Apresentação do PowerPoint · frasco de hemocultura. Secreção de orofaringe . CULTURA EM AGAR SANGUE: Streptococcus pyogenes

Coletas Microbiológicas

Prof. Me. Alessandro Vieira Ferreira

1. QUAL O TEMPO MÁXIMO PERMITIDO ENTRE A COLETA E O PROCESSAMENTO INICIAL DE MATERIAIS COLETADOS PARA EXAMES MICROBIOLÓGICOS?

INTRODUÇÃO

A definição do tempo máximo permitido entre a coleta e o processamento de um determinado material clínico é um fator particular e de extrema importância para um resultado confiável do exame.

A temperatura de transporte é outro fator

importante. A higiene e/ou anti-sepsia (álcool e clorexidina) do

local da coleta também interfere no resultado do exame.

Amostras de secreções do trato respiratório

inferior, entre outras, são consideradas de urgência e devem ser processadas o mais rápido possível.

2. Quais as importância da refrigeração de materiais clínicos

após a coleta?

INTRODUÇÃO

Temperatura ambiente (TA) para o transporte e armazenamento de amostras é de 25oC Reavaliar conceito de TA, pois no Brasil, na maior parte do ano, a TA pode ultrapassar esse valor.

Estudos recentes mostram que a viabilidade de bactérias

fastidiosas transportadas em swabs com meio de transporte, foi melhor quando os swabs foram armazenados refrigerados.

A refrigeração da amostra tem como finalidade manter a viabilidade do agente a ser pesquisado e não permitir a multiplicação de bactérias que fazem parte da microbiota do sítio de onde a amostra foi coletada.

Exceções: líquor.

3. O uso de swabs com meio de transporte para coleta de materiais clínicos pode ser utilizado em que

situações?

INTRODUÇÃO

A coleta apropriada e um sistema de transporte eficiente são as etapas mais críticas da fase pré-analítica do exame microbiológico.

Vários trabalhos mostram que a coleta de materiais

clínicos através de swabs é menos adequada do que aquela por aspiração (por exemplo: infecção por anaeróbios).

Swab com meio de transporte pode ser utilizado

para: secreções do trato genital, trato respiratório superior (orofaringe, nasofaringe), secreção ocular e do trato digestório (ânus e reto). Não deve ser utilizado para secreções de feridas.

4. Qual a sequência correta de semeadura de um material clínico nos diferentes meios de cultura?

INTRODUÇÃO

O processamento do material clínico no Laboratório de Microbiologia envolve dois principais exames: confecção de esfregaço corado pelo Gram e semeadura em meios de cultura.

Os meios de cultura são classificados basicamente em meios seletivos e não-seletivos (ricos), de acordo com sua composição.

Os meios ricos são livres de agentes inibidores e permitem o crescimento da maioria dos microrganismos mais frequentes.

Os meios seletivos já possuem agentes inibitórios (antibióticos, corantes, sais biliares, etc) favorecendo o crescimento de alguns microrganismos e inibindo o de outros.

A semeadura deve ser realizada primeiramente no meio rico, seguido do meio seletivo.

Realizar o esfregaço para bacterioscopia, após inoculação no meio (se o material tiver sido coletado por swab).

Agar sangue Agar MacConkey

Agar SS Agar CLED

MEIOS DE CULTURA

Quais as causas mais comuns de rejeição de amostras

clínicas no laboratório de microbiologia?

INTRODUÇÃO

Amostras que foram coletadas ou transportadas sem as condições adequadas não devem ser aceitas, pois a qualidade do resultado pode ser prejudicada.

PROCESSAMENTO DE SECREÇÕES

COLETA DE SECREÇÕES ABSCESSOS

Lesão aberta: Remover exsudato superficial, limpando com solução

fisiológica estéril, as margens e a superfície da lesão. Coletar a amostra na parte mais profunda da lesão,

utilizando de preferência, seringa e agulha. Ou, swab com meio de transporte.

Abscesso fechado e nódulos: Não usar swab .

Fazer anti-sepsia; limpar com solução

fisiológica estéril. Aspirar o exsudato com agulha e seringa (meio de transporte para anaeróbios).

COLETA DE SECREÇÕES ABSCESSOS

PROCESSAMENTO Swab sem meio de transporte: Suspender a amostra em volume pequeno de caldo

TSB ou solução fisiológica estéril e homogeneizar. Utilizar a solução para inocular nos meios e fazer

lâmina para o Gram. Semear por esgotamento.

Swab com meio de transporte: Rolar o swab numa parte do meio e semear por

esgotamento.

PROCESSAMENTO Seringa Inocular diretamente nos meios de cultura

sólidos (esgotamento) e em caldo THIO ou frasco de hemocultura.

Secreção de orofaringe

CULTURA EM AGAR SANGUE: Streptococcus pyogenes

GRAM NÃO É REALIZADO A PARTIR

DO MATERIAL CLÍNICO

COLETA DE SECREÇÕES SECREÇÕES TRATO RESPIRATÓRIO SUPERIOR

Possui quatro canais que consistem em dois, que servem para iluminar, um de observação e um canal aberto que acomoda instrumentos ou permite a administração de anestésico ou oxigênio.

O broncoscópio de fibra óptica flexível é introduzido através da traquéia até o bronquíolos.

Lavado bronco alveolar: são injetados aproximadamente 100mL de solução fisiológica estéril através do canal aberto. Após 3 a 5 minutos, é recuperado, por aspiração, no mínimo, 40% do volume injetado. Este pode ser coletado em dois ou mais frascos estéreis.

Escovado brônquico: A escova é enviada para análise dentro de um tubo contendo 1mL de solução fisiológica estéril, imediatamente após a colheita.

Coleta de Secreções - TRI

• Lavado broncoalveolar • Escovado • Aspirado traqueal

• Escarro – Análise da qualidade da amostra (GRAM) • Biópsia pulmonar

• Materiais não aceitáveis: - Saliva - Escarro colhido durante 24 horas - Swabs

Cultura quantitativa!!

PROCESSAMENTO SECREÇÕES TRATO RESPIRATÓRIO INFERIOR - TRI

• Escarro – Gram para avaliação da qualidade da amostra

Amostra adequada Amostra inadequada

- Amostra de boa qualidade: - >25 polimorfonucleares e <10 células descamativas, por campo no aumento de 100 x (Murray & Washington, 1975)

Coleta de Secreções - TRI

PROCESSAMENTO: CULTURAS QUANTITATIVAS

Uso de Alça Calibrada.

Critérios de Interpretação - Escovado Protegido: ≥ 103 UFC/mL - Lavado Bronco-alveolar (LBA): ≥ 104 UFC/mL

- Aspirado Traqueal: ≥ 106 UFC/mL

Agência Nacional de Vigilância Sanitária www.anvisa.gov.br

ABSCESSOS Também material de fístula, gangrena, celulite, etc. Remover exsudato superficial limpando com salina estéril ou álcool 70%. "Swab" (abscesso aberto): colher na profundidade, transporte em meio de Stuart ou similar; 2 amostras, uma para Gram e uma para cultura. Transporte: < 2h, Tº ambiente Armazenamento: < 48 h, Tº ambiente


ABSCESSOS Aspirado (abscesso fechado): com seringa e agulha, transferir assépticamente todo o material para meio de transporte anaeróbio, volume mínimo: 1 ml. Transporte: < 2h, Tº ambiente Armazenamento: <48 h, Tº ambiente


HEMOCULTURAS

Manuais Automatizadas


HEMOCULTURAS


Amostras periféricas e de CVC - Desinfetar o frasco aplicando álcool 70% e deixando 1 minuto. - Desinfetar o local da punção venosa (limpar com álcool 70%, aplicar solução de iodo concêntricamente, retirar o excesso com álcool a 70%, esperar secar; não palpar a veia; colher o sangue; limpar com álcool 70%). - Transporte: < 2 h, Tº ambiente - Armazenamento: < 48h, Tº ambiente

SANGUE


Indicações Sepsis: 2-3 amostras de locais separadas em 10 minutos. Endocardite aguda: 3 amostras de 3 locais diferentes em 1-2 horas. Endocardite subaguda: 3 amostras de 3 locais diferentes, de 15 em 15 minutos; se (-) em 24 hs, colher mais 3 amostras. Febre de origem indeterminada: 2-3 amostras com mais de 1 hora entre uma e outra; se (-) após 24 hs, colher mais 2-3 amostras.

SANGUE


- Limpar a pele ao redor da inserção do cateter com álcool; remover o cateter assépticamente, e cortar ± 5 cm da extremidade distal, colocando em tubo seco estéril. - Transporte: <15 min, Tº ambiente - Armazenamento: < 24 h, 4º C - Cultura semiquantitativa (método de Maki): cateter venoso central, periférico, Hickman, Broviac, Swan-Ganz, umbelical, arterial e NPP.

CATETER VASCULAR


LÍQUIDO CÉFALO-RAQUIDIANO


Transporte: para pesquisa de bactérias não deve ser

refrigerado < 15 minutos, Tº ambiente

para pesquisa de vírus, refrigerar imediatamente

< 15 minutos, 4º C

Armazenamento: bact: < 24 hs, Tº ambiente

vírus: < 72 hs, 4º C

LÍQUIDO CÉFALO-RAQUIDIANO


COLETA Limpar a superfície com salina estéril. Se possível, biopsiar (meio de transporte para anaeróbios); se não, aspirar com seringa e agulha; em último caso, colher com "swab" e colocar em meio de transporte (Stuart). Transporte: < 2 h, Tº ambiente Armazenamento: < 48 h, Tº ambiente

ÚLCERA DE DECÚBITO (ESCARAS)


COLETA - TRANSPORTE - ARMAZENAMENTO Conjuntiva: colher de ambos os olhos com "swabs" umedecidos em salina ou caldo; semear imediatamente em agar sangue e agar chocolate, ou transportar em Stuart; passar os "swabs" já semeados em lâminas. Transporte: placas <15 min, Tº ambiente "swabs" <2 h, Tº ambiente Armazenamento: < 48 h, Tº ambiente (em Stuart) Córnea: colher conjuntiva conforme o descrito acima; instilar 2 gotas de anestésico; colher com espátula material da lesão (úlcera), e processar como o anterior.

OLHO


ROTINA: Colher diretamente em recipiente limpo e seco. Transporte: < 1 h, Tº ambiente Armazenamento: < 48 h, 4º C Se não for possível, caldo de transporte entérico. Armazenamento: < 48 h, Tº ambiente Clostridium difficile: Idem ao anterior. Transporte: < 1 h, Tº ambiente 1-48 h, 4º C > 48 h, - 20º C

FEZES



Abdominal, ascítico, bile, articular, pericárdico,

peritoneal, pleural, sinovial.

Desinfetar o local de punção com iodo; aspirar o

material, colocar em meio de transporte para

anaeróbios >1 ml.

Transporte: <15 min, Tº ambiente

Armazenamento: < 48 h, Tº ambiente (líquido

pericárdico e pesquisa de fungos a 4º C).

FLUIDOS


Para pesquisa de BK:

Transporte: < 15 min, Tº ambiente ou

neutralizar no prazo máximo de 1 h após a

coleta, com 1,5 ml de fosfato de sódio a 40%

para cada 35-50 ml de lavado.

LAVADO GÁSTRICO


ASPIRADO TRAQUEAL e LAVADO OU ESCOVADO BRONCOALVEOLAR: Colher em recipiente seco, estéril. Transporte: < 2 h, Tº ambiente Armazenamento: < 48 h, 4º C ESCARRO: => Expectorado: tosse profunda, recipiente seco, estéril. Transporte: < 2h, Tº ambiente Armazenamento: < 24 h, 4º C

TRATO RESPIRATÓRIO INFERIOR


ESCARRO: => Induzido: após nebulização com ± 25 ml salina estéril, recipiente seco, estéril. Transporte: < 2 h, Tº ambiente Armazenamento: < 24 h, Tº ambiente Obs: se após a avaliação no laboratório, a qualidade da amostra não for adequada (<10 células escamosas/ campo e >25 leucócitos/campo), repetir a coleta.

TRATO RESPIRATÓRIO INFERIOR


ORAL: Limpar com "swab"; colher com outro. Se houver lesão, fragmento de biópsia ou aspirado. Transporte: < 2 h, Tº ambiente Armazenamento: < 48h, Tº ambiente NASAL: Anterior: pesquisa de portadores de Staphylococcus ou de Streptococcus. "Swab" umedecido com salina estéril. Transporte: < 2 h, Tº ambiente Armazenamento: < 48 h, Tº ambiente

TRATO RESPIRATÓRIO SUPERIOR


NASO e OROFARINGE: Semear imediatamente em AS/ACh. Transporte: < 15 min, Tº ambiente Armazenamento: < 24 h, Tº ambiente ou transporte Stuart Transporte: < 48 h, Tº ambiente

TRATO RESPIRATÓRIO SUPERIOR


TRANSPORTE:

Sempre que possível, meio de transporte para

anaeróbios; se não, acrescentar algumas gotas

de salina estéril para evitar ressecamento.

FRAGMENTO DE TECIDO


JATO INTERMEDIÁRIO: Lavar a região uretral com água e sabão. Enxaguar com gaze molhada. Desprezar o jato inicial, colhendo o jato médio. Recipiente estéril, boca larga (transporte < 2 h, Tº ambiente) ou diretamente no laminocultivo Transporte:< 24 h, Tº ambiente). Armazenamento: < 48 h, 4º C

URINA


Paciente com SV de demora: Desinfetar local da coleta com álcool 70% Com seringa e agulha, colher 5-10 ml urina, e processar como acima. Não colher por sondagem vesical a não ser quando absolutamente necessário (o procedimento pode PROVOCAR uma ITU).

URINA


=> Líquido amniótico: aspirar com seringa, inocular em meio de transporte para anaeróbios. Transporte: <15 minutos, Tº ambiente Armazenamento: 48 h, Tº ambiente => Bartholin: desinfetar a pele com iodo; aspirar o fluido. inocular em meio de transporte para anaeróbios. Transporte: < 2h, Tº ambiente. Armazenamento: <48h, Tº ambiente ==> Cérvix: Após limpeza do muco/secreção com um "swab", colher com outro material do canal cervica, e incluir em meio de transporte. Transporte: <2h, Tº ambiente. Armazenamento: <48h, Tº ambiente.

GENITAL FEMININO


==> Fundo de saco, endométrio: aspirar o material e incluir em frasco de transporte para anaeróbios. Transporte: <2h, Tº ambiente. Armazenamento: <48h, Tº ambiente. ==> Secreção vaginal: limpar o excesso de secreção, colher com "swab", e colocar em meio de transporte (Stuart). Um segundo "swab" passado em lâmina para pesquisa de Gardnerella vaginalis. Transporte: <2h, Tº ambiente. Armazenamento: <48h, Tº ambiente.

GENITAL FEMININO


=> Próstata: tubo seco, estéril, após massagem prostática. Transporte: <2h, Tº ambiente. Armazenamento: <24h, Tº ambiente. => Uretra: "swab" urogenital no lumen uretral (2-4 cm profundidade), rotativamente, colocando em meio de transporte (Stuart). Transporte: <2h, Tº ambiente. Armazenamento: <48h, Tº ambiente. LESÃO ULCERADA MASCULINA OU FEMININA: Colher com "swab", após limpeza e colocar em meio de transporte (Stuart). Para pesquisa de Treponema: lâmina que deve ser transportada em câmara úmida.

GENITAL MASCULINO

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