligatoriamente las pruebas correspondientes para la sangre y sus componentes, segn las normas internacionales de la Organizacin Mundial de la Salud vigentes; al amparo de ste marco legal, el Programa Nacional de Hemoterapia y Bancos de Sangre estableci la obligatoriedad del tamizaje de todas las unidades de sanguneas con los siete marcadores serolgicos que en la actualidad ejecutan los servicios transfusionales del nivel nacional: Sfilis, Hepatitis B (Antgeno de superficie y Core), Hepatitis C, VIH 1-2, HTLV I II (virus linfotrpicos de clulas T humanas) y, Chagas. El presente manual de procedimientos y control de calidad en inmunoserologa para Centros de Hemoterapia y Bancos de Sangre se constituye en una herramienta que permitir orientar al personal, sobre las tcnicas y procedimientos adecuados que permitan garantizar la confiabilidad de los resultados, uniformizando los criterios para su interpretacin y validacin. Todos los esfuerzos para disminuir esta forma de transmisin sern infructuosos si no se asume el compromiso de actualizar y fortalecer los procesos de tamizajes inmunoserolgicos que los Centros de Hemoterapia y Bancos de Sangre por parte del nivel operativo y gerencial; as como de implementar en ste servicio en un Programa de Control de Calidad Interno y participar en un Programa de Evaluacin Externa del Desempeo en Inmunoserologa, como requisitos contemplados en el Sistema de Gestin de la Calidad del PRONAHEBAS.

2.-

FINALIDAD

Estandarizar los procesos y procedimientos de inmunoserologa y control de calidad que se desarrollan en los Centros de Hemoterapia y Bancos de Sangre del nivel nacional.

3.-

OBJETIVOS

1. Difundir los procedimientos tcnicos estandarizados para las pruebas de Inmunoserologa en los Centros de Hemoterapia y Bancos de Sangre en el tamizaje de las unidades de sangre; y uniformizar criterios para la interpretacin y validacin de resultados. 2. Establecer los procedimientos y criterios para el control de calidad interno en las pruebas de inmunoserologa. 3. Servir como documento de consulta en los procesos y procedimientos de inmunoserologa y control de calidad. 4. Fortalecer la seguridad sangunea en los Centros de Hemoterapia y Bancos de Sangre a nivel nacional.

3

Manual de Procedimientos y Control de Calidad en Inmunoserologa para Centros de Hemoterapia y Bancos de Sangre

4.-

BASE LEGAL Ley N 26842, Ley General de Salud. Ley N 27657, Ley del Ministerio de Salud. Ley N 26454, Ley que declar de orden pblico e inters nacional la obtencin, donacin, conservacin, transfusin y suministro de sangre humana. Decreto Supremo N 013-2002-SA, Reglamento de la Ley del Ministerio de Salud. Decreto Supremo N 03-95-SA, Reglamento de la Ley N 26454. Resolucin Ministerial N 283-99-SA-DM, establecen normas de procedimientos para control, medidas de seguridad y sanciones en relacin con la obtencin, donacin, conservacin, transfusin y suministro de sangre humana. Resolucin Ministerial N 753-2004-MINSA, aprueban Norma Tcnica de Prevencin y Control de Infecciones Intrahospitalarias. Resolucin Ministerial N 826-2005/MINSA, aprueban Normas para la elaboracin de documentos normativos del Ministerio de Salud Resolucin Ministerial N 614-2004/MINSA que aprueba las Normas Tcnicas del Sistema de Gestin de la calidad del PRONAHEBAS

5.-

AMBITO DE APLICACIONEl presente manual es de aplicacin en todos los establecimientos de salud del Sector Salud.

.6.CONDICIONES DE BIOSEGURIDADEl personal del laboratorio de inmunoserologa debe realizar el tamizaje cumpliendo con las normas descritas en el Manual Bioseguridad para Bancos de Sangre del PRONAHEBAS.

4

Manual de Procedimientos y Control de Calidad en Inmunoserologa para Centros de Hemoterapia y Bancos de Sangre

CAPITULO I PROCEDIMIENTOS DE LAS PRUEBAS EN INMUNOSEROLOGA DE LAS INFECCIONES HEMOTRANSMISIBLES

1. ASPECTOS GENERALES DE LOS PRINCIPALES AGENTES HEMOTRANSMISIBLES A TAMIZAR 1.1 Virus de la Inmunodeficiencia Humana (VIH)

Los virus de la inmunodeficiencia humana (VIH-1 y VIH-2) son retrovirus ARN con envoltura, se transmiten por va sexual, sangunea y perinatal, primariamente infectan a los linfocitos. La situacin del VIH / SIDA en el Per de acuerdo a datos consignados en el Boletn Epidemiolgico Mensual de la Oficina General de Epidemiologa de Enero del 2006, durante el periodo 1983 2005, se reporto: 18,059 casos de SIDA, 24,449 casos de VIH notificados al 31 de Enero del 2006 El tamizaje para VIH tiene por objetivo la deteccin de anticuerpos y/o antgenos de este virus en el donante. A pesar que las pruebas de tamizaje son muy sensibles, la ausencia de anticuerpos contra el virus no descarta totalmente la infeccin ya que durante la primera infeccin, existe replicacin viral sin que haya una expresin serolgica de los anticuerpos contra el VIH. Esta etapa denominada perodo ventana puede prolongarse por varias semanas. Las pruebas de tamizaje con resultados reactivos indican la probabilidad de que la sangre est infectada. Toda muestra reactiva debe repetirse por lo menos una vez con la misma prueba de tamizaje. Aunque las pruebas utilizadas para detectar los anticuerpos anti-VIH son sumamente sensibles, especficas y reproducibles, se debe requerir que las pruebas de tamizaje tengan una sensibilidad 100% y por lo menos, un 97% de especificidad. La prueba de tamizaje mas utilizada en los Centros de Hemoterapia y Bancos de Sangre para la deteccin de anticuerpos y/o antgeno anti-VIH es la tcnica ELISA. Las primeras pruebas desarrolladas utilizaron lisados virales (antgenos utilizados en estas pruebas se prepararon a partir de viriones del VIH). Estas tcnicas son conocidas como ELISA de primera generacin las cuales tienen alta sensibilidad pero poca especificidad. Posteriormente se desarrollaron las ELISA de segunda generacin las cuales utilizaron antgenos recombinantes preparados por ingeniera gentica, luego las ELISA de tercera generacin cuyos antgenos son pptidos sintticos obtenidos por sntesis qumica y finalmente las ELISA de cuarta generacin que adems de detectar anticuerpos detecta el antgeno p24 del VIH-1 mediante la introduccin de an