1 Todo es Veneno , Nada es Veneno, Todo depende de la dosis

UNIDAD ACADÉMICA CIENCIAS QUÍMICAS Y DE LA SALUD

CARRERA DE BIOQUÍMICA Y FARMACIA

LABORATORIO DE TOXICOLOGÍA

Profesor: Bioq. Farm. Carlos García MSc. Alumna: Tania Carolina Barba Toro Curso: Quinto Paralelo: A Grupo N° 7 Fecha de Elaboración de la Práctica: lunes 22 de junio del 2015 Fecha de Presentación de la Práctica: lunes 29 de junio del 2015

PRÁCTICA N° 4 Título de la Práctica: INTOXICACIÓN POR CLOROFORMO

Animal de Experimentación: Rata Wistar.

Vía de Administración: Vía Parenteral (Intraperitoneal)

Volumen administrado: 10 ml de Cloroformo.

Tiempos:

Inicio de la práctica: 08:05 am

Hora de Inicio y finalización de Disección: 08:07 am – 08:20 am

Hora de Inicio y finalización de Destilación: 08:25 am – 09:00 am

Deceso del animal: 30 minuto

Síntomas: Vomito, cefalea, vértigo y nauseas.

Finalización de la práctica: 09:30 am

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2 Todo es Veneno , Nada es Veneno, Todo depende de la dosis

OBJETIVOS DE LA PRÁCTICA

1. Observar la reacción que presenta la rata wistar ante la Intoxicación por

Cloroformo.

2. Establecer la sintomatología y controlar el tiempo en que actúa el Cloroformo.

3. Conocer mediante reacciones de identificación la presencia de

Cloroformo.

PROCEDIMIENTO

1. Limpiar y desinfectar la mesa de trabajo.

2. Tener todos los materiales listos en la mesón de trabajo

3. Administramos a la rata wistar, 10 ml de Cloroformo por vía

intraperitoneal, anotamos el tiempo.

4. Colocar la rata wistar en la panema.

5. Observamos las manifestaciones que la rata wistar hasta su muerte.

6. De ahí procedemos a la disección de la rata wistar.

MATERIALES

Guantes

Mascarilla

Zapatones

Bata de laboratorio

Jeringa de 10 cc

Cronómetro

Equipo de disección

Bisturí

Portatubo

Probeta

Vaso de precipitación

Erlenmeyer

Equipo de destilación.

Tubos de ensayo

Pipetas

SUSTANCIAS

Alcohol De 95ª

Nitrato De Plata

Ácido Clorhídrico

Potasa Alcohólica

Percloruro De Hierro

Amoniaco Diluido

Beta Naftol

Solución Alcohólica

Concentrada De Potasa

Cristal De Yodo

Clorhidrato De Piperacina

Reactivo De Benedict

3 Todo es Veneno , Nada es Veneno, Todo depende de la dosis

7. Colocando las vísceras (picadas o trituradas lo más finas posibles) en el

recipiente adecuado (balón del equipo de destilación).

8. Preparar 2gr de ácido tartárico en 50ml de agua destilada, luego se añade

la solución de ácido tartárico a las vísceras en el balón.

9. Añadir cierta cantidad de Ácido tartárico, se deja en contacto por 30

minutos para acidular la muestra.

10. Luego de este tiempo se filtra, previamente se arma el equipo de

destilación, en un Erlenmeyer recogeremos el destilado.

11. Con el filtrado luego procedimos a realizar las reacciones de

identificación de Cloroformo en medios biológicos.

12. Culminada la práctica se limpió todo el material y el área utilizada.

Reacciones y Conducta Post-Administración

Tiempo de muerte: 30 minutos (7:35 – 8:09)

Síntomas:

Vomito,

cefalea,

vértigo y nauseas.

Muerte

REACCIONES :

1. Solución Alcohólica.- En el fondo de un tubo de ensayo se mezclan

unas cuantas gotas de cloroformo con otras tantas de alcohol de 95ª

que contiene un poco de nitrato de plata, se inflama la mezcla y se

observa que esta arde con un llama bordeada de verde y que el ácido

clorhídrico formado reacciona con el nitrato de plata disuelto originando

un precipitado de cloruro de plata.

2. Reacción de dunas.- Al adicionar unas gotas de destilado que contiene

cloroformo a unos mililitros de potasa alcohólica (proporción 1:10), se

originan formiatos y cloruro de potasio.

CHCl3 + 4 KOH ClK + HCO2K + H 2 O

4 Todo es Veneno , Nada es Veneno, Todo depende de la dosis

Se neutralizan la mezcla, y se separan en dos porciones a una porción

se le agrega percloruro de hierro produciendo un color rojo en frio o un

precipitado en caliente.

A la otra porción se le agrega solución de nitrato de plata produciéndose

un precipitado de cloruro de plata que se disuelve en amoniaco diluido.

3. Reacción de Lustgarten.- Al calentar la muestra con unos miligramos

de beta naftol y una solución alcohólica concentrada de potasa

(preferentemente un trozo de potasa y algunas gotas de alcohol), se

obtiene un franco color azul.

Si se sustituye el B-naftol por timol el color es Amarillo as o menos

oscuro; con resorsinol la coloración e roja – violáceo y con la piridina

rojo.

4. Reacción de fujiwara.- En un tubo de ensayo, se vierte 2ml de lejía de

sosa 1:2 con una capa de 2mm de piridina y luego la muestra que

contiene el cloroformo; se agitan, podemos por unos instantes en baño

de María y se deja en reposo; se convierte en una materia coloreada que

varía del rosa al rojo vivo, soluble en piridina .Esta reacción sensible

para unos pocos microgramos de cloroformo y es aplicable en la orina de

algún sujeto que haya absorbido de 15-20 g de agua clorofórmica.

5. Reacción de roseboom.- Se disuelve un pequeño cristal de yodo en la

solución muestra y se agregan unos pocos miligramos de clorhidrato de

piperacina ; si el cloroformo está presente en la muestra, la coloración

violeta inicial cambia a amarilla rojiza al disolverse el alcaloide.

6. Reacción de Benedict.- si la solución muestra contiene cloroformo,

reduce el reactivo de Benedict, y de acuerdo a la concentración del

toxico puede producirse una gama de colores que van desde el verde,

amarillo, naranja o rojo ladrillo.

5 Todo es Veneno , Nada es Veneno, Todo depende de la dosis

GRÁFICOS:

5.- Sacamos todas las

vísceras y las picamos

para colocarlas en un

beaker

7.- Añadir cierta cantidad

de Ácido tartárico, se deja

en contacto por 30

minutos para acidular la

muestra.

8.- Se filtra, previamente se

arma el equipo de

destilación, y en un

Erlenmeyer recogeremos el

destilado.

4. Procedemos a

la disección de

la Rata Wistar.

6.- Colocamos todo esto

en el balón colocando

con 50 perlas de vidrio

9.- Con el filtrado

procedemos a realizar las

reacciones de identificación

de formaldehido en medios

biológicos

4 5 6

7 9 8

1.- Animal de

experimentación Rata

Wistar.

3.- Colocamos en la rata

wistar en la panema y

observamos sus

manifestaciones.

1 2 3

2.- Administramos el

Metanol a la rata

wistar por vìa

intraperitonial

6 Todo es Veneno , Nada es Veneno, Todo depende de la dosis

REACCIONES DE RECONOCIMIENTO EN MEDIOS

BIOLÓGICOS:

1) Reacción de Schiff:

Reacción Positivo no característico Cambio de coloración

2) Reacción de Rimini: Positivo no característico

Reacción positivo no característico Cambio de coloración

ANTES DESPUES

ANTES DESPUES

7 Todo es Veneno , Nada es Veneno, Todo depende de la dosis

3) Reacción con la fenil hidracina: positivo no característico

4) Reacción de Marquis: Positivo no caracteristico

5) Con el ácido cromotrópico: Positivo no característico

ANTES DESPUES

ANTES DESPUES

ANTES DESPUÉS

8 Todo es Veneno , Nada es Veneno, Todo depende de la dosis

6) Reacción de Hehner: Positivo no característico

Reaccion Reacción positivo no caracteristico Coloración beis

OBSERVACIONES:

El uso de guantes y mascarilla es esencial al momento de

preparar la solución de cianuro ya que éste puede ser inhalado

causando efectos en nuestro organismo.

Encender la campana de ventilación para eliminar el olor del

cianuro y así mismo los malos olores que se producen al disectar

la rata wistar.

Pude observar que al administrar Metanol puro por vía

intraperitoneal al cobayo, éste presentó picazón, convulsiones, se

orinó, se observó además secreción ocular y por ultimo presentó

necropsia de la mayor parte de las vísceras al momento de abrirlo.

RECOMENDACIONES

Es de vital importancia asegurarse que el equipo esté

correctamente sellado, ya que de esta forma logramos impedir el

escape de los vapores en el proceso de la destilación, siendo estos

en pequeñas cantidades mortales.

Utilizar pipetas específicas para cada reactivo.

Aplicar todas las normas de bioseguridad en el laboratorio.

ANTES DESPUES

9 Todo es Veneno , Nada es Veneno, Todo depende de la dosis

CONCLUSIONES

Al final de esta práctica la reacción que presenta la rata wistar

ante la intoxicación con metanol puro, aprendimos como el

metanol en una sustancia que puede provocar grandes daños en

los organismos vivos, observamos lo que provoca internamente el

metanol y los signos que presento el cobayo cuando a este se le

administro la sustancia, cabe mencionar que la dosis depende del

peso del ser vivo en este caso de la rata wistar.

CUESTONARIO

1. ¿Cuál es la Dosis Letal del Metanol?

Ingerir elevadas cantidades de metanol puede causar dolor de

cabeza, mareo, náusea, vómitos y muerte (de 20 a 25 g se tiene

una dosis mortal). Tomar más de medio litro o más puede causar

ceguera o pérdida de la visión, ya que puede dañar seriamente el

nervio óptico. Una exposición crónica puede ser causa de daños al

hígado o de cirrosis. La dosis letal de metanol para los humanos

varía entre 0,3 gramos y 1 gramo por kilogramo de masa

corpórea.

2. ¿Cuáles son los síntomas más comunes por intoxicación con

metanol?

Los síntomas pueden abarcar:

Pulmones y vías respiratorias

o dificultad respiratoria

o paro respiratorio

Corazón y vasos sanguíneos

o convulsiones

o presión arterial baja

Sistema nervioso:

o comportamiento

agitado

o coma

o mareo

o dolor de cabeza

o crisis epiléptica

10 Todo es Veneno , Nada es Veneno, Todo depende de la dosis

Piel y uñas

11 Todo es Veneno , Nada es Veneno, Todo depende de la dosis

o dolor abdominal (fuerte)

o diarrea

o problemas con la función hepática

o náuseas

o pancreatitis

o vómito

Otros: fatiga, calambres en las piernas, debilidad

3. ¿Cuáles son las aplicaciones y usos del metanol?

El metanol tiene una gran variedad de aplicaciones industriales.

Su uso más frecuente como materia prima para la producción

de metil-butil-éter, que es un aditivo para la gasolina. Se

emplea en la fabricación de formaldehído, ácido acético, cloro

metanos, metacrilato de metilo, metilaminas, dimetil

tereftalato, o como solvente o anticongelante en pinturas en

aerosol, pinturas de pared, limpiadores para carburadores y

compuestos para limpiar parabrisas de automóviles.

El metanol también se emplea como anticongelante en

vehículos, solvente de tintas, tintes, resinas, adhesivos,

biocombustibles y aspartame. El metanol puede ser también

añadido al etanol para hacer que éste no sea apto para el

consumo humano (el metanol es altamente tóxico) y para

vehículos de modelismo con motores de combustión interna.

4. ¿Cuál es la dosis letal en humanos?

La dosis letal probable de Formaldehído (como formalina)

para seres humanos (DL50) se encuentra entre 500 y 5000

mg/kg, que representa una cantidad total de entre 35 y 350

g para una persona de 70 kg de peso.

GLOSARIO:

Anión gap: El anión gap es la diferencia entre los aniones

plasmáticos que habitualmente no se miden (proteínas,

sulfatos, fosfatos y ácidos orgánicos como lactato y piruvato)

y cationes plasmáticos que habitualmente no se miden (K+,

Ca2+, Mg2+). El anion gap normal es entre 8 - 12 mEq/l.

12 Todo es Veneno , Nada es Veneno, Todo depende de la dosis

Cetoacidosi Diabética: La cetoacidosis diabética (CAD)

hace referencia a una descompensación de la diabetes

mellitus que, junto con el estado hiperosmolar y

la hipoglucemia - secundaria al tratamiento, son las tres

principales complicaciones agudas de la diabetes mellitus. A

diferencia de las complicaciones crónicas, esta complicación

se desarrolla en cuestión de horas y pone en peligro la vida

del paciente, por lo que se considera una urgencia médica.

Metanol: También conocido como alcohol de

madera o alcohol metílico (o raramente alcohol de quemar),

es el alcohol más sencillo. Su fórmula

química es CH3OH (CH4O).

Nefrolitiasis: Es la presencia de litos (piedras) en el riñón,

y cuando éstos se encuentran en la vía urinaria, se

denomina al cuadro Urolitiasis, debe ser manejada por un

equipo de médicos (Nefrólogos, Urólogos, y eventualmente

Endocrinólogos).

Nistagmus: Es un tipo de movimiento involuntario de los

ojos. Usualmente es de lado a lado, pero a veces es de

arriba abajo o en forma circular (movimiento rotatorio

incontrolable). El movimiento varía entre lento y rápido y

usualmente involucra ambos ojos. El nistagmus ocurre más

frecuentemente en la infancia, pero también puede

adquirirse después en la vida.

Vértigo: Es una sensación ilusoria o alucinatoria de

movimiento de los objetos que nos rodean o de nuestro

propio cuerpo, por lo común, una sensación de giro. El

vértigo suele deberse a un trastorno en el sistema vestibular

WEBGRAFIA:

Toxicidad por metanol y su efecto sobre las vías visuales

Disponible en: vitae.ucv.ve/pdfs/VITAE_3373.pdf

Metanol 4.19 Disponible

en:www.minambiente.gov.co/documentos/Guia19.pdf

BIBLIOGRAFIA:

Manuel Repetto Giménez, toxicología fundamental. Cuarta

edición.2009.

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AUTORIA:

Bioq. Farm. Carlos García MSc

FIRMA DE RESPONSABILIDAD

__________________ Carolina Barba Toro

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ANEXOS