Virus di Epstein-BarrVirus di Epstein-Barr

C. Mengoli, 2008C. Mengoli, 2008

TassonomiaTassonomia

► Il virus di Epstein-Barr, EBV, è un Il virus di Epstein-Barr, EBV, è un membro delle membro delle HerpesviridaeHerpesviridae. .

►Appartiene alla sottofamiglia Appartiene alla sottofamiglia GammaherpesvirinaeGammaherpesvirinae, genere , genere LymphocryptovirusLymphocryptovirus. .

►L'infezione è comune, diffusa L'infezione è comune, diffusa ubiquitariamente e, in età infantile, ubiquitariamente e, in età infantile, solitamente subclinica. solitamente subclinica.

Infezione acuta e Infezione acuta e oncogenicitàoncogenicità

►La mononucleosi infettiva (M.I.) con La mononucleosi infettiva (M.I.) con anticorpi eterofili è la manifestazione anticorpi eterofili è la manifestazione morbosa più comune (interessa soprattutto morbosa più comune (interessa soprattutto l’adolescente, il giovane adulto). l’adolescente, il giovane adulto).

►La La MI comprende la triade clinica costituita MI comprende la triade clinica costituita da febbre, linfoadenopatia, angina.da febbre, linfoadenopatia, angina.

► Inoltre EBV provoca il linfoma di Burkitt Inoltre EBV provoca il linfoma di Burkitt africano e il carcinoma nasofaringeo. africano e il carcinoma nasofaringeo.

Flash storicoFlash storico

►Descrizione di Filatov e Pfeiffer alla Descrizione di Filatov e Pfeiffer alla fine del 19° secolo della "febbre fine del 19° secolo della "febbre ghiandolare" (Drusenfieber) ghiandolare" (Drusenfieber)

►Descrizione di sei casi clinici di M.I. in Descrizione di sei casi clinici di M.I. in giovani adulti (Sprunt e Evans, 1921)giovani adulti (Sprunt e Evans, 1921)

►Downey, 1923: descrizione dettagliata Downey, 1923: descrizione dettagliata dei linfociti atipici nella M.I.dei linfociti atipici nella M.I.

Anticorpi eterofili, linfoma e Anticorpi eterofili, linfoma e virusvirus

► Paul-Bunnell (1932); Davidsohn (1937): Paul-Bunnell (1932); Davidsohn (1937): descrizione di agglutinine attive su emazie descrizione di agglutinine attive su emazie di pecora previo assorbimento dell'anticorpo di pecora previo assorbimento dell'anticorpo eterofilo su cellule renali di cavia o eritrociti eterofilo su cellule renali di cavia o eritrociti di bue.di bue.

► Descrizione di un linfoma insolito con Descrizione di un linfoma insolito con predilezione di capo e collo (Burkitt, 1958)predilezione di capo e collo (Burkitt, 1958)

► Epstein, Barr, Achong (1964): descrizione di Epstein, Barr, Achong (1964): descrizione di particelle virali simili-erpetiche in colture di particelle virali simili-erpetiche in colture di cellule di linfoma di Burkitt. cellule di linfoma di Burkitt.

Aspetti virologiciAspetti virologici

► Simmetria icosaedrica, Simmetria icosaedrica, = 180-200 mm, = 180-200 mm, involucro complesso. Nucleocapside involucro complesso. Nucleocapside = 100 = 100 nm, 162 capsomeri allineati regolarmente con il nm, 162 capsomeri allineati regolarmente con il “modulo erpetico" 5:3:2.“modulo erpetico" 5:3:2.

► Virione costituito da numerosi polipeptidi Virione costituito da numerosi polipeptidi distinguibili all'analisi SDS-PAGE. distinguibili all'analisi SDS-PAGE.

► Genoma a DNA, lineare, doppio filamento, 172 Genoma a DNA, lineare, doppio filamento, 172 kbp, 101 kbp, 101 3 megadaltons. 3 megadaltons.

► In vivoIn vivo cresce produttivamente nelle cellule cresce produttivamente nelle cellule epiteliali orafaringee e nei linfociti B; ambedue i epiteliali orafaringee e nei linfociti B; ambedue i tipi di cellula hanno recettori di superficie per tipi di cellula hanno recettori di superficie per EBV (CD21, recettore per C3d).EBV (CD21, recettore per C3d).

Linfoma e MononucleosiLinfoma e Mononucleosi

Werner e Gertrude Henle (1966, 1968):Werner e Gertrude Henle (1966, 1968):► sviluppsviluppanoano un procedimento di IF un procedimento di IF

indiretta per ricercare anticorpi anti-indiretta per ricercare anticorpi anti-EBVEBV

► ddimostraimostranono alti titoli anticorpali nel alti titoli anticorpali nel siero di pazienti con linfoma di Burkitt siero di pazienti con linfoma di Burkitt e con M.I.e con M.I.

LinfotropismoLinfotropismo

► Il virus cresce Il virus cresce inin vitrovitro solo nei linfociti B solo nei linfociti B umani e di certi primati ; generalmente non umani e di certi primati ; generalmente non produce effetto citopatico. produce effetto citopatico.

► A seguito dell'infezione, cellule che A seguito dell'infezione, cellule che contengono il genoma virale si trasformano contengono il genoma virale si trasformano o immortalizzano. o immortalizzano.

► Le cellule trasformate sono positive alla Le cellule trasformate sono positive alla ricerca degli antigeni virali in sede nucleare ricerca degli antigeni virali in sede nucleare e alla ricerca del genoma virale mediante e alla ricerca del genoma virale mediante ibridazione DNA-DNA. ibridazione DNA-DNA.

Eventi precociEventi precoci

► I linfociti B (e certi linfociti I linfociti B (e certi linfociti nullnull con recettori con recettori per il complemento) sono dotati di recettore per il complemento) sono dotati di recettore per EBV.per EBV.

► Nel nucleo della cellula infetta compare EBNA Nel nucleo della cellula infetta compare EBNA prima che inizi la sintesi di proteine virali. prima che inizi la sintesi di proteine virali.

► Nelle cellule trasformate alcune copie del Nelle cellule trasformate alcune copie del genoma virale possono integrarsi nel DNA genoma virale possono integrarsi nel DNA cellulare, benchè la maggior parte rimanga in cellulare, benchè la maggior parte rimanga in forma libera, circolare, non integrata forma libera, circolare, non integrata (episomiale). (episomiale).

IntegrazioneIntegrazione

►L'integrazione viene stimolata da L'integrazione viene stimolata da mitogeni B-specifici (LPS). mitogeni B-specifici (LPS).

►La cellula ospite si immortalizza sia La cellula ospite si immortalizza sia che il virus si integrato, sia che sia che il virus si integrato, sia che sia episomiale, sia che si trovi in ambedue episomiale, sia che si trovi in ambedue le forme.le forme.

Linee linfoblastoidiLinee linfoblastoidi

► Normalmente meno del 10% delle cellule B Normalmente meno del 10% delle cellule B esposte al virus forma linee continue; la esposte al virus forma linee continue; la cellula trasformata contiene numerose cellula trasformata contiene numerose genocopie virali ; produce e/o secerne Ig.genocopie virali ; produce e/o secerne Ig.

► Le linee cellulari che contengono genoma di Le linee cellulari che contengono genoma di EBV si distinguono in EBV si distinguono in produttriciproduttrici e e nonnon produtticiproduttici. Le prime contengono VCA . Le prime contengono VCA (antigene virale capsidico) nel citoplasma, (antigene virale capsidico) nel citoplasma, liberano virioni maturi, esprimono EA (early liberano virioni maturi, esprimono EA (early antigens) in presenza di 5'-bromo-antigens) in presenza di 5'-bromo-deossiuridina (BUdR) o 5 -iodo, 2-deossiuridina (BUdR) o 5 -iodo, 2-deossiuridina (IUdR).deossiuridina (IUdR).

LatenzaLatenza

►Per la maggior parte del tempo EBV Per la maggior parte del tempo EBV rimane latente sia in rimane latente sia in vivovivo (nel linfociti (nel linfociti circolanti) sia circolanti) sia in vitroin vitro (in linee cellulari (in linee cellulari trasformate). trasformate).

►La trasmissione parenterale è raraLa trasmissione parenterale è rara ma ma riveste importanza nel paziente riveste importanza nel paziente trapiantatotrapiantato. .

EpidemiologiaEpidemiologia

► Negli USA e nel Regno Unito prima dei 5 Negli USA e nel Regno Unito prima dei 5 anni il 50% della popolazione è anni il 50% della popolazione è sieroconvertita. sieroconvertita.

► Nell'età adulta il 90-95% della popolazione è Nell'età adulta il 90-95% della popolazione è in possesso di anticorpi. in possesso di anticorpi.

► Nei pesi tropicali e nei gruppo socio-Nei pesi tropicali e nei gruppo socio-economici inferiori gli anticorpi compaiono economici inferiori gli anticorpi compaiono prima. prima.

► Una seconda “ondata” di sieroconversioni si Una seconda “ondata” di sieroconversioni si ha nel secondo decennio di vita.ha nel secondo decennio di vita.

Prima infezionePrima infezione

► La malattia clinicamente manifesta compare La malattia clinicamente manifesta compare più frequentemente negli adolescenti e nelle più frequentemente negli adolescenti e nelle popolazioni dove l'infezione primaria ha popolazioni dove l'infezione primaria ha luogo tardivamente (fra i 15 e 24 anni).luogo tardivamente (fra i 15 e 24 anni).

► L'incidenza è uguale in uomini e donne (2 L'incidenza è uguale in uomini e donne (2 anni prima in media nella donna, all’età di anni prima in media nella donna, all’età di 14-16 anni). 14-16 anni).

► Gli adolescenti e gli adulti con infezione Gli adolescenti e gli adulti con infezione primaria sviluppano una M.I. nel 25-70% dei primaria sviluppano una M.I. nel 25-70% dei casi.casi.

Viral sheddingViral shedding

►Cariche virionali modeste sono Cariche virionali modeste sono documentabili nella faringe dei malati documentabili nella faringe dei malati con M.I. (50-100% dei casi). con M.I. (50-100% dei casi).

►EBV viene emesso dall'orofaringe per EBV viene emesso dall'orofaringe per lunghi periodi (fino a 18 mesi) dopo la lunghi periodi (fino a 18 mesi) dopo la prima infezione. prima infezione.

► Il virus può essere isolato dal tampone Il virus può essere isolato dal tampone faringeo o gargarizzato di 12-25% dei faringeo o gargarizzato di 12-25% dei sieropositivi sanisieropositivi sani

ImmunosoppressiImmunosoppressi

Gli immunosoppressi emettono il virus Gli immunosoppressi emettono il virus con frequenza maggiore: con frequenza maggiore: pazienti con tumori solidi (27%)pazienti con tumori solidi (27%) pazienti con HIV-1 (50%)pazienti con HIV-1 (50%) trapiantati renali (56-70%)trapiantati renali (56-70%) pazienti critici affetti da leucemie o linfomi pazienti critici affetti da leucemie o linfomi

(74-92%).(74-92%).

CircolazioneCircolazione

► Il virus è labile nell'ambiente esterno. Il virus è labile nell'ambiente esterno. ► Trattasi di un agente molto diffuso a bassa Trattasi di un agente molto diffuso a bassa

contagiosità che richiede contatto intimo tra contagiosità che richiede contatto intimo tra virus sheddervirus shedder asintomatico e individuo asintomatico e individuo suscettibile. suscettibile.

► Le epidemie non esistono. Le epidemie non esistono. ► I malati con M.I. riportano contatti con altri I malati con M.I. riportano contatti con altri

pazienti affetti dalla stessa malattia solo nel pazienti affetti dalla stessa malattia solo nel 6% dei casi. 6% dei casi.

► La morbilità più alta si osserva nei collegi La morbilità più alta si osserva nei collegi universitari e fra i militari. universitari e fra i militari.

ClinicaClinica► Faringite, febbre, linfadenopatia. Faringite, febbre, linfadenopatia. ► Febbre nel 90% dei casi.Febbre nel 90% dei casi.► Malessere e cefalea sono frequenti.Malessere e cefalea sono frequenti.► La faringotonsillite con impegno bilaterale delle tonsille, La faringotonsillite con impegno bilaterale delle tonsille,

iperemia (con o senza essudato); frequenti le petecchie iperemia (con o senza essudato); frequenti le petecchie al palato.al palato.

► Eruzione esantematica nel 5% (90-100% se il malato Eruzione esantematica nel 5% (90-100% se il malato prende ampicillina) prende ampicillina) Il Il rashrash può essere maculopapuloso, petecchiale, scarlattinoso, può essere maculopapuloso, petecchiale, scarlattinoso,

orticarioide o simile a eritema multiformeorticarioide o simile a eritema multiforme► Adenopatia comune (80-90% dei casi), solitamente Adenopatia comune (80-90% dei casi), solitamente

generalizzata, più evidente nel distretto retrocervicale.generalizzata, più evidente nel distretto retrocervicale.► Splenomegalia nel 50% dei casi.Splenomegalia nel 50% dei casi.► Lieve epatite con epatomegalia (10-15% dei casi), Lieve epatite con epatomegalia (10-15% dei casi),

elevazione transaminasemica (80-90%), ittero (5%).elevazione transaminasemica (80-90%), ittero (5%).

ComplicanzeComplicanze

►Rare localizzazioni d’organo risultano Rare localizzazioni d’organo risultano rappresentate da rappresentate da sindromi neurologiche, sindromi neurologiche, pericardite, pericardite, miocardite, miocardite, orchite.orchite.

Quadro ematologico della MIQuadro ematologico della MI

► Più del 50% dei leucociti sono cellule Più del 50% dei leucociti sono cellule mononucleate, più del 10% dei linfociti sono atipicimononucleate, più del 10% dei linfociti sono atipici cellule di Downeycellule di Downey

► Trattasi di linfociti CD8+, soppressori/citotossici, Trattasi di linfociti CD8+, soppressori/citotossici, attivati attivati

► Il citoplasma ampio, basofilo, vacuolizzato, con Il citoplasma ampio, basofilo, vacuolizzato, con margini talvolta “arrotolati”; il nucleo è ovale, margini talvolta “arrotolati”; il nucleo è ovale, reniforme, lobulato, con cromatina irregolare; reniforme, lobulato, con cromatina irregolare; talora sono riconoscibili nucleoli talora sono riconoscibili nucleoli

► Nel complesso, il quadro ematologico periferico Nel complesso, il quadro ematologico periferico appare polimorfo appare polimorfo

► Il midollo osseo è normaleIl midollo osseo è normale

MorteMorte

► Può conseguire a malattia grave (rara), con Può conseguire a malattia grave (rara), con polmonite, febbre, pancitopenia, polmonite, febbre, pancitopenia, proliferazione virale esuberante in individui proliferazione virale esuberante in individui apparentemente sani in precedenza apparentemente sani in precedenza

► La morte può anche essere causata da La morte può anche essere causata da complicanze neurologiche, rottura di milza, complicanze neurologiche, rottura di milza, complicanze ematologiche complicanze ematologiche (trombocitopenia, granulocitopenia), (trombocitopenia, granulocitopenia), insufficienza epatica (rarissima), miocardite, insufficienza epatica (rarissima), miocardite, ostruzione delle vie aereeostruzione delle vie aeree

Sindrome di DuncanSindrome di Duncan

► EBV può svelare una immunodeficienza EBV può svelare una immunodeficienza selettiva familiare legata al cromosoma X, la selettiva familiare legata al cromosoma X, la sindrome di Duncan. sindrome di Duncan.

► I maschi affetti possono morire in corso di I maschi affetti possono morire in corso di infezione primaria (nel 40% dei casi), infezione primaria (nel 40% dei casi), oppure, diversi anni anni dopo l’episodio di oppure, diversi anni anni dopo l’episodio di M.I., possono presentare:M.I., possono presentare: agammaflobulimeniaagammaflobulimenia linfoma linfociticolinfoma linfocitico anemia aplasticaanemia aplastica

Complicanze ematologicheComplicanze ematologiche

►Anemia emolitica autoimmune da Anemia emolitica autoimmune da agglutinine fredde (solitamente anti-i).agglutinine fredde (solitamente anti-i).

►Trombocitopenia; raramente grave; Trombocitopenia; raramente grave; possibile genesi autoimmune. possibile genesi autoimmune.

ReticoloendoteliteReticoloendotelite

► V’è una reticoloendotelite diffusa. V’è una reticoloendotelite diffusa. ► I linfonodi sono ingrossati, con un aumento del I linfonodi sono ingrossati, con un aumento del

numero dei follicoli che appaiono ingranditi. numero dei follicoli che appaiono ingranditi. ► I centri germinativi sono ingrossati; contengono I centri germinativi sono ingrossati; contengono

blasti, istiociti e linfociti. blasti, istiociti e linfociti. ► La milza é aumentata di volume (di 2 o 3 volte) La milza é aumentata di volume (di 2 o 3 volte)

con edema capsulare e trabecolare. V’è con edema capsulare e trabecolare. V’è iperplasia della polpa rossa, nella quale sono iperplasia della polpa rossa, nella quale sono evidenti cellule blastiche pleiomorfiche; la polpa evidenti cellule blastiche pleiomorfiche; la polpa bianca è relativamente normale; sono frequenti bianca è relativamente normale; sono frequenti emorragie focali, soprattutto subcapsulari. emorragie focali, soprattutto subcapsulari.

Fegato e SNCFegato e SNC

►Nel fegato sono riconoscibili alterazioni Nel fegato sono riconoscibili alterazioni modeste con infiltrati linfo-monocitario modeste con infiltrati linfo-monocitario negli spazi portali.negli spazi portali.

►Per quanto riguarda il sistema nervoso Per quanto riguarda il sistema nervoso centrale, nei casi fatali sono stati centrale, nei casi fatali sono stati notati segni di degenerazione notati segni di degenerazione neuronale, manicotti perivasali, neuronale, manicotti perivasali, emorragie perivascolari, iperplasia emorragie perivascolari, iperplasia astrocitaria; l'infiltrazione astrocitaria; l'infiltrazione mononucleare è scarsa.mononucleare è scarsa.

Patogenesi della MIPatogenesi della MI

► La via di penetrazione del virus è l'orofaringe. La via di penetrazione del virus è l'orofaringe. ► Le cellule dell'epitelio sono dotate di recettori Le cellule dell'epitelio sono dotate di recettori

per EBV (gli stessi che legano C3d). per EBV (gli stessi che legano C3d). ► Studi di citoibridazione hanno dimostrato EBV Studi di citoibridazione hanno dimostrato EBV

DNA entro le cellule epiteliali orofaringee. DNA entro le cellule epiteliali orofaringee. ► Il virus infetta anche le cellule B linfocitarie Il virus infetta anche le cellule B linfocitarie

orofaringee. orofaringee. ► Nel corso dei 30-50 gg di incubazione il virus si Nel corso dei 30-50 gg di incubazione il virus si

dissemina nel tessuto linforeticolare, dissemina nel tessuto linforeticolare, sistemicamente.sistemicamente.

Risposta immuneRisposta immune

►La risposta immune contro i B-linfociti La risposta immune contro i B-linfociti trasformati è umorale e cellulare. trasformati è umorale e cellulare.

►Fra gli anticorpi vi sono Fra gli anticorpi vi sono quelli diretti contro il virus, anti-EBV quelli diretti contro il virus, anti-EBV anticorpi eterofili.anticorpi eterofili.

Anticorpi virus-specificiAnticorpi virus-specifici

La tecnica è quella dell’immunofluorescenza La tecnica è quella dell’immunofluorescenza indiretta (nel caso di EBNA, indiretta (nel caso di EBNA, immunofluorescenza indiretta anti-immunofluorescenza indiretta anti-complemento). Possono essere ricercati complemento). Possono essere ricercati anticorpi contro quattro principali sistemi - anticorpi contro quattro principali sistemi - antigene: antigene: VCA VCA EA/D (EA/D (early antigen - diffuse componentearly antigen - diffuse component) ) EA/R (EA/R (early antigen - restricted componentearly antigen - restricted component) ) EBNA EBNA

anti-VCAanti-VCA

IgM anti-VCA: persistono 4-8 sett., IgM anti-VCA: persistono 4-8 sett., sensibili (100%) e specifici; precocisensibili (100%) e specifici; precoci

IgG anti-VCA: persistono a vita IgG anti-VCA: persistono a vita (significativi se ad alto titolo, (significativi se ad alto titolo, importanza epidemiologica); precociimportanza epidemiologica); precoci; ; ggli anticorpi neutralizzanti si correlano li anticorpi neutralizzanti si correlano con le IgG anti-VCA e sono indicatori di con le IgG anti-VCA e sono indicatori di immunitàimmunità

anti-EAanti-EA

► Anti-EA/D (IgG): poco sensibili (70%) Anti-EA/D (IgG): poco sensibili (70%) ma specifici, precoci; persistono 3-6 ma specifici, precoci; persistono 3-6 mesi, sono correlati con malattia severamesi, sono correlati con malattia severa

► anti-EA/R (IgG): pochissimo sensibili, anti-EA/R (IgG): pochissimo sensibili, malattia severa o protratta, persistono da malattia severa o protratta, persistono da 2 mesi a 2 anni; alti titoli nel linfoma di 2 mesi a 2 anni; alti titoli nel linfoma di Burkitt africano; indice di infezione Burkitt africano; indice di infezione riattivata nell'immunosoppressoriattivata nell'immunosoppresso

anti-EBNAanti-EBNA

►AAnti-EBNA: companti-EBNA: compaionoiono tardiva tardivamente mente (solitamente contrassegnano la (solitamente contrassegnano la risoluzione del quadro di M.I.)risoluzione del quadro di M.I.), , persistpersistonoono a vita nel 100% dei casi a vita nel 100% dei casi

►GGli anticorpi diretti contro antigeni li anticorpi diretti contro antigeni solubili (fissazione del complemento) solubili (fissazione del complemento) hanno il significato degli anti-EBNAhanno il significato degli anti-EBNA

Profilo sierologico delle sindromi associate ad EBVIg-

antigenenon

immunei. primaria in corso

i. primaria recente

i. passata riattivazione LB CNF

IgM-VCA - + - - - - -IgG-VCA - + + + + ++ ++IgA-VCA - +/- - - +/- - ++IgG-EA/D - + + - +/- - ++IgA-EA/D - - - - ? - ++IgG-EA/R - +/- +/- - +/- ++ -anti-EBNA

- - +/- + + + +

non assorbiti

cellule renali di

cavia

emazie di bue

M.I: ++++ +++ 0Malattia da siero +++ 0 0Soggetto sano conanticorpi anti-Forssman

+ 0 +

dopo assorbimento con

Anticorpi eterofiliAnticorpi eterofili

Anticorpi eterofiliAnticorpi eterofili

► Presenza transitoriaPresenza transitoria► AAgglutinangglutinanoo le emazie di pecora e di cavallo, le emazie di pecora e di cavallo,

emoliemolizzanozzano le emazie di bue. le emazie di bue. ► LLa classe immunoglobulinica è a classe immunoglobulinica è

prevalentemente IgM prevalentemente IgM ► AAnticorpi eterofili con specificità Paul-Bunnell nticorpi eterofili con specificità Paul-Bunnell

coesistono con anticorpi anti-Forssman coesistono con anticorpi anti-Forssman ► Non v'è buona correlazione fra gravità della Non v'è buona correlazione fra gravità della

malattia e titolo eterofili.malattia e titolo eterofili. ► Il significato patogenetico è incerto Il significato patogenetico è incerto

AutoanticorpiAutoanticorpi

►Sono anche frequenti auto-anticorpi Sono anche frequenti auto-anticorpi contro contro piastrine piastrine neutrofili neutrofili linfociti linfociti antigeni nucleari antigeni nucleari ampicillina. ampicillina.

Immunità cellulareImmunità cellulare

► Si osserva una depressione dell’immunità Si osserva una depressione dell’immunità cellulare, con anergia cutanea, ridotta cellulare, con anergia cutanea, ridotta rispota blastica a mitogeni ed antigenirispota blastica a mitogeni ed antigeni in in vitrovitro. .

► La risposta immune cellulare antivirale La risposta immune cellulare antivirale include cellule T citotossiche specifiche e include cellule T citotossiche specifiche e cellule cellule natural killernatural killer. .

► Linfociti T citotossici per linee cellulari Linfociti T citotossici per linee cellulari contenentei EBV sono stati documentati in contenentei EBV sono stati documentati in pazienti con MI.pazienti con MI.

RisoluzioneRisoluzione

►Con la guarigione clinica il virus non Con la guarigione clinica il virus non viene eliminato, ma persiste allo stato viene eliminato, ma persiste allo stato latente, potendo riattivarsi soprattutto latente, potendo riattivarsi soprattutto in corso di immunosoppressione. in corso di immunosoppressione.

►La MI non ricompare, comunque. La MI non ricompare, comunque.

Patogenicità sperimentalePatogenicità sperimentale

La malattia non è trasmissibile La malattia non è trasmissibile all'animale. Linfomi maligni sono stati all'animale. Linfomi maligni sono stati peraltro indotti in alcuni primati o in peraltro indotti in alcuni primati o in roditori neonati, ovvero roditori neonati, ovvero immunosoppressi, inoculando linee immunosoppressi, inoculando linee linfoblastoidi umana contenenti EBV o linfoblastoidi umana contenenti EBV o EBV EBV cell-freecell-free..

OncogenicitàOncogenicità

►L’infezione latente da EBV è associata L’infezione latente da EBV è associata alla generazione di linee B-linfocitarie alla generazione di linee B-linfocitarie immortalizzate immortalizzate

►Questo dimostra il potere oncogeno Questo dimostra il potere oncogeno del virusdel virus

LatenzaLatenza

►Dopo l’infezione primaria, i linfociti B Dopo l’infezione primaria, i linfociti B del sangue periferico contengono EBV del sangue periferico contengono EBV nella proporzione di un cellula su 10nella proporzione di un cellula su 1055 - - 101066. .

►Quando 10Quando 1066 - 10 - 1077 linfociti del sangue linfociti del sangue periferico ottenuti da un soggetto EBV-periferico ottenuti da un soggetto EBV-sieropositivo sono messi in coltura in sieropositivo sono messi in coltura in assenza di linfociti T funzionanti, è assenza di linfociti T funzionanti, è probabile che emergano linee continue probabile che emergano linee continue B-linfocitarie contenenti EBVB-linfocitarie contenenti EBV

Trasformazione e latenzaTrasformazione e latenza

► Il 10% delle cellule B primarie poste in Il 10% delle cellule B primarie poste in coltura in presenza di EBV si infetta e si coltura in presenza di EBV si infetta e si trasforma in elemento capostipite di linea trasforma in elemento capostipite di linea linfoblastoidelinfoblastoide

►La replicazione virale in queste cellule La replicazione virale in queste cellule trasformate è minimale o non trasformate è minimale o non dimostrabiledimostrabile

► La presenza del virus è tuttavia La presenza del virus è tuttavia documentata dall’espressione di antigeni documentata dall’espressione di antigeni caratteristici dell’infezione virale “latente”caratteristici dell’infezione virale “latente”

Marcatori di latenzaMarcatori di latenza

►Nei Nei B B linfociti B con infezione latentelinfociti B con infezione latente, , EBV EBV esprimeesprime non soltanto 6non soltanto 6 EBNA EBNAs es e 2 2 LMPLMPs, ma anche 2s, ma anche 2 piccoli RNA piccoli RNA nonnon polpoliiadenadeniilatlatii (EBER (EBERss) ) ee ““BamBam A A rightward transcriptsrightward transcripts””, or BART, or BARTss. .

►Questi prodotti genici mantengono Questi prodotti genici mantengono l’infezione latente e fanno sì che l’infezione latente e fanno sì che linfociti B quiescenti entrino nel ciclo linfociti B quiescenti entrino nel ciclo mitotico, iniziando una attività mitotico, iniziando una attività proliferativa continuaproliferativa continua. .

Espressione di geni di latenzaEspressione di geni di latenza

TrasformazioneTrasformazione

►L’effetto sulla crescita cellulare è L’effetto sulla crescita cellulare è immediato; la maggior parte delle immediato; la maggior parte delle cellule infettate entra nel primo ciclo cellule infettate entra nel primo ciclo di sintesi del DNA entro 48-72 ore di sintesi del DNA entro 48-72 ore dopo l’infezionedopo l’infezione

► Il linfocita B con fenotipo Il linfocita B con fenotipo restingresting è la è la cellula più suscettibile a subire la cellula più suscettibile a subire la conversione in elemento linfoblastoideconversione in elemento linfoblastoide

Sindromi neoplastiche associate ad EBVSindromi neoplastiche associate ad EBV

Neoplasie e sindromi Neoplasie e sindromi linfoproliferativelinfoproliferative

► Linfoma di Burkitt africano: associazione con EBV nel Linfoma di Burkitt africano: associazione con EBV nel 90% dei casi 90% dei casi

► LB extra-africano: associazione nel 15% dei casiLB extra-africano: associazione nel 15% dei casi► Carcinoma nasofaringeo (squamoso o Carcinoma nasofaringeo (squamoso o

indifferenziato, Cina meridionale); associazione nel indifferenziato, Cina meridionale); associazione nel 100% dei casi100% dei casi

► Altri linfomi B-linfocitari dell'immunodepresso, Altri linfomi B-linfocitari dell'immunodepresso, nell’AIDS in particolare; nell’nell’AIDS in particolare; nell’atassia-teleanatassia-teleanggectasiaectasia

► Sindromi linfoproliferative policlonali Sindromi linfoproliferative policlonali nell'immunosoppresso (soprattutto nell'immunosoppresso (soprattutto nel nel trapiantato trapiantato renale e midollare)renale e midollare): PTLD: PTLD

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lymphocytes/l

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TACROLIMUS

MYCOPHENOLATE

PREDNISONE

CYCLOSPORIN

ACUTE GVHD CHRONIC GVHD

BK+HEMATURIA

Plasma EBV assay

BMT

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(3500 copies/ml)(0 copies/ml)

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