EL LABORATORIO COMO

HERRAMIENTA EN EL

DIAGNÓSTICO DE

ENFERMEDADES

INFECCIOSAS

Laura Vanessa Moreno

Villamizar

Slenddy Dayhanna Padilla

Velandia

Laura Carolina Rodriguez

Nuñez

INFECCION VIRALLos virus causan infecciones familiares como

el resfrío común, la gripe y las verrugas.

Pueden causar enfermedades graves como

el VIH / SIDA, la viruela y las fiebres

hemorrágicas.Los virus son como secuestradores. Invaden las

células vivas normales y las aprovechan para

multiplicarse y producir otros virus como ellos. Las infecciones virales son difíciles de tratar

porque los virus viven dentro de las células de

su cuerpo. Están "protegidos" contra los

medicamentos, que suelen trasladarse a través

del torrente sanguíneo

Son muy pequeños, mucho más pequeños que

las bacterias

MANEJO DE LA

MUESTRAMÉTODOS

DIRECTOS

Detección de virus

Biopsia

Descamación como Papanicolaou

Frotis

Lavado bronquioalveolar

Secreción

Exudados

Líquido corporal

Sangre

INDIRECTOS

Serología:

IgM

IgG

Muestreo periódico:

Dengue

Hepatitis

SIDA

Enfermedades congénitas:

Líquido amniótico

Muestra de sangre al nacimiento

Respuesta

inmune del

virus

Cómo se evidencia la actividad viral en un cultivo celular?

1) Por efecto citopático (ECP) observables mediante el uso de microscopio invertido

Este método no permite la identificación del agente causal, por lo que

se requiere la

confirmación mediante técnicas específicas. IF- Inmunhistoquímica

(IHQ).

Ejemplo

LISIS Picornavirus(virus de la

Fiebre Aftosa,

Herpesvirusbovino)

DESPRENDIMIENTO y LISIS

(HVB-5)

SINCICIOS =

Paramyxovius (Virus sincicial

respiratorio)

VACUOLIZACION = BVDV

cepa citopática.

REDONDEAMIENTO

( Adenovirus)

2) Por visualización de cuerpos de inclusión (CI):

• Tipos Cowdry A y B, intranucleareas e intracitoplasmáticos. Su

visualización en cultivos celulares se efectúa previa tinción con

colorantes específicos.

Ejemplos:

• Virus de la rabia -Corpúsculos de Negri (intracitoplasmáticos en

neuronas) –Coloración de Seller’s.

• Los cuerpos de inclusión pueden visualizarse también en cortes

histológicos ; por ejemplo: Herpesvirus equino- Cowdry A

(intranucleares en hepatocitos y células bronquiales fetales)-

coloración de hematoxilina-eosina.

La detección de cuerpos de inclusión asociados, en algunos

casos es orientativa y en otras confirmatoria de la presencia

del agente.

VIRUS

RESPIRATORIOS

Principales virus

• VRS Lactantes

• Rinovirus (50%) Todas edades

• Adenovirus Todas edades

• Gripe Especialmente < 5 años

• Parainfluenza < 5 años

• Coronavirus

Muestras clínicas

• Frotis nasal

• Lavado nasal

• Frotis faringeo

• Aspirado nasofaringeo

o Obtenerlas en los tres

primeros dias despues del

inicio de los sintomas

Métodos de Dx directo

• Cultivo viral Gold

estándar

o Efecto citopatico

o Dx lento 5-7 días

o No todos son cultivables

HBoV

CoV

RV

PIV

• Detección de Ag mediante

Ac monoclonales

o Inmunofluerescencia

o Inmunocromatografía

o Enzimoinmunoanálisis

• Detección de ácidos

nucleicos

o PCR

Métodos indirecto: serología

VIRUS HERPES

HUMANO

Virus herpes simplex

Prueba de Tzank

• Tinción de Wright o Giemsa

• Observa sincitios e inclusiones nucleares de Cowdry

Detección de Ac

• Usa para primo infección y estudios epidemiológicos

Transmisión: Saliva

• VHS-1

Transmisión: Secreción vaginal

• VHS-2

Varicela zoster

• Virus se aisla de las

vesículas

• Prueba de Tzanck

• Técnicas de biología

molecular

Virus Epstein-Barr

• Mononucleosis infecciosa

• Deteccion en suero de:

o Linfocitos atipicos

o Anticuperpos heterofilicos No están en reactivaciones

o Anticuerpos anti-VEB

CITOMEGALOVIRUS

• Infecta al 50 – 80% de las

personas en el transcurso

de la vida

VHH 6, 7 y 8

• VHH6 Roseola niños

• VHH7 Roseola

• VHH8 Sarcoma de

KaposiOjo de lechuza

Están en tejidos y en orina

Papanicolau

HE

Eosina

PCR

Inmunofluorescencia

Enzimoinmunoanálisis

VHH8

VHH6VHH7

Cultivo viral

VHH7 VHH6

GASTROENTERITI

S VIRAL

Indicación para la

realización de

coprológico y Ag

virales en heces

o Valorar si hay deshidratación, historia clínica y exploración física

o Laboratorio Se usan cuando hay deshidratación

Descartar otros dx

• Diarrea mucosanguinolenta

• Inmunodeficiencias

• Diarrea de evolución

prolongada >15 días

• Diarrea en niño llegado de

países en vía de desarrollo

Diagnóstico

• ELISARotavirus

• Microscopía electrónica

• Ig especificas

• Proteínas virales ELISA – Aglutinación látexAdenovirus

• RT-PCRCalicivirus

• Microscopía electrónica

• ELISA

• Inmunoflorescencia

• PCR

• Cultivo

Astrovirus

ENFERMEDAD

ES

TROPICALES

DENGUELeucopenia

Incremento de transaminasas

en dengue febril

Trombocitopenia

Aumento de fibrinólisis

Hemoconcentración

IgM – IgG (ELISA) después de

la fase febril

PCR

Detección de proteína vírica

específica NS1 por ELISA

Inmunohistoquímica para

DENGUE

HEMORR

ÁGICO

Se transmite por:

Cuando el

mosquito Aedes

Aegypti se alimenta

con sangre de una

persona enfermas con

este virus y luego pica

a personas sanas.

La hembra deposita

sus huevos en las

paredes de

recipientes con agua

estancada, limpia y a

la sombra. Al beber

esta agua

CHIKUN

GUNYA

Leucopenia

Trombocitopenia

RT-PCR

Cultivo

Títulos altos de IgM

Concentración cuatro veces mayor de la

IgG convaleciente

RARA

VEZ

FIEBRE

AMARILLALeucopenia

Proteinuria 5 a 6 g/L

AST es el doble de, ALT

Tiempo de protrombina

IgM por ELISA en fase aguda y convaleciente

PCR

Inmunoanálisis de anticuerpos monoclonales contra

Ags víricos circulantes.

Albuminuria para Dx diferencial

Se transmite por:

•Cuando el mosquito Aedes

Aegypti, Aedes Haemagogus y

Aedes Sabethes se alimenta con

sangre de una persona enfermas con

este virus y luego pica a personas

sanas.

OTRAS

RABI

AAcs fluorescentes Biopsia de piel

Sensibilidad de 60 a 80%

PCR de transcriptasa inversa

Amplificación de secuencias

de ácidos nucleicos

Aislamiento vírico de LCR o saliva

Acs en suero y LCR

CUERPOS DE NEGRI

RUBÉ

OLALeucopenia en primeras etapas

Aumento de células plasmáticas

Acs IgM

Títulos de Acs IgG

Aislamiento del virus

Falsos positivos de Acs IgM

Acs en orina y saliva

PCR

Virus de Epstein-

Barr

CMV

Parvovirus

Factor

reumatoide

POLIOMI

ELITISRecuento periférico de leucocitos

Presión de LCR y sus proteínas

Glucosa no disminuye

Menos de 500 leucocitos/µl

24h

LCR normal en 5% de los casos

Acs neutralizantes

Fijadores de complemento

Linfocito

s

Normal o

apenas alto

Primera o

segunda semana

de la enfermedad

HEPATITI

S BDetección del antígeno superficial del virus de la hepatitis

B (HBsAg).

La infección aguda se caracteriza por la presencia del

HBsAg y de inmunoglobulina M (IgM) en el antígeno del

núcleo HBcAg.

En la fase inicial de la infección los pacientes también son

seropositivos para el HBeAg.

La infección crónica se caracteriza por la persistencia (más

de seis meses) del HBsAg (con o sin concurrencia de

HBeAg).

La persistencia de HBsAg es el principal marcador del

riesgo de ulterior desarrollo de hepatopatía crónica y

La detección de anticuerpos anti-VHC mediante un examen

serológico revela que la persona está infectada con el virus.

Si el examen es positivo se debe realizar una prueba de

ARB del VHC para confirmar la infección crónica, dado que

entre el 15 y el 45% de las personas infectadas con el VHC

eliminan espontáneamente la infección mediante una

respuesta inmunitaria fuerte, sin necesidad de tratamiento.

Aunque ya no estén infectadas, los análisis serológicos de

esas personas revelarán la presencia de anticuerpos anti-

VHC.

HEPATITIS

C

Se analiza una muestra de

sangre para determinar la

secuencia genética del VHC.

El análisis del genotipo del

VHC sólo se hace una vez ya

que el genotipo no cambia.

Sin embargo, si alguien

infectado con el VHC se

vuelve a exponer al virus, se

pueden infectar con un

genotipo diferente.

Examen microscópico: observación de células sospechosas con

cambios coilocíticos en citologías de cuello uterino y vagina en

mujeres, usando la tinción de Papanicolaou.

Se pueden tomar biopsias de lesiones sospechosas, o incluso de

vegetaciones o verrugas genitales, tanto de hombres como de

mujeres, y enviar las muestras a una sección de anatomía

patológica para su análisis.

Detección directa del material genético del virus por técnicas de

biología molecular, que amplifican el ADN del virus y permiten la

identificación de los distintos serotipos.

VPH

http://www.aeped.es/sites/default/files/documentos/irsv.pdf

http://www.facmed.unam.mx/deptos/microbiologia/virologia/herpes.html

https://www.seimc.org/contenidos/documentoscientificos/procedimientosmicro

biologia/seimc-procedimientomicrobiologia8a.pdf

https://www.aeped.es/sites/default/files/documentos/gastroenteritis_aguda.pdf

http://www.facmed.unam.mx/deptos/microbiologia/virologia/inf-tracto-

gastro.html

BIBLIOGR

AFÍA

GRA

CIAS