Practica # 5 cetona

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  1. 1. Todo es veneno, Nada es veneno, Todo depende de la dosis Pgina 1 UNIVERSIDAD TCNICA DE MACHALA UNIDAD ACADEMICA DE CIENCIAS QUMICAS Y DE LA SALUD CARRERA DE BIOQUMICA Y FARMACIA LABORATORIO DE TOXICOLOGA. Profesor: Dr.- Carlos Garca MSc. Alumno: Oswaldo Luis Silva Oyola. Curso: 5to Bioq. Farm. Paralelo: B Grupo: # 7 Fecha de Elaboracin de la Prctica: Martes 30 de Junio del 2015. Fecha de Presentacin de la Prctica: Martes 7 de Julio del 2015. PRCTICA N 5 Ttulo de la Prctica: INTOXICACIN POR CETONA . Animal de Experimentacin: Rata wistar de color: blanco. Va de Administracin: Va Parenteral. (INTRAPERITONIAL.) Volumen Administrado: 6 ml TIEMPOS: Inicio de la prctica: 8:05 am Dosis adminstrada: 6 ml Animal de experimentacion: Rata wistar de color: blanco. Hora de administracin del toxico a la rata wistar : 8:10 am Deceso del animal: 8:24 am Hora de diseccion: 8:30 am Inicio de la destilacin: 8:55 am Finalizacin de la destilacin: 9:20 am Final de la prctica: 10:30 am SNTOMATOLOGIA DE LA RATA WISTAR. Convulciones. Nauseas. Vomito. Cefalias. Muerte. 10
  2. 2. Todo es veneno, Nada es veneno, Todo depende de la dosis Pgina 2 OBJETIVOS DE LA PRCTICA: Observar la reaccin que presenta el animal de experimentacion ante una intoxicacin. Distinguir la sintomatologa de la intoxicacin por cetona con relacin a otras sustancias toxicas. Identificar la presencia de acetona en la sangre del animal mediante pruebas de reconocimiento. MATERIALES. SUSTANCIAS. Bata de laboratorio Equipo de destilacin Mechero Guantes de ltex Gorro Campana Zapatones Esptula Mascarilla Pipetas Erlenmeyer Tubos de ensayo Vasos de precipitacin Jeringuilla de 10cc Instrumentos de diseccin PROCEDIMIENTO: 1.- Primeramente Bioseguridad: Es decir colocarse la mascarilla, bata de laboratorio, gorro, zapatones y los guantes de ltex 2.- A continuacin se deben tener todos los materiales listos en la mesa de trabajo 3.- Con la jeringuilla tomamos 10 ml de etanol e inyectamos al cobayo (va parenteral) 5.- Observar la sintomatologa del toxico en el animal de experimentacin. 6.- Esperamos el tiempo de defuncin. 7.- Una vez muerto el cobayo se procede a amarrarlo en la tabla de diseccin. Hidrxido de sodio cido clorhdrico Reactivo yodo-mercrico Hidrxido de potasio Acido tartrico Acetona Solucin yodo-yodurada Nitroprusiato de Sodio Carbonato de sodio EQUIPO. Cocineta
  3. 3. Todo es veneno, Nada es veneno, Todo depende de la dosis Pgina 3 8.- Tomamos el bistur # 11 y lo colocamos en el soporte de bistur y procedemos a rasurar al animal de experimentacion. 9.- Con mucho cuidado cortar la piel, ejerciendo presin sobre las costillas y con una jeringa aspirar la sangre. 10- Retirar los rganos sin excepcin de uno y los colocamos en un vaso de precipitacin. 11.- Luego procedemos a trocear muy fino los rganos con unas tijeras. 12.- Transvasamos a un baln y colocamos las perlas de vidrio, agregar adems una pequea cantidad de cido tartrico y unos 3ml de agua destilada. 13.- Preparar 20 ml de NaOH al 20%, colocarlo en un erlenmeyer. 14.- Armar el equipo de destilacin y poner las vsceras a destilar durante 30 minutos y con la ayuda de lmparas de alcohol calentar con movimientos circulares. 15. Finalmente una vez obtenido el destilado se realizan las reacciones de identificacin: 1. Reaccin de Nessler. 2. Reaccin de Yodoformo. 3. Con nitroprusiato de Sodio. 4. Reaccin de Fritsh. 5. Reaccin de Frommer. 6. Reaccion con 2:4 Dinitrofenilhidracina. REACCIONES DE RECONOCIMIENTO: Despus de destilar el material de investigacin, en el destilado se realizan las reacciones de reconocimiento. 1. REACCIN DE NESSLER.- La acetona reacciona con el reactivo yodo-mercrico en medio alcalino un precipitado blanco, formado por un producto de adicin. 2. REACCIN DE YODOFORMO.- Al calentar una pequea cantidad de la muestra con una solucin yodo-yodurada en medio alcalino con KOH se produce yodoformo reconocible por su olor particular y su color amarillo.
  4. 4. Todo es veneno, Nada es veneno, Todo depende de la dosis Pgina 4 I2 + 2KOH INA + IOK + H2O CH3 CI3 CO + 3IOK CO + 3KOH CH3 CH3 CI3 CO + KOH CHI3 + CH3-COOK CH3 3. CON NITROPRUSIATO DE SODIO.- Con este reactivo, al que se le aade solucin de carbonato de sodio o NaOH, orina una coloracin amarilla-rojiza que al agregarle cido actico, dar un color violeta. 4. REACCIN DE FRITSH.- Se mezcla la solucin problema con un volumen igual de cido clorhdrico concentrado que contiene 5% de ramnosa, se calienta en bao de vapor. Aparece un color rojo, apreciable an en concentracin de 0.01 g de acetona por ml de solucin. 5. REACCIN DE FROMMER.- La muestra problema, al ser condensada con aldehdo saliclico en medio alcalino, produce un color rojo que permite su determinacin colorimtrica o fotomtrica por su gran sensibilidad y especificidad. 6. CON LA 2:4 DINITROFENILHIDRACINA: Disuelva una dos gotas del compuesto que se va investigar en 2 ml de etanol y aada a 3 ml del reactivo de 2,4-dinitrofenilhidracina. Agite vigorosamente y si no se forma inmediatamente .Un precipitado de color amarillo, anaranjado o rojo, deje reposar la solucin durante 15 minutos. REACTIVO. El reactivo se prepara disolviendo 3 g de 2,4- dinitrofenilhidracina en 15 ml de cido sulfrico concentrado. Entonces se aade esta solucin, a 20 ml de agua destilada y 70 ml de etanol al 95%. Se mezcla perfectamente la solucin y se filtra. COMENTARIOS: La mayora de las cetonas producen dinitrofelhidrazonas que son slidos insolubles. Al principio, el precipitado puede ser aceitoso y al reposar, volverse cristalino. Sin embargo, algunas cetonas dan dinitrofenilhidrazonas que son aceites.
  5. 5. Todo es veneno, Nada es veneno, Todo depende de la dosis Pgina 5 GRFICOS DE LA PRACTICA: Animal de experimentacin: Rata wistar . Inyectar 20 ml el toxico (metanol) en el animal de experimentacion. Observar los sntomas de la rata luego de la administracin del toxico hasta la muerte. Colocar a la rata en la tablay realizamos la diseccin. Colocacin de las vsceras (picadas lo ms finas posibles) en el vaso. Se arma el equipo de destilacin y comienza la destilacion. Se recoge el destilado, para las reacciones de identificacin. Aqui esta la solucion madre, para que los grupos hagan las reacciones de reconocimiento.
  6. 6. Todo es veneno, Nada es veneno, Todo depende de la dosis Pgina 6 REACCIONES DE RECONOCIMIENTO EN MEDIOS BIOLGICOS. REACCIN DE NESSLER : Reaccin Positivo No caracterstico No hay coloracin en medio alcalino debia dar un precipitado blanco. REACCION DE YODOFORMO: Reaccin Positivo ( + ) caracteristico Se produce yodoformo reconocible por su olor particular y su color transparente. REACCION DE NITROPRUSIATO DE SODIO: Reaccin Positivo ( + ) caracteristico Hay Coloracin rojo, caf o violeta. Antes (color transparente) Despues (Positivo caracteristico ) Antes (color transparente) Despues (Positivo caracteristico ) Antes (color transparente) Despues (Positivo No caracteristico )
  7. 7. Todo es veneno, Nada es veneno, Todo depende de la dosis Pgina 7 REACCIN DE FRITSH: Reaccin Positivo No caracteristico No hay coloracion rojo. REACCIN DE 2:4 DINITROFENILHIDRACINA: 7.1 Reaccin con Etanol Positivo (+) caracteristico Hubo coloracion amarillo. 7.2 Reaccin Positivo (+) caracteristico Hubo color anaranjado o rojo. OBSERVACIONES. En la realizacin de sta prctica al haber administrado los 6 ml de Cetona por va peritoneal en el cobayo se pudo observar el deceso del animal despus de 18 minutos, durante su agona present mareos, Antes (color transparente) Despues (Positivo No caracteristico ) Antes (color transparente) Despues (Positivo caracteristico ) Despues (Positivo caracteristico ) Antes (color transparente)
  8. 8. Todo es veneno, Nada es veneno, Todo depende de la dosis Pgina 8 perdida de la visin, convulsiones y seguidamente la muerte por la intoxicacin con cetona. Es importante mencionar que a travs de la aplicacin de las reacciones de identificacin en medios biolgicos, observamos la coloracin de las reacciones lo cual corroboro para determinar la presencia del (toxico) en la rata wistar. CONCLUSIONES. En la realizacin de esta prctica de esta prctica se aprendi a reconocer los efectos o sntomas provocados por la administracin del toxico (cetona) al organismo de un animal de experimentacin, as como tambin hemos identificado la presencia de este en la sangre del animal mediante pruebas especficas para el reconocimiento de este compuesto que puede originar a su vez coma o hasta incluso la muerte como se ha demostrado en esta prctica. RECOMENDACIONES. Asegurarse que el equipo est correctamente sellado, ya que de esta forma logramos impedir el escape de los vapores en el proceso de la destilacin, evitando as una intoxicacin. Utilizar el equipo de proteccin adecuado: bata de laboratorio, gorro, zapatones, guantes, mascarilla. Aplicar todas las normas de bioseguridad en el laboratorio. Utilizar pipetas especficas para cada reactivo. Preparar correctamente las sustancias a la concentracin requerida Acatar las sugerencias y guas expuestas por el ayudante, para de esta manera obtener muy buenos resultados en la realizacin de la prctica. CUESTIONARIO. 1. CULES SON LAS PROPIEDADES FSICAS DE LAS CETONAS? Los compuestos carbonlicos presentan puntos de ebullicin ms bajos que los alcoholes de su mismo peso molecular. No hay grandes diferencias entre los puntos de ebullicin de aldehdos y cetonas de igual peso molecular. Los compuestos carbonlicos de cadena corta son solubles en agua y a medida que aumenta la longitud de la cadena disminuye la solubilidad. 2. CMO ES LA OBTENCIN DE LA ACETONA? Se obtiene como subproducto en la fermentacin por medio de la cual se obtiene alcohol butlico; por oxidacin de isopropanol; por ruptura de hidroperxido de cumeno en la cual se obtiene, adems, fenol; por destilacin
  9. 9. Todo es veneno, Nada es veneno, Todo depende de la dosis Pgina 9 de acetato de calcio; por destil