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La ciencia es el gran antídoto contra el veneno de la superstición. 1 LABORATORIO DE TOXICOLOGÍA Alumno: Elington Antonio Vélez Párraga. Curso: Quinto bioq.farm Paralelo: B Profesor: Bioq. Farm. Carlos García MSc Grupo N°4 Fecha de Elaboración de la Práctica: martes 24 de junio del 2014 Fecha de Presentación de la Práctica: martes 01 de julio del 2014 PRÁCTICA N° 5 TÍTULO DE LA PRÁCTICA INTOXICACIÓN POR CLOROFORMO Animal de Experimentación: Cobayo. Vía de Administración: Vía Intraperitoneal. OBJETIVOS DE LA PRÁCTICA 1. Determinar la presencia del toxico, en este caso el cloroformo en el animal de experimentación, con exámenes químicos colorimétricos. 2. Monitorear al animal de experimentación para estudiar los principales efectos que este sufre luego de la intoxicación.

Practica 5 cloroformo toxicologia

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INFORME DE LA PRÁCTICA EN EL LABORATORIO DE TOXICOLOGÍA

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Page 1: Practica 5 cloroformo toxicologia

La ciencia es el gran antídoto contra el veneno de la superstición.

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LABORATORIO DE TOXICOLOGÍA

Alumno: Elington Antonio Vélez Párraga.

Curso: Quinto bioq.farm Paralelo: B

Profesor: Bioq. Farm. Carlos García MSc

Grupo N°4

Fecha de Elaboración de la Práctica: martes 24 de junio del 2014

Fecha de Presentación de la Práctica: martes 01 de julio del 2014

PRÁCTICA N° 5

TÍTULO DE LA PRÁCTICA

INTOXICACIÓN POR CLOROFORMO

Animal de Experimentación: Cobayo.

Vía de Administración: Vía Intraperitoneal.

OBJETIVOS DE LA PRÁCTICA

1. Determinar la presencia del toxico, en este caso el cloroformo en el animal de

experimentación, con exámenes químicos colorimétricos.

2. Monitorear al animal de experimentación para estudiar los principales efectos que este

sufre luego de la intoxicación.

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La ciencia es el gran antídoto contra el veneno de la superstición. 2

MATERIALES

1. Jeringuilla de 10cc

2. Campana

3. Cronómetro

4. Equipo de disección

5. Bisturí

6. Vasos de precipitación

7. Erlenmeyer

8. Lámpara de alcohol

9. Equipo de destilación.

10. Tubos de ensayo

11. Guantes, gorros, mascarilla

12. Pipetas volumétricas

13. Bata de laboratorio

14. Pinzas para tubo.

SUSTANCIAS

1. cloroformo

2. Alcohol 95° con nitato de plata.

3. B-naftol

4. Potasa alcohólica

5. Percloruro de hierro

6. Sosa

7. Cristal de yodo

8. R. de benedict

9. Piridina

10. Cloruro de piperazina

11. Agua destilada

12. Ácido tartárico

PROCEDIMIENTO

1. Preparar el mesón de trabajo y con ello materiales y sustancias, además de

implementos de bioseguridad.

2. Administrar 10 ml de cloroformo por vía intraperitoneal

3. Monitorear síntomas que se presentan y en qué tiempo hasta la muerte del cobayo.

4. Atamos el cobayo a una tabla de disección.

5. Procedemos rasurarle toda la parte abdominal donde se hará el corte.

6. Con la ayuda del bisturí procedemos la disección del cobayo, y observamos los

cambios (coloración, dureza, etc.) que presentan sus órganos.

7. Procedemos a colocar los fluidos y las vísceras afectadas por el toxico (picadas lo

más finas posibles) en el recipiente adecuado (Vaso de precipitación).

8. A las vísceras ya picadas le añadimos 25ml de solución de ácido tartárico.

9. Esto lo llevamos a un balón.

10. Procedemos a destilar.

11. El residuo de la destilación (muestra) que obtuvimos por arrastre de vapor lo

recibimos en solución de Hidróxido de Sodio 0.1N.

12. Una vez realizado el paso anterior, se practican las diferentes reacciones

colorimétricas cualitativas.

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La ciencia es el gran antídoto contra el veneno de la superstición. 3

Reacciones:

1. A la llama.- En el fondo de un tubo de ensayo se mezclan unas cuantas gotas de cloroformo

con otras tantas de alcohol de 95ª que contiene un poco de nitrato de plata, se inflama la

mezcla y se observa que esta arde con un llama bordeada de verde y que el ácido clorhídrico

formado reacciona con el nitrato de plata disuelto originando un precipitado de cloruro de

plata.

2. Reacción de Dumas.- al adicionar unas gotas de destilado que contiene cloroformo a unos

mililitros de potasa alcohólica (proporción 1:10), se originan formiatos y cloruro de potasio.

CHCl3 + 4 KOH KCl + HCO2K + H 2 O

Se neutralizan la mezcla, y se separan en dos porciones a una porción se le agrega percloruro

de hierro produciendo un color rojo en frío o un precipitado en caliente.

A la otra porción se le agrega solución de nitrato de plata produciéndose un precipitado de

cloruro de plata que se disuelve en amoníaco diluido.

3.- Reacción de Lustgarten.- al calentar la muestra con unos miligramos de beta naftol y

solución alcohólica concentrada de potasa (preferentemente un trozo de potasa y algunas

gotas de alcohol), se obtiene un franco color azul.

Si se sustituye el B-naftol por timol el color es Amarillo más o menos oscuro; con resorcinol

la coloración e roja – violáceo y con la piridina rojo.

4.- Reacción de fujiwara.-En un tubo de ensayo, se vierte 2 ml de lejía de sosa 1:2 con una

capa de 2mm de piridina y luego la muestra que contiene el cloroformo; se agitan, podemos

por unos instantes en baño de María y se deja en reposo; se convierte en una materia

coloreada que varía del rosa al rojo vivo, soluble en piridina .Esta reacción sensible para unos

pocos microgramos de cloroformo y es aplicable en la orina de algún sujeto que haya

absorbido de 15-20 g de agua clorofórmica.

5.-Reacción de roseboom.- se disuelve un pequeño cristal de yodo en la solución muestra y

se agregan unos pocos miligramos de clorhidrato de piperacina ; si el cloroformo está

presente en la muestra, la coloración violeta inicial cambia a amarilla rojiza al disolverse el

alcaloide.

6.-Reacción de Benedict.- si la solución muestra contiene cloroformo, reduce el reactivo de

Benedict, y de acuerdo a la concentración del tóxico puede producirse una gama de colores

que van desde el verde, amarillo, naranja o rojo ladrillo.

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La ciencia es el gran antídoto contra el veneno de la superstición. 4

GRAFICOS

1. Preparamos los

10ml que vamos

a inyectar

2. Inyectamos al

cobayo vía

intraperitoneal

4. se separa las vísceras afectadas y

fluidos

8. Se monta el equipo de destilación

y se destila.

3. se realiza la

disección al

cobayo

5. se añaden 25ml de

solución de ácido

tartarico

6. se transvasa a un

balón para posterior

destilación.

7. Se añaden las 50

perlas de vidrio

Page 5: Practica 5 cloroformo toxicologia

La ciencia es el gran antídoto contra el veneno de la superstición. 5

REACCIONES DE RECONOCIMIENTO EN EL DESTILADO

REACCIONES DE RECONOCIMIENTO.

9. Realizando las

reacciones de

reconocimiento en el

destilado.

Patrón: destilado incoloro

Page 6: Practica 5 cloroformo toxicologia

La ciencia es el gran antídoto contra el veneno de la superstición. 6

Reconocimiento en Medios Biológicos

REACCION DE DUMAS

REACCION DE LUSTGARTES

- (FeCl3)

Resultado:

Reacción positiva

característica.

Coloración roja

REACCIÓN CON AgNO3

Resultado: Positivo no

característico

Formación de precipitado,

pero no de llama con borde

verde

- (AgNO3)

Resultado: Reacción

positiva característica.

Precipitado se

disuelve

se forma precipitado de cloruro de plata, al

agregar AgNO3

con amoniaco se disuelve el precipitado.

- B-naftol

Resultado:

Reacción positiva

no característica.

Coloración roja

- resorcinol

Resultado:

Reacción positiva

característica.

Coloración roja

violaceo

- timol

Resultado:

Reacción positiva

característica.

Coloración

amarilla

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La ciencia es el gran antídoto contra el veneno de la superstición. 7

OBSERVACIONES

Según mi punto de vista de la práctica, el cloroformo resulto ser uno de los tóxicos que

demoran más en causar la muerte del animal de experimentación, pero debemos señalar que

inmediatamente luego de administrar dicho toxico al cobayo este reacciono sedándose, es

decir se paralizo totalmente, sabiendo que el cloroformo es una sustancia que se usaba mucho

como sedante, pero que ahora por el conocimiento de su toxicidad, se restringe su uso.

CONCLUSIONES

Se concluye manifestando que se logró cumplir los objetivos de esta práctica, es decir, se

determinó que el cloroformo que estaba presente en las vísceras del animal, y que había

causado su muerte, además de diferentes efector letales como la cianosis de sus órganos,

hipoxia, micción abundante lagrimeo, etc. Todo esto mediante ensayos químicos

colorimétricos y monitoreo de respuestas del animal de estudio ante la intoxicación con el

alcohol en cuestión.

REACCIÓN ROSEBOOM.

resultado: Positivo no

característico

Coloración rojiza

REACCIÓN DE BENEDICT

Resultado: negativa

Coloración roja nula.

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La ciencia es el gran antídoto contra el veneno de la superstición. 8

RECOMENDACIONES

- El cloroformo es uno de los tóxicos de tipo volátil por lo que para esta práctica se

debe usar implementación que cubra las vías aéreas, y si es posibles los ojos, además

de siempre mantener la piel aislada de este toxico ya que se puede absorber vía tópica.

- Tener cuidado con las sustancias de uso restringido o peligroso, para evitar

accidentes.

- Desechar el material usado, y los restos del cobayo en un lugar seguro que no valla a

ocasionar problemas a la comunidad.

CUESTIONARIO

1) CUALES SON LAS PROPIEDADES QUIMICAS DEL CLOROFORMO?

PROPIEDADES QUIMICAS:

Los productos de descomposición del cloroformo son: fosgeno, cloruro de hidrógeno, cloro

y óxidos de carbono y cloro. Todos ellos corrosivos y muy tóxicos.

El cloroformo reacciona violentamente con:

-Acetona en medios muy básicos.

-Fluor, tetróxido de dinitrógeno, metales como aluminio, magnesio, sodio, litio y potasio,

sodio en metanol, metóxido de sodio, nitrometano, isopropilfosfina y derivados alquilados

de aluminio.

Es oxidado por reactivos como ácido crómico, formando fosgeno y cloro. Se descompone a

temperatura ambiente por acción de la luz del sol en ausencia de aire y en la oscuridad en

presencia de este último, siendo uno de los productos de esta descomposición el fosgeno, el

cual es muy tóxico.

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La ciencia es el gran antídoto contra el veneno de la superstición. 9

2) DETALLE LOS USOS DEL CLOROFORMO

Fue utilizado como un anestésico temprano en cirugía y odontología y por esta razón las

personas que trabajan con el material deben evitar la inhalación de sus vapores.

Hoy en día el cloroformo tiene un importante número de usos tales como:

- En química se utiliza en la separación orgánica.

- En la fabricación de plásticos que se utiliza en el proceso de unión.

- Se utiliza en síntesis orgánica.

- Se utiliza como un precursor en la fabricación de teflón (antiadherente).

- En la Primera Guerra Mundial el cloroformo fue usado como arma química.

- El cloroformo es clasificado como nocivo en caso de ingestión y como un irritante

para la piel. La exposición por inhalación puede causar graves daños a la salud.

3) QUE ACCIONES DE EMERGENCIA TOMARIA CON EL CLOROFORMO?

Primeros auxilios:

Una exposición aguda al cloroformo requiere descontaminación y soporte de vida básico para

la víctima. El personal de emergencia debe usar ropa de protección adecuada, dependiendo

del grado de contaminación. Toda la ropa y equipo contaminado debe almacenarse en

recipientes especiales, para darles el tratamiento de descontaminación adecuado, más tarde.

De manera general, la víctima debe moverse a una zona ventilada. Evaluar signos vitales

como: pulso y velocidad de respiración. Si no hay pulso, proporcionar rehabilitación

cardiopulmonar. Si no respira, proporcionar respiración artificial. Si la respiración es

dificultosa, proporcionar oxígeno. No existe un antídoto específico y se sabe que no debe

darse adrenalina a las personas que sufren envenenamiento por cloroformo.

Ojos y Piel: Quitar la ropa contaminada, y lavar según sea el caso, ojos y/o piel con agua

corriente en gran cantidad. Los ojos pueden lavarse también con disolución salina neutra

asegurándose de abrir bien los párpados.

Ingestión: Mantener a la víctima en reposo y caliente. No inducir el vómito. Puede

suministrarse carbón activado, si la víctima está consciente. Usar de 15 a 30 g, para niños, o

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La ciencia es el gran antídoto contra el veneno de la superstición. 10

de 50 a 100 g, para adultos con 1/2 a 1 taza de agua. Provocar excreción con un cartártico

salino o sorbitol para víctimas concientes, los niños requieren de 15 a 30 g y los adultos de

50 a 100 g.

EN TODOS LOS CASOS DE EXPOSICION, EL PACIENTE DEBE SER

TRANSPORTADO AL HOSPITAL TAN PRONTO COMO SEA POSIBLE.

Control de fuego:

Use equipo de respiración autónoma y ropa de protección adecuada, dependiendo de la

magnitud del incendio. Recordar, que a pesar de que el compuesto es no inflamable, los

productos de descomposición por calentamiento (entre ellos fosgeno) son muy peligrosos.

Mover los recipientes fuera del área de fuego cuando sea posible. Atacar el fuego desde una

distancia segura. El agua utilizada para controlar el fuego no debe tirarse al drenaje por lo

que, si es necesario, debe construirse un dique para contenerla y tratarla posteriormente.

Para incendios pequeños, pueden utilizarse extinguidores de polvo químico seco, dióxido de

carbono, agua, neblina o espuma.

Fugas y derrames:

Utilizar bata, lentes de seguridad y guantes o el equipo de seguridad que sea necesario,

dependiendo de la magnitud del siniestro.

Mantenga el material alejado de fuentes de agua y drenajes. Construir diques para almacenar

el líquido, en caso necesario. Para ello puede utilizarse tierra, sacos de arena o espuma de

poliuretano. El líquido derramado puede absorberse con cemento y para inmovilizar el

derrame, se utilizan agentes gelantes universales. Para almacenar el agua de desecho, utilizar

recipientes especializados o excavar un foso y absorber con sacos de arena o succionadores.

Para el agua contaminada puede utilizarse carbón activado, en regiones de 10 ppm o más,

aplicarlo, en una proporción 10:1 carbón activado/derrame.

Desechos:

En pequeñas cantidades puede dejarse evaporar en una campana extractora. En caso de

grandes cantidades, debe mezclarse con combustible, como queroseno, e incinerarse en

equipo especializado para evitar la generación de fosgeno.

ALMACENAMIENTO

Los recipientes que contienen este producto deben ser almacenados en lugares alejados de la

luz directa del sol, ya que se descompone lentamente a productos como el fosgeno

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La ciencia es el gran antídoto contra el veneno de la superstición. 11

WEBGRAFÍA

- PROPIEDADES QUIMICAS DEL CLOROFORMO (en línea)

Disponible en: http://www.quimica.unam.mx/IMG/pdf/7cloroformo.pdf

- USOS DEL CLOROFORMO (en línea)

Disponible en: http://cloroformo.org/usos/

- ACCIONES DE EMERGENCIA (en línea)

Disponible en: http://www.quimica.unam.mx/IMG/pdf/7cloroformo.pdf

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La ciencia es el gran antídoto contra el veneno de la superstición. 12

ANEXO:

Fig.1. DATOS OBTENIDOS CON EL MONITOREO DEL COBAYO Y LOS ANALISIS

COLORIMETRICOS.

GLOSARIO:

- FOSGENO: (COCl2), es un importante componente químico industrial utilizado para

hacer plásticos y pesticidas. A temperatura ambiente (70 °F / 21 °C), el fosgeno es

un gas venenoso. Si es enfriado y presurizado, el gas de fosgeno puede ser convertido

en líquido, de forma que pueda ser transportado y almacenado. Cuando se libera

fosgeno líquido, éste se transforma rápidamente en gas que permanece cerca del suelo

y se propaga con rapidez (es más denso que el aire y por esa razón se expande hacia

áreas más bajas). Al fosgeno también se le conoce por su denominación militar “CG”

- ALQUILO: es un sustituyente, formado por la separación de un átomo de hidrógeno

de un hidrocarburo saturado o alcano, 1 para que así el alcano pueda enlazarse a otro

átomo o grupo de átomos.

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La ciencia es el gran antídoto contra el veneno de la superstición. 13

- POLÍMEROS: son macromoléculas (generalmente orgánicas) formadas por la unión

de moléculas más pequeñas llamadas monómeros.

El almidón, la celulosa, la seda y el ADN son ejemplos de polímeros naturales, entre

los más comunes de estos y entre los polímeros sintéticos encontramos el nailon, el

polietileno y la baquelita.

- CATÁRTICA: es una sustancia que acelera la defecación. Esto es en contraste a

laxante: sustancia que facilita defecar, usualmente por ablandar las heces. Es posible

que una sustancia tenga ambos roles de laxante y de catártico. Hay agentes como

semillas de Plantago ovata que incrementan el volumen de las heces.

Catárticos como el sorbitol se usan en ocasiones como tratamiento a

envenenamiento.

- POLIURETANO :(PU) es un polímero que se obtiene mediante condensación de

bases hidroxílicas combinadas con isocianatos. Los poliuretanos se clasifican en dos

grupos, definidos por su estructura química, diferenciados por su comportamiento

frente a la temperatura. De esta manera pueden ser de dos tipos: Poliuretanos

termoestables o poliuretanos termoplásticos (según si degradan antes de fluir o si

fluyen antes de degradarse, respectivamente).1 Los poliuretanos termoestables más

habituales son espumas, muy utilizadas como aislantes térmicos y como espumas

resistentes.

INTOXICACIÓN POR CLOROFORMO

Generalidades

El cloroformo es el triclorometano (CHCl3). Inicialmente se empleó como agente anestésico,

pero poco después se abandonó este uso por s gran toxicidad hepática y renal.es un líquido

incoloro y no inflamable, de olor y sabor dulzón, extremadamente volátil y muy liposoluble.

Fuentes de exposición

Está disponible como disolvente en laboratorios y en la industria química.se ha prohibido

su uso como sustancia aromática en pastas de dientes y otros productos como resultado de su

efecto carcinogénico en animales después de exposiciones crónicas. La intoxicación aguda y

crónica puede ocurrir por exposición a sus vapores.

Toxicocinetica y mecanismo de acción

El cloroformo es un anestésico potente y origina una profunda depresión del SNC. Entra en

el organismo por vía respiratoria, digestivo dérmico. En humanos puede producir la muerte

con la ingestión oral de tan solo 10 ml .exposiciones prolongadas o repetidas a los vapores

pueden producir hepatotoxicidad, severa que se característica por necrosis centrolobular.

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La ciencia es el gran antídoto contra el veneno de la superstición. 14

Asimismo se ha descrito degeneración grasa del hígado, el riñón el corazón. El mecanismo

de lesión parece ser la oxidación a nivel hepático del cloroformo a fosgeno a través del

sistema microsomal. También se forma fosgeno cuando los vapores de cloroformo se

exponen al calor de una llama. El fosgeno inhalado se convierte en ácido hidroclorhídrico y

dióxido de carbono cuando reacciona con el agua en el alvéolo; y el ácido produce edema

pulmonar.

Cuadro clínico

La severidad de los síntomas por exposición aguda, vía respiratoria, digestivo, dérmica, está

en relación directa con la dosis absorbida. El cloroformo, cuando se inhala, produce todos

los niveles de anestesia, teniendo un margen de seguridad muy estrecho, debido a que causa

fallo cardiaco y respiratorio de forma casi simultánea. No puede detectarse por el olfato hasta

que su concentración excede de 400 ppm. Una exposición durante 10 minutos a

concentraciones de 1000 ppm produce síntomas generales como náuseas, vómitos, vértigo

cefaleas .exposiciones a una concentración de 1000 a 4000 ppm origina desorientación y

concentraciones de 10000 a 20000 ppm dan lugar a pérdida de conciencia, pudiendo originar

la muerte.

Dependiendo de la dosis absorbida va a producir alteraciones más o menos importantes de la

función hepática, renal y cardiaca.

El cloroformo, por su acusado poder como disolvente de grasas, en contacto con la piel da

lugar a dermatitis local, y en los ojos produce irritación corneal.

Reacciones en medio biológico

El material de la investigación se somete a destilación con arrastre de vapor en medio acido

tartárico, y en el destilado se realiza las reacciones de identificación.

1. En el fondo de un tubo de ensayo se mezclan unas cuantas gotas de cloroformo con otras

tantas de alcohol de 95ª que contiene un poco de nitrato de plata, se inflama la mezcla y se

observa que esta arde con un llama bordeada de verde y que el ácido clorhídrico formado

reacciona con el nitrato de plata disuelto originando un precipitado de cloruro de plata.

2. Reacción de Dumas.- al adicionar unas gotas de destilado que contiene cloroformo a unos

mililitros de potasa alcohólica (proporción 1:10), se originan formiatos y cloruro de potasio.

CHCl3 + 4 KOH KCl + HCO2K + H 2 O

Se neutralizan la mezcla, y se separan en dos porciones a una porción se le agrega percloruro

de hierro produciendo un color rojo en frío o un precipitado en caliente.

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La ciencia es el gran antídoto contra el veneno de la superstición. 15

A la otra porción se le agrega solución de nitrato de plata produciéndose un precipitado de

cloruro de plata que se disuelve en amoníaco diluido.

3.- Reacción de Lustgarten.- al calentar la muestra con unos miligramos de beta naftol y

solución alcohólica concentrada de potasa (preferentemente un trozo de potasa y algunas

gotas de alcohol), se obtiene un franco color azul.

Si se sustituye el B-naftol por timol el color es Amarillo más o menos oscuro; con resorcinol

la coloración e roja – violáceo y con la piridina rojo.

4.- Reacción de fujiwara.-En un tubo de ensayo, se vierte 2 ml de lejía de sosa 1:2 con una

capa de 2mm de piridina y luego la muestra que contiene el cloroformo; se agitan, podemos

por unos instantes en baño de María y se deja en reposo; se convierte en una materia

coloreada que varía del rosa al rojo vivo, soluble en piridina .Esta reacción sensible para unos

pocos microgramos de cloroformo y es aplicable en la orina de algún sujeto que haya

absorbido de 15-20 g de agua clorofórmica.

5.-Reacción de roseboom.- se disuelve un pequeño cristal de yodo en la solución muestra y

se agregan unos pocos miligramos de clorhidrato de piperacina ; si el cloroformo está

presente en la muestra, la coloración violeta inicial cambia a amarilla rojiza al disolverse el

alcaloide.

6.-Reacción de Benedict.- si la solución muestra contiene cloroformo, reduce el reactivo de

Benedict, y de acuerdo a la concentración del tóxico puede producirse una gama de colores

que van desde el verde, amarillo, naranja o rojo ladrillo.